KR102471009B1 - 왕자귀나무 추출물을 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물 - Google Patents

왕자귀나무 추출물을 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 왕자귀나무 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 왕자귀나무의 추출물, 이 중에서도 줄기 및 가지 추출물은 티로시나아제의 활성과 콜라게나아제의 활성을 억제하고 라디컬 소거능이 우수하여 피부 상태를 개선하는 다기능성 화장료 조성물로 용이하게 이용가능하다.

Description

왕자귀나무 추출물을 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물 {Cosmetic composition containing Albiggia kalkora extract for skin whitening and improving wrinkles}
본 발명은 왕자귀나무 추출물을 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 몸의 표면을 감싸고 있는 곳으로 표피(epidermis)와 진피(dermis)로 나뉘는데 표피는 내부기관을 보호하는 역할을 하며, 진피에서 상기 섬유아세포의 활동에 의한 피부세포 증식이 이루어진다. 또한 피부의 진피는 콜라겐(collagen), 엘라스틴(elastin), 피브릴린(fibrillin) 등 세포 외 기질단백질 섬유가 그물모양으로 짜여져 구성되어(Braverman, J. Invest. Dermatol., 78, 434-443, 1982) 전반적으로 피부전체의 탄력을 유지하는 역할을 하게 된다. 피부를 구성하는 기반이 되는 섬유아세포의 작용이 쇠퇴하면서 세포 수가 감소되고, 콜라겐과 엘라스틴의 감소되면 피부의 주름살이 증가된다. 섬유아세포의 단백질 생합성 활성은 연령이 증가함에 따라 감소한다고 알려져 있다. 피부주름을 개선하기 위한 화장료는 오래 전부터 계속해서 개발되어 오고 있으며, 특히 여성에게 있어서 피부주름이 생성되는 경우는 매우 예민한 사항으로서 외적인 요인에 의해 발생된다고 생각되는 피부주름의 발생에 대하여 UV 차단제나 보습제 등이 다양한 제품들로 쏟아져 나오고 있다.
피부 주름개선 물질로서 콜라겐 합성을 촉진하는 물질로는 레티노익산, 레티놀 및 비타민 C가 대표적이다. 그러나 각각의 물질들은 단점을 갖고 있는데 레티노익산의 경우 피부에 대한 자극성이 강하며, 레티놀은 자체의 안정성이 낮아 쉽게 산화되거나 피부트러블의 원인이 되기도 한다. 또한 비타민 C의 경우도 역시 공기, 온도 등에 의해 쉽게 변질되며, 안정성에도 문제가 많은 것으로 알려져 있다.
한편, 피부의 과색소 침착은 피부의 염증 반응 이후의 체내 호르몬 이상, 유전질환 및 자외선 조사 등의 여러 요인에 의해 발생하며, 주된 요인은 멜라닌 색소 합성 및 분포 이상에 의한 것이다. 멜라닌은 멜라닌 세포 내에서 티로신(tyrosine)이 티로시나제(tyrosinase)의 작용에 의해 도파퀴논(dopaquinone)으로 전환되고, 이후 상기 도파퀴논이 효소의 작용 및 자발적인 산화 반응에 의하여 멜라닌으로 전환되며 생성된다.
멜라닌 생성의 억제 방법으로는 다음과 같은 방법들이 있는데, 첫번째 방법은, 자외선을 차단하여 멜라닌 생성의 주원인을 제거하는 것으로, 광산란제 또는 광차단제를 함유한 화장료를 제조하여 미백 반응을 유도할 수 있다. 두번째 방법은, 티로시나제가 활성을 나타내기 위해 필요한 코어 탄수화물의 합성을 저해함으로써 멜라닌 생성을 억제하는 방법으로, 글루코사민(glucosamine)과 같은 화합물을 이용할 수 있다. 세번째 방법은, 멜라닌 세포에 대하여 특이적인 독성을 갖는 물질을 이용하여 상기 멜라닌 생성 세포의 세포분열을 방해하는 방법으로, 하이드로퀴논(hydroquinone)과 같은 화합물을 이용할 수 있다. 네번째 방법은, 멜라닌 생성에 관여하는 효소인 티로시나제의 기능을 방해하는 방법으로, 코직산(kojic acid) 또는 알부틴(arbutin)과 같은 화합물을 이용할 수 있다. 그 밖의 방법으로는, 생성된 멜라닌을 환원시키는 방법도 있다. 상기 방법 중에서 하이드로퀴논과 코직산 또는 알부틴과 같은 화합물을 이용할 때, 천연물 유래의 화합물을 사용할 수도 있으나, 합성 화합물을 이용할 수도 있다. 대표적으로 이용되는 합성 화합물로는 상기에 언급된 하이드로퀴논과 코직산 또는 알부틴 이외에도, 4-n-부틸레조시놀(4-n-butylresorcinol), 퀘르세틴(quercetin), 캠페롤(kaempferol) 등이 있는데, 상기 합성 화합물들은 미백 효과가 좋기는 하지만 피부 자극에 따른 제품 안전성 문제로 인해 그 사용에 한계가 있었다. 특히, 합성 4-n-부틸레조시놀은 제품 생산시 안정성이 떨어져 쉽게 갈변이 되며, 고농도로 사용할 때에는 피부자극이 나타나기도 한다. 따라서, 이러한 단점을 해결하기 위해, 감마리노렌산을 사용하여 4-n-부틸레조시놀을 리포좀화하는 방법이 개시된 바 있었으나(대한민국 등록특허 제10-0751883호), 자극성을 완전히 없애는 것은 불가능하였다.
항산화 기능은 체내에서 일어나는 산화반응을 억제시키거나 그 속도를 느리게 하는 것인데, 체내에서 일어나는 산화 반응은 노화의 유발과 세포의 변이를 유발하여 암세포를 생성한다. 따라서, 항산화 작용은 이런 체내의 부정적인 반응을 억제하기 위한 예방 방편으로 대중들도 관심이 많다. 체내에서는 세포 호흡과 더불어 에너지에 해당하는 ATP 생성이 주기능인 세포 내의 미토콘드리아가 호흡의 부산물인 자유 라디칼(free radical)을 생성하고, 이는 불안정하여, 지질, 핵산, 단백질 등의 다른 물질과 급격하고 무차별적으로 반응한다. 따라서 이런 자유 라디칼의 생성을 막을 수 있다면 체내의 산화를 예방한다고 볼 수 있으며, 간접적으로는 노화와 암을 예방할 수 있어서 관심이 크다. 이런 항산화 효과는 인체 내에서 발생하는 자유 라디칼을 대상으로 실험하는 것에 무리가 있어 DPPH(1,1-diphenyl-2-picylhydrazyl) 라디칼을 바이오마커로서 사용하고 있다. DPPH 라디칼 소거활성 분석은 시료의 항산화능을 측정하는 방법 중의 하나로, 페놀성 화합물, 방향족 아민류 및 아스코르브산 등에 의해 수소나 전자를 받아 환원되어 DPPH의 보라색이 탈색되는 원리를 이용하여 항산화 활성을 측정하는 방법으로 비교적 간단하고 짧은 시간 내에 항산화 활성을 측정할 수 있으며, 식물체의 항산화 활성과도 높은 연관성을 가지기 때문에 널리 사용되는 방법이다.
왕자귀나무(Albiggia kalkora PRAIN)는 콩과에 속하는 낙엽소교목으로 한국 자생종이나 중국 등에도 일부 분포한다. 자귀나무에 비해서 잎이 보다 크고 수술이 많으며 꽃은 흰빛이 더 돈다. 왕자귀나무의 나무 껍질이 이전부터 한약재로 사용되어 왔으나 이에 대한 다양한 용도로의 학술적 연구는 미비하다.
이에 본 발명자들은 왕자귀나무 추출물에 관해 다양한 생리활성을 연구하던 중, 상기 추출물이 피부미백, 주름개선 또는 항산화 효과가 우수함을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
대한민국 등록특허 제10-1225103호 (발명의 명칭 : 자귀나무 추출물을 포함한 조성물의 살충용도, 출원인 : 한국화학연구원 외 1인, 등록일 : 2013년01월16일) 대한민국 등록특허 제10-0443588호 (발명의 명칭 : 목단피추출물과 자귀나무추출물을 함유하는 노화방지화장료 조성물, 출원인 : 나드리화장품주식회사 외 1인, 등록일 : 2004년07월28일) 대한민국 등록특허 제10-1081059호 (발명의 명칭 : 항산화 및 미백 활성을 갖는 꽃 혼합 추출물 및 그 추출방법 및 그 꽃 혼합 추출물을 함유하는 화장료 조성물, 출원인 : 한국콜마 주식회사, 등록일 : 2011년11월01일)
본 발명의 목적은 왕자귀나무 추출물을 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 왕자귀나무(Albiggia kalkora PRAIN) 추출물을 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 추출물은 티로시나아제 또는 콜라게나아제를 억제하는 활성이 있다.
또한 추출물은 항산화능이 있는 것을 특징으로 한다.
상기 추출물은 물, C1~C4 알코올 또는 이들의 혼합용액을 용매로 하여 추출한 것을 특징으로 한다. 상기 C1~C4 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 및 이소부탄올로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
상기 화장료 조성물은, 스킨로션, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
또한, 본 발명은 왕자귀나무 추출물을 함유하는 피부미백 또는 주름개선용 건강기능식품에 관한 것일 수 있다. 상기 건강기능식품은 항산화 효능이 있는 것을 특징으로 한다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
상기 왕자귀나무 추출물은 채취한 사초과 식물의 잎, 줄기, 줄기, 수피, 뿌리, 꽃, 열매, 또는 이들의 혼합물을 추출용매를 이용하여 추출한 것일 수 있다. 바람직하게는 가지 및 줄기가 1:0.5 내지 1:2의 중량비로 혼합된 것을 사용할 수 있다.
상기 왕자귀나무 추출물은 물, C1~C4 알코올 또는 이들의 혼합용액을 용매로 하여 제조할 수 있다. 상기 물은 증류수, 이온화수(DI water) 등 불순물이 없는 물이면 어떤 것이든지 사용할 수 있다. 상기 C1~C4 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 및 이소부탄올로 이루어진 군에서 선택될 수 있다. 이때 왕자귀나무 추출물은 물 추출물보다는 C1~C4 알코올 추출물 또는 C1~C4 알코올의 수용액 추출물인 것이 좋으며, C1~C4 알코올의 수용액 추출물이 피부미백, 주름개선 또는 항산화 활성이 가장 좋다. C1~C4 알코올의 수용액으로서 적절한 것은 50 내지 90%(v/v) 에탄올 수용액이며, 가장 적절한 것은 60 내지 70%(v/v) 에탄올 수용액이다.
상기 왕자귀나무의 제조 시 상기 왕자귀나무 건조 중량의 5 내지 40배, 바람직하게는 10 내지 20배에 달하는 중량의 용매를 이용하여 추출할 수 있다. 상기 범위보다 용매가 너무 적으면 열을 가하여 추출물을 제조할 시, 용매의 증발로 인하여 추출이 잘 안 될 수 있으며, 용매가 너무 많으면 추출시간이 너무 길어지는 문제가 있다.
그리고, 상기 추출과정은 10 내지 40℃에서 24 내지 48시간 동안 교반하면서 진행할 수 있으며 1~4번까지 반복하여 추출하여 액상의 추출물을 수득할 수 있다.
상기 액상의 추출물은 멸균 거즈 또는 여과지를 이용하여 건더기 등을 걸러낼 수 있다. 이러한 여과 과정을 통한 여과액은 회전 진공 농축기를 이용하여 10~40℃에서 감압 농축할 수 있고, 동결건조로 남은 용매를 제거한 후 추출물을 수득할 수 있다.
상기 왕자귀나무 추출물은 상기 화장료 조성물에 0.01 내지 20 중량%로 포함할 수 있다. 상기 왕자귀나무 추출물이 화장료 내에 0.01 중량% 미만 포함되면 피부미백, 주름개선 또는 항산화 효과가 미미할 수 있고, 20 중량%를 넘으면 제제화가 어려워질 수 있다. 또한, 10 중량%를 넘으면 피부미백, 주름개선 또는 항산화 기능성이 향상되는 정도가 미미해질 수 있어서, 상기 왕자귀나무 추출물은 상기 화장료 조성물에 0.01 내지 10 중량%가 포함되는 것이 바람직할 수 있다. 이때 왕자귀나무 추출물의 중량은 상기 왕자귀나무 추출물을 건조하여 분말 형태로 만든 건조된 것을 기준으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 원료 또는 유효성분으로 함유하는 화장료 제형을 제공할 수 있다. 상기 제형은 피부외용연고, 에센스, 미백크림, 로션, 에멀젼, 팩, 일반화장수, 스킨밀크, 스킨, 크림, 세럼, 미용비누, 유연화장수, 약용화장수, 전신세정제, 클렌징 오일, 클렌징 크림, 클렌징 티슈 및 클렌징 워터에서 선택되는 것을 제공할 수 있다.
본 발명의 화장료 제형에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연, 락토스, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더, 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트, 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 왕자귀나무 추출물을 함유하는 피부미백, 주름개선 또는 항산화용 건강기능식품을 제공한다.
상기 왕자귀나무 추출물은 본 발명의 건강기능식품에 0.01~100 중량%로 하여 첨가될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제 등이 있다.
본 발명은 왕자귀나무 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 왕자귀나무의 추출물, 이 중에서도 줄기 및 가지 추출물은 티로시나아제의 활성과 콜라게나아제의 활성을 억제하고 라디컬 소거능이 우수하여 피부 상태를 개선하는 다기능성 화장료 조성물로 용이하게 이용가능하다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화 될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지도록, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
제조예 1 내지 4. 왕자귀나무 또는 자귀나무 추출물의 제조
본 발명의 왕자귀나무 추출물 제조를 위해, 왕자귀나무의 가지와 줄기를 동량으로 혼합한 것을 3차 증류수를 이용하여 세척하였고, 작두를 이용하여 잘게 분쇄하였다. 분쇄한 왕자귀나무의 가지와 줄기 혼합물에 70%(v/v) 에탄올 수용액을 10배 중량 첨가하여 25℃에서 24시간 동안 교반하면서 추출을 진행하였다. 이 후 1차로 멸균 거즈를 이용하여 여과한 후 여과액을 다시 여과지(Whatman, No. 2: Whatman Ltd., Maidstone, Kent, UK)를 이용하여 분쇄 시료 등을 걸러내었고 회전진공농축기를 이용하여 감압 농축한 후 동결건조기로 남은 용매를 제거하여 왕자귀나무 추출물을 수득하였다. 이 외 하기 표 1과 같이 자귀나무에 대해서도 가지와 줄기 혼합물, 꽃, 잎을 이용하여 각각의 추출물을 제조하였다.
조건 시료
제조예 1 왕자귀나무 가지 및 줄기
제조예 2 자귀나무 가지 및 줄기
제조예 3 자귀나무 꽃
제조예 4 자귀나무 잎
실시예 1. 콜라게나아제 억제 활성 확인
제조예 1 내지 5에서 제조한 추출물을 DMSO(dimethylsulfoxide)에 녹여 최종농도가 150㎍/㎖가 되도록 하여 콜라게나아제의 억제 활성을 확인하고, 이를 표 2에 나타내었다. 콜라게나아제(Collagenase) 저해 활성 측정은 Wunsch와 Heindrich의 방법에 따라 측정하였다. 반응구는 0.1 M tris-HCl buffer(pH 7.5)에 4 mM CaCl2를 첨가하여, 0.3 mg/mL의 4-phenyl azobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg(Sigma Aldrich CO., USA)를 녹인 기질액 125 μL 및 시료용액 50 μL의 혼합액에 0.2 mg/mL의 collagenase(Sigma Aldrich CO., USA) 75 μL를 첨가하여 실온에서 20분 동안 방치한다. 그후 6% citric acid 250 μL를 넣어 반응을 정지시킨 후 ethyl acetate 1.5 mL를 첨가하여 UV/VIS spectrophotometer(Optizen 2120 UV, Mecasys, Daejeon, Korea) 320 nm에서 흡광도를 측정하였다. Collagenase 저해활성은 시료 용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.
Collagenase 활성 저해율(%) = (B/A) ×100
A: 무첨가군의 흡광도 값
B: 추출물 처리 후 흡광도 값
구분 대조군 대비 상대적 흡광도
(Relative collagenase activity, Abs)
대조군(DMSO) 1.00
제조예 1 0.15±0.08
제조예 2 1.22±0.07
제조예 3 1.01±0.09
제조예 4 0.83±0.03
그 결과, 표 2에서와 같이 콜라게나아제의 억제 효능이 왕자귀나무 추출물 처리군에서 가장 좋은 것을 확인할 수 있다.
실시예 2. 티로시나아제 억제 활성 확인
타이로시나아제(Tyrosinase) 저해 활성 측정을 위하여 범용적으로 많이 사용하는 mushroom tyrosinase를 사용하였다. 96-well microplate(SPL Life Sciences Co., Ltd., Pocheon, Korea)에 1 mM L-tyrosine와 0.5 M phosphate buffer(pH 6.5)를 혼합한 용액을 제조한다. 제조한 용액 170 μl와 tyrosinase (300 U) 20 μl에 활성을 측정하고자 하는 추출물 시료들을 25℃에서 30분간 반응시켰다. 반응시킨 후에 microplate reader(Berthold, Bad Wildbad, Germany)를 이용하여 450 nm에서 측정하였다. DMSO 10 μl을 가하여 control로 사용하였다. Blank는 tyrosinase 대신 0.1 M phosphate buffer(pH 6.5) 20 μl를 가하여 측정하였다.
효소 활성 저해율(%)은 아래와 같은 산출식으로 계산하였다.
Tyrosinase 활성 저해율(%) = {(A-B)/A} ×100
A: O.D at 450 nm without sample,
B: O.D at 450 nm with sample
구분 대조군 대비 상대적 흡광도
(Relative tyrosinase activity, Abs)
대조군(DMSO) 1.00
제조예 1 0.60±0.02
제조예 2 2.02±0.03
제조예 3 1.52±0.01
제조예 4 1.23±0.02
확인 결과, 표 3에서와 같이 티로시나아제의 억제 효능이 왕자귀나무 추출물 처리군에서 가장 좋은 것을 확인할 수 있다.
실시예 3. DPPH 라디칼 소거능 시험
제조예 1에서 제조한 왕자귀나무의 가지 및 잎 추출물과 자귀나무의 부위별 추출물을 각각 녹여서 시료 용액을 만들었다. 96 well plate의 각 well에 각 추출물 시료를 10, 50, 100 ㎍/㎖로 최종농도가 되게 10μl씩 분주하고 150μM DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 에탄올 용액 190μl를 첨가하고 반응시켰다. 이후 뚜껑을 덮은 후 25℃에서 30분 동안 반응시켰다. 반응이 종료된 후 분광기(Microplate reader)를 사용하여 DPPH의 색 변화를 517nm에서 흡광도 값을 측정하였다. 상기 과정을 3회 반복하여 평균을 구한 수치를 사용하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
구분 10 ㎍/㎖ 에서의
DPPH 라디칼 소거능 (%)
50 ㎍/㎖ 에서의
DPPH 라디칼 소거능 (%)
100 ㎍/㎖ 에서의
DPPH 라디칼 소거능 (%)
제조예 1 55.7±0.7 82.8±0.2 98.3±2.6
제조예 2 6.6±0.7 16.6±0.7 32.1±1.3
제조예 3 5.4±0.9 21.4±0.9 36.2±3.9
제조예 4 8.4±1.1 20.4±1.1 39.2±2.3
상기 표 4를 참조하면, 제조예 1의 추출물은 10 ㎍/㎖부터 DPPH 라디컬을 거의 50% 이상 제거하지만, 자귀나무의 각 추출물은 100 ㎍/㎖를 처리하여도 DPPH 라디컬이 40% 미만으로 소거되는 것을 알 수 있어 항산화능에 있어 각 식물이 현저한 차이가 있음을 확인할 수 있다.
실시예 4. ROS 측정값 확인
HDF(human dermal fibroblast) 세포를 배양하여 96 well plate에 well당 5×103 cell/ 100 μl씩 분주하여 incubator에서 24시간 배양한 후 배양액을 제거하고 시료 또는 양성 대조군(quercetin 10 μM)으로 처리한 후 incubator에서 24시간 배양하였다. 차광조건에서 well 안의 배양액을 모두 제거한 후 PBS 용액으로 세척한 뒤DCF-DA(2-7-dicholordihydrofluorescein diacetate)를 DMSO에 녹여 10,000 μM이 되도록 한 후, 소량씩 분주하여 냉동보관하였다. PBS로 한번 더 세척한 후 50 μM DCF-DA 용액을 50 μl씩 첨가한 후 incubator에서 30분간 배양하였다. ROS indicator인 H2O2를 PBS(1% FBS 함유)에 200 μM 농도가 되도록 희석하여 각 well에 200 μl씩 처리한 후 호일로 싸서 incubator에서 30분간 배양하였다. 485 nm, 발광 535 nm에서 fluorescence를 측정하였다.
200 μM의 H2O2 처리로 인해 생성된 ROS의 소거능을 확인한 바, 하기 표 5와 같이 100 ㎍/㎖ 처리시 왕자귀나무 추출물의 ROS 소거능이 2배 이상 차이나는 것으로 파악된다. 이 때 ROS 농도는 H2O2를 처리하지 않은 정상군을 100%로 기준하여 측정하였다.
그 결과 하기 표 5와 같이 H2O2 처리로 인해 정상군의 2배 이상 증가한 ROS 농도가 왕자귀나무 추출물 처리로 인해 현저하게 감소되는 것을 확인할 수 있으며, 이와 비교해 자귀나무 추출물 시료는 큰 효과를 나타내지는 않는 것으로 보인다.
시료 처리군 추출물 100 ㎍/㎖ 에서의 ROS 농도 비교값 (%)
H2O2 (단독처리) 211.6±15
H2O2 + 제조예 1 42.1±1.9
H2O2 + 제조예 2 150.1±2.5
H2O2 + 제조예 3 146.2±4.9
H2O2 + 제조예 4 159.2±2.8
<제제예 1. 화장료 제조>
제제예 1-1. 스킨의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물 5.0 중량%, 프로필렌글리콜 5.2 중량%, 올레일알코올 1.5 중량%, 에탄올 3.2 중량%, 폴리솔베이트 20 3.2 중량%, 벤조페논-9 2.0 중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0 중량%, 글리세린 3.5 중량% 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 스킨을 제조하였다.
제제예 1-2. 로션의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물 5.0 중량%, 세토스테아릴 알코올 1.0 중량%, 글리세릴모노스테아레이트 0.8 중량%, 소르비탄모노스테아레이트 0.3 중량%, 폴리솔베이트 60 1.0 중량%, 미네랄오일 5.0 중량%, 사이크로메치콘 3.0 중량%, 디메치콘 0.5 중량%, 알란토인 0.1 중량%, 글리세린 5.0 중량%, 알코올 2 중량%, 프로필렌글리콜 3.0 중량%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 로션을 제조하였다.
제제예 1-3. 에센스의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물 5.0 중량%, 프로필렌글리콜 4.0 중량%, 글리세린 3.0 중량%, 알란토인 0.5 중량%, EDTA-2Na 0.01 중량%, 에탄올 5.0 중량%, 트리에탄올아민 1.5 중량%, 스쿠알란 2.0 중량%, 밀랍 2.5 중량%, 폴리솔베이트60 중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0 중량%, 솔비탄세스퀴올레이트 2.5 중량%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 에센스를 제조하였다.
제제예 1-4. 크림의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물 10.0%, 폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트 0.7%, 솔비탄세스퀴올레이트 0.5%, 세틸알코올 0.6%, 스테아린산 0.75%, 글리세릴모노스테아레이트 0.6%, 유동파라핀 15.0%, 카르복시비닐폴리머 10.0%, 트리에탄올아민 0.2%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 크림을 제조하였다.
<제제예 2. 식품 제조>
제제예 2-1. 조리용 양념의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물을 조리용 양념에 1 중량%로 첨가하여 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.
제제예 2-2. 밀가루 식품의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물을 밀가루에 0.1 중량%로 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
제제예 2-3. 스프 및 육즙(gravies)의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물을 스프 및 육즙에 0.1 중량%로 첨가하여 건강 증진용 수프 및 육즙을 제조하였다.
제제예 2-4. 유제품(dairy products)의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물을 우유에 0.1 중량%로 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
제제예 2-5. 야채주스의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물 0.5g을 토마토주스 또는 당근주스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 야채주스를 제조하였다.
제제예 2-6. 과일주스의 제조
본 발명의 제조예 1의 왕자귀나무 추출물 0.1g을 사과주스 또는 포도주스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 과일주스를 제조하였다.

Claims (5)

  1. 콜라게나아제의 억제하는 활성이 있는 왕자귀나무(Albiggia kalkora PRAIN) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 티로시나아제를 억제하는 활성이 있는 것을 특징으로 하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물.
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 항산화능이 있는 것을 특징으로 하는 피부미백 또는 주름개선용 화장료 조성물.
  5. 콜라게나아제의 억제하는 활성이 있는 왕자귀나무(Albiggia kalkora PRAIN) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부미백 또는 주름개선용 건강기능식품.
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