KR102527911B1 - 조절 t 세포의 약물 스크리닝 용도 - Google Patents
조절 t 세포의 약물 스크리닝 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102527911B1 KR102527911B1 KR1020220096407A KR20220096407A KR102527911B1 KR 102527911 B1 KR102527911 B1 KR 102527911B1 KR 1020220096407 A KR1020220096407 A KR 1020220096407A KR 20220096407 A KR20220096407 A KR 20220096407A KR 102527911 B1 KR102527911 B1 KR 102527911B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- cancer
- cells
- organoids
- drug
- anticancer agent
- Prior art date
Links
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 60
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 title abstract description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 170
- 210000002220 organoid Anatomy 0.000 claims abstract description 151
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 132
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims abstract description 95
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims abstract description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 19
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims abstract description 13
- 229940125648 antineoplastic drug candidate Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 24
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 22
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 22
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 22
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 17
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 15
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 11
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 claims description 9
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 8
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 claims description 8
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 8
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 claims description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 5
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 4
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 claims description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 4
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 claims description 4
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 claims description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 3
- -1 antibody Proteins 0.000 claims description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010001233 Adenoma benign Diseases 0.000 claims description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007659 Fibroadenoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000821 Parathyroid Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010046431 Urethral cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010046458 Urethral neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 201000009036 biliary tract cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000020790 biliary tract neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000003149 breast fibroadenoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 2
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000026045 malignant tumor of parathyroid gland Diseases 0.000 claims description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 claims 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims 1
- 239000002924 silencing RNA Substances 0.000 claims 1
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 81
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 73
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 73
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 24
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 19
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 description 18
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 8
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 7
- 101000831007 Homo sapiens T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Proteins 0.000 description 6
- 102100024834 T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Human genes 0.000 description 6
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 4
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000013210 evaluation model Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 2
- 238000002952 image-based readout Methods 0.000 description 2
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- TVEXGJYMHHTVKP-UHFFFAOYSA-N 6-oxabicyclo[3.2.1]oct-3-en-7-one Chemical compound C1C2C(=O)OC1C=CC2 TVEXGJYMHHTVKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 102100023387 Endoribonuclease Dicer Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 101000907904 Homo sapiens Endoribonuclease Dicer Proteins 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000011224 anti-cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000005904 anticancer immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000003197 gene knockdown Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000015607 signal release Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5011—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing antineoplastic activity
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5082—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms
- G01N33/5088—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms of vertebrates
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
본 발명은 암 오가노이드, 세포독성 T 세포(Cytotoxic T cell, CD8+ T 세포) 및 조절 T 세포(regulatory T cell, Treg)의 혼합물에 항암제 또는 항암제 후보물질을 처리하는 단계를 포함하는 항암제의 효능 평가 방법, 또는 항암제 스크리닝 방법에 관한 것이다. 또한, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 포함하는 항암제의 효능 평가 시스템 또는 항암제의 스크리닝 시스템에 관한 것이다.
본 발명에 따른 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 혼합물은 특정 비율로 혼합되어 암세포가 생체 내에서 존재하고 있는 형태인 종양 미세 환경을 유사하게 재현할 수 있다. 따라서, 이를 활용하는 경우 약물이 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있다.
본 발명에 따른 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 혼합물은 특정 비율로 혼합되어 암세포가 생체 내에서 존재하고 있는 형태인 종양 미세 환경을 유사하게 재현할 수 있다. 따라서, 이를 활용하는 경우 약물이 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있다.
Description
본 발명은 암 오가노이드, 세포독성 T 세포(Cytotoxic T cell, CD8+ T 세포) 및 조절 T 세포(regulatory T cell, Treg)의 혼합물에 항암제 또는 항암제 후보물질을 처리하는 단계를 포함하는 항암제의 효능 평가 방법, 또는 항암제 스크리닝 방법에 관한 것이다. 또한, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 포함하는 항암제의 효능 평가 시스템 또는 항암제의 스크리닝 시스템에 관한 것이다.
오가노이드는 조직 또는 기관에서 유래한 세포를 3차원 배양하여 제조한 장기 유사체이다. 오가노이드는 장기배양, 동결보존이 가능하고 조작과 관찰이 용이하다는 장점을 가진다. 동시에 불멸화가 필요 없어 그에 따른 세포의 본래 특성이 유지됨은 물론 생체 내에서만 볼 수 있었던 세포 계층적, 조직학적 구조를 재현함으로써 세포보다 한 단계 높은 차원의 생리현상을 연구할 수 있는 실험모델이다. 이러한 특성으로 인해 오가노이드는 세포의 내재적 특성이 변화된 불멸화된 세포주, 인체와 구조가 다른 동물 모델에 비해 높은 정확도로 약물 평가를 할 수 있고, 특히 환자 유래 조직을 이용하므로 사람을 대상으로 한 임상에 앞서 약물의 안전성은 물론 효능까지 미리 확인할 수 있는 장점이 있다. 다만, 기존에 약물 평가 모델로서 개발된 암 오가노이드는 종양 미세 환경을 반영하지 못하는 한계점을 지니고 있었던바, 다양한 종양 미세 환경을 갖춘 오가노이드를 개발하고, 이를 약물 평가 모델로서 사용하기 위한 노력이 수행될 필요가 있다.
종양 미세 환경은 암세포 주위에 혈관, 면역세포, 섬유아세포(fibroblast), 림프구, 신호전달분자, 세포외 기질(extracellular matrix, ECM) 등이 둘러 싸여 있는 세포환경이다. 종양 미세 환경에서 암세포는 세포외 신호 방출, 암세포 신생혈관 촉진, 말초 면역관용 등을 유도하여 미세환경에 영향을 준다. 따라서 암세포는 미세환경을 변화시키기도 하고 미세환경이 암세포의 성장 또는 전이에 영향을 미치기도 하는데, 특히 림프구 등과 관련된 종양 미세 환경은 암의 발생 및 전이 뿐만 아니라, 암의 면역 시스템 회피와도 관련이 높아 항암제에 의한 치료 반응에 영향을 미치며, 항암 면역 요법의 주요 표적이 된다(Robert L Ferris, J Clin Oncol. 2015 Oct 10;33(29):3293-304).
예를 들어, 종양 미세 환경에 존재하는 조절 T 세포(regulatory T cell, Treg)는 항암 면역을 저해하여 종양의 발생 및 발달을 촉진한다. 구체적으로, 조절 T 세포는 도움 T 세포(CD4+ T 세포) 및 세포독성 T 세포(CD8+ T 세포)의 활성화 및 분화를 억제하여 이들의 기능을 저해하고, 종양 발현 항원에 대한 반응성을 유도함에 따라 종양이 면역 시스템을 회피하는데 있어서 핵심 인자로 간주된다(Chunxiao Li et al. Mol Cancer. 2020; 19: 116). 특히, 종양 미세 환경 내 조절 T 세포와 작동 T 세포의 비율이 종양 세포의 면역 시스템 반응 여부를 결정하는 요인이며, 상기 세포들이 적절한 비율을 형성하지 못하고 조절 T 세포의 수가 지나치게 많아지는 경우에는 난소암, 유방암, 신장암, 췌장암 등 다양한 암에서 부정적인 예후를 나타내게 한다는 연구결과가 발표된바 있다(George Plitas et al. Annu. Rev. Cancer Biol. 2020. 4:459-77).
이에, 본 발명자들은 종양 미세 환경을 갖춘 암 오가노이드를 개발하고, 이를 약물 평가의 플랫폼으로 사용하기 위하여, 종양 미세 환경을 구성하는 다양한 세포 중에서도 CD8+ T 세포 및 조절 T 세포(Treg)와 암 오가노이드를 특정 비율로 공배양하는 시스템을 확립하였다. 또한, 상기 시스템에서는 암 오가노이드가 적절히 성장함에 따라 약물의 효능을 정확하게 확인할 수 있음을 실험적으로 입증하여, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
또한, 본 명세서에서 특별히 정의되지 않은 용어들에 대해서는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 의미를 갖는 것으로 이해되어야 할 것이다. 또한, 문맥상 특별히 정의하지 않은 경우라면, 단수는 복수를 포함하며, 복수는 단수를 포함한다.
본 발명의 하나의 양태는 하기 단계를 포함하는, 항암제의 효능 평가 방법을 제공한다:
(a) 암 오가노이드, 세포독성 T 세포(Cytotoxic T cell, CD8+ T 세포) 및 조절 T 세포(regulatory T cell, Treg)를 혼합하여 공배양하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계의 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg 혼합물에 항암제를 처리하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계의 항암제가 처리된 군이 항암제 미처리군 또는 양성 대조군에 비해 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸이 증가한 경우, 상기 항암제의 효능이 우수한 것으로 판단하는 단계.
구체적으로, 상기 단계 (a)는 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 혼합하여 공배양하는 단계로서, 생체 내 종양 미세 환경을 인비트로(in vitro)에서 재현하는 단계이다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "오가노이드"는 3차원 입체구조를 가지는 세포의 덩어리를 의미하며, 기관 또는 조직에서 분리한 세포를 3차원 배양을 통해 제조한 장기 유사체를 의미한다. 오가노이드는 기관 또는 조직을 구성하는 특이적 세포 집단들을 포함하고 있고, 실제 조직 또는 기관과 유사한 형태로 구조적 조직화가 이루어져 있으므로, 각 조직 또는 기관이 갖는 특수한 형태 및 기능을 재현할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "암 오가노이드"는 종양에서 분리한 세포로부터 유래된 오가노이드를 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "세포독성 T 세포(Cytotoxic T cell, CD8+ T 세포)"는 항원 특이적 후천 면역(acquired immunity, adaptive immunity)을 수행하는 림프구를 의미한다. 세포독성 T 세포는 암세포, 바이러스, 박테리아 등 병원체에 감염된 세포를 사멸시키고, TNF-α, IFN-γ와 같은 사이토카인을 생성한다. 본 발명에 따른 세포독성 T 세포는 종양 조직 내에 침윤한 것이거나, 종양 조직으로부터 분리된 것일 수 있다. 본 명세서에서, 상기 세포독성 T 세포는 "분화된 T 세포", "분화 후 T 세포", "활성화된 T 세포", "활성화 T 세포" 또는 "CD8+ T 세포"와 혼용되어 명명될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "조절 T 세포(regulatory T cell, Treg)"는 면역 반응을 억제하여 항상성과 면역관용(immune tolerance)을 유지하는 역할을 하며, T 세포 증식 및 사이토카인 생성을 억제하여 자가면역을 예방하는데 중요한 역할을 수행하는 림프구를 의미한다. 본 발명에 따른 조절 T 세포는 종양 조직 내에 침윤한 것이거나, 종양 조직으로부터 분리된 것일 수 있다. 본 명세서에서, 상기 조절 T 세포는 "Treg 세포" 또는 "Treg"와 혼용되어 명명될 수 있다.
본 발명에서, 상기 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg은 1 : 3 : 0.5 내지 3의 세포수 비율로 혼합되는 것일 수 있고, 구체적으로 1 : 3 : 1 내지 3의 세포수 비율, 더욱 구체적으로 1 : 3 : 3의 세포수 비율로 혼합되는 것일 수 있다. 상기 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg이 상기 비율로 혼합되어 공배양되는 경우에만 생체 내 종양 미세 환경을 모사할 수 있다. 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 약물에 의한 암 오가노이드의 사멸률이 현저히 낮아 약물의 항암 효과를 확인할 수 없는 문제가 발생한다. 또한, 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 서로 다른 메커니즘으로 작용하는 약물의 효능이 고르게 나타나지 않는 문제가 발생하므로, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 전술한 바와 같은 세포수 비율로 혼합하는 것이 중요하다.
본 발명에 따른 항암제의 효능 평가 방법은 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 상기 비율로 혼합한 혼합물에 항암제를 처리한다. 즉, 암세포가 생체 내에서 존재하고 있는 형태인 종양 미세 환경을 유사하게 재현한 시스템을 통해 항암제의 효능을 평가한다. 따라서, 항암제가 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있다.
본 발명에 따른 항암제의 효능 평가 방법에서, 상기 단계 (b)는 상기 (a) 단계에 따라 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg이 공배양된 혼합물에 항암제를 처리하는 단계이다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "항암제"는 암의 예방 또는 치료 효과를 나타내는 물질로서, 구체적으로 암세포, 암 오가노이드 또는 종양 등을 사멸시키거나, 또는 이의 성장을 억제할 수 있는 물질을 의미한다.
본 명세서에서, 상기 '항암제'는 '약물'과 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 또한 상기 '처리'는 '첨가' 또는 '투여'와 상호교환적으로 사용될 수 있다.
구체적으로, 상기 항암제는 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및/또는 Treg를 타겟하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 항암제는 암 오가노이드만을 타겟하는 것이거나, CD8+ T 세포만을 타겟하는 것이거나, Treg만을 타겟하는 것이거나, 암 오가노이드 및 CD8+ T 세포를 동시에 타겟하는 것이거나, 암 오가노이드 및 Treg를 동시에 타겟하는 것이거나, CD8+ T 세포 및 Treg를 동시에 타겟하는 것이거나, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 동시에 타겟하는 것일 수 있다. 예를 들어, CD8+ T 세포를 타겟하는 항암제는 아테졸리주맙(atezolizumab)일 수 있고, CD8+ T 세포 및 Treg를 동시에 타겟하는 항암제는 항-TIGIT 항체일 수 있다.
바람직하게, 상기 항암제는 화합물, 단백질, 융합 단백질, 화합물-단백질 복합체, 약물-단백질 복합체, 항체, 화합물-항체 복합체, 약물-항체 복합체, 아미노산, 펩티드, 바이러스, 탄수화물, 지질, 핵산, 추출물, 분획물 등을 제한 없이 포함한다.
예로서, 상기 항암제는 화합물, 펩티드, 펩티드 미메틱스, 융합 단백질, 항체, 앱타머, 항체-약물 복합체(ADC; Antibody Drug Conjugate) 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 바람직하게, 상기 항암제는 항체이거나, 또는 면역항암제일 수 있다.
용어, "항체"는 단일클론 항체, 다클론 항체, 이중특이적 항체, 다중특이적 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체를 포함하며, 신규 항체 외에 이미 당해 기술분야에서 공지되거나 시판되는 항체들도 포함된다. 상기 항체는 2개의 중쇄와 2개의 경쇄를 포함하는 전체 길이의 형태뿐만 아니라, 항체 분자의 기능적인 단편을 포함한다. 상기 항체 분자의 기능적인 단편은 적어도 항원 결합 기능을 보유하고 있는 단편을 의미하며, 여기에는 Fab, F(ab'), F(ab')2, Fv 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 용어, "펩티드 미메틱스(Peptide Mimetics)"는 호르몬, 사이토카인, 효소 기질, 바이러스 또는 다른 생물학적 분자의 활성 리간드를 생물학적으로 모사하는 펩티드, 또는 변형된 펩티드를 의미한다. 용어, "앱타머(Aptamer)"는 그 자체로 안정된 삼차구조를 가지면서 표적분자에 높은 친화성과 특이성으로 결합할 수 있는 특징을 가진 단일가닥 핵산(DNA, RNA 또는 변형핵산)을 의미한다.
또다른 예로서, 상기 항암제는 DNA 또는 mRNA에 상보적으로 결합하는 안티센스 핵산, siRNA, shRNA, miRNA, 리보자임 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
용어, "안티센스 핵산"은 특정 mRNA의 서열에 대해 상보적인 핵산 서열을 함유하고 있는 DNA, RNA, 또는 이들의 단편 또는 유도체를 의미하며, mRNA의 서열에 상보적으로 결합 또는 혼성화하여 mRNA의 단백질로의 번역을 저해하는 작용을 한다. 용어, "siRNA(small interfering RNA)"는 특정 mRNA의 절단(cleavage)을 통해 RNAi(RNA interference)를 유도할 수 있는 짧은 이중사슬 RNA를 의미한다. siRNA는 표적 유전자의 mRNA와 상동인 서열을 갖는 센스 RNA 가닥과 이와 상보적인 서열을 갖는 안티센스 RNA 가닥을 포함한다. siRNA는 표적 유전자의 발현을 억제할 수 있으므로, 유전자 넉다운 방법 또는 유전자치료 방법 등에 사용된다. 용어, "shRNA(short hairpin RNA)"는 단일가닥 RNA로서 수소결합에 의해 이중가닥 부분을 형성하는 줄기(stem) 부분과 고리 형태를 띄는 루프(loop) 부분으로 구분되는 RNA를 의미한다. 다이서(Dicer) 등의 단백질에 의해 프로세싱되어 siRNA로 변환되고 siRNA와 동일한 기능을 수행할 수 있다. 용어, "miRNA(micro RNA)"는 표적 RNA의 분해를 촉진시키거나 또는 이들의 번역을 억제시킴으로써 유전자 발현을 전사 후에 조절하는 21 내지 23 nt의 비코딩 RNA를 의미한다. 용어, "리보자임(ribozyme)"은 특정 염기 서열을 인식하여 자체적으로 이를 절단하는 효소와 같은 기능을 가진 RNA 분자를 의미한다. 리보자임은 타겟 전령 RNA 가닥의 상보적인 염기서열로 특이성을 가지고 결합하는 영역과 타겟 RNA를 절단하는 영역으로 구성된다.
본 발명의 방법에 따라 효능이 평가되거나 스크리닝되는 항암제는 예를 들면, 담도암, 위암, 폐암, 간암, 대장암, 결장암, 소장암, 췌장암, 뇌암, 뼈암, 흑색종, 유방암, 경화성선증, 자궁암, 자궁경부암, 두경부암, 식도암, 갑상선암, 부갑상선암, 신장암, 육종, 전립선암, 요도암, 방광암, 혈액암, 백혈병, 림프종, 섬유선종 등을 예방 또는 치료하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 항암제의 효능 평가 방법에서, 상기 단계 (c)는 상기 (b) 단계의 항암제가 처리된 군이 항암제 미처리군 또는 양성 대조군에 비해 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸이 증가한 경우, 상기 항암제의 효능이 우수한 것으로 판단하는 단계이다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "양성 대조군"은 당업계에서 항암제로 사용되고 있는 약물을 처리한 군을 의미한다.
구체적으로, 상기 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸은 암 오가노이드의 면적 증감을 통해 확인하는 것일 수 있다. 또한, 상기 암 오가노이드의 면적이 감소하는 경우, 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸이 증가된 것으로 판단하는 것일 수 있다. 또한, 상기 암 오가노이드의 면적 증감은 당업계에 공지된 방법으로 확인할 수 있으며, 예로서 HCS(High-Content Screening), 유세포 분석(Flow-cytometer) 등의 분석 방법을 통해 확인할 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 하기의 단계를 포함하는, 항암제의 스크리닝 방법을 제공한다:
(a) 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 혼합하여 공배양하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계의 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg 혼합물에 항암제 후보물질을 처리하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계의 항암제 후보물질이 처리된 군에서 항암제 후보물질 미처리군에 비해 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸이 증가한 경우, 상기 후보물질을 항암제로 결정하는 단계.
본 발명에 따른 항암제의 스크리닝 방법에서, 각 용어는 특별히 언급하지 않는 한 상기 항암제의 효능 평가 방법에서 설명한 바와 같다.
구체적으로, 상기 단계 (a)는 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 혼합하여 공배양하는 단계로서, 생체 내 종양 미세 환경을 인비트로(in vitro)에서 재현하는 단계이다.
본 발명에서, 상기 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg은 1 : 3 : 0.5 내지 3의 세포수 비율로 혼합되는 것일 수 있고, 구체적으로 1 : 3 : 1 내지 3의 세포수 비율, 더욱 구체적으로 1 : 3 : 3의 세포수 비율로 혼합되는 것일 수 있다. 상기 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg이 상기 비율로 혼합되어 공배양되는 경우에만 생체 내 종양 미세 환경을 모사할 수 있다. 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 약물에 의한 암 오가노이드의 사멸률이 현저히 낮아 약물의 항암 효과를 확인할 수 없는 문제가 발생한다. 또한, 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 서로 다른 메커니즘으로 작용하는 약물의 효능이 고르게 나타나지 않는 문제가 발생하므로, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 전술한 바와 같은 세포수 비율로 혼합하는 것이 중요하다.
본 발명에 따른 항암제의 스크리닝 방법은 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 상기 비율로 혼합한 혼합물에 항암제 후보물질을 처리한다. 즉, 암세포가 생체 내에서 존재하고 있는 형태인 종양 미세 환경을 유사하게 재현한 시스템을 통해 항암제 후보물질의 효능을 평가한다. 따라서, 항암제가 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있고, 아울러 생체 내 투여되었을 때 우수한 효능을 나타낼 수 있는 항암제를 스크리닝할 수 있다.
본 발명에 따른 항암제의 스크리닝 방법에서, 상기 단계 (b)는 상기 (a) 단계에 따라 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg이 공배양된 혼합물에 항암제 후보물질을 처리하는 단계이다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "항암제"는 암의 예방 또는 치료 효과를 나타내는 물질로서, 구체적으로 암세포, 암 오가노이드 또는 종양 등을 사멸시키거나, 또는 이의 성장을 억제할 수 있는 물질을 의미한다.
본 명세서에서, 상기 '항암제'는 '약물'과 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 또한 상기 '처리'는 '첨가' 또는 '투여'와 상호교환적으로 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "항암제 후보물질"은 암의 예방 또는 치료 효과를 나타낼 것으로 예상되는 물질을 의미하며, 구체적으로 암세포, 암 오가노이드 또는 종양 등을 사멸시키거나, 또는 이의 성장을 억제할 것으로 예상되는 물질을 의미한다.
본 명세서에서, 상기 '항암제'는 '약물'과 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 또한 상기 '처리'는 '첨가' 또는 '투여'와 상호교환적으로 사용될 수 있다.
바람직하게, 상기 항암제 또는 항암제 후보물질은 화합물, 단백질, 융합 단백질, 화합물-단백질 복합체, 약물-단백질 복합체, 항체, 화합물-항체 복합체, 약물-항체 복합체, 아미노산, 펩티드, 바이러스, 탄수화물, 지질, 핵산, 추출물, 분획물 등을 제한 없이 포함한다.
예로서, 상기 항암제 또는 항암제 후보물질은 화합물, 펩티드, 펩티드 미메틱스, 융합 단백질, 항체, 앱타머, 항체-약물 복합체(ADC; Antibody Drug Conjugate) 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 바람직하게, 상기 항암제 또는 항암제 후보물질은 항체이거나, 또는 면역항암제일 수 있다.
본 발명에 따른 항암제의 스크리닝 방법에서, 상기 단계 (c)는 상기 (b) 단계의 항암제 후보물질이 처리된 군에서 항암제 후보물질 미처리군에 비해 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸이 증가한 경우, 상기 후보물질을 항암제로 결정하는 단계이다.
본 발명의 또다른 하나의 양태는 상기 항암제의 효능 평가 방법을 사용하기 위한 항암제의 효능 평가 시스템으로서, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 포함하는 항암제의 효능 평가 시스템을 제공한다.
본 발명에 따른 항암제의 효능 평가 시스템에서, 각 용어는 특별히 언급하지 않는 한 상기 항암제의 효능 평가 방법에서 설명한 바와 같다.
본 발명의 항암제의 효능 평가 시스템은 종양 미세 환경을 모사한 것으로, 생체 내 종양 미세 환경을 구성하는 종양으로서 암 오가노이드, 및 면역세포로서 CD8+ T 세포 및 Treg를 포함한다.
구체적으로, 상기 항암제의 효능 평가 시스템은 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 1 : 3 : 0.5 내지 3의 세포수 비율로 포함하는 것일 수 있고, 구체적으로 1 : 3 : 1 내지 3의 세포수 비율, 더욱 구체적으로 1 : 3 : 3의 세포수 비율로 포함하는 것일 수 있다. 상기 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg이 상기 비율로 혼합되어 공배양되는 경우에만 생체 내 종양 미세 환경을 모사할 수 있다. 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 약물에 의한 암 오가노이드의 사멸률이 현저히 낮아 약물의 항암 효과를 확인할 수 없는 문제가 발생한다. 또한, 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 서로 다른 메커니즘으로 작용하는 약물의 효능이 고르게 나타나지 않는 문제가 발생하므로, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 전술한 바와 같은 세포수 비율로 혼합하는 것이 중요하다.
본 발명에 따른 항암제의 효능 평가 시스템은 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 상기 비율로 혼합한 혼합물을 포함하므로, 암세포가 생체 내에서 존재하고 있는 형태인 종양 미세 환경을 유사하게 재현할 수 있다. 따라서, 항암제가 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있으므로, 항암제의 효능 평가 방법에 유용하게 활용될 수 있다.
본 발명의 또다른 하나의 양태는 상기 항암제의 스크리닝 방법을 사용하기 위한 항암제의 스크리닝 시스템으로서, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 포함하는 항암제의 스크리닝 시스템을 제공한다.
본 발명에 따른 항암제의 스크리닝 시스템에서, 각 용어는 특별히 언급하지 않는 한 상기 항암제의 효능 평가 방법에서 설명한 바와 같다.
본 발명의 항암제의 스크리닝 시스템은 종양 미세 환경을 모사한 것으로, 생체 내 종양 미세 환경을 구성하는 종양으로서 암 오가노이드, 및 면역세포로서 CD8+ T 세포 및 Treg를 포함한다.
구체적으로, 상기 항암제의 효능 평가 시스템은 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 1 : 3 : 0.5 내지 3의 세포수 비율로 포함하는 것일 수 있고, 구체적으로 1 : 3 : 1 내지 3의 세포수 비율, 더욱 구체적으로 1 : 3 : 3의 세포수 비율로 포함하는 것일 수 있다. 상기 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg이 상기 비율로 혼합되어 공배양되는 경우에만 생체 내 종양 미세 환경을 모사할 수 있다. 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 약물에 의한 암 오가노이드의 사멸률이 현저히 낮아 약물의 항암 효과를 확인할 수 없는 문제가 발생한다. 또한, 상기 비율 이외의 비율로 공배양되는 경우에는 서로 다른 메커니즘으로 작용하는 약물의 효능이 고르게 나타나지 않는 문제가 발생하므로, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 전술한 바와 같은 세포수 비율로 혼합하는 것이 중요하다.
본 발명에 따른 항암제의 스크리닝 시스템은 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg를 상기 비율로 혼합한 혼합물을 포함하므로, 암세포가 생체 내에서 존재하고 있는 형태인 종양 미세 환경을 유사하게 재현할 수 있다. 따라서, 항암제가 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있으므로, 항암제의 스크리닝 방법에 유용하게 활용될 수 있다.
본 발명에 따른 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 혼합물은 특정 비율로 혼합되어 암세포가 생체 내에서 존재하고 있는 형태인 종양 미세 환경을 유사하게 재현할 수 있다. 따라서, 이를 활용하는 경우 약물이 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있다.
도 1은 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 각 공배양 비율에 따른 대장암 오가노이드의 성장률을 보여주는 그래프이다. 대표적인 예로서, 도면에 기재된 "1:3:0"은 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg가 1:3:0의 세포수 비율로 혼합된 것을 의미한다. 상기 성장률은 공배양 시작 직후(0h), 24시간 후(24h), 48시간 후(48h), 72시간 후(72h)에 각각 분석하였다.
도 2는 페암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 각 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 성장률을 보여주는 그래프이다. 대표적인 예로서, 도면에 기재된 "1:3:0"은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg가 1:3:0의 세포수 비율로 혼합된 것을 의미한다. 상기 성장률은 공배양 시작 직후(0h), 24시간 후(24h), 48시간 후(48h), 72시간 후(72h)에 각각 분석하였다.
도 3은 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 대장암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, Treg이 포함되지 않은 조건("1:3:0") 또는 CD8+ T 세포가 포함되지 않은 조건("1:0:3")에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 4는 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 대장암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 대장암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:1의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 5는 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 대장암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 대장암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:3의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 6은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, Treg이 포함되지 않은 조건("1:3:0") 또는 CD8+ T 세포가 포함되지 않은 조건("1:0:3")에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 7은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 폐암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:1의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 8은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 폐암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:3의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 2는 페암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 각 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 성장률을 보여주는 그래프이다. 대표적인 예로서, 도면에 기재된 "1:3:0"은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg가 1:3:0의 세포수 비율로 혼합된 것을 의미한다. 상기 성장률은 공배양 시작 직후(0h), 24시간 후(24h), 48시간 후(48h), 72시간 후(72h)에 각각 분석하였다.
도 3은 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 대장암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, Treg이 포함되지 않은 조건("1:3:0") 또는 CD8+ T 세포가 포함되지 않은 조건("1:0:3")에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 4는 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 대장암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 대장암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:1의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 5는 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 대장암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 대장암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:3의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 6은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, Treg이 포함되지 않은 조건("1:3:0") 또는 CD8+ T 세포가 포함되지 않은 조건("1:0:3")에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 7은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 폐암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:1의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
도 8은 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율에 따른 폐암 오가노이드의 사멸률을 보여주는 그래프로서, 폐암 오가노이드 및 CD8+ T 세포가 1:3의 세포수 비율로 고정되어 혼합된 조건에서 공배양한 결과에 관한 것이다. 'Non'은 약물 미처리군을 의미하고, 'Atez'는 예시 약물로서 아테졸리주맙을 처리한 약물 처리군을 의미하며, 'TIGIT'은 예시 약물로서 항-TIGIT 항체를 처리한 약물 처리군을 의미한다. 상기 사멸률은 약물 처리 72시간 후(72h)에 성장률을 측정한 결과를 바탕으로 분석하였다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다.
실시예 1. 항암제 효능 평가 및 스크리닝 시스템 확립
암이 생체 내 존재하고 있는 환경을 유사하게 재현함으로써, 약물이 생체 내 투여되었을 때의 효능을 정확하게 예측할 수 있는 인비트로(in vitro) 효능 평가 및 스크리닝 시스템을 확립하고자 하였다.
구체적으로, 암 오가노이드, 세포독성 T 세포(Cytotoxic T cell, 이하 'CD8+ T 세포) 및 조절 T 세포(regulatory T cell, 이하 'Treg')가 공존하는 공배양(co-culture) 시스템을 확립하기 위하여, 공배양 시 (ⅰ) 암 오가노이드가 적절히 성장하고, (ⅱ) 약물의 효능은 높게 관찰되는 조건을 충족시키는 이들의 혼합 비율을 도출하였다. 아래 표 1에 나타낸 바와 같이, 암 오가노이드를 1의 비율로 고정한 후, CD8+ T 세포 및 Treg은 0 내지 3의 비율로 설정하였다. 이때, 각 오가노이드 또는 세포의 수가 5.0×103개인 것을 1로 설정하였다
그룹 | 암 오가노이드 | CD8+ T 세포 | Treg |
1 | 1 | 3 | 0 |
2 | 0 | 3 | |
3 | 1 | 0.5 | |
4 | 1 | ||
5 | 3 | ||
6 | 3 | 0.5 | |
7 | 1 | ||
8 | 3 |
암 오가노이드는 대장암 또는 폐암 환자의 종양 조직에서 분리한 줄기세포를 이용하여 제조하였다. 분리한 줄기세포를 3D 구조로 성장할 수 있도록 ECM (Extracellular matrix)과 섞어서 dome을 제작한 뒤, 배양을 통해 오가노이드를 형성시켜 사용하였다.
CD8+ T 세포 및 Treg은 대장암 또는 폐암 환자에서 얻은 혈액으로부터 수득하였다. 혈액에 존재하는 면역세포를 분화시켰고, 분화된 면역세포에서 CD8+ 및 Treg 세포를 MACS (magnetic activated cell sorting) 방법을 이용하여 분리하였다.
실시예 1.1. 암 오가노이드가 적절히 성장하는 조건
암 오가노이드가 면역세포(CD8+ T 세포 및 Treg)와 공배양되는 경우에도 적절히 성장할 수 있도록 하는, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 혼합 비율을 도출하였다.
구체적으로, 상기 표 1에 따른 혼합 비율로 공배양한 후, 공배양 시작 직후(Oh), 24시간 후(24h), 48시간 후(48h), 72시간 후(72h)에 암 오가노이드의 면적을 각각 측정하여 다음과 같은 수식으로 성장률을 분석하였다.
*암 오가노이드 성장률 (%) = (공배양 24, 48 또는 72시간 후의 암 오가노이드 면적)/(공배양 시작 직후의 암 오가노이드 면적) × 100
그 결과, 도 1 및 2에서 볼 수 있듯이, 모든 혼합 비율에서 대장암 또는 폐암 오가노이드의 성장은 저해되지 않고 적절히 성장하였으며, 각 혼합 비율 간에 유의적인 차이가 나타나지는 않았다.
실시예 1.2. 약물의 효능이 높게 나타나는 조건
CD8+ T 세포를 타겟하는 항암제 및 Treg를 타겟하는 항암제의 효능이 높게 나타나도록 하는, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 혼합 비율을 도출하였다.
구체적으로, 상기 표 1의 혼합 비율에 따른 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양물에 대하여 약물을 처리하지 않은 것을 대조군(이하 '약물 미처리군')으로 설정하였고, 실험군(이하 '약물 처리군')으로는 CD8+ T 세포를 타겟하는 아테졸리주맙, 또는 CD8+ T 세포 및 Treg를 타겟하는 항-TIGIT 항체를 예시 약물로서 처리한 것을 설정하였다. 이들을 72시간 동안 공배양한 후, 약물 처리 72시간 후(72h)에 각각 성장률을 측정하고, 측정한 성장률을 통해 아래의 방법으로 사멸률을 분석하였다.
암 오가노이드 사멸률 (%) = [1 - (약물 처리군의 암 오가노이드 성장률*)/(약물 미처리군의 암 오가노이드 성장률**)] × 100
*약물 처리군의 암 오가노이드 성장률 (%) = (약물 처리 72시간 후의 암 오가노이드 면적)/(공배양 시작 직후(0h)의 암 오가노이드 면적) × 100
**약물 미처리군의 암 오가노이드 성장률 (%) = (약물 미처리 72시간 후의 암 오가노이드 면적)/(공배양 시작 직후(0h)의 암 오가노이드 면적) × 100
그 결과, 도 3에서 볼 수 있듯이, 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg 중에서, Treg를 제외하고 대장암 오가노이드 및 CD8+ T 세포만 1 : 3의 혼합 비율로 공배양되는 경우, 아테졸리주맙에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 약 26%로서 높게 나타나지만, 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 약 5%에 불과하여, 약물의 효능을 정확하게 판단할 수 없음을 확인하였다. 또한, 대장암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg 중에서, CD8+ T 세포를 제외하고 대장암 오가노이드 및 Treg만 1 : 3의 혼합 비율로 공배양되는 경우, 아테졸리주맙 및 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 약 2% 정도로 현저히 낮은 수준으로 나타남에 따라, 약물의 효능을 정확하게 판단할 수 없음을 확인하였다.
또한, 도 4에서 볼 수 있듯이, 대장암 오가노이드 및 CD8+ T 세포를 1 : 1의 혼합 비율로 공배양하는 경우, Treg의 혼합 비율이 증가할수록 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 증가하지만 그 최대 수준은 약 6%에 불과하고, 아테졸리주맙에 의한 암 오가노이드의 사멸률 또한 최대 약 10% 수준에 불과하여, 약물의 효능을 정확하게 판단할 수 없음을 확인하였다.
반면, 도 5에서 볼 수 있듯이, 대장암 오가노이드 및 CD8+ T 세포를 1 : 3의 혼합 비율로 공배양하는 경우, Treg의 혼합 비율이 증가할수록 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 증가하여 그 최대 수준은 약 10%에 도달하였고, 아테졸리주맙에 의한 암 오가노이드의 사멸률 또한 약 25%로서 높게 나타났다. 즉, 상기 혼합 비율에서는 다른 혼합 비율에 비하여 아테졸리주맙 및 항-TIGIT 항체와 같은 모든 약물의 효능이 높은 수준으로 나타나며, 그 효능은 최대 2배 이상 증가함을 확인하였다.
아울러, 도 6에서 볼 수 있듯이, 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg 중에서, Treg를 제외하고 폐암 오가노이드 및 CD8+ T 세포만 1 : 3의 혼합 비율로 공배양되는 경우, 아테졸리주맙에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 약 27%로서 높게 나타나지만, 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 약 6%에 불과하여, 약물의 효능을 정확하게 판단할 수 없음을 확인하였다. 또한, 폐암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg 중에서, CD8+ T 세포를 제외하고 폐암 오가노이드 및 Treg만 1 : 3의 혼합 비율로 공배양되는 경우, 아테졸리주맙 및 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 약 1% 정도로 현저히 낮은 수준으로 나타남에 따라, 약물의 효능을 정확하게 판단할 수 없음을 확인하였다.
또한, 도 7에서 볼 수 있듯이, 폐암 오가노이드 및 CD8+ T 세포를 1 : 1의 혼합 비율로 공배양하는 경우, Treg의 혼합 비율이 증가할수록 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 증가하지만 그 최대 수준은 약 6%에 불과하고, 아테졸리주맙에 의한 암 오가노이드의 사멸률 또한 약 10% 수준에 불과하여, 약물의 효능을 정확하게 판단할 수 없음을 확인하였다.
반면, 도 8에서 볼 수 있듯이, 폐암 오가노이드 및 CD8+ T 세포를 1 : 3의 혼합 비율로 공배양하는 경우, Treg의 혼합 비율이 증가할수록 항-TIGIT 항체에 의한 암 오가노이드의 사멸률은 증가하여 그 최대 수준은 약 10%에 도달하였고, 아테졸리주맙에 의한 암 오가노이드의 사멸률 또한 약 25%로서 높게 나타났다. 즉, 상기 혼합 비율에서는 다른 혼합 비율에 비하여 아테졸리주맙 및 항-TIGIT 항체의 모든 약물의 효능이 높은 수준으로 나타나며, 그 효능은 최대 2배 이상 증가함을 확인하였다.
상기 결과는, 암 오가노이드, CD8+ T 세포 및 Treg의 공배양 비율을 1 : 3 : 0.5 내지 3으로 설정하는 것이 항암제 효능 평가 또는 스크리닝 시스템에 가장 최적화된 비율임을 시사한다.
Claims (8)
- 하기 단계를 포함하는, 항암제의 효능 평가 방법:
(a) 암 오가노이드, 세포독성 T 세포(Cytotoxic T cell) 및 조절 T 세포(regulatory T cell)를 1 : 3 : 0.5 내지 3의 세포수 비율로 혼합하여 공배양하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계의 암 오가노이드, 세포독성 T 세포 및 조절 T 세포 혼합물에 항암제를 처리하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계의 항암제가 처리된 군이 항암제 미처리군 또는 양성 대조군에 비해 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸이 증가한 경우, 상기 항암제의 효능이 우수한 것으로 판단하는 단계. - 하기 단계를 포함하는, 항암제의 스크리닝 방법:
(a) 암 오가노이드, 세포독성 T 세포 및 조절 T 세포를 1 : 3 : 0.5 내지 3의 세포수 비율로 혼합하여 공배양하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계의 암 오가노이드, 세포독성 T 세포 및 조절 T 세포 혼합물에 항암제 후보물질을 처리하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계의 항암제 후보물질이 처리된 군에서 항암제 후보물질 미처리군에 비해 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸이 증가한 경우, 상기 후보물질을 항암제로 결정하는 단계. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 항암제는 화합물, 펩티드, 펩티드 미메틱스, 융합 단백질, 항체, 앱타머, 항체-약물 복합체(ADC; Antibody Drug Conjugate), DNA 또는 mRNA에 상보적으로 결합하는 안티센스 핵산, siRNA, shRNA, miRNA 및 리보자임으로 이루어진 그룹에서 선택되는 하나 이상인, 방법. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 암은 담도암, 위암, 폐암, 간암, 대장암, 결장암, 소장암, 췌장암, 뇌암, 뼈암, 흑색종, 유방암, 경화성선증, 자궁암, 자궁경부암, 두경부암, 식도암, 갑상선암, 부갑상선암, 신장암, 육종, 전립선암, 요도암, 방광암, 혈액암, 림프종 및 섬유선종으로 이루어진 그룹에서 선택되는 하나 이상인, 방법. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 암 오가노이드의 성장 저해 또는 사멸은 암 오가노이드의 면적 증감을 통해 확인하는 것인, 방법. - 제1항에 따른 항암제의 효능 평가 방법을 사용하기 위한 항암제의 효능 평가 시스템으로서, 암 오가노이드, 세포독성 T 세포 및 조절 T 세포를 포함하는 항암제의 효능 평가 시스템.
- 제2항에 따른 항암제의 스크리닝 방법을 사용하기 위한 항암제의 스크리닝 시스템으로서, 암 오가노이드, 세포독성 T 세포 및 조절 T 세포를 포함하는 항암제의 스크리닝 시스템.
- 삭제
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220096407A KR102527911B1 (ko) | 2022-08-02 | 2022-08-02 | 조절 t 세포의 약물 스크리닝 용도 |
EP22808932.2A EP4174489A1 (en) | 2021-09-17 | 2022-09-16 | Method for evaluating efficacy of anticancer agent or screening anticancer agent |
PCT/KR2022/013919 WO2023043278A1 (ko) | 2021-09-17 | 2022-09-16 | 항암제 효능 평가 또는 스크리닝 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220096407A KR102527911B1 (ko) | 2022-08-02 | 2022-08-02 | 조절 t 세포의 약물 스크리닝 용도 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR102527911B1 true KR102527911B1 (ko) | 2023-05-02 |
Family
ID=86387461
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020220096407A KR102527911B1 (ko) | 2021-09-17 | 2022-08-02 | 조절 t 세포의 약물 스크리닝 용도 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR102527911B1 (ko) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20200105852A (ko) * | 2017-12-21 | 2020-09-09 | 코닌클리즈케 네덜란드세 아카데미 반 베텐샤펜 | 면역세포 오가노이드 공-배양물 |
KR20200116944A (ko) * | 2018-02-02 | 2020-10-13 | 웨이크 포리스트 유니버시티 헬스 사이언시즈 | 면역요법 관련 오가노이드 및 그의 제조 및 사용 방법 |
KR102333275B1 (ko) * | 2020-02-25 | 2021-12-03 | 고려대학교 산학협력단 | 환자 맞춤형 약물 선택을 위한 정보 제공 방법 |
-
2022
- 2022-08-02 KR KR1020220096407A patent/KR102527911B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20200105852A (ko) * | 2017-12-21 | 2020-09-09 | 코닌클리즈케 네덜란드세 아카데미 반 베텐샤펜 | 면역세포 오가노이드 공-배양물 |
KR20200116944A (ko) * | 2018-02-02 | 2020-10-13 | 웨이크 포리스트 유니버시티 헬스 사이언시즈 | 면역요법 관련 오가노이드 및 그의 제조 및 사용 방법 |
KR102333275B1 (ko) * | 2020-02-25 | 2021-12-03 | 고려대학교 산학협력단 | 환자 맞춤형 약물 선택을 위한 정보 제공 방법 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Rocha et al., Cancers, Vol. 13, No. 421, 2021. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Xia et al. | EGFR‐targeted CAR‐T cells are potent and specific in suppressing triple‐negative breast cancer both in vitro and in vivo | |
Joo et al. | MET signaling regulates glioblastoma stem cells | |
CN101855339A (zh) | 人类癌症干细胞 | |
CN102099491A (zh) | 调节血管生成的新靶标 | |
CN101605560A (zh) | 治疗胆管癌的药物组合物、抑制胆管癌生长或侵入的方法和治疗胆管癌的方法 | |
CN105255881A (zh) | 用于蛋白质表达的具有未修饰和修饰核苷酸的组合的rna | |
EP3447143A1 (en) | Anti-cancer drug assessment method | |
CN102782133A (zh) | 抑制c-Met表达的siRNA及含有所述siRNA的抗癌组合物 | |
CN109468380B (zh) | Il1r2在乳腺癌预后评估与靶向治疗中的应用 | |
CN102348796B (zh) | 新型癌抗原eEF2 | |
CN115772232A (zh) | 一种靶向gpc3的嵌合抗原受体单核/巨噬细胞及构建方法和应用 | |
Lu et al. | Delivery of TSPAN1 siRNA by novel Th17 targeted cationic liposomes for gastric cancer intervention | |
CN108559748B (zh) | 一种cd4阳性细胞特异的dna核酸适体及其嵌合体 | |
KR102511631B1 (ko) | Pbmc 유래 세포독성 t 세포의 신규 용도 | |
KR102527911B1 (ko) | 조절 t 세포의 약물 스크리닝 용도 | |
Billings et al. | Amphiregulin overexpression results in rapidly growing keratinocytic tumors: an in vivo xenograft model of keratoacanthoma | |
KR20220067657A (ko) | 면역치료요법의 효능, 예후, 또는 내성 예측을 위한 바이오마커, 및 면역치료요법의 효능 증진을 위한 표적으로서 tctp의 용도 | |
KR102527906B1 (ko) | 수지상 세포의 약물 효능평가 용도 | |
KR102511633B1 (ko) | M1 마크로파지 및 m2 마크로파지 혼합물을 이용한 항암제 효능 평가 방법 | |
US9284557B2 (en) | Double-stranded nucleic acid molecule, cancer cell proliferation inhibitor and pharmaceutical agent suitable for prevention or treatment of cancer | |
KR102478897B1 (ko) | T세포 및 마크로파지를 이용한 항암제 효능 평가 방법 | |
KR102511632B1 (ko) | 암 오가노이드 및 til 포함 종양 미세환경을 이용한 항암제 효능 평가 방법 | |
Chen et al. | A paracrine circuit of IL-1β/IL-1R1 between myeloid and tumor cells drives glioblastoma progression | |
CN103800919B (zh) | Tuft1在制备肝癌诊断和治疗制剂中的应用 | |
WO2022160374A1 (zh) | 一种靶向cd206阳性细胞的核酸适体及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |