KR102545060B1

KR102545060B1 - 천연소재 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102545060B1
Application number: KR1020230003103A
Authority: KR
Inventors: 정혜정; 박동욱; 전우영
Original assignee: 주식회사 제이앤제이파머텍
Priority date: 2023-01-09
Filing date: 2023-01-09
Publication date: 2023-06-20

Abstract

본 발명은 천연 소재의 발효추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 지실, 길경, 황금(黃芩), 감초, 어성초 발효 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은 천연물의 발효추출물과 MSM, 알로페론 및 프로폴리스를 주성분으로 하여 여드름 개선 기능성을 확인하여 완성한 것으로서, 특히 여드름 원인균에 대한 항균 효과가 뛰어나다.
또한, 본 발명의 조성물은 천연물로부터 유래한 추출물이 주된 유효성분이므로 인체에 적용하여도 부작용을 유발하지 않아 화장료 조성물로서의 활용도가 높다.

Description

천연소재 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION FOR ACNE IMPROVEMENT CONTAINING FERMENTED EXTRACTS FROM NATURAL MATERIALS AS ACTIVE INGREDIENTS}

본 발명은 천연 소재의 발효추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 지실, 길경, 황금(黃芩), 감초, 어성초 발효 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

여드름은 털을 만드는 모낭에 붙어 있는 피지선에 발생하는 만성 염증성 질환이다. 여드름은 보통 사춘기에 발생하지만, 어른에게도 나타날 수 나타날 수 있으며 얼굴, 목, 등, 가슴 등과 같이 유분이 많은 피부 부위에 잘 생긴다. 정상적인 상태에서 피지는 모낭 벽을 따라 위로 올라가서 피부를 통해 밖으로 배출되나 피지가 피부 밖으로 배출되지 못하고 모낭 주위에 갇히면 염증을 불러일으키는 박테리아가 번식하여 여드름이 된다. 여드름은 호르몬 변화, 세균 감염, 유전성 요인 등으로 발생한다고 여겨지지만, 아직까지 정확한 원인은 알려지지 않았다. 대체로 사춘기에 나타나는 여드름은 안드로겐이라는 남성 호르몬에 자극받아 피지를 과다하게 내보내서 발생하는 것이 학계의 정설이다. 성인 여드름은 여성에게 많이 나타나며, 특히 생리 전에 주기적으로 악화되는 특징이 있다. 이 경우 프로게스테론이라는 황체호르몬, 기름이 많거나 털구멍을 밀폐시키는 화장품 등이 원인 또는 악화 인자가 될 수 있다.

여드름의 증상으로 면포, 구진, 농포 등이 나타난다. 심한 경우에는 결절이나 낭종이 생기기도 한다. 면포란 피지가 축적되어 모낭이 팽창한 것으로서, 면포가 오래되면 주위에 세균이 증식하고, 그 주위에 염증 세포가 모이면 붉은 여드름 구진, 곪는 여드름 농포를 형성하며 이 정도가 심해지면 결절과 낭종 등이 부어있는 상태가 된다.

여드름 치료는 크게 염증반응을 감소시키고, 세균성장을 억제하며, 면포 생성을 억제하는 것에 초점을 두고 있으며, 항생제, 소염제, 과도한 피지 생성 억제제 등이 사용되고 있다. 여드름 치료제 시장은 크게 약물요법과 화장용 요법을 나눌 수 있다.

통상적으로 약물요법 제품이 높게 인정받고 있지만 대부분의 약물요법의 여드름 치료제는 그 성분으로 미노사이클린염산염, 이소트레티노닌, 벤조일 페록사이드 등의 성분을 포함하고 있어 각종 부작용 및 항생제 내성 균주의 출현 등의 문제점을 내포하며 병변을 50%가량 감소시킬 뿐, 질환의 완전한 치료나 재발 억제는 불가능하다는 한계점이 존재한다.

때문에, 소비자는 매일 사용 가능한 여드름 개선 화장품을 사용하는 것을 더욱 선호하고 있는 실정이다.

이에 본 발명자는 여드름균 억제와 염증 억제제 탁월한 효능을 가진 천연물 발효추출물을 이용하여 여드름으로부터 유발된 피부 문제를 근본적으로 치료 또는 예방할 수 있는 화장료 조성물을 제공하고자 하였다.

본 발명은 여드름 유발균인 p. acnes 균을 억제하고 여드름에 의하여 유발된 염증을 완화하는 효과를 가지는 천연물과 이를 비롯한 다수의 유효성분이 피부에 효과적으로 흡수될 수 있도록 리포좀화 된 여드름 개선 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

구체적으로, 본 발명은 지실, 길경, 황금(黃芩), 감초, 어성초 발효 추출물과 디메틸설폰(Dimethyl Sulfone; MSM), 알로페론 및 프로폴리스를 리포좀화 함으로써, 여드름균(P. acne 균) 억제 및 염증성 개선 효과를 극대화하는 것을 목적으로 한다.

실시예들에서 이루고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 사항들로 제한되지 않으며, 언급하지 않은 또 다른 기술적 과제들은 이하 설명할 다양한 실시예들로부터 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 고려될 수 있다.

본 발명의 일 목적은 지실, 길경, 황금(黃芩), 감초 및 어성초로 구성된 군에서 하나 이상 선택된 천연물의 발효 추출물, 디메틸설폰(MSM), 알로페론 및 프로폴리스를 혼합하고, 이를 호호바오일을 이용하여 리포좀화 한 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

구체적으로, 상기 천연물의 발효 추출물은 (a) 지실, 길경, 황금(黃芩), 감초 및 어성초를 1mm 크기의 분말상으로 만들고 이를 고온 살균처리 하는 단계, (b) 상기 고온 살균 처리가 완료된 발효 원료에 식물성 유산균인 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028)을 접종하고 온도 35~37℃, pH7, 교반속도 100~120rpm의 발효조건에서 3~5일간 발효시켜 발효물을 얻는 단계, 및 (c) 상기 발효물을 원심분리하여 고형분을 제거하고 0.2 μm 필터로 여과하여 발효액을 얻는 단계를 거쳐 수득한 것일 수 있다.

또한, 상기 리포좀화 하는 단계는 구체적으로 호호바오일 30 내지 50 중량부, 상기 발효액 10 내지 30 중량부, MSM 10 내지 30 중량부, 알로페론 1 내지 15 중량부 및 프로폴리스 1 내지 15 중량부를 혼합한 후 200 내지 500바(bar) 조건에서 고압유화장치(Microfluidizer)를 이용하여 나노 리포좀화 한 것일 수 있으며, 더욱 구체적으로는 호호바오일 40 중량부, 발효액 20 중량부, MSM 20 중량부, 알로페론 10 중량부, 프로폴리스 10 중량부를 혼합한 후 200 내지 500바(bar) 조건에서 고압유화장치를 2회 통과시켜 안정화시킨 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 실시예에서는 고압유화장치(Microfluidizer)를 이용하여 나노 리포좀을 제조하는 방법을 이용하였으나, 이에 제한되지 않고 필요에 따라 적절히 변경하여 적용 가능하다.

본 발명에 따른 조성물은 평균 입자 지름이 500 nm 이하인 나노 리포좀으로서 안정화되어 제형화 시 침전 형성, 변색, 변취 등의 문제점을 해결하고, 용해도 및 피부 흡수율을 높일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 천연물의 발효추출물과 MSM, 알로페론 및 프로폴리스를 주성분으로 하여 여드름 개선 기능성을 확인하여 완성한 것으로서, 특히 여드름 원인균에 대한 항균 효과가 뛰어나다.

또한, 본 발명의 조성물은 천연물로부터 유래한 추출물이 주된 유효성분이므로 인체에 적용하여도 부작용을 유발하지 않아 화장료 조성물로서의 활용도가 높다.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

도 1은 본 발명 조성물의 세포독성을 실험한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명 조성물의 염증 완화 효과를 확인한 결과를 나타낸 것이다.

이하의 실시예들은 실시예들의 구성요소들과 특징들을 소정 형태로 결합한 것들이다. 각 구성요소 또는 특징은 별도의 명시적 언급이 없는 한 선택적인 것으로 고려될 수 있다. 각 구성요소 또는 특징은 다른 구성요소나 특징과 결합되지 않은 형태로 실시될 수 있다. 또한, 일부 구성요소들 및/또는 특징들을 결합하여 다양한 실시예들을 구성할 수도 있다. 다양한 실시예들에서 설명되는 동작들의 순서는 변경될 수 있다. 어느 실시예의 일부 구성이나 특징은 다른 실시예에 포함될 수 있고, 또는 다른 실시예의 대응하는 구성 또는 특징과 교체될 수 있다.

실시예 1: 발효 추출액의 준비

제1단계: 원료의 준비

지실, 길경, 황금(黃芩), 감초, 및 어성초를 건조 분말화하고, 동량의 증류수를 발효조에 넣고 100℃에서 5분간 살균처리 한 후 37℃까지 온도를 낮추어 발효원료를 준비하였다.

이때, 상기 천연물은 지실:길경:황금:감초:어성초의 중량비가 1:1:1:1:1가 되도록 하였다.

제2단계: 식물성유산균 발효

유산균 배양배지에서 액상 배양한 식물성 유산균을 상기 제1단계의 발효원료에 접종하고 온도 35~37℃, pH 7, 교반속도 100~120rpm의 발효조건에서 3~5일간 발효하였다. 이때의 식물성 유산균은 락토바실러스속이면 제한 없이 사용할 수 있으나 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028)를 사용하는 것이 바람직하다. 상기 '식물성 유산균'이란 유산균이 분리된 원재료가 식물인 것을 특징으로 하는 유산균이다. 또한 상기 유산균 배양배지는 MRS(Man Rogosa Sharpe), 락토오스, YM(Yeast and Mold), M17 또는 ART(Asparagine Enrichment Broth)배지를 사용할 수 있으나 MRS 배지를 사용하는 것이 가장 바람직하다. 유산균주의 접종량은 제1단계의 허브 식물 1kg 대비 1×10⁸~5×10⁸ cell을 접종하였다.

제3단계: 발효 추출물 제조

제2단계에서 얻은 발효물을 원심분리하여 침전물과 균체를 제거하고 발효액만 회수하였다. 상기에서 얻은 발효액은 300메쉬 여과지로 1차 여과하고 1주일간 실온에서 방치한 후 150mm 여과지로 2차 여과시켜 본 발명 발효 추출물을 제조하였다.

실험예 1: 발명 조성물의 여드름 유발균( P. acnes ) 사멸 효과 확인

본 발명 조성물의 여드름 유발균 사멸효과를 확인하기 위하여, 상기 실시예 1 및 실시예 1에서 길경의 비율만 1.5배로 늘린 샘플(실시예 1-1로 명명), 비교예 1 내지 3을 대상으로 항균력 효과를 측정하였다.

비교예 1은 실시예 1의 조성물 대신 같은 비율의 락토바이오닉애씨드를, 비교예 2는 살리실릭애씨드를, 비교예 3은 정제수를 이용하여 제조하였다.

우선, 실험균주인 프로피오니박테리움 아크네(P. acnes)를 활성화시키기 위하여 BHI 배지에서 48시간 동안 배양하였다. 이렇게 준비한 균배양액을 BHI 고체 배지(Brain-Heart Infusion broth 3.7%, agar 1.5%)에 도말한 후 건조시켰다. 이후, 화장료 조성물과 비교예 1, 2, 3에 따른 비교 조성물 1 내지 3 각각을 직경 8mm의 페이퍼 디스크(paper disc)에 40μl씩 점적한 후 앞서 준비한 고체 배지 위에 올려놓은 다음, 35℃ 혐기 배양조건에서 5일간 배양하였다. 이어서, 페이퍼 디스크 주변에 생긴 균 성장 저지영역을 관찰하고 저지환의 크기를 측정함으로써 항균력을 평가한 결과를 표 1에 나타내었다.

구분	실시예1	실시예 1-1 (길경만 1.5배)	실시예1+ MSM, 알로페론	실시예1+ MSM, 알로페론, 프로폴리스	비교예 1	비교예 2	비교예 3
성장억제환 (mm)	7	7	9	9	0	1	1

그 결과, 실시예 1과 실시예 1-1의 결과에서 확인할 수 있듯이, 길경의 비율이 높아져도 여드름 유발균의 사멸 효과에는 차이가 발생하지 않았다. 또한, 상기 실시예 1에 따른 화장료 조성물을 이용한 경우, 비교예 1, 2, 3에 따른 비교 조성물 1 내지 3에 비해 여드름균의 성장억제환의 크기가 더 큰 것을 확인하였다.

실시예 2: 약용식물의 발효추출물과 MSM, 알로페론 및 프로폴리스를 주성분으로 하는 리포좀의 제조

구체적으로, 상기 실시예 1에서 제조한 발효 추출물 20 중량부, 호호바오일 20 중량부, MSM 10 중량부, 알로페론 10 중량부, 프로폴리스 1 중량부 및 계면활성제 1 내지 10 중량부를 실온에서 혼합기를 이용하여 100 내지 300rpm으로 1분 동안 혼합하여 1차 혼합물을 제조하였다.

이 때, 상기 계면활성제는 소수기와 친수기의 균형을 나타내는 수치인 HLB(Hydrophilic lipophilic balance) 값이 4 내지 10이면 무방하며, 본 발명에서는 HLB 값이 4.7로 알려진 소르비탄 스테아레이트(Sorbitan stearate)를 사용하였다.

상기 1차 혼합물을 압력 200 내지 500바(bar) 조건에서 고압유화장치(Microfluidizer)에 2회 통과시켜 안정화된 나노 리포좀 형태의 조성물을 수득하였다. 상기 고압유화장치를 2회 통과한 후의 나노 리포좀의 평균 입자 지름은 500nm 이하인 것을 확인하였다.

실험예 2: 본 발명 조성물의 염증 완화 효과 확인

본 발명 조성물의 염증 완화 효과를 확인하기 위하여, MTT 세포독성평가 및 NO(Nitric Oxide) 활성 평가를 실시하였다.

실험예 2-1. MTT 세포독성평가

우선, 세포 독성을 확인하기 위하여 MTT-assay를 실시하였다. 구체적으로 96-웰 플레이트에 RAW264.7 세포(쥐의 대식세포)를 3.0×10⁵ 수만큼 접종하여 24시간 배양하였다. 세포를 24시간 배양한 후 상층액을 제거하고, 리포좀과 비교예 샘플을 주입(농도는 0.2, 0.3, 0.4, 0.5 mg/ml)하고, 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후, 암실 조건에서 200 ug/ml 농도의 MTT 용액을 50 ul씩 샘플이 들어있는 웰에 주입하였다. 주입한 뒤 3시간 동안 37℃에서 배양하였다. 3시간 후 상층액을 다 제거하고, PBS 버퍼로 2번 세척하였다. 이후, DMSO를 200 ul 주입한 후, 30분 뒤에 플레이트 리더 기기로 570 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도를 측정한 흡광도 데이터를 엑셀을 이용하여 세포생존율의 그래프로 전환하고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.

그 결과, 실시예 1의 발효추출물의 경우 세포생존율(Y축)이 일부 감소하는 것으로 보였으나 실시예1의 발효추출물과 MSM, 알로페론, 프로폴리스와 혼합물과 실시예2의 리포좀화 제형에서 모두 유의한 독성을 보이지 않았다.

실험예 2-2. NO 감소 효과 확인

NO(Nitric Oxide)는 무기 저분자 라디칼로서, 생체에서 병리적인 혈관확장, 세포독성, 조직손상 등과 같이 유해한 효과를 나타내고, 염증 유발의 중요한 역할을 한다. 이 실험에서는 염증유발을 시키고, NO의 양을 흡광 측정을 통해 관찰하여 발명에 따른 조성물의 활성을 평가하였다. 실험을 위해, 96-웰 플레이트에 RAW 세포를 2×10⁴ 수만큼 접종 후 24시간 배양하였다. 세포를 24시간 배양한 후 상층액을 제거하고, 염증 유발을 위해 LPS 100 ul를 주입하였다. 이후 상기 실험예 2-1과 동일한 조건으로 실험물을 주입한 후 24시간 배양하였다. 24시간 뒤 상층액 50 ul를 취하여 새로운 96-웰 플레이트에 옮기고 Griess 시약 50 ul를 주입한 후 10분간 방치하였다. 그 후, 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도를 측정한 데이터를 엑셀을 이용하여 샘플에 대한 NO 생성량의 그래프로 전환하여 결과를 비교하고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.

이때, 각각 락토바이오닉애씨드만을 유효성분으로 포함하는 것을 비교예 1, 살리실릭애씨드만을 유효성분으로 포함하는 것을 비교예 2, 실시예 1의 조성물 대신 정제수를 이용한 것을 비교예 3 및 실시예 2에서 프로폴리스를 제외한 것을 비교예 4로 설정하였다.

그 결과, 실시예 1 + MSM, 알로페론, 프로폴리스와 실시예 2의 조성물 농도에 따라 NO(Nitric Oxide) 생성량이 감소하는 것을 확인하였다.

특히 실시예 2와 실시예 1+MSM+알로페론+프로폴리스와의 결과를 비교할 때, 리포좀화 여부에 따라 NO 생성량이 눈에 띄게 감소한 것을 확인하였다.

이때, 프로폴리스가 0.1 또는 0.5 중량부로 포함될 때 효과는 1 중량부를 포함하는 본 발명 조성물 대비 현저히 효과가 적었으며(별도로 도시하지 않음), 1 중량부 이상으로 포함되는 경우에는 리포좀 생성 자체가 잘 되지 않는 문제점이 발생하였다. 또한 비교예 4와 비교할 때에도 프로폴리의 혼합에 의한 염증완화 효과가 큼을 알 수 있다.

이 결과로 미루어 본 발명에서 제시한 성분들과 이들의 조합이 세포의 염증 반응을 완화하여 특히 이를 리포좀화 하였을 때에 세포 내부로의 침투성이 증가되어 더 높은 결과를 보이는 것으로 보인다.

실험예 3: 발명 조성물의 여드름 개선 효과

본 발명 실시예 2의 조성물에 대한 여드름개선 효과를 실제로 측정하기 위하여 여드름이 발생한 남녀 15명으로 대상으로 실시예 2의 조성물을 아침, 저녁으로 4주간 얼굴 전체에 고루 바르도록 하였다. 효과의 판정은 시험에 참가한 본인이 느끼는 정도에 따라 1~3점으로 평가하도록 하고, 표 2에 그 결과를 나타내었다.

[시험전 상태의 평가]

1=여드름 약하게 있음, 2=여드름 있음, 3=여드름 심함,

[여드름 효과판정]

- 효과 없음, + 효과 약간 있음, ++ 눈에 띄게 완화, +++ 완전히 없어짐

	시험전 상태	2주 경과 후 상태	4주 경과 후 상태
피험자1	2	-	++
피험자2	3	+	+++
피험자3	3	++	+++
피험자4	3	+	++
피험자5	3	-	++
피험자6	3	+	++
피험자7	2	+	+++
피험자8	2	++	+++
피험자9	2	+	++
피험자10	1	-	+++
피험자11	3	+	++
피험자12	3	++	+++
피험자13	2	++	++
피험자14	3	++	+++
피험자15	3	+	+++

표 2의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 화장료를 4주간 사용한 결과, 대다수의 피험자들에서 여드름 개선 효과를 확인할 수 있었다.

상술한 다양한 실시예들은 그 기술적 아이디어 및 필수적 특징을 벗어나지 않는 범위에서 다른 특정한 형태로 구체화될 수 있다. 따라서, 상기의 상세한 설명은 모든 면에서 제한적으로 해석되어서는 아니되고 예시적인 것으로 고려되어야 한다. 다양한 실시예들의 범위는 첨부된 청구항의 합리적 해석에 의해 결정되어야 하고, 다양한 실시예들의 등가적 범위 내에서의 모든 변경은 다양한 실시예들의 범위에 포함된다. 또한, 특허청구범위에서 명시적인 인용 관계가 있지 않은 청구항들을 결합하여 실시예를 구성하거나 출원 후의 보정에 의해 새로운 청구항으로 포함할 수 있다.

Claims

지실, 길경, 황금(黃芩), 감초 및 어성초가 동일 중량비로 혼합된혼합물의 발효 추출물, 디메틸설폰(MSM), 알로페론 및 프로폴리스를 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 있어서,
상기 여드름 개선용 화장료 조성물은 호호바오일을 이용하여 리포좀화 된 것으로서, 평균 입자 지름이 500 nm 이하이며,
상기 발효 추출물은 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028)에 의해 발효가 진행된 것인,
여드름 개선용 화장료 조성물.
삭제
삭제
(a) 지실, 길경, 황금(黃芩), 감초 및 어성초를 1mm 크기의 분말상으로 만들고 이를 고온 살균처리 하는 단계;
(b) 상기 고온 살균 처리가 완료된 발효 원료를 동일 중량비로 혼합한 것에 식물성 유산균인 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028)을 접종하고 온도 35~37℃, pH7, 교반속도 100~120rpm의 발효조건에서 3~5일간 발효시켜 발효물을 얻는 단계; 및
(c) 상기 발효물을 원심분리하여 고형분을 제거하고 0.2 μm 필터로 여과하여 발효액을 얻는 단계;
(d) 호호바오일 30 내지 50 중량부, 상기 발효액 10 내지 30 중량부, MSM 10 내지 30 중량부, 알로페론 1 내지 15 중량부 및 프로폴리스 1 내지 15 중량부를 혼합한 후 200 내지 500바(bar) 조건에서 고압유화장치(Microfluidizer)를 이용하여 나노 리포좀화하는 단계;를 포함하는,
여드름 개선용 화장료 조성물의 제조 방법.