KR102379527B1 - Cosmetic composition containing portulaca oleracea extract, centella asiatica extract and curcumin - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 마치현 추출물, 병풀 추출물 및 커큐민을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 마치현 추출물, 병풀 추출물 및 커큐민을 함유하여 인간 각질세포의 활성을 증진시킴으로써 생존 및 분열을 촉진하여 피부장벽을 강화시키고 미백 효과의 증진을 기대할 수 있으며, 인간세포의 노화를 촉진하는 p21, p16의 유전자를 억제하고 노화정도를 나타내는 말단소립(telomere)을 신장시키는 효소인 말단소립효소의 활성을 증가시킴으로써 피부의 노화를 방지할 수 있는 마치현 추출물, 병풀 추출물 및 커큐민을 함유하는 피부노화 방지용 또는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition containing a horse chestnut extract, a Centella asiatica extract, and curcumin, and more particularly, to a skin barrier by promoting survival and division by enhancing the activity of human keratinocytes by containing a horse chestnut extract, Centella asiatica extract and curcumin. It can be expected to enhance the skin whitening effect, suppress the p21 and p16 genes that promote aging of human cells, and increase the activity of the telomere enzyme, an enzyme that elongates the telomere, which indicates the degree of aging. It relates to a cosmetic composition for preventing skin aging or for skin whitening, which contains an extract of horse chestnut, Centella asiatica extract and curcumin, which can prevent aging.
전체 인체 부피의 약 16%를 차지하고 있는 피부는 외부환경과 직접 접해 있으면서, 인체 안으로 침입하려는 치명적인 많은 유해인자, 예를 들면, 온도, 습도 및 자외선 등으로부터 인체를 보호하는 중요한 보호막 역할을 담당한다.The skin, which occupies about 16% of the total volume of the human body, is in direct contact with the external environment and plays an important protective film that protects the human body from many fatal harmful factors, such as temperature, humidity, and ultraviolet rays, that try to invade the human body.
피부는 외부에 노출되어 있어서 태양광선, 산소, 세균, 각종 공해 물질 등으로부터 직접적인 영향을 받고 있다. 특히 태양광선의 자외선에 대한 피부노출은 과잉의 활성산소종을 생성하고 체내의 항산화효소와 비타민 E, C, 글루타티온 및 유비퀴놀 등의 항산화제가 감소함으로 인해 산화와 항산화의 불균형이 야기된다. 이에 지질 과산화, 단백질 산화, 단백질 분해효소의 활성화, 콜라겐과 엘라스틴의 사슬절단 및 비정상적인 교차결합, 히알루론산 사슬절단, 멜라닌 생성반응 촉진, DNA 산화와 같은 생체 구성 성분들의 손상이 발생하고, 이는 피부탄력감소, 주름 및 기미, 주근깨 생성 등과 같은 피부노화로 이어진다. 이를 외인적 노화라고 한다. Since the skin is exposed to the outside, it is directly affected by sunlight, oxygen, bacteria, and various pollutants. In particular, skin exposure to ultraviolet rays from sunlight causes an imbalance of oxidation and antioxidants by generating excess reactive oxygen species and reducing antioxidant enzymes and antioxidants such as vitamins E, C, glutathione and ubiquinol in the body. This causes damage to biocomponents such as lipid peroxidation, protein oxidation, activation of protease, collagen and elastin chain cleavage and abnormal cross-linking, hyaluronic acid chain cleavage, melanogenesis promotion, DNA oxidation, etc. It leads to skin aging such as reduction, wrinkles and blemishes, and freckle production. This is called extrinsic aging.
그리고 나이가 듦에 따라 피부의 생리적 기능이 점차 저하되는 내인적 노화도 있다. 이는 임상학적으로 탄력이 감소하고, 피부결이 거칠어지며, 깊은 주름이 생기며 색소가 침착된다. There is also endogenous aging, in which the physiological functions of the skin gradually deteriorate with age. Clinically, this results in decreased elasticity, rough skin texture, deep wrinkles, and pigmentation.
외인적 노화의 경우 외부환경적인 요인에 의해 유발되는 노화현상이므로 인위적인 조절이 비교적 용이하다. 따라서 태양광선, 산소, 세균, 공해물질, 스트레스 등의 외부 환경적 요인들을 완전히 제거하거나 이러한 외부 환경적 요인에 의해 생성된 활성산소나 활성산소가 세포막을 공격하여 피부에 염증을 유발하고 염증화된 조직에서 생리학적 진행 메커니즘에 의해 단백질이나 유전자 물질 등이 파괴되어 기미, 주름 등이 형성되는 일련의 피부노화 메커니즘의 단계를 모두 억제시켜줄 수 있다면 외인성 노화에 의한 피부노화를 방지할 수 있을 것이다.In the case of exogenous aging, artificial aging is relatively easy because it is an aging phenomenon caused by external environmental factors. Therefore, external environmental factors such as sunlight, oxygen, bacteria, pollutants, and stress are completely removed, or active oxygen or active oxygen generated by these external environmental factors attacks the cell membrane, causing inflammation in the skin and causing inflammation. If it is possible to suppress all stages of a series of skin aging mechanisms in which blemishes and wrinkles are formed due to the destruction of proteins or genetic materials by physiological mechanisms in tissues, it will be possible to prevent skin aging caused by exogenous aging.
반면, 내인성 노화의 경우, 필연적으로 발생하는 생리적인 기능 혹은 장애에 의하기 때문에 노화를 방지하기 위해서는 피부세포의 사멸을 방지하거나, 노화에 관여하는 각종 유전자를 조절하거나, DNA 손상을 방지하는 등 노화와 관련한 각종 인자들을 조절하여야 한다.On the other hand, in the case of endogenous aging, because it is caused by physiological functions or disorders that occur inevitably, in order to prevent aging, it is necessary to prevent apoptosis of skin cells, regulate various genes involved in aging, or prevent DNA damage. Various factors related to it must be adjusted.
종래의 ‘특허문헌 1’은 삼채 분획물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 삼채 분획물을 이용하여 콜라겐 분해효소인 기질 금속 단백질 분해 효소 (Matrix Metalloproteinase; MMP)를 억제하고, 콜라겐의 합성을 증진시킴으로써 노화를 방지하는 것을 기술적 특징으로 한다. 또한, ‘특허문헌 1’은 천연자원인 식물을 이용하여 높은 인체 안정성을 담보할 수 있다.Conventional 'Patent Document 1' relates to a cosmetic composition containing a three-chaede fraction as an active ingredient, and uses the three-chaede fraction to inhibit matrix metalloproteinase (MMP), a collagen degrading enzyme, and to synthesize collagen. It is a technical feature to prevent aging by enhancing it. In addition, 'Patent Document 1' can guarantee high human safety by using plants, which are natural resources.
본 발명은 위와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 천연물을 이용하여 노화에 관여하는 여러 인자 중 세포의 분열 및 생존을 촉진시키는 인자를 증가시키고, 노화를 유발시키는 유전자를 억제함으로써 피부 노화 및 미백효과를 기대할 수 있는 화장료 조성물을 제공하는데 있다. The present invention has been devised to solve the above problems, and the problem to be solved in the present invention is to increase the factors that promote cell division and survival among various factors involved in aging using natural products, and to induce aging. An object of the present invention is to provide a cosmetic composition that can be expected to have skin aging and whitening effects by suppressing genes.
위와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명에 따른 피부노화 방지용 또는 피부미백용 화장료 조성물은 마치현 추출물, 병풀 추출물 및 커큐민을 유효성분으로 포함하는 것을 기술적 특징으로 한다. The cosmetic composition for preventing skin aging or for skin whitening according to the present invention for solving the above problems is technically characterized in that it includes a horse chestnut extract, a Centella asiatica extract and curcumin as active ingredients.
또한, 위와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명의 상기 마치현 추출물, 상기 병풀 추출물 및 상기 커큐민은 중량비 기준으로 3:4:3 비율로 혼합되는 것을 기술적 특징으로 한다.In addition, the present invention for solving the above problem is characterized in that the extract, the Centella asiatica extract and the curcumin of the present invention are mixed in a 3:4:3 ratio based on weight ratio.
또한, 위와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명의 상기 조성물은 p21, p16 저해 활성을 갖는 것을 기술적 특징으로 한다.In addition, the composition of the present invention for solving the above problems is technically characterized in that it has p21, p16 inhibitory activity.
또한, 위와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명의 상기 마치현 추출물, 상기 병풀 추출물 및 상기 커큐민은 총 중량에 대하여 1 내지 2 중량% 포함되는 것을 기술적 특징으로 한다.In addition, the present invention for solving the above problems is characterized in that the extract, the Centella asiatica extract and the curcumin of the present invention are included in 1 to 2% by weight based on the total weight.
본 발명에 따른 조성물은 인간 각질세포의 활성을 증진시킴으로써 생존 및 분열을 촉진하여 피부장벽을 강화시키고 미백 효과의 증진을 기대할 수 있다.The composition according to the present invention promotes survival and division by enhancing the activity of human keratinocytes, thereby strengthening the skin barrier and enhancing the whitening effect.
또한, 인간세포의 노화를 촉진하는 p21, p16의 유전자를 억제하고, 염색체의 말단에 반복염기서열 구조로서 노화정도를 나타내는 말단소립(telomere)을 신장시키는 효소인 말단소립효소의 활성을 증가시킴으로써 피부의 노화를 방지할 수 있다. In addition, it suppresses the p21 and p16 genes that promote aging of human cells, and increases the activity of telomerase, an enzyme that elongates telomere, which is a repeating nucleotide sequence structure at the end of the chromosome, indicating the degree of aging. can prevent aging.
도 1은 세포활성도 측정 결과를 나타내는 그래프
도 2는 CDKN1A 및 CDKN2A 유전자 발현 측정 결과를 나타내는 그래프
도 3은 말단소립효소 활성(telomerase activity) 측정 결과를 나타내는 그래프1 is a graph showing the measurement result of cell activity;
Figure 2 is a graph showing the results of CDKN1A and CDKN2A gene expression measurement
3 is a graph showing the measurement result of telomerase activity;
이하, 첨부한 도면을 참조하여 본 발명의 실시예에 대해 상세히 설명한다. 본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 형태를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 본문에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 이는 본 발명을 특정한 개시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. Since the present invention can have various changes and can have various forms, specific embodiments are illustrated in the drawings and described in detail in the text. However, this is not intended to limit the present invention to the specific disclosed form, it should be understood to include all modifications, equivalents and substitutes included in the spirit and scope of the present invention.
본 출원에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로서 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 출원에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 단계, 구성요소 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 단계, 구성요소 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.The terminology used in the present application is only used to describe specific embodiments and is not intended to limit the present invention. The singular expression includes the plural expression unless the context clearly dictates otherwise. In the present application, terms such as “comprise” or “have” are intended to designate that a feature, step, component, or combination thereof described in the specification exists, and includes one or more other features, steps, components, or It should be understood that it does not preclude the possibility of the existence or addition of combinations thereof.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.Unless defined otherwise, all terms used herein, including technical and scientific terms, have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. Terms such as those defined in commonly used dictionaries should be interpreted as having a meaning consistent with the meaning in the context of the related art, and should not be interpreted in an ideal or excessively formal meaning unless explicitly defined in the present application. does not
본 발명은 마치현 추출물, 병풀 추출물 및 커큐민을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물 및 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for preventing skin aging and a cosmetic composition for skin whitening, characterized in that it contains an extract of Machisinosa, Centella asiatica extract and curcumin as active ingredients.
도 1은 세포활성도 측정 결과를 나타내는 그래프, 도 2는 CDKN1A 및 CDKN2A 유전자 발현 측정 결과를 나타내는 그래프 및 도 3은 말단소립효소 활성(telomerase activity) 측정 결과를 나타내는 그래프이다.1 is a graph showing the measurement result of cell activity, FIG. 2 is a graph showing the measurement result of CDKN1A and CDKN2A gene expression, and FIG. 3 is a graph showing the measurement result of telomerase activity.
마치현은 쇠비름과의 쇠비름(Portulaca oleracea L.)의 전초를 말한다. 마치현은 잎 모양이 말의 이빨과 비슷하게 생겼고 약재의 성질이 매끄러운 것이 비름과 유사하기 때문에 생긴 이름이다. 잎이 큰 것을 돈이초, 잎이 작은 것을 서치현이라고도 하는데 이 또한 생김새를 표현한 것이며 잎이 오랫동안 잘 시들지 않기 때문에 장명(長命)이라는 이름도 있다. 또한 오행초(五行草)라고도 하는데 이는 잎은 청색(靑色), 줄기는 적색(赤色), 꽃은 황색(黃色), 뿌리는 백색(白色), 씨앗은 흑색(黑色)이기 때문에 오행의 의미를 가지고 있다 하여 붙여진 이름이다. 이 약재는 부드러우면서 특이한 냄새가 나고 점액성이며 맛은 짜고 성질은 차다. 마치현은 해열, 해독, 지혈효과가 있어 세균성 이질, 종기, 치질, 경부림프절염, 습진, 대하, 자궁출혈, 소변불리 등에 사용한다. 약리작용으로 항균작용, 자궁평활근 수축력 증강으로 인한 장관 연동작용, 이뇨작용 등이 보고된 바 있다.Machi-hyeon refers to the outpost of the purslane ( Portulaca oleracea L.) in the purslane family. Machihyeon is named because the shape of the leaf resembles that of a horse's tooth and the smoothness of the medicinal material is similar to that of amaranth. Large leaves are called Donicho, while those with small leaves are called Seochihyeon. This also expresses the appearance, and the leaves do not wither for a long time, hence the name Jangmyung. It is also called the Five Elements (五行草), which means the five elements because the leaves are blue, the stems are red, the flowers are yellow, the roots are white, and the seeds are black. It is named because it has This medicinal herb is soft and has a peculiar odor, is viscous, has a salty taste, and is cold in nature. As it has antipyretic, detoxifying, and hemostatic effects, it is used for bacterial dysentery, boils, hemorrhoids, cervical lymphadenitis, eczema, scabies, uterine bleeding, and urinary incontinence. As pharmacological action, antibacterial action, intestinal peristalsis action due to enhancement of uterine smooth muscle contractility, and diuretic action have been reported.
병풀(Centella asiatica)은 쌍떡잎식물 이판화군 산형화목 미나리과의 여러해살이풀이다. 다소 습기가 있는 곳에서 자란다. 옆으로 뻗어가면서 마디에서 뿌리가 내리고 비늘 같은 잎이 있다. 정상잎은 비늘 같은 잎겨드랑이에서 나오고 자루가 길며 타원형으로 지름 2∼5cm로 가장자리에 둔한 톱니가 있다.Centella asiatica ( Centella asiatica ) is a dicotyledonous perennial plant of the Dicotyledon family of the umbel family. Grows in slightly damp places. As it extends laterally, it takes root at the node and has scale-like leaves. Normal leaves come from the scale-like leaf axils, have long stalks, are oval in shape, and have dull sawtooths at the edges, with a diameter of 2-5cm.
꽃은 7∼8월에 홍자색으로 핀다. 2∼5개의 꽃이 긴 꽃자루[花梗] 끝에 달리고 작은꽃자루[小花梗]는 거의 없으며 총포조각은 2개이다. 꽃잎은 5개로 넓은 원형이고 수술로 5개이다. 열매는 편평한 원형이고 겉에 튀어나온 그물눈이 있으며 처음에는 털이 있으나 없어진다.Flowers bloom in reddish purple in July-August. 2-5 flowers hang at the end of a long peduncle, there are few small peduncles, and there are 2 inflorescences. There are 5 petals, wide circles, and 5 stamens. Fruits are flat, round, with protruding net eyes, and there are hairs at first, but they disappear.
인도에서는 약용으로 사용하며, 많이 복용하면 독성이 나타난다고 한다. 한국, 일본, 중국 등지에 분포한다.In India, it is used medicinally, and it is said that if it is taken in large amounts, it is toxic. It is distributed in Korea, Japan and China.
커큐민은 동인도산의 생강과에 속하는 식물인{Curcuma longa Linn (Zingiberaceae)}의 뿌리에서 추출되어 인도음식에 널리 사용되어 온 폴리페놀성분의 노란색 향신료로 심황(turmeric)의 큐미노이드(curcuminoid)이다. 식품첨가물에서는 노란색 색소로 사용되며 향신료로 이용되고 있다.Curcumin is a turmeric curcuminoid that is extracted from the root of a plant belonging to the ginger family { Curcuma longa Linn (Zingiberaceae)) from East India and has been widely used in Indian food. In food additives, it is used as a yellow colorant and as a spice.
커큐민은 항종양, 항산화, 항아밀로이드와 항염증작용을 가지고 있다. 항염증작용은 이코사노이드(eicosanoid) 생합성의 억제에 의해서 기능을 수행한다. 커큐민은 산화에 의한 DNA 손상과 지질과산화를 억제하고, 항산화 작용과 자유래디컬의 청소부 역할을 한다. cytochrome P450의 잠재적인 억제와 글루타티온-S-전이효소(glutathione S-transferase)을 유도하는 것에 의해 역할을 수행한다. 커큐민은 azoxymethane 유발 동물 대장암의 초기 발암과정을 차단하며, 벤조피렌(benzopyrene)에 의한 DNA adduct의 형성을 억제하여 항발암작용 및 항돌연변이 작용을 가진다. 커큐민은 쥐실험에서 벤조피렌, 7,12-dimethylbenz anthracen, phorbol ester로 유발시킨 피부암, 위암, 구강암의 형성 및 촉진을 억제시키고, N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidin으로 유발시킨 위암형성을 억제한다고 보고된 바 있다.Curcumin has anti-tumor, antioxidant, anti-amyloid and anti-inflammatory properties. Anti-inflammatory action is performed by inhibition of eicosanoid biosynthesis. Curcumin inhibits oxidative DNA damage and lipid peroxidation, and acts as an antioxidant and free radical scavenger. It plays a role by potent inhibition of cytochrome P450 and induction of glutathione S-transferase. Curcumin blocks the early carcinogenesis of azoxymethane-induced animal colorectal cancer, and inhibits the formation of DNA adducts by benzopyrene, thereby having anti-carcinogenic and anti-mutagenic effects. Curcumin inhibited the formation and promotion of skin cancer, gastric cancer, and oral cancer induced by benzopyrene, 7,12-dimethylbenz anthracen, and phorbol ester in a mouse experiment, and inhibited the formation and promotion of gastric cancer induced by N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidin. suppression has been reported.
실시예 1. 마치현 추출물의 제조Example 1. Preparation of extracts from Machihyun
마치현 100g에 정제수 5kg을 혼합한 다음 90℃에서 3시간 동안 환류냉각하여 유효성분을 추출하였다. 추출액을 냉각하여 여과한 후 60℃의 수욕상에서 감압농축하였다. 농축물을 진공건조하여 분말형태의 마치현 추출물(17.5g)을 수득하였다.After mixing 5 kg of purified water with 100 g of Machihyun, the active ingredient was extracted by reflux cooling at 90° C. for 3 hours. The extract was cooled and filtered, and then concentrated under reduced pressure in a water bath at 60°C. The concentrate was dried in vacuo to obtain a powdery extract (17.5 g) of Machihyun.
실시예 2. 병풀 추출물의 제조Example 2. Preparation of Centella asiatica extract
병풀 100g에 정제수 5kg을 혼합한 다음 90℃에서 3시간 동안 환류냉각하여 유효성분을 추출하였다. 추출액을 냉각하여 여과한 후 60℃의 수욕상에서 감압농축하였다. 농축물을 진공건조하여 분말형태의 병풀 추출물(18.6g)을 수득하였다.After mixing 5 kg of purified water with 100 g of Centella asiatica, the active ingredient was extracted by reflux cooling at 90° C. for 3 hours. The extract was cooled and filtered, and then concentrated under reduced pressure in a water bath at 60°C. The concentrate was vacuum-dried to obtain a powdery centella asiatica extract (18.6 g).
실시예 3. 마치현, 병풀 및 커큐민 복합물의 제조Example 3. Preparation of Machihyun, Centella asiatica and Curcumin Complex
실시예 1에 따라 제조된 마치현 추출물 0.3%(w/w), 실시예 2에 따라 제조된 병풀 추출물 0.4%(w/w), 커큐민(Sigma) 0.3%(w/w)과 정제수를 혼합하여 1%의 복합물을 제조하였다.By mixing 0.3% (w/w) of the extract of Machisinosa prepared according to Example 1, 0.4% (w/w) of Centella asiatica extract prepared according to Example 2, 0.3% (w/w) of curcumin (Sigma) and purified water, 1% of the composite was prepared.
실험예 1. 세포활성도 측정Experimental Example 1. Measurement of cell activity
1-1. 실험방법1-1. Experimental method
인간 피부세포/각질세포주의 일종인 HaCaT세포는 DMEM (Dulbecco′s Modified Eagle′s Medium), 10% FBS (Fetal Bovine Serum), 1% Penicillin/Streptomycin을 배합한 배지에 의해 배양되었으며, 5% CO2를 지속적으로 공급하는 37℃ 배양기 내에서 유지시켰다. 해당 세포는 96-well plate 위에서 배양되었으며, 90% 이상 성장하였을 때 (90% of Visual Confluency)에 실시예 3에 따른 복합물을 농도별로 처리하였다. 처리한 농도는 도 1에 표시되어 있으며, 72시간 동안 처리하였다. 이 후 배양액을 제거한 다음, 96-well plate 상의 세포를 PBS (Phosphate-buffered saline)로 3회 세척하였다. 다음으로 CCK-8 용액 (CK04, Dojindo Molecular Technologies, USA)을 10μL 추가한 후에 1 ~ 4시간 동안 37℃에서 반응을 시켰다. 이후 OD=450nm에서의 흡광도를 측정하여 세포의 생존율 및 활성도를 결정하였다. 실험 결과는 1-Way ANOVA 검정법을 활용하여 통계 처리하였다(ns: non-significant, *: p<0.5, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001).HaCaT cells, a type of human skin cell/keratinocyte line, were cultured in a medium containing DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium), 10% FBS (Fetal Bovine Serum), and 1% Penicillin/Streptomycin, and 5% CO 2 was maintained in a 37° C. incubator with continuous supply. The cells were cultured on a 96-well plate, and when the cells were grown to more than 90% (90% of Visual Confluency), the complex according to Example 3 was treated by concentration. The treated concentration is shown in FIG. 1 , and it was treated for 72 hours. After removing the culture medium, the cells on the 96-well plate were washed 3 times with PBS (Phosphate-buffered saline). Next, 10 μL of CCK-8 solution (CK04, Dojindo Molecular Technologies, USA) was added, followed by reaction at 37° C. for 1 to 4 hours. Thereafter, the absorbance at OD=450 nm was measured to determine the cell viability and activity. Experimental results were statistically processed using 1-Way ANOVA (ns: non-significant, *: p<0.5, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001) ).
1-2. 실험결과1-2. Experiment result
도 1에 도시된 바와 같이 1~2%의 복합물 처리가 인간 피부세포의 일종인 각질세포의 생존 및 분열에 통계적으로 유의미한 영향을 주는 것을 확인하였다. 이를 통해 본 발명에 따른 조성물이 인간 각질세포의 생존 및 활성을 자극하여 피부장벽을 강화시키고 미백을 증가시킬 것으로 예상할 수 있다.As shown in FIG. 1 , it was confirmed that treatment with the complex of 1-2% had a statistically significant effect on the survival and division of keratinocytes, a type of human skin cells. Through this, it can be expected that the composition according to the present invention stimulates the survival and activity of human keratinocytes to strengthen the skin barrier and increase whitening.
실험예 2. CDKN1A 및 CDKN2A 유전자 발현 측정Experimental Example 2. CDKN1A and CDKN2A gene expression measurement
2-1. 실험방법2-1. Experimental method
인간 피부세포/각질세포주의 일종인 HaCaT세포는 DMEM (Dulbecco′s Modified Eagle′s Medium), 10% FBS (Fetal Bovine Serum), 1% Penicillin/Streptomycin을 배합한 배지에 의해 배양되었으며, 5% CO2를 지속적으로 공급하는 37℃ 배양기 내에서 유지됨. 해당 세포는 96-well plate 위에서 배양되었으며, 90% 이상 성장하였을 때 (90% of Visual Confluency)에 실시예 3에 따른 복합물 1%를 72시간 동안 처리하였다. 이 후 배양액을 제거한 후 plate 상의 세포를 PBS (Phosphate-buffered saline)로 3회 세척하였다. 수집된 세포에서 RNA를 정제한 후 cDNA를 합성하였으며, qPCR(quantitative real time polymerase chain reaction)을 이용하여 유전자 정량분석을 수행하였다. 실험 결과는 Student t-test 검정법을 활용하여 통계 처리하였다(ns: non-significant, *: p<0.5, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001).HaCaT cells, a type of human skin cell/keratinocyte line, were cultured in a medium containing DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium), 10% FBS (Fetal Bovine Serum), and 1% Penicillin/Streptomycin, and 5% CO 2 maintained in a 37° C. incubator with continuous supply. The cells were cultured on a 96-well plate, and when they were grown to more than 90% (90% of Visual Confluency), 1% of the complex according to Example 3 was treated for 72 hours. After removing the culture medium, the cells on the plate were washed 3 times with PBS (Phosphate-buffered saline). After purifying RNA from the collected cells, cDNA was synthesized, and gene quantitative analysis was performed using qPCR (quantitative real time polymerase chain reaction). Experimental results were statistically processed using Student's t-test method (ns: non-significant, *: p<0.5, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001 ).
2-2. 실험결과2-2. Experiment result
도 2에 도시된 바와 같이 실시예 3에 따른 1%의 복합물 처리가 인간 각질세포의 노화 억제에 도움을 줄 수 있음을 알 수 있다. CDKN1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1)와 CDKN2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A) 유전자는 다양한 경로를 통해 인간세포의 노화를 촉진하는 p21, p16 단백질을 암호화하고 있다. 따라서 해당 유전자의 발현 감소는 피부의 노화 정도가 감소하였다는 것을 의미하며, 본 발명에 따른 마치현 추출물, 병풀 추출물 및 커큐민 복합물의 항노화 기능을 기대할 수 있다.As shown in FIG. 2 , it can be seen that the 1% complex treatment according to Example 3 can help inhibit aging of human keratinocytes. CDKN1A (cyclin-dependent kinase inhibitor 1) and CDKN2A (cyclin-dependent kinase inhibitor 2A) genes encode p21 and p16 proteins that promote aging of human cells through various pathways. Therefore, the decrease in the expression of the gene means that the degree of aging of the skin is reduced, and anti-aging functions of the extracts of horse chestnut, Centella asiatica and curcumin according to the present invention can be expected.
실험예 3. 말단소립 역전사효소(telomerase) 활성도 측정Experimental Example 3. Measurement of telomerase activity
3-1. 실험방법3-1. Experimental method
인간 피부세포/각질세포주의 일종인 HaCaT세포는 DMEM (Dulbecco′s Modified Eagle′s Medium), 10% FBS (Fetal Bovine Serum), 1% Penicillin/Streptomycin을 배합한 배지에 배양시켰으며, 5% CO2를 지속적으로 공급하는 37℃ 배양기 내에서 유지하였다. 해당 세포는 96-well plate 위에서 배양되었으며, 90% 이상 성장하였을 때 (90% of Visual Confluency)에 실시예 1에 따른 마치현 추출물, 실시예 2에 따른 병풀 추출물, 커큐민(sigma) 및 실시예 3에 따른 복합물을 각각 1%(w/w)의 농도로 72시간 동안 처리하였다. 이 후 세포를 수거하여 NP-40 Buffer(10mM Tris-HCl pH 8.0, 1mM MgCl2, 1mM EDTA, 1% NP-40, 0.25mM Sodium deoxycholate, 10% Glycerol, 150mM NaCl, 5mM 2-mercaptoethanol, 0,1mM AEBSF)에 1,000 cells/μl 농도로 세포를 용해시켰다. 30분 이후 1μl의 반응액을 100ng/μl ACX(5`-GCGCGGCTTACCCTTACCCTTACCCTAACC-3`), 100ng/μl NT(5`-ATCGCTTCTCGGCCTTTT-3`)와 반응시킨 후 다음 조건으로 PCR을 수행하였다; 25 ℃ for 20 min, 95 ℃ for 10 min, followed by a 40-cycle amplification (95℃ for 20 s, 50℃ for 30s, and 72℃ for 90 s). 실험 결과는 1-Way ANOVA 검정법을 활용하여 통계 처리하였다(ns: non-significant, *: p<0.5, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001).HaCaT cells, a type of human skin cell/keratinocyte line, were cultured in a medium containing DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium), 10% FBS (Fetal Bovine Serum), and 1% Penicillin/Streptomycin, and 5% CO 2 was maintained in a 37° C. incubator with continuous supply. The cells were cultured on a 96-well plate, and when grown to more than 90% (90% of Visual Confluency), the extract according to Example 1, Centella asiatica extract according to Example 2, curcumin (sigma) and Example 3 Each of the following complexes was treated at a concentration of 1% (w/w) for 72 hours. Thereafter, cells were harvested and cells were collected in NP-40 Buffer (10 mM Tris-HCl pH 8.0, 1 mM MgCl 2 , 1 mM EDTA, 1% NP-40, 0.25 mM Sodium deoxycholate, 10% Glycerol, 150 mM NaCl, 5 mM 2-mercaptoethanol, 0, Cells were lysed at a concentration of 1,000 cells/μl in 1 mM AEBSF). After 30 minutes, 1 μl of the reaction solution was reacted with 100 ng/μl ACX (5`-GCGCGGCTTACCCTTACCCTTACCCTAACC-3`), 100 ng/μl NT (5`-ATCGCTTCTCGGCCTTTT-3`) and then PCR was performed under the following conditions; 25 °C for 20 min, 95 °C for 10 min, followed by a 40-cycle amplification (95 °C for 20 s, 50 °C for 30s, and 72 °C for 90 s). Experimental results were statistically processed using 1-Way ANOVA (ns: non-significant, *: p<0.5, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001) ).
3-2. 실험결과3-2. Experiment result
도 3에 도시된 바와 같이 마치현 추출물, 병풀 추출물, 커큐민 및 이들의 혼합물의 처리는 말단소립 역전사효소의 활성을 통계적으로 유의미하게 증가시킴을 의미한다. 구체적으로, 말단소립효소 활성도는 대조군 대비 마치현이 1.366, 병풀이 1.178, 커큐민이 1.472 수준으로 확인된 바 단독 조성물로는 커큐민의 활성이 가장 우수한 것을 확인하였다. 그리고 실시예 3에 따른 혼합물을 처리하였을 경우에는 대조군 대비 1.767 수준으로 마치현, 병풀 및 커큐민 각각을 단독으로 처리하였을 때보다 혼합물을 처리하였을 때 최소 20% 부터 최대 50%까지 활성도가 더 높은 것을 확인하였다. As shown in FIG. 3 , treatment with the extracts of Machisea extract, centella asiatica, curcumin, and a mixture thereof means that the activity of telomere reverse transcriptase is increased statistically and significantly. Specifically, the telomerase activity was found to be 1.366 for machihyun, 1.178 for Centella asiatica, and 1.472 for curcumin compared to the control, confirming that the curcumin activity was the best with the single composition. And when the mixture according to Example 3 was treated, it was confirmed that the activity was higher from a minimum of 20% to a maximum of 50% when the mixture was treated at a level of 1.767 compared to the control group when the mixture was treated with each of Machihyun, Centella asiatica and curcumin alone. .
참고적으로 말단소립효소(telomerase)는 염색체의 말단에 반복염기서열 구조인 말단소립(telomere)을 신장시키는 효소로서, 단백질을 주요 구성요소로 가지며 특이적인 RNA(hTR)를 가지고 이를 활용하여 역전사효소(Reverse Transcriptase) 활성을 보인다. 이러한 기전을 통해 말단소립효소는 염색체 말단의 말단소립의 길이를 독자적으로 조절하며, 노화 및 DNA 손상에 관련된 다양한 생체 반응을 조절한다. 말단소립의 길이는 때때로 세포의 노화정도를 나타내기 때문에 말단소립효소의 활성은 세포의 항노화 활성과 대응된다. 말단소립효소는 세포 내에 존재하는 유일한 말단소립을 증가시키는 효소이므로, 말단소립효소를 활성화시키는 것은 항노화 소재로서의 가능성을 의미한다.For reference, telomerase is an enzyme that elongates the telomere, a repeating nucleotide sequence structure, at the end of a chromosome. (Reverse Transcriptase) activity. Through this mechanism, telomerase independently regulates the length of telomeres at the ends of chromosomes, and regulates various biological reactions related to aging and DNA damage. Since the length of telomeres sometimes indicates the degree of senescence of cells, the activity of telomerase corresponds to the anti-aging activity of cells. Since telomerase is the only enzyme that increases telomeres present in cells, activating telomerase means the potential as an anti-aging material.
제조예. 에센스의 제조 manufacturing example. Preparation of Essence
실시예 1에 따라 제조되는 마치현 추출물 0.6%(w/w), 실시예 2에 따라 제조되는 병풀 추출물 0.8%(w/w), 커큐민(sigma) 0.6%(w/w), 부틸렌글라이콜(butylene glycol) 64.4% 및 정제수 33.6%를 혼합하여 마치현 추출물, 병풀 추출물 및 커큐민을 함유하는 에센스를 제조하였다. 0.6% (w/w) of the extract of Machisinosa prepared according to Example 1, 0.8% (w/w) of Centella asiatica extract prepared according to Example 2, Curcumin (sigma) 0.6% (w/w), butylene glycol (butylene glycol) 64.4% and purified water 33.6% were mixed to prepare an essence containing a horse chestnut extract, centella asiatica extract and curcumin.
Claims (5)
A cosmetic composition for preventing skin aging, characterized in that it contains an extract of Machisinosa, Centella asiatica extract, and curcumin as active ingredients.
A cosmetic composition for skin whitening, comprising, as active ingredients, an extract of horse chestnut, Centella asiatica extract, and curcumin.
상기 마치현 추출물, 상기 병풀 추출물 및 상기 커큐민은 중량비 기준으로 3:4:3 비율로 혼합되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The cosmetic composition, characterized in that the extract, the centella asiatica extract, and the curcumin are mixed in a ratio of 3:4:3 by weight.
상기 조성물은 p21, p16 저해 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The composition is a cosmetic composition, characterized in that it has p21, p16 inhibitory activity.
상기 마치현 추출물, 상기 병풀 추출물 및 상기 커큐민은 총 중량에 대하여 1 내지 2 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The cosmetic composition, characterized in that the extract, the centella asiatica extract and the curcumin are included in an amount of 1 to 2% by weight based on the total weight.
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20140133280A (en) * | 2013-05-10 | 2014-11-19 | 신라대학교 산학협력단 | Cosmetic composition with antioxidant, anti-inflammatory and whitening effect containing Ge-7 mixture |
| KR20160005558A (en) | 2014-07-07 | 2016-01-15 | 주식회사 코리아나화장품 | Cosmetic composition containing fractions of allium hookeri as active ingredient |
| KR20160009330A (en) * | 2014-07-16 | 2016-01-26 | 천유화장품(주) | Cosmetic composition for improving skin-aging |
| KR20170061360A (en) * | 2015-11-26 | 2017-06-05 | 우수정 | Cosmetic composition comprising Curcumae Longae Rhizoma extract comprising curcumin as an active ingredient for skin lightening, reducing wrinkle formation, and alleviating pruritus |
| KR20180056915A (en) * | 2016-11-21 | 2018-05-30 | 동명대학교산학협력단 | Cosmetic compositions for sunblock or cool cream containing natural plant extracts |
| KR20200114029A (en) * | 2019-03-27 | 2020-10-07 | 이수혜 | Skin moisturizing and skin soothing cosmetic composition comprising Aloe barbadensis leaf juice and extracts of Pulsatilla koreana, Centella asiatica, Portulaca oleracea and Hamamelis virginiana |
-
2020
- 2020-10-28 KR KR1020200141289A patent/KR102379527B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20140133280A (en) * | 2013-05-10 | 2014-11-19 | 신라대학교 산학협력단 | Cosmetic composition with antioxidant, anti-inflammatory and whitening effect containing Ge-7 mixture |
| KR20160005558A (en) | 2014-07-07 | 2016-01-15 | 주식회사 코리아나화장품 | Cosmetic composition containing fractions of allium hookeri as active ingredient |
| KR20160009330A (en) * | 2014-07-16 | 2016-01-26 | 천유화장품(주) | Cosmetic composition for improving skin-aging |
| KR20170061360A (en) * | 2015-11-26 | 2017-06-05 | 우수정 | Cosmetic composition comprising Curcumae Longae Rhizoma extract comprising curcumin as an active ingredient for skin lightening, reducing wrinkle formation, and alleviating pruritus |
| KR20180056915A (en) * | 2016-11-21 | 2018-05-30 | 동명대학교산학협력단 | Cosmetic compositions for sunblock or cool cream containing natural plant extracts |
| KR20200114029A (en) * | 2019-03-27 | 2020-10-07 | 이수혜 | Skin moisturizing and skin soothing cosmetic composition comprising Aloe barbadensis leaf juice and extracts of Pulsatilla koreana, Centella asiatica, Portulaca oleracea and Hamamelis virginiana |
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