KR102185268B1 - Device and method for manufacturing multi-layer bio-scaffold using 3D printing - Google Patents
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Abstract
본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치는, 밀폐 구조를 갖는 케이스와; 상기 케이스 내에 구비되어 PCL 액적을 분사하는 마이크로 노즐과; 상기 케이스 내에서 상기 마이크로 노즐과 일정 거리 이격되게 배치되어 상기 마이크로 노즐에서 분사된 PCL 액적에 의해 나노 섬유층이 형성되는 수집기와; 상기 케이스의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐에 PCL 용액을 제공하는 고정밀 주입펌프와; 상기 케이스의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐과 수집기 사이에 고전압을 인가하여 전위차를 발생시키는 고전압 전원공급장치와; 상기 케이스 내에 구비되어 상기 마이크로 노즐과 수집기 사이에서 형성되는 나노 섬유층을 모니터링 하는 레이저 시각화 장치를 포함하여 구성됨으로써, 바이오 스캐폴드를 보다 안정적이고 내구성 있게 제작할 수 있다.The apparatus for manufacturing a multi-layered bio-scaffold using 3D printing according to the present invention includes a case having a sealed structure; A micro nozzle provided in the case for spraying PCL droplets; A collector disposed in the case to be spaced apart from the micro-nozzle by a predetermined distance so as to form a nanofiber layer by the PCL droplets sprayed from the micro-nozzle; A high-precision injection pump disposed inside or outside the case to provide a PCL solution to the micro-nozzle; A high voltage power supply device disposed inside or outside the case and applying a high voltage between the micro nozzle and the collector to generate a potential difference; By including a laser visualization device provided in the case to monitor the nanofiber layer formed between the micro nozzle and the collector, the bioscaffold can be manufactured more stably and durable.
Description
본 발명은 의료 분야에서 이용되는 바이오 스캐폴드 제작 장치 및 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a bio-scaffold manufacturing apparatus and method used in the medical field.
일반적으로 바이오 스캐폴드(bioscaffold)는 주로 의료 분야에서 뼈 또는 연골 재생에 사용된다. 또한, 바이오 스캐폴드는 피부 또는 조직의 재생뿐만 아니라 3D 프린팅에 의한 장기 재생에도 광범위하게 사용되고 있다.In general, a bioscaffold is mainly used in the medical field for bone or cartilage regeneration. In addition, bio-scaffolds are widely used not only for skin or tissue regeneration, but also for organ regeneration by 3D printing.
조직학 스캐폴드의 설계 및 제작에는 성공적인 세포 성장을 위한 재료 과학, 생화학 및 생명 과학 분야의 상호간의 지식이 요구된다. 생체 재료로 구성된 인공 조직 스캐폴드의 사용은 점점 더 많은 연구 주제가 되어 왔으며 지난 수십 년 동안 많은 연구가 수행되었다.The design and fabrication of histological scaffolds requires mutual knowledge in materials science, biochemistry and life sciences for successful cell growth. The use of artificial tissue scaffolds made of biomaterials has become the subject of more and more research, and many studies have been conducted in the last decades.
많은 연구들이 혈관 조직 공학, 조직 결함 개선 및 조직 재생에서 수행되어왔다. 바이오 스캐폴드의 소재로 이용하기 위해서는, 그 소재가 어떠한 생물학적 교란을 일으키지 않고 치료 또는 진단 목적을 위해 생물학적 시스템과 상호 작용해야한다. 생체 물질(소재)은 좋은 생체 적합성을 위해 높은 표면적 대 부피 비율을 제공해야한다.Many studies have been conducted in vascular tissue engineering, tissue defect improvement and tissue regeneration. In order to be used as a material for a bioscaffold, the material must interact with biological systems for therapeutic or diagnostic purposes without causing any biological disturbances. Biomaterials (materials) must provide a high surface area to volume ratio for good biocompatibility.
나노 섬유 기반 바이오 스캐폴드는 높은 표면적 대 부피 비율로 인해 생체 적합성 바이오 스캐폴드로 사용되고 있다.Nanofiber-based bioscaffolds are being used as biocompatible bioscaffolds due to their high surface area to volume ratio.
이러한 나노 섬유 기반 바이오 스캐폴드는 전기 방사법(Electrospinning, ES)과 3D 인쇄 기술을 이용하여 제작된다.These nanofiber-based bioscaffolds are fabricated using electrospinning (ES) and 3D printing technology.
전기 방사법은 고분자 나노 섬유 제조를 위한 효율적인 기술이다. 최근 몇 년 동안, 다양한 바이오 폴리머는 다양한 용매 용액에서 성공적으로 전기 방사되었다. 전기 방사법을 이용한 바이오 스캐폴드의 제조는 PCL 및 PLA와 같은 생분해성 재료를 사용하여 가능하게 된다. 이러한 생체 적합 물질은 세포 부착과 세포 증식을 증가시킨다. 그러나, 나노 섬유의 다공성으로 인하여 기계적 강도가 떨어지므로 실용화에는 한계가 있다.Electrospinning is an efficient technology for manufacturing polymer nanofibers. In recent years, various biopolymers have been successfully electrospun in various solvent solutions. The fabrication of bioscaffolds using electrospinning is made possible using biodegradable materials such as PCL and PLA. These biomaterials increase cell adhesion and cell proliferation. However, due to the porosity of the nanofibers, mechanical strength is lowered, so there is a limit to practical use.
한편, 3D 인쇄 기술은 제조의 새로운 시대를 열고 있고, 프로토 타입 제작의 빠른 방법으로 인해 생명 공학 응용 분야에도 사용되고 있다. FDM(Fused Deposition Modeling) 및 FFF(Fused Filament Fabrication)는 가장 효율적이고 널리 사용되는 3D 인쇄 프로세스이다. FDM을 사용하여, 용융된 물질, 전형적으로 열가소성 중합체를 선택적으로 증착시킴으로써 생체 물질 기반의 대상물을 제조할 수 있게 되었다.On the other hand, 3D printing technology is opening a new era of manufacturing and is also being used in biotechnology applications due to the rapid method of making prototypes. Fused Deposition Modeling (FDM) and Fused Filament Fabrication (FFF) are the most efficient and widely used 3D printing processes. Using FDM, it has become possible to fabricate biomaterial-based objects by selectively depositing molten materials, typically thermoplastic polymers.
그러나, 상기한 바와 같이 바이오 스캐폴드 제조 장치 및 방법은, 바이오 스캐폴드를 안정적이고 내구성 있게 제작하는데 한계가 있는 문제점이 있다.However, as described above, the bio-scaffold manufacturing apparatus and method has a problem in that there is a limitation in stably and durable manufacturing of the bio-scaffold.
또한, 바이오 스캐폴드를 제작하는 소재로는 생체친화 및 생체흡수형 소재로서 합성고분자 화합물인 PCL, PLA, PLGA 등이 많이 사용되고 있으나, 이중 PCL은 생체흡수는 잘되나, 내구성이 약하고, PLA 등은 내구성은 좋으나 생체흡수가 어려운 문제점이 있다.In addition, PCL, PLA, and PLGA, which are synthetic polymer compounds, are widely used as bio-friendly and bioabsorbable materials as materials for making bioscaffolds, but PCL has good bioabsorption but low durability, and PLA, etc. Although durability is good, there is a problem in that it is difficult to absorb the living body.
이상 설명한 배경기술의 내용은 이 건 출원의 발명자가 본 발명의 도출을 위해 보유하고 있었거나, 본 발명의 도출 과정에서 습득한 기술 정보로서, 반드시 본 발명의 출원 전에 일반 공중에게 공개된 공지기술이라 할 수는 없다.The contents of the background technology described above are technical information that the inventor of this application possessed for derivation of the present invention or acquired during the derivation process of the present invention, and must be known to the general public prior to filing the present invention. I can't.
본 발명은 상기한 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 바이오 스캐폴드를 보다 안정적이고 내구성 있게 제작할 수 있는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치 및 방법을 제공하는 데 목적이 있다.The present invention has been conceived to solve the above problems, and an object of the present invention is to provide an apparatus and method for manufacturing a multi-layer bio-scaffold using 3D printing capable of producing a bio-scaffold more stable and durable.
상기한 과제를 실현하기 위한 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치는, 밀폐 구조를 갖는 케이스와; 상기 케이스 내에 구비되어 PCL 액적을 분사하는 마이크로 노즐과; 상기 케이스 내에서 상기 마이크로 노즐과 일정 거리 이격되게 배치되어 상기 마이크로 노즐에서 분사된 PCL 액적에 의해 나노 섬유층이 형성되는 수집기와; 상기 케이스의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐에 PCL 용액을 제공하는 고정밀 주입펌프와; 상기 케이스의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐과 수집기 사이에 고전압을 인가하여 전위차를 발생시키는 고전압 전원공급장치와; 상기 케이스 내에 구비되어 상기 마이크로 노즐과 수집기 사이에서 형성되는 나노 섬유층을 모니터링 하는 레이저 시각화 장치를 포함한 것을 특징으로 한다.An apparatus for manufacturing a multi-layered bio-scaffold using 3D printing according to the present invention for realizing the above object includes a case having a sealed structure; A micro nozzle provided in the case for spraying PCL droplets; A collector disposed in the case to be spaced apart from the micro-nozzle by a predetermined distance so as to form a nanofiber layer by the PCL droplets sprayed from the micro-nozzle; A high-precision injection pump disposed inside or outside the case to provide a PCL solution to the micro-nozzle; A high voltage power supply device disposed inside or outside the case and applying a high voltage between the micro nozzle and the collector to generate a potential difference; It characterized in that it comprises a laser visualization device that is provided in the case to monitor the nanofiber layer formed between the micro-nozzle and the collector.
상기 케이스는, 장방형 구조를 갖는 프레임과, 상기 프레임으로 구성되는 면에 조립되되, 적어도 일부는 내부가 보이는 투명 소재로 이루어진 밀폐판을 포함하는 것이 바람직하다.It is preferable that the case includes a frame having a rectangular structure, and a sealing plate made of a transparent material, at least partially being assembled on a surface composed of the frame.
상기 케이스 내부에는 수직으로 세워지는 노즐 지지대와, 상기 노즐 지지대에 구비되어 상기 마이크로 노즐의 높이를 조절하는 노즐 높이 조절장치가 구비된 것이 바람직하다.It is preferable that a nozzle support stand vertically erected in the case, and a nozzle height adjusting device that is provided on the nozzle support and adjusts the height of the micro nozzle.
상기 레이저 시각화 장치는, 상기 마이크로 노즐에서 분사된 액적에 의해 형성되는 나노 섬유에 레이저를 조사하는 다이오드 레이저와, 상기 다이오드 레이저에서 조사된 빛이 나노 섬유에 부딪힌 다음 산란된 빛을 촬영하는 카메라를 포함하는 것이 바람직하다. The laser visualization device includes a diode laser for irradiating a laser to nanofibers formed by droplets sprayed from the micro nozzle, and a camera for photographing scattered light after light irradiated by the diode laser hits the nanofibers It is desirable to do.
상기 레이저 시각화 장치는 상기 케이스 내에 구비된 위치조절장치에 의해 위치 조절이 가능하도록 구성되는 것이 바람직하다.It is preferable that the laser visualization device is configured to enable position adjustment by a position adjusting device provided in the case.
상기 수집기는, 전동 모터에 의해 회전하는 방사축이 구성되고, 상기 방사축은 접지 단자와 스프링을 통해 전기적으로 연결되게 구성될 수 있다.The collector may be configured to have a radial shaft rotating by an electric motor, and the radial shaft may be configured to be electrically connected through a ground terminal and a spring.
또한, 상기한 과제를 실현하기 위한 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 방법은, 3D 프린터로 PLA(Poly Lactic Acid) 플랫폼을 인쇄하여 제작하는 제 1 단계와; 상기 제 1 단계에서 제작된 PLA 플랫폼을 상기한 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치에 투입하는 제 2 단계와; 상기 제 2 단계 후에, 상기 PLA 플랫폼의 양쪽면에 PCL 소재를 방사하여 나노 섬유층을 형성하는 제 3 단계를 포함한 것을 특징으로 한다.In addition, the method of manufacturing a multilayer bioscaffold using 3D printing according to the present invention for realizing the above-described problems includes: a first step of printing a PLA (Poly Lactic Acid) platform with a 3D printer; A second step of injecting the PLA platform produced in the first step into the multilayer bioscaffold fabrication apparatus using the 3D printing; After the second step, it characterized in that it comprises a third step of forming a nanofiber layer by spinning the PCL material on both sides of the PLA platform.
또한, 상기 3D 프린터는 FDM 방식의 3D 프린터를 이용하는 것을 특징으로 한다.In addition, the 3D printer is characterized by using an FDM type 3D printer.
또한, 상기 PCL 소재 농도는 2 내지 8 중량%로 설정되고, 상기 PCL을 용매로서 클로로포름 및 디클로로 메탄(DCM)의 조합에 의해 7:3의 비율로 분말 형태로 용해시켜 사용하는 것을 특징으로 한다.In addition, the PCL material concentration is set to 2 to 8% by weight, and the PCL is dissolved in a powder form at a ratio of 7:3 by a combination of chloroform and dichloromethane (DCM) as a solvent.
또한, 상기 PLA 플랫폼은 메쉬 구조로 구성되는 것을 특징으로 한다.In addition, the PLA platform is characterized in that consisting of a mesh structure.
상기한 바와 같은 본 발명의 주요한 과제 해결 수단들은, 아래에서 설명될 '발명의 실시를 위한 구체적인 내용', 또는 첨부된 '도면' 등의 예시를 통해 보다 구체적이고 명확하게 설명될 것이며, 이때 상기한 바와 같은 주요한 과제 해결 수단 외에도, 본 발명에 따른 다양한 과제 해결 수단들이 추가로 제시되어 설명될 것이다.The main problem solving means of the present invention as described above will be described more specifically and clearly through examples such as'specific details for the implementation of the invention' to be described below or the attached'drawings' In addition to the main problem solving means as described above, various problem solving means according to the present invention will be further presented and described.
본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 및 이를 제작하는 방법은 전기 방사법과 3D 프린팅법을 결합하여 복합 소재로 다층 구조로 제작하기 때문에 우수한 세포 성장 환경을 제공하면서 나노 섬유 기반 스캐폴드보다 더 높은 기계적 강도를 가질 수 있는 효과를 제공한다.The multilayer bioscaffold using 3D printing and the method of manufacturing the same according to the present invention are produced in a multilayer structure with a composite material by combining the electrospinning method and the 3D printing method, providing an excellent cell growth environment while providing a better environment than the nanofiber-based scaffold. It provides an effect that can have high mechanical strength.
특히, 본 발명은 바이오 스캐폴드를 보다 안정적이고 내구성 있게 제작할 수 있는 효과를 제공한다.In particular, the present invention provides an effect of making a bio-scaffold more stable and durable.
도 1은 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드가 도시된 개략적인 사시도이다.
도 2는 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드를 제작하기 위한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치가 도시된 사시도이다.
도 3은 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드를 제작하기 위한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치에서 수집기의 다른 실시예를 보여주는 정면도이다.
도 4는 본 발명에서 전압에 따라 나노 섬유가 형성되는 상태를 보인 사진들이다.
도 5는 본 발명에 따른 다층 바이오 스캐폴드의 확대 사진 및 나노 섬유 사진이다.
도 6은 본 발명에 따른 나노 섬유층의 SEM 이미지들이다.
도 7은 본 발명에서 전압에 따른 나노 섬유층의 균일성을 보여주는 도면들이다.
도 8은 본 발명에 따라 PLA 플랫폼에 나노 섬유층이 형성되는 구조를 보여주는 개략도이다.1 is a schematic perspective view showing a multi-layered bio-scaffold using 3D printing according to the present invention.
2 is a perspective view showing a multi-layer bio-scaffold manufacturing apparatus for manufacturing a multi-layer bio-scaffold using 3D printing according to the present invention.
3 is a front view showing another embodiment of a collector in the apparatus for manufacturing a multilayer bioscaffold for manufacturing a multilayer bioscaffold using 3D printing according to the present invention.
4 are photographs showing a state in which nanofibers are formed according to voltage in the present invention.
5 is an enlarged photograph and a photograph of a nanofiber of a multilayer bioscaffold according to the present invention.
6 is SEM images of the nanofiber layer according to the present invention.
7 is a diagram showing the uniformity of the nanofiber layer according to the voltage in the present invention.
8 is a schematic diagram showing a structure in which a nanofiber layer is formed on a PLA platform according to the present invention.
첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시 예를 설명하면 다음과 같다.A preferred embodiment of the present invention will be described with reference to the accompanying drawings.
도 1은 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드가 도시된 개략적인 사시도이다.1 is a schematic perspective view showing a multi-layered bio-scaffold using 3D printing according to the present invention.
도 1을 참조하면, 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드는 플랫폼으로서 PLA(Poly Lactic Acid) 소재를 이용하여 3D 프린터로 PLA 플랫폼(10)을 제작하고, 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30)를 이용하여 PLA 플랫폼(10)의 양면에 PCL과 콜라겐 혼합물을 전기 방사시켜 나노 섬유층(20)을 형성하는 구조로 이루어진다.Referring to FIG. 1, the multilayer bioscaffold using 3D printing according to the present invention uses a PLA (Poly Lactic Acid) material as a platform to produce a
본 발명의 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드를 제조하는 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30)에 대하여 설명한다.A multilayer
본 발명에 따른 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30)는, 도 2를 참조하면, 밀폐 구조를 갖는 케이스(43)와, 상기 케이스(43) 내에 구비되어 PCL 액적을 분사하는 마이크로 노즐(41)과, 상기 케이스(43) 내에서 상기 마이크로 노즐(41)과 일정 거리 이격되게 배치되어 상기 마이크로 노즐(41)에서 분사된 PCL 액적에 의해 나노 섬유층이 형성되는 수집기(39)와, 상기 케이스(43)의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐(41)에 PCL 용액을 제공하는 고정밀 주입펌프(33)와, 상기 케이스(43)의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐(41)과 수집기(39) 사이에 고전압을 인가하여 전위차를 발생시키는 고전압 전원공급장치(31)와, 상기 케이스(43) 내에 구비되어 상기 마이크로 노즐(41)과 수집기(39) 사이에서 형성되는 나노 섬유층을 모니터링 하는 레이저 시각화 장치(38)를 포함하여 구성된다.The multilayer
상기 케이스(43)는, 장방형 구조를 갖는 프레임(431)과, 상기 프레임(431)으로 구성되는 면에 조립되되, 적어도 일부는 내부가 보이는 투명 소재로 이루어진 밀폐판(433)을 포함하여 구성될 수 있다.The
이러한 케이스(43)는, 나노 섬유를 외부 교란으로부터 보호하기 위해 밀폐된 구조 내에 구성되는 것이 바람직하다.This
상기 마이크로 노즐(41)은 내경이 0.1 mm인 스테인리스 스틸 노즐 하나 또는 복수개로 이루어질 수 있으며, 나노 섬유를 형성할 수 있도록 구성되는 것이 바람직하다. The micro-nozzle 41 may be formed of one or a plurality of stainless steel nozzles having an inner diameter of 0.1 mm, and is preferably configured to form nanofibers.
상기 케이스(43) 내부에는 수직으로 세워지는 노즐 지지대(411)와, 상기 노즐 지지대(411)에 구비되어 상기 마이크로 노즐(41)의 높이를 조절하는 노즐 높이 조절장치(413)가 구비되는 것이 바람직하다.It is preferable that a
상기 고정밀 주입 펌프(33)는 용액을 가압하여 원하는 유속을 생성할 수 있도록 구성되는 것이 바람직하다.It is preferable that the high-
상기 고전압 전원 공급 장치(31)는 최대 전압 30 kV를 생성할 수 있는 전압 공급 장치로 구성되는 것이 바람직하다.It is preferable that the high
상기 레이저 시각화 장치(38)는, 상기 마이크로 노즐(41)에서 분사된 액적에 의해 형성되는 나노 섬유에 레이저를 조사하는 다이오드 레이저(37)와, 상기 다이오드 레이저(37)에서 조사된 빛이 나노 섬유에 부딪힌 다음 산란된 빛을 촬영하는 카메라(35)를 포함하여 구성될 수 있다. The
즉, 레이저 시각화 장치(38)는 나노 섬유 형성을 모니터링 하기 위해 카메라(35)와 다이오드 레이저(37)로 구성되어, 다이오드 레이저(37)가 나노 섬유에 부딪칠 때, 산란 된 빛을 카메라(35)에 의해 실시간으로 관찰할 수 있도록 구성되는 것이 바람직하다.That is, the
레이저 시각화 장치(38)는 상기 케이스(43) 내에 구비된 위치조절장치(381)에 의해 위치 조절이 가능하도록 구성되는 것이 바람직하다.It is preferable that the
따라서, 마이크로 노즐(41)에서 방사되어 제작된 나노 섬유는 접지 전극 쪽에 배치된 수집기(39) 즉, PLA 플랫폼(10)에 수집되고, 이 때 나노 섬유가 수집되는 모양은 완성된 바이오 스캐폴드의 모양을 결정하게 된다.Therefore, the nanofibers produced by spinning from the
또한, 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30)는 모니터링 제어 장치(45)에 연결되어, 고정밀 주입 펌프(33), 고전압 전원 공급 장치(31), 레이저 시각화 장치(38) 등을 제어함과 아울러, 레이저 시각화 장치(38)를 통해 확보된 정보를 디스플레이 할 수 있도록 구성되는 것이 바람직하다.In addition, the multilayer
한편, 도 3은 본 발명에 따른 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드를 제작하기 위한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치에서 수집기의 다른 실시예를 보여주는 정면도이다.Meanwhile, FIG. 3 is a front view showing another embodiment of a collector in the apparatus for manufacturing a multilayer bioscaffold for manufacturing a multilayer bioscaffold using 3D printing according to the present invention.
도 3을 참조하면, 본 발명의 다른 실시예에 따른 수집기는 도 2를 통해 설명하였던 수집기(39)와 달리, 맨드릴(mandrel) 타입으로 구성된 것으로, 한쪽 지지대(399)에 전동 모터(398)가 지지되고, 이 전동 모터(398)에 의해 회전하는 방사축(394) 및 이 방사축(394)을 둘러싸고 있는 절연축(396)이 구성된다.Referring to FIG. 3, the collector according to another embodiment of the present invention is configured in a mandrel type, unlike the
특히, 방사축(394)은 상기한 마이크로 노즐(41)과 대전되도록 도체로 구성되고, 접지 단자(390)와 스프링(392)으로 연결되어, 마이크로 노즐(41)과 대향되는 접지 전극을 구성하게 된다. 이때 스프링(392)은 기본적으로 방사축(394)과 접지 단자(390)를 전기적으로 연결하는 기능을 수행한다. 또한 스프링(392)은 방사축을 당겨서 가압하는 기능을 수행함과 아울러, 전동 모터(398))에 의해 회전하는 방사축(394)의 회전력을 감속, 즉 완만하게 하는 기능을 수행할 수 있고, 또 모터 회전에 따라 발생할 수 있는 회전 충격도 완화시킬 수 있는 기능을 수행할 수 있다.In particular, the
이와 같은 도 3에 예시된 수집기는 방사축(394) 둘레에 앞서 설명한 PLA 플랫폼(10)을 드럼 등을 통해 둥글게 배치한 상태에서 상기 마이크로 노즐(41)에서 분사된 PCL 액적에 의해 나노 섬유층을 형성하게 된다.The collector illustrated in FIG. 3 forms a nanofiber layer by PCL droplets sprayed from the micro-nozzle 41 in a state in which the
다음, 3D 프린터는 FDM 방식의 3D 프린터를 이용할 수 있다. 물론 공지의 다른 종류의 3D 프린터를 이용하는 것도 가능하다.Next, the 3D printer can use an FDM type 3D printer. Of course, it is also possible to use other known 3D printers.
3D 프린터로 PLA 소재를 이용하여 대략 100μm 두께의 PLA 플랫폼(10)을 제작한다.Using a PLA material with a 3D printer, a
이와 같은 PLA 플랫폼(10)을 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30) 내에 투입하고, 전기 방사 방법으로 PLA 플랫폼(10)의 양면에 나노 섬유층(20)을 형성한다. 이때 3D 프린터로 인쇄된 PLA 플랫폼(10)은 기계적 강도를 제공하고 양쪽의 PCL 나노 섬유층(20)은 세포 성장 환경을 제공하게 된다. 증착된 PLA를 펨토초 레이저(femtosecond laser)를 이용하여 제거하고, 마이크로 웰(microwells)을 형성시킬 수 있고, 이후의 세포 파종에 사용될 수 있게 된다.This
상기한 바와 같이 전기 방사와 3D 프린팅을 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 공정에 대해 설명한다.As described above, a process for fabricating a multilayer bioscaffold using electrospinning and 3D printing will be described.
다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30)를 이용하여 나노 섬유층(20)을 제작하는 재료는 PCL(polycaprolactone)인 것이 바람직하다. PCL은 바이오 스캐폴드에 일반적으로 사용되는 생분해성 물질이기 때문이다. 실험 프로세스 파라미터는 PCL 농도, 인가 전압, 유속 및 TCD(tip to contact distance) 등이다. The material for fabricating the
이때, PCL 농도는 2 내지 8 중량%로 설정할 수 있고, PCL을 용매로서 클로로포름 및 디클로로 메탄(DCM)의 조합에 의해 7 : 3의 비율로 분말 형태로 용해시켜 사용하는 것이 바람직하다. 그리고 균질한 섬유 크기를 생성하기 위해 첨가제로 소량의 NaCl을 첨가할 수 있다.At this time, the PCL concentration may be set to 2 to 8% by weight, and it is preferable to use PCL dissolved in a powder form in a ratio of 7:3 by a combination of chloroform and dichloromethane (DCM) as a solvent. And a small amount of NaCl can be added as an additive to produce a homogeneous fiber size.
도 4를 참조하면, 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30)의 노즐(41)에서 분사되는 PCL 액적은 실시간으로 레이저 시각화 장치(38)로 모니터링 된다. 전압이 0V이면, 도 4의 (a)에서와 같이 표면 장력에 의해 노즐(41) 끝단에 작은 액적이 관찰된다. 전압이 상승하게 되면(low voltage), 도 4의 (b)에서와 같이, 노즐(41) 끝단의 액적이 더 얇아지면서 나노 섬유의 불안정한 흐름을 형성하기 시작한다. 전압이 더 상승하게 되면(high voltage), 도 4의 (c)에서와 같이 나노 섬유가 안정화되고 연속적으로 나노 섬유가 생성된다.Referring to FIG. 4, PCL droplets sprayed from the
이와 같이 형성되는 나노 섬유의 크기 및 안정성은 농도, 전압, 유속 및 TCD와 같은 공정 매개 변수에 의해 결정된다. 전압은 농도를 제외한 결과에 대해 가장 민감한 매개 변수로 볼 수 있지만, 농도는 사전 최적화되어 공정에서 고정된 변수로 간주하는 것이 바람직하다.The size and stability of the nanofibers thus formed are determined by process parameters such as concentration, voltage, flow rate and TCD. Voltage can be seen as the most sensitive parameter for the results excluding concentration, but concentration is preferably pre-optimized and considered as a fixed variable in the process.
상기와 같은 나노 섬유층(20)을 3D 프린팅된 PLA 플랫폼(10)의 양면에 방사하여 형성한다. 이때 PLA 플랫폼(10)은 100 μm 두께로 형성하고, 나노 섬유층(20)은 50 μm 두께로 형성할 수 있다. PLA 플랫폼(10)과 그 양면에 나노 섬유층(20)이 구성된 바이오 스캐폴드는 나노 섬유층(20)이 PLA 플랫폼(10) 표면을 완전히 덮은 상태에서 세포 성장 영역을 형성하게 된다.The
이제, 본 발명에 따라 제작되는 바이오 스캐폴드의 구조에 대하여 설명한다.Now, the structure of the bioscaffold fabricated according to the present invention will be described.
PLA 플랫폼(10)은 상기한 바와 같이 3D 프린터로 제작된다. 이때 PLA 플랫폼(10)은 100 μm 정도의 두께로 형성할 수 있고, 일정한 면적을 갖는 시트 형상으로 제작된다.The
이러한 PLA 플랫폼(10)은 유연성을 제공하면서도 생체 물질 기반을 가질 수 있도록 강력한 기계적 베이스를 제공하는 메쉬 구조로 구성되는 것이 바람직하다. 즉, 실시 조건에 따라 적절한 메쉬 구조를 설계할 수 있는 것이다. 예를 들면, PLA 플랫폼(10)의 메쉬는 기계 강도와 메쉬 크기에 대해 45도 각도와 0도 각도로 구성될 수 있으며, 100 μm와 500 μm 사이에서 적절하게 형성할 수 있다. 롤링(rolling) 방향은 메쉬 구조 설계를 통해 미리 결정할 수 있다.This
나노 섬유층(20)은 3D 인쇄된 PLA 플랫폼(10)에 전기 방사되는 방법으로 형성되는 것이 바람직하다. The
바이오 스캐폴드는 전체적으로 200㎛ 정도의 두께를 가지도록 제작할 수 있고, 도 5의 (a)에 도시된 바와 같이 3개의 층으로 구성된다. 100μm의 두께를 갖는 PLA 플랫폼(10)이 중앙에 위치하고, PLA 플랫폼의 양쪽면에 50μm의 두께를 갖는 PCL 기반 나노 섬유층(20)이 덮힌 구조로 배치된다.The bio-scaffold can be manufactured to have a thickness of about 200 μm as a whole, and is composed of three layers as shown in FIG. 5(a). A
이러한 바이오 스캐폴드는 FDM 타입 3D 프린터로 제작된 PLA 플랫폼(10)으로서 상당히 큰 사이즈의 바이오 스캐폴드를 제작하더라도 충분한 기계적 강도를 제공할 수 있게 된다. 도 5의 (b)에 도시된 바와 같이 세포 파종 위치에 대해 펨토초 레이저를 사용하여 마이크로 웰(micro wells)을 형성할 수 있다.This bio-scaffold is a
그리고, PCL 나노 섬유층(20)은 도 5의 (c)에 도시된 바와 같이 형성되어 세포 성장 환경의 조성할 수 있게 된다.In addition, the
다음은 상기한 나노 섬유의 물성 및 특성을 정리하면 다음과 같다.The following summarizes the physical properties and properties of the above-described nanofibers.
세포 증식 및 세포 성장 환경을 위해, 6 wt% PCL을 6 wt% 콜라겐(collagen)과 혼합하여 구성할 수 있고, 이 PCL과 콜라겐 혼합물을 클로로포름과 메탄올의 비율이 7 : 3 인 용액에 녹여 구성할 수 있다. 추가로 나노 섬유의 크기가 균일해지도록 소량의 NaCl을 첨가하여 구성할 수 있다. For cell proliferation and cell growth environment, 6 wt% PCL can be mixed with 6 wt% collagen, and this PCL and collagen mixture is dissolved in a solution of chloroform and methanol in a ratio of 7:3. I can. In addition, a small amount of NaCl may be added to make the nanofibers uniform in size.
한편, 도 8을 참조하면, 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치(30)를 이용하여 나노 섬유층(20)을 형성할 때 노즐(41)과 PLA 플랫폼(10)이 위치되는 콜렉터 사이에 150mm의 거리를 갖도록 하고, 15kV의 전압을 제공했다. 이때 생성된 나노 섬유를 스캔 전자 현미경으로 관찰하였다.Meanwhile, referring to FIG. 8, when forming the
이때, 도 6에 나타낸 바와 같이, PCL과 콜라겐은 모두 균일하게 혼합되고, SEM 이미지에 의해 분리되게 관찰되지 않았다. 섬유 배향은 무작위로 형성되었고, 나노 섬유는 3D 인쇄된 PLA 플랫폼(10)의 표면에 완전히 접촉하여 형성되었다. PLA 플랫폼(10)으로 인해 다층 구조의 바이오 스캐폴드는 인장 강도 및 내구성뿐만 아니라 생체 적합성 세포 성장 환경을 포함하는 강력한 기계적 특성을 갖게 된다.At this time, as shown in FIG. 6, both PCL and collagen were uniformly mixed, and were not observed to be separated by SEM images. Fiber orientation was randomly formed, and the nanofibers were formed in full contact with the surface of the 3D printed
5kV보다 낮은 전압에서는 도 7의 (a)에서와 같이 많은 PCL 비드가 섬유와 혼합되었다. 그러나, 전압이 증가함에 따라, PCL 나노 섬유는 점차적으로 작아졌고, 더 적은 비드가 형성되었다. At a voltage lower than 5kV, many PCL beads were mixed with the fibers as shown in FIG. 7A. However, as the voltage increased, the PCL nanofibers gradually became smaller, and fewer beads were formed.
15kV의 전압을 제공할 때 도 7의 (b)에서와 같이 가장 좋은 결과가 발견되었다. 이 전압의 전기장 설정에서 가장 균일하고 균질한 나노 섬유가 생성된 것이다. 나노 섬유의 평균 크기는 5kV, 10kV 및 15kV인가 전압에서 각각 3.2μm, 2μm 및 1.2μm이었다.When providing a voltage of 15kV, the best result was found as in (b) of FIG. 7. The most uniform and homogeneous nanofibers were produced in the electric field setting of this voltage. The average sizes of the nanofibers were 3.2 μm, 2 μm and 1.2 μm at 5 kV, 10 kV and 15 kV applied voltages, respectively.
용매 중의 PCL의 농도는 또한 나노 섬유의 크기에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 그러나 농도는 공정에서 변화하기 쉽지 않았으며 예비 실험에서 6 중량 %로 고정되었다. 다른 TCD 및 유량과 같은 파라미터는 또한 섬유의 크기 및 균질성에 영향을 미치는 것으로 알려져 있지만, 인가된 전압 및 농도와 비교하여 사소한 인자로 고려된다.It is known that the concentration of PCL in the solvent also affects the size of the nanofibers. However, the concentration was not easy to change in the process and was fixed at 6% by weight in the preliminary experiment. Other parameters such as TCD and flow rate are also known to affect the size and homogeneity of the fiber, but are considered to be insignificant factors compared to the applied voltage and concentration.
상기한 바와 같이 본 발명에 따른 전기 방사 기술과 3D 프린팅 기술을 결합한 하이브리드 바이오 스캐폴드는 보다 높은 기계적 강도와 더 나은 세포 성장 환경을 제공한다. 즉, 본 발명에 따른 바이오 스캐폴드는 PLA와 PCL + 콜라겐으로 만들어지며 생체 적합성 세포 성장 환경뿐만 아니라 높은 기계적 강도를 제공할 수 있다.As described above, the hybrid bioscaffold combining the electrospinning technology and 3D printing technology according to the present invention provides a higher mechanical strength and a better cell growth environment. That is, the bioscaffold according to the present invention is made of PLA and PCL + collagen and can provide a biocompatible cell growth environment as well as high mechanical strength.
상기한 바와 같은, 본 발명의 실시예들에서 설명한 기술적 사상들은 각각 독립적으로 실시될 수 있으며, 서로 조합되어 실시될 수 있다. 또한, 본 발명은 도면 및 발명의 상세한 설명에 기재된 실시예를 통하여 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 타 실시예가 가능하다. 따라서, 본 발명의 기술적 보호범위는 첨부된 특허청구범위에 의해 정해져야 할 것이다.As described above, the technical ideas described in the embodiments of the present invention may be implemented independently, respectively, and may be implemented in combination with each other. In addition, the present invention has been described through the embodiments described in the drawings and the detailed description of the invention, but this is only illustrative, and various modifications and equivalent other embodiments from those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains It is possible. Therefore, the technical scope of the present invention should be determined by the appended claims.
10 : PLA 플랫폼 20 : 나노 섬유층
30 : 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치 31 : 고전압 전원공급장치
33 : 고정밀 주입펌프 35 : 카메라
37 : 다이오드 레이저 38 : 레이저 시각화 장치
39 : 수집기 41 : 마이크로 노즐
43 : 케이스 45 : 모니터링 제어 장치
390 : 접지 단자 392 : 스프링10: PLA platform 20: nano fiber layer
30: multilayer bio-scaffold fabrication device 31: high voltage power supply device
33: high precision injection pump 35: camera
37: diode laser 38: laser visualization device
39: collector 41: micro nozzle
43: case 45: monitoring control device
390: ground terminal 392: spring
Claims (10)
상기 케이스 내에 구비되어 PCL 액적을 분사하는 마이크로 노즐과;
상기 케이스 내에서 상기 마이크로 노즐과 일정 거리 이격되게 배치되고 상기 마이크로 노즐에서 분사된 PCL 액적에 의해 나노 섬유층이 형성되는 수집기와;
상기 케이스의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐에 PCL 용액을 제공하는 고정밀 주입펌프와;
상기 케이스의 내측 또는 외측에 배치되어 상기 마이크로 노즐과 수집기 사이에 고전압을 인가하여 전위차를 발생시키는 고전압 전원공급장치와;
상기 케이스 내에 구비되어 상기 마이크로 노즐과 수집기 사이에서 형성되는 나노 섬유층을 모니터링 하는 레이저 시각화 장치를 포함하고,
상기 수집기는, 일측 지지대에 전동 모터가 지지되고, 상기 전동 모터에 의해 회전하는 방사축이 구성되고, 상기 방사축을 둘러싸고 있는 절연축이 구성되며,
상기 방사축의 둘레에 PLA(Poly Lactic Acid) 플랫폼을 배치한 상태에서 상기 마이크로 노즐에서 분사된 PCL 액적에 의해 상기 PLA 플랫폼의 양면에 나노 섬유층을 형성하는 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작장치.A case having a sealed structure;
A micro nozzle provided in the case for spraying PCL droplets;
A collector disposed in the case to be spaced apart from the micro-nozzle by a predetermined distance and in which a nanofiber layer is formed by the PCL droplets sprayed from the micro-nozzle;
A high-precision injection pump disposed inside or outside the case to provide a PCL solution to the micro-nozzle;
A high voltage power supply device disposed inside or outside the case to apply a high voltage between the micro nozzle and the collector to generate a potential difference;
It is provided in the case and includes a laser visualization device for monitoring the nanofiber layer formed between the micro-nozzle and the collector,
In the collector, an electric motor is supported on one side support, a radial shaft rotating by the electric motor is configured, and an insulating shaft surrounding the radial shaft is configured,
Multi-layer bio-scaffold using 3D printing, characterized in that nanofiber layers are formed on both sides of the PLA platform by PCL droplets sprayed from the micro-nozzle while the PLA (Poly Lactic Acid) platform is disposed around the radial axis Manufacturing device.
상기 케이스는, 장방형 구조를 갖는 프레임과, 상기 프레임으로 구성되는 면에 조립되되, 적어도 일부는 내부가 보이는 투명 소재로 이루어진 밀폐판을 포함한 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치.The method according to claim 1,
The case includes a frame having a rectangular structure, and a sealing plate made of a transparent material that is assembled on a surface consisting of the frame, and at least a part thereof is a multilayer bioscaffold manufacturing apparatus using 3D printing.
상기 케이스 내부에는 수직으로 세워지는 노즐 지지대와, 상기 노즐 지지대에 구비되어 상기 마이크로 노즐의 높이를 조절하는 노즐 높이 조절장치가 구비된 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치.The method according to claim 1,
An apparatus for manufacturing a multilayer bio-scaffold using 3D printing, characterized in that: a nozzle support vertically erected in the case, and a nozzle height adjustment device provided on the nozzle support to adjust the height of the micro-nozzle.
상기 레이저 시각화 장치는, 상기 마이크로 노즐에서 분사된 액적에 의해 형성되는 나노 섬유에 레이저를 조사하는 다이오드 레이저와, 상기 다이오드 레이저에서 조사된 빛이 나노 섬유에 부딪힌 다음 산란된 빛을 촬영하는 카메라를 포함한 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치.The method according to claim 1,
The laser visualization device includes a diode laser for irradiating a laser to nanofibers formed by droplets sprayed from the micro nozzle, and a camera for photographing scattered light after light irradiated from the diode laser hits the nanofibers. Multi-layer bio-scaffold manufacturing apparatus using 3D printing, characterized in that.
상기 레이저 시각화 장치는 상기 케이스 내에 구비된 위치조절장치에 의해 위치 조절이 가능하도록 구성된 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치.The method according to claim 1,
The laser visualization device is a multi-layer bio-scaffold manufacturing apparatus using 3D printing, characterized in that the position can be adjusted by a position control device provided in the case.
상기 방사축은 상기 마이크로 노즐과 대전되도록 도체로 구성되고, 접지 단자와 스프링으로 연결되어, 상기 마이크로 노즐과 대향되는 접지 전극을 구성하게 되는 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치.The method according to claim 1,
The radial axis is composed of a conductor so as to be charged with the micro-nozzle, is connected to a ground terminal and a spring, and constitutes a ground electrode facing the micro-nozzle.
상기 PLA 플랫폼은 PLA 소재를 이용하여 3D 프린터로 제작된 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치.The method according to claim 1,
The PLA platform is a multi-layered bio-scaffold manufacturing apparatus using 3D printing, characterized in that produced by a 3D printer using PLA material.
상기 나노 섬유층은 상기 PCL 용액으로 PCL 또는 PCL과 콜라겐 혼합물을 사용하고 이를 전기 방사시켜 형성한 것을 특징으로 하는 3D 인쇄를 이용한 다층 바이오 스캐폴드 제작 장치.The method according to claim 1,
The nanofiber layer is a multilayer bioscaffold manufacturing apparatus using 3D printing, characterized in that formed by using PCL or a mixture of PCL and collagen as the PCL solution and electrospinning it.
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KR101469380B1 (en) | 2013-08-29 | 2014-12-04 | 한양대학교 에리카산학협력단 | Apparatus and method for manufacturing cutted nanostructure |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20200053665A (en) | 2020-05-19 |
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