KR102120323B1 - 식용곤충 효소처리물 및 생약 추출물을 함유하는 숙취해소 또는 간보호용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 갈색거저리 유충 효소처리물, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물, 귀뚜라미 성충 효소처리물, 늙은호박 추출물, 계피추출물, 진피 추출물, 황기 추출물, 발아서리태 추출물, 마카 추출물, 인삼화뢰 추출물, 포도 추출물 및 황금추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 알코올 분해효소의 활성 증가로 인한 숙취해소가 뛰어나고 알코올로 유도된 간독성 등이 완화되어 알코올성 간염, 알코올성 지방간과 같은 간 손상과 관련된 각종 질환의 치료용 조성물 또는 이들 질환의 예방과 개선을 위한 건강기능식품으로서 용이하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 식용곤충 효소처리물 및 생약 추출물을 함유하는 숙취해소 또는 간보호용 조성물에 관한 것으로서, 보다 자세하게는 갈색거저리 유충 효소처리물, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물, 귀뚜라미 성충 효소처리물, 늙은호박 추출물, 계피추출물, 진피 추출물, 황기 추출물, 발아서리태 추출물, 마카 추출물, 인삼화뢰 추출물, 포도 추출물, 황금추출물을 함유하는 숙취해소 또는 간보호용 조성물에 관한 것이다.
간 질환은 주로 만성적인 음주에 의해 발생하는 여러 가지 간의 질환을 말하는데 형태에 따라 알코올성 지방간, 알코올성 간염, 알코올성 간경변으로 크게 나누어지지만 한 사람에게서 순수한 한 가지 병만 나타나는 경우는 드물고, 각 병이 개인마다 다양한 정도로 나타나게 된다.
건겅보험심사평가원 통계에 따르면 최근 국내 알코올성 간질환으로 발생되는 치료비용은 매년 급증하는 증가추세다. 또한 국내 한 생명보험사의 통계를 분석해 봐도 시망원인 중 알코올성 간질환 사망자가 10년 전과 비교해 7배로 급증했다.
지속적인 알코올 섭취로 인해 유발되는 알코올성 간질환은 국내를 비롯한 전 세계적인 사회적인 문제로 대두되고 있다. 특히 알코올성 지방간 및 간염이 지속되면 간섬유화 및 간경변으로 더 이상 회복을 기대할 수 없는 단계에 이르게 되어 간 이식만이 유일한 치료방법으로 남게 되었다.
우리나라의 경우 20세 이상 성인 남자의 음주율은 83.3%로 매우 높고 여성의 음주율 또한 54.9%로 급격히 증가하는 추세이며, 잘못 된 음주 문화로 인하여 과음에 심각하게 노출되어 있다. 알코올의 과다 섭취로 인한 피해는 간질환을 비롯하여 각종 질환의 병인이 됨은 물론 개인, 가정, 사회의 정서와 생활에 부정적인 영향을 미침으로써 국가적으로 막대한 경제, 사회적 손실을 야기하고 있다.
지나친 과음을 통해 나타나는 여러 형태의 부작용 중 숙취는 갈증, 전신권태, 피로감, 기억상실, 복부팽만감, 소화불량, 구토, 설사 등의 현상으로 나타난다.
정상적인 알코올 대사과정은 알코올이 섭취되는 경우, 위장, 또는 소장에서 흡수되어 그 중 10%는 호흡, 땀, 소변 등으로 배설되고, 나머지 90%의 알코올은 혈관 중에 들어가 간에서 대사된다(M. Nakanishi; Saishin Igaku, 31, p2086, 1976). 이어서 간세포에 존재하는 알코올 탈수소효소(alcohol dehydrogenase, ADH)가 알코올을 아세트알데하이드로 산화시키고, 아세트알데하이드는 간세포에서 아세트알데하이드 탈수소효소(acetaldehyde dehydrogenase)에 의하여 아세트산으로 분해되어 전신의 근육이나 지방 조직으로 옮겨서 최종적으로는 탄산가스와 물로 분해된다. 그러나 이러한 분해 대사과정에서 과음으로 인해 속쓰림이 발생하고, 알코올 대사의 이상이 오며 혈중 알코올 농도가 높아지면서 대사되지 못한 에틸알코올이나 아세트알데하이드 등으로 인해 뇌혈관 수축이 일어나 두통, 어지럼증 등이 발생한다.
숙취해소제는 이와같이 과음에서 유래될 수 있는 갈증, 전신권태, 피로감, 기억상실, 복부팽만감, 소화불량, 구토, 설사 등에 다각적으로 효능이 인정되면서 복용에 거부감이 없고 및 휴대가 용이한 형태의 제품개발이 필요할 것으로 보인다.
그러나 대개의 숙취해소제품들은 생약재를 소재로하여 개발되어 있기 때문에 한액취 및 이취가 강하여 복용에 거부감이 있어 이에 대한 연구가 필요하다. 한약취 및 이취 등의 감소방법으로는 효소처리 등 생물학적 방법, 향료 등에 의한 마스킹 등의 화학적 방법 및 가온숙성 등의 물리적 방법이 있을 수 있다.
물리적 방법에 대한 예로는 저온숙성된 천년목란 추출물(대한민국 등록특허 제10-1948661호), 숙성율피 또는 그의 추출물(대한민국 등록특허 제10-1881369호), 가온 숙성대추를 이용한 양갱(대한민국 공개특허 제10-2015-0075838호), 홍산과 녹용 추출물을 중탕기에서 그대로 8 내지 14시간 방치하여 숙성단계를 거친 것을 함유하는 홍삼 및 녹용 추출물을 포함하는 드링크제 및 그의 제조방법(대한민국 등록특허 제10-1090284호), 열처리에 의한 홍삼엑기스 성분변화(농화학회지 24(1): 51-58, 1980), 열처리에 의한 홍삼엑기스의 색상변화(고려인삼학회지 4(2):50-58, 1981) 등이 있다.
또한, 숙취해소에 대해서는 대한민국 등록특허 제10-0552398호(작두콩 추출물을 함유하는 숙취해소용 음료 조성물), 대한민국 등록특허 제10-0989869호(콩나물 발효액을 함유하는 숙취해소 음료), 대한민국 등록특허 제10-1601947호(땅콩새싹 추출물 및 울금추출물을 함유하는 숙취해소 음료 조성물), 대한민국 공개특허 제10-2002-0081995호(배합식품에 의한 숙취해소 및 간 기능 개선제와 그 제조방법), 대한민국 공개특허 제10-2002-0064151호(헛개나무로부터 분리된 간독성 및 숙취해소 활성을 갖는 저급알코올 불용성 추출 분획 및 다당체 물질 및 이를 함유하는 조성물) 등의 특허를 비롯한 쌀눈엑스(구루메), 오리나무, 참나무 목초액, 갈화, 밀크씨슬 추출물 등의 여러 가지 식물에서 기원한 제제들이 숙취에 효능이 있다고 보고되어 있다. 그러나 이들 제품은 실제 만들어진 최종 완제품의 효능에 대하여 객관적 검증이 미흡한 상황으로 실제 숙취해소 제품을 필요로 하는 소비자들에게 신뢰도가 높지 않은 것이 사실이다. 이에 숙취해소 효능의 검증을 통해서 실제 소비자들이 신뢰할 수 있고 과다한 음주로 인한 사회적 손실을 줄이면서도 더불어 개인의 건강한 생활에도 도움을 줄 수 있는 제품개발이 절실히 요구되고 있다.
이와 같은 배경 하에서, 본 발명자들은 보다 효과적으로 숙취를 해소할 수 있는 방법을 개발하고자 노력한 결과 곤충 효소처리물 및 생약 추출물의 혼합물이 혈중 알코올 농도의 수준을 효과적으로 감소시키면서 숙취해소에 효과가 있을 뿐만 아니라 간보호 효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 식용곤충 효소처리물 및 생약 추출물을 함유하는 숙취해소 또는 간보호용 조성물을 제공하는 것으로서, 보다 자세하게는 갈색거저리 유충 효소처리물, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물, 귀뚜라미 성충 효소처리물, 늙은호박 추출물, 계피추출물, 진피 추출물, 황기 추출물, 발아서리태 추출물, 마카 추출물, 인삼화뢰 추출물, 포도 추출물, 황금추출물을 함유하는 숙취해소 또는 간보호용 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 갈색거저리 유충 효소처리물, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물, 귀뚜라미 성충 효소처리물, 늙은호박 추출물, 계피추출물, 진피 추출물, 황기 추출물, 발아서리태 추출물, 마카 추출물, 인삼화뢰 추출물, 포도 추출물 및 황금추출물을 함유하는 숙취해소 또는 간보호용 조성물에 관한 것이다.
보다 바람직하게는 상기 조성물에는 갈색거저리 유충 효소처리물 100 중량부 기준으로, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 20~40 중량부, 귀뚜라미 성충 효소처리물 20~40 중량부, 늙은호박 추출물 50~80 중량부, 계피 추출물 30~110 중량부, 진피 추출물 70~150 중량부, 황기 추출물 30~100 중량부, 발아서리태 추출물 120~150 중량부, 마카 추출물 40~90 중량부, 인삼화뢰 추출물 100~150 중량부, 포도 추출물 30~100 중량부 및 황금 추출물 2~50 중량부가 포함될 수 있다. 이 때 각 곤충의 효소처리물이나 각 추출물들의 혼합이 이와 같은 혼합비를 벗어날 경우 숙취해소 또는 간보호 효능이 저하될 수 있어 바람직하지 않다.
또한, 상기 조성물에는 헛개열매 추출물, 울금 추출물, 갈근 추출물, 엉겅퀴 추출물, 포공영 추출물, 쑥 추출물, 사과 추출물, 감초 추출물, 대추 추출물, 아스파라긴산, 액상과당, 무수구연산, 비타민 C, 타우린, 젖산칼슘, L-아르기닌, 구연산삼나트륨, 니코틴산아미드, 효소처리스테비아, 비타민 B1 염산염, 비타민 B2 및 DL-알파-토코페릴초산염이 더 포함될 수 있고, 적량의 정제수가 함유될 수 있는데,
보다 바람직하게는,
갈색거저리 유충 효소처리물 100 중량부 기준으로, 헛개열매 추출물 250~400 중량부, 울금 추출물 50~100 중량부, 갈근 추출물 50~100 중량부, 엉겅퀴 추출물 50~100 중량부, 포공영 추출물 50~100 중량부, 쑥 추출물 50~100 중량부, 사과 추출물 200~300 중량부, 감초 추출물 5~20 중량부, 대추 추출물 5~20 중량부, 아스파라긴산 50~100 중량부, 액상과당 3000~4000 중량부, 무수구연산 100~200 중량부, 비타민C 30~70 중량부, 타우린 20~50 중량부, 젖산칼슘 20~40 중량부, L-아르기닌 10~30 중량부, 구연산삼나트륨 5~20 중량부, 니코틴산아미드 5~20 중량부, 효소처리스테비아 1~5 중량부, 비타민B1염산염 1~3 중량부, 비타민B2 1~3 중량부 및 DL-알파-토코페릴초산염 1~3 중량부가 포함되는 것이 좋다.
상기 조성물에는 정제수(물)가 적량 함유될 수 있는데, 갈색거저리 유충 효소처리물 100 중량부 기준으로, 정제수 20000~50000 중량부가 함유될 수 있다.
본 발명의 조성물에 사용되는 추출물 원료 중 발아서리태는 발아콩 추출물은 콩발아 자엽, 콩발아 배 및 콩발아 뿌리에서 선택되는 것일 수 있고, 발아콩자엽 및 발아콩 배와 발아콩 뿌리 전체일 수도 있다.
본 발명은 상기 조성물을 함유하는 알코올성 간질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학조성물과 건강기능식품을 제공한다. 상기 알코올성 간질환은 알코올성 간염, 알코올성 지방간 또는 알코올성 간경변일 수 있다.
본 발명에서 사용하는 식용곤충 효소처리물은 원료 곤충에 플라보자임(Flavozyme), 알킬라아제(Alcalase) 또는 프로테아제(Protease) N에서 선택되는 효소를 처리한 것일 수 있는데, 알카라아제를 사용하는 것이 가장 바람직하다.
상기 식용곤충 효소처리물은 원료 식용곤충 100 중량부 기준 200~400 중량부의 정제수를 첨가한 후 100~150℃에서 0.5시간~2시간 동안 가열하고 40~60℃로 식힌 후, 5~10시간 동안 효소처리 된 것일 수 있다. 이 때, 원료 식용곤충 100 중량부 기준으로 효소를 0.1~10 중량부 첨가하는 것이 바람직하다.
또한 효소처리 이 후, 이를 당도가 20~70 브릭스(Brix)가 되도록 농축할 수 있고 필요에 따라 분말화할 수 있으며, 농축 전 또는 후로 90~100℃에서 20~60분간 열처리하여 효소를 실활시킬 수 있다.
또는 효소처리된 것을 농축 및 여과하여 얻은 액상을 건조할 수 있고, 효소처리된 직후 또는 농축 후, 각 원료 식용곤충으로부터 분리된 기름 성분을 층분리하여 제거할 수 있다.
효소처리된 직후 또는 농축 후의 액상은 건조하여 분말화 할 수 있는데, 분무건조, 열풍건조, 동결건조 등의 통상의 건조법을 이용할 수 있다.
상기와 같은 효소처리시, 원료 식용곤충 100 중량부 기준으로 정제수가 200 중량부 미만이면 이후의 효소처리과정에서 효소가 과활성화 되어 단백분해된 조성물의 품질이 저하될 수 있으며, 정제수가 400 중량부를 초과하게 되면 역시 이후의 효소처리시 효소활성이 약해 단백분해가 잘 되지 않을 수 있다.
상기 가열 조건은 살균과정 및 곤충을 익히는 조건을 동시에 수행하는 역할을 하는데, 가열 온도가 100℃ 미만이면 살균 작용이 잘 일어나지 않을 수 있고, 가열 온도가 150℃를 초과하게 되면 단백질의 성상에 변화가 나타나 단백분 된 조성물의 품질이 저하될 수 있다. 마찬가지로 가열 조건이 0.5시간 미만이어도 살균이 잘 안 될 수 있으며, 가열 시간이 2시간을 초과하게 되면 단백질의 성상에 변화가 일어날 수 있다.
상기 효소 처리 온도가 40℃ 미만이면 효소활성이 거의 나타나지 않을 수 있고, 60℃를 초과하게 되면 효소가 실활되어 작용하지 않을 수 있다.
또한, 효소처리 과정에서, 원료 식용곤충 100 중량부 기준으로 효소를 0.1 중량부 미만으로 첨가하게 되면 효소활성이 거의 나타나지 않을 수 있고, 10 중량부를 초과하여 첨가하게 되는 것은 효소 사용에 대한 비용 면에서 바람직하지 않고 효소의 작용이 과하게 되어 최종 단백분해된 산물의 물성이 더 나빠질 수 있다.
이때 원료 식용곤충은 금식하여 배설물을 완전하게 배출시킨 것을 사용하되, 생 것 상태로 정제수로 세척 후 정제수를 첨가한 뒤 가열하는 것이 좋고, 가열 과정이 충분히 수행된 후에는 이를 식힌 후 상기 식용곤충을 분쇄하고 효소처리하여 가수분해 과정을 수행하는 것이 바람직하다.
본 발명에서 사용하는 각 추출물은, 추출물 제조용 원료시료에 물, C1~C4 알코올 또는 이들의 혼합용액을 용매로 하여 추출할 수 있으며, 상기 C1~C4 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 및 이소부탄올로 이루어진 군에서 선택될 수 있다. 상기 용매는 바람직하게는 물 또는 에탄올의 50~70(v/v)% 수용액인 것이 더 좋다.
또한 추출물의 제조시 사용되는 물, C1~C4 알코올 또는 이들의 혼합용액은 원료시료 사용 중량 기준 1~40배 부피(1kg 기준 1~40ℓ) 또는 1~40배 중량을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 5~10배 부피 또는 5~10배 중량을 사용할 수 있다.
상기 추출물의 추출조건은 20~100℃에서 1분~48시간일 수 있다. 상기 과정은 1~4번까지 반복할 수 있다. 더 바람직하게는 80~95℃의 온도에서 5~8시간 추출한 뒤(가온과정), 추출액상만을 수거한 후 50~70℃에서 8~12시간 교반하는 과정(숙성과정)인 것이 더 좋다. 이 후 50~60℃에서 감압농축하여 상기 추출물을 20~70 브릭스의 농축물 상태로 제조할 수 있고 필요에 따라 분말화할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 함유하는 알코올성 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 약학 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 500㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 함유하는 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 조성물을 함유하는 알코올성 간질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제 등이 있다.
본 발명은 갈색거저리 유충 효소처리물, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물, 귀뚜라미 성충 효소처리물, 늙은호박 추출물, 계피추출물, 진피 추출물, 황기 추출물, 발아서리태 추출물, 마카 추출물, 인삼화뢰 추출물, 포도 추출물 및 황금추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 알코올 분해효소의 활성 증가로 인한 숙취해소가 뛰어나고 알코올로 유도된 간독성 등이 완화되어 알코올성 간염, 알코올성 지방간과 같은 간 손상과 관련된 각종 질환의 치료용 조성물 또는 이들 질환의 예방과 개선을 위한 건강기능식품으로서 용이하게 이용될 수 있다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명을 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화 될 수 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지도록, 당 업계자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
제조예 1. 효소처리물과 생약 추출물의 제조와 첨가제의 준비
제조예 1-1. 갈색거저리 유충의 효소처리물, 흰점박이 꽃무지 유충의 효소처리물 및 쌍별귀뚜라미의 효소처리물의 준비
숙취해소용 조성물 제조를 위해, 갈색거저리 유충의 효소처리물, 흰점박이 꽃무지 유충의 효소처리물 및 쌍별귀뚜라미의 효소처리물을 제조하였다.
전문 사육농가에서 8령의 갈색거저리 유충, 35일간 사육시킨 흰점박이꽃무지 유충 및 크기 2.5~3.0cm의 쌍별귀뚜라미 성충을 각각 구입하여, 갈색거저리 유충의 경우는 3일간 금식, 흰점박이꽃무지 유충은 3일간 금식시켜 배설물을 1차 배출시킨 다음 찹쌀가루를 7일간 식이하면서 사육시킨 후 다시 2일간 금식, 및 쌍별귀뚜라미는 1일간 금식시켜 배설물을 완전히 배출시킨 생것 상태에서 흐르는 물로 3회 수세하였다.
이 후. 갈색거저리 유충, 흰점박이 꽃무지 유충 및 쌍별귀뚜라미 성충을 각각 증숙기에 넣은 다음 3배 중량의 정제수를 첨가하여 압력 1.5kgf/cm2 및 온도 121℃의 가압고온 조건에서 90분간 가열시킨 다음, 물이 포함된 그 상태로 습식분쇄기(LSI, NEYZSCH, Srlb Bavaria, Germany)를 이용하여 bead size 0.4 mm, rotor speed 3,000 rpm의 조건으로 분쇄하여 갈색거저리 유충, 흰점박이꽃무지 유충 및 쌍별귀뚜라미 성충에 대해 분쇄물을 제조한다. 이 후 각 분쇄물 100 g당 Alcalase(Subtilisin Carlsberg, Novozymes)를 1g 첨가하여 40℃에서 5시간 동안 가수분해하는 과정을 수행하였다. 이렇게 가수분해된 각각의 분해물을 여과하여 60℃의 조건에서 감압농축기로 60 brix가 되도록 농축하여 갈색거저리 유충 효소처리물, 흰점박이 꽃무지 유충 효소처리물 및 쌍별귀뚜라미 효소처리물 수득하였다.
제조예 1-2. 늙은호박 추출물, 계피추출물, 진피 추출물, 황기 추출물, 발아서리태 추출물, 마카 추출물, 인삼화뢰 추출물, 포도 추출물 및 황금추출물의 준비
숙취해소용 조성물 제조를 위한 생약 추출물은 늙은호박, 계피, 진피, 황기, 발아서리태, 인삼화뢰, 포도 및 황금을 추출원료로 하여 제조하였다. 이때 서리태는 물에 불린 후 싹이 1~2cm 난 것을 사용하였다.
이를 위해 상기 각각 추출원료에 8배 중량의 75(v/v)% 에탄올 수용액 또는 물을 넣고 80℃에서 12시간 추출 후 여과하여 액상만을 얻었다. 수거된 액상을 온도조절이 가능한 이중자켓에 넣은 다음 70℃에서 10시간 동안 교반하는 숙성과정을 거친 후, 60℃의 감압농축기를 이용하여 60 brix가 되도록 농축하여 각각의 추출물을 수득하였다. 이 때, 늙은호박, 진피는 75(v/v)% 에탄올 수용액을 용매로 하고, 나머지는 물을 용매로 하여 제조하였다.
이 외, 마카 추출물은 75(v/v)% 에탄올 수용액으로 추출한 칠레산 65 brix의 마카 농축물을 구입하여 준비하였다.
제조예 1-3. 첨가제의 준비
숙취해소용 조성물 제조를 위한 추가 첨가제로서 헛개열매 추출물, 울금 추출물, 갈근 추출물, 엉겅퀴 추출물, 포공영 추출물, 쑥 추출물, 사과 추출물, 감초 추출물, 대추 추출물, 아스파라긴산, 액상과당, 무수구연산, 비타민 C, 타우린, 젖산칼슘, L-아르기닌, 구연산삼나트륨, 니코틴산아미드, 효소처리스테비아, 비타민 B1 염산염, 비타민 B2 및 DL-알파-토코페릴초산염을 준비하였다. 이 때 각 추출물은 제조예 1-2의 방법으로 제조하되, 헛개열매, 울금, 갈근, 엉겅퀴, 포공영, 쑥의 추출물은 75(v/v)% 에탄올 수용액을 용매로 하여 제조하였고, 사과, 감초, 대추의 추출물은 물을 용매로 하여 제조하였다. 효소처리스테비아(스테비아추출물)는 통상적으로 이용되는 설탕 대체 감미료로서 ㈜대평에서 구입하여 사용하였다.
<실시예/비교예. 숙취해소용 조성물의 제조>
다음의 숙취해소용 조성물을 제조예 1에서 준비된 시료를 혼합하여 제조하였다.
실시예 1 내지 3
각 시료를 하기 표 1의 조건으로 혼합하고, 물을 추가하여 총 중량이 3t인 음료 조성물을 제조하였다.
시료 | 실시예 1 | 실시예 2 | 실시예 3 | 실시예 4 |
갈색거저리 유충 효소처리물 (g) | 100 | 100 | 100 | 100 |
흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 (g) | 20 | 30 | 40 | 30 |
쌍별귀뚜라미 성충 효소처리물 (g) | 40 | 30 | 20 | 30 |
늙은호박 추출물 (g) | 80 | 80 | 50 | 65 |
계피 추출물 (g) | 110 | 30 | 80 | 70 |
진피 추출물 (g) | 100 | 70 | 150 | 110 |
황기 추출물 (g) | 30 | 100 | 100 | 65 |
발아서리태 추출물 (g) | 150 | 140 | 120 | 135 |
마카 추출물 (g) | 80 | 40 | 90 | 65 |
인삼화뢰 추출물 (g) | 100 | 150 | 100 | 125 |
포도 추출물 (g) | 70 | 100 | 30 | 65 |
황금 추출물 (g) | 40 | 50 | 40 | 26 |
실시예 5
실시예 1의 성분에 아래 조건으로 헛개열매 추출물 등의 첨가제를 혼합하고 물을 추가하여 총 3t의 중량이 되도록 음료 조성물을 제조하였다.
실시예 1의 성분 : 갈색거저리 유충 효소처리물 100 g, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 20 g, 쌍별귀뚜라미 성충 효소처리물 40 g, 늙은호박 추출물 80 g, 계피 추출물 110 g, 진피 추출물 100 g, 황기 추출물 30 g, 발아서리태 추출물 150 g, 마카 추출물 80 g, 인삼화뢰 추출물 100 g, 포도 추출물 70 g, 황금 추출물 40 g
추가 성분 : 헛개열매 추출물 325 g, 울금 추출물 75 g, 갈근 추출물 75 g, 엉겅퀴 추출물 75 g, 포공영 추출물 75 g, 쑥 추출물 75 g, 사과 추출물 250 g, 감초 추출물 12 g, 대추 추출물 12 g, 아스파라긴산 75 g, 액상과당 3500 g, 무수구연산 150 g, 비타민C 50 g, 타우린 35 g, 젖산칼슘 30 g, L-아르기닌 25 g, 구연산삼나트륨 12 g, 니코틴산아미드 12 g, 효소처리스테비아 3 g, 비타민B1염산염 2 g, 비타민B2 2 g, DL-알파-토코페릴초산염 2 g
실시예 6
실시예 4의 성분에 아래 조건으로 헛개열매 추출물 등의 첨가제를 혼합하고 물을 추가하여 총 3t의 중량이 되도록 음료 조성물을 제조하였다.
실시예 4의 성분 : 갈색거저리 유충 효소처리물 100 g, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 30 g, 쌍별귀뚜라미 성충 효소처리물 30 g, 늙은호박 추출물 65 g, 계피 추출물 70 g, 진피 추출물 110 g, 황기 추출물 65 g, 발아서리태 추출물 135 g, 마카 추출물 65 g, 인삼화뢰 추출물 125 g, 포도 추출물 65 g, 황금 추출물 26 g
추가 성분 : 헛개열매 추출물 325 g, 울금 추출물 75 g, 갈근 추출물 75 g, 엉겅퀴 추출물 75 g, 포공영 추출물 75 g, 쑥 추출물 75 g, 사과 추출물 250 g, 감초 추출물 12 g, 대추 추출물 12 g, 아스파라긴산 75 g, 액상과당 3500 g, 무수구연산 150 g, 비타민C 50 g, 타우린 35 g, 젖산칼슘 30 g, L-아르기닌 25 g, 구연산삼나트륨 12 g, 니코틴산아미드 12 g, 효소처리스테비아 3 g, 비타민B1염산염 2 g, 비타민B2 2 g, DL-알파-토코페릴초산염 2 g
비교예 1 내지 3
각 시료를 하기 표 2의 조건으로 혼합하고, 물을 추가하여 총 중량이 3t인 음료 조성물을 제조하였다.
시료 | 비교예 1 | 비교예 2 | 비교예 3 |
갈색거저리 유충 효소처리물 (g) | 400 | 0 | 100 |
흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 (g) | 300 | 0 | 150 |
쌍별귀뚜라미 성충 효소처리물 (g) | 220 | 0 | 69 |
늙은호박 추출물 (g) | 0 | 70 | 100 |
계피 추출물 (g) | 0 | 110 | 10 |
진피 추출물 (g) | 0 | 150 | 30 |
황기 추출물 (g) | 0 | 100 | 210 |
발아서리태 추출물 (g) | 0 | 120 | 40 |
마카 추출물 (g) | 0 | 90 | 20 |
인삼화뢰 추출물 (g) | 0 | 150 | 180 |
포도 추출물 (g) | 0 | 70 | 10 |
황금 추출물 (g) | 0 | 60 | 1 |
비교예 4
대한민국 등록특허 제10-1919839호의 실시예 2-1의 조성물을 총 920g 준비하고, 물을 추가하여 총 3t이 되게 하였다.
비교예 5
대한민국 등록특허 제10-1852840호의 실시예 2-1의 조성물을 920g 준비하고 물을 추가하여 총 3t이 되게 하였다.
비교예 6
비교예 3의 성분에 아래 조건으로 헛개열매 추출물 등의 첨가제를 혼합하고 물을 첨가하여 총 3t의 중량이 되도록 음료 조성물을 제조하였다.
비교예 3의 성분 : 갈색거저리 유충 효소처리물 100 g, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 150 g, 쌍별귀뚜라미 성충 효소처리물 69 g, 늙은호박 추출물 100 g, 계피 추출물 10 g, 진피 추출물 30 g, 황기 추출물 210 g, 발아서리태 추출물 40 g, 마카 추출물 20 g, 인삼화뢰 추출물 180 g, 포도 추출물 10 g, 황금 추출물 1 g
추가 성분 : 헛개열매 추출물 325 g, 울금 추출물 75 g, 갈근 추출물 75 g, 엉겅퀴 추출물 75 g, 포공영 추출물 75 g, 쑥 추출물 75 g, 사과 추출물 250 g, 감초 추출물 12 g, 대추 추출물 12 g, 아스파라긴산 75 g, 액상과당 3500 g, 무수구연산 150 g, 비타민C 50 g, 타우린 35 g, 젖산칼슘 30 g, L-아르기닌 25 g, 구연산삼나트륨 12 g, 니코틴산아미드 12 g, 효소처리스테비아 3 g, 비타민B1염산염 2 g, 비타민B2 2 g, DL-알파-토코페릴초산염 2 g
실험예 1. 음료 조성물의 관능검사
실시예 5, 실시예 6 및 비교예 6의 음료 조성물에 대해 관능평가를 실시하였다. 상기 관능평가는 10명의 전문가와 무작위로 선별된 20명의 비전문가가 참여하였다.
평가방법에 사용된 기호도 검사 방법은 7점 척도법으로, 1점 대단히 싫다. 2점 싫다. 3점 약간 싫다. 4점 보통이다. 5점 약간 좋다. 6점 좋다. 7점 대단히 좋다로 구분하여 진행하였다. 그 결과는 표 3에서와 같이 실시예 5 및 실시예 6의 음료 조성물이 비교예 6의 음료 조성물에 비해 색깔, 맛, 이취 및 기호도 모두 증가된 것으로 나타났다.
구 분 | 색 | 맛 | 이취없음 | 기호도 |
실시예 5 | 6.4 | 6.0 | 6.5 | 5.9 |
실시예 6 | 5.8 | 5.9 | 6.2 | 6.0 |
비교예 6 | 4.3 | 4.1 | 3.9 | 4.2 |
실험예 2. 알코올 분해효소의 활성 확인
알코올 분해효소인 알데히드탈수소효소(ALDH) 및 아세트알데히드(ADH)의 활성을 측정하였다.
이를 위해 음료로 제조하기 위해 물을 첨가하기 전의 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 5의 각 조성물을 각 성분이 골고루 혼합되도록 DMSO(dimethyl sulfoxide)에 희석하여 100㎎/㎖의 농도로 준비하고 이를 사용하여 각 실험을 수행하였다.
ALDH의 활성 측정은 Aldehyde dehydrogenase activity colorimetric assay kit (BioVision, catalog #K731-100)를 사용하여 BioVision protocol에 의거하여 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였으며, 시료의 ALDH의 활성은 대조군에 대한 상대활성(%)으로 나타내었다. 3회 측정하여 평균값을 구한 후 하기 표 4에 나타내었다.
ADH 활성 측정은 Alcohol dehydrogenase activity colorimetric assay kit (BioVision, catalog #K787-100)를 사용하여 BioVision protocol에 의거하여 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였으며, 시료의 ADH의 활성은 대조군에 대한 상대활성(%)으로 나타내어 하기의 표 4에 나타내었다.
구분 | ALDH 활성(%) | ADL 활성(%) |
대조군 | 100 | 100 |
실시예 1 | 176 | 350 |
실시예 2 | 165 | 363 |
실시예 3 | 158 | 312 |
실시예 4 | 161 | 314 |
비교예 1 | 115 | 152 |
비교예 2 | 107 | 179 |
비교예 3 | 117 | 162 |
비교예 4 | 132 | 215 |
비교예 5 | 122 | 256 |
실험예 3. 혼합물의 간 세포보호 활성 확인(in vitro)
실험예 2에서 준비한 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 5의 DMSO 희석액을 에탄올 처리된 HepG2(human liver cancer cell line)에 처리하여 알코올로 손상된 간세포의 보호활성을 확인하였다.
이 때, HepG2는 하기의 방법으로 배양한 것을 사용하였다. 구체적으로 배양액으로는 10% FBS(fetal bovine serum) 및 100 IU/mL 페니실린이 첨가된 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium, Giboc, USA)배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 조건의 인큐베이터에서 배양하였고, 3~4일에 한 번씩 계대 유지하였다.
실험을 위해, HepG2를 7x103/well 농도로 플레이트(plate)에 24시간 배양하고, 각 희석 시료를 최종농도 100 ㎍/㎖이 되도록 처리하였다. 이 후 1시간 뒤에 95% 에탄올을 각 시료가 처리된 배지 내에 200 mM이 되도록 첨가한 후 17시간 동안 배양하였다. 3일간 같은 조건으로 매일 배지를 교체하고 각 시료와 에탄올을 방법으로 처리하여 세포손상을 유도하였다. 그런 다음, MTT assay 방법을 이용하여 485 nm에서 흡광도를 측정하여 세포생존율을 조사하였다. 세포 생존율은 무처리(대조군)의 생존도 100%를 기준으로 시험군의 상대적인 생존율을 계산하였다.
구분 | 세포생존율 활성(%) |
대조군 | 100.2 |
에탄올 | 25.2 |
에탄올 + 실시예 1 | 96.4 |
에탄올 + 실시예 2 | 95.2 |
에탄올 + 실시예 3 | 98.2 |
에탄올 + 실시예 4 | 97.5 |
에탄올 + 비교예 1 | 48.2 |
에탄올 + 비교예 2 | 45.2 |
에탄올 + 비교예 3 | 48.2 |
에탄올 + 비교예 4 | 67.5 |
에탄올 + 비교예 5 | 69.2 |
그 결과, 상기 표 5와 같이 실시예 1 내지 4의 희석시료 처리군이 비교예 1 내지 5의 희석시료 처리군과 비교하여 HepG2의 생존율이 현저하게 높은 것을 확인할 수 있고 알코올 처리로 인한 대부분의 손상을 회복하는 것을 알 수 있다.
실험예 4. 숙취해소 평가
실시예 5, 실시예 6 및 비교예 6의 음료 조성물에 대한 숙취해소 효과를 평가하였다.
이때, 숙취해소 음료로 판매되는 다음의 제품 2종도 사용하였다.
#1 : 쌀배아 발효추출물, 타우린, 헛개나무열매추출물, 생강, 효모추출물, 자라 추출물, 황기 추출물, 무수구연산, DL-사과산, D-알라닌, 니코틴산아미드, 구연산삼나트륨, 복합허브추출물, 합성향료, 과당, 설탕
#2 : 황칠나무 추출물, 사과 추출물, 타우린, 모과 추출물, 구연산, 비타민C, 황금복합추출물, 효소처리스테비아, L-아스파라긴, 과당, 프락토올리고당, 사양벌꿀
평가방법은 하기와 같다. 실험 대상자는 평소 주량이 소주 1병(360ml)을 일주일에 2 내지 3회 정도 음용하는 성인 남녀들이며, 이들을 무작위로 10명씩 각 처리군으로 모아 평가하게 하였다.
음주방법은 알코올 함량이 19%(v/v)인 소주 한잔에 안주로 삼겹살 1점을 같이 섭취하게 하고, 1인당 1.5병(360ml)을 30분 동안에 마시게 하였으며, 음주 후 3시간 후에 발열, 갈증, 취기, 두통 등에 대한 억제 효과를 5점 평가방법으로 평가하였다.
5 : 매우 좋음 <-> 1 : 매우 나쁨
평가 결과 표 6에서와 같이 본 발명의 음료 조성물이 발열, 갈증, 취기, 두통, 매스꺼움 및 구토 등을 억제하는 효과가 우수한 것으로 평가되었다.
구분 | 발열 억제 | 갈증 억제 | 취기 억제 | 두통 억제 | 매스꺼움 억제 | 구토 억제 |
실시예 5 | 4.3 | 4.4 | 4.3 | 4.6 | 4.1 | 4.2 |
실시예 6 | 4.5 | 4.2 | 4.5 | 4.2 | 4.2 | 3.9 |
비교예 6 | 3.1 | 3.1 | 3.2 | 3.4 | 3.3 | 3.2 |
#1 | 2.8 | 3.2 | 3.3 | 2.7 | 3.5 | 2.9 |
#2 | 3.6 | 2.9 | 3.6 | 2.7 | 3.2 | 2.8 |
Claims (4)
- 갈색거저리 유충 효소처리물 100 중량부 기준으로, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 20~40 중량부, 귀뚜라미 성충 효소처리물 20~40 중량부, 늙은호박 추출물 50~80 중량부, 계피 추출물 30~110 중량부, 진피 추출물 70~150 중량부, 황기 추출물 30~100 중량부, 발아서리태 추출물 120~150 중량부, 마카 추출물 40~90 중량부, 인삼화뢰 추출물 100~150 중량부, 포도 추출물 30~100 중량부 및 황금 추출물 2~50 중량부를 함유하는 것을 특징으로 하는 숙취해소 또는 간보호용 건강기능 식품.
- 제1항에 있어서,
상기 식품에 헛개열매 추출물, 울금 추출물, 갈근 추출물, 엉겅퀴 추출물, 포공영 추출물, 쑥 추출물, 사과 추출물, 감초 추출물, 대추 추출물, 아스파라긴산, 액상과당, 무수구연산, 비타민 C, 타우린, 젖산칼슘, L-아르기닌, 구연산삼나트륨, 니코틴산아미드, 효소처리스테비아, 비타민 B1 염산염, 비타민 B2 및 DL-알파-토코페릴초산염이 추가되는 것을 특징으로 하는 숙취해소 또는 간보호용 건강기능 식품. - 갈색거저리 유충 효소처리물 100 중량부 기준으로, 흰점박이꽃무지 유충 효소처리물 20~40 중량부, 귀뚜라미 성충 효소처리물 20~40 중량부, 늙은호박 추출물 50~80 중량부, 계피 추출물 30~110 중량부, 진피 추출물 70~150 중량부, 황기 추출물 30~100 중량부, 발아서리태 추출물 120~150 중량부, 마카 추출물 40~90 중량부, 인삼화뢰 추출물 100~150 중량부, 포도 추출물 30~100 중량부 및 황금 추출물 2~50 중량부를 함유하는 조성물을 함유하거나,
상기 조성물에 헛개열매 추출물, 울금 추출물, 갈근 추출물, 엉겅퀴 추출물, 포공영 추출물, 쑥 추출물, 사과 추출물, 감초 추출물, 대추 추출물, 아스파라긴산, 액상과당, 무수구연산, 비타민 C, 타우린, 젖산칼슘, L-아르기닌, 구연산삼나트륨, 니코틴산아미드, 효소처리스테비아, 비타민 B1 염산염, 비타민 B2 및 DL-알파-토코페릴초산염이 추가되는 조성물을 함유하는 것을 특징으로 하는
알코올성 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제1항 또는 제2항의 식품을 함유하는 것을 특징으로 하는 알코올성 간질환의 예방 또는 개선용 건강기능 식품.
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