KR102090758B1 - 식물 생장 촉진용 조성물 및 식물의 생장 촉진 방법 - Google Patents

식물 생장 촉진용 조성물 및 식물의 생장 촉진 방법 Download PDF

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전남대학교 산학협력단
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Abstract

본 발명은 이사리아 자바니카 pf185(Isaria javanica pf185) KACC93241의 배양액, 배양여액 및 포자로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물 및 상기 조성물을 이용하여 식물의 생장 촉진 방법에 관한 것이다. 상기 조성물은 환경친화적이고 쉽게 얻을 수 있어 매우 유용하며, 식물 관련 사업들의 발전에 이바지가 될 수 있다.

Description

식물 생장 촉진용 조성물 및 식물의 생장 촉진 방법{Composition for promoting growth of plant and Method for promoting growth of plant}
본 발명은 식물 생장 촉진용 조성물과 식물의 생장 촉진 방법에 관한 것이다.
곤충 병원성 진균류는 해충에 대한 방제 가능성을 가지고 있다. 이러한 진균류는 다양한 작물 시스템에서 절지동물의 해충을 방제하는 생물농약으로서 상업적으로 이용이 가능하다. 곤충병원성 진균류가 식물 질병 및 비생물적인 스트레스에 대한 시스템적 내성의 유도, 작물 생장의 촉진, 식물 병원균의 직접적인 저해를 통해 식물의 건강에 긍정적인 영향을 미친다는 것이 최근 연구들을 통해 밝혀졌다. 결과적으로, 이러한 곤충병원성 진균은 축적된 해충 관리 연구에서 매력적인 주제에 해당한다. 그들의 cross-kingdom 효과는 작물의 보호에 있어서, 곤충 병원성 진균은 단순히 해충 방제 보다는 더 좋은 효과들을 가질 수 있다는 것을 나타낸다.
브베리아 속(Beauveria spp.), 메타히리움 속(Metarhizium spp.) 및 레카니실리움 속(Lecanicillum spp.)을 포함하는 몇 가지 진균 곤충병원체들은 숙주 식물의 콜로니화 이 후 식물의 생장을 촉진한다. 곤충병원성 진균인, 브베리아 베시아나(Beauveria bassiana) 및 레카니실리움 속(Lecanicillium spp.)이 콜로니화한 야자나무의 단백질체학적 분석은 광합성, 에너지 대사, 식물 방어 및 스트레스 보호 단백질의 유도가 개선되는 것을 보여준다. 식물 생장 촉진의 메커니즘은 식물 생장 호르몬의 변화 또는 영양 개선을 포함할 수 있다. 예를 들어, 식염수 조건에서 재배된 대두에 M. anisopliae의 콜로니화는 abscisic acid의 생산을 감소시키고, jasmonic acid의 생산은 증진시킨다. 곤충병원성 M. robertsii은 철분이 제거된 배양 조건에서 숙주식물의 철분 영양을 증진시킬 수 있는 siderophore를 분비한다. B. bassiana의 콜로니화된 식물들에서 변화된 식물 영양들을 관찰할 수 있다. 미생물의 휘발성 화합물들 또한 식물 생장을 증진시킨다. Fusarium oxysporum의 분리물은 식물 생장에 영향을 미치는 휘발성 유기 화합물들을 생산한다. Bacillus subtilis와 Pseudomonas chlororaphis 같은 Rhizobacteria는 식물 생장을 증진시키고 생물적 또는 비생물적인 스트레스들에 대한 시스템적인 내성을 유도하는 2R, 3R-butanediol을 생산한다.
본 발명에서는 곤충병원성 진균인 Isaria javanica pf185에 의한 식물 생장 촉진을 조사하였다. 이 진균은 벌레나 식물 질병에 대한 생물방제 효과를 가지고 있다. 또한, 우리는 이 진균의 대사체가 식물 생장에 영향을 미치는 지를 테스트하였다. I. javanica pf185의 배양액, 배양여액 및 포자 등이 생장을 촉진함을 확인할 수 있었다.
한국공개특허 제1997-0058555호
본 발명은 이사리아 자바니카 pf185(Isaria javanica pf185) KACC93241의 배양액, 배양여액 및 포자로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 Isaria javanica pf185의 배양액, 배양여액 및 포자로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 식물 또는 식물이 식재된 토양에 살포하여 식물의 생장 촉진 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
1. 이사리아 자바니카 pf185(Isaria javanica pf185) KACC93241의 배양액, 배양여액 및 포자로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물.
2. 위 1에 있어서, 상기 식물은 고추, 토마토 감자, 피망, 구기자, 토마토, 담배로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나인, 식물 생장 촉진용 조성물.
3. 위 1에 있어서, 상기 식물은 담배(Nicotiana)인, 식물 생장 촉진용 조성물.
4. 위 1에 있어서, 상기 생장은 싹, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 부위의 생장인, 식물 생장 촉진용 조성물.
5. 위 1의 조성물을 식물 또는 식물에 식재된 토양에 살포하는 단계;를 포함하는 식물의 생장 촉진 방법.
6. 위 5에 있어서, 상기 식물은 고추, 토마토 감자, 피망, 구기자, 토마토, 담배로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나인, 식물의 생장 촉진 방법.
7. 위 5에 있어서, 상기 식물은 담배(Nicotiana)인, 식물의 생장 촉진 방법.
8. 위 5에 있어서, 상기 생장은 싹, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 부위의 생장인, 식물의 생장 촉진 방법.
본 발명의 조성물 또는 방법은 Isaria javanica pf185 균주의 배양액, 배양여액 및 포자로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는 조성물이 식물의 생장을 촉진할 수 있는 효과를 가짐으로써, 친환경적인 조성물을 이용토록 하여 다양한 산업에 활용될 수 있는 장점이 있다.
도 1은 pot에서 담배(Nicotiana tabaccum cv. Xanthi) 식물의 생장에 대한 Isaria javanica pf185의 배양액의 영향을 확인한 도이다.
도 2는 pot에서 담배(Nicotiana tabaccum cv. Xanthi) 식물의 생장에 대한 Isaria javanica pf185의 배양여액의 영향을 확인한 도이다.
도 3은 pot에서 담배(Nicotiana tabaccum cv. Xanthi) 식물의 생장에 대한 Isaria javanica pf185의 포자의 직접적인 처리 시 그 영향을 확인한 도이다.
도 4는 pot에서 담배(Nicotiana tabaccum cv. Xanthi) 식물의 생장에 대한 Isaria javanica pf185의 포자의 간접적인 처리 시 그 영향을 확인한 도이다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 이사리아 자바니카 pf185(Isaria javanica pf185) KACC93241의 배양액, 배양여액 및 포자로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물에 관한 것이다.
상기 배양액이란, 미생물이나 동식물의 조직을 배양하기 위하여 배양체가 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 하고, 다시 특수한 목적을 위한 물질을 넣어 혼합한 것으로, 미생물 및 미생물의 대사물질이 포함된 것이다. 따라서 이사리아 자바니카 pf185의 배양액이란, 이사리아 자바니카 pf185가 배양되기 위한 영양물질, 해당 균주, 이사리아 자바니카 pf185의 대사물질 등이 모두 포함된 액체 또는 고체의 물질이다.
상기 배양여액이란, 미생물을 배양한 액체배지에서 균체를 여과하여 제거한 여액으로서, 이사리아 자바니카 pf185의 배양여액이란, 이사리아 자바니카 pf185이 배양된 배양액에서 이사리아 자바니카 pf185 균체만 제거한 것을 의미한다.
상기 포자란 균류나 식물이 무성생식의 수단으로서 형성하는 생식세포를 말하는 것으로, 이사리아 자바니카 pf185의 포자란, 이사리아 자바니카 pf185의 생식세포를 말한다.
상기 식물은 가지과 식물일 수 있다. 가지과 식물로서는 예를 들어, 고추, 토마토 감자, 피망, 구기자, 토마토, 담배 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 상기 식물은 바람직하게는 담배(Nicotiana)일 수 있고, 상기 담배(Nicotiana) 속에 속하는 식물은 예를 들어, Nicotiana acuminate, Nicotiana alata, Nicotiana attenuata, Nicotiana benthamiana, Nicotiana clevelandii, Nicotiana excelsior, Nicotiana forgetiana, Nicotiana glauca, Nicotiana glutinosa, Nicotiana langsdorffii, Nicotiana longiflora, Nicotiana obtusifolia, Nicotiana paniculata, Nicotiana plumbagifolia, Nicotiana quadrivalvis, Nicotiana repanda, Nicotiana rustica, Nicotiana suaveolens, Nicotiana sylvestris, 재배담배(Nicotiana tabacum), Nicotiana tomentosa 등일 수 있으며, 보다 바람직하게는 재배담배(Nicotiana tabacum)일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 생장이란, 생물체를 이루고 있는 세포의 수가 많아져서 생물체의 크기가 커지거나 무게가 증가하는 것을 말하며, 예를 들어 식물세포의 싹이나 뿌리, 줄기 등의 무게가 무거워지거나 길이가 길어지는 것, 두께의 증가, 뿌리털의 증가 등일 수 있으며, 바람직하게는 싹 또는 뿌리 및 줄기로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나 부위의 생장일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식물 생장 촉진용 조성물은 식물에 직접적으로 처리하여 식물의 생장을 촉진할 수 있고, 간접적으로 처리하여 휘발되는 물질이 식물에 접촉되어 식물의 생장을 촉진시킬 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 상기 조성물을 식물 또는 식물에 식재된 토양에 살포하는 단계;를 포함하는 식물의 생장 촉진 방법에 관한 것이다.
상기 조성물을 식물에 살포하는 경우, 식물의 직접적인 흡수에 따라 식물의 생장이 촉진되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 조성물을 식물에 식재된 토양에 살포하여 식물의 생장을 촉진하는 경우, 식물이 식재된 토양 내 조성물이 토양을 통해 식물에 흡수되는 것일 수 있고, 공기 중으로 휘발된 물질이 식물에 접촉되어 흡수되는 것일 수 있고, 살포하는 때에 공기 중에서 바로 식물에게 접촉되어 흡수되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식물은 전술한 바와 같이 바람직하게는 담배 속에 속하는 식물일 수 있고, 보다 바람직하게는 재배담배(Nicotiana tabacum)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 생장은 전술한 바와 같이 싹, 뿌리, 줄기 등 식물 각 부위의 무게 또는 크기(길이) 등의 생장일 수 있고, 바람직하게는 뿌리 및 줄기로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 부위의 생장일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다.
실시예
1. 담배 식물에 대한 Isaria javanica pf185의 배양액, 배양여액 및 포자의 식물 생장 촉진효과의 실험 준비
(1) Isaria javanica pf185의 배양
Isaria javanica pf185 (KACC93241P)를 국립농업진흥청(원주, 한국)로부터 분양받았다. pf185 균주는 감자한천배지(potato dextrose agar, PDA; Difco Inc. Detroit, MI, USA)에서 배양하였다.
(2) 담배 식물의 준비
Nicotiana tabacum L. cv. Xanthi 씨앗을 에탄올과 차아염소산 나트륨 용액(Han, Anderson, et al., 2006)을 사용하여 표면 살균을 하였다. 살균된 담배 씨앗을 0.5% (w/v) 한천 및 3% (w/v) 자당(Murashige and Skoog, 1962)이 첨가된 Murashig and Skoog (MS, Sigma-Aldrich Inc., St. Louis, MO, USA) 페트리 접시(SPL Life Science Co., Pecheon, Korea) 배지에 심었다. 담배 식물을 40-W 형광등(2,000 lux, 80 μmol photons m-2 s-1) 하에서 16시간의 빛과 8시간의 암흑을 주기로 하여 2주간 재배하였다. 온도는 25±3℃, 습도는 54 내지 60%를 유지하였다.
(3) Isaria javanica pf185의 배양액 및 배양여액의 담배 식물 생장 촉진의 분석
담배 식물을 심고 2주 후에, 담배 묘목을 MS 고형 배지를 포함하는 I plates (100 x 15 mm2, SPL Life Sci.)의 측면에 심었다. plate 당 세 개의 묘목을 심었다. PDA 배지는 분생자(1Х107 spores/ml) 현탁액을 0.1ml를 스프레딩하고 24시간 뒤에 증류수에 접종하였다. 대조군으로서 0.1ml 증류수만 처리한 PDA배지를 이용하였다. 접종된 I-plate를 Parafilm으로 밀봉하고, 상기 언급한 형광등 아래의 성장실에서 2주간 놓고, 담배 생장 파라미터를 측정하였다.
처리된 담배 식물의 뿌리 성장은 M165 FC (Leica Microsystems, Tokyo, Japan) 현미경으로 확인하였다.
다른 담배 묘목들은 pot당 하나의 묘목이 이식된 500 cm3의 멸균된 토양 없는 배지(초탄:질석:펄라이트, 7:3:3, vol/vol)가 담긴 pot에 심었다. 이러한 pot들은 매 2일마다 10ml의 증류수를 주었다. 2주 생장 후, 묘목에 곰팡이가 피었다.
손상되지 않은 배양액의 처리를 위해, PDB에 담긴 I. javanica pf185를 25℃에서 진탕배양기에서 150rpm으로 진탕배양하였다. 이 배양액을 부피비율로 1:1로 증류수로 희석하였다. 세포가 없는 상등액(배양여액)의 제조를 위해, 7일 배양액을 원심분리하여 진균 파편들을 제거하고, 0.2 μm 필터(Millipore Filter Corp., Bedford, MA, USA)로 여과하였다. 배양액은 7일령 플레이트에서 증류수와 함께 배양하였다. 현탁액을 멸균 치즈 천의 두 개의 층을 통해 여과하여 균사 파편을 제거하였다.
담배 식물은 매주 15ml씩 4 번 상등액(배양여액)으로 처리하였다. 손상되지 않은 배양액 (20 ml)을 1 회 적용 하였다. 대조군 처리를 위해 증류수 또는 PDB를 사용 하였다. 실험은 처리 당 6개의 식물로 2 번 반복되었다. 처리 중 식물 생장 인자는 최종 처리 후 1 주일 후에 측정하였다.
(4) Isaria javanica pf185의 포자의 담배 식물 생장 촉진의 분석
상기 배양액 및 배양여액의 효과 분석과 동일하게, 담배 식물을 심고 2주 후에, 담배 묘목을 MS 고형 배지를 포함하는 I plates (100 x 15 mm2, SPL Life Sci.)의 측면에 심었다. plate 당 세 개의 묘목을 심었다. PDA 배지는 분생자(1Х107 spores/ml) 현탁액을 0.1 ml를 스프레딩하고 24시간 뒤에 증류수에 접종하였다. 대조군으로서 0.1 ml 증류수만 처리한 PDA배지를 이용하였다. 접종된 I-plate를 Parafilm으로 밀봉하고, 상기 언급한 형광등 아래의 성장실에서 2주간 놓고, 담배 생장 파라미터를 측정하였다. 처리된 담배 식물의 뿌리 성장은 M165 FC (Leica Microsystems, Tokyo, Japan) 현미경으로 확인하였다.
다른 담배 묘목들은 pot당 하나의 묘목이 이식된 500 cm3의 멸균된 토양 없는 배지(초탄:질석:펄라이트, 7:3:3, vol/vol)가 담긴 pot에 심었다. 이러한 pot들은 매 2일마다 10ml의 증류수를 주었다. 2주 생장 후, 묘목에 곰팡이가 피었다.
식물에 처리할 포자를 얻기 위해, 진균 한천 플러그를 25℃의 PDA 플레이트에서 배양하였고, 배양액은 7일령 플레이트에서 증류수와 함께 배양하였다. 현탁액을 멸균 치즈 천의 두 개의 층을 통해 여과하여 균사 파편을 제거하였다. 현미경 (Olympus BX41, Japan) 하에서 헤모사이토미터 (Marienfeld Superior, Lauda-Kφnigshofen, Germany)를 사용하여 포자 농도를 결정하고, 1 x 108 포자 / ml로 조정하였다.
담배 식물은 매주 15ml씩 4 번 포자 현탁액으로 처리하였으며, 포자의 담배 생장 촉진 효과 확인을 위해서 포자 현탁액을 식물에 직접 처리하였고, 포자 현탁액에 포함된 휘발성 물질의 담배 생장 촉진 효과 확인을 위해 포자 현탁액을 식물에 닿지 않게 배지 측면에 처리하였다. 또한, 대조군 처리를 위해 증류수 또는 PDB를 사용 하였다. 실험은 처리구당 6개의 식물로 2 번 반복되었다. 처리 중 식물 생장 인자는 최종 처리 후 1 주일 후에 측정하였다.
(5) 담배 식물의 생장 분석
담배 식물들에 처리한 것의 효과를 결정하기 위해 싹의 엽록소 함유량을 Chlorophyll meter(SPAD-502Plus, Minolta Camera Co., Osaka, Japan)를 사용하여 3-4번 째 완전 발달된 담배 싹의 최소 10번의 다른 위치에서 측정하였다. 그 후, 각 식물들을 재배하였다. 식물들의 무게를 analytic balance (A&D Korea Limited, Seoul, Korea)를 이용하여 측정하였다. 식물 줄기의 직경과 길이를 digital ruler (Mitutoyo Corp., Kanagawa, Japan)를 이용해 측정하였다. 측문 뿌리의 밀도를 image analysis software ASSESS 2.0 (APS Press, St. Paul, M, USA)를 이용하여 측정하였다. 처리구당 6개 식물을 2회 반복하여 수행하였다.
(6) 통계 분석
Isaria javanica pf185 배양액, 배양여액에 의한 식물 생장 효과를 분석한 데이터를 학생용 소프트웨어 패키지 프로그램 버전 23의 SPSS (Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 이용해 분석하였다. 유의성 검증은 p<0.05 수준에서 이루어졌다. 평균 값은 표준편차 내로 이루어졌다.
2. 담배 식물에 대한 Isaria javanica pf185의 배양액, 배양여액 및 포자의 식물 생장 촉진효과의 실험 결과
(1) Isaria javanica pf185의 배양액 및 배양여액의 담배 식물 생장 촉진 효과의 확인
pot 실험에서, 담배는 진균류와 그의 대사 산물에 의해 촉진되었다. pf185의 완전한 진균 배양액이 처리된 묘목은 배양액이 처리되지 않은 1/2 PDB가 처리된 대조군 식물에 비해 더 생장했다(도 1). I. javanica pf185 완전 배양액에 뿌리를 적시고 28일 후에, 뿌리 길이(p=0.004), 싹의 무게(p=0.02), 싹의 높이(p=0.001)는 유의한 정도로 증가하였으나, 뿌리 무게에서는 유의한 영향을 나타내진 못했다. 배양여액이 처리된 경우에도 싹의 생장이 촉진됨을 확인할 수 있었다(도 2): 싹의 높이(p=0.006), 싹의 무게(p=0.003). 이러한 결과들은 I. javanica pf185의 배양액 또는 배양여액이 담배의 생장을 촉진한다는 것을 명확하게 나타낸다.
상기 실험 결과를 나타낸 도 1 및 도 2에 대해 상세히 설명하자면, 상기 실험 방법에서 언급한 진균 배양액 및 배양여액이 뿌리에 처리된 14일령 담배 묘목은 5주간 처리되었다. PDB 또는 물에 동량만큼 처리된 것이 대조군으로 사용되었다. 반복당 여섯 개의 묘목이 사용되었고, 2회를 기준으로 평균 및 표준 편차를 나타내었다. 처리들 간의 대조군과 생장을 통계를 비교하였을 때(Student's t test, α < 0.05), 실질적인 P-value로 제공되었고, 담배 묘목의 이미지가 도 1 및 도 2에 삽입되어 있다.
(2) Isaria javanica pf185의 포자의 직접적인 담배 식물 생장 촉진 효과의 확인
pot 실험에서, 포자 현탁액이 처리된 담배식물의 묘목들은 싹의 무게(p=0.02), 뿌리 무게(p=0.008)에서 증가됨을 확인할 수 있었다(도 3). 이러한 결과들은 I. javanica pf185의 포자가 담배의 생장을 촉진한다는 것을 명확하게 나타낸다.
상기 실험 결과를 나타낸 도 3에 대해 상세히 설명하자면, 상기 실험 방법에서 언급한 진균 포자 현탁액이 뿌리에 처리된 14일령 담배 묘목은 5주간 처리되었다. PDB 또는 물에 동량만큼 처리된 것이 대조군으로 사용되었다. 반복당 여섯 개의 묘목이 사용되었고, 2회를 기준으로 평균 및 표준 편차를 나타내었다. 처리들 간의 대조군과 생장을 통계를 비교하였을 때(Student's t test, α < 0.05), 실질적인 P-value로 제공되었다.
(3) Isaria javanica pf185의 포자의 간접적인 담배 식물 생장 촉진 효과의 확인
I 플레이트를 사용하여 pf185로부터 생성된 휘발성 물질들의 담배에 대한 효과를 확인하였다(도 4). 진균류가 없이 생장된 묘목(대조군)에 비해서, 진균의 휘발성 물질이 처리된 담배의 생장은 매우 촉진되었다(Tukey's test with alpha value < 0.000001). 싹의 높이, 뿌리의 길이는 휘발성 물질에 의해 대조군에 비해 1.5배 가량 증가하였으며; 싹의 무게와 뿌리의 무게는 2배 이상 증가하였다(도 4). 이러한 변화는 잎의 엽록소(p=0.000001)와 줄기의 직경에서도 나타났다. 측면의 뿌리와 뿌리털 형성도 모두 증가하였다. 따라서, I. javanica pf185로부터 얻은 휘발성 물질은 담배의 뿌리 구조 변화와 바이오매스의 향상과 함게 생장을 촉진하는 효과를 가짐을 알 수 있었다.
본 실험의 결과인 도 4에 대해 상세히 설명하면, I 플레이트에서 처리 후 2주 후 조사된 식물들에 대한 데이터이다. 진균이 없이 재배된 담배의 식물 생장 파라미터는 평균으로 나타낸 것이다. Student's t test로 평가한 대조군의 반응에 대한 통계적 차이는 별 세 개로 나타났다(α < 0.001). I. javanica pf185의 포자 현탁액이 함께 처리된 담배 묘목과 담배 뿌리털 형성의 사진이 도 4에 나타나있다. 뿌리털 형성 사진들은 현미경 사진이다.

Claims (8)

  1. 이사리아 자바니카 pf185(Isaria javanica pf185) KACC93241의 배양액, 배양여액 및 포자로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는, 고추, 토마토, 감자, 피망, 구기자 및 담배로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 식물 생장 촉진용 조성물.
  2. 삭제
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 식물은 담배(Nicotiana)인, 식물 생장 촉진용 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 생장은 싹, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 부위의 생장인, 식물 생장 촉진용 조성물.
  5. 청구항 1의 조성물을 식물 또는 상기 식물이 식재된 토양에 살포하는 단계;를 포함하는, 고추, 토마토, 감자, 피망, 구기자 및 담배로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 식물의 생장 촉진 방법.
  6. 삭제
  7. 청구항 5에 있어서, 상기 식물은 담배(Nicotiana)인, 식물의 생장 촉진 방법.
  8. 청구항 5에 있어서, 상기 생장은 싹, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 부위의 생장인, 식물의 생장 촉진 방법.
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