KR102566132B1 - 신규 펩타이드 및 이를 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 신규 펩타이드 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 클로렐라 프로토테코이데스(chlorella protothecoides)로부터 유래한 신규의 펩타이드를 포함하여 피부 미백 또는 주름 개선 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 신규 펩타이드 또는 이의 단편은 피부 미백 및 주름 개선 효과가 우수하며, 크기가 작은 펩타이드제제로서, 부작용이 적어 피부 미백 또는 주름 개선용 화장료 조성물에 널리 사용될 수 있다.

Description

신규 펩타이드 및 이를 포함하는 화장료 조성물{Novel peptides and cosmetics composition comprising the same}

본 발명은 신규 펩타이드 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 클로렐라 프로토테코이데스(chlorella protothecoides)로부터 유래한 신규의 펩타이드를 포함하여 피부 미백 또는 주름 개선 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.

미세조류는 이산화탄소와 물, 그리고 태양에너지를 이용하여 에너지주요인자인 유기물을 합성하고 산소를 생산하는 광합성 생물이다. 이러한 미세조류는 대기 중 이산화탄소를 고정할 수 있고, 단백질 및 지질함량이 높으므로 식품, 사료 또는 연료 생산용 바이오매스로 활용될 수 있다. 구체적으로, 미세조류의 1차 대사산물인 지질, 당질 또는 단백질 등은 바이오디젤, 바이오에탄올 또는 바이오가스와 같은 다양한 바이오연료의 공급원 및 다가 불포화지방산(Polyunsaturated fatty acids, PUFAs)의 원료로도 사용될 수 있고, 미세조류의 2차 대사산물인 비타민, 카로테노이드, 다당류, 루테인 등의 고부가 유용 물질은 기능성식품, 천연색소, 의약용물질, 동물사료, 수산양식용 사료 등으로 이용될 수 있다.

종래의 클로렐라는 독특한 비린내와 엽록소로부터 유래한 짙은 녹색으로 인해 화장료 조성물 또는 외용제 원료로서의 활용이 제한되었다. 그러나 클로렐라 프로토테코이데스는 옅은 노란색과 옅은 취로 활용 제한 요소가 없어 화장료 조성물로서의 활용 가치가 높다고 할 수 있다. 한국공개특허공보 10-2017-0023065호는 클로렐라 프로토테코이데스로부터 가용성 단백질을 추출하는 방법을 개시하고 있다.

하지만 피부 흡수도가 높은 것으로 알려진 펩타이드 중에서도 화장료 조성물로서 활용 가능한 미백, 주름개선 및 항노화 생리활성을 가지는 클로렐라 추출물 내 펩타이드에 관한 연구개발은 미비한 실정이다.

한국공개특허공보 제 10-2017-0023065호(2017.03.02)

이에 본 발명자들은 클로렐라 추출물로부터 화장료 조성물에 사용될 수 있는 펩타이드 소재를 개발하고자 연구, 노력한 결과, 클로렐라 프로토테코이데스로부터 유래한 신규 펩타이드가 우수한 피부 미백 또는 주름 개선 효과가 나타나는 것을 발견함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서 본 발명은 신규의 펩타이드 및 이를 포함하는 피부 미백 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.

본 발명은,

하기 서열번호 1 내지 3 중에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열로 표시되는 분리된 펩타이드를 제공한다.

서열번호 1 : LPL

서열번호 2 : PLVL

서열번호 3 : LPLL

또한 본 발명은 상기 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다.

한편 본 발명은 상기 펩타이드 또는 상기 폴리뉴클레이티드를 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 화장료 조성물은 피부 미백 또는 주름 개선 용도로 사용될 수 있다.

본 발명의 신규 펩타이드 또는 이의 단편은 피부 미백 및 주름 개선 효과가 우수하며, 크기가 작은 펩타이드제제로서, 부작용이 적어 피부 미백 또는 주름 개선용 화장료 조성물에 널리 사용될 수 있다.

도 1은 실시예에서 제조된 펩타이드의 세포 내 멜라닌 생성 억제효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 실시예에서 제조된 펩타이드의 세포 내 콜라겐 합성량을 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명에 대하여 상세히 설명하기로 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다. 따라서, 본 명세서에 기재된 실시예에 기재된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.

본 발명의 신규한 펩타이드는 다음과 같은 서열번호 1 내지 3 중에서 선택된 어느 하나의 서열을 포함할 수 있다.

서열번호 1 : LPL

서열번호 2 : PLVL

서열번호 3 : LPLL

본 명세서에서 언급된 아미노산은 IUPAC-IUB 명명법에 따라 다음과 같이 약어로 기재하였다.

L : 루이신

P : 프롤린

V : 발린

본 발명에서 용어, “펩타이드 (peptide) 또는 이의 단편”이란 아미드 결합 (또는 펩타이드 결합)으로 연결된 2개 이상의 아미노산으로 이루어진 폴리머를 의미한다.

본 발명의 펩타이드 또는 이의 단편은 표적화 서열, 태그 (tag), 표지된 잔기, 반감기 또는 펩타이드의 안정성을 증가시키기 위한 특정 목적으로 고안된 추가의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.

본 발명의 펩타이드는 클로렐라 프로토테코이데스(chlorella protothecoides) 추출물의 펩타이드 분석을 통하여 도출된 것으로, 클로렐라 프로토테코이데스(chlorella protothecoides)를 용매에 분산시켜 얻는 분산액에 단백질 분해 효소를 첨가한 후, 여과 등을 거쳐 얻을 수 있으나, 이외에도 유전자 재조합과 단백질 발현 시스템을 이용하여 제조하거나 펩타이드 합성과 같은 화학적 합성을 통하여 시험관 내에서 합성하는 방법, 및 무세포 단백질 합성법 등으로 제조될 수 있다.

보다 구체적으로는 이 분야에서 잘 알려진 방법, 예를 들어 자동 펩타이드 합성기에 의해 합성할 수 있으며, 유전자 조작 기술에 의해 생산할 수도 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명은 상기 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 상기 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 벡터에 삽입하여 이를 발현시킴으로써 상기 펩타이드를 다량으로 확보할 수 있다.

한편 본 발명은 상기 펩타이드 또는 상기 폴리뉴클레이티드를 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 화장료 조성물은 피부 미백 또는 주름 개선 용도로 사용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예 및 실험예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다.

실시예 : 펩타이드의 제작

자동 펩타이드 합성기(PSP-5100, PEPTEN, 미국)를 이용하여 하기 표 1에 기재된 아미노산 서열을 갖는 펩타이드들을 합성하고, C₁₈ 역상 고성능액체크로마토그래피(HPLC, Waters Associates, USA)를 이용하여 이들 합성된 펩타이드를 순수 분리하였다. 컬럼은 ACQUITY UPLC BEH300 C18 (2.1 x 100 mm, 1.7 ㎛, Waters Co, USA)을 이용하였다.

서열번호	명칭	서열
1	실시예 1	LPL
2	실시예 2	PLVL
3	실시예 3	LPLL

실험예 1 : B16F10 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 측정

상기 실시예의 펩타이드의 세포 매 미백 효과를 확인하기 위해, B16F10 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 측정하였다.

B16F10 세포를 2.0x10⁴ cells/ml 로 분주하여 24시간 배양한 세포주에 멜라닌 생성 유도 호르몬인 α-MSH를 처리하고, 양성대조군인 알부틴(arbutin) 1830μM과 실시예의 펩타이드 100μM를 각각 첨가하였다. 그 후, 배지에서 72시간 배양, 세포 수집 후 1N NaOH를 80℃에서 1시간 처리하여 멜라닌을 추출하고 405 ㎚에서 흡광도를 측정하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.

도 1에서 보는 바와 같이, 본 발명의 펩타이드는 양성대조군인 알부틴과 동등한 수준의 멜라닌 합성저해 효과를 나타내었다.

실험예 2 : 콜라겐 생성량 평가를 통한 주름개선 및 항노화 효과 확인

상기 실시예의 펩타이드의 주름개선 및 항노화효과를 확인하기 위해 세포 내 콜라겐 생성량 평가를 하였다.

콜라겐 생성 효과를 알아보기 위해, 인간진피섬유아세포(NHDF)를 2.0x10⁴ cells/ml로 분주하여 24시간 배양한 다음, 실시예의 펩타이드 100μM를 각각 첨가한 배지에서 48시간 배양 후, 프로콜라겐 타입 I C-펩타이드 양을 측정하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다.

도 2 에서 보는 바와 같이, 실시예의 펩타이드를 처리한 경우 프로-콜라겐 생성량이 증가한 바, 본 발명의 펩타이드가 우수한 주름 개선 및 항노화 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.

<110> DAEBONG LS CO., LTD. <120> Novel peptides and cosmetics composition comprising the same <130> SP21-144 <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 3 <212> PRT <213> Chlorella protothecoides <400> 1 Leu Pro Leu 1 <210> 2 <211> 4 <212> PRT <213> Chlorella protothecoides <400> 2 Pro Leu Val Leu 1 <210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> Chlorella protothecoides <400> 3 Leu Pro Leu Leu 1

Claims (4)

1. 서열번호 2의 아미노산 서열로 표시되는 분리된 펩타이드.
   
2. 제1항의 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드.
   
3. 서열번호 1 내지 3 중에서 선택된 어느 하나의 아미노산 서열로 표시되는 분리된 펩타이드 또는 상기 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 화장료 조성물.
   
4. 제3항에 있어서,
   상기 조성물은 피부 미백 또는 주름 개선 효과가 우수한 화장료 조성물.