KR102277308B1 - Persimmon leaf extract and vitamin b-encapsulated composition using fermented emulsifier forming reverse micell - Google Patents

Persimmon leaf extract and vitamin b-encapsulated composition using fermented emulsifier forming reverse micell Download PDF

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Abstract

본 발명은 역미셀을 형성하는 발효유화제를 이용한 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물을 제조함으로써, 유효 물질을 피부의 지질층에 융합시켜 효과적으로 유효 물질을 침투 및 흡수시킬 수 있다. 또한, 유효 물질의 안정성 및 보관성을 향상시켜 친환경적이고, 인체친화적인 피부학적 조성물을 제공할 수 있다. 또한, 유효성분의 피부 침투 및 흡수를 향상시켜 보습력, 주름개선, 피부노화, 항염 등의 피부학적 기능을 향상시킬 수 있고, 특히 미백효과가 향상된 조성물을 제공할 수 있다.The present invention can effectively penetrate and absorb the active substance by fusing the active substance into the lipid layer of the skin by preparing a persimmon leaf extract and a vitamin B collection composition using a fermented emulsifier that forms reverse micelles. In addition, it is possible to provide an eco-friendly, human-friendly dermatological composition by improving the stability and storability of the active material. In addition, it is possible to improve skin penetration and absorption of active ingredients to improve dermatological functions such as moisturizing power, wrinkle improvement, skin aging, and anti-inflammatory, and in particular, it is possible to provide a composition with improved whitening effect.

Description

역미셀을 형성하는 발효유화제를 이용한 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물{PERSIMMON LEAF EXTRACT AND VITAMIN B-ENCAPSULATED COMPOSITION USING FERMENTED EMULSIFIER FORMING REVERSE MICELL}Persimmon leaf extract and vitamin B capture composition using a fermented emulsifier that forms reverse micelles {PERSIMMON LEAF EXTRACT AND VITAMIN B-ENCAPSULATED COMPOSITION USING FERMENTED EMULSIFIER FORMING REVERSE MICELL}

본 발명은 역미셀을 형성하는 발효유화제를 이용한 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a persimmon leaf extract and a vitamin B collection composition using a fermented emulsifier that forms reverse micelles.

또한, 본 발명은 상기 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물을 제조하는 방법에 관한 것이다.In addition, the present invention relates to a method for preparing the persimmon leaf extract and vitamin B-capturing composition.

인간의 피부는 크게 표피와 진피, 피하지방으로 나누어지고 다시 표피는 각질층, 투명층, 과립층, 유극층, 기저층으로 세분화되어 있다. 피부의 최외각층인 각질층은 죽은 케라틴세포 덩어리로 이루어져 있으며, 주로 단백질로 이루어져 있는 각질 세포로 구성되고, 각질 세포 간의 사이를 세라마이드, 콜레스테롤, 유리지방산 등의 지질이 채우고 있는 구조를 가진다. 이 지질층은 체내 수분이 증발되는 것을 방지하며, 외부 침입에 대해 신체를 보호하는 건강학적 기능과 동시에, 피부를 윤택하고 매끄럽게 보이게 하는 심미적 기능을 가지고 있다. 이러한 유효 성분을 피부에 자연스럽게 통과시키기 위해서는 소수성 혹은, 친수성과 소수성이 결합된 담체를 이용해야 하며 특히, 수용성 활성물질을 피부에 전달하기 위해 미셀(micelle) 혹은 리포좀(liposome)과 같은 형태의 담체를 이용하는 것이 일반적이다.Human skin is largely divided into epidermis, dermis, and subcutaneous fat, and the epidermis is further subdivided into stratum corneum, transparent layer, granular layer, stratum corneum, and basal layer. The stratum corneum, which is the outermost layer of the skin, is composed of a mass of dead keratinocytes, and is mainly composed of keratinocytes composed of protein, and has a structure in which lipids such as ceramide, cholesterol, and free fatty acid fill the spaces between the keratinocytes. This lipid layer prevents the evaporation of moisture from the body and has a health function to protect the body against external invasion, and an aesthetic function to make the skin look shiny and smooth. In order to pass these active ingredients through the skin naturally, hydrophobicity or a carrier combining hydrophilicity and hydrophobicity must be used. In particular, a carrier in the form of micelles or liposomes is used to deliver water-soluble active substances to the skin. It is common to use

그러나 이러한 미셀 혹은 리포좀의 형태는 피부의 지질층을 통과시켜 유효물질을 흡수시키기에는 한계가 있다. 이는 피부의 최외각층인 각질층은 각질세포들로 쌓여있고, 그 사이사이는 지질성분으로 이루어진 구조이므로 구조적으로 친수성의 물질보다는 소수성의 물질이 각질세포 사이로 투과시키는 것이 용이하기 때문이다.However, these micelles or liposomes have a limit in absorbing active substances through the lipid layer of the skin. This is because the stratum corneum, which is the outermost layer of the skin, is stacked with keratinocytes, and the structure between them is composed of lipid components.

한편, 역미셀계(reverse micelle system)는 비극성용매의 환경에서 계면활성제의 소수성 부분(tail)이 외부로 향하고, 친수성 부분(head)이 내부로 향하도록 자발적으로 배열되는 응집체이다. 이는 나노크기의 입자로 분산될 수 있다.On the other hand, the reverse micelle system is an aggregate that is spontaneously arranged so that the hydrophobic part (tail) of the surfactant faces outward and the hydrophilic part (head) faces inward in the environment of a non-polar solvent. It can be dispersed into nano-sized particles.

본 발명은 이러한 역미셀을 이용하여 유효성분을 포집하는 조성물을 개발하여 피부 내에 유효성분을 더욱 효과적으로 전달하고자 하였다.The present invention was intended to more effectively deliver the active ingredient into the skin by developing a composition for collecting the active ingredient using such reverse micelles.

본 발명은 역미셀을 형성하는 발효유화제를 이용하여 감잎 추출물 및 비타민 B가 포집된 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition in which persimmon leaf extract and vitamin B are captured using a fermented emulsifier that forms reverse micelles.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 제조하는 방법에 관한 것이다.The present invention also relates to a method for preparing the composition.

상기 과제를 해결하기 위하여 본 발명은,The present invention in order to solve the above problems,

Candida bombicola UA-06(기탁번호: KCTC13855BP, 한국생명공학연구원, 2019.06.04.) 미생물을 활성화시키는 종균배양 단계; Candida bombicola UA-06 (Accession No.: KCTC13855BP, Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 2019.06.04.) A seed culture step to activate microorganisms;

상기 종균배양된 미생물 및 식물성 오일을 발효시켜 역미셀을 형성하는 발효유화제를 제조하는 발효 단계;a fermentation step of fermenting the seed cultured microorganism and vegetable oil to prepare a fermented emulsifier to form reverse micelles;

상기 발효유화제, 감잎 추출물 및 비타민 B를 혼합하는 단계; 및mixing the fermented emulsifier, persimmon leaf extract and vitamin B; and

정제 단계를 포함하며,a purification step;

상기 종균배양 단계에서 사용하는 배지가 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3 및 MgSO4를 포함하고,The medium used in the seed culture step includes yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 and MgSO 4 ,

상기 발효 단계에서 사용하는 배지가 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3, MgSO4, 글루쿠로노락톤(glucuronolactone) 및 식물성 오일을 포함하고,The medium used in the fermentation step is yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 , MgSO 4 , glucuronolactone and vegetable oil. including,

상기 정제 단계가 발효물을 정치시켜 상층과 하층을 분리하여 하층을 폐기하고, MgSO4를 첨가하여 교반 후 원심분리하여 미생물 및 수분을 제거하는 단계 및, 친화크로마토그라피 컬럼에 규산마그네슘을 충진제로 사용하여 지방산 및 불순물이 제거된 오일을 회수하는 단계를 포함하는 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법을 제공한다.In the purification step, the fermented product is allowed to stand to separate the upper and lower layers, the lower layer is discarded, and MgSO 4 is added and stirred to remove microorganisms and moisture by centrifugation, and magnesium silicate is used as a filler in the affinity chromatography column. To provide a method for producing a persimmon leaf extract and vitamin B capture composition comprising the step of recovering the oil from which fatty acids and impurities have been removed.

일구현예에 따르면 상기 감잎 추출물은,According to one embodiment, the persimmon leaf extract,

건조되기 전의 감잎을 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 알코올 또는 에틸 아세테이트로 4 내지 100℃에서 3시간 내지 20일 동안 추출하여 감잎 추출물을 제조하는 단계;Preparing a persimmon leaf extract by extracting persimmon leaves before drying at 4 to 100° C. for 3 hours to 20 days with anhydrous or hydrous alcohol or ethyl acetate having 1 to 3 carbon atoms;

상기 감잎 추출물을 제조하는 단계의 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거하는 단계; 및removing the diethyl ether soluble component before or after the step of preparing the persimmon leaf extract; and

상기 감잎 추출물을 농축하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.It may be prepared by a method comprising the step of concentrating the persimmon leaf extract.

일구현예에 따르면, 상기 비타민 B는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B3, 비타민 B5, 비타민 B6, 비타민 B9 및 비타민 B12로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 포함할 수 있다.According to one embodiment, the vitamin B may include at least one selected from the group consisting of vitamin B1, vitamin B2, vitamin B3, vitamin B5, vitamin B6, vitamin B9, and vitamin B12.

일구현예에 따르면, 조성물 총 중량에 대하여 상기 감잎 추출물은 0.05 내지 10중량%, 상기 비타민 B가 0.5 내지 10중량% 및 상기 발효유화제가 55 내지 90중량% 함량으로 포함될 수 있다.According to one embodiment, the persimmon leaf extract may be included in an amount of 0.05 to 10% by weight, 0.5 to 10% by weight of the vitamin B, and 55 to 90% by weight of the fermented emulsifier based on the total weight of the composition.

일구현예에 따르면, 상기 종균배양 단계는 15 내지 30℃에서 100 내지 500rpm, 0.5 내지 2vvm, 호기 조건으로 진행되고,According to one embodiment, the seed culture step is carried out at 15 to 30 ℃ 100 to 500 rpm, 0.5 to 2 vvm, aerobic conditions,

상기 발효 단계는20 내지 35℃의 온도 및 50 내지 200rpm의 혼합 조건으로 진행될 수 있다.The fermentation step may be performed at a temperature of 20 to 35° C. and mixing conditions of 50 to 200 rpm.

일구현예에 따르면, 상기 종균발효 단계는 균의 지수생장 종말점 시점에서 종료할 수 있다.According to one embodiment, the seed fermentation step may be terminated at the endpoint of the exponential growth of the bacteria.

일구현예에 따르면, 상기 식물성 오일은 해바라기씨, 포도씨, 카놀라, 쌀눈, 올리브, 대두, 아르간, 현미, 들깨, 참깨, 아몬드, 땅콩, 옥수수, 홍삼, 아보카도, 마카다미아, 코코넛, 로즈힙, 비타민나무씨, 시어나무열매, 기름야자, 베르가모트열매, 동백씨, 홍화씨, 살구씨, 양귀비씨, 달맞이꽃씨, 피마자씨, 녹차씨, 메도우폼씨, 아마씨 및 햄프씨로 이루어지는 군으로부터 추출될 수 있다.According to one embodiment, the vegetable oil is sunflower seed, grape seed, canola, rice germ, olive, soybean, argan, brown rice, perilla, sesame, almond, peanut, corn, red ginseng, avocado, macadamia, coconut, rosehip, vitamin tree seed , shea fruit, oil palm, bergamot fruit, camellia seed, safflower seed, apricot seed, poppy seed, evening primrose seed, castor seed, green tea seed, meadowfoam seed, flax seed and hemp seed.

본 발명의 다른 구현예에 따르면, 상기한 바와 같은 방법으로 제조되는 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물을 제공한다.According to another embodiment of the present invention, there is provided a persimmon leaf extract and a vitamin B collection composition prepared by the method as described above.

상기 조성물은 역미셀 내에 감잎 추출물 및 비타민 B가 포집된 형태를 형성할 수 있다.The composition may form a form in which persimmon leaf extract and vitamin B are captured in reverse micelles.

본 발명의 다른 구현예에 따르면, 상기한 바와 같은 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공할 수 있다.According to another embodiment of the present invention, it is possible to provide a cosmetic composition comprising the persimmon leaf extract and the vitamin B collection composition as described above.

기타 본 발명에 따른 구현예들의 구체적인 사항은 이하의 상세한 설명에 포함되어 있다.The specific details of other embodiments according to the present invention are included in the detailed description below.

본 발명은 역미셀(reverse micelle)을 형성하는 발효유화제를 이용하여 감잎 추출물의 유효 물질 및 비타민 B를 피부의 지질층에 효과적으로 통과시킬 수 있다.The present invention can effectively pass the active substance of the persimmon leaf extract and vitamin B through the lipid layer of the skin using a fermented emulsifier that forms reverse micelles.

또한, 산화되기 쉬운 유효물질을 화장품 제형 내에 용이하게 적용할 수 있으며, 용해성, 유화, 산화 안정성, 피부 내 효능 등을 향상시킬 수 있다. 또한, 합성물이 아닌 천연 발효물로써 친환경적이고, 피부세포에 대한 독성이 없으므로 인체 친화적인 화장료를 제공할 수 있다.In addition, an active substance that is easily oxidized can be easily applied in a cosmetic formulation, and solubility, emulsification, oxidative stability, and skin efficacy can be improved. In addition, as a natural fermented product rather than a synthetic product, it is eco-friendly and has no toxicity to skin cells, so it is possible to provide a human-friendly cosmetic.

도 1은 본 발명에 따른 간략한 제조과정을 예시로 도시한 것이다.
도 2는 실시예 7의 관찰 사진이다.1 illustrates a simplified manufacturing process according to the present invention by way of example.
2 is an observation photograph of Example 7.

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예를 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.Since the present invention can apply various transformations and can have various embodiments, specific embodiments are illustrated in the drawings and described in detail in the detailed description. However, this is not intended to limit the present invention to specific embodiments, and it should be understood to include all modifications, equivalents and substitutes included in the spirit and scope of the present invention. In describing the present invention, if it is determined that a detailed description of a related known technology may obscure the gist of the present invention, the detailed description thereof will be omitted.

천연유래의 계면활성제는 피부에 유용한 성분을 다량 함유하고 있으며, 그 중, 미생물을 이용하는 생물 계면활성제(bio-surfactant)는 많은 이점을 가진다.Naturally derived surfactants contain a large amount of ingredients useful for the skin, and among them, bio-surfactants using microorganisms have many advantages.

한편, 계면활성제는 일정 농도 이상일 때, 수상에서 중심에 소수기를 밀집시키는 미셀(micelle) 구조를 이루는 것이 일반적이다. 반대로, 유상에서는 저분자 친수기를 중심에 밀집시키는 역미셀(reverse micelle) 구조를 이룬다. 역미셀은 미셀보다 피부의 지질층을 통과하는데 더 효율적이기 때문에 세포간극을 통하여 수용성 활성물질을 피부세포에 안정적으로 전달하는 시스템으로 적용할 수 있다.On the other hand, when the surfactant is at a certain concentration or more, it is common to form a micelle structure in which hydrophobic groups are concentrated in the center of the aqueous phase. Conversely, in the oil phase, a reverse micelle structure is formed in which low molecular weight hydrophilic groups are concentrated in the center. Since reverse micelles are more efficient at passing through the lipid layer of the skin than micelles, they can be applied as a system that stably delivers water-soluble active substances to skin cells through the intercellular space.

그러므로 본 발명에서는 활성물질을 안정적으로 전달할 수 있는 역미셀을 형성하는 발효유화제를 이용하여 감잎 추출물 및 비타민 B를 포집시킨 조성물 및 그의 제조방법을 제공하고자 한다.Therefore, an object of the present invention is to provide a composition in which persimmon leaf extract and vitamin B are captured using a fermented emulsifier that forms reverse micelles capable of stably delivering an active substance, and a method for preparing the same.

이하, 본 발명의 구현예에 따른 역미셀을 형성하는 발효유화제를 이용한 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물과 그 제조방법에 대하여 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the persimmon leaf extract and vitamin B collection composition using the fermented emulsifier for forming reverse micelles according to an embodiment of the present invention and a method for preparing the same will be described in more detail.

본 발명에 따르면 감잎 추출물 및 비타민 B와 같은 수상의 수용성 물질과 유상의 역미셀 발효유화제 오일을 혼합하여 수용성 물질을 포집하는 투명한 성상의 역미셀 용액을 제공할 수 있으며, 간략한 제조과정을 예시로 도 1에 도시하였다.According to the present invention, it is possible to provide a transparent reverse micelle solution that collects water-soluble substances by mixing aqueous phase water-soluble substances such as persimmon leaf extract and vitamin B with oily reverse micellar fermented emulsifier oil. 1 is shown.

구체적으로 본 발명은,Specifically, the present invention

Candida bombicola UA-06(기탁번호: KCTC13855BP, 한국생명공학연구원, 2019.06.04.) 미생물을 활성화시키는 종균배양 단계; Candida bombicola UA-06 (Accession No.: KCTC13855BP, Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 2019.06.04.) A seed culture step to activate microorganisms;

상기 종균배양된 미생물 및 식물성 오일을 발효시켜 역미셀을 형성하는 발효유화제를 제조하는 발효 단계;a fermentation step of fermenting the seed cultured microorganism and vegetable oil to prepare a fermented emulsifier to form reverse micelles;

상기 발효유화제, 감잎 추출물 및 비타민 B를 혼합하는 단계; 및mixing the fermented emulsifier, persimmon leaf extract and vitamin B; and

정제 단계를 포함하며,a purification step;

상기 종균배양 단계에서 사용하는 배지가 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3 및 MgSO4를 포함하고,The medium used in the seed culture step includes yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 and MgSO 4 ,

상기 발효 단계에서 사용하는 배지가 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3, MgSO4, 글루쿠로노락톤(glucuronolactone) 및 식물성 오일을 포함하고,The medium used in the fermentation step is yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 , MgSO 4 , glucuronolactone and vegetable oil. including,

상기 정제 단계가 발효물을 정치시켜 상층과 하층을 분리하여 하층을 폐기하고, MgSO4를 첨가하여 교반 후 원심분리하여 미생물 및 수분을 제거하는 단계 및, 친화크로마토그라피 컬럼에 규산마그네슘을 충진제로 사용하여 지방산 및 불순물이 제거된 오일을 회수하는 단계를 포함하는 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법을 제공한다.In the purification step, the fermented product is allowed to stand to separate the upper and lower layers, the lower layer is discarded, and MgSO 4 is added and stirred to remove microorganisms and moisture by centrifugation, and magnesium silicate is used as a filler in the affinity chromatography column. To provide a method for producing a persimmon leaf extract and vitamin B capture composition comprising the step of recovering the oil from which fatty acids and impurities have been removed.

일구현예에 따르면 상기 감잎 추출물은,According to one embodiment, the persimmon leaf extract,

건조되기 전의 감잎을 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 알코올 또는 에틸 아세테이트로 4 내지 100℃에서 3시간 내지 20일 동안 추출하여 감잎 추출물을 제조하는 단계;Preparing a persimmon leaf extract by extracting persimmon leaves before drying at 4 to 100° C. for 3 hours to 20 days with anhydrous or hydrous alcohol or ethyl acetate having 1 to 3 carbon atoms;

상기 감잎 추출물을 제조하는 단계의 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거하는 단계; 및removing the diethyl ether soluble component before or after the step of preparing the persimmon leaf extract; and

상기 감잎 추출물을 농축하는 단계를 포함하는 방법으로 제조할 수 있다.It can be prepared by a method comprising the step of concentrating the persimmon leaf extract.

구체적으로 예를 들면, 건조 전의 감잎을 4 내지 30℃에서 3 내지 20일간 추출할 수 있고, 또 다른 예를 들면 50 내지 100℃에서 3 내지 24시간 동안 추출할 수 있다.Specifically, for example, persimmon leaves before drying may be extracted at 4 to 30° C. for 3 to 20 days, and for another example, may be extracted at 50 to 100° C. for 3 to 24 hours.

일구현예에 따르면 본 발명에 따른 조성물 총 중량에 대하여, 상기 감잎 추출물은 0.05 내지 10중량%, 예를 들면 0.1 내지 2중량%, 상기 비타민 B는 0.5 내지 10중량%, 예를 들면 1 내지 5중량% 및 상기 발효유화제는 55 내지 90중량%, 예를 들면 60 내지 80중량%의 함량으로 포함할 수 있다.According to one embodiment, based on the total weight of the composition according to the present invention, the persimmon leaf extract is 0.05 to 10% by weight, for example, 0.1 to 2% by weight, the vitamin B is 0.5 to 10% by weight, for example 1 to 5 Weight% and the fermentation emulsifier may be included in an amount of 55 to 90% by weight, for example, 60 to 80% by weight.

일구현예에 따르면, 상기 비타민 B는 비타민 B군을 의미할 수 있고, 예를 들면, 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B3, 비타민 B5, 비타민 B6, 비타민 B9 및 비타민 B12로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 포함할 수 있다.According to one embodiment, the vitamin B may refer to vitamin B group, for example, one selected from the group consisting of vitamin B1, vitamin B2, vitamin B3, vitamin B5, vitamin B6, vitamin B9 and vitamin B12. may include more than one.

일구현예에 따르면, 상기 종균배양 단계에서 사용하는 배지는 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3 및 MgSO4를 포함할 수 있다. 또한, 추가로 물을 포함할 수 있고, 구체적으로는 정제수가 바람직하며, 예를 들어 이온교환수지를 이용한 정제수를 사용할 수 있다.According to one embodiment, the medium used in the seed culture step may include yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 and MgSO 4 . In addition, it may further contain water, specifically, purified water is preferable, for example, purified water using an ion exchange resin may be used.

일구현예에 따르면, 상기 발효 단계에서 사용하는 배지는 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3, MgSO4, 글루쿠로노락톤(glucuronolactone) 및 식물성 오일을 포함할 수 있다. 또한, 추가로 물을 포함할 수 있고, 구체적으로는 정제수가 바람직하며, 예를 들어 이온교환수지를 이용한 정제수를 사용할 수 있다.According to one embodiment, the medium used in the fermentation step is yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 , MgSO 4 , glucuronolactone ( glucuronolactone) and vegetable oils. In addition, it may further contain water, specifically, purified water is preferable, for example, purified water using an ion exchange resin may be used.

일구현예에 따르면, 상기 종균배양 단계는 15 내지 30℃, 100 내지 500rpm, 0.5 내지 2vvm, 호기 조건으로 진행될 수 있다.According to one embodiment, the seed culture step may be performed under 15 to 30 ℃, 100 to 500 rpm, 0.5 to 2vvm, aerobic conditions.

일구현예에 따르면, 상기 발효 단계는 20 내지 35℃의 온도 및 50 내지 200rpm으로 진행될 수 있다.According to one embodiment, the fermentation step may be performed at a temperature of 20 to 35 °C and 50 to 200 rpm.

일구현예에 따르면, 상기 식물성 오일은 해바라기씨, 포도씨, 카놀라(canola), 쌀눈, 올리브(olive), 대두, 아르간(argan), 현미, 들깨, 참깨, 아몬드(almond), 땅콩, 옥수수, 홍삼, 아보카도(avocado), 마카다미아(macadamia), 코코넛(coconut), 로즈힙(rose hip), 시어나무(shea tree)열매, 기름야자(african oil palm), 베르가모트(bergamot)열매, 비타민나무씨, 동백씨, 홍화씨, 살구씨, 양귀비씨, 달맞이꽃씨, 피마자씨, 녹차씨, 메도우폼씨(meadowfoam seed), 아마씨 및 햄프씨(hemp seed) 등으로 이루어지는 군으로부터 추출된 것을 사용할 수 있다.According to one embodiment, the vegetable oil is sunflower seed, grape seed, canola (canola), rice germ, olive (olive), soybean, argan (argan), brown rice, perilla, sesame, almond (almond), peanut, corn, red ginseng , avocado, macadamia, coconut, rose hip, shea tree fruit, african oil palm, bergamot fruit, vitamin tree seed, camellia seed , safflower seeds, apricot seeds, poppy seeds, evening primrose seeds, castor seeds, green tea seeds, meadowfoam seeds (meadowfoam seeds), flax seeds and hemp seeds (hemp seeds) and the like can be used extracted from the group consisting of.

일구현예에 따르면, 상기 발효 단계 후 정제 단계를 더 포함할 수 있다. 구체적으로, 수분 및 미생물의 제거를 위하여, 오일발효 후 발효물을 정치시켜 상층에 위치하는 소수성 부분(발효물)과 하층에 위치하는 친수성 부분(배지 및 불순물)을 분리하여 하층을 폐기하고, MgSO4를 첨가하여 교반한 후 원심분리기를 이용하여 잔존 불순물 및 미생물을 제거할 수 있다.According to one embodiment, it may further include a purification step after the fermentation step. Specifically, for the removal of moisture and microorganisms, the fermented product is left standing after oil fermentation to separate the hydrophobic portion (fermented product) located in the upper layer and the hydrophilic portion (medium and impurities) located in the lower layer to discard the lower layer, and MgSO 4 can be added and stirred to remove residual impurities and microorganisms using a centrifuge.

본 발명에 따른 감잎 추출물 포집 조성물은 역미셀(reverse micelle)의 형태를 형성할 수 있다. 역미셀은 친수성 용해물 존재 하에 극성기가 안쪽으로 배향되고, 소수기가 바깥쪽 비극성 용매측으로 배향되며, 거의 구상의 배향성 집단을 이루는 분자 집단을 의미한다. 이러한 역미셀 구조 내에 감잎 추출물이 포집된 형태를 형성함으로써 감잎 추출물의 유효 물질을 더욱 효과적으로 피부의 지질층 내로 통과시킬 수 있다.The composition for collecting persimmon leaf extract according to the present invention may form a form of reverse micelles. Reverse micelles refer to a group of molecules in which polar groups are oriented inward and hydrophobic groups are oriented toward the outside non-polar solvent in the presence of a hydrophilic lysate, and form a nearly spherical orientation group. By forming a form in which the persimmon leaf extract is captured in the reverse micelle structure, the active substance of the persimmon leaf extract can more effectively pass into the lipid layer of the skin.

본 발명의 다른 구현예에 따르면, 조성물 총 중량에 대하여, 상기와 같은 감잎 추출물 포집 조성물을 0.0001 내지 30%, 예를 들어 1 내지 30% 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.According to another embodiment of the present invention, based on the total weight of the composition, there is provided a cosmetic composition comprising 0.0001 to 30%, for example, 1 to 30% of the persimmon leaf extract collection composition as described above.

일구현예에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되며, 피부학적으로 적용이 가능한 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 피부학적으로 적용이 가능하다는 것은 적용 대상에게 비교적 비독성이고 무해한 유효작용을 할 수 있는 조성물로서, 피부에 적용할 수 있는 외용제를 포함할 수 있으며, 상기 조성물로부터 기인하는 부작용이 유효 성분의 효능을 저하시키기 않고, 적용 대상에 심각한 자극을 유발하지 않으면서 유효성분들의 활성 및 물성을 손상시키지 않는다는 것을 의미할 수 있다. 본 발명의 피부학적으로 적용이 가능한 화장료 조성물로는 예를 들어, 용액, 현탁액, 유액, 유탁액, 페이스트, 겔, 팩, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 및 모발 화장료 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 구체적으로, 상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 겔, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 엠플, 영양에센스, 팩, 비누, 헤어샴푸, 풋샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형 등으로 제조될 수 있다.According to one embodiment, the cosmetic composition of the present invention is conventionally prepared in the art, and may be prepared in any formulation that can be applied dermatologically. Dermatologically applicable is a composition that can have a relatively non-toxic and harmless effective action to the subject, and may include an external application that can be applied to the skin, and the side effects resulting from the composition can affect the efficacy of the active ingredient. It may mean that the activity and physical properties of the active ingredients are not impaired while not lowering the application target and causing serious irritation. The dermatologically applicable cosmetic composition of the present invention includes, for example, a solution, suspension, emulsion, emulsion, paste, gel, pack, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, and powder foundation. , emulsion foundation, wax foundation, spray and hair cosmetics, etc., but is not limited thereto. Specifically, the cosmetic composition is a skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, gel, milk lotion, moisture lotion, nourishing lotion, massage cream, nourishing cream, moisture cream, hand cream, foundation, essence, ampoule, nutrition It can be prepared in the form of essence, pack, soap, hair shampoo, foot shampoo, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion and body cleanser.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail so that those of ordinary skill in the art can easily carry out the present invention. However, the present invention may be embodied in many different forms and is not limited to the embodiments described herein.

제조예 1: Candida bombicola UA 06(기탁번호: KCTC13855BP, 한국생명공학연구원, 2019.06.04.) 균체 수득Preparation Example 1: Candida bombicola UA 06 (Accession number: KCTC13855BP, Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 2019.06.04.) Cells obtained

Candida bombicola UA 06을 이스트 추출물(yeast extract) 10 g/L, 글리세린(glycerin) 20 g/L, K2HPO4 25 g/L, KH2PO4 7 g/L, NH4NO3 3 g/L, MgSO4 2 g/L 및 증류수 933 g/L로 구성된 배지에 접종하여 20℃, 300rpm, 1NL/min(1vvm)의 호기적인 조건에서 배양을 진행하였다. 배양은 분광광도계(Epoch2, BioTek)로 600nm에서 흡광도를 측정하여 균의 지수생장 종말점인 60시간 시점에서 종료하였다. 배양액을 원심분리(16,000g, 30분)하여 균체를 침전시키고 인산 버퍼로 수 회 세척하여 균체를 수득하였다. Candida bombicola UA 06 with yeast extract 10 g/L, glycerin 20 g/L, K 2 HPO 4 25 g/L, KH 2 PO 4 7 g/L, NH 4 NO 3 3 g/ L, MgSO 4 Inoculated in a medium consisting of 2 g / L and distilled water 933 g / L 20 ℃, 300 rpm, and cultured under aerobic conditions of 1NL / min (1vvm). The culture was terminated at 60 hours, the end point of exponential growth, by measuring absorbance at 600 nm with a spectrophotometer (Epoch2, BioTek). The culture medium was centrifuged (16,000 g, 30 minutes) to precipitate the cells and washed several times with a phosphate buffer to obtain the cells.

제조예 2: 감잎 추출물Preparation Example 2: Persimmon Leaf Extract

건조하지 않은 감잎 100g를 잘게 세절하여 70% 에틸알코올 1L에 넣고 상온에서 1주일간 침적시켜 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 12.08g을 수득하였다.100 g of undried persimmon leaves were finely chopped, put in 1 L of 70% ethyl alcohol, immersed at room temperature for 1 week, extracted, filtered with 300 mesh filter paper, left for 1 week, and the precipitate was filtered twice with Edventec No. 7 filter paper. Then, it was completely concentrated at 50° C. using a vacuum concentrator to obtain a dry weight of 12.08 g.

실시예 1 내지 8: 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물Examples 1 to 8: Persimmon leaf extract and vitamin B capture composition

오일 발효를 위하여 이스트 추출물(yeast extract) 1.0 g/L, 글리세린(glycerin) 20 g/L, K2HPO4 25 g/L, KH2PO4 7 g/L, NH4NO3 3 g/L, MgSO4 2 g/L, 글루쿠로노락톤(glucuronolactone) 100 g/L, 식물성오일 500 g/L 및 증류수 333 g/L 로 구성된 발효액을 5 L 발효조에 25℃, 100rpm 조건으로 발효액을 혼합 제조하였다. 상기 발효액의 온도가 25℃일 때, 제조예1에 따른 균체 2.5 g/L를 투입하고, 3일 동안 발효를 진행하였다. 식물성 오일로는 고올레인산 해바라기씨유를 사용하였으나, 이 외에, 포도씨, 카놀라, 쌀눈, 올리브, 대두, 아르간, 현미, 들깨, 참깨, 아몬드, 땅콩, 옥수수, 홍삼, 아보카도, 마카다미아, 코코넛, 로즈힙, 비타민나무씨, 시어나무열매, 기름야자, 베르가모트열매, 동백씨, 홍화씨, 살구씨, 양귀비씨, 달맞이꽃씨, 호호바씨, 피마자씨, 녹차씨, 메도우폼씨, 아마씨, 햄프씨 등의 식용 가능 또는 인체 친화적인 오일이라면 본 발명의 범위에 포함될 수 있다.For oil fermentation, yeast extract 1.0 g/L, glycerin 20 g/L, K 2 HPO 4 25 g/L, KH 2 PO 4 7 g/L, NH 4 NO 3 3 g/L , MgSO 4 2 g/L, glucuronolactone 100 g/L, vegetable oil 500 g/L, and distilled water 333 g/L. In a 5 L fermenter, the fermentation broth is mixed at 25°C and 100rpm. prepared. When the temperature of the fermentation broth was 25° C., 2.5 g/L of the cells according to Preparation Example 1 was added, and fermentation was performed for 3 days. Sunflower seed oil with high oleic acid was used as vegetable oil, but in addition to grape seed, canola, rice bran, olive, soybean, argan, brown rice, perilla, sesame, almond, peanut, corn, red ginseng, avocado, macadamia, coconut, rosehip, Edible fruits such as vitamin tree seed, shea fruit, oil palm, bergamot fruit, camellia seed, safflower seed, apricot seed, poppy seed, evening primrose seed, jojoba seed, castor seed, green tea seed, meadowfoam seed, flax seed, hemp seed, etc. Any human-friendly oil may be included in the scope of the present invention.

발효 3일 후, 발효물의 잔존하는 효소활성을 90℃ 고온으로 활성 상실시킨 후, 1N HCl로 pH를 4 내지 5로 조정하고, 발효물을 6 내지 12시간 정치하여 수층(미생물 및 배지)과 유층(발효유화물)을 분리하여 수층을 제거하였다. 발효유화물에 남아있는 수분을 제거하기 위하여 MgSO4를 20 g/L 첨가하고, 50℃, 300rpm 조건으로 2시간 교반하여 원심분리 후 투명한 유층(발효유화물)을 수득하였다. 또한, 상기 발효유화물의 지방산 및 불순물을 규산마그네슘이 충진된 컬럼으로 정제 후, 잔존하는 작은 입자의 MgSO4를 완전히 제거하기 위하여 0.45 ㎛ 필터로 감압여과시켜 발효유화제를 수득하였다.After 3 days of fermentation, the remaining enzyme activity of the fermented product is lost at a high temperature of 90° C., the pH is adjusted to 4 to 5 with 1N HCl, and the fermented product is allowed to stand for 6 to 12 hours to form an aqueous layer (microorganisms and medium) and an oil layer. (fermented emulsion) was separated and the aqueous layer was removed. To remove the moisture remaining in the fermented emulsion , 20 g/L of MgSO 4 was added, and the mixture was stirred at 50° C. and 300 rpm for 2 hours to obtain a transparent oil layer (fermented emulsion) after centrifugation. In addition, after purification of the fatty acids and impurities of the fermented emulsion with a column filled with magnesium silicate, the remaining small particles of MgSO 4 were filtered under reduced pressure through a 0.45 μm filter to completely remove the remaining small particles, thereby obtaining a fermented emulsifier.

표 1과 같은 조성으로 감잎 추출물 및 비타민B 복합물 포집 조성물을 제조하였으며, 감잎 추출물은 제조예 2에 따른 것을 사용하였다. 각 구성의 함량 단위는 중량%이다.A composition for collecting persimmon leaf extract and vitamin B complex was prepared with the composition shown in Table 1, and the persimmon leaf extract according to Preparation Example 2 was used. The content unit of each composition is weight %.

구체적으로, 표 1의 1번 내지 3번 원료를 순차적으로 투입 및 혼합하였다. 그리고 4번 원료는 50℃까지 교반하면서 승온시켰다. 1내지 3번 원료를 4번 원료 용기에 교반하면서 투입하였다. 교반속도는 500 ~ 1000 rpm, 1시간 동안 포집시켰다. 그 후, 포집시킨 조성물을 25℃까지 교반하면서 냉각시켰다. 냉각시킨 조성물의 투명도와 장기적인 안정도를 관찰하였다. 단, 감잎추출물과 수용성비타민 B군의 조합물은 정제수에 각각 희석하여 사용하였다. 비타민B군 조합물은 B1 (1.0 %), B2 (0.01 %), B3 (5.0 %), B5(5.0 %), B6 (2.0 %), B9 (2.0 %) 및 B12 (0.01 %)로 구성하였다.Specifically, the raw materials No. 1 to No. 3 in Table 1 were sequentially added and mixed. And the 4th raw material was heated while stirring to 50 ℃. The raw materials No. 1 to No. 3 were put into the No. 4 material container while stirring. The stirring speed was 500 ~ 1000 rpm, and collected for 1 hour. Thereafter, the collected composition was cooled while stirring to 25°C. The transparency and long-term stability of the cooled composition were observed. However, the combination of persimmon leaf extract and water-soluble vitamin B group was used after each dilution in purified water. The vitamin B group combination consisted of B1 (1.0 %), B2 (0.01 %), B3 (5.0 %), B5 (5.0 %), B6 (2.0 %), B9 (2.0 %) and B12 (0.01 %). .

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실시예 9 및 비교예 1: 에센스 제조Example 9 and Comparative Example 1: Preparation of Essence

하기 표 2의 조성에 따라 에센스를 제조하였다. 구체적으로, 하기 표 2의 A상과 B상의 원료를 순차적으로 투입하고, 교반하여 70 ℃로 가열 및 용해시켰다. C상을 용해시킨 후 A상과 B상을 투입하고, 혼합하였다. D상은 A내지 C상이 혼합된 용기에 투입하여, 호모믹서로 3500 rpm으로 5분간 혼합하였다. 그 후 E상을 투입하여 균일하게 용해 및 혼합시키고, 탈포 및 냉각시켰다. 단, 비타민 B군 조합물은 B1 (1.0 %), B2 (0.01 %), B3 (5.0 %), B5(5.0 %), B6 (2.0 %), B9 (2.0 %) 및 B12 (0.01 %)로 구성하였다.Essence was prepared according to the composition of Table 2 below. Specifically, the raw materials of phase A and phase B of Table 2 were sequentially added, stirred, and heated and dissolved at 70°C. After dissolving phase C, phase A and phase B were added and mixed. Phase D was put into a container in which phases A to C were mixed, and mixed with a homomixer at 3500 rpm for 5 minutes. After that, phase E was added, dissolved and mixed uniformly, and defoamed and cooled. However, the vitamin B group combination is B1 (1.0%), B2 (0.01%), B3 (5.0%), B5 (5.0%), B6 (2.0%), B9 (2.0%) and B12 (0.01%). composed.

Figure 112019066496960-pat00002
Figure 112019066496960-pat00002

실험예 1: 감잎 추출물 및 비타민 B를 포집시킨 조성물의 봉입율 확인Experimental Example 1: Confirmation of the encapsulation rate of the composition encapsulating persimmon leaf extract and vitamin B

표 1의 조성물을 냉각시켰을 때 투명도를 확인하여, 외부에는 오일상, 내부에는 수용성물질이 안정하게 포집된 여부를 확인하고자 하였다. 그 결과는 표 3에 정리하였으며, 실시예 6 내지 8은 냉각 후에도 투명하게 포집된 형태를 관찰할 수 있고, 도 2의 실시예 7 사진을 보면, 나노입자 크기를 가지는 것을 성상의 투명함으로 확인할 수 있다.When the composition of Table 1 was cooled, the transparency was checked, and it was attempted to confirm whether the oil phase on the outside and the water-soluble substance on the inside were stably collected. The results are summarized in Table 3, and in Examples 6 to 8, the transparently captured form can be observed even after cooling, and looking at the photo of Example 7 of FIG. 2, it can be confirmed that having a nanoparticle size is transparent in nature. have.

Figure 112019066496960-pat00003
Figure 112019066496960-pat00003

실험예 2: 장기 보관 온도별 안정성 평가Experimental Example 2: Stability evaluation by long-term storage temperature

보관 온도 조건에 따른 안정성을 평가하기 위하여, 실시예 6내지 8에 따른 조성물에 대하여 상온, 25℃, 저온(-5℃), 고온(50℃), 순환(-5 내지 40℃/12 hr) 조건에서 3개월 동안 보관한 뒤 관찰하였다. 평가 결과는 표 4에 나타내었다.In order to evaluate the stability according to the storage temperature conditions, room temperature, 25 ℃, low temperature (-5 ℃), high temperature (50 ℃), circulation (-5 to 40 ℃ / 12 hr) for the compositions according to Examples 6 to 8 It was observed after storage for 3 months in the condition. The evaluation results are shown in Table 4.

Figure 112019066496960-pat00004
Figure 112019066496960-pat00004

표 4에 나타난 바와 같이, 실시예 7 및 8은 보관조건에 따른 투명도, 색상, 침전에 따른 안정도가 우수한 것을 확인할 수 있다.As shown in Table 4, it can be confirmed that Examples 7 and 8 were excellent in transparency, color, and stability according to precipitation according to storage conditions.

실험예 3: 실시예 9 및 비교에 1에 따라 제조된 조성물의 미백효과 비교Experimental Example 3: Comparison of the whitening effect of the compositions prepared according to Example 9 and Comparative 1

상기 실시예 9 및 비교에 1의 조성물의 미백효과를 조사하기 위하여 인체피부에 대한 실험을 진행하였다. 단, 활성물질인 감잎 추출물 및 비타민 B 조합물은 실시예 9와 비교예1에서 동일한 농도의 것을 사용하였다.In order to investigate the whitening effect of the composition of Example 9 and Comparative 1, an experiment was conducted on human skin. However, the active substance, persimmon leaf extract and vitamin B combination was used in Example 9 and Comparative Example 1 at the same concentration.

구체적으로, 피부톤이 어둡거나, 색소침착, 기미 및 주근깨가 있는 건강한 성인남녀 10명씩 시험군과 비교군으로 나뉜 후, 시험군은 실시예 9를, 비교군은 비교에 1을 각각 1일 아침 저녁으로 2회 4주간 도포하였다. 피부상태의 측정은 분광색차계를 이용하여 측정하였다. 피부색 밝기변화는 △L값을 측정하여 피부미백 및 피부톤 개선을 수치화하였다. 그 결과는 표 5에 나타내었으며, 각 시험군의 값을 평균값으로 평가하였다.Specifically, after 10 healthy adult men and women with dark skin tone, pigmentation, melasma and freckles were divided into a test group and a control group, the test group assigned Example 9 and the comparative group set 1 to the morning and evening of the first day, respectively. was applied twice for 4 weeks. The skin condition was measured using a spectrophotometer. Changes in skin color brightness were quantified by measuring the ΔL value to improve skin whitening and skin tone. The results are shown in Table 5, and the values of each test group were evaluated as average values.

Figure 112019066496960-pat00005
Figure 112019066496960-pat00005

표 5에 나타난 바와 같이, 실시예 9와 비교예 1을 인체 안면피부에 적용하였을 때 효능학적으로 피부톤 및 미백효과를 비교하였다. 실시예 9는 실시예 7을 제형에 적용한 것으로 활성물질을 역미셀로 포집시켜놓은 것을 사용하였고, 비교예 1은 직접적으로 제형에 투입한 제형이다. 그 결과, 비교예 1보다 실시예 9의 제형이 피부의 미백효과 및 피부톤 개선에 우수한 효과를 나타내었음을 확인할 수 있었다. 따라서, 화장품 제형에 활성물질을 역미셀을 이용하여 제형에 적용시키는 것이 피부의 친화력 및 흡수력, 침투력이 뛰어나 동일한 농도를 사용했을 때 더 우수한 결과를 나타낼 수 있다.As shown in Table 5, when Example 9 and Comparative Example 1 were applied to human facial skin, skin tone and whitening effects were efficaciously compared. In Example 9, Example 7 was applied to the formulation, and the active material was collected by reverse micelles, and Comparative Example 1 is a formulation directly added to the formulation. As a result, it was confirmed that the formulation of Example 9 showed an excellent effect on skin whitening effect and skin tone improvement than Comparative Example 1. Therefore, applying the active material to the cosmetic formulation using reverse micelles has excellent skin affinity, absorption, and penetration, so that better results can be obtained when the same concentration is used.

상기와 같은 결과로부터 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명은 역미셀을 형성하는 발효유화제(U-able® HBG)를 이용하여 감초추출물 및 비타민 B군을 오일상으로 포집시킴으로써 피부에 흡수 및 침투시키는 한계점을 극복하여 피부 지질층의 흡수력, 칩투력 또는 투과력 및 이에 따른 효능을 극대화시킬 수 있다. 또한, 안정적인 조성물을 제공할 수 있다.As can be seen from the above results, the present invention uses a fermented emulsifier that forms reverse micelles (U-able® HBG) to capture licorice extract and vitamin B group in an oily phase, thereby absorbing and penetrating into the skin. It is possible to maximize the absorption power, chip penetration or penetrating power of the skin lipid layer and thus the efficacy thereof. In addition, it is possible to provide a stable composition.

이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다. 또한, 본 발명에 개시된 실시 예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시 예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.The above description is merely illustrative of the technical idea of the present invention, and various modifications and variations are possible by those skilled in the art to which the present invention pertains without departing from the essential characteristics of the present invention. In addition, the embodiments disclosed in the present invention are not intended to limit the technical spirit of the present invention, but to explain, and the scope of the technical spirit of the present invention is not limited by these embodiments. The protection scope of the present invention should be construed by the following claims, and all technical ideas within the scope equivalent thereto should be construed as being included in the scope of the present invention.

Claims (11)

Candida bombicola UA-06(기탁번호: KCTC13855BP, 한국생명공학연구원, 2019.06.04.) 미생물을 활성화시키는 종균배양 단계;
상기 종균배양된 미생물 및 식물성 오일을 발효시켜 역미셀을 형성하는 발효유화제를 제조하는 발효 단계;
상기 발효유화제, 감잎 추출물 및 비타민 B를 혼합하는 단계; 및
정제 단계를 포함하며,
상기 종균배양 단계에서 사용하는 배지가 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3 및 MgSO4를 포함하고,
상기 종균배양 단계가 15 내지 30℃, 100 내지 500rpm, 0.5 내지 2vvm, 호기 조건으로 진행되고,
상기 발효 단계에서 사용하는 배지가 이스트 추출물(yeast extract), 글리세린(glycerin), K2HPO4, KH2PO4, NH4NO3, MgSO4, 글루쿠로노락톤(glucuronolactone) 및 식물성 오일을 포함하고,
상기 발효 단계가 20 내지 35℃의 온도 및 50 내지 200rpm의 혼합 조건으로 진행되고,
상기 정제 단계가 발효물을 정치시켜 상층과 하층을 분리하여 하층을 폐기하고, MgSO4를 첨가하여 교반 후 원심분리하여 미생물 및 수분을 제거하는 단계 및, 친화크로마토그라피 컬럼에 규산마그네슘을 충진제로 사용하여 지방산 및 불순물이 제거된 오일을 회수하는 단계를 포함하는 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법. Candida bombicola UA-06 (Accession No.: KCTC13855BP, Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 2019.06.04.) A seed culture step to activate microorganisms;
a fermentation step of fermenting the seed cultured microorganism and vegetable oil to prepare a fermented emulsifier to form reverse micelles;
mixing the fermented emulsifier, persimmon leaf extract and vitamin B; and
a purification step;
The medium used in the seed culture step includes yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 and MgSO 4 ,
The seed culture step is carried out at 15 to 30 ° C, 100 to 500 rpm, 0.5 to 2 vvm, aerobic conditions,
The medium used in the fermentation step is yeast extract, glycerin, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , NH 4 NO 3 , MgSO 4 , glucuronolactone and vegetable oil. including,
The fermentation step is carried out at a temperature of 20 to 35 ° C and mixing conditions of 50 to 200 rpm,
In the purification step, the fermented product is left standing to separate the upper layer and the lower layer, the lower layer is discarded, MgSO 4 is added, stirred and centrifuged to remove microorganisms and moisture, and magnesium silicate is used as a filler in the affinity chromatography column A method for producing a persimmon leaf extract and vitamin B capture composition comprising the step of recovering the oil from which fatty acids and impurities have been removed. 제1항에 있어서 상기 감잎 추출물이,
건조되기 전의 감잎을 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 알코올 또는 에틸 아세테이트로 4 내지 100℃에서 3시간 내지 20일 동안 추출하여 감잎 추출물을 제조하는 단계;
상기 감잎 추출물을 제조하는 단계의 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거하는 단계; 및
상기 감잎 추출물을 농축하는 단계를 포함하는 방법으로 제조되는 것인, 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법.The method of claim 1, wherein the persimmon leaf extract,
Preparing a persimmon leaf extract by extracting persimmon leaves before drying with anhydrous or hydrous alcohol or ethyl acetate having 1 to 3 carbon atoms at 4 to 100° C. for 3 hours to 20 days;
removing the diethyl ether soluble component before or after the step of preparing the persimmon leaf extract; and
A method for producing a persimmon leaf extract and a vitamin B collection composition, which is prepared by a method comprising the step of concentrating the persimmon leaf extract. 제1항에 있어서,
상기 비타민 B가 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B3, 비타민 B5, 비타민 B6, 비타민 B9 및 비타민 B12로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 포함하는 것인, 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법.According to claim 1,
Wherein the vitamin B comprises at least one selected from the group consisting of vitamin B1, vitamin B2, vitamin B3, vitamin B5, vitamin B6, vitamin B9, and vitamin B12. 제1항에 있어서 상기 조성물 총 중량에 대하여,
상기 감잎 추출물이 0.05 내지 10중량%, 상기 비타민 B가 0.5 내지 10중량% 및 상기 발효유화제가 55 내지 90중량% 함량으로 포함되는 것인, 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법.According to claim 1, with respect to the total weight of the composition,
The persimmon leaf extract is 0.05 to 10% by weight, the vitamin B is 0.5 to 10% by weight, and 55 to 90% by weight of the fermented emulsifier, a method for producing a persimmon leaf extract and a vitamin B capturing composition. 삭제delete 제1항에 있어서,
상기 종균발효 단계가 균의 지수생장 종말점 시점에서 종료하는 것인, 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법.According to claim 1,
The method for producing a persimmon leaf extract and vitamin B capture composition, wherein the seed fermentation step is terminated at the end point of exponential growth of the bacteria. 제1항에 있어서,
상기 식물성 오일이 해바라기씨, 포도씨, 카놀라, 쌀눈, 올리브, 대두, 아르간, 현미, 들깨, 참깨, 아몬드, 땅콩, 옥수수, 홍삼, 아보카도, 마카다미아, 코코넛, 로즈힙, 비타민나무씨, 시어나무열매, 기름야자, 베르가모트열매, 동백씨, 홍화씨, 살구씨, 양귀비씨, 달맞이꽃씨, 피마자씨, 녹차씨, 메도우폼씨, 아마씨 및 햄프씨로 이루어지는 군으로부터 추출된 것인, 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물의 제조방법.According to claim 1,
The vegetable oil is sunflower seed, grape seed, canola, rice germ, olive, soybean, argan, brown rice, perilla, sesame, almond, peanut, corn, red ginseng, avocado, macadamia, coconut, rosehip, vitamin tree seed, shea fruit, oil Palm, bergamot fruit, camellia seed, safflower seed, apricot seed, poppy seed, evening primrose seed, castor seed, green tea seed, meadowfoam seed, flax seed and hemp seed, which is extracted from the group consisting of, persimmon leaf extract and vitamin B capture composition manufacturing method. 제1항 내지 제4항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항에 따른 방법으로 제조되는 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물.A persimmon leaf extract and vitamin B-capturing composition prepared by the method according to any one of claims 1 to 4, 6 and 7. 제8항에 있어서,
역미셀 내에 감잎 추출물 및 비타민 B가 포집된 형태를 형성하는 것인, 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물.9. The method of claim 8,
The persimmon leaf extract and vitamin B capture composition, which forms a form in which the persimmon leaf extract and vitamin B are captured in the reverse micelles. 제9항에 있어서,
상기 비타민 B가 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B3, 비타민 B5, 비타민 B6, 비타민 B9 및 비타민 B12로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 포함하는 것인, 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물.10. The method of claim 9,
Wherein the vitamin B comprises at least one selected from the group consisting of vitamin B1, vitamin B2, vitamin B3, vitamin B5, vitamin B6, vitamin B9, and vitamin B12, persimmon leaf extract and vitamin B collection composition. 제8항에 따른 감잎 추출물 및 비타민 B 포집 조성물을 포함하는 화장료 조성물.A cosmetic composition comprising the persimmon leaf extract according to claim 8 and the vitamin B capture composition.
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