KR102389900B1 - Cosmetic Composition for Improvement of Sensitive Skin Comprising extract of Aruncus dioicus - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 눈개승마 추출물을 유효성분으로 함유하는 민감성 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 외부환경에 대해 민감한 피부를 진정시켜 자극 및 붉은기를 완화시켜주는 효과를 발휘하는 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition for improving sensitive skin containing an extract of nungae equestrian horseradish as an active ingredient, and more particularly, to a cosmetic composition that calms sensitive skin to the external environment and exhibits the effect of alleviating irritation and redness will be.
민감성 피부는 외부의 자극이나 알레르기성 물질 등 환경 변화에 정상 피부와 비교하여 더 민감하게 반응하여 자극반응이나 피부염이 잘 발생하는 피부를 말한다. 민간성 피부의 원인은 매우 다양하고 복합적인데, 유전적 요인에 의해 선천적으로 예민한 피부를 가지고 있거나, 유해 물질이나 스트레스, 기후, 계절변화, 작업환경과 같은 외부적 요인에 의해서 발생되게 되며 홍반, 피부 건조, 따가움, 가려움증, 화끈거림 및 염증 등의 증상이 나타난다.Sensitive skin refers to skin that reacts more sensitively than normal skin to environmental changes such as external stimuli or allergic substances, and is prone to irritation or dermatitis. The causes of sensitive skin are very diverse and complex. They have sensitive skin innately due to genetic factors, or are caused by external factors such as harmful substances, stress, climate, seasonal change, and work environment. Symptoms include dryness, stinging, itching, burning, and inflammation.
민감성 피부를 유발하는 원인으로는 크게 신경학적 과도한 반응, 면역 반응의 증가 및 피부 장벽의 손상으로 나누어진다. 민감성 피부 환자의 경우 정상 피부와 비교하여 신경 감각을 전달하는 신호가 과도하게 활성화되어 작은 자극에도 과도하게 신경학적 반응을 유발한다고 알려져 있다. 최근 외부 자극에 의해 통증 및 다양한 감각을 전달하는 일시적 자극 수용체인 TRP (transient receptor potential) 채널의 활성화 억제를 통해 민감성 피부를 개선할 수 있다는 연구가 보고되고 있다. TRP 채널은 비선택적인 양이온 채널로 각종 화학적, 물리적 및 외부 자극에 의한 감각 조절을 담당한다. TRP 채널 중에서 캡사이신 수용체로 알려진 TRPV1 (transient receptor potential vanilloid type 1)은 화끈거리는 열 통각 유발 외에 외부자극에 대해 반응하여 스스로를 보호하는 역할을 한다. TRPV1이 과도하게 활성화될 경우 열감, 가려움과 같은 소양감이 증가하여 피부에 민감함이 유발된다. Causes of sensitive skin are largely divided into neurological overreaction, increase in immune response, and damage to the skin barrier. It is known that, in patients with sensitive skin, compared to normal skin, signals that transmit nerve sensations are excessively activated, which causes excessive neurological responses even to small stimuli. Recently, research has been reported that sensitive skin can be improved by inhibiting the activation of TRP (transient receptor potential) channels, which are transient stimulus receptors that transmit pain and various senses by external stimuli. The TRP channel is a non-selective cation channel and is responsible for sensory regulation by various chemical, physical and external stimuli. Among TRP channels, transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), known as a capsaicin receptor, acts to protect itself by responding to external stimuli in addition to inducing burning heat nociception. When TRPV1 is excessively activated, itchy sensations such as heat and itching increase, leading to skin sensitivity.
한편, 민감성 피부의 가장 흔한 증상인 가려움증은 긁고 싶어 하는 불쾌감을 유발하는 피부의 상태를 일컫는 것으로 접촉, 온도변화, 스트레스 등의 외부 자극이나 화학적, 물리적 및 유해 자극으로도 유발될 수 있다. 가려움증의 신호전달과정에는 단백질분해효소-활성화 수용체(proteinase-activated receptor, PAR)가 중요한 역할을 한다는 것이 밝혀졌다. PAR-2는 비만세포, 각질 형성세포 및 신경세포에 존재하는 G-단백질 결합수용체로, PAR-2의 발현이 증가되고 활성화될 경우 세포 내의 IκB kinase 및 nuclear factor kappa B의 기전을 활성화시켜 염증 반응 및 가려움증을 유발한다. 이와 같은 신경학적 조절 및 가려움증 기전 억제를 통해 민감한 피부의 증상을 예방하고 개선시키고자 하는 많은 연구가 진행되고 있다.On the other hand, itching, the most common symptom of sensitive skin, refers to a condition of the skin that causes the unpleasant feeling of scratching, and may be induced by external stimuli such as contact, temperature change, stress, or chemical, physical and harmful stimuli. It has been found that proteinase-activated receptor (PAR) plays an important role in the signaling process of itch. PAR-2 is a G-protein-coupled receptor present in mast cells, keratinocytes, and neurons. When the expression of PAR-2 is increased and activated, it activates the mechanisms of IκB kinase and nuclear factor kappa B in the cell for an inflammatory response. and itching. Many studies are being conducted to prevent and improve the symptoms of sensitive skin through such neurological control and suppression of the itch mechanism.
민감한 피부 개선을 위해 스테로이드와 같은 항생제, 항 히스타민제 등이 사용되고 있으나 이들을 반복적으로 사용할 시 내성의 문제로 인해 호전되지 않거나 부작용 등이 수반된다. 이에 따라, 독성 및 부작용이 없고 민감성 피부를 개선할 수 천연 소재의 발굴이 필요하다. Antibiotics such as steroids and antihistamines are used to improve sensitive skin, but when they are used repeatedly, they do not improve or cause side effects due to resistance problems. Accordingly, it is necessary to discover a natural material that has no toxicity and side effects and can improve sensitive skin.
본 발명은 눈개승마(Aruncus dioicus)를 이용하여 민감성 피부를 개선하거나 피부자극 또는 피부자극으로 말미암은 붉은기를 완화시킬 수 있는 화장료 조성물을 개발하여 제공하는 것을 목적으로 한다. An object of the present invention is to develop and provide a cosmetic composition capable of improving sensitive skin or alleviating redness caused by skin irritation or skin irritation using Aruncus dioicus .
본 발명은 눈개승마(Aruncus dioicus) 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 민감성 피부 개선용 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a cosmetic composition for improving sensitive skin, characterized in that it contains an Aruncus dioicus extract as an active ingredient.
본 발명의 민감성 피부 개선용 화장료 조성물에 있어서, 상기 눈개승마 추출물은, 바람직하게 눈개승마의 지상부를 60~80% 에탄올로 추출한 추출물인 것이 좋다. In the cosmetic composition for improving sensitive skin of the present invention, it is preferable that the extract of nipae equestrian extract is an extract obtained by extracting the above-ground part of nungae equestrian horseradish with 60 to 80% ethanol.
본 발명은 눈개승마(Aruncus dioicus) 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부자극 완화용 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a cosmetic composition for alleviating skin irritation, characterized in that it contains an Aruncus dioicus extract as an active ingredient.
본 발명의 피부자극 완화용 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 피부자극으로 말미암은 붉은기를 완화시키는 것일 수 있다. In the cosmetic composition for alleviating skin irritation of the present invention, the cosmetic composition may preferably be to relieve redness caused by skin irritation.
본 발명의 화장료 조성물은 TRPV1 발현 억제 효과, PAR-2 발현 억제 효과, 자극에 의한 붉은기 완화 효과를 통해 민감성 피부를 개선할 수 있는 뛰어난 효과를 발휘한다. The cosmetic composition of the present invention exhibits an excellent effect of improving sensitive skin through the TRPV1 expression inhibitory effect, the PAR-2 expression inhibitory effect, and the irritation-induced redness alleviation effect.
도 1은 본 발명 눈개승마 추출물의 TRPV1 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.
도 2는 본 발명 눈개승마 추출물의 PAR-2 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.
도 3은 본 발명 눈개승마 추출물을 함유한 크림 제형의 붉은기 완화 효과를 확인한 결과이다.1 is a result confirming the TRPV1 expression inhibitory effect of the extract of the present invention nungae equestrian horse.
Figure 2 is a result confirming the PAR-2 expression inhibitory effect of the extract of the present invention nungae equestrian horse.
3 is a result confirming the redness relief effect of the cream formulation containing the extract of the present invention.
본 발명에서 눈개승마(Aruncus dioicus) 추출물을 유효성분으로 함유하는 민감성 피부 개선용 화장료 조성물을 제공한다.In the present invention, there is provided a cosmetic composition for improving sensitive skin containing an extract of Aruncus dioicus as an active ingredient.
눈개승마(Aruncus dioicus)는 장미과의 고산지역에서 자라는 다년생 초본으로 낙엽이 많고 음지 또는 반그늘에서 자생하며 눈을 뚫고 자란다고 해서 눈개승마라는 이름이 붙여진 봄나물 중 하나이다. 잎은 2-3회 우상복엽이며 꽃은 6-8월에 하얀 꽃이 피고 열매는 7-8월에 익으며 갈색을 띄고 타원형이다. 울릉도에서 많이 재배하고 있으며 잎이 삼잎과 비슷해서 삼나물이라 부르기도 한다. 사포닌, 베타카로틴 및 칼슘과 철분 등의 무기질이 다량 함유되어 있으며 보신, 수렴, 해열, 해독, 정력 및 지혈 작용이 있다고 알려져 있다.Aruncus dioicus ( Aruncus dioicus ) is a perennial herb that grows in alpine areas of the Rosaceae, and it is one of the spring herbs that has a lot of fallen leaves, grows wild in shade or semi-shade, and grows through snow. Leaves are bifocal 2-3 times, white flowers bloom in June-August, and fruits ripen in July-August, are brown in color and have an oval shape. It is cultivated a lot in Ulleungdo, and the leaves are similar to cedar leaves, so it is also called cedar namul. It contains a large amount of saponin, beta-carotene, and minerals such as calcium and iron, and is known to have bodily, astringent, antipyretic, detoxifying, energetic and hemostatic effects.
한편, 민감성 피부는 정상적인 피부와 비교하여 신경학적 감각이 과도하게 활성화 되어 있는 경우가 많고 작은 자극에도 과하게 면역반응이 유도되어 홍반, 열감, 가려움증, 따가움 등과 같은 증상이 유발된다. 최근 외부 자극에 대한 감각을 조절하는 일시적인 감각 수용체인 TRPV1 채널이 피부 민감성을 조절하는데 중요한 역할을 하는 것이 보고 되어 있으며 단백질분해효소-활성화 수용체(proteinase-activated receptor, PAR)인 PAR-2의 조절이 가려움증 완화에 도움을 줄 수 있는 것이 밝혀졌다. On the other hand, compared to normal skin, sensitive skin often has excessively activated neurological sensations, and an excessively induced immune response to even a small stimulus causes symptoms such as erythema, heat, itching, and stinging. Recently, it has been reported that the TRPV1 channel, a transient sensory receptor that regulates the sensation to external stimuli, plays an important role in regulating skin sensitivity. It has been found that it can help relieve itching.
본 발명의 눈개승마 추출물은, 바람직하게는 용매로 60~80% 에탄올을 이용하여 추출한 것이 좋다. 본 발명에서는 상기 용매로 눈개승마 지상부를 추출한 추출물을 이용하여 실험한 결과, 자극 수용체인 TRPV1의 발현 억제, PAR-2의 발현 억제 및 붉은기 완화 효과를 통해 뛰어난 민감성 피부 예방 또는 개선 효과를 발휘하는 것을 확인할 수 있었다.The extract of the present invention is preferably extracted using 60 to 80% ethanol as a solvent. In the present invention, as a result of an experiment using an extract extracted from the above-ground part of the eyeball as the solvent, it exhibits an excellent effect of preventing or improving sensitive skin through suppression of the expression of stimulatory receptor TRPV1, suppression of expression of PAR-2, and alleviation of redness. could confirm that
한편, 본 발명에 있어, 상기 눈개승마 추출물은, 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.0001~30.0중량%가 함유되는 것이 좋다. 더욱 바람직하게는 화장료 조성물 전체 중량에 대해서 0.01~10중량% 함유되는 것이 좋다. 눈개승마 추출물의 함량이 0.0001중량% 미만인 경우에는 민간성 피부 예방 또는 개선 효과가 미미하고, 30.0중량% 초과할 경우 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과 증가가 보이지 않는다. On the other hand, in the present invention, it is preferable that the nurigae equestrian extract is contained in an amount of 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. More preferably, it is good to contain 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. If the content of the extract of nipae equestrian extract is less than 0.0001% by weight, the effect of preventing or improving sensitive skin is insignificant.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 본 발명의 눈개승마 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.On the other hand, the ingredients included in the cosmetic composition of the present invention may include ingredients commonly used in cosmetic compositions in addition to the extract of the present invention as an active ingredient, for example, antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and customary adjuvants such as perfumes, and carriers.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing , oil, pack, massage cream and spray, etc. may be formulated, but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion, a nourishing lotion, a nourishing cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray, or a powder.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide, etc. This can be used.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, for example, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene fatty acid esters of glycol, 1,3-butylglycol oil, glycerol fatty esters, polyethylene glycol or sorbitan.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, a suspending agent such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester , microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth may be used.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chlorofluorohydro It may contain a propellant such as carbon, propane/butane or dimethyl ether.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is cleansing containing surfactant, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate, Fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, fatty alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester and the like can be used.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a surfactant-containing cleansing formulation, or a surfactant-free cleansing formulation, it may be applied to the skin and then wiped off, removed, or washed off with water. As a specific example, the soap is liquid soap, powder soap, solid soap, and oil soap, the surfactant-containing cleansing formulation is a cleansing foam, cleansing water, cleansing towel and cleansing pack, and the surfactant-free cleansing formulation is a cleansing cream , cleansing lotion, cleansing water, and cleansing gel, but not limited thereto.
이하, 본 발명의 구성을 하기 실시예 및 실험예를 통해 구체적으로 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in detail through the following examples and experimental examples. However, the scope of the present invention is not limited to the following examples and experimental examples, and includes modifications of technical ideas equivalent thereto.
[실시예 1: 눈개승마 에탄올 추출물 제조][Example 1: Preparation of Ethanol Extract of Snow Gae Horse Riding]
눈개승마(Aruncus dioicus) 지상부를 음건하여 파쇄한 후, 20배 중량의 70%(v/v)에탄올을 첨가하여 24 시간 동안 상온에서 추출하였다. 이후, 추출물을 여과하고, 감압농축 및 동결건조하여 눈개승마 에탄올 추출물을 제조하였다. 이렇게 제조한 눈개승마 에탄올 추출물 분말을 하기 실험에 사용하였다. After crushing the above-ground parts by drying in the shade, 20 times the weight of 70% (v/v) ethanol was added and extracted at room temperature for 24 hours. Thereafter, the extract was filtered, concentrated under reduced pressure and freeze-dried to prepare an ethanol extract of nevi horseradish. The ethanol extract powder prepared in this way was used in the following experiment.
[실험예 1: 눈개승마 추출물의 TRPV1 발현 억제 효과 확인][Experimental Example 1: Confirmation of TRPV1 Expression Inhibition Effect of Nungae Equestrian Horse Extract]
본 실험예에서는 눈개승마 추출물의 자극 완화 효과를 확인하기 위하여, 자극 수용체인 TRPV1 발현에 대한 영향을 확인하였다.In this experimental example, in order to confirm the stimulus-relieving effect of the extract of nevi horseradish, the effect on the stimulatory receptor TRPV1 expression was confirmed.
사람유래 각질형성세포를 12웰 플레이트에 3 x 105 cells/well로 분주하고 37oC, 5% CO2 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 이후, 상기 실시예 1에서 제조한 눈개승마 추출물을 10, 30, 100 ㎍/㎖ 농도로 희석하여 각각 처리하였고, TRPV1의 발현을 위하여 열처리를 하여 자극을 가하였다. 6 시간 동안 반응시킨 후, 상층액을 제거하고 1 x PBS로 한 번 세척하였으며 스크레퍼(scraper)로 긁어 세포를 수집하였다. 그 후, 세포용해버퍼(Cell lysis buffer)를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA법으로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동시켰다. 겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고, 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1 시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 이후, 1 x TTBS 용액으로 3회 세척하고 1차 항체를 4oC에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2 시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1 x TTBS 용액으로 3회 세척한 후 ECL용액을 반응시켜 Chemi-Doc 기기로 밴드를 검출하였다. 이는, Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 TRPV1 발현 억제율(%)을 계산하여 하기 표 1에 나타내었다.Human-derived keratinocytes were seeded in a 12-well plate at 3 x 10 5 cells/well, and the cells were stabilized for one day in a 37 o C, 5% CO 2 incubator. Then, the extract prepared in Example 1 was diluted to a concentration of 10, 30, and 100 μg/ml and treated, respectively, and heat treatment was performed for expression of TRPV1 and stimulation was applied. After reacting for 6 hours, the supernatant was removed, washed once with 1 x PBS, and scraped with a scraper to collect cells. Thereafter, the protein was separated using a cell lysis buffer, and the protein was quantified by the BCA method, and then a certain amount of the protein was electrophoresed on a 10% SDS-PAGE gel. The separated protein on the gel was transferred to a PVDF membrane and blocked for 1 hour using 5% skim milk. Then, after washing 3 times with 1 x TTBS solution and reacting the primary antibody at 4 o C overnight (over night), the HRP-conjugated secondary antibody was reacted at room temperature for 2 hours. Then, after washing 3 times with 1 x TTBS solution, the ECL solution was reacted and the band was detected with a Chemi-Doc instrument. This was quantified using Image J 1.47 software and quantified based on the expression of beta-actin (β-actin) to calculate the TRPV1 expression inhibition rate (%) and are shown in Table 1 below.
(눈개승마 추출물)Example 1 (μg/ml)
(Snowflake horseradish extract)
실험결과, 본 발명의 눈개승마 추출물은 농도의존적으로 TRPV1의 발현을 억제하였다. 30 ㎍/㎖의 농도부터 44.05%로 유의한 억제율을 보였으며, 100 ㎍/㎖의 농도에서 최대 53.48%의 높은 TRPV1의 발현 억제 효과를 나타내었다 (도 1). 도 1는 본 발명 눈개승마 추출물의 TRPV1의 발현 억제 효과를 확인한 결과이다. As a result of the experiment, the extract of the present invention nurigae horseshoe extract inhibited the expression of TRPV1 in a concentration-dependent manner. It showed a significant inhibition rate of 44.05% from a concentration of 30 μg/ml, and showed a high TRPV1 expression inhibition effect of up to 53.48% at a concentration of 100 μg/ml ( FIG. 1 ). 1 is a result confirming the effect of inhibiting the expression of TRPV1 of the extract of the present invention nungae equestrian horse.
[실험예 2: 눈개승마 추출물의 PAR-2 발현 억제 효과 확인][Experimental Example 2: Confirmation of the PAR-2 expression inhibitory effect of the extract of nipae horseradish]
본 실험예에서는 눈개승마 추출물의 PAR-2 발현 억제 효과를 측정하고자 하였다.In this experimental example, it was attempted to measure the PAR-2 expression inhibitory effect of the extract of Nungae horseradish.
사람유래 각질형성세포를 12웰 플레이트에 3 x 105 cells/well로 분주하고 37oC, 5% CO2 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 이후, 상기 실시예 1에서 제조한 눈개승마 추출물을 10, 30, 100 ㎍/㎖ 농도로 희석하여 각각 처리하였고, PAR-2의 발현을 위하여 열처리를 하여 자극을 가하였다. 6 시간 동안 반응시킨 후, 상층액을 제거하고 1 x PBS로 한 번 세척하였으며 스크레퍼(scraper)로 긁어 세포를 수집하였다. 그 후, 세포용해버퍼(Cell lysis buffer)를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA법으로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동시켰다. 겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고, 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1 시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 이후, 1 x TTBS 용액으로 3회 세척하고 1차 항체를 4℃에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2 시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1 x TTBS 용액으로 3회 세척한 후 ECL용액을 반응시켜 Chemi-Doc 기기로 밴드를 검출하였다. 이는, Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 PAR-2 발현 억제율(%)을 계산하여 하기 표 2에 나타내었다.Human-derived keratinocytes were seeded in a 12-well plate at 3 x 10 5 cells/well, and the cells were stabilized for one day in a 37 o C, 5% CO 2 incubator. Then, the extract prepared in Example 1 was diluted to a concentration of 10, 30, and 100 μg/ml and treated, respectively, and heat treatment was performed for expression of PAR-2 and stimulation was applied. After reacting for 6 hours, the supernatant was removed, washed once with 1 x PBS, and scraped with a scraper to collect cells. Thereafter, the protein was separated using a cell lysis buffer, and the protein was quantified by the BCA method, and then a certain amount of the protein was electrophoresed on a 10% SDS-PAGE gel. The separated protein on the gel was transferred to a PVDF membrane and blocked for 1 hour using 5% skim milk. Then, after washing 3 times with 1 x TTBS solution and reacting the primary antibody overnight at 4° C., the HRP-conjugated secondary antibody was reacted at room temperature for 2 hours. Then, after washing 3 times with 1 x TTBS solution, the ECL solution was reacted and the band was detected with a Chemi-Doc instrument. This was quantified using Image J 1.47 software and quantified based on the expression of beta-actin (β-actin), and the PAR-2 expression inhibition rate (%) was calculated and shown in Table 2 below.
(눈개승마 추출물)Example 1 (μg/ml)
(Snowflake horseradish extract)
실험결과, 본 발명의 눈개승마 추출물은 농도의존적으로 PAR-2의 발현을 억제하였다. 30 ㎍/㎖의 농도부터 41.95%로 유의한 억제율을 보였으며, 100 ㎍/㎖의 농도에서 최대 80.49%의 높은 PAR-2의 발현 억제 효과를 나타내었다 (도 2). 도 2는 본 발명 눈개승마 추출물의 PAR-2의 발현 억제 효과를 확인한 결과이다. As a result of the experiment, the extract of the present invention nurigae horseshoe extract inhibited the expression of PAR-2 in a concentration-dependent manner. It showed a significant inhibition rate of 41.95% from a concentration of 30 μg/ml, and showed a high PAR-2 expression inhibitory effect of up to 80.49% at a concentration of 100 μg/ml ( FIG. 2 ). Figure 2 is a result confirming the expression inhibitory effect of PAR-2 of the extract of the present invention nyeongae equestrian horse.
[실시예 2 : 눈개승마 추출물을 함유하는 화장료 조성물 제조] [Example 2: Preparation of a cosmetic composition containing an extract of nipae horseback riding horses]
상기 실시예 1에서 수득한 눈개승마 에탄올 추출물을 1 중량%, 3 중량%, 5 중량% 함유하는 화장료 조성물을 제조하고자 하였다. 제조된 조성물은 점성의 크림형태이고, 그 조성은 하기 표 3에 나타내었다. An attempt was made to prepare a cosmetic composition containing 1 wt%, 3 wt%, and 5 wt% of the ethanol extract obtained from Example 1 above. The prepared composition was in the form of a viscous cream, and the composition is shown in Table 3 below.
(중량-1%)Formulation Example 1
(weight-1%)
(중량-3%)Formulation Example 2
(weight-3%)
(중량-5%)Formulation Example 3
(weight-5%)
[실험예 3 : 눈개승마 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 자극에 의한 붉은기 완화 효과 확인][Experimental Example 3: Confirmation of redness relief effect by skin irritation of cosmetic composition containing extract
본 실험예에서는 상기 실시예 2에서 제조한 눈개승마 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 자극에 대한 붉은기 완화 효과를 확인하고자 하였다.In this experimental example, it was attempted to confirm the redness alleviation effect on stimulation of the cosmetic composition containing the extract of nipae equestrian horses produced in Example 2 above.
팔 안쪽 부분에 실험할 구획을 정한 후, 피부의 붉은기(erythema index)를 측정하였다. 피부에 자극을 주기 위해 첩포 패치에 1% 소듐라우릴설페이트를 처리한 후 핀 챔버를 피험자의 팔 안쪽 구획부분에 부착하여 24 시간 동안 반응시켜 홍반을 유도하였다. 첩포 패치를 제거하고 30분간 항온항습 조건에서 안정을 취한 후 각각 실험군의 피부의 붉은기를 측정하였다. After determining the section to be tested on the inner part of the arm, the skin redness (erythema index) was measured. To stimulate the skin, 1% sodium lauryl sulfate was applied to the patch patch, and then a pin chamber was attached to the inner compartment of the subject's arm and reacted for 24 hours to induce erythema. After removing the patch and resting in a constant temperature and humidity condition for 30 minutes, the redness of the skin of each experimental group was measured.
이후, 실시예 2에서 제조한 제형예 1, 제형예 2, 제형예 3을 핀 챔버에 적용하여 피험자의 팔 안쪽 구획 부분에 부착하여 24 시간 동안 반응시켰다. 첩포 패치를 제거하고 30 분간 항온항습 조건에서 안정을 취한 후 각각 실험군의 피부 붉은기를 측정하였다. 결과는 하기 표 4에 나타내었다.Thereafter, Formulation Example 1, Formulation Example 2, and Formulation Example 3 prepared in Example 2 were applied to the pin chamber, attached to the inner compartment of the subject's arm, and reacted for 24 hours. After removing the patch and resting in a constant temperature and humidity condition for 30 minutes, the skin redness of each experimental group was measured. The results are shown in Table 4 below.
(눈개승마 추출물 1%)Formulation Example 1
(Nungae
(눈개승마 추출물 3%)Formulation Example 2
(3% snow horse riding extract)
(눈개승마 추출물 5%)Formulation Example 3
(5% snow horse riding extract)
실험결과, 표 4에서 보는 바와 같이 소듐라우릴설페이트를 처리하여 홍반을 유도한 대조군의 홍반 수치가 그대로 유지된 것과 비교하여 눈개승마 추출물을 함유하는 제형예 1~3을 처리한 군에서는 피부의 붉은기가 농도의존적으로 완화됨을 확인하였다. 눈개승마 추출물을 5% 함유한 크림을 처리한 군에서 최대 48.18% 붉은기가 완화되었다 (도 3). 도 3은 본 발명 눈개승마 추출물을 함유하는 크림의 붉은기 완화 효과를 확인한 결과이다.As a result of the experiment, as shown in Table 4, the erythema level of the control group induced by sodium lauryl sulfate treatment with sodium lauryl sulfate was maintained as it is. It was confirmed that the group was relaxed in a concentration-dependent manner. Redness was relieved by up to 48.18% in the group treated with the cream containing 5% of the extract of nungae horseback riding (Fig. 3). Figure 3 is the result of confirming the redness relief effect of the cream containing the extract of the present invention.
Claims (4)
Redness for sensitive skin, characterized in that it contains an extract of Aruncus dioicus as an active ingredient to suppress the expression of TRPV1 (transient receptor potential vanilloid type 1) and PAR-2 (proteinase-activated receptor-2) and A cosmetic composition for relieving itching.
상기 눈개승마 추출물은,
눈개승마의 지상부를 60~80% 에탄올로 추출한 추출물인 것을 특징으로 하는 민감성 피부를 위한 붉은기 및 가려움증 완화용 화장료 조성물.
According to claim 1,
The snowgae horseback riding extract,
A cosmetic composition for alleviating redness and itching for sensitive skin, characterized in that it is an extract obtained by extracting the above-ground part of the nungae horseback riding with 60-80% ethanol.
Priority Applications (1)
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| KR1020210178810A KR102389900B1 (en) | 2021-12-14 | 2021-12-14 | Cosmetic Composition for Improvement of Sensitive Skin Comprising extract of Aruncus dioicus |
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Citations (5)
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| KR20030042527A (en) * | 2001-11-23 | 2003-06-02 | 주식회사 코리아나화장품 | Cosmetic Compositions Comprising Extract from Mung-bean for Abirritating Skin |
| KR101231589B1 (en) * | 2010-12-31 | 2013-02-08 | 충남대학교산학협력단 | Goatsbeard extract or its fraction having antiviral, antioxidative and antimicrobial effects |
| KR20130034276A (en) * | 2011-09-28 | 2013-04-05 | 대구가톨릭대학교산학협력단 | Extract of aerial parts of aruncus dioicus and compounds isolated herefrom |
| KR101422250B1 (en) | 2012-09-12 | 2014-07-24 | 안동대학교 산학협력단 | Pharmaceutical composition comprising the extract of aruncus dioicus var. kamtschaticus as an effective component for prevention or treatment of thrombosis and health functional food comprising the same |
| KR101869353B1 (en) | 2017-08-23 | 2018-06-21 | 재단법인 제주테크노파크 | Novel Compound Isolated from Aruncus dioicus and Anti-inflammation Composition Using the Same |
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2021
- 2021-12-14 KR KR1020210178810A patent/KR102389900B1/en active IP Right Grant
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