KR102276941B1 - 류마티스 관절염 치료용 펩티드 및 그의 용도 - Google Patents
류마티스 관절염 치료용 펩티드 및 그의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102276941B1 KR102276941B1 KR1020190078953A KR20190078953A KR102276941B1 KR 102276941 B1 KR102276941 B1 KR 102276941B1 KR 1020190078953 A KR1020190078953 A KR 1020190078953A KR 20190078953 A KR20190078953 A KR 20190078953A KR 102276941 B1 KR102276941 B1 KR 102276941B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- group
- seq
- rheumatoid arthritis
- peptide
- apob100
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 74
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 title claims abstract description 65
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 40
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 18
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 16
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000036541 health Effects 0.000 claims abstract description 12
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract 4
- 102100038910 Alpha-enolase Human genes 0.000 claims description 43
- 101000882335 Homo sapiens Alpha-enolase Proteins 0.000 claims description 38
- VLMZMRDOMOGGFA-WDBKCZKBSA-N festuclavine Chemical compound C1=CC([C@H]2C[C@H](CN(C)[C@@H]2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 VLMZMRDOMOGGFA-WDBKCZKBSA-N 0.000 claims description 38
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 22
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 22
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 21
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 21
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 18
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 18
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 17
- 108010008150 Apolipoprotein B-100 Proteins 0.000 claims description 13
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 12
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 11
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 7
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 6
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 6
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 claims description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 238000002875 fluorescence polarization Methods 0.000 claims description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 4
- 238000002821 scintillation proximity assay Methods 0.000 claims description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 4
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims description 3
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims description 3
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 3
- 125000001421 myristyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 238000010379 pull-down assay Methods 0.000 claims description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 claims description 2
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 claims description 2
- 238000011490 co-immunoprecipitation assay Methods 0.000 claims description 2
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 claims description 2
- 238000012482 interaction analysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000002714 localization assay Methods 0.000 claims description 2
- 102000006991 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 claims 4
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical group C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 claims 2
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 claims 2
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 claims 2
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 claims 2
- 238000010396 two-hybrid screening Methods 0.000 claims 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 18
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 15
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 13
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 12
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 10
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 9
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 101001051093 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 8
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 8
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 7
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 5
- 238000011764 rheumatoid arthritis animal model Methods 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 4
- 101150102415 Apob gene Proteins 0.000 description 3
- 206010051728 Bone erosion Diseases 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- -1 that is Substances 0.000 description 3
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 2
- 206010007710 Cartilage injury Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 206010052904 Musculoskeletal stiffness Diseases 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 2
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- 230000037456 inflammatory mechanism Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 2
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YAWVFJYLSIMLAY-UHFFFAOYSA-N 2-acetyloxybenzoic acid;2-[4-(2-methylpropyl)phenyl]propanoic acid Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O.CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 YAWVFJYLSIMLAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YIGLXQRFQVWFEY-NRPADANISA-N Ala-Gln-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O YIGLXQRFQVWFEY-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- FOHXUHGZZKETFI-JBDRJPRFSA-N Ala-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N FOHXUHGZZKETFI-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- CNQAFFMNJIQYGX-DRZSPHRISA-N Ala-Phe-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=CC=C1 CNQAFFMNJIQYGX-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N Asn-Lys-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTWOPSIUJBMNRI-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 101100512078 Caenorhabditis elegans lys-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100315624 Caenorhabditis elegans tyr-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- BNCKELUXXUYRNY-GUBZILKMSA-N Cys-Lys-Glu Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N BNCKELUXXUYRNY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- IWUFOVSLWADEJC-AVGNSLFASA-N Gln-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IWUFOVSLWADEJC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- FJWSJWACLMTDMI-WPRPVWTQSA-N Gly-Met-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O FJWSJWACLMTDMI-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 1
- ZSKJIISDJXJQPV-BZSNNMDCSA-N His-Leu-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 ZSKJIISDJXJQPV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 description 1
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- XXXXOVFBXRERQL-ULQDDVLXSA-N Leu-Pro-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XXXXOVFBXRERQL-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- ZQCVMVCVPFYXHZ-SRVKXCTJSA-N Lys-Asn-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN ZQCVMVCVPFYXHZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GRADYHMSAUIKPS-DCAQKATOSA-N Lys-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O GRADYHMSAUIKPS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101100068676 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) gln-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- OSBADCBXAMSPQD-YESZJQIVSA-N Phe-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N OSBADCBXAMSPQD-YESZJQIVSA-N 0.000 description 1
- XNMYNGDKJNOKHH-BZSNNMDCSA-N Phe-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O XNMYNGDKJNOKHH-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- PCJLFYBAQZQOFE-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PCJLFYBAQZQOFE-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- HKHCTNFKZXAMIF-KKUMJFAQSA-N Ser-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CC1=CC=C(O)C=C1 HKHCTNFKZXAMIF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- MGJLBZFUXUGMML-VOAKCMCISA-N Thr-Lys-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O MGJLBZFUXUGMML-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N Tyr-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- IZFVRRYRMQFVGX-NRPADANISA-N Val-Ala-Gln Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N IZFVRRYRMQFVGX-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- UQMPYVLTQCGRSK-IFFSRLJSSA-N Val-Thr-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O UQMPYVLTQCGRSK-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 231100000749 chronicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008316 intracellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 208000018937 joint inflammation Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000020763 muscle atrophy Effects 0.000 description 1
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000003498 protein array Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000008409 synovial inflammation Effects 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4713—Autoimmune diseases, e.g. Insulin-dependent diabetes mellitus, multiple sclerosis, rheumathoid arthritis, systemic lupus erythematosus; Autoantigens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/775—Apolipopeptides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/306—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on bone mass, e.g. osteoporosis prevention
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/775—Apolipopeptides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/988—Lyases (4.), e.g. aldolases, heparinase, enolases, fumarase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
- G01N2800/101—Diffuse connective tissue disease, e.g. Sjögren, Wegener's granulomatosis
- G01N2800/102—Arthritis; Rheumatoid arthritis, i.e. inflammation of peripheral joints
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Abstract
류마티스 관절염 치료용 펩티드 및 그의 용도에 관한 것으로서, 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 펩티드 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 펩티드를 포함하는 류마티스 관절염 치료용 약학적 조성물 또는 류마티스 관절염 개선용 건강 기능성 식품 조성물을 제공한다.
Description
류마티스 관절염 치료용 펩티드 및 그의 용도에 관한 것이다.
류마티스 관절염(Rheumatoid arthritis; RA)은 관절이나 힘줄의 활막에 비세균성 염증 반응이 만성적으로 나타나며, 이로 인해 활막이 증식되고 활액의 양이 증가하여 관절의 붓기와 동통을 초래하는 질환이다. 류마티스 관절염은 전신성 염증 반응으로 인체 내 많은 조직과 기관(피부, 혈관, 심장 폐, 근육)들에 영향을 주며, 특히, 관절에 비가역적인 증식성 활막염을 일으켜 관절연골의 파괴와 관절의 강직으로 진행된다. 류마티스 관절염의 원인은 아직 밝혀져 있지 않았으나, 자가면역반응이 이 질환의 만성화와 진행에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 보다 구체적으로, 염증성 매개체 또는 사이토카인의 국소적인 방출과 함께 T 세포가 중요한 역할을 하여, 관절을 파괴시키는 지속적인 자가면역반응이 일어난다. 주요 증상으로는 피로, 무력감, 동통 등이며, 관절염이 진행되면서 발열 및 체력 쇠약을 동반한다. 또한, 염증이 일어난 관절 부근에 근육경직과 근육위축이 나타나 관절의 움직임에 영향을 준다.
류마티스 관절염을 치료하기 위한 주요 목적은 관절의 통증과 염증을 감소시키고, 관절의 변형을 방지할 뿐만 아니라 보다 근본적으로는 관절염을 유발하는 세포내 작용 메카니즘을 밝히고 그 기작을 제어하는데 있다. 그러나 류마티스 관절염의 발병 원인 및 기전에 대한 많은 연구와 그 결과를 이용한 다양한 신약개 개발에도 불구하고(한국공개특허 10-2018-003659), 아직까지 완치에 이르게 하는 치료제는 개발되어 있지 않은 상태이다.
지금까지 알려진 관절염 치료제로는 비스테로이드성 항염증 약물(NSAIDs)(아스피린 이부프로펜), 메토트렉세이트(methotrexate), 레프루노미드(leflunomide), 설파살라진(sulfasalazine), 스테로이드(steroid) 호르몬제 등이 있다. 그러나 이러한 치료제는 장기간 복용시 부작용이 따르는 문제점이 있다. 이에 최근에는 염증 기전의 중심 역할을 하는 TNF(tumor necrosis factor)의 수용성 수용체 혹은 TNF 나 interleukin 6 receptor에 대한 항체, CD20에 대한 항체 등을 유전자 재조합 기술로 생산하고, 이를 치료제로 개발하여 질병의 경과를 호전시킨 바 있으나, 이 역시 중증 감염이나 결핵, 종양 등의 예상치 못했던 부작용이 발생하는 문제점이 있다.
이러한 기술적 배경 하에서, 류마티스 관절염과 관련된 핵심적인 염증 기전을 조절함으로서, 류마티스 관절염의 제반 증상인 염증, 골 및 연골조직의 침식 등을 완화시킬 수 있는 새로운 치료제의 발굴이 필요한 실정이다.
일 양상은 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 펩티드, 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공하는 것이다.
다른 양상은 상기 펩티드, 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 유효성분으로 포함하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
또 다른 양상은 상기 펩티드를 유효성분으로 포함하는 류마티스 관절염 예방 또는 개선용 건강 기능성 식품 조성물을 제공하는 것이다.
또 다른 양상은 (a) ENO1(α-enolase)를 포함하는 개체의 시료에, 아포지질단백질 B100(apoB100)을 후보 물질과 함께 접촉시키는 단계; 및 (b) 상기 후보 물질과 접촉된 시료에서 측정된 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준을 후보 물질이 투여되지 않은 대조군과 비교하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염 치료제를 스크리닝하는 방법을 제공하는 것이다.
본 출원의 다른 목적 및 이점은 첨부한 청구범위 및 도면과 함께 하기의 상세한 설명에 의해 보다 명확해질 것이다. 본 명세서에 기재되지 않은 내용은 본 출원의 기술 분야 또는 유사한 기술 분야 내 숙련된 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략한다.
일 양상은 류마티스 관절염 치료를 위한, 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어지는 펩티드, 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "펩티드(Peptide)”는 아마이드 결합 (또는 펩티드 결합)으로 연결된 2개 이상의 아미노산으로 이루어진 폴리머를 의미하며, 보다 구체적으로, 상기 펩티드는 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어질 수 있다. 본 발명자들은 생물학적으로 유효한 활성을 갖는 펩티드를 개발하고자 예의 노력한 결과, 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 규명하였다. 여기서, 상기 생물학적으로 유효한 활성은 (a) 염증성 사이토카인의 분비 억제 ; (b) 류마티스 관절염에 의한 염증반응 완화; (c) 류마티스 관절염에 의한 병리적 증상의 완화와 같은 특성으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 나타내는 것일 수 있다. 따라서, 상기 펩타이드는 류마티스 관절염의 예방 또는 치료를 위한 용도로 활용될 수 있다.
또한, 상기 펩티드는 보다 나은 화학적 안정성, 강화된 약리 특성(반감기, 흡수성, 역가, 효능 등), 변경된 특이성(예를 들어, 광범위한 생물학적 활성 스펙트럼), 감소된 항원성을 획득하기 위하여, 상기 펩티드의 N- 또는 C-말단에 보호기가 결합되어 있을 수 있다. 바람직하게, 상기 보호기는 아세틸기, 플루오레닐 메톡시 카르보닐기, 포르밀기, 팔미토일기, 미리스틸기, 스테아릴기 또는 폴리에틸렌글리콜(PEG)일 수 있으나, 펩티드의 개질, 특히 펩티드의 안정성 증진시킬 수 있는 성분이라면, 제한없이 포함할 수 있다. 일 구체예에 있어서, 상기 펩티드의 N-말단은 아세틸기(acetyl group), 플루오레닐메톡시카르보닐기(fluoreonylmethoxycarbonyl group), 포르밀기(formyl group), 팔미토일기(palmitoyl group), 미리스틸기(myristyl group), 스테아릴기(stearyl group) 및 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol; PEG)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 보호기와 결합될 수 있고; 및/또는 상기 펩티드의 C-말단은 아미노기(amino group, -NH2), 및 아자이드(azide, -NHNH2)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 보호기와 결합될 수 있다.
상기 용어, "안정성"은 생체 내 단백질 절단효소의 공격으로부터 본 발명의 펩티드를 보호하는 인 비보 안정성뿐만 아니라, 저장 안정성(예컨대, 상온 저장 안정성)도 의미하는 것일 수 있다.
아울러, 상기 펩티드는 표적화 서열, 태그(tag), 표지된 잔기를 위한 특정 목적으로 제조된 아미노산 서열도 추가적으로 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "폴리뉴클레오티드(Polynucleotide)”는 뉴클레오티드가 결합된 중합체로서, 유전 정보를 전달하는 역할하는 분자를 지칭한다. 상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 코딩하며, 상기 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열과 각각 약 70% 이상, 약 75% 이상, 약 80% 이상, 약 85%이상, 약 90% 이상, 약 92% 이상, 약 95% 이상, 약 97% 이상, 약 98% 이상, 또는 약 99% 이상의 서열 상동성을 갖는 서열을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "상동성(Homology)"은 야생형 아미노산 서열 또는 폴리뉴클레오티드 서열과의 유사한 정도를 나타내기 위한 것으로서, 이러한 상동성의 비교는 당업계에서 널리 알려진 비교 프로그램을 이용하여 수행할 수 있으며, 2개 이상의 서열간 상동성을 백분율(%)로 계산할 수 있다.
상기 펩티드는 당해 분야에서 널리 공지된 다양한 방법으로 획득할 수 있다. 일례로서, 폴리뉴클레오티드 재조합과 단백질 발현 시스템을 이용하여 제조하거나 펩티드 합성과 같은 화학적 합성을 통하여 시험관 내에서 합성하는 방법, 및 무세포 단백질 합성법 등으로 제조될 수 있다(solid-phase synthesis techniques; Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. 85:2149-54(1963); Stewart, et al., Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd. ed., Pierce Chem. Co.: Rockford, 111(1984), US 등록특허 제5,516,891호).
다른 양상은 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어지는 펩티드, 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 유효성분으로 포함하는, 류마티스 관절염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 약학적 조성물에 있어서, 상기 "펩티드", 및 "폴리뉴클레오티드"등에 대해서는 상기한 바와 같다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "예방"은 일 양상에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 개체의 류마티스 관절염을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "치료"는 일 양상에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 개체의 류마티스 관절염에 대한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "개체"는 류마티스 관절염의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하며, 보다 구체적으로 인간 또는 비-인간인 영장류, 생쥐 (mouse), 개, 고양이, 말 및 소 등의 포유류를 의미할 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 펩티드는 말초 혈액 내 단핵구 세포 표면에 발현되어 있는 ENO1과 apoB100간의 결합을 저해함으로써, 염증성 사이토카인, 예를 들어, 혈액 내 IL-1β, IL-6, 및/또는 TNF-α의 분비량을 감소시키고, 이에 따라, 류마티스 관절염 치료 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
한편, 일 양상에 따른 펩티드 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 콜로이드 현탁액, 분말, 식염수, 지질, 리포좀, 미소구체(microspheres), 또는 나노 구형입자와 같은 약학적으로 허용될 수 있는 담체에 운반될 수 있다. 이들은 운반 수단과 복합체를 형성하거나 관련될 수 있고, 지질, 리포좀, 미세입자, 금, 나노입자, 폴리머, 축합 반응제, 다당류, 폴리아미노산, 덴드리머, 사포닌, 흡착 증진 물질 또는 지방산과 같은 당업계에 공지된 운반 시스템을 사용하여 생체 내 운반될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체, 즉, 제제시 통상적으로 이용되는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아, 고무, 인산칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세 결정성 셀룰로스, 폴리비닐 피로리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필 히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함할 수 있으며, 또한, 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 근육 내, 정맥 내, 복강 내, 피하, 피내, 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 명세서에 있어서, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 일 양상에 따른 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 항염증제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 항염증제와는 동시에, 별도로, 또는 순차적으로 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로, 상기 약학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에 활성 성분의 흡수도, 불활성율, 배설 속도, 질병 종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있으며, 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라 증감될 수 있다.
또 다른 양상은 치료학적 유효량의 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어지는 펩티드, 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.
상기 약학적 조성물에 대한 설명에서 언급된 용어 또는 요소 중 이미 언급된 것과 동일한 것은 상술한 바와 같다.
또 다른 양상은 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어지는 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 류마티스 관절염의 예방 또는 개선용 건강 기능성 식품 조성물을 제공한다.
상기 건강 기능성 식품 조성물에 있어서, 상기 “펩티드”에 대해서는 상기한 바와 같다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "개선"이란 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들어, 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미할 수 있다. 이때, 상기 건강 기능성 식품 조성물은 류마티스 관절염의 예방 또는 개선을 위하여 해당 질환의 발병 단계 이전 또는 발병 후, 치료를 위한 약제와 동시에 또는 별개로서 사용될 수 있다.
상기 건강 기능성 식품 조성물에서, 유효성분은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 상기 건강 기능성 식품 조성물은 원료에 대하여 바람직하게 약 15 중량% 이하, 바람직하게는 약 10 중량% 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있다.
상기 건강 기능성 식품 조성물은 상기 유효성분을 함유하는 것 외에 특별한 제한없이 다른 성분들을 필수 성분으로서 함유할 수 있다. 예를 들어, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알코올일 수 있다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어, 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
상기 외에도, 일 양상에 따른 건강 기능성 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.
또 다른 양상은 (a) ENO1(α-enolase)를 포함하는 개체의 시료에, 아포지질단백질 B100(apoB100)을 후보 물질과 함께 접촉시키는 단계; 및 (b) 상기 후보 물질과 접촉된 시료에서 측정된 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준을 후보 물질이 투여되지 않은 대조군과 비교하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염 치료제를 스크리닝하는 방법을 제공한다.
본 명세서에서 사용된, "ENO1(α-enolase)"은 해당경로(glycolytic pathway)의 핵심 요소로서 최초로 확인된 다기능성 단백질로서, 세포기질에서 편재하여(ubiquitously) 발현되고, 플라스미노겐-결합 리셉터로서 세포 표면에 발현하는 것으로 알려져 있다. 상기 ENO1에 대한 항체는 루푸스, 크론병, 및 망막증과 같은 자가면역질환 환자군에 발견된 바 있다. 그러나, 류마티스 관절염의 염증 반응 유도와 관련된 특정 단백질과의 결합에 대해서는 알려진 바가 없다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "시료"는 개체로부터 분리된 전혈, 혈청, 혈장, 타액, 뇨, 객담, 림프액, 세포, 조직 등을 포함할 수 있고, 예를 들어, 말초 혈액, 보다 구체적으로, 말초 혈액 단핵구 세포일 수 있다.
상기 방법에서, "접촉(Contacting)"은 일반적인 의미이며, 2개 이상의 제제(예를 들어, 2개 폴리펩티드)를 결합시키거나, 제제와 세포(예를 들어, 단백질과 세포)를 결합시키는 것 등을 지칭할 수 있다. 접촉은 시험관 내(in vitro)에서 일어날 수도 있다. 예컨대, 시험관(test tube) 또는 다른 컨테이너(container)에서 2개 이상의 제제를 결합시키거나 시험 제제와 세포 또는 세포 용해물과 시험 제제를 결합시킬 수 있다. 또한, 접촉은 세포 또는 인 시투(in situ)에서 일어날 수도 있다. 예컨대, 2개의 폴리펩티드를 암호화하는 재조합 폴리뉴오티드를 세포 내에서 공동발현(coexpression)시킴으로써 세포 또는 세포 용해물에서 2개의 폴리펩티드를 접촉시킬 수 있다. 또한 테스트하고자 하는 단백질이 고정상의 표면에 배열된 단백질 칩(protein chip)이나 단백질 어레이(protein array)를 이용할 수도 있다
상기 방법에서, “후보 물질”은 임의의 물질(substance), 분자(molecule), 원소(element), 화합물(compound), 실재물(entity) 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 예를 들어, 단백질, 폴리펩티드, 저분자 유기화합물(small organic molecule), 다당류(polysaccharide), 폴리뉴클레오티드 등을 포함할 수 있다. 또한, 자연 산물(natural product), 합성 화합물 또는 화학 화합물 또는 2개 이상의 물질의 조합일 수도 있다.
상기 “아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준을 측정하는 방법”은 -하이브리드 방법, 공동면역침강 방법(co-immunoprecipitation assay), 공동-국소화 분석(co-localization assay), 섬광 근접 측정법(scintillation proximity assay: SPA), UV 또는 화학적 가교 결합 방법, 이분자 상호작용 분석(bimolecular interaction analysis: BIA), 질량 분석법(mass spectrometry: MS), NMR(nuclear magnetic resonance), 형광 편광 분석법(fluorescence polarization assays,FPA) 및 시험관내 풀-다운 에세이(in vitro pull-down assay)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
일 실시예에 따르면, 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합을 저해하는 물질은 류마티스 관절염 환자군의 말초 혈액 내 염증성 사이토카인의 분비량을 유의적으로 감소시켰을 뿐만 아니라, 류마티스 관절염 동물모델에서도 우수한 치료 효능을 보여주였는 바, 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준은 류마티스 관절염 치료제 개발을 위한 지표로 활용될 수 있다.
따라서, 상기 방법은 후보 물질과 접촉된 시료에서 측정된 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준이 대조군에 비해 감소된 경우, 류마티스 관절염의 치료제로 결정하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 결합 수준의 변화는 대조군 또는 양성 대조군과 유사한 수준 또는 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 및 100% 이상 감소하는 것을 포함할 수 있다.
일 양상에 따른 펩티드에 의하면, 말초 혈액 내 염증성 사이토카인을 유의적으로 감소시키고, 이에 따라, 류마티스 관절염의 제반 증상인 염증, 골 및 연골조직의 침식 등을 치료하는데 이용될 수 있다.
일 양상에 따른 스크리닝하는 방법에 의하면, 류마티스 관절염과 관련된 염증 반응을 유의적으로 감소시킬 수 있는 신규 치료제를 발굴할 수 있다.
도 1은 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포의 표면에서 ENO1의 발현을 공초점 현미경으로 관찰한 결과이다.
도 2는 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100을 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (HC: 정상 대조군, RA: 류마티스 관절염 환자군, * p<0.05).
도 3은 ENO1와 apoB100간 결합 여부를 (A) 면역블롯팅, (B) 공초점 현미경, (C) BIACORE 시스템, 및 (D) ELISA 분석을 통하여 확인한 결과이다.
도 4는 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 ENO1siRNA를 처리하여 ENO1의 발현을 억제시키고 apoB100을 처리한 후, (A) IL-1, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (ConsiRNA: 대조군, ENO1siRNA: ENO1 발현 저해군).
도 5는 LDLR 넉아웃 마우스에 apoB100을 처리한 후, (A) 체중, (B) 발목 두께, 및, (C) 관절염 지수 변화를 비교한 결과이다 (LDLR K/O: LDLR 넉아웃 마우스, WT: 야생형 마우스).
도 6은 LDLR 넉아웃 마우스에 apoB100을 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (LDLR K/O: LDLR 넉아웃 마우스, WT: 야생형 마우스).
도 7은 말초 혈액 내 ENO1와 결합하는 apoB100의 모티프를 펩티드 마이크로 어레이를 통해 확인한 결과이다.
도 8은 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100 유래의 펩티드 #1 내지 펩티드 #5를 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다(HC: 정상 대조군, RA: 류마티스 관절염 환자군, NBP: 비결합 펩티드 처리군, * p<0.05, *** p<0.001).
도 9는 CD14(-) 말초 혈액 단핵구 세포 및 CD14(+) 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100 유래의 펩티드 #1 내지 펩티드 #5를 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (NBP: 비결합 펩티드 처리군, * p<0.05, ** p<0.01, *** p<0.001).
도 10은 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드(apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5)를 처리한 후, (A) IL-1, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다(NBP: 비결합 펩티드 처리군, * p<0.05).
도 11은 K/BxN 류마티스 관절염 동물모델에 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드(apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5)를 처리한 후, 상기 동물모델의 (A) 발목 두께, 및, (B) 관절염 지수 변화를 비교한 결과이다.
도 12는 K/BxN 류마티스 관절염 동물모델에 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드(apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5)를 처리한 후, (A) 관절막 염증 (synovial inflammation) (B) 골 침식(bone erosion), (C) 연골 손상(cartilage demage) (D) 백혈구 침윤(leukocyte infiltration)을 비교한 결과이다.
도 2는 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100을 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (HC: 정상 대조군, RA: 류마티스 관절염 환자군, * p<0.05).
도 3은 ENO1와 apoB100간 결합 여부를 (A) 면역블롯팅, (B) 공초점 현미경, (C) BIACORE 시스템, 및 (D) ELISA 분석을 통하여 확인한 결과이다.
도 4는 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 ENO1siRNA를 처리하여 ENO1의 발현을 억제시키고 apoB100을 처리한 후, (A) IL-1, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (ConsiRNA: 대조군, ENO1siRNA: ENO1 발현 저해군).
도 5는 LDLR 넉아웃 마우스에 apoB100을 처리한 후, (A) 체중, (B) 발목 두께, 및, (C) 관절염 지수 변화를 비교한 결과이다 (LDLR K/O: LDLR 넉아웃 마우스, WT: 야생형 마우스).
도 6은 LDLR 넉아웃 마우스에 apoB100을 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (LDLR K/O: LDLR 넉아웃 마우스, WT: 야생형 마우스).
도 7은 말초 혈액 내 ENO1와 결합하는 apoB100의 모티프를 펩티드 마이크로 어레이를 통해 확인한 결과이다.
도 8은 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100 유래의 펩티드 #1 내지 펩티드 #5를 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다(HC: 정상 대조군, RA: 류마티스 관절염 환자군, NBP: 비결합 펩티드 처리군, * p<0.05, *** p<0.001).
도 9는 CD14(-) 말초 혈액 단핵구 세포 및 CD14(+) 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100 유래의 펩티드 #1 내지 펩티드 #5를 처리한 후, (A) IL-1β, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다 (NBP: 비결합 펩티드 처리군, * p<0.05, ** p<0.01, *** p<0.001).
도 10은 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드(apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5)를 처리한 후, (A) IL-1, (B) IL-6, 및 (C) TNF-α의 분비량 변화를 비교한 결과이다(NBP: 비결합 펩티드 처리군, * p<0.05).
도 11은 K/BxN 류마티스 관절염 동물모델에 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드(apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5)를 처리한 후, 상기 동물모델의 (A) 발목 두께, 및, (B) 관절염 지수 변화를 비교한 결과이다.
도 12는 K/BxN 류마티스 관절염 동물모델에 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드(apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5)를 처리한 후, (A) 관절막 염증 (synovial inflammation) (B) 골 침식(bone erosion), (C) 연골 손상(cartilage demage) (D) 백혈구 침윤(leukocyte infiltration)을 비교한 결과이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
실시예 1. ENO1과 apoB100의 결합이 염증성 사이토카인 분비에 미치는 영향
본 실시예에서는 류마티스 관절염과 말초 혈액 내 단핵구 세포의 ENO1 발현간 관련성을 확인하고, Immunoprecipitation (IP)/mass spectroscopy (MS) 방법을 이용한 프로테오믹 분석을 통하여 ENO1(α-enolase)의 결합 리간드로 선정된 아포지질단백질 B100(apoB100)과의 결합이 류마티스 관절염 환자의 말초 혈액 내 염증성 사이토카인 분비에 미치는 영향을 확인하고자 하였다. 구체적으로, 류마티스 관절염 환자로부터 수득한 단핵구 세포를 대상으로 ENO1 면역 염색을 실시하고 이들의 발현을 관찰하였다. 또한, 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100을 처리한 후, IL-1β, IL-6, TNF-α의 분비량 변화를 비교하였다. 한편, 대조군으로는 정상인으로부터 분리된 세포를 이용한 군(Healthy control: HC)을 설정하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 대조군에 비해 류마티스 환자의 단핵구의 표면에서 유의적으로 높은 ENO1의 발현이 관찰되었다. 또한, 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 apoB100을 처리한 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 염증성 사이토카인인 IL-1β, IL-6, 및 TNF-α 모두의 분비량이 정상 대조군에 비해 현격하게 증가됨을 확인하였다.
또한, 면역 블롯팅, Biacore 시스템, 공초점 현미경, 및 ELISA를 통하여, ENO1와 apoB100간 결합 여부를 확인한 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, ENO1과 apoB100은 상대적으로 강력한 결합을 형성함을 확인할 수 있었다.
이에 따라, 본 실시예에서는 ENO1과 apoB100의 결합이 류마티스 관절염에 의한 염증 반응에 핵심적인 역할을 하는지 여부에 대한 추가적으로 검증을 실시하였다. 우선, 류마티스 관절염 환자로부터 분리된 말초 혈액 단핵구 세포에 ENO1 siRNA를 처리하여 ENO1의 발현을 억제시킨 경우, 종전과 마찬가지로 apoB100에 처리에 의해 염증성 사이토카인의 분비량이 증가하는지를 확인하였다. 또한, 생체 내에서, apoB100 단백질과 결합되어 있는 상태로 존재하는 LDL이 상기 염증 반응에 관여할 가능성도 배제할 수 없는 바, LDLR 넉아웃 마우스 및 C57BL/6 야생형 대조군 마우스에 K/BxN 마우스의 혈청(이하, K/BxN 혈청으로 명명함.) 및 ApoB100을 처리한 후, 이에 따른 생체 내 변화를 비교하였다. 한편, K/BxN 마우스 혈청의 첨가는, 상기 K/BxN 혈청 내 존재하는 자가 항체의 침착을 통하여 관절염을 유발시키는 역할을 하며, 이는 자가 면역 반응에 의한 관절염 동물 모델을 제조하기 위한 종래의 기술 중 하나이다.
그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 말초 혈액 단핵구 세포의 ENO1 발현을 억제시킨 경우, apoB100 처리에 의한 염증성 사이토카인 분비량의 증가는 관찰되지 않았다. 또한, 도 5 및 도 6에 나타낸 바와 같이, 발목 두께, 관절염 지수, 및 염증성 사이토카인 분비량의 변화에 있어서, LDLR 넉아웃 마우스는 대조군과 유사하거나 오히려 더 높은 결과를 확인할 수 있었으며, 이는 상기 염증 반응은 LDL 또는 LDL 수용체와는 무관한 것임을 보여준다.
즉, 이러한 실험결과를 종합해 보면, 류마티스 관절염의 발병과 말초 혈액 내 단핵구 세포의 ENO1 발현은 밀접한 상관 관계에 있으며, 특히, 상기 말초 혈액 내 ENO1과 apoB100의 결합은 해당 질병의 염증 반응에 핵심적인 역할을 함을 나타내는 것이다.
실시예 2. 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드의 도출
본 실시예에서는 상기 실시예 1의 실험 결과에 기초하여, 말초 혈액 내 ENO1과 apoB100간 결합을 저해함으로써, 염증성 사이토카인의 분비를 억제시킬 수 있는 펩티드를 도출하고자 하였다. 구체적으로, 도 7에 나타낸 바와 같이, 펩티드 마이크로어레이를 이용하여 ENO1과 결합하는 apoB100의 모티프를 확인하고, 총 5종의 펩티드를 수득하였다. 상기 펩티드의 구체적인 정보는 하기 표 1과 같다.
번호 | 서열 정보 | 비고 |
# 1 | AICKEQHLFLPF (서열번호 1) | 도 7에서 “22”로 표기 |
# 2 | CKEQHLFLPFSY (서열번호 2) | 도 7에서 “23”으로 표기 |
# 3 | SYKNKYGMVAQV (서열번호 3) | 도 7에서 “28”로 표기 |
# 4 | KNKYGMVAQVTQ (서열번호 4) | 도 7에서 “29”로 표기 |
# 5 | TKKMGLAFESTK (서열번호 5) | 도 7에서 “44”로 표기 |
이후, 정상인 및 류마티스 환자로부터 수득한 말초 혈액 단핵구 세포에 상기 펩티드 #1 내지 펩티드 #5 (apoB100 #1, apo100 #2, apoB100 #3, apoB100 #4, apoB100 #5로 명명함.)를 처리한 후, IL-1β, IL-6, 또는 TNF-α의 분비량 변화를 비교하였다. 한편, 대조군으로는 비결합 펩티드 처리군 (NBP)을 설정하였으며, 본 실시예에서의 결과는 류마티스 환자 및 정상인 각각 6명에 대한 평균값으로 나타낸 것이다.
그 결과, 도 8에 나타낸 바와 같이, 상기와 마찬가지로, 류마티스 관절염 환자에서 IL-1β, IL-6, 또는 TNF-α의 분비량이 정상인(HC)에 비해 유의적으로 증가됨을 확인할 수 있었다. 또한, apoB100 #2 또는 apoB100 #4를 처리한 경우, 말초 혈액 단핵구 세포의 IL-1β, IL-6, 또는 TNF-α의 분비량이 대조군에 현격하게 증가된 반면, apoB100 #1, apoB100 #3 또는 apoB100 #5를 처리한 경우에는 IL-1β, IL-6, 또는 TNF-α의 분비량이 감소됨을 확인할 수 있었다.
한편, 종전의 연구에서 류마티스 관절염 환자 혈액 내 ENO1의 발현 증가는 대부분 CD14(+) 말초 혈액 단핵구 세포로부터 유래함을 확인한 바 있다. 따라서, 본 실시예에서는 CD14(-) 또는 CD14(+) 말초 혈액 단핵구 세포에 상기 펩티드 #1 내지 펩티드 #5를 처리한 후, IL-1β, IL-6, 또는 TNF-α의 분비량 변화를 비교함으로써, ENO1과 apoB100의 결합이 상기 반응에 관여하는지를 간접적으로 확인하고자 하였다. 한편, 대조군으로는 비결합 펩티드 처리군 (NP)을 설정하였다.
그 결과, 도 9에 나타낸 바와 같이, CD14(+) 말초 혈액 단핵구 세포에서는 상기 도 8의 결과와 유사한 경향을 보여주었으나, CD14(-) 말초 혈액 단핵구 세포에서는 어떠한 변화도 관찰되지 않았는바, 상기의 반응에 ENO1과 apoB100의 결합이 밀접하게 관여함을 재차 확인할 수 있었다.
이러한 실험 결과로부터 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드로서, apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5를 도출할 수 있었다.
실시예 3. 류마티스 관절염의 치료 효과 검증
본 실시예에서는 상기 실시예 2에의 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드(apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5)의 류마티스 관절염 치료 효과를 확인하고자 하였다.
3-1. 류마티스 관절염 환자 유래의 말초 혈액에서 염증성 사이토카인 분비 감소
류마티스 관절염 환자 유래의 말초 혈액에 apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5를 처리한 뒤, IL-1β, IL-6, 또는 TNF-α의 분비량 변화를 확인하였다. 대조군으로는 비결합 펩티드 처리군(NBP)을 설정하였다.
그 결과, 도 10에 나타낸 바와 같이, apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5의 처리에 따라 IL-1β, IL-6, 또는 TNF-α의 분비량이 유의적으로 감소하였으며, 이 중에서도 apoB100 #3의 처리에 따른 효과가 가장 우수함을 확인할 수 있었다
3-2. 류마티스 관절염 동물모델에서 치료 효과 확인
마우스에 K/BxN 혈청과 apoB를 투여하여 중등도의 관절염을 유도하여, K/BxN 류마티스 관절염 동물모델(K/BxN serum transfer arthritis mouse)을 확립한 뒤, 상기 동물모델을 대상으로, 염증성 사이토카인 분비 억제용 펩티드를 병변 부위에 피하 주사하였다. 이후, 상기 펩티드의 주사에 따른 발목 두께(ankle thickness), 및 관절염 지수(arthritis score)의 변화를 확인하였다. 아울러, 상기와 동일한 조건에서 관절액 염증, 골 침식, 연골 손상, 백혈구 침윤의 변화를 비교하였다. 한편, 대조군으로 K/BxN 혈청, 및 apoB 만을 처리한, 비교군으로는 K/BxN 혈청, apoB, 및 비결합 펩티드 처리군(NP)을 설정하였다.
그 결과, 도 11에 나타낸 바와 같이, apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5의 처리는 류마티스 관절염에 의해 증가한 발목 두께 및 관절염 지수를 유의적으로 감소시켰다. 또한, 도 12에 아타낸 바와 같이, 상기 결과와 마찬가지로, 상기 펩티드의 처리에 따라 관절액 염증, 골 침식, 연골 손상, 백혈구 침윤이 감소되었다. 즉, 이러한 결과를 종합해 보면, 상기 apoB100 #1, apoB100 #3, 또는 apoB100 #5는 류마티스 관절염 치료제의 유효 성분으로 사용될 수 있음을 나타내는 것이다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
<110> Seoul National University Industry Foundation
<120> Peptides for treating rheumatoid arthritis and uses thereof
<130> PN127909KR
<150> KR 2018-0077329
<151> 2018-07-03
<160> 5
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> peptide #1
<400> 1
Ala Ile Cys Lys Glu Gln His Leu Phe Leu Pro Phe
1 5 10
<210> 2
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> peptide #2
<400> 2
Cys Lys Glu Gln His Leu Phe Leu Pro Phe Ser Tyr
1 5 10
<210> 3
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> peptide #3
<400> 3
Ser Tyr Lys Asn Lys Tyr Gly Met Val Ala Gln Val
1 5 10
<210> 4
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> peptide #4
<400> 4
Lys Asn Lys Tyr Gly Met Val Ala Gln Val Thr Gln
1 5 10
<210> 5
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> peptide #5
<400> 5
Thr Lys Lys Met Gly Leu Ala Phe Glu Ser Thr Lys
1 5 10
Claims (12)
- 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 펩티드.
- 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어지는 펩티드, 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 유효성분으로 포함하는, 류마티스 관절염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 청구항 2에 있어서, 상기 조성물은 염증성 사이토카인의 분비를 억제시키는 것인, 약학적 조성물.
- 청구항 3에 있어서, 상기 사이토카인은 IL-1β(Interleukin-1β), IL-6(Interleukin-6), TNF-α(Tumor necrosis factor-α), 이의 조합으로부터 선택되는 어느 하나인 것인, 약학적 조성물.
- 청구항 2에 있어서, 상기 펩티드의 N-말단은 아세틸기(acetyl group), 플루오레닐메톡시카르보닐기(fluoreonylmethoxycarbonyl group), 포르밀기(formyl group), 팔미토일기(palmitoyl group), 미리스틸기(myristyl group), 스테아릴기(stearyl group) 및 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol; PEG)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 보호기와 결합되거나,
상기 펩티드의 C-말단은 아미노기(amino group, -NH2), 및 아자이드(azide, -NHNH2)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 보호기와 결합되는 것인, 약학적 조성물. - 청구항 2에 있어서, 상기 조성물은 상기 펩티드이외 다른 항염증제와 동시에, 별도로, 또는 순차적으로 병용투여되는 것인, 약학적 조성물.
- 청구항 2에 있어서, 상기 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함하는 것인, 약학적 조성물.
- 서열번호 1, 서열번호 3, 또는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어지는 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 류마티스 관절염의 예방 또는 개선용 건강 기능성 식품 조성물.
- (a) ENO1(α-enolase)를 포함하는 개체의 시료에, 아포지질단백질 B100(apoB100)을 후보 물질과 함께 접촉시키는 단계; 및
(b) 상기 후보 물질과 접촉된 시료에서 측정된 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준을 후보 물질이 투여되지 않은 대조군과 비교하는 단계를 포함하는, 류마티스 관절염 치료제를 스크리닝하는 방법. - 청구항 9에 있어서, 상기 시료는 혈액 시료인 것인, 방법.
- 청구항 9에 있어서, 상기 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준은 투-하이브리드 방법, 공동면역침강 방법(co-immunoprecipitation assay), 공동-국소화 분석(co-localization assay), 섬광 근접 측정법(scintillation proximity assay: SPA), UV 또는 화학적 가교 결합 방법, 이분자 상호작용 분석(bimolecular interaction analysis: BIA), 질량 분석법(mass spectrometry: MS), NMR(nuclear magnetic resonance), 형광 편광 분석법(fluorescence polarization assays,FPA) 및 시험관내 풀-다운 에세이(in vitro pull-down assay)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법에 의해 측정되는 것인, 방법.
- 청구항 9에 있어서, 상기 후보 물질과 접촉된 시료에서 측정된 아포지질단백질 B100과 ENO1간 결합 수준이 대조군에 비해 감소된 경우, 류마티스 관절염 치료제로 결정하는 단계를 더 포함하는 것인, 방법.
Priority Applications (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/KR2019/008040 WO2020009424A1 (ko) | 2018-07-03 | 2019-07-02 | 류마티스 관절염 치료용 펩티드 및 그의 용도 |
US17/257,492 US20210221847A1 (en) | 2018-07-03 | 2019-07-02 | Peptide for treating rheumatoid arthritis and use thereof |
CN201980044775.XA CN112368294B (zh) | 2018-07-03 | 2019-07-02 | 用于治疗风湿性关节炎的肽以及其用途 |
JP2020573530A JP7315245B2 (ja) | 2018-07-03 | 2019-07-02 | リウマチ関節炎治療用ペプチド及びその用途 |
EP19831496.5A EP3800196A4 (en) | 2018-07-03 | 2019-07-02 | PEPTIDE FOR TREATMENT OF RHEUMATOID ARTHRITIS AND USE THEREOF |
JP2023003697A JP2023052387A (ja) | 2018-07-03 | 2023-01-13 | リウマチ関節炎治療用ペプチド及びその用途 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR20180077329 | 2018-07-03 | ||
KR1020180077329 | 2018-07-03 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20200004261A KR20200004261A (ko) | 2020-01-13 |
KR102276941B1 true KR102276941B1 (ko) | 2021-07-14 |
Family
ID=69153393
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020190078953A KR102276941B1 (ko) | 2018-07-03 | 2019-07-01 | 류마티스 관절염 치료용 펩티드 및 그의 용도 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210221847A1 (ko) |
EP (1) | EP3800196A4 (ko) |
JP (2) | JP7315245B2 (ko) |
KR (1) | KR102276941B1 (ko) |
CN (1) | CN112368294B (ko) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115671253B (zh) * | 2021-07-30 | 2024-02-27 | 河北菲尼斯生物技术有限公司 | Se-dr亲和肽在制备治疗风湿疾病的药物中的用途 |
CN117264066B (zh) * | 2023-05-08 | 2024-03-22 | 北京积水潭医院 | 一种eno1抗体及其应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010208946A (ja) | 2007-06-29 | 2010-09-24 | Nihon Pharmaceutical Co Ltd | 関節リウマチの予防・治療剤 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6635623B1 (en) * | 1997-06-13 | 2003-10-21 | Baylor College Of Medicine | Lipoproteins as nucleic acid vectors |
US8506964B2 (en) * | 2010-02-05 | 2013-08-13 | Cardiovax, Llc | Fusion proteins and related compositions, methods and systems for treatment and/or prevention of atherosclerosis |
AU2011325948A1 (en) | 2010-11-12 | 2013-05-30 | Cedars-Sinai Medical Center | Immunomodulatory compositions, methods and systems comprising immunogenic fragments of Apob100 |
JP2014516913A (ja) | 2010-11-12 | 2014-07-17 | シーダース シナイ メディカル センター | 高血圧の治療及び/又は予防のための免疫調節方法及びシステム |
KR102101478B1 (ko) * | 2011-08-10 | 2020-04-16 | 란케나우 인스티튜트 포 메디칼 리서치 | 자가면역 및 염증성 질환의 치료를 위한 방법 및 조성물 |
EP2788012A4 (en) * | 2011-11-11 | 2015-08-05 | Cedars Sinai Medical Center | COMPOSITIONS AND METHODS OF TREATING NURSE DISEASES |
EP2875826B1 (en) * | 2012-05-11 | 2017-08-23 | KAEL-GemVax Co.,Ltd | Composition for preventing or treating sepsis |
WO2014204229A2 (ko) * | 2013-06-21 | 2014-12-24 | 성균관대학교산학협력단 | 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
EP3169343B1 (en) * | 2014-07-15 | 2020-03-25 | Yissum Research and Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Ltd. | Isolated polypeptides of cd44 and uses thereof |
US10434141B2 (en) * | 2016-05-31 | 2019-10-08 | Abcentra, Llc | Methods for treating systemic lupus erythematosus with an anti-apolipoprotein B antibody |
-
2019
- 2019-07-01 KR KR1020190078953A patent/KR102276941B1/ko active IP Right Grant
- 2019-07-02 EP EP19831496.5A patent/EP3800196A4/en active Pending
- 2019-07-02 JP JP2020573530A patent/JP7315245B2/ja active Active
- 2019-07-02 CN CN201980044775.XA patent/CN112368294B/zh active Active
- 2019-07-02 US US17/257,492 patent/US20210221847A1/en active Pending
-
2023
- 2023-01-13 JP JP2023003697A patent/JP2023052387A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010208946A (ja) | 2007-06-29 | 2010-09-24 | Nihon Pharmaceutical Co Ltd | 関節リウマチの予防・治療剤 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Journal of Immunology, Vol. 189, No. 1, pp. 365-372(2012.) |
The American Journal of Medicine, Vol. 113, No. 3, pp. 188-193(2002.) |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112368294B (zh) | 2023-09-29 |
US20210221847A1 (en) | 2021-07-22 |
JP7315245B2 (ja) | 2023-07-26 |
JP2021529793A (ja) | 2021-11-04 |
CN112368294A (zh) | 2021-02-12 |
KR20200004261A (ko) | 2020-01-13 |
JP2023052387A (ja) | 2023-04-11 |
EP3800196A1 (en) | 2021-04-07 |
EP3800196A4 (en) | 2022-03-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US7241576B2 (en) | Uses of THANK, a TNF homologue that activates apoptosis | |
KR100537558B1 (ko) | 인터류킨-18 결합 단백질 | |
Kacířová et al. | Inflammation: major denominator of obesity, Type 2 diabetes and Alzheimer’s disease-like pathology? | |
JP2008501716A (ja) | 自己炎症性疾患を処置するためのil−1アンタゴニストを使用する方法 | |
JP2023052387A (ja) | リウマチ関節炎治療用ペプチド及びその用途 | |
Joosten et al. | T cell dependence of chronic destructive murine arthritis induced by repeated local activation of Toll‐like receptor–driven pathways: crucial role of both interleukin‐1β and interleukin‐17 | |
US8071716B2 (en) | Thymus-specific protein | |
EP2440236B1 (en) | Neuregulin based methods for treating heart failure | |
US10695404B2 (en) | Treatment of steroid-induced hyperglycemia with fibroblast growth factor (FGF) 1 analogs | |
CN105705160B (zh) | Il-22二聚体在制备用于治疗胰腺炎的药物中的用途 | |
JP2008518941A (ja) | 大腸連続性を伴う短腸症候群患者の治療 | |
CN113286604B (zh) | 治疗炎症性疾病的蛋白质 | |
JP6573293B2 (ja) | 炎症性疾患の予防または治療用ペプチド及びこの用途 | |
KR101510082B1 (ko) | 비만증을 억제하기 위한 백신 및 방법 | |
JP2007523196A (ja) | Nt−4/5を用いて肥満または糖尿病を処置する方法 | |
TWI359271B (en) | Pharmaceutical composition for insulin resistance | |
CN111050786A (zh) | 用于治疗非酒精性脂肪性肝炎(nash)的方法的修饰的成纤维细胞生长因子21(fgf-21) | |
KR101645015B1 (ko) | Fpr2를 활성화하는 물질을 포함하는, 인슐린 저항성 관련 질환 치료용 조성물 | |
WO2020009424A1 (ko) | 류마티스 관절염 치료용 펩티드 및 그의 용도 | |
Ren et al. | IL-37 alleviates liver granuloma caused by Schistosoma japonicum infection by inducing alternative macrophage activation | |
JPH111500A (ja) | 新規化合物 | |
AU2018335193B2 (en) | Peptide for inhibiting angiogenesis and use thereof | |
KR102609822B1 (ko) | 항염증 활성을 갖는 펩타이드와 이의 용도 | |
KR20230110921A (ko) | Pkdcc를 포함하는 유방암 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
CN116249542A (zh) | 用于预防或治疗阿尔茨海默痴呆症的肽组合物 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
GRNT | Written decision to grant |