KR102222108B1

KR102222108B1 - 배양 트레이

Info

Publication number: KR102222108B1
Application number: KR1020177034103A
Authority: KR
Inventors: 크리스티안 카프카
Original assignee: 유로이뮨 메디지니쉐 라보디아그노스티카 아게
Priority date: 2015-04-24
Filing date: 2015-12-21
Publication date: 2021-03-04
Also published as: BR112017019915B1; EP3085446A1; US20180078941A1; WO2016169576A1; CA2983467A1; BR112017019915A2; JP2018513787A; AU2015392201B2; US10596574B2; EP3285929A1; DE112015006486A5; JP6592105B2; KR20180016999A; AU2015392201A1; CN107530704B; CA2983467C; CN107530704A; SG11201708466VA

Abstract

본 발명은 배양 트레이의 벽에 의해 형성된 오목부를 가지며, 베이스를 포함하는 배양 트레이에 관한 것으로, 이 배양 트레이는 오목부의 하나 이상의 종방향 단부에 액체를 인출하기 위한 수단을 포함하고, 바람직하게는, 오목부의 종방향 단부 상의 출구 채널 내로, 특히 바람직하게는, 배양 트레이의 벽 내로 개방되는 개구를 포함하며, 개구 및 출구 채널은 부압이 가해지도록 설계되고, 배양 트레이는 이 배양 트레이의 횡축을 중심으로 피봇 가능하며, 배양 트레이는 캐리어를 구비할 수 있다.

Description

배양 트레이{Incubation tray}

본 발명은 배양 트레이의 벽에 의해 형성된 오목부를 가지며, 베이스를 포함하는 배양 트레이에 관한 것으로, 이 배양 트레이는 오목부의 적어도 하나 이상의 종방향 단부에 액체를 인출하기 위한 수단을 포함하고, 바람직하게는, 오목부의 종방향 단부 상의 출구 채널 내로, 특히 바람직하게는, 배양 트레이의 벽 내로 개방되는 개구를 포함하며, 개구 및 출구 채널은 부압이 가해지도록 설계되고, 배양 트레이는 이 배양 트레이의 횡축을 중심으로 피봇 가능하며, 배양 트레이는 캐리어를 구비할 수 있다.

병리학상 및 실험실 진단 테스트는 현대 의학에서 없어서는 안될 기초 검사다. 일상적으로 이용가능한 다수의 테스트를 수행할 수 있으며, 현재의 임상 사진에 관한 결정적인 정보의 도움으로, 환자의 부재시에 시료 물질로부터 치료의 예후 또는 성공을 얻을 수 있다.

이 경우, 조직 절편 또는 세포 형태의 환자 시료를 초기에 착색할 수 있으며, 다음에 진단 수행을 위한 틀 내에서 착색한 구조를 테스트할 수 있다. 특히 조직학 또는 조직 병리학 분야에서는, 단지 수 마이크로미터 두께의 착색된 조직 절편이 준비되고 현미경으로 평가된다.

조직학적 작업에서 이용하는 시료 물질은 주로 수술 적출물, 시험 절제물, 및 조직 검사에 의해 제거된 조직을 포함하며, 이 방식에서 착색된 조직 절편을 테스트하는 주된 목적은 종양을 확실하게 검출하고 종류를 알아내는 것이다. 이러한 방법의 도움으로, 조직을 조직학적으로 특징화할 수 있으며, 성장 및 종양의 연구 방법에 의해 암을 진단할 수 있다.

대안적으로, 진단을 위한 참조데이터에 기초하여 획득한 값이 유용한 정보를 제공하는 경우, 특정 분자의 존재나 농도 파악을 위해 환자 시료를 테스트할 수 있다. 이런 식으로, 특정 자가항체가 검출되면, 이는 환자가 자가 면역 질환을 앓고 있음을 나타낼 수 있다. 자가 면역 질환의 예로는 감염, 류마티스 질환 같은 염증성 질환, 당뇨병 같은 대사 장애 및 신경계 질환을 포함한다.

해결되지 않은 한가지 문제는 시약과 시료 물질의 희소성 및 높은 가격이다. 비용 효율성을 높이기 위해, 작업 순서 및 물질의 소비를 최적화한다. 특히, 소형화 경향이 있으며: 진단, 병리학적, 및 분석적 반응은 더 이상 밀리미터 단위가 아닌, 오히려 마이크로리터 및 나노리터까지 수행된다. 이는 시약과 공간을 절약하고, 한 번 수집한 시료가 다수의 진단 테스트를 위해 충분한 양의 출발 물질을 제공하는 것을 가능케 한다. 마지막으로 그러나 중요하게는, 환자는 단일 진단 테스트가 실패한 경우에도 다른 시료를 채취하지 않아도 된다.

소형화와 관련된 특별한 한가지 문제는, 한편으로는 표면 상의 모세관 힘 및 부착으로 인해 유지하고 있는 유체 체적의 비율이, 다른 한편으로는 하나의 방법 단계 동안 사용되는 유체의 총 체적이 특히 높은 것이다. 다시 말해, 많은 유체가 표면에 부착되어 방법의 어떤 단계 후에 유체를 쏟아 내거나 피펫으로 취해서 유체를 효율적으로 제거할 수 없다.

상대적으로 큰 체적의 유체가 남게 되며, 이는 후속 방법 단계에 악영향을 준다. 예를 들어, 남아 있는 세척 용액은 후속 반응을 위해 도입한 시약을 희석시킴으로써, 후속 반응의 수율 또는 감도를 감소시킨다.

US 2014/248618에는 미세 유체 유동 세포용 배열이 기재되어 있으나, 이는 피봇 가능하지 않으며, 배양 트레이가 아닌, 오히려 폐쇄 시스템이다. US 6 673 620에 기재된 현미경 장치의 경우에도 동일하게 적용된다.

그러므로, 본 발명에서 다루는 한가지 과제는 병리학적으로 또는 실험실 진단에 의해 분석할 시료를 가능한 한 최소량의 시약 및 시료를 사용하여 분석할 수 있는 방법을 제공하는 것이다. 특히, 상기 과제는 주어진 절대량을 사용하면서 시약의 농도를 증가시키는 것이다.

또한, 특히 액상의 연속적인 대류로 인해 짧은 반응 시간과 높은 착색 품질도 보증해야 한다. 착색하는 동안 시간 소모적이고 오류가 발생하기 쉬운 수작업 단계를 크게 피할 수 있다.

본 발명에서 따르는 또 다른 과제는 종래 기술에 기재된 방법과 비교하여, 필요한 공간, 유체의 손실 및/또는 전환 또는 전체 분석의 기간을 감소시키는 것이다. 동시에, 재현성은 유지되거나 증가되어야 한다.

또 다른 과제는 실수의 위험, 시약의 관련 낭비, 및 시료의 손상을 최소화하는 방법을 제공하는 것이다.

상기 과제 및 추가적인 과제는 본 출원의 요지, 및 특히 첨부한 독립항의 주제에 의해 해결되며, 실시예는 종속항에서 기인한다.

본 발명에서 다루는 과제는, 제 1 측면에서, 배양 트레이의 벽에 의해 형성된 오목부를 가지며, 베이스를 포함하는 배양 트레이에 있어서, 배양 트레이는 오목부의 하나 이상의 종방향 단부에 액체를 인출하기 위한 수단을 포함하고, 바람직하게는, 오목부의 종방향 단부 상의 출구 채널 내로, 특히 바람직하게는, 배양 트레이의 벽 내로 개방되는 개구를 포함하며, 개구 및 출구 채널은 부압이 가해지도록 설계되고, 배양 트레이는 이 배양 트레이의 횡축을 중심으로 피봇 가능하며, 배양 트레이는 캐리어를 구비할 수 있는 배양 트레이에 의해서 해결된다.

제 1 측면의 바람직한 일 실시예에서, 부압은 출구 채널을 통해 가해진다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 흡인 수단은 베이스 상의 유체가 인출되도록 하고, 바람직하게는, 출구 채널 내로 개방되고 배양 트레이의 베이스 상에 배치되는 개구이다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이는 출구 채널 내로 개방되는 개구를 갖고, 이 개구는 베이스의 평면 또는 그 아래에서 연장되는 출구 채널 내로 개방되며, 출구 채널은 오목부로부터 분리되고 출구 격실 개구를 갖는 출구 격실과 인접해 있다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이는 바람직하게는, 배양 트레이의 베이스를 향하는 캐리어의 측면에서, 바람직하게는, 베이스 상에 놓이는 캐리어 상에 위치되는 생체 시료를 구비하는 캐리어를 포함한다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이는 유체를 함유하고, 이때 배양 트레이는 출구 채널 내로 개방되는 개구를 갖고, 유체의 표면은 바람직하게는, 개구 위에 놓인다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이가 캐리어를 구비하는 경우, 캐리어가 오목부 내에서 배양 트레이의 종축을 따라 전후로 이동할 수 있도록, 캐리어와 배양 트레이가 서로 정합된다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이는 입구 채널 내로 바람직하게는, 오목부와 분리된 입구 격실에 인접해 있는 배양 트레이의 벽으로 개방되는 개구를 더 포함하고, 입구 격실은 입구 격실 개구를 갖고, 입구 채널은 바람직하게는, 배양 트레이의 종축을 따라 베이스의 평면 또는 그 아래에서 연장된다.

또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이는 오목부의 종방향 일단부에 배양 트레이의 종축을 따라 출구 채널 내로 개방되는 개구를 포함하고, 오목부의 종방향 타단부에 입구 채널 내로 개방되는 개구를 갖는다.

상기 제 3 내지 제 8 실시예의 실시예이기도 한 제 9바람직한 실시예에서, 배양 트레이는 출구 격실 개구에 착탈 가능하게 결합되고 부압이 가해지도록 하는 배출 라인을 포함하는 추출 후드를 더 포함한다.

제 1 내지 제 9 실시예의 바람직한 실시예이기도 한 바람직한 제 10 실시예에서, 캐리어는 이동 중에 오목부의 종방향 일단부까지 이동되어, 오목부의 종방향 단부에 갭 없이 맞닿을 수 있다.

본 발명에서 다루는 과제는 제 2 측면에서, 하부와, 본 발명에 따른 하나 이상의 출구 격실 개구를 각기 갖는 배양 트레이들과, 추출 후드를 구비하는 프레임 형상 상부를 포함하는 장치에 있어서,

하부 및 상부는 각각 추출 후드가 각 출구 격실 개구에 결합되는 방식으로 상부가 하부에 놓여지도록 하부와 상부가 서로 정합되는 장치에 의해서 해결된다.

본 발명에서 다루는 과제는 제 3 측면에서, 캐리어를 배양하는 방법에 있어서,

a) 배양 트레이의 벽에 의해 형성된 오목부를 갖고, 베이스를 포함하는 배양 트레이의 오목부에서 유체의 존재시에 캐리어를 배양하는 단계와;

b) 바람직하게는, 부압하에 있는 출구 채널 내로 개방되는 개구를 통해, 오목부의 종방향 일단부에서 유체를 인출하는 단계를 포함하고;

개구는 오목부의 종방향 단부에, 바람직하게는, 배양 트레이의 베이스에 배치되며,

배양 트레이는 본 발명에 따른 배양 트레이 또는 본 발명에 따른 배양 장치의 배양 트레이인 방법에 의해서 해결된다.

제 3 측면의 제 1 바람직한 실시예에서, 배양 트레이는 이 배양 트레이의 횡축을 중심으로 피봇 가능하고, 단계 a) 및 b) 중 적어도 하나, 바람직하게는, 단계 b)는 피보팅하는 동안 수행된다.

제 3 측면의 제 2 바람직한 실시예에서, 단계 b)는 유체가 배양 트레이의 종방향 단부에 수집되고, (바람직하게는, 가능한 한 최대량으로) 유체가 인출되도록 배양 트레이가 피봇되고,

캐리어가 바람직하게는, 오목부의 종방향 단부까지 이동하고, 특히 바람직하게는, 오목부의 종방향 단부에 갭 없이 맞닿는 순간에 수행된다.

본 발명은, 본 발명에 따라 유체를 제거하기 위해 부압이 가해지는 배양 트레이에 관한 것이다. 이 배양 트레이는 유체 잔류물이 이런 식으로 제거될 수 있도록 설계되며, 오직 중력으로 구동되어 쏟아내는 식으로 제거되지는 않는다. 따라서, 유체는 종래의 배양 트레이 및 방법의 경우에 비해 보다 효율적으로 제거된다.

바람직한 일 실시예에서, 배양 트레이는 종방향, 즉 짧은 변 대 종축을 한정하는 긴 변의 비가 1:1 이상, 예를 들어 1:1.25, 1:1.5, 1:1.61, 1:1.75, 1:1.86, 1:2, 1:2.5, 1:2.923, 1:3, 1:4, 1:5, 1:5.2, 1:7.5 또는 1:10이다. 배양 트레이는 유체 밀봉되며, 커버, 필름 또는 이와 유사한 덮개를 구비할 수 있다. 배양 트레이는 도입 가능한 삽입물의 형태로 그에 정합되는 태블릿 내에 삽입될 수 있으며, 복수의 배양 트레이, 예를들어 최소한 2, 3, 4, 5, 6, 10, 12, 15, 20 또는 30개 이상의 배양 트레이를 포함할 수 있다. 바람직한 일 실시예에서, 태블릿은 상이한 크기의 여러 배양 트레이를 수용할 수 있다.

배양 트레이의 베이스는 평탄하며, 평면을 형성한다. 그럼에도 불구하고, 이것은 어떤 유형의 불균일부도 없는 평면일 필요는 없다. 대신에, 베이스는 홈 또는 거친 부분을 구비할 수 있다. 구조적인 특징이 베이스 "아래" 또는 "위에" 그의 평면, 또는 이 평면과 평행한 평면에 배치된 것으로 기재되는 경우, 그 위치는 상기 평면에 대해 수직임을 의미한다.

배양 트레이는 캐리어를 구비할 수 있다. 캐리어는 바람직하게는, 배양 트레이의 폭과 일치하는 평탄 캐리어, 바람직하게는, 유리 캐리어, 보다 바람직하게는, 예를 들어, DE 20 2011 005 278에 기재된 유형의 바이오칩이다. 캐리어는 투명할 수 있다. 시료 자체를 추가의 대상 캐리어, 예를 들어 투명한 목적 캐리어에 접착되거나, 다른 식으로 그에 고정되는 필름 또는 얇은 유리나 플라스틱 디스크에 도포할 수 있으나, 시료를 직접 캐리어에 코팅할 수 있다. 캐리어는 EP14152113.8에 기재된 유형의 성질 및 특성을 가질 수 있다. 바람직하게는, 시료는 캐리어의 하부측, 다시 말해 배양 트레이의 베이스를 향하는 측에 위치된다.

배양 트레이와 캐리어는 배양 트레이가 캐리어를 구비할 수 있도록 서로 정합될 수 있다. 바람직하게는, 배양 트레이 및 캐리어는 길며, 이때 캐리어의 길이는 오목부의 길이보다 짧아, 오목부 내에 놓여진 캐리어는 오목부의 2 개의 종방향 단부와 접촉하지 않는다. 캐리어의 길이는 바람직하게는, 오목부의 길이의 50 내지 99%, 보다 바람직하게는, 50 내지 95%, 더욱 바람직하게는, 60 내지 90%이다. 캐리어의 폭은 바람직하게는, 오목부 내에 도입된 캐리어가 배양 트레이의 베이스 상에서 회전할 수 없도록 선택된다.

오목부 내에 도입된 캐리어는 바람직하게는, 고정되지 않으며, 바람직하게는, 오목부의 벽에 의해 규정된 기하학적 경계의 틀 내에서, 그 안에 캐리어 및 유체를 갖는 배양 트레이가 피봇하는 동안, 종축을 따라 이동할 수 있다. 바람직하게는, 배양 트레이와 캐리어의 형상은, 캐리어가 오목부의 단부까지 이동하여 오목부의 종방향 단부에 안착되도록 배양 트레이가 피봇될 때, 캐리어의 일단부가 오목부의 종방향 단부와 갭 없이 맞닿도록 서로 정합된다. 갭 없이 맞닿는 것은 캐리어의 전체 폭에 걸쳐서 연장될 필요는 없지만, 캐리어 아래에 위치하거나, 캐리어 아래에서 출구격실개구 방향으로 흐르는 유체를 적어도 부분적으로 보내기에 충분해야 한다.

대안적으로, 캐리어는 테스트 스트립 및/또는 적합한 멤프레인, 예를 들어서 시료 또는 진단 시약으로 코팅된 니트로셀룰로스 멤브레인일 수 있다.

특히 바람직한 일 실시예에서, 유체를 충진한 후에, 캐리어가 적어도 부분적으로 유체로 언더 코팅되고, 따라서 캐리어 상의 시료가 유체와 접촉하도록, 캐리어는 오목부의 베이스 상에 놓인다. 캐리어는 베이스 또는 배양 트레이 상에 직접 놓일 수 있고, 및/또는 캐리어는 캐리어의 하부측과 오목부의 베이스 간의 분리상태, 바람직하게는, 최소 분리상태를 고정하기 위한 수단을 갖는다. 예를 들어, 캐리어와 동일한 재료로 제조된, 가령 베이스를 향하는 그의 측면에 캐리어의 종방향과 평행하게 설치된, 선택적으로 병렬로 배열된 쌍의 형태로, 캐리어의 하부측에 하나의 발 또는 하나 이상의 발, 가령 베이스나 하나의 레일 또는 하나 이상의 레일을 설치할 수 있다. 대안적으로, 배양 트레이의 베이스 또는 벽 상에 프레임이 놓이거나 설치될 수 있으며, 프레임 상에서 캐리어는 오목부의 베이스로부터 고정된 거리를 두고 안착된다. 필요한 국부적인 유체 교환은, 가령 배양 트레이가 규칙적인 방식으로 이동되고, 캐리어는 적어도 잠시 변위되거나, 회전하지 않고 부유하는 다른 방법으로도 보장할 수 있다.

거리를 고정시키는 수단은, 특히 시료가 캐리어의 하부에 위치할 때, 특히 캐리어가 완전히 덮이지 않을 때, 시료가 유체와 접촉하는 것을 보장한다. 또한, 이러한 배열은 베이스에 의해 바닥에서, 캐리어의 하부에 의해 상부에서, 그리고 벽에 의해 측면에서 폐쇄되는 별도의 격실을 형성하는 것을 가능케 하며, 그 내용물은 배양 트레이의 베이스에 있는 개구를 통해 특히 효과적으로 인출될 수 있다. 이 경우, 표면과의 상호 작용으로 인해 캐리어 또는 배양 트레이에 부착되는 유체도 제거되며, 쏟아져서 제거되지는 않는다. 또한, 유체의 증발 및 따라서, 시약의 소비는 격실에 의해 감소된다.

특히 바람직한 일 실시예에서, 시료는 진단적으로 또는 분석적으로 처리된다. 이것은 바람직하게는, 시료의 상태가 (선택적으로 추가의 공정 단계 후에) 분석 및 진단에 기여하도록 하는 방식으로 진단 방법 및/또는 작용제를 사용하여 시료가 처리된 것을 의미한다. 옵션으로는 예를 들어, 실험실 의학, 세포학, 형태학-현미경, 생화학, 면역(화학), 특히 면역 조직화학 또는 효소 조직화학, 분자 생물학, 조직학적, 혈청학적, 병리학적, 화학적 또는 물리적 분석 방법을 포함한다.

특히 바람직한 일 실시예에서, 시료는 파라핀에 들어 있는, 및/또는 포름알데히드 용액에 고정된 생체 시료이다. 특히 바람직한 일 실시예에서, 조직 절편은 염료 또는 마킹된 항체, 바람직하게는, 형광 마킹된 항체를 사용하여 착색되며, 광학 현미경을 사용하여 그안에 함유된 세포의 형태에 관해 조사한다. 예시적인 분자 생물학적 방법으로는 형광 인시츄(in situ) 하이브리드화와 같은 인시츄 하이브리드화를 포함한다. 병리학적 방법의 예로는 근육 생검에서 ATP아제(ATPase)-, NADH-, 헤마톡실린-/에오신-, 고모리 3색(Gomori's trichrome)-, PAS- 및 오일레드 착색(oil red staining) 같은 착색을 포함한다. 시료를 처리하기 위한 적절한 시약, 소프트웨어 및 장치는, 예를 들어, EUROIMMUN AG Medizinische Labordiagnostika, Luebeck사에서 시판하고 있다.

생체 시료는 예를 들어, 조직, 바람직하게는, 조직 절편 또는 조직 생검, 가령, 동결 절편, 진핵이나 원핵 세포, 또는 그의 생성물 같은 생체 세포, 바이러스, 핵산, 폴리펩티드, 지질 또는 탄수화물 같은 정제되거나 분리된 또는 합성으로 제조된 분자로 이루어진 군으로부터 선택할 수 있다. 생체 시료는 인간 또는 동물에서 기원한 것이 바람직하다.

배양 트레이는 흡인 중에 캐리어가 제거 또는 손상되지 않도록 선택되는 흡인을 통해 배양 트레이로부터 유체를 제거하기 위한 출구 채널 개구를 갖는 출구 채널을 포함한다. 바람직한 일 실시예에서, 출구 채널은 튜브이며, 튜브의 단부는 유체에 삽입된다. 바람직하게는, 출구 채널은 배양 트레이에 일체화된 채널이다. 흡인을 위해 출구 채널에 압력을 가할 수 있다.

출구 채널의 폭은 바람직하게는, 배양 트레이의 오목부 또는 캐리어, 바람직하게는, 캐리어의 폭의 50% 내지 100%, 보다 바람직하게는, 60% 내지 95%, 더욱 바람직하게는, 75% 내지 95%이다.

바람직하게는, 출구 채널은 출구 격실 개구를 갖는 출구 격실 내로 개방된다. 이것은, 바람직하게는, 채널 및 개구의 입구를 제외하고, 압력 및 유체 손실에 대비해 폐쇄되는 배양 트레이의 일단부에 그의 종축을 따라 형성된 공간이며, 이는 캐리어와 접촉하지 않고 배양 트레이가 적절히 기울어졌을 때, 배양 트레이에 담긴 유체를 수집할 수 있다. 출구 격실 개구는 추출 장치, 바람직하게는, 추출 후드가 착탈 가능하게 또는 고정되어 설치될 수 있도록 설계된다. 출구 격실의 베이스는 격실 내로의 유체 유동을 지원하기 위해 적어도 부분적으로 오목부의 베이스의 평면 아래에 놓일 수 있다. 본원에서 사용한 바와 같이, "추출 후드"란 용어는 가요성 재료, 예를 들어 고무 또는 플라스틱 흡인 컵으로 제조된, 적어도 베이스 상의 둥근 하부로 이해하는 것이 바람직하며, 추출 후드는, 이를 통해 압력이 가해지는 배출 라인이 형성된 개구 상에 압력 밀봉되는 방식으로 결합된다.

베이스의 평면으로부터 진행하여, 출구 채널의 개구는, 이 개구의 적어도 일부, 바람직하게는, 전체 개구가 배양 트레이를 채우는, 보다 바람직하게는, 캐리어가 유체로 꼭 완전히 덮일 때까지 채우는 유체의 표면 아래에 놓이도록 수직으로 배열된다. 개구는 바람직하게는, 베이스 상에 배치된다. 이것은 유체가 개구의 방향으로 움직이도록 트레이가 기울어졌을 때, 표면에 부착되어 있는 잔류물을 제외하고, 배양 트레이에 배치된 모든 유체가 빠져나갈 수 있는 경우이다.

바람직한 일 실시예에서, 출구 채널에는 바람직하게는, 오목부 내의 유체가 인출되도록 하는 크기로 된 부압이 작용한다. 유체가 인출되는 전달 속도는 0.1 l/분 내지 10 l/분, 바람직하게는, 0.2 l/분 내지 5 l/분, 더욱 바람직하게는, 0.3 l/분 내지 3 l/분 일 수 있다. 예를 들어, 다이어프램 펌프, 기어 펌프, 피스톤 펌프 또는 연동 펌프 같은 통상적인 장치를 흡인을 위해 사용할 수 있다. 유체의 흡인은 연속적으로 또는 불 연속적으로 일어날 수 있다. 바람직한 일 실시예에서, 흡인은 연속적으로 일어나며, 다시 말해, 대부분의 유체는, 예를 들어 배양 과정의 끝에서 갑자기가 아닌, 오히려 다단계로 인출된다. 특히 바람직하게는, 유체 내에서 캐리어의 배양을 포함하는 방법 중 하나의 단계에서, 유체는 배양 트레이의 일단부에서 동시에 도입되고, 하나 이상의 시점에, 바람직하게는, 적어도 10, 20, 30, 60, 120, 300, 600초, 10, 15, 20 또는 30분 동안 배양 트레이의 타단부에서 인출된다. 이런 식으로 캐리어는 사용하지 않은 신선한 액체에만 접촉한다. 이는 캐리어 또는 생체 시료의 처리를 가속화한다. 또 다른 바람직한 실시예에서, 유체가 도입된 후에, 유체가 제거되기 전에, 캐리어는 초기에, 바람직하게는, 적어도 10, 20, 30, 60, 120, 300초, 10, 15 또는 30분 동안 그 안에서 배양된다.

배양 트레이는 유체, 바람직하게는, 수성 유체, 보다 바람직하게는, 캐리어 상의 시료를 처리하기 위한 세척 완충액 또는 시약으로 채워질 수 있다. 유체의 체적은 생체 시료가 그와 충분히 접촉하도록 하는 크기로 되어 있다. 바람직한 일 실시예에서, 배양 트레이 내의 유체의 체적은 유체가 수평 위치에서 캐리어 및 그 위에 있는 시료를 완전히 덮도록 하는 크기로 되어 있다. 또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이 내 유체의 체적은 유체가 베이스를 향하는 캐리어의 측면 상에 위치된 시료를 완전히 덮도록 하는 크기로 되어 있다. 또 다른 바람직한 실시예에서, 배양 트레이 내의 유체의 체적은 배양 중에 배양 트레이가 피봇될 때, 시료를 연속적으로가 아닌, 오히려 규칙적으로 습윤시키도록 하는 크기로 되어 있다. 비특이적 세척 완충액, 예를 들어 PBS, 또는 신호를 발생시키는 용액 같은 간단히 이용가능한 용액을 많이 사용할 수 있지만, 사용자는 절대적으로 필요한 최소량의 다른 용액, 예컨대, 항체, 특히 1 차 항체 같은 작은 체적에서 이용 가능하며 얻기가 힘든 시약을 사용하는 것으로 제한된다.

선택적으로, 배양 트레이는 입구 채널을 포함한다. 이 채널은 유체의 유입에 대한 폐쇄 수단이며, 압력 밀봉되도록 설계할 필요는 없다. 상기 유입은 배양 트레이 내로 직접 또는 입구 격실 내의 입구 격실 개구를 통해, 바람직하게는, 배양 시료의 끝에서 종축을 따라, 바람직하게는, 출구 격실의 대향 단부에서 일어날 수 있다. 들어오는 유체 방울에 의해 발생된 국부적인 압력을 감소시키기 위해, 입구 격실의 베이스는 적어도 부분적으로 오목부의 베이스의 평면 아래에 놓일 수 있다.

배양 트레이는 유체가 혼합되고 캐리어에 대한 그의 노출이, 예를 들어 피봇, 진동, 흔들림 등에 의해 촉진되도록 이동할 수 있는 것이 바람직하다. 바람직한 일 실시예에서, 배양 트레이는 이 배양 트레이의 횡축을 중심으로 피봇 가능하므로, 유체는 배양 트레이의 종방향 단부에 놓이는 하부의 방향으로 이동한다. 피봇 상태에서, 특히 출구 개구가 종방향 단부에 위치되고 출구 채널 개구가 그의 베이스 상에 배치되는 경우, 유체는 특히 간단하고 효율적으로 제거된다. 피봇 동안, 배양 트레이는 베이스 표면과 1도 내지 45도, 바람직하게는, 2.5도 내지 30도, 보다 바람직하게는, 7.5도 내지 25도의 각을 형성한다.

예시적인 실시예를 바탕으로 도면을 참조하여 이하에서 본 발명을 설명한다. 설명한 실시예들은 모든 면에서 단지 예시일뿐이고, 제한하는 것으로 생각해서는 안되며, 언급한 특징의 상이한 조합들은 본 발명의 범위에 포함된다.

도 1은 그 안에 배치된 배양 트레이(2)를 포함하는 하부(1)를 구비하는 본 발명에 따른 장치를 도시하며, 배양 트레이는 오목부(3), 출구 격실 상의 추출 후드(4), 및 입구 격실 내로 연결되는 입구 채널(5)을 구비한다.
도 2a는 하부(1) 및 오목부(3)를 구비하는 배양 트레이(2)를 포함하는 본 발명에 따른 장치를 위에서 본 것을 도시한다. 검은 색 바는 도 2b에 도시된 장치의 단면이 절단된 지점을 표시한다.
도 2b는 검은 색 바의 도움으로 도 2a에 표시한 지점에서, 배양 트레이(2)를 통해 본 발명에 따른 장치의 단면을 도시한다. 배양 트레이의 종축을 따라 일단부에는 출구 채널(6)을 통해 유체(7)로 채워진 오목부에 연결되는 출구 격실(8)이 배치된다. 유체는 부압을 가함으로써 추출 후드(4)에 배치된 배출 라인(13)을 통해 출구 격실로부터 인출될 수 있다. 유체는 입구 채널(5)을 통해 입구 격실(11)내에 도입될 수 있다. 입구 채널(5) 및 출구 채널(6)은 각각, 입구 격실 개구(10) 또는 출구 격실 개구(9)의 형태로 오목부 내로 개방된다. 생체 시료를 포함하는 캐리어(12)가 유체에 침지된다. 도 2b에서, 입구 격실(11)의 베이스는 오목부의 베이스의 평면 아래에 놓여 있다.
도 3의 상이한 하위 도면들은 하부(1, 14)를 포함하는 본 발명에 따른 장치의 상호 작용을 도시하며, 상부(15)는 하부와 정합된다. 도 3a에는 하부만 도시되어 있다.
도 3b에서, 하부는 한 세트의 추출 후드(4) 및 한 세트의 입구 채널(5)과 함께 도시되어 있다.
도 3c는 상부(15) 및 하부(14)를 도시하며, 여기서 상부는 출구 후드 및 입구 채널을 구비하며, 이들은 출구 격실 개구 및 입구 격실 개구에 결합될 수 있도록 각각 배열된다.
도 3d는 상부(15)가 하부(14) 상에 결합된 것을 제외하고는 도 3c와 동일한 본 발명에 따른 장치를 도시한다.
도 4a는 유체(7)로 채워지고 생체 시료를 포함하는 캐리어(12)가 구비된 오목부(3)를 갖는 배양 트레이(2)를 도시한다. 시료(16)는 배양 트레이의 베이스를 향하는 그의 측면에서 캐리어 상에 배치된다. 캐리어는 특히 배양 트레이가 횡축(회전축에 평행함, 도시 생략)을 중심으로 회전축(17)을 통해 피봇됨으로써 종축을 따라 배양 트레이 내에서 전후로 이동할 수 있다. 캐리어는 2 개의 발을 통해 베이스 위에 서 있으며, 발은 유체가 종축을 따라 유동할 수 있도록 설계되어 있다.
도 4b는 횡축을 중심으로 피봇된 후의 동일한 장치를 도시한다. 생체 시료(16)를 포함하는 캐리어(12)는 유체와 함께 중력 하에서 배양 트레이의 오목부의 종방향 단부까지 이동하며, 여기서 캐리어는 오목부의 종방향 단부에 갭 없이 맞닿는다 (이중 화살표로 표시). 유체는 오목부 또는 하방으로 피봇되는 배양 트레이의 종방향 단부에 수집된다.
도 4c는 이러한 상황에서 캐리어와, 배양 트레이의 베이스 및 벽이 채널을 형성하고, 이를 통해 출구 격실에 부압이 가해질 때, 유체는 출구 채널(6)을 통해 특히 효율적으로 인출될 수 있다. 채널을 통한 유체의 유동은 하나의 화살표를 사용하여 표시하였다. 종방향 단부에는 유체가 남아 있지 않게 된다.

1: 하부를 포함하는 장치
2: 배양 트레이
3: 오목부
4: 추출 후드
5: 입구 채널
6: 출구 채널
7: 유체
8: 출구 격실
9: 출구 격실 개구
10: 입구 격실 개구
11: 입구 격실
12: 생체 시료를 포함한 캐리어
13: 배출 라인
14: 하부
15: 상부
16: 시료
17: 회전축

Claims

배양 트레이의 벽에 의해 형성된 오목부를 가지며, 베이스를 포함하는 배양 트레이에 있어서,
상기 배양 트레이는 상기 오목부의 하나 이상의 종방향 단부에 액체를 인출하기 위한 수단을 포함하고,
상기 오목부의 종방향 단부 상의 출구 채널 내로, 상기 배양 트레이의 벽 내로 개방되는 개구를 포함하며, 상기 개구 및 상기 출구 채널은 부압이 가해지도록 설계되고,
상기 배양 트레이는 이 배양 트레이의 횡축을 중심으로 피봇 가능하며,
상기 배양 트레이는 캐리어를 구비하며,
상기 배양 트레이는 캐리어의 하부측과 오목부의 베이스 간의 분리상태를 고정하기 위한 수단을 포함하며,
상기 분리상태를 고정하기 위한 수단은 베이스에 의해 바닥에서, 캐리어의 하부에 의해 상부에서, 그리고 벽에 의해 측면에서 폐쇄되는 별도의 격실을 형성하는 것을 달성하며,
흡인 수단은 상기 베이스 상의 유체가 인출되도록 하고, 출구 채널 내로 개방되고 상기 배양 트레이의 베이스 상에 배치되는 개구부로 형성되며,
상기 캐리어는 상기 배양 트레이의 베이스를 향하는 캐리어의 측면에서, 상기 캐리어 상에 위치되는 생체 시료를 포함하는 배양 트레이.
제 1항에 있어서,
상기 부압은 상기 출구 채널을 통해 가해지는 배양 트레이.
삭제
제 1항에 있어서,
상기 배양 트레이는 출구 채널 내로 개방되는 개구를 갖고, 이 개구는 상기 베이스의 평면 또는 그 아래에서 연장되는 출구 채널 내로 개방되며, 상기 출구 채널은 상기 오목부로부터 분리되고 출구 격실 개구를 갖는 출구 격실과 인접해 있는 배양 트레이.
삭제
제 1항에 있어서,
유체를 함유하고, 상기 배양 트레이는 출구 채널 내로 개방되는 개구를 갖고, 상기 유체의 표면은, 상기 개구 위에 놓이는 배양 트레이.
제 1항에 있어서,
상기 배양 트레이가 상기 캐리어를 구비하는 경우, 상기 캐리어가 상기 오목부 내에서 배양 트레이의 종축을 따라 전후로 이동하도록, 상기 캐리어와 상기 배양 트레이가 서로 정합되는 배양 트레이.
제 1항에 있어서,
입구 채널 내로, 상기 오목부와 분리된 입구 격실에 인접해 있는 상기 배양 트레이의 벽내로 개방되는 개구를 더 포함하고, 상기 입구 격실은 입구 격실 개구를 갖고,
상기 입구 채널은, 상기 배양 트레이의 종축을 따라 상기 베이스의 평면 또는 그 아래에서 연장되는 배양 트레이.
제 8항에 있어서,
상기 오목부의 종방향 일단부에 상기 배양 트레이의 종축을 따라 출구 채널 내로 개방되는 개구를 포함하고, 상기 오목부의 종방향 타단부에 입구 채널 내로 개방되는 개구를 갖는 배양 트레이.
제 4항에 있어서,
출구 격실 개구에 착탈 가능하게 결합되고 부압이 가해지도록 하는 배출 라인을 포함하는 추출 후드를 더 포함하는 배양 트레이.
제 7항에 있어서,
상기 캐리어는 이동 중에 상기 오목부의 종방향 일단부까지 이동되어, 상기 오목부의 종방향 단부에 갭 없이 맞닿는 배양 트레이.
하부와 추출 후드를 구비하는 프레임 형상 상부를 포함하는 장치에 있어서,
상기 하부는 제 10항에 기재된 하나 이상의 출구 격실 개구를 각기 갖는 배양 트레이들을 포함하고,
상기 하부 및 상부는 각각 추출 후드가 각 출구 격실 개구에 맞는 방식으로 상기 상부가 상기 하부에 놓여지도록 상기 하부와 상부가 서로 정합되는 장치.
캐리어를 배양하는 방법에 있어서,
a) 배양 트레이의 벽에 의해 형성된 오목부를 갖고, 베이스를 포함하는 배양 트레이의 오목부에서 유체의 존재시에 캐리어를 배양하는 단계와;
b) 부압하에서 출구 채널 내로 개방되는 개구를 통해, 오목부의 종방향 일단부에서 유체를 인출하는 단계를 포함하고;
상기 개구는 상기 오목부의 종방향 단부에, 상기 배양 트레이의 베이스에 배치되며,
상기 배양 트레이는 제 1항 또는 제2항 또는 제4항 또는 제6항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 기재된 배양 트레이 또는 제 12 항에 기재된 배양 장치의 배양 트레이인 방법.
제 13항에 있어서,
상기 배양 트레이는 상기 배양 트레이의 횡축을 중심으로 피봇 가능하고, 상기 단계 a) 및 b) 중 적어도 하나의 단계가 피보팅 동안 수행되는 방법.
제 14항에 있어서,
상기 단계 b)는 유체가 상기 배양 트레이의 종방향 단부에 수집되고, 가능한 한 최대량으로 상기 유체가 인출되도록 배양 트레이가 피봇되고,
캐리어가 상기 오목부의 종방향 단부까지 이동하고, 상기 오목부의 종방향 단부에 갭 없이 맞닿는 순간에 수행되는 방법.