KR102450020B1

KR102450020B1 - 약물 전달 및 전안부 보호를 위한 안구용 제제

Info

Publication number: KR102450020B1
Application number: KR1020177010289A
Authority: KR
Inventors: 데이비드 피 빙거먼; 폴 쥐 체니; 마틴 비 왁스
Original assignee: 팬옵티카, 인크.
Priority date: 2014-09-17
Filing date: 2015-09-17
Publication date: 2022-09-30
Also published as: CA2958315A1; CN106999476B; AU2021200997A1; HUE053852T2; DK3193867T3; NZ767710A; JP6657193B2; JP7176042B2; EP3193867A4; ES2863601T3; IL251019B; CN113209000A; RU2704810C2; JP6890692B2; IL282504A; KR20220137157A; RU2017112930A; PT3193867T; JP2020079274A; EP3878449A1

Abstract

본 출원은 화합물-I 또는 이의 유리 염기, 및 니코틴산, 니코틴아미드, 및 비타민 K, 및 이들의 조합으로부터 선택된 제2 활성제를 포함하는 안구 신혈관형성 치료용 국소 제제에 관한 것이다. 또한, 본 출원은 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 입자를 포함하는 약학 조성물, 및 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 입자 조성물을 포함하는 현탁 제제에 관한 것이다.

Description

약물 전달 및 전안부 보호를 위한 안구용 제제{OCULAR FORMULATIONS FOR DRUG-DELIVERY AND PROTECTION OF THE ANTERIOR SEGMENT OF THE EYE}

관련 출원

본 출원은 2014년 9월 17일에 출원된 U.S.S.N. 62/051,794호의 우선권 및 권리를 주장하며, 그 내용은 전문이 참고로 포함된다.

적용 분야

본원에 개시된 실시양태는 일반적으로 안구 질환 또는 병태를 치료하기 위한 제1 활성제, 예를 들어, 약학 화합물 또는 이의 염, 및 제2 활성제의 조합물의 국소 투여에 관한 것이다. 개시된 실시양태는 제1 활성제 또는 이의 염 및 제2 활성제를 포함하는 안구용 제제로서, 용액 또는 현탁액인 제제를 포함한다. 용액 또는 현탁액은 가용화제를 추가로 포함할 수 있으며, 피험체의 전안부를 보호하면서 제1 활성제 또는 이의 염을 후안부에 전달하는 데 적합하다.

국소 적용되는 활성제를 이용한 후안부 질환 또는 장애의 치료는 활성제를 표적 부위에 충분히 전달하지 못함으로 인해 효과를 보지 못하였다. 대부분의 국소 약물은 각막을 통해 투과한다. 그러나 각막의 기본 구조가 활성제의 상대적인 투과성에 영향을 주기 때문에 각막은 국소 적용된 모든 활성제를 동일하게 투과시키지 못한다. 실질적으로, 활성제 투과에 가장 큰 장벽은 각막 상피로 이는 세포막이 풍부하여 친유성 제제에 의한 투과가 더 쉽다. 대조적으로, 각막 기질은 대체로 물로 구성되기 때문에 활성제가 친수성일 경우 더 쉽게 통과한다. 내피는 역시 친유성인 단층을 나타낸다. 친유성 또는 양친성인 활성제는 하전 또는 비하전되어 작용할 수 있다는 점에서 각막을 가장 잘 투과한다. 각막과 유사하게, 결막 상피와 결막 상피 안이나 아래 혈관은 동일한 유형의 친유성 또는 이상성(biphasic) 제제에 의해 투과될 수 있다. 그러나 결막과 그의 고유한 혈관구조에서 친유성 막의 특성으로 인해, 대부분의 활성제는 통상적으로 결막을 통과하여 눈 안으로 투과하지 못한다. 결막 및 결막 하 영역 내 혈관 조직으로 투과가 제한된 제제는 전신 순환으로 배출된다.

많은 국소 점안제의 각막 및 결막 장벽으로의 제한된 투과성으로 인한 국소 점안제의 주된 단점은 내부 안구 조직에 유의한 치료 약물 수준을 달성하기 위해서 국소 제제 내 활성제를 고농도로 요구한다는 것일 수 있다. 활성제, 분자 자체 또는 이의 고농도에 따라, 국소 제제는 결막, 각막 및/또는 수정체를 포함한 전안부에 유독하여 안구 표면에 여러 상처, 예를 들어 각막 상피 결함 및 미란을 일으킬 수 있다.

항-EGFR 약물요법, 예를 들어, 항-EGFR 암요법으로 치료 후 발견되는 안구 부작용은 EGFR 신호전달 경로가 인간 각막 상피의 건강을 유지하고 회복하는 데 필수적인 역할을 한다는 것을 밝혔다. 항-EGFR 약물요법으로 치료받은 환자는 항-EGFR 요법을 진행중이거나 심지어 중단 후에도 각막 변화, 예를 들어 상피 변성 및 결함, 궤양, 각막 상피 박화, 미란 및/또는 각막 부종, 각막염뿐만 아니라 천공으로 발전할 수 있다. 각막 상피의 항상성 및 병태 생리학에 있어 EGFR 신호전달의 중요한 역할은 잘 확립되어 있다. EGFR 활성화는 각막 상피의 이동, 증식 및 분화에 필수적이고 충분하기도 한다. 게다가, EGFR은 불멸화 인간 각막 상피 세포를 이용한 시험관 내 실험 과정에서 상처 치유의 1차 매개 인자이다. 따라서, 안구 질환 또는 장애(예를 들어, 후안부 질환 또는 장애)의 치료에 활성제(예를 들어, 독성 또는 항-EGFR 활성을 가진 활성제)를 포함하는 제제의 투여 이외에 EGFR 활성을 유지하는 제제의 투여가 유익할 것이다.

본 출원은 기존의 국소 치료제의 안구 전달에서 당면하게 되는 문제를 회피하는 신규 제제를 제공한다. 본 출원은 후안부 생체 이용률을 증가시키면서 각막 및 전안부의 약물 노출을 감소시키고 각막 및 전안부 조직을 보호하는 복합된 효과를 달성한다. 각막 노출을 낮추고, 각막 조직을 보호하고, 후안부 생체이용률을 증가시킴으로써, 본 발명의 제제는 안구 내성을 향상시키고 활성제의 치료지수를 증가시킨다.

요약

본 출원은 전안부, 예를 들어 각막과 결막으로 구성된 안구 표면에서 제1 활성제에 노출을 낮추고, EGFR 활성 유지를 통해 눈, 예를 들어 전안부를 보호하는 용액 및/또는 현탁액 형태의 약학 제제에 관한 것이다. 본 출원의 약학 제제는 후안부, 예를 들어 중심 맥락막 및/또는 중심 망막에서 제1 활성제의 생체이용률을 증가시키고, 전안부의 건강을 보호하고/하거나 향상시킨다.

본 출원은 제1 활성제, 및 경우에 따라 제2 활성제를 포함하는 용액 또는 현탁액 형태의 제제로서, 겔로 형성된 조성물에 비해 우수한 특성을 보이는 제제를 제공한다. 본 출원은 제1 활성제 및/또는 제2 활성제가 용액 및/또는 현탁액으로서 함께 제제화될 수 있다는 것을 제공한다. 전안부에서 제1 활성제의 수준 증가는 제1 활성제를 포함하는 국소 점안액의 안구 내성을 제한하고 각막 상피 결함 및 미란을 일으킬 수 있다. 제2 활성제의 존재는 제1 활성제에 노출에 의해 야기될 수 있는 손상을 예방하고, 제1 활성제에 노출에 의해 야기될 수 있는 임의의 손상을 치료하고/하거나, 안구 표면, 특히 각막 상피의 전체 건강을 향상시킬 수 있다. 제2 활성제는 제1 활성제와 함께 제제화될 수 있거나, 제1 활성제를 포함하는 제제와 함께 투여되는 별개의 제제로서 제제화될 수 있다.

본 출원의 제제는 전안부, 예를 들어 각막 또는 결막 표면에서 제1 활성제의 노출을 감소시키고, 전안부, 예를 들어 각막 또는 결막 표면 손상으로부터 보호하고/하거나 이를 복구하고, 표적 조직에서 해당 수용체에 결합하는 데 필수적인 제1 활성제의 적절한 농도를 유지하고, 후안부, 예를 들어 맥락막과 망막에 치료 효과를 제공한다.

본 출원은 예를 들어, 당뇨 망막병증(배경 당뇨 망막병증, 증식성 당뇨 망막병증, 및　당뇨 황반 부종 포함)에서 안구 혈관형성, 신혈관형성, 및/또는 혈관 누수;　노인 황반변성(AMD: age-related macular degeneration)(신생혈관성(습성/삼출성) AMD, 건성 AMD, 및 지도모양위축 포함);　임의의 기전(예를 들어, 고도근시, 외상, 겸상 적혈구증;　눈 히스토플라스마증,　혈관 무늬 망막병증, 외상성 맥락막 파열,　시신경 드루젠, 또는 일부 망막 이영양증)으로 인한 병리적 맥락막 신혈관형성(CNV: choroidal neovascularization) 및 혈관 누수; 임의의 기전(예를 들어, 겸상 적혈구 망막증, 일스병,　안허혈 증후군,　경동맥 해면 정맥동루, 가족성 삼출 유리체 망막증,　과다점성 증후군,　특발성 폐쇄 세동맥염,　버드샷 망막맥락막증, 망막　혈관염,　유육종증, 또는 톡소플라스마증)으로 인한 병리적 망막 신혈관형성 및 혈관 누수;　포도막염; 망막 정맥 폐색(중심 또는 분지); 안외상; 수술 유발 부종; 수술 유발 신혈관형성; 낭포 황반부종; 안허혈; 미숙아 망막병증; 코츠병; 겸상 적혈구 망막증;　및/또는 신생혈관 녹내장으로 인해 발생하거나 악화된 병리 상태를 치료하는 데 유용한 제제 및 방법에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 병리 상태는 AMD이다. 한 실시양태에서, 병리 상태는 안구 혈관형성 및/또는 신혈관형성으로 인해 발생하거나 악화된다.

또한, 본 출원은 전신질환(예를 들어, 암, 당뇨병 등) 및 안구 질환을 포함한 질환, 또는 국소 또는 전신 투여된 약물(예를 들어, 항-EGFR 제제 또는 EGFR 억제제)로 인한 부작용과 관련된 각막 상피 파괴를 예방 및/또는 치료하는 데 유용한 제제 및 방법에 관한 것이다. 본 출원의 제제는 적어도 안구 혈관형성 장애의 치료에 사용하기 위한 적어도 하나의 혈관형성 억제제(antiangiogenic agent), 항염증제, 또는 혈관 투과성 억제제 및 각막 상피 파괴의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 EGFR 조절제(예를 들어, EGFR의 활성을 유지하거나 EGFR을 활성화하는 제제)를 갖는다.

본 출원의 실시양태에 따르면, 제1 활성제는 항-혈관형성 키나아제 억제제이고 제2 활성제는 키나아제 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 제2 활성제에 의해 조절되는(예를 들어, 유지되거나 활성화되는 활성) 키나아제와는 상이한 키나아제를 억제한다. 유익한 치료 결과를 가져 오는 데 사용될 수 있는 일부 키나아제 억제제의 예는 수용체 티로신 키나아제의 억제제, 예를 들어 제한 없이, VEGFR, FGFR, Tie-2, 및 에프린 키나아제 수용체를 포함한다. 유익한 치료 결과를 가져 오는 데 사용될 수 있는 키나아제 조절제의 예는 ErbB 수용체 티로신 키나아제의 활성화제, 예를 들어, 제한 없이, EGFR1/ErbB1/HER1, ErbB2/HER2/Neu, ErbB3/HER3, 및 ErbB4/HER을 포함한다. 한 실시양태에서, ErbB 수용체 티로신 키나아제는 EGFR1이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 VEGFR 억제제이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산 또는 니코틴아미드이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K이다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 제2 활성제는 본 출원의 고농도의 제1 활성제(예를 들어, 전안부에 제1 활성제의 투여 후 일시적인 고농도의 제1 활성제)에 의해 유발되는 전안부에서 EGFR의 억제를 감소 또는 완화시킨다.

본 출원의 실시양태는 하기 화학식 I의 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염; EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제), 예를 들어 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합인 제2 활성제; 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 안구 신혈관형성 치료용 안과용 제제로서, 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 제제가 용액 또는 현탁액을 형성하도록 약 0.02% 내지 약 1.2% w/v로 존재하는 것인 안구용 제제를 제공한다:

<화학식 I>

,

상기 식에서,

X¹은 O 또는 S이고;

R¹은 H, C₁-C₁₀알킬, C₂-C₁₀알케닐, C₂-C₁₀알키닐, C(O)(C₁-C₁₀알킬), (CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴), (CH₂)_t(4-10원 헤테로시클릭), C(O)(CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴), 또는 C(O)(CH₂)_t(5-10원 헤테로시클릭)이고, 여기서

t는 0 내지 5의 정수이고;

알킬기는 O, S 및 N(R⁶)으로부터 선택된 1 또는 2개의 이종 모이어티를 경우에 따라 포함하고, 단 두 개의 O 원자, 두 개의 S 원자, 또는 한 개의 O와 한 개의 S 원자는 서로 직접 부착되지 않고;

아릴 및 헤테로시클릭 기는 경우에 따라 C₆-C₁₀아릴 기, C₅-C₈포화 시클릭 기, 또는 5-10원 헤테로시클릭 기와 융합되고;

상기 헤테로시클릭 모이어티에서 1 또는 2개의 탄소 원자는 경우에 따라 옥소(=O) 모이어티 또는 산소 음이온으로 치환되고;

(CH₂)_t 모이어티는 t가 2 내지 5의 정수일 때 경우에 따라 탄소-탄소 이중 또는 삼중 결합을 포함하고;

H를 제외한 상기 R¹기는 경우에 따라 1 내지 3개의 R⁴기로 치환되고;

R²는 H이고;

R³은 (CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴)이고, 여기서:

t는 0 내지 5의 정수이고;

아릴 기는 경우에 따라 C₆-C₁₀아릴 기, C₅-C₈포화 시클릭 기, 또는 5-10원 헤테로시클릭 기와 융합되고;

상기 R³기는 경우에 따라 1 내지 5개의 R⁴기로 치환되고;

각 R⁴는 C₁-C₁₀알킬, C₂-C₁₀알케닐, C₂-C₁₀알키닐, 할로, 시아노, 니트로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 아지도, OR⁵, C(O)R⁵, C(O)OR⁵, NR⁶C(O)R⁵, NR⁶C(O)OR⁵,OC(O)R⁵, NR⁶SO₂R⁵, SO₂NR⁵R⁶, C(O)NR⁵R⁶, NR⁵R⁶, S(O)_jR⁷(여기서 j는 0 내지 2의 정수), SO₃H, NR⁵(CR⁶R⁷)_tOR⁶, (CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴), SO₂(CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴), S(CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴), O(CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴), (CH₂)_t(5-10원 헤테로시클릭), 및 (CR⁶R⁷)_mOR⁶으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서:

m은 1 내지 5의 정수이고;

t는 0 내지 5의 정수이고;

상기 R⁴기의 알킬, 아릴 및 헤테로시클릭 모이어티는 할로, 시아노, 니트로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 아지도, NR⁶SO₂R⁵, SO₂NR⁵R⁶, C(O)R⁵, C(O)OR⁵,OC(O)R⁵, NR⁶C(O)R⁵, C(O)NR⁵R⁶, NR⁵R⁶, (CR⁶R⁷)_mOR⁶(여기서 m은 1 내지 5의 정수), OR⁵, 및 R⁵의 정의에 열거된 치환기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 경우에 따라 치환되고;

R⁵, R⁶,및 R⁷은 각각 독립적으로 H 또는 C₁-C₆알킬이다.

한 실시양태에서, R³은 (CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴)이고, 여기서 t는 1 내지 3의 정수이고 R³은 경우에 따라 1 내지 4개의 R⁴기로 치환된다.

또 다른 실시양태에서, R³은 할로 및 C₁-C₄알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 경우에 따라 치환된 벤질이다. 또 다른 실시양태에서, R³은 메틸, 플루오로, 클로로 및 브로모로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 벤질이다.

한 실시양태에서, R¹은 C₁-C₄알킬, 히드록시 및 히드록시메틸로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 경우에 따라 치환된 (CH₂)_t(5-10원 헤테로시클릭)(여기서, t는 0 내지 5의 정수)이다.

본 출원은 모르폴리노, 피롤리디닐, 이미다졸릴, 피페라지닐, 피페리디닐, 및 2,5-디아자-비시클로[2.2.1]헵트-2-일로부터 선택된 화학식 I의 R¹ 기의 헤테로시클릭 모이어티를 제공하며, R¹기의 t 변수는 2 내지 5 범위이고, R¹기는 경우에 따라 하나 이상의 히드록시 기로 치환된다.

예를 들어, 본 출원의 화학식 I의 R¹기의 헤테로시클릭 모이어티는 피롤리딘이다.

본 출원의 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는

이다.

본 출원의 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ의 염산염, 즉 화합물-I이다.

한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K이다.

본 출원의 실시양태는 약 0.005% 내지 약 5.0% w/v의 화학식 I 또는 Ⅱ의 제1 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I을 포함하는 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 제제 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.005% - 약 0.01%, 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05% - 약 0.1%, 약 0.1% - 약 0.2%, 약 0.2% - 약 0.3%, 약 0.3% - 약 0.4%, 약 0.4% - 약 0.5%, 약 0.5% - 약 0.6%, 약 0.6% - 약 0.7%, 약 0.7% - 약 0.8%, 약 0.8% - 약 0.9%, 약 0.9% - 약 1.0%, 약 1.1 - 약 2.0%, 약 2.1 - 약 3.0%, 약 3.1 - 약 4.0%, 또는 약 4.1- 약 5.0% w/v 이다. 일부 실시양태에서, 제제 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.1% - 약 1.2%, 약 0.2% - 약 1.2%, 약 0.3% - 약 1.2%, 약 0.4% - 약 1.2%, 0.1% - 약 1.1%, 약 0.2% - 약 1.1%, 약 0.3% - 약 1.1%, 약 0.4% - 약 1.1%, 0.1% - 약 1.0%, 약 0.2% - 약 1.0%, 약 0.3% - 약 1.0%, 약 0.4% - 약 1.0%, 0.1% - 약 0.8%, 약 0.2% - 약 0.8%, 약 0.3% - 약 0.8%, 약 0.4% - 약 0.8%, 0.1% - 약 0.6%, 약 0.2% - 약 0.6%, 약 0.3% - 약 0.6%, 약 0.4% - 약 0.6%, 0.1% - 약 0.5%, 약 0.2% - 약 0.5%, 약 0.3% - 약 0.5%, 약 0.4% - 약 0.5%, 0.1% - 약 0.4%, 약 0.2% - 약 0.4%, 약 0.3% - 약 0.4% w/v 이다. 일부 실시양태에서 제제는 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)를 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 출원은 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제(예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합)의 용액을 제공하며, 이는 하나 이상의 가용화제를 포함한다.

일부 실시양태에서, 제제는 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 화학식 I 또는 Ⅱ, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I, 및 제2 활성제 및 가용화제를 포함한다.

일부 실시양태에서, 제제 내 가용화제는 시클로덱스트린, 예를 들어, 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린, 메틸-β-시클로덱스트린, 무작위 메틸화-β-시클로덱스트린, 에틸화-β-시클로덱스트린, 트리아세틸-β-시클로덱스트린, 과아세틸화-β-시클로덱스트린, 카복시메틸-β-시클로덱스트린, 히드록시에틸-β-시클로덱스트린, 2-히드록시-3-(트리메틸아미노)프로필-β-시클로덱스트린, 글루코실-β-시클로덱스트린, 말토실-β-시클로덱스트린, 설포부틸 에테르-β-시클로덱스트린, 분지형-β-시클로덱스트린, 히드록시프로필-γ-시클로덱스트린, 무작위 메틸화-γ-시클로덱스트린, 트리메틸-γ-시클로덱스트린, 또는 이들의 조합일 수 있다.

한 실시양태에서, 제제 내 가용화제는 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린 또는 β-시클로덱스트린 설포부틸 에테르이다.

한 실시양태에서, 제제는 염화벤잘코늄(BAK), 염화나트륨, 및 pH 조정제 중 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 제제는 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 완충액, 예를 들어, 트로메타민을 포함한다. 한 실시양태에서, 제제는 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 약 0.3% - 약 1.0% w/v 트로메타민을 포함하고, 경우에 따라 약 0.005% w/v 염화벤잘코늄(BAK)을 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 예를 들어, 제2 활성제는 니코틴산(또는 니아신/비타민 B3), 니코틴아미드, 및 비타민 K, 또는 이들의 조합을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 본원에서 정의되는 "비타민 K"는 천연 또는 합성의 비타민 K 군의 하나 이상의 일원 및 이의 전구 약물을 포함한다. 비타민 K 군은 비타민 K₁(필로퀴논, 피토메나디온 또는 피토나디온으로도 알려짐), 비타민 K₂, 및 임의의 비타민 K₂ 상동체로 구성된다. 비타민 K₂ 상동체는 메노퀴논으로 불리며 그들의 측쇄 내 이소프레노이드 잔기 개수로 특성화된다. 합성 비타민 K는 비타민 K₃(즉, 메나디온), 비타민 K₄, 비타민 K₅를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산 및/또는 니코틴아미드이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴아미드이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K₁이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K₂이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K₂ 상동체이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 합성 비타민 K(예를 들어, 비타민 K₃, 비타민 K₄, 또는 비타민 K₅)이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K₃(즉, 메나디온)이다.

일부 실시양태에서, 제제 내 제2 활성제의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.00001% - 약 5.0% w/v이다. 일부 실시양태에서, 제제 내 제2 활성제의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.00001% - 약 1.0%, 약 0.00001% - 약 0.1%, 약 0.00001% - 약 0.01%, 약 0.00001% - 약 0.001%, 약 0.00001% - 약 0.0002%, 또는 약 0.00001% - 약 0.0001% w/v이다. 일부 실시양태에서, 제제 내 제2 활성제의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.00001% - 약 0.0001%, 0.000012% - 약 0.0001%, 0.000014% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.0001%, 0.000018% - 약 0.0001%, 0.00002% - 약 0.0001%, 0.00003% - 약 0.0001%, 0.00004% - 약 0.0001%, 0.00005% - 약 0.0001%, 0.00006% - 약 0.0001%, 0.00007% - 약 0.0001%, 0.00008% - 약 0.0001%, 0.00009% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.00009%, 0.000018% - 약 0.00009%, 0.00002% - 약 0.00009%, 0.00003% - 약 0.00009%, 0.00004% - 약 0.00009%, 0.00005% - 약 0.00009%, 0.00006% - 약 0.00009%, 0.00007% - 약 0.00009%, 또는 0.00008% - 약 0.00009% w/v이다. 일부 실시양태에서, 제제는 약 0.00001%, 0.00002%, 0.00003%, 0.00004%, 0.00005%, 0.00006%, 0.00007%, 0.00008%, 0.000081%, 0.000082%, 0.000083%, 0.000084%, 0.000085%, 0.000086%, 0.000087%, 0.000088%, 또는 0.000089% w/v의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함한다.

일부 실시양태에서, 제제 내 제2 활성제의 농도는 약 0.5 μM, 약 0.6 μM, 약 0.7 μM, 약 0.8 μM, 약 0.9 μM, 약 1 μM, 약 2 μM, 약 3 μM, 약 4 μM, 약 5 μM, 약 6 μM, 약 7 μM, 약 8 μM, 또는 약 9 μM 이다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제의 농도는 약 1 μM 이다.

본 출원은 약 40℃ 이하에서 pH 값이 약 4.5 내지 약 7.5인 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 제제의 pH 값은 약 pH 5.0 내지 약 7.0이다. 한 실시양태에서, 제제의 pH 값은 약 40℃ 이하에서 약 6.0이다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 후안부에 접근하기 위하고/하거나 본원에서 기재한 후안부의 질환 또는 혈관병증성 또는 염증성 질환, 예를 들어, 당뇨 망막병증(배경 당뇨 망막병증, 증식성 당뇨 망막병증, 및　당뇨 황반 부종 포함);　노인 황반변성(AMD)(신생혈관성(습성/삼출성) AMD, 건성 AMD, 및 지도모양위축 포함);　임의의 기전(예를 들어, 고도근시, 외상, 겸상 적혈구증;　눈 히스토플라스마증,　혈관 무늬 망막병증, 외상성 맥락막 파열,　시신경 드루젠, 및 일부 망막 이영양증)으로 인한 병리적 맥락막 신혈관형성(CNV); 임의의 기전(예를 들어, 겸상 적혈구 망막증, 일스병,　안허혈 증후군,　경동맥 해면 정맥동루, 가족성 삼출 유리체 망막증,　과다점성 증후군,　특발성 폐쇄 세동맥염,　버드샷 망막맥락막증, 망막　혈관염,　유육종증, 및 톡소플라스마증)으로 인한 병리적 망막 신혈관형성;　포도막염; 망막 정맥 폐색(중심 또는 분지); 안외상; 수술 유발 부종; 수술 유발 신혈관형성; 낭포 황반부종; 안허혈; 미숙아 망막병증; 코츠병; 겸상 적혈구 망막증;　및/또는 신생혈관 녹내장을 치료 및/또는 개선하기 위한 의약 제조를 위한 제1 활성제(예를 들어, 화학식 I 또는 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)), 및 제2 활성제(예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합)을 포함하는 제제의 용도를 제공한다. 한 실시양태에서, 안질환은 AMD이다. 한 실시양태에서, 안질환은 안구 혈관형성 및/또는 신혈관형성으로 인해 발생하거나 악화된다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 후안부에 접근하기 위하고/하거나 후안부의 질환 또는 혈관병증성 또는 염증성 질환을 치료 및/또는 개선하기에 적합한 의약 제조에 사용하기 위한 제제에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 제제는 제1 활성제 및 제2 활성제를 포함한다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 VEGFR 억제제이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화합물-I이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 및 비타민 K, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 제제는 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 안구 질환 또는 장애(예를 들어, 후안부의 혈관병증성 또는 염증성 질환)의 증상을 치료 및/또는 개선하기 위한 의약 제조에 사용하기 위한 제제에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 제제는 제1 활성제 및 제2 활성제를 포함한다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 VEGFR 억제제이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화합물-I이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 및 비타민 K, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 제제는 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 후안부에 접근하고/하거나 후안부 질환을 치료 또는 개선하는 방법에 사용하기 위한 제제에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 제제는 제1 활성제 및 제2 활성제를 포함한다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 VEGFR 억제제이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화합물-I이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 및 비타민 K, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 제제는 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 안구 질환 또는 장애(예를 들어, 후안부의 혈관병증성 또는 염증성 질환)의 증상을 치료 및/또는 개선하는 방법에 사용하기 위한 제제에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 제제는 제1 활성제 및 제2 활성제를 포함한다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 VEGFR 억제제이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화합물-I이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 및 비타민 K, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 제제는 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 후안부에 접근하고/하거나 후안부 질환을 치료 및/또는 개선하기 위한 병용 요법으로서, 제1 활성제 및 제2 활성제를 투여하는 단계를 포함하는 요법에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 VEGFR 억제제이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화합물-I이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 및 비타민 K, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 제2 활성제와 동시에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 제2 활성제의 투여 전에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 제2 활성제의 투여 후에 투여된다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 안구 질환 또는 장애(예를 들어, 후안부 혈관병증성 또는 염증성 질환)의 증상을 치료 및/또는 개선하기 위한 병용요법으로서, 제1 활성제 및 제2 활성제를 투여하는 단계를 포함하는 요법에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 VEGFR 억제제이다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 화합물-I이다. 한 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다. 또 다른 실시양태에서, 제2 활성제는 니코틴산, 니코틴아미드, 및 비타민 K, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 한 실시양태에서, 제1 활성제는 제2 활성제와 동시에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 제2 활성제의 투여 전에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는 제2 활성제의 투여 후에 투여된다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제의 노출 시간은 1 내지 90일이거나 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월)이다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제의 노출 시간은 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월)이다. 일부 실시양태에서, 투여 용법(dosage regimen)은 피험체에게 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제를 포함하는 제제를 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월)동안 국소 안구 투여하는 여러 과정을 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월)동안 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회 또는 1일 4회의 제제 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 최대 90일 동안 격일(즉, 제1, 3, 5, 7일 등)로 1회, 2회, 3회 또는 4회의 제제 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 제2일 내지 제90일에 1회 또는 2회 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 2회, 3회, 또는 4회, 이어서 2-90일 동안 1일 1회 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 2회, 3회, 또는 4회, 이어서 최대 90일 동안 격일(즉, 제1, 3, 5, 7일 등)로 1회, 2회, 3회 또는 4회 투여를 수반한다. 예를 들어, 한 투여 용법은 연속 1, 2, 3, 4, 또는 5일 동안 1일 1회 또는 2회 투여를 수반한다. 1일 2회 또는 3회 투여 용법일 경우, 피험체는 국소 안구 용량의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제 제제를 제1일 및 제4일에 대략 4, 6, 또는 8시간 간격으로 받는다. 또 다른 실시양태에서, 피험체는 국소 안구 용량의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제 제제를 연속 4일 동안 대략 4, 6, 또는 8시간 간격으로 받는다. 일부 실시양태에서, 피험체는 하루에 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제 제제를 연속 5일 동안 받는다. 또 다른 실시양태에서, 피험체는 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제 제제를 연속 5-90일 동안 받는다. 일부 실시양태에서, 피험체는 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및 제2 활성제 제제를 적어도 연속 25일 동안 받는다. 한 실시양태에서, 피험체는 1회 또는 2회의 국소 안구 용량을 적어도 연속 90일 이상 받는다.

예를 들어, 약 1 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 10 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안의 투여 용법은 상기 문단에 기재된 연일 또는 격일을 수반하는 임의의 용법일 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 QD 또는 BID로 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 저용량(예를 들어, 1 mg/mL, 2 mg/mL, 3 mg/mL, 4 mg/mL, 또는 5 mg/mL)으로 투여될 때 QD, BID, TID, 또는 QID로 투여되고, 고용량(예를 들어, 6 mg/mL, 7 mg/mL, 8 mg/mL, 9 mg/mL, 또는 10 mg/mL)일 때 QD 또는 BID로 투여된다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)와 제2 활성제의 제제는 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 예를 들어, 약 0.2% - 약 1.0 %(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 약 0.1% - 1.2%(w/v)의 화합물-I 및 제2 활성제를 포함하는 본 출원의 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 1일 1회(QD), 1일 2회(BID), 1일 3회(TID), 또는 1일 4회(QID) 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 화합물-I은 착화제, 예를 들어, 시클로덱스트린(예를 들어, 히드록시프로필-β-시클로덱스트린(HP-β-CD, 클렙토스(KLEPTOSE)® HPB (%))와 약 1:8의 비율로 착물로 형성되며, 이때 약 2% - 13 %(w/v) 시클로덱스트린(예를 들어, 클렙토스® HPB(%))이 제제에 첨가된다. 제제는 약 0.1% - 약 0.2% 완충액, 예를 들어, 10 mM 포스페이트 완충액을 추가로 포함할 수 있다. 제제의 요망하는 삼투압 농도는 약 200 - 약 300 mOsm일 수 있으며, 이는 염, 예를 들어 염화나트륨으로 삼투압 농도를 달성하기에 충분한 양을 첨가하여 달성된다. 제제의 pH는 약 6.0일 수 있다.

본 출원은 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I) 및/또는 제2 활성제), 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 입자를 포함하는 약학 조성물로서, 입자가 100 nm 내지 100 μm의 평균 직경을 갖는 것인 약학 조성물에 관한 것이다.

본 출원은 약학 조성물을 포함하는 현탁 제제로서, 상기 약학 조성물이 상기에 기재된 바와 같이 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I) 및/또는 제2 활성제), 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 입자를 포함하는 것인 현탁 제제에 관한 것이다.

[도 1]은 변화하는 농도의 본 출원의 제1 활성제 또는 대조군(AG1478, EGFR 키나아제 억제제)로 처리한 불멸화 각막 상피 세포(hTCEpi 세포)에서 EGFR 인산화 및 EGF의 일련의 면역블롯이다(위 패널: 전체 EGFR의 면역블롯팅, 중간 패널: EGFR의 티로신 1068의 인산화를 나타내는 면역블롯팅, 아래 패널: EGFR의 티로신 1045의 인산화를 나타내는 면역블롯팅).
[도 2]는 변화하는 농도의 본 출원의 제1 활성제를 단독 처리하거나 비타민 K₃(50 μM), 니코틴산(10 μM), 또는 니코틴아미드(10 μM)로 처리 후 처리한 불멸화 각막 상피 세포(hTCEpi 세포)에서 EGFR 인산화의 일련의 면역블롯이다(첫줄: 전체 EGFR의 면역블롯팅, 둘째 줄: EGFR의 티로신 1068의 인산화를 나타내는 면역블롯팅, 셋째 줄: EGFR의 티로신 1045의 인산화를 나타내는 면역블롯팅).
[도 3a]는 명시된 농도의 본 출원의 제1 활성제 또는 대조군(AG1478, EGFR 키나아제 억제제)로 30분간 처리 후, 명시된 농도의 EGF 또는 VEGF와 함께 제1 활성제 또는 대조군으로 16시간 처리한 불멸화 각막 상피 세포(hTCEpi 세포)의 이동/증식을 나타내는 일련의 현미경 사진이다. [도 3b]는 [도 3a]에서 hTCEpi 세포의 이동/증식을 정량화하는 일련의 막대그래프이다.
[도 4a]는 명시된 농도의 비타민 K₃, 메나디온으로 4시간 처리한 후, 변화하는 농도의 본 출원의 제1 활성제를 추가하고, 이어서 EGF와 함께 비타민 K₃, 제1 활성제로 처리한 불멸화 각막 상피 세포(hTCEpi 세포)의 이동/증식을 나타내는 일련의 현미경 사진이다. [도 4b]는 [도 4a]에서 hTCEpi 세포의 이동/증식을 정량화하는 일련의 막대그래프이다.
[도 5a]는 비히클, 명시된 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 AG1478로 처리한 각막의 초기 상처(0hr) 및 상처 후 시간에서 상피 상처의 일련의 이미지이다. [도 5b 및 5c]는 비히클, 명시된 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 AG1478로 처리한 각막의 상처 후 16시간(도 5b) 또는 24시간(도 5c)에 상처 치유를 정량화하는 일련의 막대그래프이다. [도 5d]는 비히클, 명시된 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 AG1478로 처리한 각막의 시간 경과에 따른 상처 치유를 나타내는 그래프이다.
[도 6a]는 비히클, 메나디온, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물과 조합된 메나디온으로 처리한 각막의 초기 상처(0hr) 및 상처 후 시간에서 상피 상처의 일련의 이미지이다. [도 6b]는 비히클, 메나디온, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물과 조합된 메나디온으로 처리한 각막 상처 후 16시간 또는 24시간에 상처 치유를 정량화하는 일련의 막대그래프이다. [도 6c]는 비히클, 메나디온, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물과 조합된 메나디온으로 처리한 각막의 시간 경과에 따른 상처 치유를 나타내는 그래프이다.
[도 7a]는 명시된 농도의 메나디온으로 4시간 처리, 이어서 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물(1 nM, 10 nM, 100 nM, 또는 1 μM)로 30분간 처리 후, 10 ng/ml VEGF로 처리한 인간 망막 상피 세포에서 전체 VEGFR2, 인산화 VEGFR2, 및 α-튜불린(로딩 대조군)을 나타내는 일련의 면역블롯이다. [도 7b]는 명시된 농도의 메나디온으로 4시간 처리, 이어서 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물(0.1 nM, 1 nM, 10 nM, 또는 100 nM)로 30분간 처리 후, 10 ng/ml VEGF로 하룻밤 처리한 후 인간 망막 상피 세포의 성장을 정량화하는 그래프이다.
[도 8]은 명시된 농도의 메나디온으로 4시간 처리 후 명시된 시간 동안 8.0 nM EGF와 인큐베이션한 hTCEpi 세포에서 전체 EGFR2, 인산화 EGFR, 및 α-튜불린(로딩 대조군)을 나타내는 일련의 면역블롯이다.
[도 9a]는 높은 롤러 속도에서 장시간 작은 분쇄 매질을 이용하여 제조한 5%의 화학식 Ⅱ의 화합물과 1% 플루로닉(Pluronic) F-127을 포함하는 입자의 크기 분포를 나타낸다. [도 9b]는 낮은 롤러 속도에서 단시간 큰 분쇄 매질을 이용하여 제조한 5%의 화학식 Ⅱ의 화합물 및 1% 플루로닉 F-127을 포함하는 입자의 크기 분포를 나타낸다. [도 9c]는 분쇄 없이 제조한 3%의 화학식 I의 화합물, 0.6% 트리스(Tris) HCl, 및 2% 글리세롤을 포함하는 입자의 크기 분포를 나타낸다. [도 9d]는 0.4%의 화학식 Ⅱ의 화합물, 10 μM 메나디온, 0.08% 플루로닉 F-127, 및 2.5% 글리세롤을 포함하는 입자의 40℃에서 7일간 저장 후 크기 분포를 나타낸다.
[도 10]는 5%의 메나디온 및 1% HPMC를 포함하는 입자의 크기 분포를 나타낸다.
[도 11]은 낮은 롤러 속도에서 단기간 큰 분쇄 매질을 이용하여 제조한 5%의 화학식 Ⅱ의 화합물과 1% 플루로닉 F-127을 포함하는 입자의 크기 분포를 나타낸다.

본원에 기재된 재료, 화합물, 조성물, 제품, 및 방법은 개시된 주제의 특정 측면에 대한 하기 구체적인 설명 및 그 안에 포함된 실시예를 참고로 하여 더 쉽게 이해될 수 있다. 본 재료, 화합물, 조성물, 제품, 장치, 및 방법을 개시하고 기재하기 전에, 하기 기재된 측면은 달라질 수 있기 때문에 특정 방법 또는 특정 시약에 제한되지 않는 것을 이해해야 한다. 또한, 본원에 사용된 용어는 단지 특정 측면을 기재하기 위한 것이며 제한하고자 하는 것이 아님을 이해해야 한다.

또한, 본 명세서 전반에 여러 간행물이 참고로 언급된다. 개시된 내용이 관련된 기술 상황을 더 충분하게 설명하기 위해서 이들 출판물의 개시내용은 본 출원에 참고로 포함된다. 또한, 본원에 개시된 참고문헌은 그들에 포함되고 참고가 요구되는 문장에 논의된 자료에 대해 본원에서 개별적으로 구체적으로 참고로 포함된다.

본 출원은 내피세포 증식, 상승된 혈관 투과성, 염증, 혈관형성, 또는 신혈관형성에 의해 유발된 안구 장애의 치료에 사용하기 위한 제1 활성제 및/또는 제2 활성제, 및 제1 활성제, 전신질환 및/또는 안구 질환에 의해 전안부에 유발된 손상의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 제2 활성제를 포함하는 조성물 또는 제제를 제공한다.

또한, 본 출원은 제1 활성제, 예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 및 제2 활성제, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 비타민 K, 또는 이들의 조합의 병용에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 제2 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 동시에 투여된다. 별법으로, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 전에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 후에 투여된다.

본 출원의 제제는 각막 질환을 예방 또는 억제하면서 안구 장애와 관련된 신혈관형성 및 혈관 누수를 예방 또는 억제하는 데 유용하다. 일부 경우에, 본 출원의 제제는 신혈관형성의 퇴행을 일으킨다. 간략하게, 본 출원의 문맥에서, 제1 활성제는 혈관 성장의 억제, 혈관 투과성의 감소, 및/또는 염증의 감소에 작용하는 합성 또는 천연의 임의의 분자로 이해되어야 한다.

또한, 본 출원의 제제는 전신질환(예를 들어, 암, 당뇨병 등), 안구 질환, 또는 국소 또는 전신 투여 약물(예를 들어, 항-EGFR 제제, 또는 항-EGFR 활성을 갖는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물)로 인한 부작용에 의해 유발된 각막 상피 파괴를 예방 및/또는 치료하는 데 유용하다. 간략하게, 본 출원의 문맥에서, 제2 활성제는 각막 부종, 궤양 또는 임의의 기타 각막 이상으로부터 보호하고/하거나 이를 복구하는 작용을 하는 합성 또는 천연의 임의의 분자로 이해되어야 한다. 특히, 본 출원은 제1 활성제 및 제2 활성제 각각을 치료 유효량으로 포함하는 제제를 제공한다.

일반적인 정의

본 명세서와 뒤따르는 청구항에서, 하기 의미를 갖는 것으로 정의될 많은 용어를 참고한다. 본원에서 모든 퍼센트, 비 및 비율은 달리 명시되지 않는다면 중량에 따른다. 모든 온도는 달리 명시되지 않는다면 섭씨온도(℃)이다.

"약학적으로 허용 가능한"은 생물학으로나 그 외 비바람직하지 않은 물질을 의미한다. 즉, 물질은 임상적으로 허용되지 않는 생물학적 효과를 일으키거나 그가 포함된 약학 조성물 또는 제제의 임의의 기타 구성요소와 해로운 방식으로 상호작용하지 않으면서 적절한 활성 화합물과 함께 개체에 투여될 수 있다.

구성요소의 중량 퍼센트는, 반대로 구체적으로 언급되지 않는다면, 구성요소가 포함된 제제 또는 조성물의 전체 중량을 기준으로 한다.

본원에서 사용되는 "유효량"은 요망하는 결과 또는 치료 결과를 달성하는 데 필요한 투여량 및 기간에 효과적인, 하나 이상의 화합물의 양을 의미한다. 유효량은 당 업계에 공지된 인자, 예를 들어 치료받는 인간 또는 동물의 질환 상태, 나이, 성별, 및 체중에 따라 달라질 수 있다. 구체적인 투여 용법(dosage regimen)이 본원에 실시예에 기재될 수 있지만, 당 업자는 투여 용법이 최적의 치료 반응을 제공하기 위해 변경될 수 있다는 것을 이해할 것이다. 예를 들어, 몇 번의 분할된 용량으로 매일 투여될 수 있거나 위급한 치료 상황을 나타낼 때 용량은 비례적으로 감소될 수 있다. 게다가, 본 개시의 제제는 치료량을 달성하는 데 필요한 만큼 빈번하게 투여될 수 있다.

인간에서 유효량(effective amount 또는 effective dose)은 동물(예를 들어, 실험 동물)의 유효량으로부터 결정될 수 있다. 인간에서 유효량은 하기 표에 나타낸 전환율을 기초로 하여 계산될 수 있다.

본원에서 사용되는 "부형제"는 치료적 또는 생물학적 활성 화합물인 아닌 개시된 하나 이상의 억제제에 포함되거나 그와 병용될 수 있는 임의의 기타 화합물을 포함한다. 이 같이, 부형제는 약학적으로 또는 생물학적으로 허용 가능하거나 적절해야 한다(예를 들어, 부형제는 일반적으로 피험체에 비독성이어야 한다). "부형제"는 이러한 단일 화합물을 포함하고, 또한 다수의 부형제를 포함하고자 한다. 본 출원을 위해, 용어 "부형제" 및 "담체"는 본 출원의 설명의 전반에 호환적으로 사용되고 상기 용어는 본원에서 "안전하고 효과적인 약학 조성물의 제제화를 실시하는 데 사용되는 성분"으로 정의된다.

본원에서 사용되는 "피험체"는 개체를 의미한다. 따라서, "피험체"는 애완동물(예를 들어, 고양이, 개 등), 가축(예를 들어, 소, 말, 돼지, 양, 염소 등), 실험동물(예를 들어, 생쥐(mouse), 토끼, 쥐(rat), 기니피그 등), 및 조류를 포함할 수 있다. 또한, "피험체"는 영장류 또는 인간을 포함할 수 있다.

"감소시킨다", 또는 용어의 기타 형태, 예를 들어 "감소시키는" 또는 "감소"는 현상 또는 특징(예를 들어, 혈관 누수, 또는 조직 종창(swelling))의 저하를 의미한다. 이는 전형적으로 어떤 기준 또는 예상 값에 관련된 것이며, 다시 말해서 상대적이지만, 기준 또는 상대 값이 항상 언급될 필요는 없는 것으로 이해된다.

용어 "치료하다", 또는 용어의 기타 형태 "치료되는" 또는 "치료"는 본원에서 본 출원의 화합물 또는 제제의 투여가 숙주에서 질환 또는 장애를 완화하고/하거나 장애와 관련된 특징 또는 현상(예를 들어, 혈관 누수 또는 각막 궤양)을 감소, 억제 또는 제거한다는 것을 의미하는 데 사용된다.

본 출원의 방법이 장애의 예방에 관한 한, 용어 "예방하다"는 질환 상태가 완전히 저해될 것을 요구하는 것은 아니라고 이해된다. 오히려, 본원에서 사용되는 용어 예방은 숙련 기술자가 본 출원의 화합물의 투여가 질환 개시 전에 발생할 수 있도록 장애에 걸리기 쉬운 집단을 확인하는 능력을 언급한다. 용어는 질환 상태가 완전히 방지된다는 것을 의미하지는 않는다.

용어 "개선하는" 또는 용어의 기타 형태 "개선하다"는 본원에서 본 출원의 치료제의 투여가 숙주에서 질환 또는 장애의 한 가지 이상의 증상을 완화하고/하거나 치료제의 투여 전 및/또는 후에 질환 또는 장애와 관련된 특정 증상을 감소, 억제 또는 제거하는 것을 의미하는 데 사용된다.

개시된 제1 활성제 화합물은 수용체 티로신 키나아제를 억제함으로써 혈관 누수 또는 병리적 신혈관형성에 영향을 준다. 개시된 제2 활성제 화합물은 수용체 티로신 키나아제를 조절(예를 들어 활성화)함으로써 각막 상피 파괴에 영향을 준다.

본 명세서의 설명 및 청구항의 전반에 걸쳐, 용어 "포함하다", 및 용어의 기타 형태, 예를 들어 "포함하는"은 예를 들어 기타 부가물, 또는 구성요소를 포함하지만 이에 제한되는 것은 아님을 의미하며 그들을 배제하고자 하는 것이 아니다.

설명 및 첨부된 청구항에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태 "하나"("a," "an," 및 "the")는 문맥에서 달리 명백하게 명시하지 않는다면 복수 지시 대상을 포함한다.

"경우에 따른" 또는 "경우에 따라"는 그 뒤에 기재되는 현상 또는 상황이 발생할 수 있거나 발생하지 않을 수 있다는 것과 기재 내용이 현상 또는 상황이 발생할 수 있는 경우와 현상 또는 상황이 발생하지 않는 경우를 포함한다는 것을 의미한다.

용어 "약"은 제제의 제조 및 질환 또는 장애의 치료에 있어 제제의 효능을 변화시키지 않는 치료제(예를 들어, 제1 활성제 또는 제2 활성제)의 농도 또는 양의 어떤 최소한의 변화를 나타낸다. 예를 들어, 제한 없이, 치료제의 농도는 0.005% 내지 5.0%(예를 들어, ±0.0005%) 사이에서 변화하는 경우 유효하다. 본 출원의 치료제/활성제, 예를 들어, 제1 활성제 또는 제2 활성제의 농도 범위와 관련하여 용어 "약"은 또한 유효한 양 또는 범위인 언급된 양 또는 범위의 임의의 편차를 언급한다.

범위는 본원에서 "약" 한 특정 값에서 및/또는 "약" 또 다른 특정 값까지 표현될 수 있다. 이러한 범위로 표현될 때, 또 다른 측면은 한 특정 값에서 및/또는 다른 특정 값까지를 포함한다. 유사하게, 값이 선행된 "약"을 사용하여 근사치로 표현될 때, 특정 값은 또 다른 측면을 이루는 것으로 이해된다. 또한, 범위의 각 종점은 다른 종점과 관련하여서도 다른 종점과 무관하게도 모두 유의하다고 이해된다. 본원에 개시된 값이 많이 존재하고 각 값은 또한 본원에서 그 값 자체뿐만 아니라 "약" 그 특정 값으로 개시되는 것으로 이해된다. 예를 들어, 값 "10"이 개시되는 경우, "약 10"이 또한 개시된다. 숙련 기술자에게 적절하게 이해되는 바와 같이, 한 값이 개시될 때, 그 값 "이하", 그 값 "이상", 및 값 사이의 가능한 범위가 또한 개시되는 것으로 이해된다. 예를 들어, 값 "10"이 개시되는 경우, "10 이하" 및 "10 이상"이 또한 개시된다. 또한, 본 출원에 전반에 걸쳐 데이터는 다양한 많은 형식으로 제공되고 이 데이터는 종점 및 시점 및 데이터 지점의 임의의 조합에 대한 범위를 나타내는 것으로 이해된다. 예를 들어, 한 특정 데이터 지점 "10" 및 한 특정 데이터 지점 "15"가 개시되는 경우, 10과 15 초과, 이상, 미만, 이하, 및 10과 15와 동일할 뿐 아니라 10과 15 사이도 개시된 것으로 간주하는 것으로 이해된다. 또한, 두 특정 단위 사이의 각 단위가 개시된 것으로 이해된다. 예를 들어 10과 15가 개시되는 경우, 11, 12, 13, 및 14도 개시된다.

본원에서 사용되는 "할로"는, 달리 명시되지 않는다면, 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도를 포함한다. 바람직한 할로 기는 플루오로, 클로로 및 브로모이다.

본원에서 사용되는 용어 "알킬"은, 달리 명시되지 않는다면, 명시된 개수의 탄소 원자를 가진 분지쇄 및 직쇄 두 가지 모든 포화 지방족 탄화수소를 포함한다. 예를 들어, C_1-6 알킬은 C₁, C₂, C₃, C₄, C₅, 및 C₆ 알킬 기를 포함하고자 한다. 알킬의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸, 및 n-헥실을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 특정 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 그의 골격에 6개 이하의 탄소 원자를 가지고(예를 들어, 직쇄일 경우 C₁-C₆, 분지쇄일 경우 C₃-C₆), 또 다른 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 4개 이하의 탄소 원자를 가진다. 유사하게, 시클로알킬은 그의 고리 구조에 3 내지 8개의 탄소 원자를 가지고, 다른 실시양태에서, 시클로알킬은 고리 구조에 5 또는 6개 탄소를 가진다.

알킬은 탄화수소 골격의 하나 이상의 탄소 상 수소를 대체하여 치환될 수 있다. 이러한 치환기는 예를 들어, 할로겐, 히드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 디알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 시아노, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노 포함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도 포함), 아미디노, 이미노, 설프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다. 시클로알킬은 상기에 기재된 치환기 및 추가의 치환기, 예를 들어 알킬, 알케닐, 및 알키닐로 추가 치환될 수 있다. "알킬아릴" 또는 "아르알킬" 모이어티는 아릴(예를 들어, 페닐메틸(벤질))로 치환된 알킬이다.

본원에서 사용되는 용어 "알케닐"은, 달리 명시되지 않는다면, 상기에 기재된 알킬과 길이 및 가능한 치환이 유사하지만, 적어도 하나의 이중 결합을 포함하는 불포화 지방족 기를 포함한다. 예를 들어, 용어 "알케닐"은 직쇄 알케닐 기(예를 들어, 에테닐, 프로페닐, 부테닐, 펜테닐, 헥세닐, 헵테닐, 옥테닐, 노네닐, 데세닐), 분지쇄 알케닐 기, 시클로알케닐(예를 들어, 지환족) 기(예를 들어, 시클로프로페닐, 시클로펜테닐, 시클로헥세닐, 시클로헵테닐, 시클로옥테닐), 알킬 또는 알케닐 치환된 시클로알케닐 기 및 시클로알킬 또는 시클로알케닐 치환된 알케닐 기를 포함한다. 특정 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알케닐 기는 그의 골격에 6개 이하의 탄소 원자를 가진다(예를 들어, 직쇄일 경우 C₂-C₆, 분지쇄일 경우 C₃-C₆). 유사하게, 시클로알케닐 기는 그의 고리 구조에 3 내지 8개의 탄소 원자를 가질 수 있고, 일부 실시양태에서, 시클로알케닐 기는 고리 구조에 5 내지 6개의 탄소를 가진다. 용어 "C₂-C₆"은 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 알케닐 기를 포함한다. 용어 "C₃-C₆"은 3 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 알케닐 기를 포함한다. 알케닐은 하나 이상의 탄화수소 골격 탄소 원자 상의 수소를 대체함으로써 치환될 수 있다. 이러한 치환기는, 예를 들어, 알키닐 기, 할로겐, 히드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 디알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 시아노, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노 포함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도 포함), 아미디노, 이미노, 설프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "알키닐"은, 달리 명시되지 않는다면, 상기에 기재된 알킬과 길이 및 가능한 치환이 유사하나, 적어도 하나 이상의 삼중 결합을 포함하는 불포화 지방족 기 포함한다. 예를 들어, "알키닐"은 직쇄 알키닐 기(예를 들어, 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 데시닐), 분지쇄 알키닐 기, 및 시클로알킬 또는 시클로 알케닐 치환된 알키닐 기를 포함한다. 특정 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알키닐 기는 그의 골격에 6개 이하의 탄소 원자를 가진다(예를 들어, 직쇄일 경우 C₂-C₆, 분지쇄일 경우 C₃-C₆). 용어 "C₂-C₆"은 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 알키닐 기를 포함한다. 용어 "C₃-C₆"은 3 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 알키닐 기를 포함한다. 알키닐은 하나 이상의 탄화수소 골격 탄소 원자 상의 수소를 대체함으로써 치환될 수 있다. 이러한 치환기는 예를 들어, 할로겐, 히드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 디알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 시아노, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노 포함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도 포함), 아미디노, 이미노, 설프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "알콕시"는, 달리 명시되지 않는다면, O-알킬 기를 포함하며, 여기서 "알킬"은 상기에 정의된 바와 같다.

본원에서 사용되는 "아릴"은, 달리 명시되지 않는다면, 5- 및 6-원 "비공액", 또는 단일 고리, 방향족 기, 및 적어도 한 개의 방향족 고리를 가진 "공액" 또는 다환계를 포함한다. 아릴 기의 예는 벤젠, 페닐 등을 포함한다. 게다가, 용어 "아릴"은 다환형 아릴 기, 예를 들어, 트리시클릭, 비시클릭, 예를 들어, 나프탈렌을 포함한다.

고리 구조에 이종원자를 가진 아릴 기는 "방향족 헤테로사이클", "아릴 헤테로사이클", "헤테로사이클", "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족"으로 언급될 수 있다.

아릴 또는 헤테로아릴은 하나 이상의 고리 위치에서 상기에 기개된 치환기, 예를 들어, 할로겐, 히드록실, 알콕시, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 알킬아미노카보닐, 아르알킬아미노카보닐, 알케닐아미노카보닐, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 아르알킬카보닐, 알케닐카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 시아노, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노 포함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도 포함), 아미디노, 이미노, 설프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티로 치환될 수 있다. 또한, 아릴 기는 다환계(예를 들어, 테트랄린, 메틸렌디옥시페닐)를 형성하기 위해서 방향족이 아닌 지환족 또는 헤테로시클릭 고리와 융합되거나 가교될 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "4-10원 헤테로시클릭"은, 달리 명시되지 않는다면, O, S 및 N으로부터 각각 선택된 하나 이상의 이종원자를 포함하는 방향족 및 비방향족 헤테로시클릭 기를 포함하며, 여기서 각 헤테로시클릭 기는 그의 고리계에 4-10개의 원자를 가진다. 비방향족 헤테로시클릭 기는 그들의 고리계에 단지 4개의 원자를 포함하지만, 방향족 헤테로시클릭 기는 그들의 고리계에 적어도 5개의 원자를 포함해야 한다. 4원 헤테로시클릭 기의 예는 아제티디닐(아제티딘으로부터 유도)이다. 5원 헤테로시클릭 기의 예는 티아졸릴이고 10원 헤테로시클릭 기의 예는 퀴놀리닐이다.

비방향족 헤테로시클릭 기의 예는 피롤리디닐, 테트라히드로퓨라닐, 테트라히드로티에닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로티오피라닐, 피페리디노, 모르폴리노, 티오모르폴리노, 티옥사닐, 피페라지닐, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 호모피페리디닐, 옥세파닐, 티에파닐, 옥사제피닐, 디아제피닐, 티아제피닐, 1,2,3,6-테트라히드로피리디닐, 2-피롤리닐, 3-피롤리닐, 인돌리닐, 2H-피라닐, 4H-피라닐, 디옥사닐, 1,3-디옥솔라닐, 피라졸리닐, 디티아닐, 디티올라닐, 디히드로피라닐, 디히드로티에닐, 디히드로퓨라닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 3-아자비시클로[3.1.0]헥사닐, 3-아자비시클로[4.1.0]헵타닐, 3H-인돌릴 및 퀴놀리지닐이다.

방향족 헤테로시클릭 기의 예는 피리디닐, 이미다졸릴, 피리미디닐, 피라졸릴, 트리아졸릴, 피라지닐, 테트라졸릴, 퓨릴, 티에닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조퓨라닐, 시놀리닐, 인다졸릴, 인돌리지닐, 프탈라지닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 이소인돌릴, 프테리디닐, 퓨리닐, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 퓨라자닐, 벤조퓨라자닐, 벤조티오페닐, 벤조티아졸릴, 벤족사졸릴, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 나프티리디닐, 및 퓨로피리디닐이다.

상기에 열거된 화합물로부터 유도되는 상기 기는 가능한 경우 C-부착되거나 N-부착될 수 있다. 예를 들어 피롤로부터 유도된 기는 피롤-1-일(N-부착) 또는 피롤-3-일(C-부착)일 수 있다. "4-10원 헤테로시클릭" 모이어티는 치환될 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용 가능한 염(들)"은, 달리 명시되지 않는다면, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ)의 화합물 또는 제2 활성제에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 포함한다. 성질이 염기성인 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 제2 활성제는 여러 무기산 및 유기산과 매우 다양한 염을 형성할 수 있다. 화학식 I 또는 Ⅱ의 상기 염기성 화합물 및 제2 활성제의 약학적으로 허용 가능한 산부가 염을 제조하는 데 사용될 수 있는 산은 무독성 산부가 염을 형성하는 것들이고, 즉, 약학적으로 허용되는 음이온을 함유하는 염, 예를 들어 염산, 브로화수소, 요오드화수소, 나이트레이트, 설페이트, 비설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 아세테이트, 락테이트, 살리실레이트, 시트레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 판토테네이트, 비타르트레이트, 아스코르베이트, 숙시네이트, 말레에이트, 젠티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루카로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 파모에이트[즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-히드록시-3-나프토에이트)] 염이다.

성질이 산성인 제1 활성제(예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ)의 화합물 및 제2 활성제는 여러 약리학적으로 허용 가능한 양이온과 염기 염을 형성할 수 있다. 상기 염의 예는 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속, 특히 나트륨염 및 칼륨염을 포함한다.

일부 실시양태에서, 염은 산부가 염, 예를 들어 HCl 염이다.

화학식 I 또는 Ⅱ의 특정 화합물 및 특정 제2 활성제는 비대칭 중심을 가질 수 있어서 상이한 거울상 이성질체 형태로 존재한다. 본 출원은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 모든 광학 이성질체 및 입체 이성질체 및 이들의 혼합물 및 제2 활성제의 모든 광학 이성질체 및 입체 이성질체 및 이들의 혼합물의 용도에 관한 것이다. 또한, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 제2 활성제는 E/Z 기하 이성질체 또는 호변 이성질체로서 존재할 수 있다. 본 출원은 상기 모든 기하 이성질체 및 호변 이성질체 및 이들의 혼합물의 용도에 관한 것이다.

또한, 본 출원은 동위원소 표지된 화합물, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하며, 이들은 하나 이상의 원자가 자연에서 통상적으로 발견되는 원자량 또는 질량수와 상이한 원자량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된 사실을 제외하고는 화학식 I 또는 Ⅱ에 열거된 것과 동일하다. 본 출원의 화합물에 포함될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오르 및 염소, 예를 들어 각각 ²H, ³H, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸O, ¹⁷O, ³⁵S, ¹⁸F, 및 ³⁶Cl을 포함한다. 상기에 언급된 동위원소 및/또는 기타 원자의 기타 동위원소를 포함하는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 이들의 공액체, 및 상기 화합물 또는 상기 공액체의 약학적으로 허용 가능한 염은 본 출원의 범위 내에 있다. 본 출원의 동위원소 표지된 특정 화합물(예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물), 예를 들어 ³H 및 ¹⁴C와 같은 방사성 동위원소가 포함된 것은 약물 및/또는 기질 조직 분포 분석에 유용하다. 삼중 수소화, 즉, ³H, 및 탄소-14, 즉, ¹⁴C 동위원소는 제조 용이성 및 검출능 때문에 특히 바람직하다. 게다가, 중수소, 즉, ²H와 같은 중동위원소로의 치환은 더 큰 대사 안정성, 예를 들어 생체 내 반감기 증가, 또는 필요 투여량의 감소로 인한 확실한 치료 이점을 제공할 수 있으며, 이에 따라, 일부 상황에서는 바람직할 수 있다. 본 출원의 화학식 I 또는 Ⅱ의 동위원소 표지된 화합물 및 이의 에스테르 또는 지질 공액체는 일반적으로 쉽게 이용 가능한 동위원소 표지된 시약으로 동위원소 표지되지 않은 시약을 대체하여 하기의 개요 및/또는 실시예 및 제조에 개시된 절차를 수행하여 제조될 수 있다.

또한, 본 출원은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유도체를 포함하는 약학 제제를 포함한다. 유리 아미노, 또는 아미도 기를 가진 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 아미노산 잔기, 또는 두 개 이상(예를 들어 2, 3, 또는 4개)의 아미노산 잔기의 폴리펩티드 사슬이 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제2 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유리 아미노기에 아미드 또는 에스테르 결합을 통해 공유 결합된 공액 유도체로 전환될 수 있다. 아미노산 잔기는 통상적으로 3개의 문자 부호로 나타내는 20가지 천연 아미노산을 포함하나 이에 제한되지 않으며, 4-히드록시프롤린, 히드록시리신, 데모신, 이소데모신, 3-메틸히스티딘, 노르발린, 베타-알라닌, 감마-아미노부티르산, 시트룰린, 호모시스테인, 호모세린, 오르니틴 및 메티오닌 설폰도 포함한다.

또 다른 유형의 유도체도 포함된다. 아미드 및 에스테르 모이어티는 에테르, 아민 및 카복실산 작용기를 포함하는, 그러나 이에 제한되지 않는, 기를 포함할 수 있다. 문헌(D. Fleisher, et al., Advanced Drug Delivery Reviews (1996) 19, 115. Carbamate conjugates of hydroxy and amino groups are also included, as are carbonate conjugates and sulfate esters of hydroxy groups)에 개략적으로 설명된 바와 같이, 유리 히드록시기는 헤미숙시네이트, 포스페이트 에스테르, 디메틸아미노아세테이트 및 포스포릴옥시메틸옥시카보닐을 포함하는, 그러나 이에 제한되지는 않는, 기를 이용하여 유도체화될 수 있다. 히드록시기의 카보네이트 공액체 및 설페이트 에스테르와 같이 히드록시와 아미노기의 카바메이트 공액체가 또한 포함된다. 아실 기가 에테르, 아민 및 카르복실산 작용기를 포함하는, 그러나 이에 제한되지 않는, 기로 경우에 따라 치환된 알킬 에스테르일 수 있는 경우, 또는 아실 기가 상기에 기재된 아미노산 에스테르일 경우, (아실옥시)메틸 및 (아실옥시)에틸 에테르로서 히드록시 기의 유도체화도 포함된다. 상기 유형의 유도체는 문헌(R. P. Robinson et al., J. Medicinal Chemistry (1996) 39, 10)에 기재되어 있다.

용어 "키나아제"는 단백질 잔기에 인산 기의 첨가를 촉매하는 임의의 효소를 언급한다. 예를 들어, 세린 및 트레오닌 키나아제는 세린 및 트레오닌 잔기에 인산 기의 첨가를 촉매한다.

용어 "VEGFR 키나아제," 및 "VEGFR"은 임의의 혈관 내피 성장 인자 수용체를 언급한다.

용어 "VEGF 신호전달," 및 "VEGF 캐스케이드"는 VEGF 신호전달 캐스케이드의 상류 및 하류 두 가지 모두의 구성요소를 언급한다.

용어 "ErbB 키나아제," 및 "ErbB 수용체"는 EGFR(ErbB1 또는 HER1), HER2/c-neu(ErbB2), HER3(ErbB3) 및 HER4(ErbB4)를 포함하는 수용체 티로신 키나아제의 ErbB 패밀리의 일원을 언급한다.

용어 "EGF 신호전달," 및 "EGF 캐스케이트"는 EGF 신호전달 캐스케이드의 상류 및 하류 두 가지 모두의 구성요소를 포함한다.

용어 "약학적으로 허용 가능한"은 담체, 희석제 또는 부형제가 제제의 기타 성분과 적합하며 그들의 수용자에게 해롭지 않아야 한다는 점을 언급한다.

용어 "화합물의 투여" 또는 "화합물을 투여하는 것"은 치료를 필요로 하는 피험체에게 본 출원의 화합물 또는 약학 제제를 제공하는 행위를 언급한다.

용어 "혈관항상성(vasculostasis)"은 정상적인 생리적 기능을 유도하는 항상성 혈관 기능의 유지를 언급한다.

용어 "혈관항상성 제제(vasculostatic agent)"는 혈관항상성의 손실을 예방하거나 그를 회복 또는 유지함으로써 혈관항상성이 저하된 병태를 다루고자 하는 제제를 언급한다.

본 출원에서 "조성물" 및 "제제"는 호환적으로 사용되며 당 업계에 공지된 바와 같이 조성물 또는 제제의 통상적인 이해를 나타낸다.

본 출원은 안과용 제제에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 안과용 제제는 겔 제제, 또는 세미 겔 제제, 또는 두 가지 모두이다.

본 출원에 따른 "겔"은 현탁된 입자를 포함하는 본 출원의 반고체 제형이다. 반고체는 쏟을 수 없으며, 실온에서 흐르거나 그 용기에 맞춰지지 않는다. 반고체는 낮은 전단 응력에서 흐르지 않고 일반적으로 소성 유동 양상을 보인다. 콜로이드 분산은 콜로이드 크기(즉, 통상적으로 1 nm 내지 1 μM)의 입자는 액체 전반에 균일하게 분포된 시스템이다.

일부 실시양태에서, "겔"은 액체에 의해 상호투과되는 작은 무기 입자 또는 유기 분자의 현탁액으로 이루어진 반고체 계이다. "겔"은 단상계 또는 2 상계로 분류된다. "겔"은 또한 중간상, 또는 액체와 고체의 중간 물질 상태로 부분적으로 규칙 격자를 나타내며, 이는 본 실시양태의 "겔 드롭"에서 활성제의 상태이다. 2 상 겔은 작은 단립자(discrete particle)의 네트워크로 이루어진다. 2 상계에서, 겔 덩어리는 때로는 현탁된 물질의 입자 크기가 클 경우 마그마(예를 들어, 벤토나이트 마그마)로 언급된다. 겔과 마그마 두 가지 모두 정치시 반고체를 형성하고 교반 시 액체를 형성하는 요변성을 보인다. 반고체 제제는 균질성을 보장하기 위해 투여 전 흔들어 주어야 하기 때문에 라벨을 붙여야 한다(현탁액 참조). 단상 겔은 분산된 고분자와 액체 사이에 분명한 경계가 존재하지 않는 방식으로 액체 전반에 균일하게 분산된 유기 고분자로 이루어진다. 또한, 단상 겔은 겔화를 담당하는 구성요소가 실제 활성 성분인 저분자량(LWML: low molecular weight)의 유기 분자로 이루어질 수 있다. 소위 이들 "LMW 히드로겔"은 고분자량의 합성 중합체, 다당류, 및 단백질과 같은 종래의 겔화제(gelator)와는 상이하다. 고분자량 겔화제는 수소 결합으로 인해 매우 규칙적이며 단방향성인 반면 LMW 히드로겔을 통제하는 힘은 대개 비방향성의 반 데르 발스 힘(소수성) 상호작용이다. 실제로, LMW 히드로겔은 액체 전반에 퍼져 물리적으로 갈라지거나 얽혀있는 망을 생성하는 높은 이방성(anisotropic)(통상적으로 섬유성) 구조로 관찰된다. 따라서, 겔은 규칙적이지 않거나 약간 규칙적이어서 약간의 복굴절의 액정 특성을 보일 수 있다. 겔은 점안액으로서 히드로겔의 형태로 국소 또는 흔든 후 투여된다.

본 출원에 따른 반고체 "겔"은 USP 정의 및 그 안에 참고된 문헌에 따라 반고체이다. 반고체 제제의 겉보기 점도는 농도에 따라 증가한다. 본 제제의 임상 투여 강도(dosage strength)는 낮은 강도의 ≤1 mg/mL(0.1%) 내지 높은 강도의 ≤6 mg/mL(0.6%) 범위에 있다. 낮은 강도 용량은 점도가 가장 낮고 "용액"의 범주에 해당하지만 강도가 높아질수록 점도가 높아지며 겔의 정의에 적합해진다.

본 출원에 따른 "젤리"는 겔의 한 부류로서, 액체에 의해 상호투과된 작은 무기 입자 또는 큰 유기 분자로 구성된 현탁액으로 이루어진 반고체계이며 그 안에 구조적으로 일관된 매트릭스는 높은 비율의 액체, 대개 물을 포함한다.

본 발명에 따른 "용액"은 용매 또는 상호 혼화성 용매의 혼합물에 용해된 하나 이상의 화학 성분을 포함하는 투명한 균질의 액체 제형이다. 용액은 적합한 용매 또는 상호 혼화성 용매의 혼합물에 용해된 하나 이상의 화학 성분을 포함하는 액체 제제이다. 용액 내 약물 성분의 분자가 균일하게 분산되어 있기 때문에 제형으로서 용액의 사용은 투여시 균일한 투여량과 용액이 희석되거나 그 외 혼합될 때 우수한 정확도를 보장해준다.

본 출원에 따른 "액체"는 액체 상태의 순수한 화학물질로 이루어진 제형이다. 액체는 쏟을 수 있다. 액체는 흐르며 실온에서 그 용기에 맞춰진다. 액체는 뉴턴 또는 의소성 유동 양상을 보인다.

본 출원에 따른 "현탁액"은 액체 비히클에 분산된 고체 입자를 포함하는 액체 제형이다.

제1 활성제(예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ)의 화합물 및 제2 활성제는 천연 또는 염의 형태로 치료 제제에 제제화된다. 약학적으로 허용 가능한 비독성 염은, 예를 들어, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 또는 수산화철과 같은 무기 염기, 및 이소프로필아민, 트리메틸아민, 2-에틸아미노-에탄올, 히스티딘, 프로카인 등과 같은 유기 염기로부터 유도된 염기 부가 염(유리 카복실 또는 기타 음이온 기와 형성됨)을 포함한다. 상기 염은 임의의 유리 양이온 기와 산부가 염으로 형성되며 일반적으로 예를 들어, 염산, 황산, 또는 인산과 같은 무기산, 또는 아세트산, 시트르산, p-톨루엔설폰산, 메탄설폰산, 옥살산, 타르타르산, 만델산 등과 같은 유기산으로 형성된다. 본 출원의 염은 염산, 브롬화수소산, 요오드화 수소산, 황산, 인산 등과 같은 무기산과 아미노기의 프로톤 부가에 의해 형성된 아민염을 포함한다. 또한, 본 출원의 염은 p-톨루엔설폰산, 아세트산 등과 같은 적합한 유기산과 아미노기의 프로톤 부가에 의해 형성된 아민염을 포함한다. 본 출원의 실시에 사용하기 위해 고려되는 추가의 부형제는 당 업자에게 이용 가능한 것, 예를 들어 미국 약전(United States Pharmacopoeia) Vol. XXII 및 국민 의약품집(National Formulary Vol. XVII)(U.S. Pharmacopoeia Convention, Inc., Rockville, Md. (1989))에서 발견되는 것이다. 그 해당 내용은 본원에서 참고로 포함된다. 또한, 본 출원의 화합물의 다형체는 본 출원에 포함된다.

본 출원의 실시양태는 하기 화학식 I의 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염; 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합인 제2 활성제 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염; 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 안구 신혈관형성 치료용 안과용 제제로서, 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 약 0.02% 내지 약 1.2% w/v로 존재하는 것인 제제를 제공한다:

<화학식 I>

.

상기 식에서, X¹은 O 또는 S이고;

t는 0 내지 5의 정수이고;

상기 헤테로시클릭 모이어티 내 1 또는 2개의 탄소 원자는 경우에 따라 옥소(=O) 모이어티 또는 산소 음이온으로 치환되고;

R²는 H이고;

R³은 (CH₂)_t(C₆-C₁₀아릴)이고, 여기서:

t는 0 내지 5의 정수이고;

m은 1 내지 5의 정수이고;

t는 0 내지 5의 정수이고;

상기 R⁴의 알킬, 아릴 및 헤테로시클릭 모이어티는 할로, 시아노, 니트로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 아지도, NR⁶SO₂R⁵, SO₂NR⁵R⁶, C(O)R⁵, C(O)OR⁵,OC(O)R⁵, NR⁶C(O)R⁵, C(O)NR⁵R⁶, NR⁵R⁶, (CR⁶R⁷)_mOR⁶(여기서 m은 1 내지 5의 정수), OR⁵, 및 R⁵의 정의에 열거된 치환기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 경우에 따라 치환되고;

R⁵, R⁶,및 R⁷은 각각 독립적으로 H 또는 C₁-C₆알킬이다.

본 출원의 또 다른 실시양태에서, 제1 활성제는

이다.

본 출원의 화합물은 3-[(4-브로모-2,6-디플루오로페닐)메톡시]-5-[[[[4-(1-피롤리디닐)부틸]아미노]카보닐]아미노]-4-이소티아졸카복사미드 히드로클로라이드이며, 이것은 분자식: C₂₀H₂₄BrF₂N₅O₃S·HCl, 분자량: 568.86 g/mol이며, 분자가 비대칭 중심을 포함하지 않고 키랄이 아닌 특성을 갖는다. 본 출원의 화합물은 하기 화합물-I로 나타낸다:

.

본 출원의 화합물-I은 VEGFR-2의 티로신 키나아제 활성의 억제제이고, 상기 수용체의 VEGF 자극된 자가 인산화 및 내피세포 증식을 차단한다. 이는 수용체 상피세포 성장인자 수용체(EGFR) 및 인슐린 수용체(IR) 티로신 키나아제를 억제하는 데 필요한 농도에 비해 선택적(>500x)이다. 화합물-I은 미국 특허 제6,235,764호에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물은 VEGFR-2 억제제이다.

본 출원의 제2 활성제는 EGFR의 티로신 키나아제 활성의 EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)이다.

제1 활성제 및 제2 활성제는 제1 활성제, 제2 활성제, 및 약학적인 부형제를 포함하는 동일한 제제의 일부분으로서 함께 투여될 수 있다. 또한, 제1 활성제 및 제2 활성제는 별개로 투여될 수 있다. 한 실시양태에서, 제1 활성제 및 제2 활성제는 두 가지 제제로 별개로 투여되며, 이때 한 가지 제제는 제1 활성제 및 약학적인 부형제를 포함하고, 제2 제제는 제2 활성제 및 약학적 부형제를 포함한다.

한 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 제2 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 동시에 투여된다. 별법으로, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 전에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 후에 투여된다.

일반적인 특성

본 출원의 화합물-I은 표 1에 나타낸 특성을 가진다. 실시양태는 화합물-I 또는 이의 유리 염기 - 화학식 Ⅱ 화합물의 3가지 제제를 제공한다.

<표 1A>

화합물-I 제제의 조성은 표 1B에 열거한다. 제제 재료는 표 1C에 열거한다.

<표 1B>

<표 1C>

화합물-I 제제 및 제2 활성제의 조성은 표 1D에 열거한다. 제제 재료는 표 1E에 열거한다.

<표 1D>

<표 1E>

안과 용액

본 출원은 물과 유사한 점도의 용액으로 형성된, 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I 및/또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ 화합물)) 및/또는 제2 활성제의 제제를 제공한다. 용액은 약학적으로 허용 가능한 제제/부형제, 예를 들어, 제한 없이, 시클로덱스트린을 포함한다. 따라서, 용액은 눈에 국소 투여하기에 적합한 투명한 무색 용액이다.

본 출원의 용액은 제1 활성제의 전안부 노출을 감소시킴으로써, 용액 내 제1 활성제, 예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 농도를 증가시키고 전달 빈도를 증가하시켜 후안부 내 제1 활성제의 고농도 유지를 촉진한다.

본 출원의 용액은 약 0.005% 내지 약 5.0% w/v의 화학식 I 또는 Ⅱ의 제1 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I을 포함한다. 일부 실시양태에서, 용액 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.005% - 약 0.01%, 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05% - 약 0.1%, 약 0.1% - 약 0.2%, 약 0.2% - 약 0.3%, 약 0.3% - 약 0.4%, 약 0.4% - 약 0.5%, 약 0.5% - 약 0.6%, 약 0.6% - 약 0.7%, 약 0.7% - 약 0.8%, 약 0.8% - 약 0.9%, 약 0.9% - 약 1.0%, 약 1.0 - 약 2.0%, 약 2.0 - 약 3.0%, 약 3.0 - 약 4.0%, 또는 약 4.0 - 약 5.0% w/v 이다. 일부 실시양태에서, 제제 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.1% - 약 1.2%, 약 0.2% - 약 1.2%, 약 0.3% - 약 1.2%, 약 0.4% - 약 1.2%, 0.1% - 약 1.1%, 약 0.2% - 약 1.1%, 약 0.3% - 약 1.1%, 약 0.4% - 약 1.1%, 0.1% - 약 1.0%, 약 0.2% - 약 1.0%, 약 0.3% - 약 1.0%, 약 0.4% - 약 1.0%, 0.1% - 약 0.8%, 약 0.2% - 약 0.8%, 약 0.3% - 약 0.8%, 약 0.4% - 약 0.8%, 0.1% - 약 0.6%, 약 0.2% - 약 0.6%, 약 0.3% - 약 0.6%, 약 0.4% - 약 0.6%, 0.1% - 약 0.5%, 약 0.2% - 약 0.5%, 약 0.3% - 약 0.5%, 약 0.4% - 약 0.5%, 0.1% - 약 0.4%, 약 0.2% - 약 0.4%, 약 0.3% - 약 0.4% w/v 이다. 일부 실시양태에서, 용액은 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)를 포함한다.

본 출원의 용액은 약 0.00001% - 약 5.0% w/v의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 본 출원의 용액은 약 0.00001% - 약 1.0%, 약 0.00001% - 약 0.1%, 약 0.00001% - 약 0.01%, 약 0.00001% - 약 0.001%, 약 0.00001% - 약 0.0002%, 또는 약 0.00001% - 약 0.0001% w/v의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 용액 내 제2 활성제의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.00001% - 약 0.0001%, 0.000012% - 약 0.0001%, 0.000014% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.0001%, 0.000018% - 약 0.0001%, 0.00002% - 약 0.0001%, 0.00003% - 약 0.0001%, 0.00004% - 약 0.0001%, 0.00005% - 약 0.0001%, 0.00006% - 약 0.0001%, 0.00007% - 약 0.0001%, 0.00008% - 약 0.0001%, 0.00009% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.00009%, 0.000018% - 약 0.00009%, 0.00002% - 약 0.00009%, 0.00003% - 약 0.00009%, 0.00004% - 약 0.00009%, 0.00005% - 약 0.00009%, 0.00006% - 약 0.00009%, 0.00007% - 약 0.00009%, 0.00008% - 약 0.00009% w/v 이다. 일부 실시양태에서, 용액은 약 0.00001%, 0.00002%, 0.00003%, 0.00004%, 0.00005%, 0.00006%, 0.00007%, 0.00008%, 0.000081%, 0.000082%, 0.000083%, 0.000084%, 0.000085%, 0.000086%, 0.000087%, 0.000088%, 또는 0.000089% w/v의 제2 활성제를 포함한다.

본 출원의 용액은 약 0.5 μM, 약 0.6 μM, 약 0.7 μM, 약 0.8 μM, 약 0.9 μM, 약 1 μM, 약 2 μM, 약 3 μM, 약 4 μM, 약 5 μM, 약 6 μM, 약 7 μM, 약 8 μM, 또는 약 9 μM의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제의 농도는 약 1 μM 이다.

일부 실시양태에서, 제제는 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)의 용해도를 향상시키기 위해 시클로덱스트린을 포함한다. 1 또는 4개의 결합을 통해 연결된 6 내지 8개의 덱스트로스 단위로 구성된 올리고당인 시클로덱스트린은 물 또는 수용액(예를 들어, PBS 완충액)에서 저조하거나 낮은 용해도를 보이는 활성제의 용해도를 증가시킨다. 시클로덱스트린은 소수성 활성제와 친수성 착물을 형성한다.

하나 이상의 시클로덱스트린이 본 출원의 용액에 사용될 수 있다. 본 출원의 제제에 사용하기 위한 시클로덱스트린의 비제한적인 예는 예를 들어 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린, 메틸-β-시클로덱스트린, 무작위 메틸화-β-시클로덱스트린, 에틸화-β-시클로덱스트린, 트리아세틸-β-시클로덱스트린, 과아세틸화-β-시클로덱스트린, 카복시메틸-β-시클로덱스트린, 히드록시에틸-β-시클로덱스트린, 2-히드록시-3-(트리메틸아미노)프로필-β-시클로덱스트린, 글루코실 -β-시클로덱스트린, 말토실-β-시클로덱스트린, 설포부틸 에테르-β-시클로덱스트린, 분지형-β-시클로덱스트린, 히드록시프로필-γ-시클로덱스트린, 무작위 메틸화-γ-시클로덱스트린, 트리메틸-γ-시클로덱스트린, 또는 이들의 조합이다.

일부 실시양태에서, 시클로덱스트린을 포함하는 화학식 Ⅱ 화합물 또는 화합물-I의 용액은 투명한 무색 용액이며 물과 유사한 점도를 갖는다. 일부 실시양태에서, 본 출원은 화합물-I, 하나 이상의 시클로덱스트린, 및 제2 활성제를 포함하는 국소 적용을 위한 용액을 제공하고 눈에 국소 적용된다.

본 출원의 안과 용액은 덱스트린 및 안과 용액에 최적인 농도 이하에서 선택된 약학적 부형제를 포함한다. 본 출원의 부형제는 예를 들어, 염화벤잘코늄(BAK) 및 NaCl이다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.001 - 약 0.005% w/v 염화벤잘코늄(BAK)을 포함한다. BAK의 양은 적용되는 필요에 따라 달라진다.

안과 용액은, 예를 들어, 제한 없이, 약 0.005% - 5.0% 화합물-I 또는 이의 유리 염기, 약 2 - 약 25% 시클로덱스트린, 예를 들어, 제한 없이, 히드록시프로필-β-시클로덱스트린(HPβCD) 또는 메틸시클로덱스트린(클렙토스® HPB), 및/또는 설포부틸 에테르-β-시클로덱스트린(캡티솔(CAPTISOL)®), 약 0.1 - 약 0.7% 염, 예를 들어, 제한 없이, NaCl, 및/또는 약 0.005%의 항균제, 예를 들어, 제한 없이, 염화벤잘코늄(BAK)을 포함한다. 제제는 화합물-I 또는 이의 유리 염기 대 시클로덱스트린 비 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 또는 1:10 내지 1:20을 포함한다. 일부 실시양태에서, 시클로덱스트린을 포함하는 안과 용액은 트로메타민(트리스, 트리스(히드록시메틸)아미노메탄, 또는 트리스 완충액으로도 알려짐)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.05% - 1% 트리스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.05% - 0.5% 트리스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.05% - 0.2% 트리스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.05% - 0.15% 트리스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 1% 트리스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.005% - 5.0% 제2 활성제를 포함한다.

본 실시양태의 안과 용액은, 예를 들어, 제한 없이: 약 0.3% - 약 5.0% 화합물-I(약 3 mg/mL - 약 50.0 mg/mL), 약 0.05% 인산나트륨 1염기 일수화물, 약 2% 글리세린; 약 0.4% 화합물-I, 약 7% HPβCD, 약 0.7% NaCl, 약 0.005% BAK; 약 0.4% 화합물-I, 약 4% HPβCD, 약 0.7% NaCl, 약 0.005% BAK; 약 0.4% 화합물-I, 약 7% HPβCD, 약 1% 트로메타민, 약 0.4% NaCl, 약 0.005% BAK; 및 약 0.6% 화합물-I, 약 7% HPβCD, 약 0.7% NaCl, 약 0.005% BAK를 포함한다. 약 0.005% 내지 약 5.0% 농도의 화합물-I의 경우, 시클로덱스트린은 상응하는 몰 비율로 존재하다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.005% - 5.0% 제2 활성제를 추가로 포함한다.

또 다른 안과 용액은, 예를 들어, 제한 없이: 약 0.4% 화학식 Ⅱ 화합물(유리 염기), 약 7.15% HPβCD, 약 0.7% NaCl; 약 0.1% 화학식 Ⅱ 화합물(유리 염기), 약 1.79% HPβCD, 약 0.85% NaCl; 약 0.2% 화학식 Ⅱ 화합물(유리 염기), 약 3.57% HPβCD, 약 0.8% NaCl; 약 0.6% 화학식 Ⅱ 화합물(유리 염기), 약 10.72% HPβCD, 약 0.6% NaCl; 약 0.4% 화학식 Ⅱ 화합물(유리 염기), 약 8.41% HPβCD, 약 0.65% NaCl; 약 0.4% 화합물-I, 약 10.51 HPβCD, 약 0.65% NaCl; 약 0.4% 화학식 Ⅱ 화합물(유리 염기), 약 10.51% HPβCD, 약 0.15% NaCl, 약 1.0% 트로메타민(트리스); 및/또는 약 0.1% 화학식 Ⅱ 화합물(유리 염기), 약 2.63% HPβCD, 약 0.8% NaCl; 약 0.6% 화합물-I(유리 염기), 약 15.77% HPβCD, 약 0.37% NaCl을 포함한다. 약 0.005% 내지 약 5.0% 농도의 화학식 Ⅱ 경우, 시클로덱스트린은 상응하는 몰 비율로 존재한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.005% - 5.0%의 제2 활성제를 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 1.0% - 약 25%의 시클로덱스트린을 포함한다. 예를 들어, 제한 없이, 화합물-I 제제는 약 2.0% - 약 3.0% HPβCD, 약 3.0% - 약 5.0% HPβCD, 약 5.0% - 약 10% HPβCD, 또는 약 10% - 약 25% HPβCD를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.005% - 5.0%의 제2 활성제를 추가로 포함한다.

또 다른 실시양태에서, 안과 용액은, 예를 들어, 제한 없이: 약 8.41% 클렙토스® HPB 및 약 0.142% 포스페이트; 약 8.9% 클렙토스® HPB 및 약 0.142% 포스페이트; 약 4.88% 캡티솔® 및 약 0.142% 포스페이트; 및/또는 약 4.88% 캡티솔® 및 약 0.122% 포스페이트로서 제제화된다.

일부 실시양태에서, 시클로덱스트린을 포함하는 안과 용액은 투명 무색이고, 높은 점도, 중간 점도를 가지거나, 물과 유사한 점도를 가진다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 안과 용액은 약 40℃ 이하에서 pH 값이 약 4.5 내지 약 7.5이다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 안과 용액은 약 40℃ 이하에서 pH 값이 약 5.0 내지 약 7.0이다.

예를 들어, 본 출원의 안과 용액은 약 40℃ 이하에서 pH 값이 약 6.0이다.

본 출원의 안과 용액은 통상적으로 포함되는 여러 가지 첨가제, 예를 들어 완충제(예를 들어, 포스페이트 완충액, 보레이트 완충액, 시트레이트 완충액, 타르트레이트 완충액, 아세테이트 완충액, 아미노산, 아세트산나트륨, 시트르산나트륨 등), 긴장제(tonicity agent)(예를 들어, 당류, 예를 들어 소르비톨, 글루코스 및 만니톨, 다가 알콜, 예를 들어 글리세린, 농글리세린, PEG 및 프로필렌 글리콜, 염화나트륨과 같은 염 등), 보존제 또는 방부제(예를 들어, 염화벤잘코늄, P-옥시벤조에이트 예를 들어 메틸 p-옥시벤조에이트 또는 에틸 p-옥시벤조에이트, 벤질 알코올, 펜에틸 알코올, 소르빈산 또는 이의 염, 티머로살, 클로로부탄올 등), 용해 보조제 또는 입자 안정제(예를 들어, 폴리비닐 피롤리돈과 같은 수용성 중합체, 틸록사폴, 폴리소르베이트, 폴록사머 등과 같은 계면활성제), pH 조정제(예를 들어, 염산, 아세트산, 인산, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화암모늄 등), 증점제(예를 들어, HEC, 히드록시프로필 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, HPMC, 카복시메틸 셀룰로스 및 이들의 염), 킬레이트제(예를 들어, 에데트산나트륨, 시트르산나트륨, 축합 인산나트륨 등), 및 제2 활성제 안정제(예를 들어, EDTA, 프로필 갈레이트, 및 이들의 조합)를 포함할 수 있다.

본 출원의 안과 용액은 시클로덱스트린을 포함하고, 추가의 부형제, 예를 들어, 제한 없이, 약 0.5% - 약 3% 계면활성제 및 유화제, 예를 들어, 제한 없이, 폴리소르베이트 80 또는 이의 등가의 부형제; 약 0.05 - 약 0.4% 알킬 아릴 폴리에테르 알코올 유형의 비이온계 액상 중합체, 예를 들어, 제한 없이 틸록사폴; 및/또는 약 0.05% - 약 0.6% 친수성 비이온계 계면활성제, 예를 들어, 제한 없이, 폴록사머, 예를 들어 폴록사머 407을 추가로 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.01 - 약 0.5%, 약 0.02 - 약 0.5%, 약 0.04 - 약 0.5%, 약 0.06 - 약 0.5%, 약 0.08 - 약 0.5%, 약 0.08 - 약 0.4%, 약 0.08 - 약 0.3%, 약 0.08 - 약 0.2%, 약 0.08 - 약 0.18%, 약 0.08 - 약 0.16%, 약 0.08 - 약 0.14%, 또는 약 0.08 - 약 0.12% EDTA를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.04%, 약 0.06%, 약 0.08%, 약 0.1%, 약 0.12, 약 0.14%, 약 0.16%, 약 0.18%, 또는 약 0.2% EDTA를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.1% EDTA를 포함한다.

일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.001 - 약 0.5%, 약 0.002 - 약 0.5%, 약 0.005 - 약 0.5%, 약 0.01 - 약 0.5%, 약 0.02 - 약 0.5%, 약 0.03 - 약 0.5%, 약 0.04 - 약 0.5%, 약 0.01 - 약 0.4%, 약 0.01 - 약 0.3%, 약 0.01 - 약 0.2%, 약 0.01 - 약 0.1%, 약 0.01 - 약 0.08%, 약 0.01 - 약 0.06% 프로필 갈레이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.01%, 약 0.02%, 약 0.03%, 약 0.04%, 약 0.05%, 약 0.06%, 약 0.07%, 약 0.08%, 약 0.09% 프로필 갈레이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 용액은 약 0.05% 프로필 갈레이트를 포함한다.

안과 용액으로서 전달된 여러 안구 조직에서 농도

시클로덱스트린을 포함하는 안구 용액은 후안부에서 본 출원의 제1 활성제의 생체이용률을 향상시킨다. 이론에 구속하고자 하는 것은 아니지만, 한 실시양태에서, 시클로덱스트린을 포함하는 제제는 투명한 무색 용액을 형성하고, 이는 활성제의 각막 노출, 예를 들어, 화합물-I의 노출을 등몰의 겔 드롭 제제를 이용한 각막 노출에 비해 약 5-15배 낮춘다.

이론에 구속하고자 하는 것은 아니지만, 한 실시양태에서, 시클로덱스트린을 포함하는 안과 용액은 국소 안구 투여 시 화합물-I의 치료지수를 증가시킨다. 투여 시, 시클로덱스트린-화합물-I의 친수성 착물은 각막에서 약리학적으로 비활성이다. 이론에 구속하고자 하는 것은 아니지만, 일부 실시양태에서, 시클로덱스트린-화합물-I 착물은 화합물-I의 각막 내성을 증가시킨다. 이론에 구속하고자 하는 것은 아니지만, 일부 실시양태에서, 말초 혈관구조에서 화합물-I로부터 시클로덱스트린의 자발적인 해리는 표적 조직, 예를 들어 맥락막 또는 망막에서 생체이용률을 증가시킨다.

일부 실시양태에서 각막 독성에 영향을 주는 화학식 I의 기타 제제와는 달리, 유사한 농도의 화합물-I을 포함하는 시클로덱스트린 기반 안과 용액은 각막 노출을 낮춤으로써, 치료지수 및 환자에 상응하는 편의를 증가시킨다. 한 실시양태에서, 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액의 사용은 등몰 농도의 겔 드롭과 비교하여 각막 노출을 대략 10x 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액은 화합물-I의 각막 노출을 5x, 20x, 30x, 40x, 또는 50x 감소시킨다. 한 실시양태에서, 시클로덱스트린 기반 용액으로서 약 0.005% - 약 5.0% 화합물-I의 1-90일 또는 3-9개월간 국소 안구 투여는 각막, 맥락막, 및/또는 망막에 부작용 또는 독성효과를 전혀 주지 않는다. 또 다른 실시양태에서, 시클로덱스트린 기반 용액으로서 약 0.6% - 약 5.0% 화합물-I의 1-90일간의 국소 안구 투여는 각막, 맥락막, 및/또는 망막에 부작용 또는 독성효과를 전혀 주지 않는다.

각막 노출의 저하는 후안부, 예를 들어 눈의 망막 또는 맥락막에서 활성제의 생체이용률 및 치료지수와 관련된다. 예를 들어, 시클로덱스트린을 포함하는 약 0.1% - 약 5.0% 화합물-I 제제가 적어도 30일 또는 60일 이상 동안 눈에 국소 투여될 때 각막 또는 눈의 기타 부분에 제1 활성제 또는 적합한 담체에 기인된 독성은 전혀 관찰되지 않는다.

한 실시양태에서, 약 0.4%(약 4 mg/mL)의 화합물-I 또는 이의 유리 염기, 및 시클로덱스트린을 포함하는 제제가 눈에 국소 투여될 때, 중심 맥락막 농도는 약 0.2 μM - 약 0.9 μM이고 활성제의 중심 망막 농도는 약 0.02 μM - 약 0.4 μM이고, 활성제의 방수 농도는 약 0.003 μM - 약 0.009 μM이고, 활성제의 각막 농도는 6 μM - 40 μM이다. 제제에 사용되는 시클로덱스트린은 예를 들어, 예를 제한하지 않으면서, 클렙토스® HPB 또는 캡티솔®이다.

일부 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 시클로덱스트린 기반 용액은 각막에서 농도를 감소시키면서 중심 맥락막 및 중심 망막에서 활성제의 생체이용률을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 시클로덱스트린 존재하에 제제화된 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 국소 전달은 등몰의 겔 드롭의 각막 농도에 비해 각막 농도를 약 5 - 약 15배 감소시킨다.

이론에 구속하고자 하는 것은 아니지만, 일부 실시양태에서, 후안부 생체이용률을 증가시키면서 저조한 안구 내성을 방지하기 위해서 각막 약물 노출을 감소시키는 병용 효과는 치료지수 및 환자에 상응하는 편의를 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 화합물-I 및 제2 활성제의 노출 시간은 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월)이다. 일부 실시양태에서, 투여 용법은 피험체에게 화합물-I 및 제2 활성제를 포함하는 제제를 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 국소 투여하는 여러 과정을 수반하며, 이때 제2 활성제는 별개의 제제로서 또는 화합물-I 제제의 일부로서 투여된다. 예를 들어, 투여 용법은 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회 또는 1일 4회의 제제 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 제2 활성제를 최대 90일 동안 격일(즉, 제1, 3, 5, 7일 등)로 1회, 2회, 3회 또는 4회의 제제 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 제2일-제90일에 1회 또는 2회 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 2회, 3회, 또는 4회, 이어서 2-90일 동안 1일 1회 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 2회, 3회, 또는 4회, 이어서 최대 90일 동안 격일(즉, 제1, 3, 5, 7일 등)로 1회, 2회, 3회 또는 4회 투여를 수반한다. 예를 들어, 한 투여 용법은 연속 1, 2, 3, 4, 또는 5일 동안 1일 1회 또는 2회 투여를 수반한다. 1일 2회 또는 3회 투여 용법일 경우, 피험체는 국소 안구 용량의 화합물-I 제제 및 제2 활성제를 제1일 및 제4일에 대략 4, 6, 또는 8시간 간격으로 받는다. 또 다른 실시양태에서, 피험체는 국소 안구 용량의 화합물-I 제제 및 제2 활성제를 연속 4일 동안 대략 4, 6, 또는 8시간 간격으로 받는다. 일부 실시양태에서, 피험체는 하루에 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 화합물-I 제제 및 제2 활성제를 연속 5일 동안 받는다. 또 다른 실시양태에서, 피험체는 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 화합물-I 제제 및 제2 활성제를 연속 5-90일 동안 받는다. 일부 실시양태에서, 피험체는 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 화합물-I 제제 및 제2 활성제를 적어도 연속 25일 동안 받는다. 한 실시양태에서, 피험체는 1회 또는 2회의 국소 안구 용량을 적어도 연속 90일 이상 받는다. 제2 활성제는 별개로 또는 화합물-I 제제의 일부로서 투여될 수 있다. 별개로 투여될 때, 제2 활성제, 또는 이의 약학적 염은 단독으로 제제로서 투여될 수 있다.

예를 들어, 약 1 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL TID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL QID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 10 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안의 투여 용법은 상기 문단에 기재된 연일 또는 격일을 수반하는 임의의 용법일 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 저용량(예를 들어, 1 mg/mL, 2 mg/mL, 3 mg/mL, 4 mg/mL, 또는 5 mg/mL)으로 투여될 때 QD, BID, TID, 또는 QID로 투여되고, 고용량(예를 들어, 6 mg/mL, 7 mg/mL, 8 mg/mL, 9 mg/mL, 또는 10 mg/mL)일 때 QD 또는 BID로 투여된다.

일부 실시양태에서, 1 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 1 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 누 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 2 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 2 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 3 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 3 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 4 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 4 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 5 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 5 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 6 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 6 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 7 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 7 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 8 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 8 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 9 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 9 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 10 mg/mL BID의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 10 mg/mL QD의 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I) 제제와 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안의 투여 용법은 상기 문단에 기재된 연일 또는 격일을 수반하는 임의의 용법일 수 있다.

본 출원은 약 30 - 90일 또는 4 - 6개월 동안 국소 투여될 때 우수한 내성을 갖는 히드록시프로필-베타-시클로덱스트린(HP-β-CD, 클렙토스® HPB) 또는 캡티솔®을 포함하는 시클로덱스트린 기반 용액을 제공한다. 일부 실시양태에서, 약 1.0% - 약 25% HP-β-CD 또는 캡티솔®을 포함하는 용액 내 약 0.005% - 약 5.0% w/v 화합물-I 또는 이의 유리 염기 및 제2 활성제의 1일 1회 또는 2회 투여는 피험체에서 우수한 내성을 갖는다.

일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I과 제2 활성제의 제제는 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 예를 들어, 약 0.2% - 약 1.0 %(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 약 0.1% - 1.2%(w/v)의 화합물-I 제제 및 제2 활성제를 포함하는 본 출원의 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 1일 1회(QD), 1일 2회(BID), 1일 3회(TID), 또는 1일 4회(QID) 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I 제제와 제2 활성제는 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 예를 들어, 약 0.2% - 약 1.0 %(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 약 0.1% - 1.2%(w/v)의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 1일 1회(QD), 1일 2회(BID), 1일 3회(TID), 또는 1일 4회(QID) 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다.

일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 화합물-I은 착화제, 예를 들어, 시클로덱스트린(예를 들어, 클렙토스® HPB (%))와 약 1:8의 비율로 착물로 형성되며, 이때 약 2% - 13 %(w/v) 시클로덱스트린(예를 들어, 클렙토스® HPB (%))이 제제에 첨가된다. 제제는 약 0.1% - 약 0.2% 완충액, 예를 들어, 10 mM 포스페이트 완충액을 추가로 포함할 수 있다. 제제의 요망하는 삼투압 농도는 약 200 - 약 300 mOsm이며, 이는 염, 예를 들어 염화나트륨으로 삼투압 농도를 달성하기에 충분한 양을 첨가하여 달성된다. 제제의 pH는 약 40℃ 이하에서 약 6.0이다. 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안의 투여 용법은 상기 문단에 기재된 연일 또는 격일을 수반하는 임의의 용법일 수 있다.

안과 현탁액

본 출원은 제제 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 제1 활성제(예를 들어, 화합물)의 현탁액을 제공한다. 또한, 본 출원은 제1 활성제, 제2 활성제 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 제1 활성제(예를 들어, 화합물-I)와 제2 활성제의 현탁액을 제공한다. 예를 들어, 화합물-I 현탁액 및 제2 활성제 현탁액은, 제한 없이, 완충제, 산 & 염기, 예를 들어, 제한 없이, HCl 및 NaOH를 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 현탁액은 완충제, 예를 들어, 제한 없이, 트로메타민(트리스)을 포함할 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기와 제2 활성제의 현탁액은 완충제, 예를 들어, 제한 없이, 트로메타민(트리스)을 포함할 수 있다. 화학식 Ⅱ 화합물 또는 화합물-I과 제2 활성제의 트로메타민 기반 현탁액은 눈에 국소 투여하기에 유용하다.

본 출원의 현탁액은 약 0.005% 내지 약 5.0% w/v의 화학식 I 또는 Ⅱ의 제1 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I을 포함한다. 일부 실시양태에서, 현탁액 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.005% - 약 0.01%, 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05% - 약 0.1%, 약 0.1% - 약 0.2%, 약 0.2% - 약 0.3%, 약 0.3% - 약 0.4%, 약 0.4% - 약 0.5%, 약 0.5% - 약 0.6%, 약 0.6% - 약 0.7%, 약 0.7% - 약 0.8%, 약 0.8% - 약 0.9%, 약 0.9% - 약 1.0%, 약 1.0 - 약 2.0%, 약 2.0 - 약 3.0%, 약 3.0 - 약 4.0%, 또는 약 4.0 - 약 5.0% w/v 이다. 일부 실시양태에서, 제제 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.1% - 약 1.2%, 약 0.2% - 약 1.2%, 약 0.3% - 약 1.2%, 약 0.4% - 약 1.2%, 0.1% - 약 1.1%, 약 0.2% - 약 1.1%, 약 0.3% - 약 1.1%, 약 0.4% - 약 1.1%, 0.1% - 약 1.0%, 약 0.2% - 약 1.0%, 약 0.3% - 약 1.0%, 약 0.4% - 약 1.0%, 0.1% - 약 0.8%, 약 0.2% - 약 0.8%, 약 0.3% - 약 0.8%, 약 0.4% - 약 0.8%, 0.1% - 약 0.6%, 약 0.2% - 약 0.6%, 약 0.3% - 약 0.6%, 약 0.4% - 약 0.6%, 0.1% - 약 0.5%, 약 0.2% - 약 0.5%, 약 0.3% - 약 0.5%, 약 0.4% - 약 0.5%, 0.1% - 약 0.4%, 약 0.2% - 약 0.4%, 약 0.3% - 약 0.4% w/v 이다. 일부 실시양태에서, 현탁액은 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)를 포함한다.

본 출원의 현탁액은 약 0.00001% - 약 5.0% w/v의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 본 출원의 현탁액은 약 0.00001% - 약 1.0%, 약 0.00001% - 약 0.1%, 약 0.00001% - 약 0.01%, 약 0.00001% - 약 0.001%, 약 0.00001% - 약 0.0002%, 또는 약 0.00001% - 약 0.0001% w/v의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 현탁액 내 제2 활성제의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.00001% - 약 0.0001%, 0.000012% - 약 0.0001%, 0.000014% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.0001%, 0.000018% - 약 0.0001%, 0.00002% - 약 0.0001%, 0.00003% - 약 0.0001%, 0.00004% - 약 0.0001%, 0.00005% - 약 0.0001%, 0.00006% - 약 0.0001%, 0.00007% - 약 0.0001%, 0.00008% - 약 0.0001%, 0.00009% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.00009%, 0.000018% - 약 0.00009%, 0.00002% - 약 0.00009%, 0.00003% - 약 0.00009%, 0.00004% - 약 0.00009%, 0.00005% - 약 0.00009%, 0.00006% - 약 0.00009%, 0.00007% - 약 0.00009%, 또는 0.00008% - 약 0.00009%이다. 일부 실시양태에서, 현탁액은 약 0.00001%, 0.00002%, 0.00003%, 0.00004%, 0.00005%, 0.00006%, 0.00007%, 0.00008%, 0.000081%, 0.000082%, 0.000083%, 0.000084%, 0.000085%, 0.000086%, 0.000087%, 0.000088%, 또는 0.000089% w/v의 제2 활성제를 포함한다.

본 출원의 현탁액은 약 0.5 μM, 약 0.6 μM, 약 0.7 μM, 약 0.8 μM, 약 0.9 μM, 약 1 μM, 약 2 μM, 약 3 μM, 약 4 μM, 약 5 μM, 약 6 μM, 약 7 μM, 약 8 μM, 또는 약 9 μM의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제의 농도는 약 1 μM 이다.

본 출원의 안과 현탁액은 통상적으로 포함되는 여러 가지 첨가제, 예를 들어 완충제(예를 들어, 포스페이트 완충액, 보레이트 완충액, 시트레이트 완충액, 타르트레이트 완충액, 아세테이트 완충액, 아미노산, 아세트산나트륨, 시트르산나트륨 등), 긴장제(예를 들어, 당류, 예를 들어 소르비톨, 글루코스 및 만니톨, 다가 알콜, 예를 들어 글리세린, 농글리세린, PEG 및 프로필렌 글리콜, 염화나트륨과 같은 염 등), 보존제 또는 방부제(예를 들어, 염화벤잘코늄, P-옥시벤조에이트 예를 들어 메틸 p-옥시벤조에이트 또는 에틸 p-옥시벤조에이트, 벤질 알코올, 펜에틸 알코올, 소르빈산 또는 이의 염, 티머로살, 클로로부탄올 등), 용해 보조제 또는 입자 안정제(예를 들어, 시클로덱스트린 및 이들의 유도체, 폴리비닐 피롤리돈과 같은 수용성 중합체, 틸록사폴, 폴리소르베이트, 폴록사머 등과 같은 계면활성제), pH 조정제(예를 들어, 염산, 아세트산, 인산, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화암모늄 등), 증점제(예를 들어, HEC, 히드록시프로필 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, HPMC, 카복시메틸 셀룰로스 및 이들의 염), 킬레이트제(예를 들어, 에데트산나트륨, 시트르산나트륨, 축합 인산나트륨 등), 및 제2 활성제 안정제(예를 들어, EDTA, 프로필 갈레이트, 및 이들의 조합)를 포함할 수 있다.

본 출원의 안과 현탁액은 안과 용액에 최적인 농도 이하로 선택된 약학적인 부형제를 포함한다. 본 출원의 부형제는, 예를 들어, 제한 없이, 인산나트륨 일수화물, 글리세린, 및 염화벤잘코늄(BAK)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.01 - 약 0.5%, 약 0.02 - 약 0.5%, 약 0.04 - 약 0.5%, 약 0.06 - 약 0.5%, 약 0.08 - 약 0.5%, 약 0.08 - 약 0.4%, 약 0.08 - 약 0.3%, 약 0.08 - 약 0.2%, 약 0.08 - 약 0.18%, 약 0.08 - 약 0.16%, 약 0.08 - 약 0.14%, 또는 약 0.08 - 약 0.12% EDTA를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.04%, 약 0.06%, 약 0.08%, 약 0.1%, 약 0.12, 약 0.14%, 약 0.16%, 약 0.18%, 또는 약 0.2% EDTA를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.1% EDTA를 포함한다.

일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.001 - 약 0.5%, 약 0.002 - 약 0.5%, 약 0.005 - 약 0.5%, 약 0.01 - 약 0.5%, 약 0.02 - 약 0.5%, 약 0.03 - 약 0.5%, 약 0.04 - 약 0.5%, 약 0.01 - 약 0.4%, 약 0.01 - 약 0.3%, 약 0.01 - 약 0.2%, 약 0.01 - 약 0.1%, 약 0.01 - 약 0.08%, 약 0.01 - 약 0.06% 프로필 갈레이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.01%, 약 0.02%, 약 0.03%, 약 0.04%, 약 0.05%, 약 0.06%, 약 0.07%, 약 0.08%, 약 0.09% 프로필 갈레이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.05% 프로필 갈레이트를 포함한다.

일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 화학식 I 또는 Ⅱ, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I, 및 제2 활성제를 포함하고, 트로메타민(즉, 트리스)을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.05% - 1% 트리스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.2% - 1.0% 트리스를 포함한다. 일부 실시양태에서, 안과 현탁액은 약 0.4% - 0.8% 트리스를 포함한다. 화합물-I 또는 이의 유리 염기 및/또는 제2 활성제의 트로메타민 기반 현탁액은 추가의 완충액 및 부형제, 예를 들어, 제한 없이, 포스페이트 완충액을 포함할 수 있다. 현탁액은 하나 이상의 계면활성제 및 유화제, 예를 들어, 제한 없이, 폴리소르베이트 80 또는 이의 등가의 부형제; 알킬 아릴 폴리에테르 알코올 유형의 하나 이상의 비이온계 액상 폴리머, 예를 들어, 제한 없이 틸록사폴; 및/또는 하나 이상의 친수성 비이온계 계면활성제, 예를 들어, 제한 없이, 폴록사머, 예를 들어 폴록사머 407을 추가로 포함할 수 있다.

본 출원은 트리스 완충액 내 부형제, 예를 들어, 제한 없이, 포비돈, 폴리소르베이트 80(PS80), 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 400, 틸록사폴, 폴록사머, 글리세린, 및 BAK 존재하에 제제화된 본 출원의 제제의 현탁액을 제공한다.

한 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 현탁액은 약 0.1 - 0.5% 포스페이트 완충액을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기와 제2 활성제의 현탁액은 약 0.1 - 0.5% 포스페이트 완충액을 포함한다. 일부 실시양태에서, 트로메타민 기반 현탁액의 pH는 pH 4-7, 예를 들어, pH 6.0이다. 일부 실시양태에서, 트리스에 제조된 현탁액은 약 0.5% - 약 2% 폴리소르베이트 80; 약 0.05 - 약 0.2% 틸록사폴; 및/또는 약 0.05% - 약 0.4% 폴록사머 407을 추가로 포함한다.

일부 상기 실시양태에서, 본 출원의 현탁액은 약 0.01 - 약 1%, 또는 약 1 - 약 2.0% w/v 글리세린을 추가로 포함한다. 특정 실시양태에서, 현탁액은 약 2% w/v 글리세린을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 현탁액은 약 0.001- 약 0.005% w/v 염화벤잘코늄(BAK)을 추가로 포함한다. BAK 양은 관찰되는 임의의 부작용에 따라 달라질 것이다. BAK는 안구 표면 세포에 손상을 줄 수 있어서 제제 내 양은 안구 세포층 완전성을 저해하고 독성을 증가시키지 않으면서 화합물-I의 안구 투과의 최적 수준을 달성하기 위해 달라질 수 있다.

일부 실시양태에서, 현탁액은 경우에 따라 완충액을 포함한다. 사용되는 경우 완충액은 예를 들어 인산나트륨 1염기, 인산 및 트리스 완충액일 수 있다. 현탁액 내 화합물-I 농도는 약 0.005% - 약 5.0% w/v이다. 추가의 완충액 없이 제조된 현탁액은 약 0.005% BAK 및 약 2% 글리세린을 추가로 포함하며 pH 6.0이다. 또 다른 실시양태에서 추가의 완충액 없이 제조된 현탁액은 약 1% 폴리소르베이트 80, 약 0.1% 틸록사폴, 약 0.2% 폴록사머 407, 약 0.005% BAK, 약 2.0% 글리세린을 포함하며 pH 6.0이다.

인산/트리스에 제조된 현탁액에서, 현탁액은 약 0.14% 인산, 약 0.2% 트리스 염기, 약 1.0% 폴리소르베이트 80, 약 0.005% BAK, 약 2.0% 글리세린을 포함하며 pH 6.0이다. 한 실시양태에서, 현탁액은 약 0.2% 틸록사폴을 추가로 포함한다. 현탁액의 pH는 약 pH 6.0 내지 7.2에서 달라진다.

트로메타민(트리스) 단독에 제조된 현탁액은 약 1% 폴리소르베이트 80, 약 0.1% 틸록사폴, 약 0.2% 폴록사머 407, 약 0.6% 트리스, 약 0.005% BAK, 및 약 2.0% 글리세린을 포함하며 pH 6.0이다. 또 다른 실시양태에서, 트리스에 제조된 현탁액은 약 1% 트리스, 약 0.45% NaCl, 약 0.025% EDTA, 약 0.2% HPMC, 약 0.1% 폴리소르베이트 80, 약 0.005% BAK를 포함하며 pH 6.0이다. 상기 현탁액에서, 1 N HCl 및/또는 1N NaOH가 적합한 pH로 적정하기 위해 사용된다.

본 출원의 현탁액은 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0%의 화학식 I 또는 Ⅱ의 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I, 및 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05 - 약 0.09%, 또는 약 0.09 - 약 0.2% w/v 인산나트륨 1염기 일수화물 및/또는 약 0.3% - 약 1.0%의 트리스를 포함한다. 별법으로, 본 출원의 현탁액은 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0%의 화학식 I 또는 Ⅱ의 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I, 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0%의 제2 활성제, 및 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05 - 약 0.09%, 또는 약 0.09 - 약 0.2% w/v 인산나트륨 1염기 일수화물 및/또는 약 0.3% - 약 1.0%의 트리스를 포함한다.

특정 실시양태에서, 현탁액은 약 0.14% 또는 약 0.2% w/v 트리스-완충액을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 현탁액은 약 0.6% 트리스 또는 약 1.0% 트리스에 제조된다. 또한, 당 업계에 잘 알려진 기타 등가의 완충 시스템이 본 출원의 현탁액에 사용된다. 한 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 화합물 또는 화합물-I은 약 0.4% 활성제, 약 5% 크레모포(Cremophor) RH40, 약 2.0% 글리세린, 및 약 0.005% BAK로서 제제화된다. 또 다른 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 화합물 또는 화합물-I은 약 0.4% 활성제, 약 0.005% 내지 약 5.0%의 제2 활성제, 약 5% 크레모포 RH40, 약 2.0% 글리세린, 및 약 0.005% BAK로서 제제화된다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 현탁액은 약 40℃ 이하에서 pH 값이 약 4.0 내지 약 7.5이다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 현탁액은 약 40℃ 이하에서 pH 값이 약 5.0 내지 약 7.0이다.

예를 들어, 본 출원의 현탁액은 약 40℃ 이하에서 pH 값이 약 6이다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제는 본원에서 기재된 실시양태에 따라 용액으로 제제화될 수 있고, 제2 활성제는 본원에서 기재된 실시양태에 따라 현탁액으로 제제화될 수 있다.

기타 실시양태에서, 제1 활성제는 본원에서 기재된 실시양태에 따라 현탁액으로 제제화될 수 있고, 제2 활성제는 본원에서 기재된 실시양태에 따라 용액으로 제제화될 수 있다.

안과 현탁액으로서 전달된 여러 혈관 조직에서 농도

일부 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 현탁액은 겔 드롭 형태(하기에 논의됨)로 전달된 제1 활성제의 농도와 비교하여 중심 맥락막과 중심 망막에서 제1 활성제의 유사한 농도를 제공한다.

일부 실시양태에서, 제2 활성제가 함유 또는 무함유된 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 트리스 기반 현탁액은 각막에서 농도를 감소시키고 각막 파괴 및/또는 질환(예를 들어, 각막 부종, 궤양, 이상 등)을 예방 및/또는 치료하면서 중심 맥락막 및 중심 망막에서 제1 활성제의 생체이용률을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 트리스 염기에 제제화된 화합물-I 및 이의 유리 염기의 국소 전달은 화합물-I의 각막 농도를 겔 드롭으로 전달되는 등몰의 화합물-I 또는 이의 유리 염기의 각막 농도와 비교하여 약 5-10x, 10-20x, 20-30x, 30-40x, 또는 약 50-100x 감소시킨다.

수용체 티로신 키나아제(RTK), 예를 들어, VEGFR의 억제를 증가시키기 위해서 후안부 생체이용률을 유지 또는 증가시키면서 저조한 안구 내성을 방지하기 위해 각막 약물 노출을 감소시키는 병용 효과는 치료지수 및 환자에게 상응하는 편익을 크게 증가시킨다. EGFR 조절제(예를 들어, 활성화제)와 같은 제2 활성제를 이용한 전안부 표면의 파괴의 추가적인 예방 및/또는 치료는 치료지수 및 환자에게 상응하는 편익을 더 향상시킨다.

본 출원의 약 0.005% - 약 5.0% w/v 화합물-I 현탁액의 30-90일 또는 4 - 6개월간 1일 1회 또는 2회 투여는 눈에 우수한 내성을 보인다.

겔 드롭

일부 실시양태에서, 본 출원의 안과 조성물 또는 제제는 겔 드롭으로 제제화된다. 겔 드롭 제제는 약 0.05% 이하의 인산나트륨 1염기 일수화물을 포함하여 계면활성제를 요구하지 않으면서 약 0.005% - 약 2.0% 화합물-I 및/또는 약 0.005% - 약 5%의 제2 활성제의 필요한 완충능 및 자유 유동성의 여과 가능한 제제를 제공한다.

본 출원의 겔 드롭 제제는 약 0.005% 내지 약 2.0% w/v의 화학식 I 또는 Ⅱ의 제1 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I을 포함한다. 겔 드롭 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.005% - 약 0.01%, 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05% - 약 0.1%, 약 0.1% - 약 0.2%, 약 0.2% - 약 0.3%, 약 0.3% - 약 0.4%, 약 0.4% - 약 0.5%, 약 0.5% - 약 0.6%, 약 0.6% - 약 0.7%, 약 0.7% - 약 0.8%, 약 0.8% - 약 0.9%, 약 0.9% - 약 1.0%, 또는 약 1.0% - 약 2.0% w/v일 수 있다. 일부 실시양태에서, 겔 드롭은 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 또는 약 2% w/v의 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ)를 포함한다.

본 출원의 겔 드롭은 약 0.00001% - 약 5.0% w/v의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 본 출원의 겔 드롭 제제는 약 0.00001% - 약 1.0%, 약 0.00001% - 약 0.1%, 약 0.00001% - 약 0.01%, 약 0.00001% - 약 0.001%, 약 0.00001% - 약 0.0002%, 또는 약 0.00001% - 약 0.0001% w/v의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 겔 드롭 내 제2 활성제의 농도는 국소 투여를 위해 약 0.00001% - 약 0.0001%, 0.000012% - 약 0.0001%, 0.000014% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.0001%, 0.000018% - 약 0.0001%, 0.00002% - 약 0.0001%, 0.00003% - 약 0.0001%, 0.00004% - 약 0.0001%, 0.00005% - 약 0.0001%, 0.00006% - 약 0.0001%, 0.00007% - 약 0.0001%, 0.00008% - 약 0.0001%, 0.00009% - 약 0.0001%, 0.000016% - 약 0.00009%, 0.000018% - 약 0.00009%, 0.00002% - 약 0.00009%, 0.00003% - 약 0.00009%, 0.00004% - 약 0.00009%, 0.00005% - 약 0.00009%, 0.00006% - 약 0.00009%, 0.00007% - 약 0.00009%, 또는 0.00008% - 약 0.00009% w/v일 수 있다. 일부 실시양태에서, 겔 드롭은 약 0.00001%, 0.00002%, 0.00003%, 0.00004%, 0.00005%, 0.00006%, 0.00007%, 0.00008%, 0.000081%, 0.000082%, 0.000083%, 0.000084%, 0.000085%, 0.000086%, 0.000087%, 0.000088%, 또는 0.000089% w/v의 제2 활성제를 포함한다.

본 출원의 겔 드롭 제제는 약 0.5 μM, 약 0.6 μM, 약 0.7 μM, 약 0.8 μM, 약 0.9 μM, 약 1 μM, 약 2 μM, 약 3 μM, 약 4 μM, 약 5 μM, 약 6 μM, 약 7 μM, 약 8 μM, 또는 약 9 μM의 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제의 농도는 약 1 μM 이다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 겔 드롭 안과 조성물은 긴장제로서 글리세린을 포함한다. 본 출원의 일부 실시양태는 만니톨을 포함하는 안과 조성물을 제공한다. 화합물-I의 용해도에 어떤 변화를 방지하는 양의 글리세린 또는 만니톨, 및 약 2.0 - 약 2.5% 수준의 글리세린은 포스페이트 농도에 따라 약 225 - 약 300 mOsm/kg의 삼투압 농도를 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 글리세린은 겔 드롭 안과 조성물의 약 2%이고 포스페이트 농도는 약 0.05%이다. 본 출원의 글리세린 및 포스페이트 농도는 안과 조성물의 긴장성 수준이 약 240 mOsm/kg이 되는 양이다.

본 출원의 겔 드롭 안과 조성물은 염화벤잘코늄(BAK)을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, BAK 함량은 미생물 오염에 대해 안과 조성물을 보존하기에 충분한 약 0.005%이다. 본 출원의 일부 실시양태에서, BAK는 1회용 멸균 제품에 안과 조성물을 사용하는 데에는 요구되지 않는다.

일부 실시양태에서, 화합물-I의 겔 드롭 안과용 제제는 약 0.005% - 약 2.0% 화합물-I 또는 이의 유리 염기, 약 0.05% 인산나트륨, 긴장성 조정제로서 약 2% 글리세린, 보존제로서 약 0.005% BAK, 비히클로서 물(정제수, 즉 증류수, 또는 탈이온수), 및 pH를 6.0으로 조정하기 위한 수산화나트륨을 포함한다. 한 실시양태에서, 기타 부형제는 첨가되지 않는다.

본 출원의 겔 드롭은 약 0.005% - 약 2.0%의 화학식 I 또는 Ⅱ의 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I, 및 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05 - 약 0.09%, 또는 약 0.09 - 약 0.2% w/v 인산나트륨 1염기 일수화물을 포함한다. 특정 실시양태에서, 겔 드롭은 약 0.05%, 약 0.05-0.2%, 또는 약 0.2% w/v 인산나트륨 1염기 일수화물 완충액을 포함한다. 또한, 당 업계에 잘 알려진 기타 등가의 완충 시스템이 본 출원의 겔 드롭에 사용된다. 한 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기는 약 0.4% - 약 2.0% 제1 활성제, 약 5% 크레모포 RH40, 약 2.0% 글리세린, 및 약 0.005% BAK로서 제제화된다.

한 실시양태에서, 화합물-I의 겔 드롭은 약 0.3% - 약 2.0%(3-20 mg/mL) 화합물-I, 약 0.05% - 약 0.2% 인산나트륨, 및 약 2% 글리세린을 포함한다. 조성물의 pH는 pH 5.0 - 7.0이다.

화합물-I 및 제2 활성제의 겔 드롭 안과용 제제는 약 0.005% - 약 2.0% 화합물-I 또는 이의 유리 염기, 약 0.00001% - 약 5%(예를 들어, 약 0.00001% - 약 0.0002%, 또는 약 0.00001% - 약 0.0001%) 제2 활성제, 약 0.05% 인산나트륨, 긴장성 조정제로서 약 2% 글리세린, 보존제로서 약 0.005% BAK, 비히클로서 물(정제수, 즉, 증류수, 또는 탈이온수), 및 pH를 6.0으로 조정하기 위한 수산화나트륨을 포함한다. 한 실시양태에서, 기타 부형제는 첨가되지 않는다.

본 출원의 겔 드롭은 약 0.005% - 약 2.0%의 화학식 I 또는 Ⅱ의 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 예를 들어, 화합물-I, 약 0.00001% - 약 5%(예를 들어, 약 0.00001% - 약 0.0002%, 또는 약 0.00001% - 약 0.0001%) 제2 활성제, 및 약 0.01% - 약 0.05%, 약 0.05 - 약 0.09%, 또는 약 0.09 - 약 0.2% w/v 인산나트륨 1염기 일수화물을 포함한다. 특정 실시양태에서, 겔 드롭은 약 0.05%, 약 0.05-0.2%, 또는 약 0.2% w/v 인산나트륨 1염기 일수화물 완충제를 포함한다. 또한, 당 업계에 잘 알려진 기타 등가의 완충제가 본 출원의 겔 드롭에 사용된다. 한 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기는 약 0.4% - 약 2.0% 제1 활성제, 약 0.005% - 약 5.0% 제2 활성제, 약 5% 크레모포 RH40, 약 2.0% 글리세린, 및 약 0.005% BAK로서 제제화된다.

한 실시양태에서, 화합물-I의 겔 드롭은 약 0.3% - 약 2.0%(3-20 mg/mL) 화합물-I, 약 0.005% - 약 5.0% 제2 활성제, 약 0.05% - 약 0.2% 인산나트륨, 및 약 2% 글리세린을 포함한다. 조성물의 pH는 pH 5.0 - 7.0이다.

본 출원은 포스페이트 완충액 내 부형제, 예를 들어, 예를 제한하지 않지만, 포비돈, 폴리소르베이트 80(PS80), 폴리에틸렌글리콜(PEG) 400, 틸록사폴, 폴록사머, 글리세린, 및 BAK의 존재하에 제제화된 본 출원의 제제(예를 들어, 제1 활성제 및 제2 활성제)의 겔 드롭을 제공한다.

점안제(Eye drop)

수 분의 작용 개시로 환자에게 약학적으로 허용 가능한 편리하고 안전한 약물 전달 시스템의 형태인 점안제로서, 제1 활성제, 예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 및/또는 제2 활성제, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합을 포함하는 제제가 본원에서 개시된다. 미국 연방 규제 관행에 따른 치료법에 사용되는 표준 점안제는 멸균되며, pH가 약 6.0-7.4이며, 1회 이상 사용되는 경우 보존제를 포함하지만 개봉 후 제한된 대개 1개월의 저장 수명을 갖는다. 점안제가 멸균의 1회용만의 단위 용량 분배기에 포장되는 경우, 보존제는 생략될 수 있다.

점안 제제의 한 방법은 화학식 I 또는 Ⅱ의 개시된 화합물(예를 들어, 99% 순도 이상) 및/또는 제2 활성제의 가장 순수한 형태를 포함하고, 화합물 및/또는 제2 활성제는 생리 pH 및 삼투압 농도에 맞게 조정하기 위해 완충액 및 긴장성 조정제와 혼합된다. pH를 유지 또는 조정하기 위한 완충제의 예는 아세테이트 완충액, 시트레이트 완충액, 포스페이트 완충액 및 보레이트 완충액을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 긴장성 조정제의 예는 염화나트륨, 만니톨 및 글리세린이다. 일부 실시양태에서, 기타 약학적으로 허용 가능한 성분도 첨가된다.

제제화된 용액은 그 다음 각각이 단위 투여에 적합한 다수의 개별, 멸균 일회용 카트리지, 또는 단위 투여용 단일 카트리지로 분액된다. 이러한 1회용 단일 카트리지는, 예를 들어 용기 한 말단에 용기 내용물을 그들로부터 분배하기 위해서 종축을 따라 방사방향으로 눌러지는 측벽을 가진 용기가 구비된 원뿔형 또는 원통형의 특정 부피 분배기이다.

본 출원은 예를 들어, 점안기를 가진 플라스틱병으로서 다회 용량 형태 또는 단일 용량 형태로 포장된 안과 점안 용액/현탁액을 제공한다. 다회 용량형 제제에서, 용기 개봉 후 세균 오염을 방지하기 위해 보존제가 요구된다. 적합한 보존제는 염화벤잘코늄, 티머로살, 클로로부탄올, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 페닐에틸 알코올, 에데트산이나트륨, 소르브산, 폴리쿼테뮴-1, 또는 당업자에게 공지된 기타 제제, 및 본 출원에 사용이 고려되는 모든 것을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 상기 보존제는 통상적으로 0.001 내지 약 1.0% w/v 수준으로 이용된다.

이론에 구속하고자 하지는 않지만, 점안제 내 본 출원의 제제는 약물의 펄스 진입을 제공한다. 화합물-I이 후안부에 접근하는 경로는 각막을 통한 직접적인 확산과 방수, 유리체액, 망막 및 궁극적으로 맥락막을 통한 후속적인 확산에 의한 것이 아니다. 오히려, 화합물-I 화합물은 안구를 통과하기보다는 돌아가는 둘레 경로를 이용하여 국소 점적 주입 후 후안부에서 뛰어난 생체이용률을 달성한다.

특정 임상 조건에서, 점안 용액/현탁액은 다른 성분의 자극을 약화시키고 임상 반응을 용이하게 하기 위해서 다른 약학 제제와 함께 제제화될 수 있다. 이러한 제제는 혈관수축제, 예를 들어 페닐에프린, 옥시메타졸린, 나프타졸린 또는 테트라히드로졸린; 비만세포 안정제, 예를 들어 올로파타딘; 항히스타민제, 예를 들어 아젤라스틴; 항생제, 예를 들어 테트라사이클린; 스테로이드 항염증제, 예를 들어 베타메타손; 비스테로이드 항염증제, 예를 들어 디클로페낙; 면역조절제, 예를 들어 이미퀴모드 또는 인터페론; 및 항바이러스제, 예를 들어 발락시클로버, 시도포버 및 트리플루리딘을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 상기 기재된 목적에 사용되는 용량은 달라지지만, 눈에 불편함, 가려움, 자극, 또는 통증을 억제하기에 유효한 양이다. 조성물이 국소 투여될 때, 단위 투여량으로서 1일 1회 내지 4회 투여되는 1 내지 4방울의 조성물로, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 "약학적 유효량"은 일반적으로 0.05 mg/mL 내지 약 10 mg/mL의 농도 범위일 수 있고, 제2 활성제의 "약학적인 유효량"은 일반적으로 0.05 mg/mL 내지 약 10 mg/mL의 농도 범위일 수 있다. 안약 전달의 가장 보편적인 방법은 각막으로의 점적 주입이다(즉, "점안제").

필수적인 요건은 제제가 멸균되어야 하고 멸균 환경에서 제조되어야 한다는 것이다. 안과 용액/현탁액에 사용하기 위해 개시된 이상적인 화합물은 정상 안구의 pH 및 긴장성에서 수성 매질에서 가용성이고/거나 혼화성이어야 한다. 게다가, 게시된 화합물은 안정하고, 비독성이고, 지속 작용성이며 깜박거림 및 눈물 흘림에 의해 약물 농도의 희석에 반대 작용하기에 충분히 강력해야한다.

제형

본 출원의 제제는 안과 용도에 적합하다. 한 실시양태에서 제제는 용액이다. 본 출원의 용액은 투명한 무색, 멸균, 등장성, 완충 수성 자유 유동성 액체 제제일 수 있다. 약품(예를 들어, 제1 활성제 및/또는 제2 활성제)은 pH가 대략 6.0이며 +5℃에서 저장될 수 있다. 약품은 점적기 팁(tip)과 캡(cap)을 가진 반투명 안과 분배기로 이루어진 용기 폐쇄 시스템으로 제공될 수 있다.

일부 실시양태에서, 화합물-I의 안과 용액 또는 현탁액의 임상 농도는 약 0.1 mg/mL 이하, 약 0.2 mg/mL 이하, 약 0.2 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.3 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.4 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.5 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.6 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.7 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.8 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.9 - 약 1.0 mg/mL, 약 1.0 - 약 2.0 mg/mL, 약 2.0 - 약 3.0 mg/mL, 약 3.0 - 약 4.0 mg/mL, 약 4.0 - 약 5.0 mg/mL, 약 5.0 - 약 6.0 mg/mL, 약 5.0 - 약 10.0 mg/mL, 약 10 - 약 20 mg/mL, 약 20 - 약 30 mg/mL, 약 30 - 약 40 mg/mL, 또는 약 40 - 약 50 mg/mL이다.

기타 실시양태에서, 화합물-I 및 제2 활성제 안과 용액 또는 현탁액의 임상 농도는 독립적으로 약 0.1 mg/mL 이하, 약 0.2 mg/mL 이하, 약 0.2 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.3 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.4 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.5 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.6 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.7 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.8 - 약 1.0 mg/mL, 약 0.9 - 약 1.0 mg/mL, 약 1.0 - 약 2.0 mg/mL, 약 2.0 - 약 3.0 mg/mL, 약 3.0 - 약 4.0 mg/mL, 약 4.0 - 약 5.0 mg/mL, 약 5.0 - 약 6.0 mg/mL, 약 5.0 - 약 10.0 mg/mL, 약 10 - 약 20 mg/mL, 약 20 - 약 30 mg/mL, 약 30 - 약 40 mg/mL, 또는 약 40 - 약 50 mg/mL이다.

본 출원의 한 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 강도는 약 0.005% - 약 5.0%(약 0.5 - 약 50 mg/mL)이다. 병리적 맥락막 및 망막 신혈관형성에 대한 본 출원의 제제의 요망하는 약리학적 활성(또는 농도)는 약 0.005%, 약 0.05%, 약 0.1%, 약 0.2%, 약 0.3%, 약 0.4%, 약 0.5%, 약 0.6%, 약 0.7%, 약 0.8%, 약 0.9%, 약 1.0%, 약 2.0%, 약 3.0%, 약 4.0%, 또는 약 5.0% w/v의 화합물-I을 포함하는 제제의 안구 투여 후에 달성된다. 본 출원은 최적 용량(예를 들어, 약 0.005% 내지 약 5.0%)으로 국소 안구 투여 후 약리학적 활성 농도가 중심 맥락막 표적 조직에서 달성되고 유지되도록 제공한다. 한 실시양태에서 제1 활성제(화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)는 약 0.005 - 약 5.0% w/v 농도로 제제화되고, 제2 활성제(니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합)는 약 0.005 - 약 5.0% w/v 농도로 제제화되고, 조합물은 눈마다 1일 1회 또는 2회 연속 60일 이상 투여된다. 국소 투여 후 관찰되는 혈장 농도는 전신에 독성을 가져올 것으로 예상되는 수준보다 실질적으로 낮다.

<표 2>

일부 실시양태에서, 화합물-I은 약 100nM 미만의 IC₅₀으로, 여러 가지 혈관형성 촉진(proangiogenic) 성장인자 수용체에 대한 티로신 키나아제 활성을 강력하게 억제한다(표 3 참조). 또한, 화합물-I은 고친화성 VEGF 수용체, 예를 들어, VEGFR-1/Flt-1을 차단하지만, 효능이 낮다(약 122 nM(69.41 ng/mL)의 IC₅₀).

<표 3>

VEGFR 억제가 혈관 투과성을 감소시키고 추가의 신생혈관 성장을 억제하는 데 필수적인 것으로 보이지만, 다른 성장인자 신호전달 경로(예를 들어, PDGF 및 안지오포이에틴/Tie2)의 억제와 동시에 VEGF 신호전달의 억제는 고유한 치료 성과와 관련될 수 있다. 신호전달 경로의 더 광범위한 억제의 치료 성과는 후안부에 새로이 확립된 병리적 혈관의 퇴행에 기여할 수 있다.

일부 실시양태에서, 약 300 nM(약 170.67 ng/mL)의 화합물-I은 VEGFR-2 키나아제 기능을 억제한다(표 4 참조). 또한, FGFR1-3, Tie-2, 및 EphB-4를 포함한 유사 세트의 혈관형성 촉진 성장인자 수용체의 실질적인 차단이 관찰된다. 예상 외의 결과는 약 300 nM 농도의 화합물-I이 VEGFR-2 키나아제 기능을 억제한다는 것인데, 이는 국소 안구 전달 후 5일에 중심 맥락막과 망막에서 발견되는 전형적인 범위 내에 해당한다.

<표 4>

<표 5>

약물 성분 및 약품의 개요

약품: 임상 연구용 화합물-I 및/또는 제2 활성제 안과용 제제는 0.05% - 1.0%의 화합물-I과 약 0.00001% - 약 5%(예를 들어, 약 0.00001% - 약 0.0002%, 또는 약 0.00001% - 약 0.0001%)의 제2 활성제의 투여 강도로 제조된다. 일부 실시양태에서, 제제 내 화합물-I 투여량은 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.6%, 0.8%, 또는 1.0%이다. 일부 실시양태에서, 제제 내 제2 활성제 투여량은 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.6%, 0.8%, 1.0%, 2.0%, 3.0%, 4.0% 또는 5.0%이다. 화합물-I 및/또는 제2 활성제 안과용 제제(용액 또는 현탁액)는 임상적 설정에서 1일 1회용 눈 국소 투여용이다. 제1 및 제2 활성 성분 이외에, 일부 실시양태에서, 약품은 보존제로서 약 0.005% BAK, 비히클로서 정제수를 추가로 포함할 수 있고, pH는 수산화나트륨으로 pH6으로 조정된다.

인산나트륨 기반 겔 드롭

안과에서 인산나트륨 기반 제제(표 6에 열거) 내 화합물-I의 이점은 인산나트륨과 같은 완충액에서 API의 자가 겔화 특성에 기인한다. 투명 용액으로부터 화합물-I의 자가 형성성 요변성 겔은 인산나트륨 내 제1 활성제의 농도를 증가시킴으로써 자발적으로 형성된다. 포스페이트 완충액 내 제1 활성제 농도가 과포화된 상태에 도달하면, 화합물-I의 불용성 입자가 겔 안에서 관찰된다.

현 상태의 기술에서 눈 표면에 점도가 증가된 겔의 적용은 각막 체류 시간을 증가시킬 것으로 예측된다. 각막 체류 시간의 증가는 차례로 안구 약물 흡수를 촉진한다. 결과적으로, 점성 겔의 안구 내 약물 농도는 비점성 제제, 예를 들어 물과 유사한 용액에 비해 증가된다. 점도를 증가시키는 한 가지 방법은 여러 가지 점도 상승 부형제, 예를 들어 카복시메틸셀룰로스를 사용하는 것이며, 이는 국소 안구 투여 후 다양한 약물 성분의 안구 내 흡수를 효과적으로 증가시킨다. 본 출원은 임의의 점도 상승 부형제가 전혀 없이 형성되는 화합물-I 및/또는 제2 활성제의 요변성 겔을 제공한다. 예를 들어, 화합물-I 또는 화합물-I 및 제2 활성제가 간단한 완충액, 예를 들어 인산나트륨에 용해될 때 요변성 겔이 형성된다. 임의의 점도 상승 부형제가 전혀 없이 형성되는 요변성 겔은 겔 드롭으로 제제화된다.

본 출원은 후안부 조직에 화합물-I의 용량 의존적이고 투여 빈도 의존적인 전달을 제공한다.

본 출원의 겔 드롭 제제(표 6에 열거됨)는 여러 가지 측면, 예를 들어 제1 활성제 농도, 인산나트륨 농도, 긴장제(글리세린) 또는 보존제(염화벤잘코늄/BAK)의 유무, 가용화 계면활성제(폴리소르베이트 80, 틸록사폴, 및/또는 폴록사머), 및 pH 사이에서 서로 상이하다.

트로메타민 기반 현탁액

본 출원은 트로메타민 기반 제제 내 화합물-I 및/또는 제2 활성제의 현탁액을 제공한다. 일부 실시양태에서, 트로메타민 기반 제제 내 화합물-I 및/또는 제2 활성제의 현탁액은 불용성 형태인 제1 활성 약물 성분을 95% 이상 갖는다. 이 특징은 겔 드롭(제1 활성제의 농도가 증가하면서 완전히 가용성 상태는 아닌 겔 드롭(겔)) 또는 시클로덱스트린 기반 제제 내 화합물-I의 가용성 또는 반가용성 상태와 구별된다. 화합물-I의 트로메타민 기반 제제는 제1 활성제 농도를 증가시킴에 따라 혼탁도가 증가한다. 가용성 및 불용성 제1 활성제 구성요소의 조합인 화합물-I 및/또는 제2 활성제 현탁액을 눈에 국소 점적 투여하는 것은 안전성/내성 및 효능 모두와 관련하여 유익하다.

본 출원은 여러 혈관형성 촉진 RTK에 대한 세포 IC₅₀의 10-1000x 농도로 표적 조직에 전달되는 트로메타민 기반 현탁액 내 화합물-I을 제공한다. 예를 들어, 표 7을 참조한다.

국소 화합물-I의 각막 안정성 및 내성은 각막 표면에 적용된 가용성(불용성과 반대) 제1 활성제의 양 및 결과적인 각막 조직 농도의 직접적인 결과이다. 일부 실시양태에서, 트로메타민 기반 현탁액의 국소 안구 투여를 받는 피험체는 인산나트륨 기반 겔 드롭의 등몰 제제와 비교하여 제제 내 제1 활성제 농도의 더 높은 수준에까지 내성을 보일 수 있다. 국소 화합물-I의 안정성 및 내성은 또한 EGFR 억제에 의해 유발되는 각막 파괴 또는 질환을 예방 또는 치료하는 EGFR의 조절제(예를 들어, 활성화제)인 제2 활성제, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합의 투여 결과이다.

<표 6>

<표 7>

본 출원은 트로메타민 기반 현탁액의 투여시 후안부에서 화합물-I의 안구 생체이용률을 제공한다. 후안부에서 화합물-I의 안구 생체이용률은 투여된 약물, 화합물-I의 총량(불용성 및 가용성, 표 7 참조)에 직접적으로 비례한다. 불용성 약물 입자는 전안부 조직에 쉽게 이용되지 않지만, 화합물-I의 본래 고유한 물리화학적 특성은 불용성 및 가용성 구성요소 모두가 후안부 조직, 예를 들어 맥락막 및 망막에 진입할 수 있게 한다. 결과적으로, 등가량의 제1 활성제를 포함하는 겔 드롭 제제로 달성되는 것보다 훨씬 높은 약물 농도가 트로메타민 기반 현탁액으로 달성된다. 따라서, 트로메타민 기반 현탁액은 a) 향상된 각막 내성 및 b) 신생혈관성(습성) AMD를 치료하기 위한 1차 표적 조직인 후안부, 특히 맥락막에 유지 또는 증가된 생체이용률을 제공한다. 게다가, EGFR의 억제에 의해 유발된 각막 파괴 또는 질환을 예방 또는 치료하는 조절제(예를 들어, 활성화제)인 제2 활성제, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합은 화합물-I의 투여와 잠재적으로 연관된 각막 파괴를 예방 및/또는 치료함으로써 화합물-I의 치료지수를 증가시킨다.

시클로덱스트린 기반 용액

1 내지 4개의 결합을 통해 연결된 6 내지 8개의 덱스트로스 단위(α-, β-, 및 γ-CD)로 구성된 환형 올리고당인 시클로덱스트린은 비교적 불용성인 약물을 위한 가용화제로서의 작용능으로 잘 알려져 있다. 문헌(Stella & He, Cyclodextrins, Toxicol . Pathol ., 36: 30-42 (2008))을 참조한다.

일부 실시양태에서, 제안된 임상 제제, 화합물-I 또는 이의 유리 염기와 제2 활성제 안과 용액에서 1:6 몰 비율 이상의 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린(HP-β-CD, 클렙토스® HPB로도 알려짐) 또는 1:2 비율 이상의 설포부틸에테르-β-시클로덱스트린(SBE-β-CD, 캡티솔®로도 알려짐)은 0.1-1.2% 화합물-I의 임상적 용량 강도(dose strength)를 충족시키는 용해도를 제공한다.

일부 실시양태에서, 화합물-I 또는 이의 유리 염기 및/또는 제2 활성제의 시클로덱스트린 기반 용액은 국소 안구 투여시 균일한 용액으로 제1 활성제의 용해도를 향상시킬 뿐만 아니라, 신규하고 이전에 관찰되지 않은 특성으로 후안부에서 제1 활성제의 상당히 증가된 치료지수를 갖는다. 본 출원의 화합물-I 및/또는 제2 활성제의 용액은 높은 후안부 농도를 유지하기 위하여 화합물-I의 전안부 노출을 감소시킴으로써 용액 내 제1 활성제의 농도를 증가시키고 그의 전달 빈도를 증가시킨다. 상기 유익한 특성 두 가지 모두는 소수성 약물과 친수성 착물을 형성하는 시클로덱스트린의 공지된 특성과 관련된다. 문헌(Stella & He, Cyclodextrins, Toxicol. Pathol ., 36: 30-42 (2008))을 참조한다. 제1 활성제와 조합물로서 제2 활성제의 투여는 전신질환(예를 들어, 암, 당뇨병), 안구 질환, 또는 제1 활성제, 예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 투여에 의한 EGFR의 억제에 의해 유발되는 각막 파괴 또는 질환을 예방함으로써, 제1 활성제, 예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 치료지수를 증가시킨다.

화합물-I 또는 이의 유리 염기 및/또는 제2 활성제와 제제화될 때, 시클로덱스트린은 물과 유사한 점도를 나타내는 투명한 무색 용액을 형성할 수 있다. 국소 안구 투여 후, 화합물-I/시클로덱스트린 착물은 약리학적으로 불활성이며 대사적으로 불활성인 외관을 갖는다. 화합물-I/시클로덱스트린 착물은 시클로덱스트린이 제1 활성제로부터 자발적으로 해리될 때까지 각막 내성을 제공하여 후안부, 예를 들어, 맥락막 및 망막에서 그의 의도하는 작용 부위에서 높은 농도의 화합물-I을 이용 가능하게 한다.

일부 실시양태에서, 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액은 유사한 약물 농도의 겔 드롭 제제에 비해 화합물-I의 각막 노출을 낮춘다. 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액의 사용은 겔 드롭의 등몰 제제의 투여와 비교하여 각막 농도를 약 10x 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 시클로덱스트린 기반 용액으로서 약 0.2 - 2.0%, 예를 들어, 약 0.6% 화합물-I의 국소 안구 투여 20-30일 후에 바람직하지 않은 결과는 시험 제품 또는 비히클에 기인하지 않는다. 본 출원은 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액이 국소 적용될 때 후안부 표적 조직, 예를 들어 중심 맥락막 및 중심 망막 내에 화합물-I을 더 높은 농도로 제공한다. 일부 실시양태에서, RTK 억제를 증가시키기 위해 후안부 생체이용률을 증가시키면서 저조한 안구 내성을 방지하기 위하여 각막 약물 노출을 감소시키는 병용 효과는 치료지수 및 치료받은 피험체에게 상응하는 이점(들)을 상당히 증가시킨다. 기타 실시양태에서, RTK 억제를 증가시키기 위해 후안부 생체이용률을 증가시키면서 저조한 안구 내성을 방지하기 위하여 각막 약물 노출을 감소시키고 제2 활성제에 의한 각막 파괴 또는 질환을 예방 또는 치료하는 병용 효과는 치료지수 및 치료받은 피험체에게 상응하는 이점(들)을 증가시킬 수 있다.

본 출원은 상당한 노출 감소(약 10-100X 또는 1-2 log 감소)로 인해 화합물-I의 현탁액 기반 제제(실시예 3 참조) 및 시클로덱스트린 제제 모두에 치료 범위(therapeutic window)를 확장시킨다. 노출 감소는 각막 안정성/내성을 향상시키고, 이는 국소 투여되는 화합물-I의 더 높은 농도 또는 투여 빈도를 가능하게 한다. 더 높은 농도는 화합물-I이 눈 뒤의 표적 조직 농도가 더 높이 도달할 수 있게 해주고, 이는 화합물-I의 치료 효능을 향상시킨다.

일부 실시양태에서, 안과 겔 드롭의 국소 안구 투여는 높은 각막 조직 노출(≥100uM) 및 상응하는 바람직하지 않은 전안부에서의 관찰결과, 예를 들어 불편함, 각막 및 결막 염증, 각막 상피 미란 및/또는 박화 및 변성과 관련된다. 반면, 화합물-I 안과 용액의 반복된 국소 안구 투여는 등몰 용량의 안과 겔 드롭보다 대략 5-10 배 더 낮은 각막 노출을 가져오며, 바람직하지 않은 임상 또는 조직병리적 결과가 없다. 또한, 화합물-I 안과 용액으로 국소 안구 투여는 등몰 용량의 안과 겔 드롭에 비해 중심 맥락막에서 동일하거나 더 높은 표적 치료 노출을 달성한다. 종합적으로, 물리화학적 안정성 향상과 함께, 동시에 후안부 표적 조직에 약물 전달을 유지 또는 촉진하면서 감소된 각막 노출과 상응하는 향상된 안구 내성의 조합은 안과 겔 드롭에 비해 피험체에게 더 큰 이점을 제공할 것이다.

시클로덱스트린 기반 용액 내 국소 안구 화합물-I을 이용한 1 내지 5일의 PK 결과

본 출원은 국소 안구 투여 후 화합물-I의 여러 제제 및 투여 용법의 안구 약동학을 제공한다. 화합물-I의 9가지 상이한 국소 안구용 제제 내 3가지 투여 강도를 1일 1회(q.d.) 또는 1일 2회(b.i.d.) 연속 1, 2, 3, 4, 또는 5일 동안 투여에 사용한다. 각 피험체는 양변위 피펫을 이용하여 3가지 화합물-I 제제 또는 비히클 제제 중 하나의 30 ㎕ 좌우 국소 안구 용량을 받는다.

각 화합물-I 제제의 조성은 표 8A에 기재한다. 모든 용량은 예정된 투여 시간 ± 1시간 내에 투여하였다. 제1일에, 그룹 1, 2, 4-6, 8, 10, 11, 13, 15, 및 17은 1일 또는 4일 동안 1회 용량(q.d.)을 받는다. 1 내지 4일에, 그룹 3, 7, 9, 12, 14, 및 16은 7:00 AM 및 3:00 PM에 대략 8시간 간격으로 4일 동안 b.i.d로 투여받는다. 일부 피험체는 비히클 단독 제제를 연속 5일 동안 b.i.d 투여받는다.

일부 실시양태에서, 안구 시료 채취는 제1일 용량에 대해 투여 후 약 0.5, 약 1, 약 2, 약 3, 약 4, 약 5, 약 6, 약 7, 약 8, 약 9, 약 10, 약 11, 약 12, 약 13, 약 14, 약 15, 약 16, 약 17, 약 18, 약 19, 약 20, 약 21, 약 22, 약 23, 또는 약 24시간에 실시한다. 방수, 각막, 중심 및 주변 망막, 및 중심 및 주변 맥락막 시료를 수집하여 치료 효과를 모니터한다. 방수, 각막, 중심 망막, 및 중심 맥락막 시료를 분석한다.

표 8A-C는 시클로덱스트린 기반 용액 내 국소 안구 화합물-I을 이용한 1 내지 5일의 PK 결과를 열거한다.

<표 8A>

표 8B는 방수, 망막, 맥락막, 및 각막에서 화합물-I의 평균 농도(LLOQ(Lower Limit of Quantitation): 최저 정량 한계; LLOQ는 허용 가능한 정밀도 및 정확도로 정량될 수 있는 최저 분석물 농도이다)를 열거한다.

<표 8B>

표 8C는 그룹 1 내지 10에 대해 방수, 중심 및 주변 망막, 중심 및 주변 맥락막, 및 각막에서 화합물-I의 평균 안구 조직 농도를 요약하여 열거한다. 임의 값 <LLOQ는 통계 계산에서 제외시켰다. 주어진 시점에 대해 모든 값이 <LLOQ일 때 <LLOQ를 평균으로 보고한다.

<표 8C>

시클로덱스트린 기반 용액 내 국소 안구 화합물-I을 이용한 5일의 PK 결과

본 출원은 안구 용량 투여 후 히드록시프로필-β-시클로덱스트린("HDβCD")을 포함하는 화합물-I의 국소 안구 용액의 다양한 투여 용법의 안구 약동학을 제공한다. 화합물-I의 다양한 국소 안구용 제제는 1일 1회(q.d.) 또는 1일 2회(b.i.d.) 연속 4 또는 5일 동안 투여한다. 각 피험체는 4가지 화합물-I 투여 강도 중 하나의 30 ㎕ 좌우 국소 안구 용량을 받는다.

모든 용량은 제1일에 받은 일부 피험체를 제외하고 예정된 투여 시간 ± 1시간 내에 투여하였다. 화합물-I의 투여 후 안구 시료 채취는 피험체에 대해 제5일에 최초 1일 용량 후 1시간에 실시하고, 그 외 몇몇에서 안구 시료 채취는 제4일에 최초 1일 용량 후 24시간에 실시한다.

방수, 각막, 중심 및 주변 망막, 및 중심 및 주변 맥락막 시료를 수집한다. 각막, 중심 망막, 및 중심 맥락막 시료를 분석한다. 방수 주변 망막, 및 주변 맥락막 시료는 분석하지 않는다.

표 9 (A-B)는 시클로덱스트린 기반 용액 내 국소 안구 화합물-I을 이용한 5일의 PK 결과를 열거한다.

<표 9A>

표 9B는 방수, 중심 망막, 중심 맥락막, 및 각막에서 화합물-I의 평균 안구 조직 농도를 요약하여 열거한다. 임의 값 <LLOQ는 통계 계산에서 제외시켰다. 주어진 시점에 대해 모든 값이 <LLOQ일 때 <LLOQ를 평균으로 보고하였다.

<표 9B>

여러 가지 안구액 및 조직에서 화합물-I의 농도( μM )

일부 실시양태에서, 약 0.4%(약 4 mg/mL) 화합물-I과 시클로덱스트린의 용액의 국소 안구 투여 시 여러 조직 및 안구액에서 제1 활성제의 농도를 측정한다. 화합물-I의 평균 농도를 중심 맥락막, 중심 망막, 방수, 및 각막에서 측정한다. 화합물-I은 8.41% 클렙토스® 및 0.142% 포스페이트 완충액; 8.9% 클렙토스® HPB 및 0.142% 포스페이트; 4.88% 캡티솔® 및 0.142% 포스페이트; 또는 4.88% 캡티솔® 및 0.122% 포스페이트를 포함한 용액(0.4% 또는 4 mg/mL) 내에 있다. 표 10A-B 참조한다.

일부 실시양태에서, 약 0.4%(약 4 mg/mL) 화합물-I과 시클로덱스트린의 용액의 국소 안구 투여 시, 화합물-I의 중심 맥락막 농도는 약 0.2 μM 내지 약 0.8 μM이다. 화합물-I의 중심 망막 농도는 약 0.05 μM - 약 0.15 μM 이다. 일부 실시양태에서, 약 0.4%(약 4 mg/mL) 화합물-I과 시클로덱스트린의 용액의 국소 안구 투여 시, 화합물-I의 방수 농도는 약 0.003 μM - 약 0.008 μM 이다. 그리고 화합물-I의 각막 농도는 약 6.0 μM - 약 40 μM 이다. 클렙토스® HPB 또는 캡티솔®이 눈에 국소 투여되는 화합물-I의 용액에 사용된다.

일부 실시양태에서, 염화벤질알코늄 함유 또는 미함유의 0.3% 화합물-I 안과 겔 드롭 제제로 1일 2회 국소 투여 후 화합물-I의 평균 안구 조직 농도는 각막에서 약 200 μM - 약 350 μM로 최고이며, 주변 맥락막에서 약 2.0 μM - 약 5.0 μM, 중심 맥락막에서 약 0.2 μM - 약 0.7 μM, 주변 망막에서 약 0.05 μM - 약 0.5 μM, 방수에서 약 0.01 μM - 약 0.05 μM 이다.

일부 실시양태에서, 화합물-I의 트리스 기반 현탁 제제는 각막 소견은 전혀 없이 단지 가벼운 결막염이 약간 산발적으로 발생하는 우수한 내성을 갖는다. 일부 실시양태에서, 염화벤질알코늄 함유 또는 미함유의 0.3% 화합물-I 트리스 기반 현탁액으로 1일 2회 국소 투여의 경우 제30일에 최초 1일 국소 안구 투여 후 1시간 ± 15분에 평가된 화합물-I의 평균 안구 조직 농도는 각막에서, 예를 들어, 약 2.00 μM - 약 4.0μM로 최고이다. 동일한 용량으로부터 주변 맥락막 농도는 약 0.7 μM - 약 1.5 μM이고; 중심 맥락막 농도는 약 0.3 μM - 약 0.4 μM; 주변 망막 농도는 약 0.08 μM - 약 0.09 μM 이고; 중심 망막 농도는 약 0.04 μM - 약 0.07 μM이고; 방수 농도는 약 0.001 μM - 약 0.002 μM 이다.

본 출원은 약 0.1% 화합물-I(약 2.0% - 약 2.5% HP-β-CD를 포함한 용액 내)로 1일 2회, 약 0.2% 화합물-I(약 4.0% - 약 4.5% HP-β-CD를 포함한 용액 내)로 1일 2회, 약 0.4% 화합물-I(약 8.0% - 약 8.5% HP-β-CD를 포함한 용액 내)로 1일 1회 또는 2회, 및 약 0.6% 화합물-I(최대 약 14% HP-β-CD를 포함한 용액 내) 1일 1회 또는 2회 30일까지 국소 투여될 때 피험체에서 우수한 내성을 갖는 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액(예를 들어, 히드록시프로필-베타-시클로덱스트린(HP-β-CD, 클렙토스® HPB)를 포함하는 용액)을 제공한다. 게다가, 또 다른 실시양태에서, 클렙토스® HPB, 클렙토스® HP, 또는 캡티솔® 내 약 0.4% w/v 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액은 1일 2회 24일까지 투여될 때 우수한 내성을 갖는다.

본 출원은 화합물-I 안과 겔 드롭 제제로 관찰되는 용량 제한적인 각막 독성을 제공한다. 일부 실시양태에서, 안과 겔 드롭은 시클로덱스트린 기반 용액에 비해 화합물-I의 각막 농도를 약 5배 내지 약 15배 더 높게 만들고 트리스 기반 현탁액에 비해 화합물-I의 각막 농도를 약 15배 내지 약 100배 더 높게 만든다. 본 출원의 화합물-I 트리스 기반 현탁액 및 시클로덱스트린 기반 용액은 명백한 안구 독성의 증거 없이 우수한 내성을 갖는다. 일부 실시양태에서, 약 0.005% 내지 약 5.0% w/v의 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액 또는 트리스 기반 현탁액의 적어도 30일간 1일 1회 또는 2회 투여는 피험체에서 우수한 내성을 갖는다. 본 출원은 등몰 용량의 겔 및/또는 트리스 기반 제제에 비해 시클로덱스트린 기반 용액을 이용하여 화합물-I의 최고 중심 맥락막 농도를 제공한다.

<표 10A>

<표 10B>

표 11은 화합물-I 제제의 각막 및 중심 맥락막 농도를 나타낸다.

<표 11>

신생혈관성 AMD 환자에서 용량 증가 연구(Dose-Escalation Study)를 위한 I상 프로토콜

본 출원은 신생혈관성 노인 황반변성(AMD) 환자에서 화합물-I의 국소 안구 투여 후 안정성, 내성, 및 약동학을 평가하기 위하여 12주, 개방 표지, 용량 증가, 다기관 임상시험을 수반한 I상 연구를 제공한다. 최대 60명 환자 전체가 화합물-I 안과 용액의 국소 안구 투여로 1일 1 내지 2회 3개월간 치료받는다. 이때 용량 증가 단일 요법의 3개 군(arm), 및 최대 내성 단일요법 용량에 더하여 루센티스(Lucentis)®의 유리체 내 단일 주사를 이용하는 한 개의 보조요법 군을 설계한다(치료 군 당 15명 환자). 독립적인 판독 센터에 의해 확인된 사전에 명시된 시력 및 CNV 병변 기준을 충족시키는 환자는 동시에 국소 안구 투여를 중단하고 표준 치료법으로 치료받는다.

본 출원은 임상 연구용 0.1% 내지 1.0%(w/v)(화합물-I로서) 안과 용액 범위의 3가지 투여 강도를 제공한다. 강도는 약 0.1%, 약 0.3%, 약 0.6%, 및 약 1.0%(w/v) 화합물-I HCl이다.

제제 제조

본 출원의 제제의 비제한적인 예를 표 12에 개략적으로 나타낸다.

<표 12>

화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 EGFR 활성을 결정하기 위한 세포 내 EGFR 티로신 인산화 분석

더 높은 농도의 EGF가 EGFR 키나아제 활성의 억제를 극복할 수 있는지를 결정하기 위해 각막 상피 세포에서 EGFR 티로신 분석을 실시한다. 세포를 혈청 고갈시키고, 그 후 다양한 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 예를 들어, 화합물-I 또는 대조군으로 전처리하고, 이어서 EGF로 처리한다. 그 후 세포를 수집하고 인산화 EGFR 및 수용체 활성(IC₅₀)를 결정하는 데 사용된 전체 EGFR 농도를 결정하기 위해 면역블롯한다.

화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물과 제2 활성제의 조합의 EGFR 활성을 결정하기 위한 세포 내 EGFR 티로신 인산화 분석

비타민 K 또는 니코틴산/니코틴아미드가 EGFR의 억제를 극복할 수 있는지와 EGFR 활성이 증가하는지를 결정하기 위해 각막 상피 세포에서 EGFR 티로신 분석을 실시한다. 세포를 혈청 고갈시키고, 그 후 다양한 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 예를 들어, 화합물-I 및 포화 농도의 비타민 K 또는 니코틴산/니코틴아미드로 전처리하고, 이어서 EGF로 처리한다. 세포를 수집하고 인산화 EGFR(티로신 1068 및 티로신 1045) 및 수용체 활성(IC₅₀)을 결정하는 데 사용된 전체 EGFR 농도를 결정하기 위해 면역블롯한다.

세포에서 세포 이동/ 증식에 대한 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 EGF의 효과 결정(시험관 내 상처 치유)

각막 상피 세포에서 세포 이동/증식의 결정은 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 EGF의 존재하에서 세포 이동/증식을 결정하여 실시한다. 세포를 실리콘 마개와 함께 평판 배양한다. 그 후 세포를 혈청 고갈시키고 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 또는 대조군으로 전처리한다. 그 후 실리콘 마개를 제거하여 무세포 영역을 생성하고, 세포를 EGF로 처리한다. 세포 이동을 현미경 사진으로부터 정량한다.

화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및/또는 제2 활성제로 처리한 세포에서 세포 이동/증식의 결정

각막 상피 세포에서 세포 이동/증식의 결정은 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 비타민 K, 또는 니코틴산/니코틴아미드의 존재하에서 세포 이동/증식을 결정하여 실시한다. 세포를 실리콘 마개와 함께 평판 배양한다. 그 후 세포를 혈청 고갈시키고 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 또는 대조군으로 전처리한다. 마개를 제거하고 세포를 1) EGF, 2) EGF 및 비타민 K 또는 3) EGF 및 니코틴산/니코틴아미드로 처리한다. 세포 이동을 현미경 사진으로부터 정량한다.

생체 내에서 기초 및 EGF 매개 각막 상처 치유에 대한 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 효과의 결정

각막 상처 치유의 기초 및 리간드 자극 속도에 대한 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 효과를 생쥐에서 결정하였다. C57/Bl 생쥐의 각막에 상처를 준 후 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물을 전처리하고, 이어서 EGF를 첨가하였다. 상처 크기는 플루오레세인 염색 및 형광 사진촬영에 의해 모니터하고 정량한다.

생체 내에서 기초 및 EGF 매개 각막 상처 치유에 대한 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 제2 활성제의 효과의 결정

각막 상처 치유에 대한 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및/또는 제2 활성제의 효과를 생쥐에서 결정하였다. C57/Bl 생쥐의 각막에 상처를 준 후 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물로 전처리하고, 이어서 EGF, 비타민 K, 또는 니코틴산/니코틴아미드를 첨가한다. 상처 크기와 봉합을 모니터한다.

치료 용량

본 출원의 제제는 포유동물 피험체의 눈의 맥락막 및 망막 신혈관형성(NV)을 치료(즉, 병변 안정화 또는 퇴행) 또는 예방하는 데 효과적이다. 특정 용량의 본 출원의 화합물-I은 수용체 티로신 키나아제를 억제하고 특정 용량의 제2 활성제는 ErbB 수용체 티로신 키나아제를 억제한다. 일부 실시양태에서, 특정 용량의 화합물-I 제제는 VEGFR, FGFR, Tie2, 및 EphB-4를 포함한 수용체 티로신 키나아제를 억제한다. 특정 용량의 본 출원의 제제에 의한 여러 RTK의 억제는 동시에 상승 효과를 가지며 후안부의 NV의 치료 또는 퇴행에 효과적이다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제는 EGFR, HER2, HER3 및 Erb4를 포함한 ErB 수용체 티로신 키나아제를 직간접적으로 조절(예를 들어, 활성화)한다. 특정 농도의 본 출원의 제제에 의한 여러 ErB 수용체 티로신 키나아제의 활성화는 동시에 상승 효과를 보일 수 있으며, 각막 파괴 또는 질환의 예방 또는 치료에 효과적이다.

한 실시양태에서, 본 출원은 눈의 맥락막 및 망막 신혈관형성(NV)의 치료(즉, 병변 안정화 또는 퇴행) 또는 예방 방법으로서, 이를 필요로 하는 피험체에게 치료 유효량의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 제2 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함에 의하며, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 동시에 투여되는 것인 방법을 제공한다. 별법으로, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 전에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 후에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 본 출원은 눈의 맥락막 및 망막 신혈관형성(NV)의 치료(즉, 병변 안정화 또는 퇴행) 또는 예방 방법으로서, 이를 필요로 하는 피험체에게 치료 유효량의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 치료 유효량의 본원에서 기재된 제제를 투여하기 전에 투여함에 의한 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원은 눈의 맥락막 및 망막 신혈관형성(NV)의 치료(즉, 병변 안정화 또는 퇴행) 또는 예방 방법 및 각막 파괴 또는 질환의 예방 또는 치료 방법으로서, 이를 필요로 하는 피험체에게 치료 유효량의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 제2 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함에 의하며, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 동시에 투여되는 것인 방법을 제공한다. 별법으로, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 전에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 후에 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 본 출원은 눈의 맥락막 및 망막 신혈관형성(NV)의 치료(즉, 병변 안정화 또는 퇴행) 또는 예방 방법 및 각막 파괴 또는 질환의 예방 또는 치료 방법으로서, 이를 필요로 하는 피험체에게 치료 유효량의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 치료 유효량의 본원에서 기재된 제제를 투여하기 전에 투여함에 의한 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태에서, 본 출원의 제제는 약 0.005% - 약 5.0%(약 0.05 - 약 50 mg/mL)의 화합물-I 및 제2 활성제의 국소 안구 전달에 의해 1일 1, 2, 3, 및 4회 투여될 때 NV의 치료 및 전신질환, 안질환 또는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 투여에 의해 유발된 각막 파괴 또는 질환의 치료 또는 예방에 효과적이다. NV의 치료 또는 퇴행 및 각막 파괴 또는 질환의 치료 및/또는 퇴행을 위한 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ) 및 제2 활성제의 제제는 제2 활성제, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 및 시클로덱스트린을 포함하는 용액 또는 트리스를 포함하는 현탁액이다. 산소 유발 망막병증(OIR: oxygen induced retinopathy) 또는 NV를 유발하는 대기 산소에 노출된 피험체에 전달될 때 용액 또는 현탁액은, 예를 들어, 각막 파괴 또는 질환이 거의 없거나 전혀 없이 망막 당 전망막 NV 평균 면적을 효과적으로 감소시킬 수 있다. 화합물-I 제제 및/또는 현탁액에 의한 NV의 예방 또는 치료는 VEGFR-2를 포함한 여러 수용체 티로신 키나아제(RTK)의 억제에 의해 달성된다. 제2 활성제에 의한 각막 파괴 또는 질환의 예방 또는 치료는 EGFR의 조절(예를 들어, 활성화)에 의해 달성된다.

본원에서 기재된 임의의 개시된 질환 또는 병태는 약 200 nM - 약 2 μM의 개시된 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제제 및/또는 현탁액의 표적 조직 농도를 달성함으로써 치료 또는 예방될 수 있다. 본 출원의 한 실시양태는 후안부의 병리적 혈관형성의 치료 방법으로서, 약 200 nM - 약 2 μM의 개시된 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및/또는 이의 제제의 표적 조직 농도를 달성하는 방법에 관한 것이다. 본 실시양태의 또 다른 반복은 약 300 nM - 약 2 μM의 하나 이상의 개시된 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및/또는 이의 제제의 표적 조직 농도를 달성하는 것에 관한 것이다.

본 출원의 실시양태에서, 투여 시 용액 또는 현탁액으로 제제화된 약 0.2 - 약 1.0%(약 2 - 약 10 mg/mL)의 화합물-I은 VEGFR-2 키나아제 기능을 효과적으로 억제하고 FGFR1-3, Tie-2, 및 EphB-4를 포함한 일련의 혈관형성 촉진 성장인자 수용체를 실질적으로 차단할 수 있다. 제제 내 2 - 10 mg/mL 농도의 화합물-I은 국소 안구 전달 후 1-5일에 중심 맥락막 및 망막에 약물의 약리학적 유효 농도를 효과적으로 제공한다.

일부 실시양태에서, 화합물-I의 노출 시간은 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월)이다. 일부 실시양태에서, 투여 용법은 피험체에게 화합물-I을 포함하는 제제를 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 국소 안구 투여하는 여러 과정을 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회 또는 1일 4회의 제제 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 최대 90일 동안 격일(즉, 제1, 3, 5, 7일 등)로 1회, 2회, 3회 또는 4회의 제제 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 제2일 내지 제90일에 1회 또는 2회 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 2회, 3회, 또는 4회, 이어서 2-90일 동안 1일 1회 투여를 수반한다. 예를 들어, 투여 용법은 제1일에 1회, 2회, 3회, 또는 4회, 이어서 최대 90일 동안 격일(즉, 제1, 3, 5, 7일 등)로 1회, 2회, 3회 또는 4회 투여를 수반한다. 예를 들어, 한 투여 용법은 연속 1, 2, 3, 4, 또는 5일 동안 1일 1회 또는 1일 2회 투여를 수반한다. 1일 2회 또는 3회 투여 용법일 경우, 피험체는 국소 안구 용량의 화합물-I 제제를 제1일 및 제4일에 대략 4, 6, 또는 8시간 간격으로 받는다. 또 다른 실시양태에서, 피험체는 국소 안구 용량의 화합물-I 제제를 연속 4일 동안 대략 4, 6, 또는 8시간 간격으로 받는다. 일부 실시양태에서, 피험체는 하루에 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 화합물-I 제제를 연속 5일 동안 받는다. 또 다른 실시양태에서, 피험체는 화합물-I의 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 제제를 연속 5-90일 동안 받는다. 일부 실시양태에서, 피험체는 화합물-I의 1회 또는 2회의 국소 안구 용량의 제제를 적어도 연속 25일 동안 받는다. 한 실시양태에서, 피험체는 1회 또는 2회의 국소 안구 용량을 적어도 연속 90일 이상 받는다.

일부 실시양태에서, 본 출원은 AMD, 병리적 CNV, 및/또는 병리적 NV를 치료하기 위해 피험체의 전안부에 국소 투여되는 화합물-I 또는 이의 유리 염기 및/또는 제2 활성제의 제제를 제공한다. 예를 들어, 제제는 1일 1, 2, 3, 또는 4회 피험체의 눈에 투여된다. 특정 실시양태에서, 제제는 1일 2 또는 3회 피험체의 눈에 투여된다. 예를 들어, 제제는 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 예를 들어, 약 1 mg/ml의 제1 활성제를 포함하는 본 개시의 제제는 1일 2회(BID) 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL 1일 1회(QD) 또는 BID, 약 2 mg/mL QD 또는 BID, 약 3 mg/mL QD 또는 BID, 약 4 mg/mL QD 또는 BID, 약 5 mg/mL QD 또는 BID, 약 6 mg/mL QD 또는 BID, 약 7 mg/mL QD 또는 BID, 약 8 mg/mL QD 또는 BID, 약 9 mg/mL QD 또는 BID, 또는 약 10 mg/mL QD 또는 BID로 피험체의 한쪽 또는 양쪽 눈에 투여된다.

예를 들어, 약 1 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 1 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 2 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 3 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 4 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 5 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 7 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 8 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL BID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL TID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 9 mg/mL QID의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 10 mg/mL QD의 화합물-I 및/또는 제2 활성제를 포함하는 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안의 투여 용법은 상기 문단에 기재된 연일 또는 격일을 수반하는 임의의 용법일 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 저용량(예를 들어, 1 mg/mL, 2 mg/mL, 3 mg/mL, 4 mg/mL, 또는 5 mg/mL)으로 투여될 때 QD, BID, TID, 또는 QID로 투여되고, 고용량(예를 들어, 6 mg/mL, 7 mg/mL, 8 mg/mL, 9 mg/mL, 또는 10 mg/mL)일 때 QD 또는 BID로 투여된다.

기타 실시양태에서, 1 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 1 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 2 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 2 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 3 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 3 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 4 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 4 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 5 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 5 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 6 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 6 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 7 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 7 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 8 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 8 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 9 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 9 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 10 mg/mL BID의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 10 mg/mL QD의 화합물-I 제제 및 제2 활성제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안의 투여 용법은 상기 문단에 기재된 연일 또는 격일을 수반하는 임의의 용법일 수 있다.

본 출원은 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여하기 위한 표 13에 나타낸 제제를 제공한다.

<표 13>

일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 제제는 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 예를 들어, 약 0.2% - 약 1.0 %(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 약 0.1% - 1.2%(w/v)의 화합물-I을 포함하는 본 개시의 제제는 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안 1일 1회(QD) 또는 1일 2회(BID) 피험체의 한쪽 눈 또는 양쪽 눈에 투여된다. 일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 화합물 또는 화합물-I은 착화제, 예를 들어, 시클로덱스트린(예를 들어, 클렙토스® HPB (%))와 약 1:8의 비율로 착물로 형성되며, 이때 제제에 약 2% - 13 %(w/v) 시클로덱스트린(예를 들어, 클렙토스® HPB (%))이 제제에 첨가된다. 제제는 약 0.1% - 약 0.2% 완충액, 예를 들어, 10 mM 포스페이트 완충액을 추가로 포함할 수 있다. 제제의 요망하는 삼투압 농도는 약 200 - 약 300 mOsm일 수 있으며, 이는 염, 예를 들어 염화나트륨으로 삼투압 농도를 달성하기에 충분한 양을 첨가하여 달성된다. 제제의 pH는 약 40℃ 이하에서 약 6.0이다. 1 내지 90일 또는 90일 이상(예를 들어, 4개월, 6개월, 8개월, 또는 12개월) 동안의 투여 용법은 상기 문단에 기재된 연일 또는 격일을 수반하는 임의의 용법일 수 있다. 일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 화합물 또는 화합물-I 제제는 제2 활성제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 화학식 Ⅱ 화합물 또는 화합물-I 제제는 제2 활성제와 함께 투여된다.

특정 용량의 제2 활성제, 예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K 또는 이들의 조합은 EGFR, HER2, HER3, 및 HER4를 포함한 ErbB 수용체 티로신 키나아제(RTK)를 직간접적으로 조절(예를 들어, 활성화)한다. 동시에 특정 용량의 본 출원의 제제에 의한 ErbB RTK의 조절(예를 들어, 활성화)은 상승효과를 보이며 전안부의 각막 파괴 또는 질환(예를 들어, 각막 궤양, 각막상피 결손, 각막염 등)의 예방 또는 치료에 효과적이다.

본 출원의 방법은 레이저 치료 및 주사 가능한 항신생혈관제를 이용한 치료를 포함하는, 그러나 이에 제한되지 않는, 표준 치료법과 병용된다.

입자 조성물 및 입자 조성물을 포함하는 제제

본 출원은 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I) 및/또는 제2 활성제), 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 입자를 포함하는 약학 조성물로서, 입자가 100 nm 내지 100 μm의 평균 직경을 갖는 것인 약학 조성물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 입자는 20 μm 내지 90 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 20 μm 내지 80 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 20 μm 내지 70 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 30 μm 내지 70 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 30 μm 내지 60 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 30 μM와 50 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 30 μm 내지 40 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 50 μm 내지 70 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 50 μm 내지 60 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 적어도 30 μM의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 약 30 μm, 약 35 μm, 약 40 μm, 약 45 μm, 약 50 μm, 약 55 μm, 약 60 μm, 약 65 μm, 또는 약 70 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 약 30 μm, 약 35 μm, 약 50 μm, 또는 약 60 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 100 nm 내지 8 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 100 nm 내지 200 nm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 최대 150 nm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 약 150 nm, 약 140 nm, 약 130 nm, 약 120 nm, 약 110 nm, 또는 약 100 nm의 평균 직경을 갖는다. 기타 실시양태에서, 입자는 1 μm 내지 5 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 2 μm 내지 4 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 약 1 μm, 약 2 μm, 약 3 μm, 약 4 μm, 또는 약 5 μm의 평균 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자는 약 3 μm의 평균 직경을 갖는다.

일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 70 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 60 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 10 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 9 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 8 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 7 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 6 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 5 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 4 μm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 300 nm 이하의 직경을 갖는다. 일부 실시양태에서, 입자의 적어도 90%는 200 nm 이하의 직경을 갖는다.

일부 실시양태에서, 약학 조성물은 제1 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I))의 입자 및 제2 활성제(예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 비타민 K, 또는 이들의 조합)의 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 약학 조성물은 제1 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I))의 입자 및 비타민 K(예를 들어, 메나디온)의 입자를 포함한다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)과 제2 활성제(예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 비타민 K, 또는 이들의 조합)는 함께 롤러 분쇄되어 제1 활성제 및 제2 활성제를 포함하는 입자를 형성한다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제와 제2 활성제는 별도로 롤러 분쇄된 후, 제1 활성제를 포함하는 입자와 제2 활성제를 포함하는 입자가 혼합되거나 함께 롤러 분쇄된다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제 또는 제2 활성제는 우선 롤러 분쇄된 후, 입자는 추가의 롤러 분쇄를 위해 나머지 활성제에 첨가된다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제 또는 제2 활성제)의 입자를 포함하는 약학 조성물은 하나 이상의 부형제를 추가로 포함한다. 부형제는, 예를 들어 안과용 제제를 제공하기 위한, 당 업계에 공지된 임의의 적합한 부형제로부터 선택될 수 있다. 일부 실시양태에서, 부형제는 폴리소르베이트(트윈(Tween)) 80, 폴록사머(플루로닉) F-127, 하이프로멜로스(히드록시프로필 메틸셀룰로스 또는 HPMC), 포비돈(PVP K-29/32 또는 K-30), 및 틸록사폴, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 부형제는 HPMC, 트윈 80, 플루로닉 F-127, 및 틸록사폴, 및 이들의 조합으로부터 선택된다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)를 포함하는 입자 및 제2 활성제(예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 비타민 K, 또는 이들의 조합)를 포함하는 입자는 동일한 부형제(들)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제 또는 제2 활성제)의 입자를 포함하는 약학 조성물은 계면 활성제, 예를 들어 염화벤잘코늄(BAC)을 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제 또는 제2 활성제)의 입자를 포함하는 약학 조성물은 부형제(예를 들어, 활성제의 생체이용률을 상승시키기 위함)를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 부형제는 히드록시에틸 셀룰로스(HEC)이다. 일부 실시양태에서, HEC는 약 0.1% - 약 1%, 약 0.1% - 약 0.9%, 약 0.1% - 약 0.8%, 약 0.1% - 약 0.7%, 약 0.1% - 약 0.6%, 약 0.1% - 약 0.5%, 약 0.1% - 약 0.4%, 또는 약 0.1% - 약 0.3%의 양으로 존재한다. 일부 실시양태에서, HEC는 약 0.2% 또는 약 0.3%의 양으로 존재한다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 입자는 화학식 Ⅱ(즉, 화합물-I의 유리 염기)를 포함한다. 기타 실시양태에서, 본 출원의 입자는 화합물-I을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 입자는 롤러 분쇄에 의해 제조된다. 입자 크기에 영향을 줄 수 있는 인자는 활성제(예를 들어, 화합물-I vs. 화학식 Ⅱ)의 유리 염기 또는 염의 사용, 부형제의 첨가, 분쇄시 롤러 속도, 분쇄 매질의 크기, 및 분쇄 시간을 포함하나 이에 제한되지 않는다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 입자는 롤러 분쇄 없이 제조된다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I) 및/또는 제2 활성제)의 입자는 멸균된다. 일부 실시양태에서, 멸균은 감마 조사로 수행된다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I) 및/또는 제2 활성제)의 입자는 멸균 후 안정하다(예를 들어, 멸균의 결과로 인한 임의의 불순물 또는 분해 산물이 실질적으로 없는).

본 출원은 약학 조성물을 포함하는 현탁 제제로서, 약학 조성물이 본원에서 기재된 바와 같이, 본 출원의 활성제(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I) 및/또는 제2 활성제), 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 입자를 포함하는 것인 현탁 제제에 관한 것이다.

일부 실시양태에서, 현탁 제제는 약 0.1 mg/mL - 약 10 mg/mL의 농도의 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제는 약 0.2 mg/mL - 약 10 mg/mL, 약 0.5 mg/mL - 약 10 mg/mL, 약 1 mg/mL - 약 10 mg/mL, 약 2 mg/mL - 약 9 mg/mL, 약 2 mg/mL - 약 8 mg/mL, 약 3 mg/mL - 약 8 mg/mL, 약 3 mg/mL - 약 7 mg/mL, 약 3 mg/mL - 약 6 mg/mL, 약 4 mg/mL - 약 6 mg/mL, 또는 약 4 mg/mL - 약 5 mg/mL의 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 농도이다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제는 약 0.1 mg/mL, 0.3 mg/mL, 0.5 mg/mL, 약 1 mg/mL, 약 2 mg/mL, 약 3 mg/mL, 약 4 mg/mL, 약 6 mg/mL, 또는 약 10 mg/mL의 농도이다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제는 약 1 mg/mL - 약 4 mg/mL 또는 약 2 mg/mL - 약 4 mg/mL의 농도이다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제는 약 2 mg/mL 또는 약 4 mg/mL의 농도이다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 입자를 포함하는 현탁 제제는 제2 활성제(예를 들어, 니코틴산, 니코틴아미드, 비타민 K, 또는 이들의 조합)를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K(예를 들어, 메나디온)이다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제는 10 μM 미만의 양으로 존재한다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제는 약 0.5 μM, 약 0.6 μM, 약 0.7 μM, 약 0.8 μM, 약 0.9 μM, 약 1 μM, 약 2 μM, 약 3 μM, 약 4 μM, 약 5 μM, 약 6 μM, 약 7 μM, 약 8 μM, 또는 약 9 μM의 양으로 존재한다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제는 약 1 μM의 양으로 존재한다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 입자를 포함하는 현탁 제제는 폴리소르베이트(트윈) 80, 폴록사머(플루로닉) F-127, 하이프로멜로스(히드록시프로필 메틸셀룰로스 또는 HPMC), 포비돈(PVP K-29/32 또는 K-30), 및 틸록사폴, 및 이들의 조합으로부터 선택된 부형제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 부형제는 플루로닉 F-127, 트윈 80, HPMC, 또는 틸록사폴, 또는 이들의 조합이다. 일부 실시양태에서, 부형제는 약 0.01% - 약 0.2%, 약 0.01% - 약 0.15%, 약 0.01% - 약 0.12%, 약 0.01% - 약 0.1%, 약 0.01% - 약 0.09%, 약 0.02% - 약 0.09%, 약 0.03% - 약 0.09%, 약 0.04% - 약 0.09%, 또는 약 0.04% - 약 0.08%의 농도로 존재한다. 일부 실시양태에서, 현탁 제제는 약 0.08% 또는 약 0.04% 플루로닉 F-127을 포함한다. 일부 실시양태에서, 현탁 제제는 약 0.08% HPMC를 포함한다. 기타 실시양태에서, 현탁 제제는 약 0.04% 틸록사폴을 포함한다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 입자를 포함하는 현탁 제제는 완충제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 완충제는 포스페이트 완충액, 보레이트 완충액, 시트레이트 완충액, 타르트레이트 완충액, 아세테이트 완충액, 아미노산, 아세트산나트륨, 시트르산나트륨, 트리스 완충액 등으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 완충제는 트리스다. 일부 실시양태에서, 완충제는 약 0.1% - 약 2%, 약 0.2% - 약 1.8%, 약 0.3% - 약 1.6%, 약 0.4% - 약 1.4%, 약 0.4% - 약 1.2%, 약 0.4% - 약 1%, 약 0.4% - 약 0.8%, 약 0.4% - 약 0.7%, 또는 약 0.5% - 약 0.7%의 농도로 존재한다. 일부 실시양태에서, 현탁 제제는 약 0.6% 트리스를 포함한다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 입자를 포함하는 현탁 제제는 삼투압 농도 조정제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 삼투압 농도 조정제는 글리세롤이다. 일부 실시양태에서, 삼투압 농도 조정제는 약 1% - 약 10%, 약 2% - 약 10%, 약 3% - 약 10%, 약 4% - 약 10%, 약 5% - 약 10%, 약 2% - 약 9%, 약 2% - 약 8%, 약 2% - 약 7%, 약 2% - 약 6%, 약 2% - 약 5%, 약 2% - 약 4%, 또는 약 2% - 약 3%의 양으로 존재한다. 일부 실시양태에서, 현탁 제제는 약 2% 또는 약 2.5% 글리세롤을 포함한다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)를 포함하는 현탁 제제는 pH가 7.5 미만이다. 일부 실시양태에서 pH는 약 6.0 - 약 7.0이다. 일부 실시양태에서 pH는 약 6.0 또는 약 7.0이다.

일부 실시양태에서, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 입자를 포함하는 현탁 제제는 히드록시에틸 셀룰로스(HEC)를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HEC는 약 0.1% - 약 1%, 약 0.1% - 약 0.9%, 약 0.1% - 약 0.8%, 약 0.1% - 약 0.7%, 약 0.1% - 약 0.6%, 약 0.1% - 약 0.5%, 약 0.1% - 약 0.4%, 또는 약 0.1% - 약 0.3%의 양으로 존재한다. 일부 실시양태에서, HEC는 약 0.2% 또는 약 0.3%의 양으로 존재한다.

본 출원에 기재된 제1 활성제, 제2 활성제, 및 하나 이상의 부형제 중 하나는 본원에 기재된 임의의 농도 또는 수준으로 존재하는 본 출원에 기재된 제1 활성제, 제2 활성제, 및 하나 이상의 부형제 중 나머지와 함께 본원에 기재된 임의의 농도 또는 수준으로 존재할 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 약 0.1% 내지 약 1.2%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위)의 제1 활성제, 약 0.4% - 약 0.8%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) 트리스, 약 2% - 약 4%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) 글리세롤, 약 0.1% - 약 0.3%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) HEC, 및 약 0.04% - 약 0.09%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) HPMC를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I이다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 약 0.4%의 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I, 약 0.6% 트리스, 약 2%의 글리세롤, 약 0.2% HEC, 및 약 0.08% HPMC를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 30 μm 내지 60 μm의 평균 직경을 갖는 제1 활성제 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 50 μm 내지 60 μm의 평균 직경을 갖는 제1 활성제 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 약 50 μm 또는 60 μm의 평균 직경을 갖는 제1 활성제 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 pH가 7.0 미만이다. 일부 실시양태에서, 제제는 pH가 약 6이다.

일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 약 0.1% 내지 약 1.2%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) 제1 활성제, 약 0.00001% - 약 0.0001%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) 제2 활성제, 약 0.4% - 약 0.8%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) 트리스, 약 2% - 약 4%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) 글리세롤, 약 0.1% - 약 0.3%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) HEC, 및 약 0.04% - 약 0.09%(또는 본원에 기재된 중간의 임의의 범위) HPMC를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제1 활성제는 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I이다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제는 비타민 K₃(예를 들어, 메나디온)이다. 일부 실시양태에서, 본 출원의 제제는 약 0.4% 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I, 약 0.000086% 비타민 K₃, 약 0.6% 트리스, 약 2% 글리세롤, 약 0.2% HEC, 및 약 0.08% HPMC를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 30 μm 내지 60 μm의 평균 직경을 갖는 제1 활성제 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 50 μm 내지 60 μm의 평균 직경을 갖는 제1 활성제 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 약 50 μm 또는 60 μm의 평균 직경을 갖는 제1 활성제 입자를 포함한다. 일부 실시양태에서, 입자는 또한 제2 활성제를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제제는 pH가 7.0 미만이다. 일부 실시양태에서, 제제는 pH가 약 6이다.

증상 및 치료방법

눈의 질환 또는 병태의 치료 방법을 개시한다. 개시된 방법은 하나 이상의 개시된 화합물(예를 들어, 제1 활성제(예를 들어, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물), 및 경우에 따라 제2 활성제), 및 이들의 제제를 피험체에게 투여하여 안구 신혈관형성(NV)을 치료, 예방 또는 조절하거나, NV의 발병과 관련된 질환 또는 병태를 치료하는 것에 관한 것이다.

개시된 방법의 한 측면은 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제를 피험체에게 투여하여 NV를 치료 또는 예방하는 것에 관한 것이다. 본 측면의 한 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제, 및 경우에 따라 b) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 NV를 치료하는 방법에 관한 것이다.

개시된 방법은 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및 이들의 제제를 피험체에게 투여하여 병리적 안구 신혈관형성(NV)을 예방 또는 조절하거나, NV의 발병과 관련된 질환 또는 병태를 치료하는 것에 관한 것이다.

본 실시양태는 후안부의 질환 또는 혈관병증성 또는 염증성 질환을 가진 피험체를 치료하기 위한 의약 제조를 위한 화합물-I 또는 이의 유리 염기(화학식 Ⅱ), 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)의 제제의 용도를 제공한다. 이들은 예를 들어, 당뇨 망막병증(배경 당뇨 망막병증, 증식성 당뇨 망막병증, 및　당뇨 황반 부종 포함);　노인 황반변성(AMD)(신생혈관성(습성/삼출성) AMD, 건성 AMD, 및 지도모양위축 포함);　임의의 기전(예를 들어, 고도근시, 외상, 겸상 적혈구증;　눈 히스토플라스마증,　혈관 무늬 망막병증, 외상성 맥락막 파열,　시신경 드루젠, 및 일부 망막 이영양증)으로 인한 병리적 맥락막 신혈관형성(CNV); 임의의 기전(예를 들어, 겸상 적혈구 망막증, 일스병,　안허혈 증후군,　경동맥 해면 정맥동루, 가족성 삼출 유리체 망막증,　과다점성 증후군,　특발성 폐쇄 세동맥염,　버드샷 망막맥락막증, 망막　혈관염,　유육종증, 또는 톡소플라스마증)으로 인한 병리적 망막 신혈관형성;　포도막염; 망막 정맥 폐색(중심 또는 분지); 안외상; 수술 유발 부종; 수술 유발 신혈관형성; 낭포 황반부종; 안허혈; 　미숙아 망막병증; 코츠병; 겸상 적혈구 망막증　및/또는 신생혈관 녹내장을 포함한다. 한 실시양태에서, 안질환은 AMD이다. 한 실시양태에서, 안질환은 안구 혈관형성 및/또는 신혈관형으로부터 발생하거나 그에 의해 악화된다.

본 출원의 한 측면에서, 제제는 노인 황반변성(AMD)(신생혈관성(습성/삼출성) AMD, 건성 AMD, 및 지도모양위축 포함)의 치료에 사용된다. 용액 또는 현탁액은 신생혈관성(삼출성 또는 습성) AMD의 치료에 사용된다. 또 다른 실시양태에서, 용액 또는 현탁액은 건성 AMD의 치료에 사용된다. 또 다른 실시양태에서, 용액 또는 현탁액은 지도모양위축의 치료에 사용된다.

본 출원의 제제는 피험체에서 임의의 기전(예를 들어, 고도근시, 외상, 겸상 적혈구증;　눈 히스토플라스마증,　혈관 무늬 망막병증, 외상성 맥락막 파열,　시신경 드루젠, 및 일부 망막 이영양증)으로 인한 병리적 맥락막 신혈관형성(CNV)의 방병을 예방, 지연 또는 치료한다.

본 출원의 제제는 감각 신경의 망막 아래 병리적 맥락막 신혈관형성(CNV)의 개시를 지연하고, 그의 진행을 예방하거나, 그의 형성을 치료한다. 본 출원의 제제는 CNV를 치료하는 데 효과적이다.

본 발명의 한 측면은 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 안구 신혈관형성을 치료 또는 예방하는 것에 관한 것이다. 본 측면의 한 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제, 및 경우에 따라 b) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 안구 부종 및 신혈관형성을 치료하는 방법에 관한 것이다.

또한, 개시된 방법은 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 안구 부종을 예방 또는 조절하거나 안구 부종의 발병과 관련된 질환 또는 병태를 치료하는 것에 관한 것이다.

본 발명의 한 측면은 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 안구 부종을 치료 또는 예방하는 것에 관한 것이다. 본 측면의 한 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제, 및 경우에 따라 b) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 안구 부종을 치료하는 방법에 관한 것이다.

개시된 또 다른 방법은 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 망막 부종 또는 망막 신혈관형성을 예방 또는 조절하거나 망막 부종 또는 망막 신혈관형성의 발병과 관련된 질환 또는 병태를 치료하는 것에 관한 것이다. 본 방법의 한 측면은 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 망막 부종 또는 망막 신혈관형성을 치료 또는 예방하는 것에 관한 것이다. 본 측면의 한 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제, 및 경우에 따라 b) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 망막 부종 또는 망막 신혈관형성을 치료하는 방법에 관한 것이다.

본 측면의 또 다른 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제, 및 경우에 따라 b) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 비증식성 망막병증의 증식성 망막병증으로의 진행을 지연 또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

개시된 방법의 한 측면은 　당뇨병의 직간접적인 결과인 질환, 그중에서도, 당뇨 황반 부종 및 당뇨 망막병증에 관한 것이다. 당뇨병 환자의 안구 혈관구조는 시간이 경과함에 따라 불안정해져서, 비증식성 망막병증,　황반부종, 및 증식성 망막병증과 같은 병태로 이어진다. 선명한 직전방 시력이 발생하는 눈의 일부부인 황반의 중심으로 액이 누출되면서, 증가된 액과 관련된 단백질은 황반 위 또는 아래에 침착하기 시작한다. 이는 종창을 일으키고 피험체의 중심 시력이 점진적으로 왜곡되게 만든다. 이 병태를 "황반부종"으로 언급한다. 발생할 수 있는 또 다른 병태는 눈의 황반 영역 밖에서 혈관 변화, 예를 들어 미세동맥류가 관찰될 수 있는 비증식성 망막병증이다. 증식성 DR 과정에, 병리적인 신규 혈관이 망막으로부터 유리체로 성장해 들어가, 여기서 이들 이상 혈관은 황반에서 망막 형태를 변화시키고/거나 유리체로 출혈을 일으켜 시축을 흐리게 할 수 있다.

개시된 또 다른 방법은 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 당뇨 망막병증을 치료, 예방 또는 조절하거나 당뇨 망막병증의 발병과 관련된 질환 또는 병태를 치료하는 것에 관한 것이다.

개시된 방법의 한 측면은 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 당뇨 망막증을 치료 또는 예방하는 것에 관한 것이다. 본 측면의 한 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제, 및 경우에 따라 b) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 당뇨 망막병증을 치료하는 방법에 관한 것이다.

당뇨 증식성 망막병증은 신혈관형성의 특징을 갖는다. 신규 혈관은 손상되기 쉽고 출혈에 민감하다. 그 결과는 망막 상처뿐만 아니라 신규 혈관의 이상 형성으로 인한 눈을 통과하는 광 경로의 폐쇄 또는 완전한 차단이다. 전형적으로, 당뇨 황반 부종 피험체는 당뇨 망막병증의 비증식성 단계를 겪고 있지만, 피험체는 증식성 단계의 발병시 단지 황반부종만을 나타내기 시작하는 것이 일반적이다.

개시된 또 다른 방법은 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합)를 피험체에게 투여하여 당뇨 황반 부종을 예방 또는 조절하거나 당뇨 황반 부종의 발병과 관련된 질환 또는 병태를 치료하는 것에 관한 것이다.

본 발명의 한 측면은 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 또는 이들의 제제를 피험체에게 투여하여 당뇨 황반 부종을 치료 또는 예방하는 것에 관한 것이다. 본 측면의 한 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및 경우에 따라 제2 활성제(예를 들어, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드, 또는 이들의 조합), 및/또는 이들의 제제, 및 b) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 당뇨 황반 부종을 치료하는 방법에 관한 것이다.

개시된 방법의 또 다른 측면은 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 제2 활성제, 및/또는 이들의 제제를 피험체에게 투여하여 NV를 치료 또는 예방하고/하거나 각막 파괴 또는 질환을 치료 및/또는 예방하는 것에 관한 것이다. 본 측면의 한 실시양태는 a) 유효량의 하나 이상의 개시된 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 및/또는 이들의 제제, b) 제2 활성제, 및 경우에 따라 c) 하나 이상의 담체 또는 적합한 부형제의 조성물을 피험체에게 투여하여 NV를 치료하고 각막 파괴 또는 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다.　한 실시양태에서, 각막 파괴 또는 질환은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물에 의해 유발된다.

키트 　

또한, 인간, 포유동물, 또는 세포에 약물 전달을 위한 개시된 화합물 및 조합물의 키트를 개시한다. 키트는 인간, 포유동물, 또는 세포에 전달되기 위해 하나 이상의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물을 포함하는 조성물의 하나 이상의 포장 단위 용량 및 제 2 활성제의 하나 이상의 포장 단위 용량을 포함할 수 있다. 전달되는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 또는 제2 활성제가 사용 전에 포장된 단위 투여 앰플 또는 다회 용량 용기는 활성제 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 이들의 제제의 그들의 약학적 유효량, 또는 복수의 유효량에 적합한 양을 내포하는 밀봉된 용기를 포함할 수 있다. 화합물은 멸균 제제로서 포장될 수 있고, 밀봉된 용기는 사용할 때까지 제제의 멸균성을 유지하도록 설계된다.

본 출원의 키트는 안과용 제제의 전달을 위한 일회용 점안 분배 병을 구비한다. 또 다른 실시양태에서, 본 출원의 키트 다회용 점안 분배 병을 구비한다. 다회 용량 분배 병은 적합한 양의 항감염제 및/또는 보존제, 예를 들어 제한 없이, 0.005% BAK를 포함한다. 본 출원의 안과 분배기는 마개와 뚜껑을 가진다. 본 출원의 용기는 반투명 LDPE 점적기 팁 및 HDPE 뚜껑을 가진 반투명 LDPE 안과 분배 병을 가진다. 용기는 요구되는바 및/또는 당 업계에 사용되는 바에 따라 기타 유형 및 형태일 수 있다.

하기 실시예는 본 출원의 방법 및 조성물을 예시하는 것이지 제한하는 것은 아니다. 치료법에서 정상적으로 접하게 되거나 당업자에게 자명한 다양한 조건 및 매개변수의 기타 적합한 변형 및 응용은 실시양태의 취지와 범위 내에 있다.

일반적인 방법론

롤러 분쇄

수평 롤러 분쇄기는 금속 하우징 내에 포함되어 다수의 모터로 구동되는 롤러로 이루어진다. 롤러 사이에 배치된 각각의 컨테이너는 롤러 속도와 컨테이너의 직경에 의해 결정되는 rpm으로 회전한다. API, 및 경우에 따라 안정제, 물, 및/또는 분쇄 매질로 이루어진 약물 슬러리를 컨테이너에 첨가하고 롤러 사이에 배치한다. 사용된 매질은 다양한 크기, 예를 들어, 800 마이크론 내지 3000 마이크론의 비드이며, 이트리아 지르코늄으로 제조될 수 있다. 분쇄 후, 내용물을 스크린 메시를 갖춘 원심분리 관 삽입물에 옮겨 분산액을 매질로부터 분리한다. 예를 들어, 대략 300 x G에서 대략 5분간 원심분리 후, 분산액은 메시(매질을 보유) 아래에 수집한다.

광학 현미경법 ( OM : Optical Microscopy)

입자 조성물의 형태 및 크기 분포는 광학 현미경법에 의해 평가할 수 있고, 입자의 현미경 사진은 예를 들어, 유침 100x 대물(1000x 배율)이 장착된 올림퍼스(Olympus) BX51 시스템을 이용하여 촬영할 수 있다. 보정 막대(1μm 내지 100 μm)를 각 현미경 사진에서 콤퍼레이터(comparator)로 설정할 수 있다.

입자 크기 분포( PSD : Particle Size Distribution)

입자 크기 분포는 예를 들어, 호리바(Horiba) LA-950 V2로 레이저 회절 광 산란을 이용하여 분석할 수 있다.　 조건과 굴절률 값을 정하는 데 일반적인 가정을 설정한다. 분산은 체적을 기준으로 한다. 시료 밀도는 청색 LED 광원에 일반적인 범위의 투과율로 조정한다. 시료 양을 최소화하기 위해 플로 스루(flow through) 셀보다 작은 시료 셀(물로 채워진)을 사용한다.

계산

하기 방정식을 이용하여 명시된 조직 농도의 맥락막, 망막 및 각막 시료를 제공하기 위해 필요한 희석액(50:50 메탄올:물)의 부피를 결정하였다.

Vol. _희석액 = ( 질량 _조직 / Conc . _조직 ) - 부피 _조직 방정식 1

상기 식에서, Conc._조직 = 요망하는 조직 농도 (mg/mL)

질량_조직 = 조직의 질량 (mg)

Vol._희석액 = 희석액(50:50 메탄올: 물)의 부피 (mL)

Vol._조직 = 조직의 부피 (mL), 가정 밀도 1.0 g/mL

농도를 ng/g(ng의 약물/g의 조직)로 계산하기 위하여, 하기 방정식을 사용하였다.

Conc . _ng/g = Conc . _ng/mL x (Vol. _전체 / 질량 _조직 ) 방정식 2

상기 식에서, Conc._ng/g = 계산된 농도 (ng의 약물/g의 조직)

Conc._ng/mL = 계산된 농도 (ng의 약물/mL의 균질액(homogenate))

Vol._전체 = 조직 균질액의 전체 부피 (mL)

질량_조직 = 조직의 질량 (g)

그 후, 조직*에서 약물의 농도를 μM(μmol의 약물/조직의 부피)로 계산하기 위해서, 조직 밀도를 1 g/mL로 가정하여 하기식을 사용하였다.

Conc . _μM = Conc . _ng/g / MW 방정식 3

상기 식에서, Conc._μM = 계산된 농도 (μmol의 약물/ 조직의 부피)

Conc._ng/g = 계산된 농도 (ng의 약물/g의 조직)

MW = 분자량 (g/mole)

*조직 = 맥락막, 망막, 또는 각막

체액**에서 약물의 농도를 μM(μmol의 약물/체액의 부피)로 계산하기 위하여, 하기 방정식을 사용하였다.

Conc . _μM = Conc . _ng/mL / MW 방정식 4

상기 식에서, Conc._μM = 계산된 농도 (μmol의 약물/체액의 부피)

Conc._ng/mL = 계산된 농도 (ng의 약물/mL의 액체)

MW = 분자량 (g/mole)

**체액 = 혈장

주의: 상기 보고의 체 내 < LLOQ인 임의의 시료 농도는 보고된 통계 값(평균, 표준 편차, 및 퍼센트 분산 계수) 계산에서 누락 또는 제외시켰다.

각막, 홍채, 및 결막에 대한 드레이즈 ( Draize ) 눈 자극 점수 체계

실시예

화합물-I은 기타 혈관형성 촉진 RTK, 예를 들어 FGF 수용체(FGFR-1-3), Tie-2, 및 에프린 수용체 B4(EPHB-4)와 함께 VEGFR-2의 강력하고 선택적인 소분자 억제제이다. 화합물-I은 생쥐 각막 및 쥐 성장판 모델에서 전신 투여 후 특정 RTK의 인산화, 내피세포 증식, 및 병리적 혈관형성뿐만 아니라 흉선제거 생쥐에서 인간 종양 이종이식편의 성장을 억제한다는 것을 보였다. 가능한 안과 증상과 관련하여, 하기에 기재된 본 출원의 실시예는 화합물-I의 국소 안구 전달이 임상적으로 관련된 설치류 모델에서 병리적 망막 및 맥락막 신혈관형성의 유의한 억제를 제공한다는 것을 증명하였다. 상기 데이터는 하기에 요약한다.

망막 조직의 혈관 누출 및 신혈관형성에 대해 개시된 화합물의 효과를 측정하기 위해 하기 연구를 수행하였다.

실시예 1

1차 약역학

화합물-I의 시험관 내 효능 약리학. 화합물-I은 여러 시험관 내 분석 과정에서 혈관 내피 성장인자 수용체-2(VEGF-2) 뿐 아니라, 기타 혈관형성 촉진 RTK의 선택된 부분집단의 티로신 키나아제 활성을 강력하게 억제한다. 구체적으로, 화합물-I 화합물은 배양된 내피세포의 증식과 함께 전세포에서 VEGF 자극된 VEGFR-2 인산화를 차단하였다. 화합물-I은 각각 10.55 nM(6 ng/mL) 및 8.79 nM(5 ng/mL)의 50% 억제 농도(IC₅₀)로 VEGFR-2 및 FGFR-2의 재조합 티로신 키나아제 활성을 억제하였고, IC₅₀ = 5.27 nM(3 ng/mL)로 완전(intact) 세포에서 VEGFR-2의 자가 인산화를 억제하였다. 상기 억제는 기타 많은 티로신 키나아제에 비해 선택적이었으며, 예를 들어, VEGFR-2 IC₅₀은 상피 성장인자 수용체(EGFR) 및 인슐린 수용체(IR) 티로신 키나아제보다 각각 대략 500x 및 1000x 낮았다(표 2 참조).

257 내지 5000nM(146 - 2845 ng/mL) 범위의 10-지점의 적정 곡선을 이용할 때, 화합물-I은 IC₅₀ < 100nM(56.89 ng/mL)로 증명된 바와 같이 여러 혈관형성 촉진 성장인자 수용체에 대해 티로신 키나아제 활성을 강력하게 억제하였다(표 3 참조). 상기 선택 그룹의 키나아제에 대한 IC₅₀은 각각 다음과 같다. 재조합 KDR(VEGFR-2의 인간 이소형) = 1.27 nM(0.72 ng/mL), Tie-2 = 10.10 nM(5.75 ng/mL), 및 FGFR 1-3 = 8.50 nM(4.84 ng/mL), 3.08 nM(1.75 ng/mL), 및 33.9n M(19.29 ng/mL). 또한, 화합물은 기타 고친화성 VEGF 수용체, VEGFR-1/Flt-1을 차단하였지만 효능은 낮았다: IC₅₀ = 122nM(69.41 ng/mL).

VEGFR 억제는 혈관 투과성을 감소시키고 추가의 신생혈관 성장을 억제시키는 데 필수적인 것으로 보이지만, 기타 성장인자 신호전달 경로(예를 들어, PDGF 및 안지오포이에틴/Tie2)의 억제와 함께 VEGF 신호전달의 동시억제는 고유 치료 성과와 연관될 수 있다. 신호전달 경로의 더 광범위한 억제의 치료 성과는 후안부에서 새로이 확립된 병리적 혈관의 퇴행에 기여할 수 있다.

300nM(170.67 ng/mL)의 화합물-I은 VEGFR-2 키나아제 기능을 완전히 억제하였고(표 4 참조) FGFR 1-3, Tie-2, 및 EphB-4를 포함한 유사 세트의 혈관형성 촉진 성장인자 수용체를 실질적으로 차단하였다. 예상 밖의 결과는 300 nM 농도가 VEGFR-2 키나아제 기능을 완전히 억제할 수 있다는 것이었다. 상기 농도는 토끼 및 개에서 국소 안구 전달 5일 후 중심 맥락막 및 망막에서 발견된 전형적인 범위 내에 해당한다.

약물 성분 및 약품의 개요

약물 성분: 활성 약학 성분(API: active pharmaceutical ingredient), 화학식 Ⅱ 염산염(화합물-I, CP-547,632-01)은 단일 다형체의 소분자이다. API 성분은 99.7% 넘는 순도로 일관적으로 제조된다. 약물 성분 내 ≥ 0.15%인 임의의 불순물은 독성학 연구에서 적절하게 제한하고 미지의 신규 개별 불순물의 현재 규격은 NMT 0.2%에 설정한다. 최종 약물 성분 및 약품은 표준 방법을 이용하여 분석한다.

약품: 임상 연구용 화합물-I 안구용 제제는 0.05% - 1.0%(화합물-I로서)의 투여 강도로 제작하였다. GLP 배치(batch)에 사용되는 강도는 0%(플라세보), 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.6%, 0.8%, 및 1.0% 화합물이다. 화합물-I 안과용 제제(용액 또는 현탁액)는 임상 시험에서 눈에 1일, 1회용, 국소 투여용으로 사용한다. 활성 성분 외에, 약품은 보존제로서 0.005% BAK, 비히클로서 순수한 물을 추가로 포함할 수 있고 pH는 수산화나트륨으로 pH 6.0으로 조정된다.

실시예 2

인산나트륨 기반 겔 드롭

안과에서 인산나트륨 기반 제제 내 화합물-I(표 6에 열거됨)의 이점은 완충액, 예를 들어 인산나트륨 내 API의 자가 겔화 특성에 기인한다. 투명한 용액으로부터 화합물-I의 자가 형성성 요변성 겔은 인산나트륨 내 API 농도를 증가시킴으로써 자발적으로 형성되었다. 이 겔은 처음에는 투명해 보였고, 그 후 더 높은 API 농도에서 농도(thickness)/점도가 증가하고, 나아가 점차 더 불투명해진다, 즉 탁해진다는 것이 입증되었다. 포스페이트 완충액 내 API 농도가 과포화 상태에 도달하면, 화합물-I의 불용성 입자가 또한 겔 내에서 관찰되었다.

눈의 표면에 점도가 증가된 겔의 적용은 각막 체류 시간을 증가시킨다. 각막 체류 시간의 증가는 차례로 약물의 안구 흡수를 용이하게 한다. 결과적으로, 점성 겔의 안구 내 약물 농도는 비점성 제제, 예를 들어 물과 유사한 용액에 비해 증가한다. 점도를 증가시키는 한 가지 방법은 여러 가지 점도 상승 부형제, 예를 들어, 카복시메틸셀룰로스를 사용하는 것이다. 이는 국소 안구 투여 후 다양한 약물 성분의 안구 내 흡수를 효과적으로 증가시킨다. 그러나 본 연구에서, 예상 밖으로 점도 상승 부형제가 전혀 없이도 화합물-I의 요변성 겔이 형성되었다. 예를 들어, 화합물-I이 인산나트륨과 같은 간단한 완충액에 용해될 때, 요변성 겔이 형성되었다. 점도 상승 부형제가 전혀 없이 형성된 요변성 겔은 본 실시예에서 겔 드롭으로 제제화되었다.

화합물-I의 겔 드롭은 더치 벨티드(Dutch belted) 토끼의 눈에 적용하였다. 화합물-I의 겔 드롭은 1일 3회 투여하면서 연속 4 또는 5일 동안 투여하였다. 표적 조직에서 화합물-I의 농도는 최후 용량 투여 후 1시간에 측정하였다. 후안부 조직으로 화합물-I의 전달은 용량 의존적이고 투여 빈도 의존적이었다.

겔 드롭 제제(표 6에 열거됨)는 여러 측면, 예를 들어 API 농도, 인산나트륨 농도, 긴장제(글리세린) 또는 보존제(염화벤잘코늄/BAK)의 유무, 가용화 계면활성제(폴리소르베이트 80, 틸록사폴, 및/또는 폴록사머), 및 pH에서 상이하였다.

실시예 3

트로메타민 기반 현탁액

트로메타민 기반 제제 내 화합물-I(약 1 mg/mL 내지 약 10 mg/mL)은 현탁액을 형성하였다. 트로메타민 기반 제제 내 화합물-I의 현탁액은 불용성 형태의 활성 약물 성분을 >95% 가졌다. 이 특징은 겔 드롭 또는 시클로덱스트린 기반 제제 내 화합물-I의 가용성 또는 반가용성 상태와 구별된다(겔 드롭(겔)은 활성제의 농도가 증가함에 따라 완전히 가용성인 상태가 아님). 화합물-I의 트로메타민 기반 제제는 활성제 농도가 증가함에 따라 혼탁도가 증가하였다. 눈에 화합물-I 현탁액(가용성 및 불용성 활성제 구성요소의 조합)의 국소 점적 투여는 안정성/내성 및 효능 모두에 관련한 고유한 이점을 제공할 것으로 예상되었다.

화합물-I의 트로메타민 기반 현탁액은 1일 3회 투여하면서 연속 4 또는 5일 동안 더치 벨티드 토끼에 투여하였다. 화합물-I의 안구 조직 및 혈장 농도는 최후 용량 투여 후 1시간에 측정하였다. 트로메타민 기반 현탁액 내 화합물-I은 다양한 혈관형성 촉진 RTK에 대한 그의 세포 IC₅₀의 10-1000배로 표적 조직에 농도를 전달하였다. 표 7 참조.

국소 화합물-I의 각막 안정성 및 내성은 각막 표면에 적용된 가용성(불용성과 반대로) 활성제의 양, 및 그 결과 각막 조직 농도의 직접적인 결과였다. 트로메타민 기반 현탁액을 국소 안구 투여받은 동물은 인산나트륨 기반 겔 드롭의 등몰 제제에 비해 제제 내 활성제 농도의 더 높은 수준까지 내성을 보일 수 있었다. 더치 벨티드 토끼 및 비글 견으로부터 얻은 결과는 화합물-I의 각막 농도가 100μM을 초과할 때 안구 부작용, 예를 들어 불편함 및 염증, 일부 경우에, 각막 박화가 더 일관적으로 관찰된다는 것을 시사하였다.

트로메타민 기반 현탁액의 투여는 후안부에서 화합물-I의 안구 생체이용률에 대해 예상치 못한 효과를 보였다. 후안부에서 화합물-I의 안구 생체이용률은 투여된 약물의 총량(불용성 및 가용성, 표 7 참조)에 직접적으로 비례하는 것으로 관찰되었다. 불용성 약물 입자는 전안부 조직에 쉽게 이용될 수 없었지만, 화합물-I의 본래 고유한 물리화학적 특성은 불용성 및 가용성 구성요소 모두가 후안부 조직, 예를 들어 맥락막 및 망막에 진입할 수 있게 해주었다. 결과적으로, 등가량의 제1 활성제를 포함하는 겔 드롭 제제로 달성되는 것보다 훨씬 높은 약물 농도가 트로메타민 기반 현탁액으로 달성되었다. 따라서, 트로메타민 기반 현탁액은 a) 향상된 각막 내성 및 b) 후안부, 특히 신생혈관성(습성) AMD를 치료하기 위한 1차 표적 조직인 맥락막에 유지 또는 증가된 생체이용률을 제공하였다.

실시예 4

시클로덱스트린 기반 용액

1:6 몰 비율 이상의 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린(HP-β-CD, 클렙토스® HPB) 또는 1:2 비율 이상의 설포부틸에테르-β-시클로덱스트린(SBE-β-CD, 캡티솔®) 내 화합물-I 또는 이의 유리 염기 안과 용액의 임상 제제는 0.1-1.0% 화합물-I의 임상 용량 강도를 갖는 용해도를 제공하였다.

화합물-I 또는 이의 유리 염기의 시클로덱스트린 기반 용액은 균일한 용액으로 제1 활성제의 용해도를 향상시킬 뿐만 아니라 국소 안구 투여시 후안부에서 제1 활성제의 치료지수가 상당히 증가된 이전에 관찰되지 않은 신규 특징을 보였다. 용액은 전안부 노출을 감소시킴으로써 용액 내 활성제의 농도를 증가시키고 전달 빈도를 증가시켰고, 이는 높은 후안부 농도를 유지시켰다. 상기 유익한 특징 두 가지 모두는 소수성 약물과 친수성 착물을 형성하는 시클로덱스트린의 공지된 특성과 관련된다. 문헌(Stella & He, Cyclodextrins, Toxicol . Pathol ., 36: 30-42 (2008))을 참조한다. 화합물-I 또는 이의 유리 염기와 제제화될 때, 시클로덱스트린은 투명한 무색용액을 형성하고 물과 유사한 점도를 나타냈다. 국소 안구 투여 후, 화합물-I/시클로덱스트린 착물은 약리학적으로 불활성이며 대사적으로 불활성인 외관을 보였다. 화합물-I/시클로덱스트린 착물은 시클로덱스트린이 활성제로부터 자발적으로 해리될 때까지 각막 내성을 제공하여 후안부 그의 의도하는 작용부위, 예를 들어, 맥락막 및 망막에서 높은 농도의 화합물-I을 이용 가능하게 하였다.

더치 벨티드 토끼에서 1 내지 30일 지속되는 국소 안구 투여 연구 과정에서, 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액은 유사한 약물 농도에서 겔 드롭 제제(실시예 2 참조)에 비해 각막 노출을 극적으로 낮춘다는 것을 증명하였다. 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액을 사용하여 겔 드롭의 등몰 제제의 투여에 비해 각막 농도를 약 10x 감소시켰다. 결과적으로, 시클로덱스트린 기반 용액으로서 약 0.6% 화합물-I의 국소 안구 투여 30일 후에 어떤 바람직하지 않은 결과도 시험 제품 또는 비히클에 기인하지 않았다. 또한, 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액은 후안부 표적 조직에서, 예를 들어 중심 맥락막 및 중심 망막에서 약물의 동일하거나 더 높은 농도를 달성하였다. RTK 억제를 증가시키기 위해 후안부 생체이용률을 증가시키면서 저조한 안구 내성을 방지하기 위하여 각막 약물 노출을 감소시키는 병용 효과는 치료지수 및 환자가 경험하는 상응하는 이점(들)을 상당히 증가시킬 수 있다.

현탁액 기반 제제(실시예 3 참조) 및 시클로덱스트린 제제 모두에 대해, 상당한 노출 감소(약 10-100X 또는 1-2 log 감소)로 인해 치료 범위가 확장된다. 노출 감소는 각막 안정성/내성을 향상시키고, 이는 국소 투여되는 화합물-I의 더 높은 투여 농도 또는 투여 빈도를 가능하게 한다. 더 높은 농도는 약물이 눈 뒤의 표적 조직 농도가 더 높이 도달할 수 있게 해주고, 이는 화합물-I의 치료 효능을 향상시킨다.

본 연구는 토끼와 개에서, 안과 겔 드롭의 국소 안구 투여가 높은 각막 조직 노출(≥100uM) 및 전안부에서 상응하는 바람직하지 않은 관찰결과, 예를 들어 불편함, 각막 및 결막 염증, 각막 상피 미란 및/또는 박화 및 변성과 관련된다는 것을 증명하였다. 반면, 화합물-I 안과 용액의 반복된 국소 안구 투여는 등몰 용량의 안과 겔 드롭보다 대략 5-10 배 더 낮은 각막 노출을 가져왔으며, 바람직하지 않은 임상 또는 조직병리적 결과가 없다. 또한, 화합물-I 안과 용액으로 국소 안구 투여는 등몰 용량의 안과 겔 드롭에 비해 중심 맥락막에서 동일하거나 더 높은 표적 치료 노출을 달성하였다. 종합적으로, 물리화학적 안정성 향상과 함께, 동시에 후안부 표적 조직에 약물 전달을 유지 또는 촉진하면서 각막 노출의 감소와 상응하는 안구 내성의 향상의 조합은 안과 겔 드롭 제제에 비해 환자에게 더 큰 이점을 제공한다.

실시예 5

더치 벨티드 토끼에서 화합물-I의 여러 제제의 국소 안구 용량 투여 및 투여 용법 후, 안구 약동학을 조사하였다. 3가지 용량의 화합물-I을 가진 9가지 상이한 국소 안구용 제제를 1일 1회(q.d.) 또는 1일 2회(b.i.d.) 연속 1, 4, 또는 5일 동안 투여하였다. 연구 설계(표 10A-B 참조)는 양변위 피펫을 이용하여 3가지 화합물-I 제제 또는 비히클 제제 중 하나의 30 ㎕의 좌우 국소 안구 용량을 각각 받은 72마리 토끼로 이루어졌다.

각 화합물-I 제제의 조성은 표 8A에 기재되어 있다. 모든 용량은 예정된 투여 시간 ± 1시간 내에 투여하였다. 제1일에, 그룹 1, 2, 4-6, 8, 10, 11, 13, 15, 및 17은 1일 또는 4일 동안 1회 용량(q.d.)을 받았다. 제1일 내지 제4일에, 그룹 3, 7, 9, 12, 14, 및 16은 7:00 AM 및 3:00 PM에 대략 8시간 간격으로 4일 동안 b.i.d 투여받았다. 그룹 18 및 19의 동물은 비히클 단독 제제를 연속 5일 동안 b.i.d 투여받았다.

그룹 1의 안구 시료는 제1일 용량에 대해 투여 후 0.5, 1, 2, 4, 8, 및 24시간에 채취하였다. 그룹 2 및 6의 안구 시료는 제5일 아침 투여에 대해 투여 후 1, 8, 및 24시간에 채취하였다. 그룹 3, 7, 8, 11, 및 13의 안구 시료는 제5일 아침 투여에 대해 투여 후 1 및 24시간에 채취하였다. 그룹 4, 9, 10, 12, 14, 15, 16, 및 17의 안구 시료는 제5일 아침 투여에 대해 투여 후 1시간에 채취하였다. 그룹 5의 안구 시료는 제1일 용량에 대해 투여 후 0.5, 1, 2, 4, 8, 및 24시간에 채취하였다. 그룹 18 및 19의 동물은 5일 동안 임상적 관찰만 따랐다.

방수, 각막, 중심 및 주변 망막, 및 중심 및 주변 맥락막 시료를 수집하였다. 그 후 방수, 각막, 중심 망막, 및 중심 맥락막 시료를 분석하였다. 주변 망막 및 주변 맥락막 시료는 연구 프로토콜 당 그룹 1-8, 12, 14, 및 16에 대해서만 분석하였다.

토끼 방수, 각막, 중심 및 주변 망막, 및 중심 및 주변 맥락막 시료를 분석하였다. 대조군 기질에서 보정곡선을 작성하여 여러 조직에서 화합물-I의 농도를 결정하였다.

실시예 6

더치 벨티드 토끼에서 히드록시프로필-β-시클로덱스트린("HDβCD")을 포함하는 화합물-I의 국소 안구 용액의 여러 투여 용법의 안구 용량 투여 후, 안구 약동학을 계산하였다. 4가지 상이한 용량의 화합물-I을 가진 9가지 상이한 국소 안구 용액을 1일 1회(q.d.) 또는 1일 2회(b.i.d.) 연속 4, 또는 5일 동안 투여하였다. 연구 설계는 양변위 피펫을 이용하여 4가지 화합물-I 투여 강도 중 하나를 30 ㎕의 좌우 국소 안구 용량으로 각각 받은 40마리 토끼로 이루어졌다.

모든 용량은 제1일에 투여받은 그룹 1, 4, 및 10을 제외하고 예정된 투여 시간 ± 1시간 내에 투여하였다. 제1일에 최초 용량은 12:00 PM에 투여하고, 2차 용량(그룹 1 및 10)은 대략 4시간 후에 투여하였다. 이는 제제의 도착 지연으로 인한 것이었다. 이들 그룹에 대한 다른 모든 투여는 예정대로 하였다. 제1일에 그룹 4-8, 및 11-12는 1회 용량(q.d.)을 4일 동안 받았다. 제1일 내지 제4일에, 그룹 1-3, 및 9-10은 4일 동안 대략 8시간 간격으로 b.i.d 투여받았다.

제4일에 1일 최초 투여 후 24시간에 안구 시료를 채취한 그룹 5b 및 6b를 제외하고, 제5일에 1일 최초 투여 후 1시간에 모든 그룹에 대해 안구 시료를 채취하였다.

혈장 수집을 위한 혈액 시료는 모든 동물에 대해 예정된 안락사 직전에 얻었다. 방수, 각막, 중심 및 주변 망막, 및 중심 및 주변 맥락막 시료를 수집하였다. 그룹 1-12의 각막, 중심 망막, 및 중심 맥락막 시료를 분석하였다. 방수, 주변 망막, 및 주변 맥락막 시료는 분석하지 않았다.

실시예 7

시클로덱스트린을 포함하는 화합물-I의 안구 용액을 제조하고 다양한 동물 그룹에서 시험하였다. 0.4%(약 4 mg/mL) 화합물-I과 시클로덱스트린의 용액의 국소 안구 투여 시, 눈의 여러 조직 및 안구액에서 활성제의 농도를 측정하였다. 중심 맥락막, 중심 망막, 방수, 및 각막에서 화합물-I의 평균 농도를 측정하였다. 화합물-I은 8.41% 클렙토스® 및 0.142% 포스페이트 완충액; 8.9% 클렙토스® HPB 및 0.142% 포스페이트; 4.88% 캡티솔® 및 0.142% 포스페이트; 또는 4.88% 캡티솔® 및 0.122% 포스페이트를 포함한 용액(0.4% 또는 4 mg/mL) 내에 있었다. 표 10A-B를 참조한다.

화합물-I의 중심 맥락막 농도는 0.259 μM 내지 0.769 μM 였다. 표 10A를 참조한다. 화합물-I의 중심 망막 농도는 0.0531 μM - 0.124 μM 였다. 표 10A를 참조한다. 화합물-I의 방수 농도는 0.00313 μM - 0.00656 μM 였다. 표 10A를 참조한다. 화합물-I의 각막 농도는 6.49 μM - 30 μM 였다. 표 10A를 참조한다. 용액을 제조하는 데 사용된 시클로덱스트린은 클렙토스® HPB 또는 캡티솔®이었다. 표 10B를 참조한다.

실시예 8

안구 독성학 연구

용량 제한적인 안구 독성은 더치 벨티드 토끼 및 비글 견에서 각막 및 결막 결과로 특성화하였다. 화합물-I 안과 겔 드롭으로 반복 투여 독성학 연구의 이들 안구 결과는 임상 안과 및 조직병리학적 평가에 기초하였고 결막 충혈, 결막부종, 울혈, 및 분비물, 각막 혼탁 및 상피 미란, 및 각막결막염에 한정하였다. 눈의 심층구조(홍채, 수정체, 모양체, 망막, 맥락막, 공막) 또는 시신경과 관련한 바람직하지 않은 변화는 관찰되지 않았다. 망막 기능은 토끼에서 실시된 전체 시야 망막전도 검사에서 모든 시험 제품과 비히클 처리군에서 정상이었다.

탐색적 안구 독성학 연구의 목적은 a) 우수한 내성을 갖는 국소 안구용 제제 및 b) 중심 맥락막에서 화합물-I의 표적 치료 농도를 달성할 수 있는 제제를 확인하는 것이었다.

염화벤질알코늄 함유 또는 미함유 0.3% 화합물-I 안과 겔 드롭 제제로 1일 2회 국소 투여 후 화합물-I의 평균 안구 조직 농도는 더치 벨티드 토끼에서 각막에서 최고였으며 각막(236-260μM) >> 주변 맥락막(2.79-4.10 μM), 중심 맥락막(0.340-0.496μM), 주변 망막(0.150-0.309μM) 및 방수(0.0197-0.0395μM) 였다.

안과 임상검사시 더치 벨티드 토끼에서 가벼운 결막염이 단지 몇 회 산발적으로 발생하고 각막에는 주목할 만한 결과가 없다고 밝혀진, 트리스 기반 제제는 우수한 내성을 보였다. 게다가, 0.3% w/v 화합물-I 트리스 기반 현탁액을 1일 2회 30일 동안 받은 동물의 눈은 현미경 평가 과정에서 정상으로 간주되었다. 염화 벤질알코늄 함유 또는 미함유 0.3% 화합물-I 트리스 기반 현탁액으로 1일 2회 국소 투여 경우 제30일에 1일 최초 국소 안구 투여 후 1시간 ± 15분에 평가된 화합물-I의 평균 안구 조직 농도는 각막에서 최고였으며, 각막 (2.69-3.10μM) >>주변 맥락막 (0.781-1.21μM), 중심 맥락막 (0.303-0.319μM), 주변 망막 (0.0819-0.0868μM), 중심 망막 (0.0495-0.0592μM), 및 방수 (0.00127-0.00145μM) 였다.

히드록시프로필-베타-시클로덱스트린(HP-β-CD, 클렙토스® HPB)를 이용한 시클로덱스트린 기반 용액은 더치 벨티드 토끼에서 0.1% 화합물-I(2.1% HP-β-CD)로 1일 2회, 0.2% 화합물-I(4.21% HP-β-CD)로 1일 2회, 0.4% 화합물-I(8.41% HP-β-CD)로 1일 1회 또는 2회, 및 0.6% 화합물-I(최대 12.62% HP-β-CD)로 1일 1회 또는 2회 30일간 국소 투여될 때 우수한 내성을 보였다. 게다가, 유사한 반복 투여 연구에서, 클렙토스® HPB, 클렙토스® HP, 또는 캡티솔® 내 0.4% w/v 화합물의 시클로덱스트린 기반 용액은 1일 2회 24일 동안 투여될 때 우수한 내성을 보였다. 화합물-I 또는 비히클 처리와 관련된 명백한 안구 독성은 어느 연구에서도 안과 임상검사 또는 현미경 검사 중에 전혀 발견되지 않았다.

24일 연구에서, 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액으로 처리한 눈의 안구 조직 농도를 제24일에 1일 최초 국소 안구 투여 후 1시간 ± 15분에 평가하였으며, 이는 각막에서 최고였으며, 내림차순으로 각막(6.49-30μM) >> 중심-펀치(center-punch) 맥락막(0.212-0.769μM) > 중심-펀치 망막(0.0531-0.124) > 방수(0.002-0.007) 였다.

요컨대, 용량 제한적인 각막 독성을 화합물-I 안과 겔 드롭 제제에서 관찰하였다. 안과 겔 드롭은 시클로덱스트린 기반 용액에 비해 화합물-I의 각막 농도를 5배 내지 15배로 높게 만들고, 트리스 기반 현탁액에 비해 화합물-I의 각막 농도를 50배 내지 100배로 높게 만든다. 화합물-I 트리스 기반 현탁액 및 시클로덱스트린 기반 용액은 명백한 안구 독성의 증거 없이 우수한 내성을 보였다. 1일 1회 또는 2회 투여될 때 화합물-I의 시클로덱스트린 기반 용액 또는 트리스 기반 현탁액에 우수한 내성을 갖는 용량 수준은 적어도 30일 동안 약 0.005% 내지 약 5.0% w/v 범위였다. 또한, 시클로덱스트린 기반 용액은 등몰 용량의 3가지 제제를 이용할 때 화합물-I의 최고 중심 맥락막 농도를 제공하였으며, 표적 치료 농도를 충족시키거나 초과하였다.

실시예 9

신생혈관성 AMD 환자에서 용량 증가 연구를 위한 I상 프로토콜

I상 연구는 신생혈관성 노인 황반변성(AMD) 환자에서 화합물-I의 국소 안구 투여 후 안정성, 내성, 및 약동학을 평가하기 위해 설계된 12주, 개방 표지, 용량 증가, 다기관 임상시험이다. 최대 60명 환자 전체가 화합물-I 안과 용액의 국소 안구 투여로 1일 1 내지 2회 3개월간 치료받는다. 이때 용량 증가 단일 요법의 3개 군 및 최대 내성 단일요법 용량에 더하여 루센티스®의 유리체 내 단일 주사를 이용하는 한 개의 보조 요법 군을 설계한다(치료 군 당 15명 환자). 독립적인 판독 센터에 의해 확인된 사전 명시된 시력 및 CNV 병변 기준을 충족시키는 환자는 동시에 국소 안구 투여를 중단하고 표준 치료법으로 치료받도록 한다.

임상 연구용 화합물-I 안과 용액은 0.1% 내지 1.0%(w/v)(화합물-I로서) 범위의 적어도 3가지 투여 강도로 제조한다. GLP 배치(batch)의 강도는 0%(플라세보), 0.1%, 0.3%, 0.6%, 및 1.0% 화합물-I HCl이다. 최대 2 내지 3배 증가 용량(대략 ½ log 단위 단계)을 다음 코호트에 투여한다.

실시예 10

0.1-1.0%(1 내지 10 mg/ml)의 약물 강도에 대해 물리적 화학적으로 모두 안정한 "겔이 아닌(non-gel)," "비점성의" 균질한 안과 용액 국소 제제는 화합물-I 농도, 시클로덱스트린 착화제 농도, pH, 및 긴장성, 화합물-I 용해도 및 안정성을 측정하여 제조하였다. 적합한 완충 시스템은 1 mg/mL 미만 농도에서 안정성에 따라 pH 변화를 방지한다. 포스페이트 및 트로메탄올(트리스) 두 가지 모두 완충제로서 평가하였다. 긴장성을 조절하는 데 염화나트륨을 사용하였다.

제품 품질 속성은 표 14에 나타낸다.

<표 14>

제제 제조

표 12 및 13에 개략적으로 나타낸 제제는 열거한 일반적인 절차를 이용하여 제조하였다.

제제는 주사용 물로 부피에 맞추고 500 rpm에서 30분간 교반하였다. 최종 pH를 확인하고 NaOH 또는 HCl를 이용하여 목표 범위로 조정하였다. 약 5ml 분액을 플렉시콘(Flexicon) 필러가 장착되고 0.2 마이크론 PVDF 캡슐 필터에 부착된 왓슨 말로 펌실(Watson Marlow Pumpsil) D 관을 이용하여 일정한 속도로 연속적으로 교반하면서 반투명 5ml LDPE 병으로 직접 여과한다. 모든 시료 제조가 완료될 때까지 시료는 2-8℃에서 보관한다. 그 후 모든 시료는 보관 및 시험을 위해 분석받았다.

실시예 11

화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 EGFR 활성을 결정하기 위한 각막 상피 세포( hTCEpi 세포)에서 EGFR 티로신 인산화 분석

더 높은 농도의 EGF가 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물에 의한 EGFR 키나아제 활성의 억제를 극복할 수 있는지를 결정하기 위해 각막 상피 세포에서 EGFR 티로신 분석을 실시하였다.

35 mm 접시의 hTCEpi 세포를 혈청 고갈시킨 후 다양한 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 예를 들어, 화합물-I, 또는 대조군, AG1478(EGFR 키나아제 억제제)로 30분간 전처리하고, 이어서, EGF(10, 50, 100 ng/ml)를 15분간 처리하였다. 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 6가지 농도, 예를 들어, 0, 1 μM, 3 μM, 10 μM, 30 μM, 100 μM, 또는 대조군으로서 1 μM AG1478을 각 EGF 농도(10, 50, 100 ng/ml)에 사용하였다. 실시된 추가의 대조군은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 무첨가 또는 EGF 무첨가였다. 모든 실험은 3회 반복하였다. 그 후 세포를 수거하고 인산화된 EGFR(티로신 1068 및 티로신 1045) 및 전체 EGFR을 결정하기 위해 면역블롯하였다.

EGFR 인산화는 수용체 활성의 판독 값으로 사용된다. [도 1]에 나타낸 바와 같이, 고농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물은 리간드 자극된 EGFR 티로신 인산화를 억제하고 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 농도를 증가시켜 양쪽 부위에서 EGFR 티로신 인산화를 억제할 수 있었다. EGF의 농도를 증가시켜 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물로 인한 EGFR 억제 및 각막 부작용을 극복한다(도 1). EGFR 특이적 억제제, AG1478은 IC₅₀ = 3 nM이며, 1 μM AG1478은 EGFR 인산화를 완전히 차단하였다. 100 μM의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물이 EGFR 인산화 ~ 75-80%를 억제하는 것으로 추정된다.

실시예 12

화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 및 제2 활성제를 이용한 각막 상피 세포( hTCEpi 세포)에서 EGFR 티로신 인산화 분석

비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드가 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물이 EGFR를 억제하는 것을 방지할 수 있는지와 EGFR 활성에 증가가 있는지를 결정하기 위하여 각막 상피 세포에서 EGFR 티로신 분석을 실시하였다.

35 mm 접시의 hTCEpi 세포를 혈청 고갈시킨 후 비타민 K(50 μM), 니코틴산(10 μM), 또는 니코틴아미드(10μM)로 4시간 전처리하고, 이어서, 다양한 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 예를 들어, 화합물-I로 30분간 처리하였다. 그 후 세포를 EGF(50 ng/ml)와 15분간 인큐베이션하였다. 세포를 수거하고 세포 용해물은 인산화된 EGFR(티로신 1068 및 티로신 1045) 및 전체 EGFR 농도를 결정하기 위해 면역블롯하였다. [도 2]에 나타낸 바와 같이, 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드는 화학식 I 또는 Ⅱ 화합물 매개된 각막 부작용(EGFR 억제)을 극복한다. 또한, [도 2]는 비타민 K₃(메나디온)이 EGFR 티로신 인산화의 화학식 I 또는 Ⅱ 화합물 매개된 억제를 가장 효과적으로 약화시켰다는 것을 보여준다.

실시예 13

각막 상피세포( hTCEpi 세포)에서 세포 이동/증식(시험관 내 상처 치유)의 결정: 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 EGF의 효과

각막 상피 세포에서 세포 이동/증식의 결정은 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 EGF의 존재하에서 세포 이동/증식을 결정하여 실시하였다.

hTCEpi 세포를 실리콘 마개와 함께 평판 배양하였다. 그 후 세포를 혈청 고갈시키고 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 또는 대조군 화합물 AG1478과 30분간 전처리하였다. 그 후 실리콘 마개를 제거하여 무세포 영역을 생성하였다. 세포를 사진 촬영한 후 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 또는 AG1478과 함께 EGF(10, 50, 또는 100 ng/ml) 또는 VEGF(10 ng/ml)로 16시간 처리하였다. 세포를 다시 사진촬영하고 세포 이동을 현미경사진으로부터 정량하였다. 모든 실험은 3회 반복하였다.

화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 4가지 농도(0, 3 μM, 10 μM, 30 μM) 또는 3.2 μM AG1478(EGFR 키나아제 억제제)을 각 EGF 농도 또는 VEGF에 사용하였다. 실시된 추가의 대조군은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 무첨가 또는 EGF 무첨가였다.

데이터로 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물이 각막 상피 상처 치유(세포 이동 및 증식)의 시험관 내 측정값을 방지하는지와 더 높은 수준의 EGF가 수용체 티로신 키나아제 억제를 극복하는지를 결정할 수 있다. [도 3a 및 3b]에 나타낸 바와 같이, 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물은 EGFR 매개된 hTCEpi 세포 시험관 내 "상처 치유"를 용량 의존적으로 억제하였다.

실시예 14

각막 상피세포( hTCEpi 세포)에서 세포 이동/증식(시험관 내 상처 치유)의 결정: 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 제2 활성제의 효과

각막 상피 세포에서 세포 이동/증식의 결정은 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 단독 또는 비타민 K, 니코틴산, 또는 니코틴아미드와 함께 존재하에서 세포 이동/증식을 결정하여 실시하였다.

hTCEpi 세포를 실리콘 마개와 함께 평판 배양하였다. 그 후 세포를 혈청 고갈시킨 후 변화하는 농도의 비타민 K₃ 유사체, 메나디온과 4시간 전처리하고 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물을 30분간 추가하였다. 마개를 제거하였다. 세포를 사진 촬영한 후 여러 농도의 비타민 K, EGF, 및/또는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물을 처리하였다. 세포를 다시 사진촬영하고 세포 이동을 현미경사진으로부터 정량하였다. 실시된 추가의 대조군은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 무첨가 또는 EGF 무첨가였다. 모든 실험은 3회 반복하였다.

[도 4a 및 4b]에 나타낸 바와 같이, 시험관 내 상처 치유에 대한 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 억제 효과는 0.3 μM 메나디온의 첨가로 역전될 수 있다. 0.3 μM의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 단독에 비해, 0.3 μM의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물이 0.3 μM 메나디온와 병용될 때 시험관 내 상처 치유에 있어 통계적으로 유의한 차이가 있었다.

실시예 15

생체 내에서 기초 및 EGF 매개된 각막 상처 치유의 결정: 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 효과

각막 상처 치유의 기초 및 리간드 자극된 비율에 대한 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 효과는 C57/Bl 생쥐에서 결정하였다.

8주령 C57/Bl 생쥐의 각막에 상처(1.5 mm 표면 상피 상처)를 준 후 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물(0, 1.0 μM, 10 μM, 30 μM, 또는 50 μM)로 전처리하고, 이어서 EGF(0, 10, 100 ng/ml)를 첨가하였다. 대조군으로서, AG1478(EGFR 키나아제 억제제)를 100 ng/ml EGF의 존재 및 부재 하에 사용하였다. 상처 크기는 플루오레세인 염색하고 40시간에 걸쳐 형광 사진촬영하여 모니터하였다. 상처 봉합은 이미지(Image) J 소프트웨어를 이용하여 정량하였다.

[도 5a, 5b, 5c, 및 5d]에 나타낸 바와 같이, 생체 내 각막 상피 상처 치유는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 존재하에서 용량 의존적 방식으로 감소하였다. 상처 치유의 최대 억제는 AG1478의 농도보다 5배 더 높은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 농도에서 관찰되었다. 각막에 상처주기 전 48시간 동안 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 48시간 전처리는 전처리가 없을 때보다 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 더 낮은 농도에서 각막 상피 상처 치유를 억제하였다.

실시예 16

생체 내에서 기초 및 EGF 매개 각막 상처 치유의 결정: 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및 제2 활성제의 효과

각막 상처 치유에 대한 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 및/또는 제2 활성제의 효과는 C57/Bl 생쥐에서 결정하였다.

8주령 C57/Bl 생쥐의 각막은 비히클, 0.3 μM 메나디온, 10 μM의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 0.3 μM 메나디온 및 10 μM의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물의 국소 투여로 전처리하고 48시간 후에 각막에 상처(1.5 mm 표면 상피 상처)를 주었다. 상처 크기는 플루오레세인 염색 및 형광 사진촬영으로 모니터하였다. 상처 봉합은 40시간에 걸쳐 모니터하였다.

[도 6a, 6b, 및 6c]에 나타낸 바와 같이, 메나디온(0.3 μM)은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물(10 μM) 전처리의 각막 상피 상처 치유에 대한 효과를 역전시켰다.

실시예 17

화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물에 의한 VEGFR의 억제에 대한 메나디온의 효과

인간 망막 내피세포는 0, 0.3, 또는 3 μM 메나디온으로 4시간 처리하고, 이어서 메나디온 내 변화하는 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물(1 nM, 10 nM, 100 nM, 또는 1 μM)로 30분 처리하였다. 그 후 세포를 0.5 nM(10 ng/ml) VEGF로 자극하였다. 세포를 용해시켰다. 용해물은 7.5% SDS-PAGE로 분석하고, 니트로셀룰로스로 이동시켜, 인산화 VEGFR2, 전체 VEGFR2, 또는 로딩 대조군으로서 α-튜불린에 대해 면역블롯하였다. [도 7a]에 나타낸 바와 같이, 메나디온은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물에 의해 매개된 VEGFR2 인산화의 억제 IC₅₀을 변화시키지 않았다.

실시예 18

1차 인간 망막 미세혈관 내피세포 증식에 대한 메나디온의 효과

인간 망막 내피세포는 메나디온으로 4시간, 그 후 명시된 농도의 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물로 30분간 전처리하고, 0.5 nM(10 ng/ml) VEGF를 하룻밤 첨가하였다. 생존 세포는 알라마 블루(Alamar Blue) 분석(Thermo Fisher)으로 정량하였다. 데이터는 VEGF 또는 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물로 처리하지 않은 세포에 대한 성장율로 플레이팅하고, [도 7b]에서 평균 ± S.E.M.으로 나타낸다. [도 7b]에 나타낸 바와 같이, 메나디온은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물에 의해 매개된 VEGF 매개 망막 내피세포 증식의 억제 IC₅₀을 변화시키지 않았다.

실시예 19

메나디온이 EGFR 활성을 상승시키는 기전의 결정

hTCEpi 세포는 메나디온(0, 0.3, 또는 3.0 μM)로 4시간 전처리하였다. 그 후 세포는 8.0 nM(50 ng/ml) EGF와 0-3시간 인큐베이션하였다. 세포를 용해시키고 용해물은 SDS-PAGE로 분석하고, 인산화된 EGFR(pY1068), 전체 EGFR, 또는 α-튜불린에 대해 면역블롯하였다. [도 8]에 나타낸 바와 같이, 메나디온 처리는 기초 EGFR 인산화를 변화시키거나 EGFR 탈인산화를 지연시키지 않았다. 0.3 mM 메나디온은 EGFR 분해의 동역학을 지연시켰으며, 이는 메나디온이 수용체 분해의 동력학을 지연시키거나 신규 수용체 합성 속도를 증가시킴으로써 EGFR 수용체 신호전달을 유지할 수 있다는 것을 나타낸다.

실시예 20-1

더치 벨티드 토끼에서 본 출원의 제제의 안구 약동학

비-GLP 연구를 실시하여 더치 벨티드 토끼의 양쪽 눈에 4일간 국소 점적 주입으로 1일 1회 또는 2회 투여될 때, 현탁액 또는 용액 내 본 출원의 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 안구 약동학을 평가하였다. 연구 설계(표 15-1)는 45마리 더치 벨티드 토끼로 이루어졌으며, 각각은 30 ㎕의 좌우 국소 안구 용량을 받았다. 투여는 표 15-1의 투여 용법에 따라 실시하였다.

<표 15-1>

안구 시료는 제5일에 1일 최초 투여 후 1시간에 모든 그룹에 대해 채취하였다. 전혈 시료는 항응고제로서 K₂EDTA을 사용하여 제5일에 투여 후 1시간에 모든 동물로부터 수집하였다. 전혈은 얼음에 두었다가 시료를 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 방수, 결막, 각막, 중심 망막, 주변 망막, 중심 맥락막, 및 주변 맥락막 시료는 검시 후 수집하였다. 그 후 시료는 -70℃ 이하에서 냉동시켰다. 모든 그룹 1-15의 혈장, 중심 망막, 중심 맥락막, 및 각막 시료를 분석하였다.

모든 투여 그룹에 대해, 제5일에 평가된 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 안구 조직 농도는 각막에서 최고였으며, 내림 차순으로 각막 >> 중심 맥락막 > 중심 망막이었다(표 15-2). 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 최고 각막 농도는 그룹 10에서 확인되었다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 최저 각막 농도는 그룹 8에서 확인되었다. 일반적으로, 더 높은 중심 망막 및 중심 맥락막 농도는 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 더 높은 각막 농도와 관련되었다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 각막 농도에서 감소 또는 중심 망막 또는 중심 맥락막 농도에서 증가와 관련하여 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 안과 용액에 대해 기타 제제의 이점은 발견되지 않았다.

<표 15-2>

안구 자극을 점수 매기기 위한 드레이즈 척도를 이용한 육안 안구 검사는 연구 기간 중 매일 최초 투여 전에 모든 동물에 실시하였다. 모든 제제는 우수한 내성을 보였다. 또한, 동물은 연구 전, 투여 기간, 및 검시시 일반 건강을 관찰하였다. 연구에 지정된 모든 동물은 정상이었다. 검시 평가는 드레이즈 점수 시트 및 안과 검사 형식에 이미 지시된 것 이외의 관찰결과로 이루어졌다. 모든 제제에 대해, 투여 관찰결과는 드레이즈 안구 자극 점수 시스템을 이용하여 평가하였다. 제5일에 검시 전, 그룹 I에서 한 마리와 그룹 M에서 한 마리에서 양쪽 눈에 발적 수준 I이 나타난 것을 제외하고 이상 관찰결과가 나타나지 않았다.

실시예 20-2

비-GLP 연구를 실시하여 더치 벨티드 토끼의 양쪽 눈에 4일간 국소 점적 주입으로 1일 1회, 3회 또는 4회 투여될 때, 현탁액 또는 용액 내 본 출원의 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 안구 약동학을 평가하였다. 연구 설계(표 16-1)는 39마리 더치 벨티드 토끼로 이루어졌으며, 각각은 30 ㎕의 좌우 국소 안구 용량을 받았다. 투여는 표 16-1의 투여 용법에 따라 실시하였다.

<표 16-1>

안구 시료는 제5일에 1일 최초 투여 후 1시간에 모든 그룹에 대해 채취하였다. 전혈 시료는 항응고제로서 K₂EDTA을 사용하여 제5일에 투여 후 1시간에 모든 동물로부터 수집하였다. 전혈은 얼음에 두었다가 시료를 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 방수, 결막, 각막, 중심 망막, 주변 망막, 중심 맥락막, 및 주변 맥락막 시료는 검시 후 수집하였다. 그 후 시료는 -70℃ 이하에서 냉동시켰다. 모든 그룹 1-13의 혈장, 중심 망막, 중심 맥락막, 및 각막 시료를 분석하였다.

모든 투여 그룹 대해, 제5일에 평가된 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 안구 조직 농도는 각막에서 최고였으며 내림 차순으로 각막 >> 중심 맥락막 > 중심 망막이었다(표 16-2). 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 최고 각막 농도는 그룹 1에서 확인되었다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 최저 각막 농도는 그룹 3에서 확인되었다. 일반적으로, 더 높은 중심 망막 및 중심 맥락막 농도는 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 더 높은 각막 농도와 관련되었다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 각막 농도에서 감소와 중심 망막 및 중심 맥락막 농도에서 증가와 관련하여 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 안과 용액에 대해 기타 제제의 이점은 발견되지 않았다.

<표 16-2>

안구 자극을 점수 매기기 위한 드레이즈 척도를 이용한 육안 안구 검사는 연구 기간 중 매일 최초 투여 전에 모든 동물에 실시하였다. 모든 제제는 우수한 내성을 보였다. 또한, 동물은 연구 전, 투여 기간, 및 검시시 일반 건강을 관찰하였다. 연구에 지정된 모든 동물은 정상이었다. 검시 평가는 드레이즈 점수 시트 및 안과 검사 형식에 이미 지시된 것 이외에 관찰결과로 이루어졌다. 모든 제제에 대해, 투여 관찰결과는 드레이즈 안구 자극 점수 시스템을 이용하여 평가하였다. 연구 기간에 걸쳐 하기 이상 관찰결과가 나타났다. 그룹 7, 9, 10, 11, 12, 및 13의 동물들은 여러 연구일에 걸쳐 투여 후 깜박거림의 증가를 경험하였고, 그룹 11 중 한 마리는 제3일에 분비물 1단계를 나타냈다.

실시예 20-3

비-GLP 연구를 실시하여 더치 벨티드 토끼의 양쪽 눈에 4일간 국소 점적 주입으로 1일 1회, 2회 또는 3회 투여될 때, 현탁액 내 본 출원의 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 안구 약동학을 평가하였다. 연구 설계(표 17-1)는 39마리 더치 벨티드 토끼로 이루어졌으며, 각각은 30 ㎕의 좌우 국소 안구 용량을 받았다. 본 출원의 여러 현탁 제제는 두 가지 대조군 제제 a) 시클로덱스트린 기반 점안 용액(대조군 그룹 13, 표 17-1), 및 b) 앞선 토끼 약동학 연구에서 사용된 파일럿 현탁 제제(대조군 그룹 10, 표 17-1)에 대해 평가하고 비교하였다. 표 17-1에 열거된 각 현탁액에 대한 제제의 변수 비교는 표 17-2에 제공한다. 시험 현탁액에 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I을 사용하였지만, 점안 용액 제제는 화합물-I에서 유래한다.

<표 17-1>

<표 17-2>

제5일에 평가된 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 안구 조직 농도는 각막에서 최고였으며 내림 차순으로 각막 >> 중심 맥락막 > 중심 망막이었다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 각막 농도는 그룹 13에서 관찰된 최고 농도와 그룹 1에서 최저로 1.5 내지 14.7 μM 범위였다. 모든 현탁 제제, 그룹 1-12는 점안 용액 대조군 그룹 13과 비교하여 평균 각막 농도가 더 낮았다. 이들 관찰결과는 현탁 제제 내 비타민 K₃/메나디온의 유무에 의해 영향을 받지 않는 것으로 보였다. 중심 맥락막 농도는 그룹 11에서 관찰된 최고 농도와 그룹 2에서 최저로 <0.028 내지 0.27 μM 범위였다. 중심 망막 농도는 0.009 내지 0.069 μM 범위였다. 그룹 11은 최고의 중심 망막 농도를 보였고 그룹 1은 최저의 중심 망막 농도를 보였다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 혈장농도는 중심 망막 및 중심 맥락막에 비해 각각 약 10배 및 100배 낮은 것으로 매우 낮았다. 표 17-3을 참조한다.

<표 17-3>

추가적으로, 그룹 8 및 9의 동물의 혈장, 중심 망막, 중심 맥락막, 및 각막 시료에서 비타민 K3 농도를 결정하였다. 대조군 기질에서 작성된 보정 곡선을 이용하여 비타민 K3의 농도를 결정하였다. 표 17-4를 참조한다.

<표 17-4>

안구 자극을 점수 매기기 위한 드레이즈 척도를 이용한 육안 안구 검사는 연구 기간 중 매일 최초 투여 전에 모든 동물에 실시하였다. 결막부종이 나타난 투여 제4일에 그룹 11에서 한 마리, 결막 발적이 나타난 투여 제4일에 그룹 12에서 한마리를 제외하고 모든 제제는 우수한 내성을 보였다. 또한, 동물은 연구 전, 투여 기간, 및 검시시 일반 건강을 관찰하였다. 연구에 지정된 모든 동물은 정상이었다. 검시 평가는 드레이즈 점수 시트에 이미 지시된 것 이외에 관찰결과로 이루어졌다. 모든 제제에 대해, 투여 관찰결과는 드레이즈 안구 자극 점수 시스템을 이용하여 평가하였다. 연구 기간에 걸쳐 하기 이상 관찰결과가 나타났다. 그룹 4, 6, 7, 8, 9, 및 11의 동물들은 여러 연구일에 걸친 투여 후 깜박거림의 증가를 경험하였고, 그룹 4 중 한 마리는 제5일 검시 전에 양쪽 눈에 발적 단계 I과 왼쪽 눈에 결막부종 단계 I을 나타냈으며, 그룹 5중 한 마리는 제5일 검시 전에 오른쪽 눈에 결막 부종 단계 I을 나타냈다.

실시예 20-5

비-GLP 연구를 실시하여 더치 벨티드 토끼의 양쪽 눈에 4일간 국소 점적 주입으로 1일 1회 또는 2회 투여될 때, 현탁액 내 본 출원의 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 안구 약동학을 평가하였다. 연구 설계(표 18-1)는 49마리 더치 벨티드 토끼로 이루어졌으며, 각각은 30 ㎕의 좌우 국소 안구 용량을 받았다. 본 출원의 여러 현탁 제제는 시클로덱스트린 기반 점안 용액(대조군 그룹 2 및 3, 표 18-1)에 대해 평가하고 비교하였다. 표 18-1에 열거된 각 현탁액에 대한 제제의 변수 비교는 표 18-2에 제공한다. 시험 현탁액에 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I을 사용하였지만, 점안 용액 제제는 화합물-I에서 유래한다.

<표 18-1>

<표 18-2>

안구 시료는 제5일에 1일 최초 투여 후 1시간에 모든 그룹에 대해 채취하였다. 전혈 시료는 항응고제로서 K₂EDTA을 사용하여 제5일에 투여 후 1시간에 모든 동물로부터 수집하였다. 전혈은 얼음에 두었다가 시료를 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 방수, 결막, 각막, 중심 망막, 주변 망막, 중심 맥락막, 및 주변 맥락막 시료는 검시 후 수집하였다. 그 후 시료는 -70℃ 이하에서 냉동시켰다. 모든 그룹 1-16의 혈장, 중심 망막, 중심 맥락막, 및 각막 시료는 PAN-90806에 대해 분석하였다.

제5일에 평가된 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 안구 조직 농도는 각막에서 최고였으며, 내림 차순으로 각막 >> 중심 맥락막 > 중심 망막이었다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 각막 농도는 그룹 9에서 관찰된 최고 농도와 그룹 1에서 최저로 3 내지 34 μM 범위였다. 중심 맥락막 농도는 그룹 6 및 14에서 관찰된 최고 농도와 그룹 1에서 최저로 <0.056 내지 0.24 μM 범위였다. 중심 망막 농도는 0.02 내지 0.014 μM 범위였다. 그룹 6은 최고의 중심 망막 농도를 보였고 그룹 1은 최저의 중심 망막 농도를 보였다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 혈장농도는 중심 망막 및 중심 맥락막에 비해 각각 약 5 내지 10배 및 100배 낮은 것으로 매우 낮았다. 표 18-3을 참조한다.

<표 18-3>

안구 자극을 점수 매기기 위한 드레이즈 척도를 이용한 육안 안구 검사는 연구 기간 중 매일 최초 투여 전에 모든 동물에 실시하였다. 모든 제제는 우수한 내성을 보였다. 또한, 동물은 연구 전, 투여 기간, 및 검시시 일반 건강을 관찰하였다. 연구에 지정된 모든 동물은 정상이었다. 검시 평가는 드레이즈 점수 시트에 이미 지시된 것 이외에 관찰결과로 이루어졌다. 모든 제제에 대해, 투여 관찰결과는 드레이즈 안구 자극 점수 시스템을 이용하여 평가하였고, 하기에 요약한다. 이상 관찰결과는 나타나지 않았다.

실시예 20-4

비-GLP 연구를 실시하여 더치 벨티드 토끼의 양쪽 눈에 4일간 국소 점적 주입으로 1일 1회 또는 2회 투여될 때, 현탁액 내 본 출원의 제1 활성제(예를 들어, 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I)의 안구 약동학을 평가하였다. 연구 설계(표 19-1)는 47마리 더치 벨티드 토끼로 이루어졌으며, 각각은 30 ㎕의 좌우 국소 안구 용량을 받았다. 본 출원의 여러 현탁 제제는 시클로덱스트린 기반 점안 용액(대조군 그룹 1, 표 19-1)에 대해 평가하고 비교하였다. 표 19-1에 열거된 각 현탁액 제제의 변수 비교는 표 19-2에 제공한다. 시험 현탁액 및 점안 용액에 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I을 사용하였다. 그러나 상이한 배치의 화합물-I은 특정 현탁액(그룹 13, 14, 및 15, 표 19-1)에서 시험하였다.

<표 19-1>

<표19-2>

안구 시료는 제5일에 1일 최초 투여 후 1시간에 모든 그룹에 대해 채취하였다. 전혈 시료는 항응고제로서 K₂EDTA을 사용하여 제5일에 투여 후 1시간에 모든 동물로부터 수집하였다. 전혈은 얼음에 두었다가 시료를 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 방수, 결막, 각막, 중심 망막, 주변 망막, 중심 맥락막, 및 주변 맥락막 시료는 검시 후 수집하였다. 그 후 시료는 -70℃ 이하에서 냉동시켰다. 모든 그룹 1-15의 혈장, 중심 망막, 중심 맥락막, 및 각막 시료를 분석하였다. 그룹 5의 시료만 비타민 K3에 대해 분석하였다.

제5일에 최초 투여 후 1시간에 평가된 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 안구 조직 농도는 각막에서 최고였으며 내림 차순으로 각막 >> 중심 맥락막 > 중심 망막이었다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 각막 농도는 그룹 12에서 관찰된 최고 농도와 그룹 7에서 최저로 1 내지 25 μM 범위였다. 중심 맥락막 농도는 그룹 12 및 14에서 관찰된 최고 농도와 그룹 7에서 최저로 0.06 내지 0.2 μM 범위였다. 중심 망막 농도는 0.03 내지 0.1 μM 범위였다. 그룹 12는 최고의 중심 망막 농도를 보였고 그룹 7은 최저의 중심 망막 농도를 보였다. 화학식 Ⅱ 또는 화합물-I의 혈장농도는 중심 망막 및 중심 맥락막에 비해 각각 약 10배 및 100배 낮은 것으로 매우 낮았다. 표 19-3을 참조한다.

<표 19-3>

비타민 K3을 분석하기 위한 분석 방법은 그룹 5 동물의 혈장, 중심 망막, 중심 맥락막, 및 각막 시료에서 결정하였다. 대조군 방수에서 작성된 보정 곡선을 이용하여 비타민 K3의 농도를 결정하였다. 내부 표준(IS: internal standard) 반응은 중심 맥락막 및 혈장 시료에 일치하지 않았다. 따라서, 양성 혈장 결과는 감소된 IS 반응에 기인하는 것으로 보였다. 혈장에서 비타민 K3 반응은 배경 수준과 유사하였다. 중심 맥락막 시료는 양성 비타민 K3 반응을 보였지만, 감소된 IS 반응은 정량 결과를 의심스럽게 만들었다. 중심 망막 및 각막 시료는 정상적인 IS 반응을 보였으며 비타민 K3에 대한 정량 결과는 없었다. 표 19-4를 참조한다.

<표 19-4>

안구 자극을 점수 매기기 위한 드레이즈 척도를 이용한 육안 안구 검사는 연구 기간 중 매일 최초 투여 전에 모든 동물에 실시하였다. 일반적으로, 결막부종이 나타난 투여 제4일에 그룹 6에서 두 마리, 결막 분비물이 나타난 투여 제3일에 그룹 8에서 한 마리, 결막 부종과 분비물이 나타난 투여 제5일에 그룹 10에서 한 마리, 결막 부종이 나타난 투여 제5일에 그룹 14에서 한 마리를 제외하고 모든 제제는 우수한 내성을 보였다. 또한, 동물은 연구 전, 투여 기간, 및 검시시 일반 건강을 관찰하였다. 연구에 지정된 모든 동물은 정상이었다. 검시 평가는 드레이즈 점수 시트 및 안과 검사 형식에 이미 지시된 것 이외에 관찰결과로 이루어졌다. 모든 제제에 대해, 투여 관찰결과는 드레이즈 안구 자극 점수 시스템을 이용하여 평가하였다. 연구 기간에 걸쳐 하기 이상 임상 관찰결과가 나타났다. 그룹 8에서 한 마리가 제3일 투여 과정에서 왼쪽 눈에 분비물을 나타냈다. 그룹 12에서 동물들은 검시시 양쪽 눈에 결막부종이 나타냈다.

실시예 21

화학식 Ⅱ를 포함하는 입자의 제조

화학식 Ⅱ의 입자를 포함하는 현탁 제제는 롤러 분쇄에 의해 제조하였다. 큰 입자는 낮은 롤러 속도로 단기간에 더 큰 분쇄 매질(예를 들어, 직경 3 mm)을 이용하여 제조하였다(도 9b). 나노입자는 높은 롤러 속도로 더 긴 기간 더 작은 매질(예를 들어, 직경 0.8 mm)을 이용하여 제조하였다(도 9a). 두 가지 농도의 화학식 Ⅱ(즉, 0.4% 및 0.2%)는 적합한 긴장성을 얻기 위해 글리세롤 용액으로 5% API 저장용액으로부터 희석하였다. 최선의 무균 예방책은 제품 접촉 부분의 가압멸균 처리, 부형제 용액의 여과 및 사전포장된 멸균 재료를 이용한 이동을 포함하였다. 또한, 모든 이동은 클린룸 구역 내 층류 유동 후드 내에 있었다.

화학식 Ⅱ 또는 화합물-I을 포함하는 입자의 추가적인 예는 표 21 및 22에 나타낸다.

<표 21>

<표 22>

실시예 22

화합물-I/ 트리스 제제의 제조

화합물-I의 미분쇄 현탁액을 제조하였다. 제제는 3% 화합물-I; 0.6% 트리스-HCl pH 6; 2% 글리세롤로 이루어졌다. 화합물-I을 용액에 직접 첨가하고 분쇄 없이 혼합하고 특성화하였다(도 9c).

실시예 23

화학식 Ⅱ 및 비타민 K3을 포함하는 입자

현탁 제제에 비타민 K₃(메나디온)의 첨가는 유익한 생체 내 효과를 가져 올 수 있다. 메나디온은 분쇄된 현탁액으로서 제제에 첨가하였다. 메타디온은 처음에 화학식 Ⅱ를 분쇄하는 것과 똑같이 분쇄하였다. 안정제로서 플루로닉 F-127을 포함한 0.5% 현탁액. 그 후 상기 현탁액을 화학식 Ⅱ에 첨가하고 분쇄하였다(큰 입자 및 나노입자 제제). 그 후 분쇄된 5% 현탁액(메나디온 현탁액을 포함)은 0.4%의 화학식 Ⅱ(앞서 기재된 바와 같이 글리세린 내)로 희석하였다.

메나디온은 화학식 Ⅱ의 분쇄된 입자의 물리적 특성에 전혀 영향을 주지 않는 것으로 보였다(도 9d). 그러나 첨가된 메나디온의 최고 농도(10 μM)에서, 크기가 증가하는 비타민 K₃ 입자가 확인되었다. 추가로, 유리 염기 범위 밖의 매우 큰 입자가 적은 양으로 존재하였으며, 이는 아마도 비타민 K₃이었다. 비타민 K₃은 화학식 Ⅱ보다 더 빠른 속도로 커지기 때문에 현탁액에서 기타 입자와 같이 균일하게 분포될 수 없다고 결론 내렸다.

실시예 24

메나디온을 포함하는 입자의 제조

메나디온/화학식 Ⅱ의 제제는 시간이 경과함에 따라 더 큰 결정을 형성할 수 있다. 현탁액으로서 메타디온을 첨가할 수 있는 최적화된 제제가 요구되었다. 5% 메나디온을 포함하는 제제는 화학식 Ⅱ 제제를 스크리닝할 때와 동일한 방법으로 롤러 분쇄기를 이용하여 스크리닝하였다. HPMC 제제는 40℃에서 단기간 안정성을 입증한 미세 균질 현탁액을 생성하였다(도 10).

실시예 25

화학식 Ⅱ를 포함하는 입자의 제조

메나디온이 현탁액으로서 첨가될 수 있는 제제를 제공하기 위해서 메나디온의 HPMC 제제를 화학식 Ⅱ와 함께 사용하였다. HPMC를 이용한 특대(X-large)(30 - 40 마이크론) 입자 크기는 안정제로서 플루로닉 F-127을 사용할 때보다 더 짧은 시간에 분쇄될 수 있다(도 11a 및 11b)는 것을 확인하였다. 그 후 현탁액은 메나디온/HPMC 현탁액으로 희석할 수 있다.

실시예 25

본 출원의 제제에서 메나디온의 안정성

안정성 연구에서 메나디온 농도는 20 μM 였다. 메나디온을 다음과 같이 제제화하였다 0.43 % w/v 화합물-I(미분쇄, 50 μM), 0.6% 트리스/HCl, pH 6, 2% 글리세롤, 0.2% HEC, 0.08% HPMC 및 20 μM 메나디온. 본 제제로부터, 10가지 시험 제제를 제조하였다.

1. 글리세린 무첨가 (N₂미처리)

2. 대조군 제제; (N₂미처리)

3. 대조군 제제; N₂ 살포

4. + 0.3% Na 티오설페이트(5수화물), N₂ 살포*

5. + 0.1% Na2 EDTA, N₂ 살포

6. + 0.5% TPGS 비타민 E, N₂ 살포

7. + 0.05% 프로필 갈레이트, N₂ 살포

8. + 0.02% BHT, N₂ 살포

9. + 메나디온/HPb-시클로덱스트린 착물, N₂ 살포

10. + 항산화제 착물(#5 - #9), N₂ 살포

7 mL의 각 제제를 황색의 40 ml 바이알(황색 조명하)에 첨가하였다. 여과된 질소 기체를 바이알의 바닥으로 서서히 거품이 일게 하여 생성된 거품이 바이알 위로 나가기 시작하면 신속하게 뚜껑을 닫았다. 메나디온/HPb-시클로덱스트린 착물(#9)은 시클로덱스트린과 메나디온의 대략 등몰 농축 용액을 혼합한 후(약 2시간) 제제에 첨가하여 제조하였다.

실시예 26

롤러 분쇄 방법 및 본 출원의 롤러 분쇄기의 입자의 특성화

롤러 분쇄기

수평 롤러 분쇄기(US Stoneware, model 755)는 금속 하우징 내에 4개의 모터로 구동되는 12" 고무 롤러로 이루어진다. 롤러 사이에 배치된 각각의 병은 롤러 속도와 병의 직경에 의해 정해진 rpm으로 회전할 것이다. API, 안정제, 물, 및/또는 분쇄 매질로 이루어진 약물 슬러리를 병에 첨가하고 뚜껑으로 단단히 밀봉하고 롤러 사이에 배치하였다. 사용된 매질은 직경이 800 마이크론 내지 3000 마이크론으로 변화하는 매우 치밀한 이트리아 지르코늄이었다. 분쇄 후, 내용물을 스크린 메시를 갖춘 원심분리 관 삽입물에 옮겨 매질로부터 분산액을 분리하였다. 작은 삽입물을 원심분리 관에 넣었다. 그 후, 대략 300 x G에서 대략 5분간 원심분리하였다. 분산액은 메시(매질을 보유하는) 아래 관으로 수집하였다.

광학 현미경법 ( OM )

나노입자의 광학 현미경 사진은 유침 100x 대물(1000x 배율)이 장착된 올림퍼스 BX51 시스템을 이용하여 촬영할 수 있다. 보정 막대(1μm 내지 100 μm)를 각 현미경 사진에서 콤퍼레이터로 설정하였다(보정 막대는 더 낮은 배율에서도 더 큰 입자의 크기를 표시하는 데 효과적인 역할을 한다.

입자 크기 분포( PSD )

입자 크기 분포는 호리바 LA-950 V2로 레이저 회절 광 산란을 이용하여 분석하였다. 조건과 굴절률 값을 정하는 데 일반적인 가정을 설정하였다. 분산은 체적을 기준으로 하였다. 시료 밀도는 청색 LED 광원에 일반적인 범위의 투과율로 조정하였다. 시료 양을 최소화하기 위해 흐르는 세포보다는 작은 시료 세포(물로 채워진)를 사용하였다.

참고의 포함

본원에서 참고된 각각의 특허 문서 및 과학 논문의 전체 개시 내용은 모든 목적에 참고로 포함된다. 본 출원에서, 호스트 문서는 충분히 특이적으로 식별되고 본 개시 내용에 관련된 자료는 참고의 내용에 기초하여 이해된다. 출판물 및 특허 문서의 인용은 관련 있는 어떤 선행 기술이 존재한다는 것을 인정하고자 하는 것이 아니며, 상기의 내용 또는 날짜와 관련하여 인정하는 것도 아니다. 본 출원은 지금 서면 기술을 통해 기재되었지만, 당 업자는 본 출원이 다양한 실시양태로 실시될 수 있으며 상기 설명 및 실시예가 예시를 위한 것이며 뒤따르는 청구항을 제한하기 위함은 아니라는 것을 인정할 것이다.

등가물

본 출원은 그의 취지 또는 필수적인 특징을 벗어나지 않으면서 기타 특정 형태로 구현될 수 있다. 따라서 상기 실시양태는 모든 측면에서 본원에서 기재된 출원을 제한한다기보다는 예시적인 것으로 간주해야 한다. 따라서 본 출원의 범위는 상기 설명에 의해서라기보다는 첨부된 청구항에 의해 명시되며, 청구항의 등가물의 의미 및 범위 내에 들어오는 모든 변화는 그 안에 포함하고자 한다.

Claims

a. 하기 화학식 Ⅱ의 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염;

,
b. 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합인 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염; 및
c. 약학적으로 허용 가능한 부형제
를 포함하고, 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 0.1% 내지 2.0%(w/v)로 존재하는 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
a. 0.1% 내지 2.0%(w/v)의 하기 화학식 Ⅱ의 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염;

,
b. 0.00001% 내지 0.0001%(w/v)의 비타민 K, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염;
c. 0.6%(w/v)의 트로메타민;
d. 2.0%(w/v)의 글리세린;
e. 0.2%(w/v)의 히드록시에틸 셀룰로스; 및
f. 0.08%(w/v)의 하이프로멜로스
를 포함하는 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
a. 하기 화학식 Ⅱ의 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염;

,
b. 니코틴산, 니코틴아미드, 또는 비타민 K, 또는 이들의 조합인 제2 활성제, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염; 및
c. 히드록시프로필 메틸셀룰로스(HPMC), 카복시메틸 셀룰로스 및 이의 염, 및 히드록시에틸 셀룰로스(HEC)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제
를 포함하고, 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 0.1% 내지 2.0%(w/v)로 존재하는 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 Ⅱ의 화합물을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제:

(Ⅱ).
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화합물-I을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제:

(화합물-I).
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 또는 0.4%(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 0.1% 내지 1.0%(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 0.2% 내지 1.0%(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.5%, 0.6%, 0.7%, 0.8%, 0.9%, 또는 1.0%(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제9항에 있어서, 0.2%(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제9항에 있어서, 1.0%(w/v)의 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 활성제가 비타민 K인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 활성제가 10μM 미만의 양으로 존재하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제13항에 있어서, 제2 활성제가 1μM, 2μM, 3μM, 4μM, 또는 5μM의 양으로 존재하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제14항에 있어서, 제2 활성제가 1μM의 양으로 존재하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 활성제에 대한 안정제를 더 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, pH가 6인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 염산 및 수산화나트륨으로 구성된 군에서 선택된 pH 조정제를 더 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 제1 활성제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 입자를 포함하고, 상기 입자가 100nm 내지 100μm의 평균 직경을 갖는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제19항에 있어서, 입자가 30μm 내지 60μm의 평균 직경을 갖는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제19항에 있어서, 입자가 1μm 내지 5μm의 평균 직경을 갖는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제19항에 있어서, 입자가 최대 150nm의 평균 직경을 갖는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제19항에 있어서, 입자가 3μm, 30μm, 35μm, 또는 50μm의 평균 직경을 갖는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리소르베이트(Tween) 80, 폴록사머 407, 하이프로멜로스(히드록시프로필 메틸셀룰로스 또는 HPMC), 포비돈, 및 틸록사폴, 및 이들의 조합으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 부형제를 더 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 비이온계 액상 폴리머 및 친수성 비이온계 계면활성제로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 부형제를 더 포함하는 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제25항에 있어서, 비이온계 액상 폴리머가 알킬 아릴 폴리에테르 알코올 유형인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제25항에 있어서, 친수성 비이온계 계면활성제가 폴록사머인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 또는 제3항에 있어서, 약학적으로 허용 가능한 부형제는 히드록시프로필 메틸셀룰로스(HPMC) 및 카복시메틸 셀룰로스 중 하나 이상 및 이들의 염으로 구성된 군에서 선택된 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.
제1항 또는 제3항에 있어서, 약학적으로 허용 가능한 부형제는 히드록시프로필 메틸셀룰로스(HPMC) 및 히드록실에틸 셀룰로스 중 하나 이상으로 구성된 군에서 선택된 것인 국소 안구용 수성 현탁액 제제.