KR102118562B1 - 다중 흡광 검출 장치, 및 다중 흡광 검출 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 신속하고 정확하게 분석할 수 있는 미세유체 흐름셀 및 이를 포함하는 흡광 검출 장치를 제공한다.
본 발명의 일 측면에 따른 미세유체 흐름셀은 시료가 주입되는 복수의 시료 주입구, 상기 시료 주입구와 연결되며 이어져 형성된 복수의 검출 통로, 광이 입사되는 복수의 광 입사구, 및 광이 출사되는 복수의 광 출사구를 포함하고, 상기 검출 통로들은 광 입사구에서 광 출사구까지 이어져 형성되며, 복수의 시료를 동시에 검출한다.

Description

다중 흡광 검출 장치, 및 다중 흡광 검출 방법{ABSORPTION DETECTION DEVICE, AND ABSORPTION DETECTION METHOD}
본 발명은 다중흡광검출을 위한 흡광 검출 장치 및 흡광 검출 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 복수의 시료를 동시에 측정하여 빠른 시간에 높은 정확도와 정밀도로 관심물질을 정량할 수 있는 다중 흡광 검출 장치 및 다중 흡광 검출 방법에 관한 것이다.
흡광광도법에 의한 관심물질의 정량은 서로 다른 농도의 표준용액 (바탕용액을 포함하여 최소 4개) 각각에 대한 흡광도를 측정하여 얻은 검량선 (표준용액 의 농도에 대한 흡광도의 함수, 1차 함수로 나타낼 경우 y = ax + b, y: 흡광도, a: 기울기, x: 농도, b: 절편)에 시료의 흡광도를 대입하여 농도를 결정한다.
종래에는 복수의 표준용액에 대한 흡광도를 개별적으로 측정하여 검량선을 얻은 다음, 시료의 흡광도를 측정하고 검량선에 대입하여 관심물질의 농도를 결정한다. 즉, 표준용액과 시료의 흡광도를 순차적으로 측정한다. 이러한 방법은 시료를 개별적으로 측정해야 하므로 시간이 오래 걸리고 온도, 습도, 압력 변화에 따라 발색반응속도 및 검출신호의 세기가 달라짐에 따라 정확도와 정밀도가 낮아지는 문제가 있다.
한편, 여러 개의 광원을 사용하거나 여러 개의 검출기를 사용하여 복수의 시료를 동시에 측정하는 경우에도 기기마다 설치된 광원이 상이할 뿐만 아니라 검출 광학계도 상이하므로 오차가 발생하는 문제가 있다.
상기한 바와 같은 기술적 배경을 바탕으로, 본 발명은 정확하고 정밀한 분석을 신속하게 할 수 있는 미세유체 흐름셀 및 이를 포함하는 흡광 검출 장치를 제공한다.
본 발명의 일 측면에 따른 미세유체 흐름셀은 시료가 주입되는 복수의 시료 시료 주입구, 상기 시료 주입구와 연결되며 이어져 형성된 복수의 검출 통로, 광이 입사되는 복수의 광 입사구, 및 광이 출사되는 복수의 광 출사구를 포함하고, 상기 검출 통로들은 광 입사구에서 광 출사구까지 이어져 형성되며, 복수의 시료를 동시에 검출한다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 시료 주입구는 검량선을 얻기 위한 표준용액이 주입되는 표준용액 주입구와 측정대상 시료가 주입되는 시료 주입구를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 복수의 상기 검출 통로는 상기 미세유체 흐름셀의 높이 방향으로 평행하게 이어져 형성될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 시료 주입구에는 상기 광 입사구를 연결하는 연결 통로가 형성되고, 상기 검출 통로는 상기 광 입사구를 매개로 상기 연결 통로와 연결될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 시료는 시료 주입구로 주입되어 상기 광 입사구를 거쳐서 상기 검출 통로를 통과하여 상기 광 출사구로 이동할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 미세유체 흐름셀은 상기 광 출사구와 연결된 배출 유도통로와 상기 배출 유도통로와 연결되어 시료를 배출하는 시료 배출구를 더 포함하며, 상기 배출 유도통로는 상기 광 출사구의 하면과 연결된 복수의 하부 통로와 복수의 상기 하부 통로들과 연결되어 상기 하부 통로들에서 시료가 유입되는 배출 챔버와 상기 배출 챔버와 상기 시료 배출구를 연결하는 전달 통로를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 다중 흡광 검출 장치는 빛을 출사하는 광원, 빛이 통과하는 복수의 검출 통로를 갖는 미체유체 흐름셀, 및 상기 미세유체 흐름셀을 통과한 빛을 검출하는 검출기를 포함하고, 상기 검출 통로는 상기 광원에서 출사되는 빛의 진행방향을 따라 이어져 형성될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 미체유체 흐름셀은 시료가 주입되는 복수의 시료 주입구, 광이 입사되는 복수의 광 입사구, 및 광이 출사되는 복수의 광 출사구를 포함하고, 상기 검출 통로는 상기 시료 주입구와 연결되되 상기 광 입사구에서 상기 광 출사구까지 이어져 형성되며, 상기 시료는 상기 검출 통로를 통해서 상기 광 입사구에서 상기 광 출사구로 이동할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 시료 주입구에는 상기 광 입사구를 연결하는 연결 통로가 형성되고, 상기 검출 통로는 상기 광 입사구를 매개로 상기 연결 통로와 연결될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 미세유체 흐름셀은 상기 광 출사구와 연결된 배출 유도통로와 상기 배출 유도통로와 연결되어 시료를 배출하는 시료 배출구를 더 포함하며, 상기 배출 유도통로는 상기 광 출사구의 하면과 연결된 복수의 하부 통로와 복수의 상기 하부 통로들과 연결되어 상기 하부 통로들에서 시료가 유입되는 배출 챔버와 상기 배출 챔버와 상기 시료 배출구를 연결하는 전달 통로를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 미세유체 흐름셀과 상기 광원 사이에는 상기 광원에서 출사되는 빛의 반치전폭(full width at half maximum) 보다 더 작은 반치전폭을 갖도록 빛을 투과하는 간섭 필터가 설치될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 상기 미세유체 흐름셀과 상기 광원 사이에는 상기 간섭 필터가 삽입되는 장착 홀이 형성된 홀더가 설치되고, 상기 홀더에는 상기 미세유체 흐름셀을 감싸는 지지 리브가 형성될 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 다중 흡광 검출 방법은 복수의 표준용액과 측정 대상인 시료를 각각의 주입구로 동시에 주입하는 시료 주입 단계, 주입된 표준용액과 시료를 검출 통로를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 흡광도 측정 단계, 표준용액의 흡광도로부터 검량선을 도출하는 검량선 도출 단계, 및 검량선으로부터 시료의 농도를 도출하는 농도 결정 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 다중 흡광 검출 방법은 복수의 표준용액을 각각의 주입구로 동시에 주입하는 표준용액 주입 단계, 주입된 표준용액을 검출 통로를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 표준용액 흡광도 측정 단계, 표준용액의 흡광도로부터 검량선을 도출하는 검량선 도출 단계, 측정 대상인 시료들을 각각의 주입구로 동시에 주입하는 시료 주입 단계, 주입된 시료를 검출 통로를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 시료 흡광도 측정 단계, 및 검량선으로부터 시료의 농도를 도출하는 농도 결정 단계를 포함할 수 있다.
상기한 바와 같이 본 발명의 일 측면에 따른 미세유체 흐름셀 및 이를 포함하는 흡광 검출 장치는 적은 양의 시료 및 시약을 사용하여 검량선 획득과 미지시료 내 관심물질의 정량을 동시에 수행할 수 있다. 이에 따라 분석 속도 및 정확도가 향상될 수 있다. 또한, 본 발명의 일 측면에 따른 미세유체 흐름셀 및 이를 포함하는 흡광 검출 장치는 하나의 광원과 하나의 검출기를 이용하여 시료를 분석할 수 있으므로 정확도와 정밀도가 높은 분석이 가능하다. 또한, 본 발명의 일 측면에 따른 미세유체 흐름셀 및 이를 포함하는 흡광 검출 장치는 환경오염물질의 실시간 현장모니터링, 질병진단, 조합화학 등의 분야에 적용이 가능하다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 흡광 검출 장치를 도시한 측면도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체 흐름셀, 간섭 필터, 및 홀더를 도시한 분해 사시도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체 흐름셀을 도시한 사시도이다.
도 4는 도 3에서 Ⅳ-Ⅳ선을 따라 잘라 본 절개 사시도이다.
도 5는 도 3에서 Ⅴ-Ⅴ선을 따라 잘라 본 단면도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체 흐름셀의 평면도이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체 흐름셀의 저면도이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 다중 흡광 검출 방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 9는 본 발명의 다른 실시예에 따른 다중 흡광 검출 방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 10은 상용 자외선-가시광선 흡광광도계로 측정한 표준용액의 흡광도로부터 얻은 검량선이다.
도 11은 냉각 CCD 카메라로 얻은 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액에 대한 이미지이다.
도 12는 도 11의 이미지로부터 계산한 흡광도로 얻은 검량선이다.
도 13은 코발트(Ⅱ) 클로라이드의 농도가 50mM인 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이다.
도 14는 코발트(Ⅱ) 클로라이드의 농도가 100mM인 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이다.
도 15는 코발트(Ⅱ) 클로라이드의 농도가 200mM인 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이다.
도 16은 실험예 3에 따른 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액에 대한 냉각 CCD 이미지이다.
도 17은 실험예 3에 따른 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이다.
본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예를 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 발명에서, '포함하다' 또는 '가지다' 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시예들을 상세히 설명한다. 이 때, 첨부된 도면에서 동일한 구성 요소는 가능한 동일한 부호로 나타내고 있음에 유의한다. 또한, 본 발명의 요지를 흐리게 할 수 있는 공지 기능 및 구성에 대한 상세한 설명은 생략할 것이다. 마찬가지 이유로 첨부 도면에 있어서 일부 구성요소는 과장되거나 생략되거나 개략적으로 도시되었다.
이하에서는 본 발명의 제1 실시예에 따른 흡광 검출 장치에 대해서 설명한다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 흡광 검출 장치를 도시한 측면도이고, 도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체 흐름셀, 간섭 필터, 및 홀더를 도시한 분해 사시도이다.
도 1 및 도 2를 참조하여 설명하면, 본 실시예에 따른 흡광 검출 장치(100)는 광원(110), 미세유체 흐름셀(200), 검출기(120), 간섭 필터(140), 및 홀더(130)를 포함할 수 있다. 본 실시예에 따른 흡광 검출 장치(100)는 복수의 시료를 동시에 분석할 수 있는 장치로서, 특히 수질 오염을 특정하기 위한 장치로 이루어질 수 있다. 본 실시예에 따른 흡광 검출 장치(100)는 물 속에 포함된 특정 성분을 검출하기 위한 장치로 이루어질 수 있다.
광원(110)은 빛을 발생시키며 면 광원 또는 LED 소자 등으로 이루어질 수 있다. 또한 광원(110)은 스마트 기기에서 발생되는 빛으로 이루어질 수도 있다. 광원(110)은 홀더(130)의 하부에 배치되어 홀더(130)를 지지할 수 있다. 하나의 광원(110)은 복수의 광 입사구(221)에 동시에 빛을 조사할 수 있다. 이에 따라 빛의 세기 변화로 인하여 검출 정확도가 낮아지는 문제를 방지할 수 있다.
광원(110)은 지지대(151) 상에 전방향으로 회전 가능한 조인트(152)를 매개로 거치될 수 있다. 조인트(152)는 구형의 돌기와 돌기를 감싸는 컵을 포함할 수 있다. 이에 따라 광원(110)은 검출기(120)에 수직인 방향으로 용이하게 조절될 수 있다.
검출기(120)는 냉각 CCD 카메라로 이루어질 수 있으며, 미세유체 흐름셀(200)의 상부에 설치된다. 검출기(120)는 기 설정된 노출시간 동안 미세유체 흐름셀로 입사한 빛의 세기 변화를 연속적으로 측정한다. 여기서 노출시간은 0.5초 내지 1.5초로 이루어질 수 있다.
홀더(130)는 판상으로 이루어지며 간섭 필터(140) 및 미세유체 흐름셀(200)을 지지한다. 홀더(130)의 중앙에는 간섭 필터(140)가 삽입되는 장착 홀(132)이 형성되며, 홀더(130)의 상면에는 미세유체 흐름셀(200)을 감싸는 지지 리브(134)가 형성된다.
간섭 필터(140)는 미세유체 흐름셀(200)과 광원(110) 사이에 설치되어 미세유체 흐름셀(200)로 입사되는 빛을 가공한다. 간섭 필터(140)는 광원(110)에서 출사되는 빛의 반치전폭(full width at half maximum) 보다 더 작은 반치전폭을 갖도록 빛을 투과한다. 빛의 파장의 밴드폭이 감소되면 검출 효과가 향상될 수 있으며, 이에 따라 보다 정확하게 농도를 검출할 수 있고, 검출 가능한 농도범위를 최대로 확장할 수 있다. 여기서 간섭 필터(140)는 코발트(Ⅱ) 클로라이드(CoCl2)의 최대흡수파장인 514nm의 빛을 5.7nm의 반치전폭으로 투과하는 필터로 이루어질 수 있다. 다만, 광원에서 출사되는 빛이 녹색광, 적색광, 청색광 등으로 이루어져 빛의 대역폭이 좁은 경우에는 간섭 필터가 생략될 수도 있다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체 흐름셀을 도시한 사시도이고, 도 4는 도 3에서 Ⅳ-Ⅳ선을 따라 잘라 본 절개 사시도이며, 도 5는 도 3에서 Ⅴ-Ⅴ선을 따라 잘라 본 단면도이다.
도 3 내지 도 5를 참조하여 설명하면, 미세유체 흐름셀(200)은 시료 주입구(210), 검출 통로(241), 광 입사구(221), 광 출사구(223), 연결 통로(230), 배출 유도통로(250), 시료 배출구(260)를 포함할 수 있다. 미세유체 흐름셀(200)은 사각판 형상의 지지판(201)과 지지판(201)에서 상부로 돌출되며 원기둥 형상으로 이루어진 바디부(202)를 포함한다.
미세유체 흐름셀(200)은 빛을 흡수할 수 있는 검정색의 재료로 3차원 프린터로 제작될 수 있다. 다만 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니며 미세유체 흐름셀(200)은 빛을 흡수할 수 있는 색으로 착색될 수도 있다.
시료 주입구(210)는 바디부(202)의 둘레 방향으로 이격 배치되며, 바디부(202)에는 6개의 시료 주입구(210)가 형성될 수 있다. 이에 따라 본 실시예에 따른 미세유체 흐름셀(200)은 6개의 시료를 동시에 분석할 수 있다. 시료 주입구(210)에는 시료를 전달하는 용액 주입관이 삽입되는 결합 홈(211)과 결합 홈(211)의 바닥에서 돌출되어 용액 주입관에 삽입되는 결합 돌기(212)가 형성될 수 있다. 용액 주입관은 플렉서블한 관으로 이루어지며, 용액 주입관에는 시료가 저장된 용기와 다채널 연동펌프가 설치될 수 있다.
시료 주입구(210)는 검량선을 얻기 위한 표준용액이 주입되는 표준용액 주입구와 측정대상 시료가 주입되는 시료 주입구를 포함할 수 있다. 즉, 일부의 시료 주입구(210)로는 측정 대상 물질의 농도를 알고 있는 표준용액이 주입되고, 일부의 시료 주입구(210)로는 측정대상 시료가 주입될 수 있다. 6개의 시료 주입구(210) 중 어느 하나에만 표준용액이 주입되고, 나머지 시료 주입구에는 측정대상 시료가 주입될 수 있다. 다만 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니다.
연결 통로(230)들은 시료 주입구(210)와 광 입사구(221)를 연결하여 시료 주입구(210)에서 광 입사구(221)로 시료를 전달한다. 연결 통로(230)들은 바디부(202)의 반경 방향으로 이어진 제1 통로(231)와 제1 통로(231)에서 하부로 이루어진 제2 통로(232)를 포함할 수 있다. 제1 통로(231)는 지지판(201)과 수평인 방향으로 이어지며 제2 통로(232)는 바디부(202)의 높이 방향으로 이어질 수 있다.
도 7에 도시된 바와 같이 미세유체 흐름셀(200)의 하면에는 광이 입사되는 복수의 광 입사구(221)가 형성된다. 광 입사구(221)는 바디부(202)의 외측에서 중앙으로 이어진 홈으로 이루어지며 대략 방사상으로 이어져 형성될 수 있다. 광 입사구(221)의 길이방향 외측 단부는 연결 통로(230)와 연결되고, 광 입사구(221)의 내측 단부는 검출 통로(241)와 연결된다. 이에 따라 연결 통로(230)의 하단과 검출 통로(241)의 하단은 광 입사구(221)의 길이 방향으로 이격 배치된다. 광 입사구(221)에서 검출 통로(241)와 연결된 단부가 내측에 위치하므로 하나의 광원에서 출사된 빛이 모든 광 입사구로 용이하게 진입할 수 있다.
광 입사구(221)는 미세유체 흐름셀(200)의 하면에 형성되며 하부로 개방된 구조로 이루어질 수 있다. 바디부(202)의 하면에는 광 투과성을 갖는 하부 커버(205)가 설치되어 광 입사구(221)에서 시료가 유출되는 것을 방지한다. 미세유체 흐름셀(200)에는 6개의 광 입사구(221)가 형성되며, 각각의 광 입사구(221)는 연결 통로(230)와 연결될 수 있다.
검출 통로(241)는 광 입사구(221)에서 광 출사구(223)까지 이어져 형성되며 복수의 검출 통로(241)는 미세유체 흐름셀(200)의 높이 방향으로 평행하게 이어져 형성될 수 있다. 이에 따라 시료는 검출 통로(241)를 통해서 광 입사구(221)에서 광 출사구(223)까지 이동할 수 있다. 검출 통로들(241)은 광 입사구(221)를 매개로 각각 연결 통로(230)와 연결될 수 있다. 이와 같이 복수의 검출 통로(241)들이 서로 평행하게 배치되면 복수의 시료를 동시에 분석할 수 있다.
도 6에 도시된 바와 같이 미세유체 흐름셀(200)의 상면에는 광이 출사되는 복수의 광 출사구(223)가 형성되며 광 출사구(223)들은 평행하게 배치될 수 있다. 또한, 광 출사구(223)는 미세유체 흐름셀(200)의 상면에 형성되며 상부로 개방된 구조로 이루어질 수 있다. 바디부(202)의 상면에는 광 투과성을 갖는 상부 커버(206)가 설치되어 광 입사구(221)에서 시료가 유출되는 것을 방지한다. 미세유체 흐름셀(200)에는 6개의 광 출사구(223)가 형성되며, 각각의 광 출사구(223)는 배출 유도통로(250)와 연결될 수 있다.
광 출사구(223)의 길이방향 외측 단부는 배출 유도통로(250)와 연결되고, 광 출사구의 내측 단부는 검출 통로(241)와 연결된다. 이에 따라 배출 유도통로(250)의 상단과 검출 통로(241)의 상단은 광 출사구(223)의 길이 방향으로 이격 배치된다.
배출 유도통로(250)는 광 출사구(223)의 하면과 연결된 복수의 하부 통로(251)와 하부 통로(251)들과 연결되어 하부 통로(251)들에서 시료가 유입되는 배출 챔버(252)와 배출 챔버(252)와 시료 배출구(260)를 연결하는 전달 통로(253)를 포함할 수 있다. 하부 통로(251)는 광 출사구(223)에서 하부로 이어져 배출 챔버(252)와 연결된다. 배출 챔버(252)에는 복수의 하부 통로(251)가 연결되며, 미세유체 흐름셀(200)의 내부에는 2개의 배출 챔버(252)가 형성될 수 있다. 배출 챔버들(252)은 검출 통로(241)를 상이에 두고 이격 배치된다.
이와 같이 배출 챔버(252)가 이격 배치됨에 따라 검출 통로(241)가 빛의 이동 방향과 평행하게 배치될 수 있을 뿐만 아니라 배출 챔버(252)가 형성되므로 최초 주입된 시료가 신속하게 이동할 수 있다.
전달 통로(253)는 각각의 배출 챔버(252)에 연결된 2개의 제1 전달관(253a)과 제1 전달관(253a)들과 시료 배출구(260)를 연결하는 하나의 제2 전달관(253b)을 포함할 수 있다. 미세유체 흐름셀(200)에는 하나의 시료 배출구(260)가 형성되며 6개의 시료 주입구(210)에서 주입된 시료는 배출 챔버(252) 및 전달 통로(253)에서 합류하여 시료 배출구(260)를 통해서 배출될 수 있다.
상기한 바와 같이 본 실시예에 따르면 하나의 미세유체 흐름셀(200)을 이용하여 복수의 용액을 동시에 분석할 수 있다. 또한, 각각의 시료 주입구(210)가 연결 통로(230)를 통해서 광 입사구(221)와 연결되며, 광 출사구(223)가 배출 유도통로(250)를 통해서 시료 배출구(260)와 연결되므로 시료의 이동과 배출이 용이하다.
이하에서는 본 발명의 일 실시예에 따른 다중 흡광 검출 방법에 대해서 설명한다. 도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 다중 흡광 검출 방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 8을 참조하여 설명하면, 본 실시예에 따른 다중 흡광 검출 방법은 복수의 표준용액과 측정 대상인 시료를 각각의 시료 주입구(210)로 동시에 주입하는 시료 주입 단계(S101), 주입된 표준용액과 시료를 검출 통로(241)를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 흡광도 측정 단계(S102), 표준용액의 흡광도로부터 검량선을 도출하는 검량선 도출 단계(S103), 검량선으로부터 시료의 농도를 도출하는 농도 결정 단계(S104)를 포함할 수 있다.
시료 주입 단계(S101)는 서로 다른 농도의 표준용액을 시료 주입구(210)를 통해서 주입하며 하나의 시료 주입구(210)로 측정 대상인 시료를 주입할 수 있다. 여기서 표준용액은 측정대상 물질의 농도를 알고 있는 용액이다. 시료 주입 단계(S101)는 미세유체 흐름셀의 둘레 방향으로 이격된 시료 주입구(210)를 통해서 시료를 주입한다.
흡광도 측정 단계(S102)는 주입된 용액과 시료를 미세유체 흐름셀(200)의 하단에 형성된 광 입사구(221)로 이동시키는 하부 이송 단계와 빛이 통과하는 검출 통로(241)를 따라 용액과 시료를 광 출사구(223)로 이동시키는 검출 통로 이송 단계와 광 출사구(223)에서 용액과 시료를 배출 챔버(252)를 거쳐서 시료 배출구(260)로 이동시키는 배출 단계와 검출 통로(241)를 통과한 빛을 냉각 CCD 카메라로 촬영하는 이미지 생성 단계를 포함할 수 있다.
검량선 도출 단계(S103)는 표준용액의 농도와 흡광도를 대비하여 검량선을 생성한다. 농도 결정 단계(S104)는 시료의 흡광도를 검량선에 대입하여 시료에 포함된 특정 물질의 농도를 도출한다.
도 9는 본 발명의 다른 실시예에 따른 다중 흡광 검출 방법을 설명하기 위한 순서도이다. 도 9를 참조하여 설명하면, 본 실시예에 따른 다중 흡광 검출 방법은 복수의 표준용액을 각각의 주입구로 동시에 주입하는 표준용액 주입 단계(S201), 주입된 표준용액을 검출 통로를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 표준용액 흡광도 측정 단계(S202), 표준용액의 흡광도로부터 검량선을 도출하는 검량선 도출 단계(S203), 측정 대상인 시료들을 각각의 주입구로 동시에 주입하는 시료 주입 단계(S204), 주입된 시료를 검출 통로를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 시료 흡광도 측정 단계(S205), 및 검량선으로부터 시료의 농도를 도출하는 농도 결정 단계(S206)를 포함할 수 있다.
표준용액 주입 단계(S201)는 각각의 시료 주입구(210)로 통해서 서로 다른 농도를 갖는 표준용액을 동시에 주입할 수 있다. 여기서 표준용액은 측정대상 물질의 농도를 알고 있는 용액이다.
표준용액 흡광도 측정 단계(S202)는 주입된 표준용액을 미세유체 흐름셀(200)의 하단에 형성된 광 입사구(221)로 이동시키고, 빛이 통과하는 검출 통로(241)를 따라 용액과 시료를 광 출사구(223)로 이동시키면서 이미지를 생성한 후에 표준용액을 배출 챔버(252)를 거쳐서 시료 배출구(260)로 이동시킨다.
검량선 도출 단계(S203)는 표준용액의 농도와 흡광도를 대비하여 검량선을 생성한다. 시료 주입 단계(S204)는 각각의 주입구로 통해서 복수의 측정 대상 시료를 동시에 주입할 수 있다. 여기서 시료는 현장에서 수집한 물이 될 수 있다. 시료 흡광도 측정 단계(S205)는 주입된 시료를 검출 통로(241)를 따라 이동시키면서 이미지를 생성한 후에 시료를 시료 배출구(260)로 이동시킨다. 농도 결정 단계(S206)는 시료들의 흡광도를 검량선에 대입하여 시료에 포함된 특정 물질의 농도를 도출한다.
이하에서는 본 발명의 실험예에 대해서 설명한다.
(실험예 1)
실험예 1은 본 실시예에 따른 흡광 검출 장치(100)의 성능을 검증하기 위해 코발트(Ⅱ) 클로라이드(CoCl2) 표준용액의 흡광도를 측정하고, 측정한 흡광도로부터 검량선을 얻는다. 또한 상용 자외선-가시광선 흡광광도계로 동일한 표준용액의 흡광도와 검량선을 얻은 결과와 비교한다.
코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액의 농도는 0, 50, 100, 150, 200, 250ppb로 제조하여 사용한다. 상용 자외선-가시광선 흡광광도계는 광 경로 길이가 10mm인 흡광검출셀을 사용한다.
상용 자외선-가시광선 흡광광도계의 경우, 상기한 6개의 표준용액의 흡광도는 각각의 흡광검출셀 또는 1개의 흡광검출셀을 이용하여 6번 측정하며, 매 측정 시 세척하여 사용한다. 도 10은 상용 자외선-가시광선 흡광광도계로 측정한 표준용액의 흡광도로부터 얻은 검량선이다. 도 10에 도시된 바와 같이 검량선은 선형계수(R2)가 0.99997이며, Y=0.00480X-0.00200로 나타낼 수 있다. 여기서 Y는 흡광도이고, X는 염화 코발트의 농도이다. 검량선의 선형계수는 표준용액의 농도에 따른 흡광도의 상관관계를 나타내는 것으로 1에 근접할수록 정확도가 높다는 것을 의미한다.
본 실시예에 따른 흡광 검출 장치의 경우, 상기한 표준용액을 6개의 실리콘 재질의 용액 주입관을 다채널 연동펌프에 고정하여 10μL/min의 유속으로 연속적으로 유입 및 배출한다. 도 11은 냉각 CCD 카메라로 얻은 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액 0, 50, 100, 150, 200, 250mM에 대한 이미지이다. 도 11에 도시된 바와 같이 표준용액의 농도가 높을수록 광원의 빛이 많이 흡수되어 낮은 농도의 이미지보다 어두운 것을 알 수 있다. 각 이미지는 동일한 면적의 원에 명암을 소프트웨어를 사용하여 수치화한 다음, 다음의 식으로부터 계산하여 얻는다.
[식 1]
A = -log(I/I0)
A는 흡광도, I0는 검출셀로 유입된 광원의 빛의 세기, I는 검출셀을 통과한 광원의 빛의 세기를 말한다. 본 실험예 1에서 I0는 바탕용액 즉, 0 mM 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액이 유입된 미세유체 흐름셀을 통과한 광원의 빛에 세기이며, I는 나머지 표준용액 각각에 대한 미세유체 흐름셀을 통과한 빛의 세기이다.
도 12은 도 11의 이미지로부터 계산한 흡광도로부터 얻은 검량선으로서, 검량선은 선형계수(R2)가 0.99996이며, Y=0.00471X+0.000429로 나타낼 수 있다. 여기서 선형계수는 0.99996으로서 도 8에서 나타낸 선형계수 0.99997과 유사하게 1.0000에 근접한다.
또한 두 장치로부터 얻은 표준용액의 농도에 따른 흡광도와 직선성을 보이는 농도범위가 유사하다. 상기한 결과로부터 본 실시예에 따른 흡광 검출 장치가 상용 자외선-가시광선 흡광광도계의 성능에 준하는 것을 알 수 있다.
(실험예 2)
실험예 2는 본 실시예에 따른 흡광 검출 장치(100)에 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액과 표준시료의 흡광도를 동시에 측정하여 검량선을 얻는 동시에 표준시료의 농도를 결정한다. 표준용액은 0, 25, 75, 150, 250 mM, 표준시료는 50, 100, 200 mM의 코발트(Ⅱ) 클로라이드 용액을 사용한다. 상기한 표준시료는 동일한 용액 주입관을 통해 연속하여 주입한다.
도 13은 코발트(Ⅱ) 클로라이드의 농도가 50mM인 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이며, 도 14는 코발트(Ⅱ) 클로라이드의 농도가 100mM인 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이며, 도 15는 코발트(Ⅱ) 클로라이드의 농도가 200mM인 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이다.
[표 1]은 표준시료에 대한 상대오차, 상대표준편차, 검량선의 선형계수를 나타낸다. 상대오차는 정확도를 나타내는 것으로 -0.5% 이하이며, 상대표준편차는 10번 반복분석을 통해 얻은 것으로 정밀도를 나타내며 0.446% 이하로 정확도와 정밀도가 매우 높다. 또한 검량선의 선형계수는 1.0000에 근접한 값을 가진다.
표준시료농도
(mM)
측정농도
(mM)
상대오차
(%)
상대표준편차
(%, n = 10)
선형계수
(R2)
50.0 49.8 -0.40 0.317 0.99999
100.0 100.0 0.00 0.446 0.99994
200.0 199.0 -0.50 0.310 0.99997
(실험예 3)
실험예 3은 본 실시예에 따른 흡광 검출 장치(100)로 다수의 시료를 동시에 분석한다. 0, 25, 75, 125, 175, 225 mM의 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액을 주입하여 검량선을 얻은 다음, 0, 50, 100, 150, 200, 250 mM 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준시료를 주입하여 상기한 검량선의 함수로부터 각 표준시료의 농도를 확인하고 10회 반복 분석하여 정밀도를 확인한다.
도 16은 본 실험예의 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준용액에 대한 냉각 CCD 이미지이다. 상기한 이미지로부터 표준용액의 농도에 따른 흡광도를 계산하여 얻은 검량선은 Y=0.00463X-0.0026의 1차함수로 표현되며 선형계수는 0.99995로 1.0000에 근접한다. 도 17은 본 실험예의 코발트(Ⅱ) 클로라이드 표준시료에 대한 냉각 CCD 이미지이다. 상기한 이미지로부터 표준시료 각각에 대한 흡광도를 계산하여 도 16으로부터 얻은 1차함수에 적용하여 측정농도를 계산한다.
표 2는 도 17의 표준시료에 대한 상대오차, 상대표준편차, 검량선의 선형계수를 나타낸다. 상대오차 2.72% 이하이며, 상대표준편차는 10번 반복분석을 통해 얻은 것으로 1.27% 이하로 정확도와 정밀도가 매우 높다.
표준시료농도
(mM)
측정농도
(mM)
상대오차
(%)
상대표준편차
(%, n = 10)
50.0 51.4 2.72 1.27
100.0 101.1 1.06 0.400
150.0 150.8 0.543 0.248
200.0 200.4 0.217 0.348
250.0 249.7 -0.118 0.232
이상, 본 발명의 일 실시예에 대하여 설명하였으나, 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서, 구성 요소의 부가, 변경, 삭제 또는 추가 등에 의해 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있을 것이며, 이 또한 본 발명의 권리범위 내에 포함된다고 할 것이다.
100: 흡광 검출 장치
110: 광원
120: 검출기
130: 홀더
140: 간섭 필터
200: 미세유체 흐름셀
210: 시료 주입구
221: 광 입사구
223: 광 출사구
230: 연결 통로
241: 검출 통로
250: 배출 유도통로
260: 시료 배출구

Claims (14)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 빛을 출사하는 광원;
    빛이 통과하는 복수의 검출 통로를 갖는 미세유체 흐름셀; 및
    상기 미세유체 흐름셀을 통과한 빛을 검출하는 검출기;
    를 포함하고,
    상기 검출 통로는 상기 광원에서 출사되는 빛의 진행방향을 따라 이어져 형성되며,
    상기 미세유체 흐름셀은 시료가 주입되는 복수의 시료 주입구, 광이 입사되는 복수의 광 입사구, 및 광이 출사되는 복수의 광 출사구를 포함하고,
    상기 검출 통로는 상기 시료 주입구와 연결되되 상기 광 입사구에서 상기 광 출사구까지 이어져 형성되며,
    상기 시료는 상기 검출 통로를 통해서 상기 광 입사구에서 상기 광 출사구로 이동하며,
    하나의 상기 광원은 복수의 상기 광 입사구에 동시에 빛을 조사하도록 이루어지며,
    상기 검출기는 복수의 상기 광 출사구에서 출사되는 빛의 세기를 동시에 측정하는 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 장치.
  8. 제7 항에 있어서,
    상기 검출기는 빛의 세기를 측정하는 카메라로 이루어진 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 장치.
  9. 제7 항에 있어서,
    상기 시료 주입구에는 상기 광 입사구를 연결하는 연결 통로가 형성되고, 상기 검출 통로는 상기 광 입사구를 매개로 상기 연결 통로와 연결된 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 장치.
  10. 제9 항에 있어서,
    상기 미세유체 흐름셀은 상기 광 출사구와 연결된 배출 유도통로와 상기 배출 유도통로와 연결되어 시료를 배출하는 시료 배출구를 더 포함하며,
    상기 배출 유도통로는 상기 광 출사구의 하면과 연결된 복수의 하부 통로와 복수의 상기 하부 통로들과 연결되어 상기 하부 통로들에서 시료가 유입되는 배출 챔버와 상기 배출 챔버와 상기 시료 배출구를 연결하는 전달 통로를 포함하는 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 장치.
  11. 제7 항에 있어서,
    상기 미세유체 흐름셀과 상기 광원 사이에는 상기 광원에서 출사되는 빛의 반치전폭(full width at half maximum) 보다 더 작은 반치전폭을 갖도록 빛을 투과하는 간섭 필터가 설치된 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 장치.
  12. 제11 항에 있어서,
    상기 미세유체 흐름셀과 상기 광원 사이에는 상기 간섭 필터가 삽입되는 장착 홀이 형성된 홀더가 설치되고, 상기 홀더에는 상기 미세유체 흐름셀을 감싸는 지지 리브가 형성된 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 장치.
  13. 시료가 주입되는 주입구, 시료가 배출되는 배출구, 시료가 이동하는 검출 통로, 빛이 입사되는 광 입사구, 빛이 출사되는 광 출사구를 갖는 미세유체 흐름셀을 이용한 다중 흡광 검출 방법에 있어서,
    복수의 표준용액과 측정 대상인 시료를 각각의 상기 주입구로 동시에 주입하는 시료 주입 단계;
    주입된 표준용액과 시료를 상기 검출 통로를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 흡광도 측정 단계;
    표준용액의 흡광도로부터 검량선을 도출하는 검량선 도출 단계; 및
    검량선으로부터 시료의 농도를 도출하는 농도 결정 단계;
    를 포함하며,
    상기 흡광도 측정 단계는 주입된 시료를 미세유체 흐름셀에 형성된 상기 광 입사구로 이동시키는 하부 이송 단계와 광원에서 출사된 빛이 통과하는 상기 검출 통로를 따라 시료를 상기 광 출사구로 이동시키는 검출 통로 이송 단계와 상기 광 출사구에서 시료를 배출구로 이동시키는 배출 단계와 상기 검출 통로를 통과한 빛을 검출기로 촬영하는 이미지 생성 단계를 포함하고,
    상기 검출 통로 이송 단계에서 하나의 상기 광원은 복수의 상기 광 입사구에 동시에 빛을 조사하며,
    상기 이미지 생성 단계에서 하나의 상기 검출기는 복수의 상기 광 출사구에서 출사되는 빛의 세기를 동시에 측정하는 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 방법.
  14. 시료가 주입되는 주입구, 시료가 배출되는 배출구, 시료가 이동하는 검출 통로, 빛이 입사되는 광 입사구, 빛이 출사되는 광 출사구를 갖는 미세유체 흐름셀을 이용한 다중 흡광 검출 방법에 있어서,
    복수의 표준용액을 각각의 상기 주입구로 동시에 주입하는 표준용액 주입 단계;
    주입된 표준용액을 상기 검출 통로를 따라 이동시키면서 광원에서 출사된 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 표준용액 흡광도 측정 단계;
    표준용액의 흡광도로부터 검량선을 도출하는 검량선 도출 단계;
    측정 대상인 시료들을 각각의 상기 주입구로 동시에 주입하는 시료 주입 단계;
    주입된 시료를 상기 검출 통로를 따라 이동시키면서 빛을 조사하여 흡광도를 측정하는 시료 흡광도 측정 단계; 및
    검량선으로부터 시료의 농도를 도출하는 농도 결정 단계;
    를 포함하며,
    상기 시료 흡광도 측정 단계에서,
    하나의 상기 광원은 복수의 상기 광 입사구에 동시에 빛을 조사하며,
    하나의 검출기는 복수의 상기 광 출사구에서 출사되는 빛의 세기를 동시에 측정하는 것을 특징으로 하는 다중 흡광 검출 방법.
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