RU2689608C2 - Выделенный штамм clonostachys rosea для применения в качестве агента биологической защиты - Google Patents
Выделенный штамм clonostachys rosea для применения в качестве агента биологической защиты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2689608C2 RU2689608C2 RU2016113495A RU2016113495A RU2689608C2 RU 2689608 C2 RU2689608 C2 RU 2689608C2 RU 2016113495 A RU2016113495 A RU 2016113495A RU 2016113495 A RU2016113495 A RU 2016113495A RU 2689608 C2 RU2689608 C2 RU 2689608C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- plant
- composition
- bvt
- spores
- fungus
- Prior art date
Links
- 239000011814 protection agent Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 241001149472 Clonostachys rosea Species 0.000 title description 30
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 194
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 83
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 64
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 64
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 50
- 241000343082 Clonostachys rosea f. rosea Species 0.000 claims abstract description 35
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims abstract description 35
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 34
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 32
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 50
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 27
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 22
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 19
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 16
- 241000123650 Botrytis cinerea Species 0.000 claims description 15
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 claims description 14
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 claims description 14
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 claims description 14
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 claims description 13
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims description 13
- 241001518729 Monilinia Species 0.000 claims description 12
- 239000005667 attractant Substances 0.000 claims description 12
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 12
- 230000031902 chemoattractant activity Effects 0.000 claims description 12
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 12
- 241000233639 Pythium Species 0.000 claims description 11
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 claims description 10
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 claims description 10
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 claims description 10
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 claims description 10
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 10
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 claims description 10
- 241000221696 Sclerotinia sclerotiorum Species 0.000 claims description 10
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 10
- 241001361634 Rhizoctonia Species 0.000 claims description 9
- 235000003095 Vaccinium corymbosum Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000017537 Vaccinium myrtillus Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000021014 blueberries Nutrition 0.000 claims description 9
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 8
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims description 8
- 235000002245 Penicillium camembertii Nutrition 0.000 claims description 7
- 241001520823 Zoysia Species 0.000 claims description 7
- 241000222290 Cladosporium Species 0.000 claims description 6
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 claims description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 claims description 6
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 6
- 241000223600 Alternaria Species 0.000 claims description 5
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 claims description 5
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000011299 Brassica oleracea var botrytis Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000003259 Brassica oleracea var. botrytis Species 0.000 claims description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 241000222199 Colletotrichum Species 0.000 claims description 4
- 241000555695 Didymella Species 0.000 claims description 4
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 claims description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 claims description 4
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 4
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 4
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 claims description 3
- 235000017647 Brassica oleracea var italica Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 claims description 3
- 240000003433 Miscanthus floridulus Species 0.000 claims description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000043859 Dynamin Human genes 0.000 claims description 2
- 108700021058 Dynamin Proteins 0.000 claims description 2
- GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N Gallium Chemical compound [Ga] GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 2
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 claims description 2
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 claims description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011651 chromium Substances 0.000 claims description 2
- 239000004927 clay Substances 0.000 claims description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 claims description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 2
- 229910052733 gallium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N isosorbide mononitrate Chemical compound [O-][N+](=O)O[C@@H]1CO[C@@H]2[C@@H](O)CO[C@@H]21 YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 claims description 2
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229920001495 poly(sodium acrylate) polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052701 rubidium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N rubidium atom Chemical compound [Rb] IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052706 scandium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- SIXSYDAISGFNSX-UHFFFAOYSA-N scandium atom Chemical compound [Sc] SIXSYDAISGFNSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M sodium polyacrylate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C=C NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229910052712 strontium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- CIOAGBVUUVVLOB-UHFFFAOYSA-N strontium atom Chemical compound [Sr] CIOAGBVUUVVLOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052718 tin Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010936 titanium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- LEONUFNNVUYDNQ-UHFFFAOYSA-N vanadium atom Chemical compound [V] LEONUFNNVUYDNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims description 2
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N yttrium atom Chemical compound [Y] VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 2
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 claims 2
- 240000000851 Vaccinium corymbosum Species 0.000 claims 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000142531 Clonostachys Species 0.000 description 29
- 241001465180 Botrytis Species 0.000 description 13
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 241000221662 Sclerotinia Species 0.000 description 10
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 10
- 241000256837 Apidae Species 0.000 description 9
- 244000078534 Vaccinium myrtillus Species 0.000 description 9
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 8
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 7
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 241001480007 Phomopsis Species 0.000 description 6
- 241000758706 Piperaceae Species 0.000 description 6
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 6
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 235000021012 strawberries Nutrition 0.000 description 6
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 5
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 5
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 4
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 4
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 description 3
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 3
- 241000987614 Royena glabra Species 0.000 description 3
- 240000007651 Rubus glaucus Species 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 3
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 3
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 2
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 2
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 2
- 241000223247 Gloeocercospora Species 0.000 description 2
- 241000218922 Magnoliophyta Species 0.000 description 2
- 235000011430 Malus pumila Nutrition 0.000 description 2
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 description 2
- 235000015103 Malus silvestris Nutrition 0.000 description 2
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 2
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 2
- 240000003889 Piper guineense Species 0.000 description 2
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 2
- 235000011034 Rubus glaucus Nutrition 0.000 description 2
- 235000009122 Rubus idaeus Nutrition 0.000 description 2
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 241000959260 Typhula Species 0.000 description 2
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 2
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000011681 asexual reproduction Effects 0.000 description 2
- 238000013465 asexual reproduction Methods 0.000 description 2
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 2
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- FIKAKWIAUPDISJ-UHFFFAOYSA-L paraquat dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].C1=C[N+](C)=CC=C1C1=CC=[N+](C)C=C1 FIKAKWIAUPDISJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 230000010152 pollination Effects 0.000 description 2
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 2
- 241001019659 Acremonium <Plectosphaerellaceae> Species 0.000 description 1
- 235000009434 Actinidia chinensis Nutrition 0.000 description 1
- 244000298697 Actinidia deliciosa Species 0.000 description 1
- 235000009436 Actinidia deliciosa Nutrition 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 1
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 1
- 241000223602 Alternaria alternata Species 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 244000226021 Anacardium occidentale Species 0.000 description 1
- 241000207875 Antirrhinum Species 0.000 description 1
- 235000005638 Austrian pine Nutrition 0.000 description 1
- 241000218999 Begoniaceae Species 0.000 description 1
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 1
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 244000308180 Brassica oleracea var. italica Species 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 1
- 244000241235 Citrullus lanatus Species 0.000 description 1
- 235000012828 Citrullus lanatus var citroides Nutrition 0.000 description 1
- 240000007154 Coffea arabica Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000612152 Cyclamen hederifolium Species 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 239000001692 EU approved anti-caking agent Substances 0.000 description 1
- 241000735572 Exacum Species 0.000 description 1
- 235000009419 Fagopyrum esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 240000008620 Fagopyrum esculentum Species 0.000 description 1
- 241001600161 Fulvia Species 0.000 description 1
- 241000221779 Fusarium sambucinum Species 0.000 description 1
- 241000208150 Geraniaceae Species 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 241001091440 Grossulariaceae Species 0.000 description 1
- 241000234435 Lilium Species 0.000 description 1
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 1
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 1
- 241000879364 Monilinia vaccinii-corymbosi Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 244000025272 Persea americana Species 0.000 description 1
- 235000008673 Persea americana Nutrition 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 240000009002 Picea mariana Species 0.000 description 1
- 235000017997 Picea mariana var. mariana Nutrition 0.000 description 1
- 235000018000 Picea mariana var. semiprostrata Nutrition 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000008565 Pinus banksiana Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 235000013264 Pinus jeffreyi Nutrition 0.000 description 1
- 235000008578 Pinus strobus Nutrition 0.000 description 1
- 240000007320 Pinus strobus Species 0.000 description 1
- 235000008585 Pinus thunbergii Nutrition 0.000 description 1
- 241000209504 Poaceae Species 0.000 description 1
- 235000014030 Podocarpus spicatus Nutrition 0.000 description 1
- 240000002381 Prunus davidiana Species 0.000 description 1
- 240000005809 Prunus persica Species 0.000 description 1
- 241000508269 Psidium Species 0.000 description 1
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 1
- 240000001987 Pyrus communis Species 0.000 description 1
- 241000813090 Rhizoctonia solani Species 0.000 description 1
- 244000042430 Rhodiola rosea Species 0.000 description 1
- 235000001537 Ribes X gardonianum Nutrition 0.000 description 1
- 235000001535 Ribes X utile Nutrition 0.000 description 1
- 235000002357 Ribes grossularia Nutrition 0.000 description 1
- 235000016919 Ribes petraeum Nutrition 0.000 description 1
- 244000281247 Ribes rubrum Species 0.000 description 1
- 235000002355 Ribes spicatum Nutrition 0.000 description 1
- 241000109329 Rosa xanthina Species 0.000 description 1
- 235000004789 Rosa xanthina Nutrition 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 description 1
- 235000002597 Solanum melongena Nutrition 0.000 description 1
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000219793 Trifolium Species 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000443 biocontrol Effects 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021029 blackberry Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 235000020226 cashew nut Nutrition 0.000 description 1
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 1
- 235000016213 coffee Nutrition 0.000 description 1
- 235000013353 coffee beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 229930186364 cyclamen Natural products 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- -1 dipping Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000004495 emulsifiable concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000006353 environmental stress Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000002648 laminated material Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 1
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N magnesium oxide Inorganic materials [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N magnesium;oxygen(2-) Chemical group [O-2].[Mg+2] AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000024241 parasitism Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 244000000003 plant pathogen Species 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013138 pruning Methods 0.000 description 1
- 235000021013 raspberries Nutrition 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 235000017985 rocky mountain lodgepole pine Nutrition 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004763 spore germination Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229920000247 superabsorbent polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004583 superabsorbent polymers (SAPs) Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 239000004563 wettable powder Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H17/00—Symbiotic or parasitic combinations including one or more new plants, e.g. mycorrhiza
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
- A01N25/22—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests containing ingredients stabilising the active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N3/00—Spore forming or isolating processes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Botany (AREA)
- Virology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены штамм гриба Clonostachys rosea f. rosea IDAC 040913-01, его споры, композиция на основе штамма или его спор в качестве агента биологической защиты растений, способ обработки растений агентом биологической защиты растений, применение штамма, его спор или композиции в качестве агента биологической защиты растений, способ уменьшения порчи растительного материала и способ получения агента биологической защиты растений. Указанный штамм, композиции, включающие указанный штамм, и/или споры, происходящие от указанного штамма, могут наноситься на растения или растительные материалы с целью улучшения урожайности растений, улучшения роста растений или лечения или профилактики заболеваний или патогенов у растения. 7 н. и 30 з.п. ф-лы, 1 табл., 5 пр.
Description
РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] По настоящей заявке испрашивается приоритет временной заявки на патент США с серийным номером 61/876469, поданной 11 сентября 2013 г., содержание которой включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
[0002] Настоящее изобретение относится к выделенному штамму гриба Clonostachys rosea и более конкретно к выделенному штамму Clonostachys rosea, пригодному в качестве агента биологической защиты для обработки растений.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Clonostachys rosea f. rosea является полезным микрогрибом, который находится в тканях разнообразных растений в дикой природе, и почти во всех видах культурных растений. Гриб обычно встречается в здоровых корнях, листьях, стеблях, цветах и плодах растений, собранных на фермах и в питомниках, на плантациях, виноградниках, пастбищах и садах по всему миру. Сообщалось о его нахождении в растениях и почвах таких разнообразных регионов, как субарктические, холодные и умеренно теплые зоны, пустыни и влажные тропики. Растения, колонизированные C. rosea, не проявляют никаких видимых признаков того, что грибок присутствует до тех пор, пока ткани не стареют и умирают в природных условиях. В это время грибок может спорулировать, и беловатый рост на поверхности растений может становиться заметным, особенно с помощью лупы. В отличие от патогенных организмов, связанных с заболеванием, Clonostachys не вызывает повреждений, пятнистости, увядания или других симптомов у растений. Clonostachys rosea f. rosea, как известно, является также полезным агентом биологической защиты для обработки растений и способствует защите растений от болезней и стрессов окружающей среды, а также содействует росту растений и урожайности.
[0004] Stewart et al. (патент США No. 8101551) описывают штамм 88-710 Clonostachys rosea и относят его к штамму, имеющему преимущества в стимуляции мощности, жизнеспособности, роста и урожайности растений.
[0005] Остается потребность в новых штаммах Clonostachys rosea, которые являются полезными в качестве агентов биологической защиты для обработки растений.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0006] Авторы настоящего изобретения выделили и охарактеризовали новый штамм гриба Clonostachys rosea f. rosea. Как описано в настоящем документе, этот новый штамм Clonostachys rosea f. rosea, обозначенный как «BVT Cr-7» особенно полезен в качестве агента биологической защиты для обработки растений. В одном аспекте изобретения выделенная культура штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea была депонирована под номером поступления 040913-01 в международный депозитарный орган Канады, расположенный в национальной микробиологической лаборатории, агентство общественного здравоохранения Канады, 1015 Arlington Street, Winnipeg, Manitoba, R3E 3R2, Canada, 4 сентября 2013 г.
[0007] Как показано в примере 1, ряд различных штаммов Clonostachys rosea f. rosea был выделен и охарактеризован с целью выявления штаммов с особенно предпочтительными свойствами для использования в качестве агента биологической защиты. По сравнению с другими штаммами BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea продемонстрировал ряд улучшенных свойств и/или сочетания желаемых свойств для использования в качестве агента биологической защиты. Например, BVT Cr-7 продемонстрировал улучшенные или желаемые свойства в отношении роста и обилия продукции спор, своей способности существовать как эндофит внутри разнообразных растений, включая корни и цветы культурных растений и листву опытных растений, и своей способности подавлять или контролировать широкий спектр заболеваний растений и/или патогенных микроорганизмов. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 проявляет одно или более улучшенных свойств по сравнению с контрольным штаммом Clonostachys rosea f. rosea, таким как 88-710 и/или EV1а.
[0008] Кроме того, как указано в примерах 2-5, применение BVT Cr-7 для растений при полевых испытаниях, а также в теплицах в контролируемых условиях показывает, что BVT Cr-7 представляет собой агент с широким спектром биологической защиты с высокой производительностью против целого ряда различных заболеваний, в разнообразных условиях и для самых разных растений. Как показано в примере 4, BVT Cr-7 также полезен для снижения порчи растительных материалов, например, путем снижения уровней гнили или изменения цвета собранных культур.
[0009] Соответственно, в одном аспекте предлагается выделенная культура штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea, как описано в настоящем документе. В одном варианте осуществления штамм представляет собой штамм, который был депонирован под номером поступления 040913-01 в международный депозитарный орган Канады, расположенный в национальной микробиологической лаборатории, агентство общественного здравоохранения Канады, 1015 Arlington Street, Winnipeg, Manitoba, R3E 3R2, Canada, 4 сентября 2013 г.
[0010] Предлагаются также споры, образованные штаммом BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea, а также потомство штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea и составы, содержащие выделенные культуры, споры и/или потомство BVT Cr-7. Предлагается также выделенная клетка штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea, которая способна воспроизводиться бесполым путем. В одном варианте осуществления предлагается спора, полученная путем инкубации выделенной культуры BVT Cr-7 на субстрате в условиях, подходящих для споруляции. В одном варианте осуществления предлагается состав, включающий споры BVT Cr-7, которые связаны со стабилизирующим агентом, таким как силикат кальция.
[0011] В одном варианте осуществления выделенная культура BVT Cr-7, описанная в настоящем документе, колонизирует растения как эндофит. В одном варианте осуществления контактирование растения с BVT Cr-7 подавляет или контролирует заболевание или патоген, которые влияют на листья, цветы, плоды и/или корни растения. В одном варианте осуществления заболевание представляет собой заболевание серой плесенью, заболевание белой плесенью, бурую гниль, корневую гниль и/или фомопсис. В одном варианте осуществления заболевание вызывается Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum и/или штаммами Pythium spp., Rhizoctonia и/или Fusarium.
[0012] В одном варианте осуществления предлагается также растение или растительный материал, которые колонизированы инокулятом BVT Cr-7.
[0013] В одном варианте осуществления штамм BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea является полезным в качестве агента биологической защиты для обработки растений. В одном варианте осуществления предлагается способ обработки растения, включающий контактирование растения со штаммом BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea, как описано в настоящем документе. Например, в одном варианте осуществления BVT Cr-7 является полезным для улучшения жизнеспособности, роста и/или урожайности растений по сравнению с контрольным растением, которое не было обработано BVT Cr-7. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 является полезным для профилактики или лечения заболеваний и/или патогенов у растения. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 является полезным для стимуляции исключения колонизации растения другими грибами, включая патогенные грибы. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 пригоден для инициации природной устойчивости к заболеваниям и стрессам у растения, например, в ответ на инфицирование патогеном. Предлагается также способ снижения порчи растительного материала, включающий контактирование растительного материала с BVT Cr-7.
[0014] В одном варианте осуществления BVT Cr-7 является полезным для обработки растения с целью профилактики или лечения заболеваний и/или патогенов, которые могут повлиять на жизнеспособность, рост и/или урожайность растений. В одном варианте осуществления патогеном является микроорганизм, такой как грибок или бактерии. Примеры патогенов, которые могут повлиять на жизнеспособность, рост и/или урожайность растения, которые могут контролироваться BVT Cr-7, включают, но не ограничиваются этим, Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum, Pythium spp., Alternaria, Monilia, Monilinia, Colletotrichum, Cladosporium Rhizoctonia, Streptomyces, Didymella и/или Fusarium. Примеры заболеваний, которые могут повлиять на жизнеспособность, рост и/или урожайность растения, которые можно регулировать с помощью использования BVT Cr-7, включают, но не ограничиваются заболеванием серой плесенью, заболеванием белой плесенью, бурой гнилью и/или корневой гнилью. Другие примеры включают заболевания фомопсисом, например, у голубики или винограда и паршой картофеля.
[0015] В одном варианте осуществления растение представляет собой любое растение или его часть, которые могут быть колонизированы штаммом BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea в качестве эндофита. В одном варианте осуществления растение представляет собой цветковое растение, зерновое, бобовое или овощное растение. Например, в одном варианте осуществления способы и варианты применения, описанные в настоящем документе, пригодны для обработки таких растений, как цветковые растения или культуры, такие как овощи, фрукты, злаки, а также их семена или рассада. В одном варианте осуществления способы и варианты применения, описанные в настоящем документе, пригодны для обработки саженцев/пересаживаемых растений хвойных деревьев. В одном варианте осуществления растение представляет собой дерево, такое как сосна, черная ель или саженцы сосны. В одном варианте осуществления растение представляет собой пшеницу, ячмень, подсолнечник, канолу, голубику, клубнику, малину, виноград, картофель, перец, огурцы, помидоры, газонные травы, перец, помидоры, огурцы, брокколи, цветную капусту, персики, яблоки, канолу, цветущие декоративные растения, такие как розы, герани, цикламены, львиный зев, экзакум, бегонии или лилии. В одном варианте осуществления растение выращивается на открытом воздухе. В одном варианте осуществления растение выращивают в теплице.
[0016] В одном варианте осуществления способы и варианты применения, описанные в настоящем документе, включают контактирование растение с BVT Cr-7, таким как культура BVT Cr-7, его споры или композиции. В одном варианте осуществления культура BVT Cr-7, его споры или композиции пригодны в качестве материала для инокуляции. В некоторых вариантах осуществления BVT Cr-7 наносят на растение или его часть в виде спрея, мелкокапельного распыления, окунания, порошка или питательного раствора и/или путем векторизации насекомыми, например, путем использования векторизации пчелами, как описано в заявке РСТ No. РСТ/CA2013/050179, включенной в настоящий документ в качестве ссылки в полном объеме.
[0017] Предлагаются также способы получения агента биологической защиты, причем способ включает инокуляцию субстрата выделенной культурой BVT Cr-7 и инкубацию субстрата в условиях, подходящих для роста грибов для получения штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea. Необязательно, способ дополнительно включает инкубацию субстрата в условиях, подходящих для споруляции грибка и удаления спор с субстрата для получения материала для инокуляции.
[0018] Другие признаки и преимущества настоящего изобретения станут очевидными из последующего подробного описания. Следует понимать, однако, что подробное описание и конкретные примеры, демонстрирующие предпочтительные варианты осуществления изобретения, приведены только в качестве иллюстрации, поскольку различные изменения и модификации в пределах сущности и объема изобретения станут очевидными для специалистов в данной области техники из этого подробного описания.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Определения
[0019] В настоящем описании «штамм BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea» или «BVT Cr-7» относится к штамму гриба, депонированному под номером поступления 040913-01 в международный депозитарный орган Канады, расположенный в национальной микробиологической лаборатории, агентство общественного здравоохранения Канады, 1015 Arlington Street, Winnipeg, Manitoba, R3E 3R2, Canada, 4 сентября 2013 г. Термины «штамм BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea», «BVT Cr-7» или «штамм IDAC 040913-01 Clonostachys rosea f. rosea» также включают изоляты указанного штамма или любые клетки, культуры, споры, и потомки, полученные из указанного штамма, например, путем бесполого размножения.
[0020] Различные способы, известные в данной области техники, могут быть использованы для культивирования BVT Cr-7 или получения спор грибка, включая, но, не ограничиваясь способами, описанными в настоящем описании, и в статье Sutton et al. «Gliocladium roseum: a versatile adversary of Botrytis cinerea in crops.» Plant Dis 1997;81:316-28; Sutton et al. «Ability of Clonostachys rosea to establish and suppress sporulation potential of Botrytis cinerea in deleafed stems of hydroponic greenhouse tomatoes» Biocontrol Sci Technol 2002;12(4):413-25, и заявке на патент США No. 2012/0021906 «Fungal Inoculant Compositions», все они включены в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
[0021] В рамках изобретения термин «растение» относится к любому члену царства Plantae, который способен колонизироваться BVT Cr-7 в виде эндофита. В предпочтительном варианте осуществления изобретения растение представляет собой культивируемое растение. В одном варианте осуществления «растение» включает также клубни, семена и/или рассаду, которые приводят к росту растения и необязательно включает растительный материал. В рамках изобретения термин «растительный материал» относится к любому материалу, который собирается или отделяется от растения и предназначается для использования в качестве пищевого продукта или для других целей, который подвержен порче из-за заболевания и/или инфекции, вызванных патогенами. Примеры растительного материала включают, но не ограничиваются этим, зерновые, фрукты или овощи.
[0022] В рамках изобретения термин «колонизированный как эндофит» относится к процессу, с помощью которого споры гриба проникают и образуют колонии грибов внутри растения-хозяина, или его части, не вызывая симптомов или других признаков заболевания, или не нанося иного вреда хозяину.
[0023] В рамках изобретения термин «агент биологической защиты» относится к агенту, который способствует жизнеспособности, росту, мощности и/или урожайности растений; повышает степень прорастания и/или качество семян; повышает устойчивость к болезням, вредителям и/или экологическим стрессам, таким как неблагоприятные погодные или почвенные условия; контролирует заболевания или действует против них или против патогенов, или пригоден для лечения или профилактики заболевания или патогена; или способствует восстановлению растений от повреждения и/или инфекции. Предпочтительным примером агента биологической защиты является BVT Cr-7 Clonostachys rosea, как описано в настоящем документе.
[0024] В настоящем описании «патоген» относится к микроорганизму, который может проникать в растение-хозяин и колонизировать его, и подавлять жизнеспособность, рост, мощность и/или урожайность растения. Примеры патогенов включают, но не ограничиваются этим, бактерии и грибки, такие как Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum и штаммы Pythium, Alternaria, Monilia, Monilinia, Colletotrichum, Cladosporium Rhizoctonia, Streptomyces, Didymella и/или Fusarium.
Взаимодействие Clonostachys rosea с растениями и организмами, вызывающими заболевания растений
[0025] Не ограничиваясь теорией, считается, что BVT Cr-7 Clonostachys rosea обеспечивает защиту растений с помощью различных механизмов, включая активацию природной устойчивости растений к болезням и стрессам, а также за счет конкурентного исключения других патогенов.
[0026] Clonostachys воспроизводится с помощью большого числа микроскопических (5-7 мкм) бобовидных спор. При нанесении на растения споры прорастают с возникновением маленьких трубочек, из которых образуются чрезвычайно тонкие ветви, и они проникают в ткани растений. Проникновение может происходить в живые лепестки, листья, раны растения, корни, клубни и другие части растений. Оказавшись внутри тканей, каждая ветвь образует микроскопическую грибковую колонию. Растения с колониями Clonostachys не проявляют никаких симптомов, таких как симптомы, вызываемые болезнетворными организмами (патогенами). После внедрения в качестве эндофита внутрь растительных тканей Clonostachys может оказывать благотворное воздействие, например, индукцию природной устойчивости растений к болезням и стрессам.
[0027] Взаимоотношение микроскопических колоний Clonostachys с тканями растений резко изменяется, когда ткани растений начинают стареть, например, когда листья впервые начинают желтеть или когда начинает развиваться заболевание или стресс. В это время маленькие колонии начинают быстро расти и часто полностью занимать соседние ткани. У Clonostachys этот рост начинается раньше, чем почти у всех других грибков и бактерий, которые растут на стареющих и умирающих растениях. Таким образом, Clonostachys является пионером в колонизации стареющих растительных тканей. По сути дела он оккупирует ткани раньше других организмов, включая деструктивные патогены, такие как Botrytis, Sclerotinia и Monilinia. После того, как ткани оккупированы, другие организмы, включая патогены, не замещают оккупирующий организм. Clonostachys способен блокировать рост патогенов и других грибов просто за счет упреждающей оккупации тканей. Это конкурентное исключение является основным способом, с помощью которого Clonostachys подавляет болезнетворные организмы и развитие заболевания у растений. Как показано в примерах, BVT Cr-7 Clonostachys является особенно эффективным в контролировании заболеваний и патогенов у широкого круга разнообразных растений.
[0028] Clonostachys продуцирует споры, когда колонизированные ткани постепенно стареют и умирают. Во многих случаях такие споры инициируют новые циклы эндофитного роста у ближайших живых растений. Clonostachys способен сохраняться некоторое время в мертвых растительных материалах, которые он колонизировал, когда они были живыми. Тем не менее, он обладает небольшой способностью расти на мертвых растительных материалах, уже оккупированных другими грибами и бактериями. В такой ситуации Clonostachys не характеризуется хорошей конкуренцией с микробами, такими как Penicillium и Aspergillus, которые адаптированы к микробному миру растительных остатков и почвы.
[0029] Clonostachys обладает также способностью расти на гифах и мицелии других грибов (т.е. является микопаразитом). Clonostachys обычно атакует другой гриб только после создания очень тесного контакта с гифами, склероциями или другой частью гриба (т.е. абсолютного контакта или на расстоянии, приблизительно 1-5 мкм). Делая это, гифы Clonostachys иногда обвиваются вокруг гриба, являясь паразитами, «гриб-хозяин» в основном погибает.
[0030] Не ограничиваясь теорией, основные способы, с помощью которых Clonostachys подавляет патогены и заболевания у растений, как полагают, представляют собой: A. Быструю оккупацию стареющих или поврежденных тканей, так, чтобы предотвратить рост патогенов в тканях; и B. Стимуляцию природных механизмов устойчивости растений к болезнетворным организмам. Кроме того, Clonostachys способен инактивировать или уничтожать структуры, определяющие выживание грибов (например, склероции и различные виды спор в почве или на ней), путем паразитизма (т.е. роста на них как источниках питания). BVT Cr-7 представляет собой выделенный штамм Clonostachys, который обладает рядом характеристик, которые делают его особенно эффективным в качестве агента биологической защиты для обработки растений.
Свойства и характеристики штамма BVT Cr-7
[0031] В одном варианте осуществления предлагается выделенный штамм Clonostachys, называемый BVT Cr-7. В одном варианте осуществления штамм представляет собой штамм, депонированный под номером поступления 040913-01 в международный депозитарный орган Канады, расположенный в национальной микробиологической лаборатории, агентство общественного здравоохранения Канады, 1015 Arlington Street, Winnipeg, Manitoba, R3E 3R2, Canada, 4 сентября 2013 г. В одном варианте осуществления «штамм BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea» или «BVT Cr-7» включает любые культуры, споры, клетки и потомки, полученные из указанного штамма, например, путем бесполого размножения. Как описано в настоящем документе, BVT Cr-7 обладает рядом преимущественных свойств по сравнению с другими штаммами Clonostachys.
[0032] Например, в одном варианте осуществления BVT Cr-7 способен продуцировать споры на стандартных агаровых средах и семенах растений, таких как стерилизованные семена зерновых культур. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 обладает улучшенной способностью к продукции спор на стандартных агаровых средах и семенах растений, таких, как стерилизованные семена зерновых по сравнению с другими штаммами Clonostachys rosea f. rosea, такими как 88-710 (по-другому известный как AFr-710, PG-710). Штамм 88-710 описан в статье Sutton et al., Evaluation of the Fungal Endophyte Clonostachys rosea as an Inoculant to Enhance Growth, Fitness and Productivity of Crop Plants. Proc. IVth IS on Seed, Transplant and Stand Establishment of Hort. Crops Ed.: D.I. Leskovar, Acta Hort. 782, ISHS 2008 pp. 279-286 (включенной в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме). В одном варианте осуществления семена зерновых представляют собой семена пшеницы и ячменя. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 пригоден для получения инокулята для использования при обработке растений.
[0033] В одном аспекте BVT Cr-7 способен существовать в растениях как эндофит. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 способен существовать как эндофит в корнях растений, таких как корни культурных растений. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 характеризуется улучшенной способностью существовать как эндофит в корнях растений по сравнению с другими штаммами Clonostachys rosea f. rosea, такими как 88-710. Например, в одном варианте осуществления BVT Cr-7 характеризуется улучшенной способностью существовать как эндофит в культурных растениях и/или в таких растениях, как небольшие зерновые злаки, газонные травы, горох, канола, соя, перец, помидоры и огурцы.
[0034] В одном варианте осуществления BVT Cr-7 способен существовать как эндофит в листьях и/или цветах растений. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 характеризуется улучшенной способностью существовать как эндофит в листьях и цветах растений по сравнению с другими штаммами Clonostachys rosea f. rosea, такими как 88-710. Например, в одном варианте осуществления BVT Cr-7 характеризуется улучшенной способностью существовать как эндофит в листьях и/или цветах минироз, клубники, подсолнечника и канолы.
[0035] В другом аспекте BVT Cr-7 способен подавлять и/или контролировать заболевание у растений. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 способен подавлять и/или контролировать заболевание у растений, вызванное патогенами, такими как другие грибы или микроорганизмы. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 обладает улучшенной способностью подавлять или контролировать заболевания у других растений по сравнению с другими штаммами Clonostachys rosea f. rosea, такими как 88-710. Например, в одном варианте осуществления BVT Cr-7 обладает улучшенной способностью подавлять или контролировать заболевания, которые влияют на листья, цветы, плоды и/или корни растений. В одном варианте осуществления заболевание вызвано Botrytis cinerea (заболевания серой плесенью), Sclerotinia sclerotiorum (заболевания белой плесенью) и/или штаммами Pythium spp., Rhizoctonia, и/или Fusarium (корневые гнили и другие заболевания).
[0036] В одном варианте осуществления BVT Cr-7 способен уменьшать порчу растительных материалов. Например, в одном варианте осуществления контактирование собранного растительного материала с BVT Cr-7, например, путем обработки спреем, снижает случаи заболевания гнилью по сравнению с необработанным растительным материалом.
Применение BVT Cr-7 для растений и/или их частей
[0037] В одном варианте осуществления способы и варианты применения, описанные в настоящем документе, включают контактирование растения или растительного материала с BVT Cr-7. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 экспонируется с растениями или растительным материалом так, чтобы способствовать эндофитной колонизации растений или растительного материала. BVT Cr-7 может быть нанесен на любую часть растения, включая листья растений, цветы, корни, клубни и/или семена, любым известным способом, включая нанесение с помощью спрея, мелкокапельного распыления, окунания, питательных растворов и/или путем векторизации насекомыми, в зависимости от применения.
[0038] Например, молодые растения для пересадки можно обрабатывать путем пропитки материала почвы или путем погружения растений при пересадке.
[0039] В другом примере, заболевания, вызванные патогенами, инфицирующими цветки, часто можно эффективно контролировать с помощью применения BVT Cr-7 Clonostachys rosea к цветкам, например, путем обработки распылением или векторизации насекомыми, например, путем использования метода векторизации пчелами, как описано в заявке РСТ No. WO2012/135940 и заявке РСТ РСТ/CA2013/050179, содержание которых включено в данное описание в качестве ссылки в полном объеме. В одном варианте осуществления векторизация пчелами позволяет обрабатывать цветковые культуры, так как пчелы доставляют Clonostachys к только что распустившимся цветкам каждый день (в отличие, например, от еженедельных спреев).
[0040] Другие примеры применения включают использование Clonostachys для листьев тепличных культур с помощью сверхнизкого объема мелкокапельного распыления или обычного распыления для контроля патогенов, таких как Botrytis на листьях и ранах стеблей, возникающих в ходе удаления листьев и других методов обрезки; обработки спреем с Clonostachys трав на полях для гольфа для контролирования заболевания долларовым пятнышком (Sclerotinia), снежной плесенью (Typhula, Microdochium) и других заболеваний листьев; нанесение Clonostachys на свежие раны (в течение 48 часов) часто обеспечивает длительную защиту против многих инфицирующих раны болезнетворных организмов, например, при прививке, обрезке и у поврежденных растений; и семена могут быть обработаны Clonostachys (с последующим ростом гриба в корневых системах) для повышения способности культур, таких как полевой горох, поддерживать рост в условиях стресса в виде засухи или производственной практики (включая использование некоторых пестицидов).
[0041] В одном варианте осуществления BVT Cr-7, как описано в настоящем документе, может быть пригоден для контроля за патогенами, такими как sclerotinia sclerotiorum, monilinia vaccinii-corymbosi и/или botrytis cinerea, в различных культурах, включая канолу, подсолнечник, малину, голубику, клубнику, яблоко, грушу, киви, арбуз, кофе, манго, авокадо, вишню, сливу, миндаль, персик, кешью, гуаву, люцерну, гречиху, клевер, фасоль, горох, лук, соевые бобы, хлопок, горчицу, ежевику, крыжовник, перец, баклажаны и смородину.
[0042] В некоторых вариантах осуществления BVT Cr-7 наносится на растения в виде экспозиции с одной дозой или в виде экспозиций с несколькими дозами в разное время. Например, в одном варианте осуществления растения получают дозу или экспонируются с BVT Cr7, например, путем распыления или векторизации насекомыми с помощью пчелиного улья, оборудованного подходящим инокуляционным диспенсером, по меньшей мере, порознь 2 дня, 4 дня, 1 неделю, 2 недели, 1 месяц или более 1 месяца.
[0043] В одном варианте осуществления растения контактируют с BVT Cr-7 один или более раз в течение годового цикла роста целевого растения. Например, в одном варианте осуществления BVT Cr-7 наносится на растения весной в начале вегетации и/или осенью в конце вегетационного периода. В одном варианте осуществления BVT Cr-7 наносится на растения до сбора растительных материалов, например, за 1 неделю, 2 недели, 3 недели или за 4 недели до сбора растительных материалов.
Композиции для инокуляции растений
[0044] В одном аспекте предлагается состав, включающий BVT Cr-7, который подходит для инокуляции растений или растительных материалов. Необязательно состав может быть твердым веществом, таким как порошкообразный состав, или раствором, таким как водный раствор. В одном варианте осуществления состав включает лиофилизованные споры BVT Cr-7. В одном варианте осуществления составы, описанные в настоящем документе, могут быть использованы в качестве инокулятов для обработки растений.
[0045] В одном варианте осуществления состав может включать различные добавки, объединенные с выделенной культурой или спорами грибка, происходящими от штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea.
[0046] Специалисту в данной области техники будет понятно, что концентрация клеток или спор в составе может варьироваться в зависимости от условий, в которых предполагается использовать состав (например, от климата, целевого растения, способа нанесения состава на растения или растительные материалы и т.д.).
[0047] В некоторых вариантах осуществления состав представляет собой твердый состав и может включать от приблизительно 1×108 до приблизительно 4×108 спор на грамм состава, необязательно от приблизительно 2×108 до приблизительно 4×108 спор на грамм состава.
[0048] В некоторых вариантах осуществления добавки включают один или более из стабилизирующего агента, агента для поглощения влаги, аттрактанта, разбавителя и/или предотвращающего слипание агента. В некоторых вариантах осуществления добавки могут включать два или более из стабилизирующего агента, агента для поглощения влаги, аттрактанта, разбавителя и/или агента, предотвращающего слипание. В одном варианте осуществления состав пригоден для векторизации насекомыми, например, как описано в патенте PCT/CA2013/050179, включенном в данное описание в качестве ссылки.
[0049] В одном варианте осуществления состав включает стабилизирующий агент. Стабилизирующий агент служит для предотвращения или сведения к минимуму распада, разрушения или активации спор грибка перед доставкой к целевому растению. Примеры стабилизирующих агентов включают частицы силиката кальция. Например, в некоторых вариантах осуществления состав может включать споры грибка, и споры грибка могут быть связаны, по меньшей мере, с некоторыми частицами силиката кальция. Состав может иметь плотность от приблизительно 1×109 до приблизительно 4×109 спор на грамм силиката кальция, с которым они связаны. В одном варианте осуществления состав может иметь приблизительно 2×109 спор на грамм силиката кальция, с которым они связаны.
[0050] В одном варианте осуществления состав включает агент для поглощения влаги. Агент для поглощения влаги служит для поглощения влаги из состава для того, чтобы сохранить состав относительно сухим и предотвратить слеживание или комкование состава. Примеры увлажняющих агентов включают поглотители влаги, такие как частицы или шарики силикагеля, и сверхвпитывающие полимеры, такие как полиакрилат натрия. Другие примеры абсорбирующих влагу агентов включают древесную стружку и шарики глины.
[0051] В одном варианте осуществления состав включает аттрактант. Аттрактант может способствовать привлекательности состава для растений и/или векторизации насекомыми. Например, аттрактант может иметь чистый положительный электростатический заряд, так что он электростатически притягивается к растениям и/или векторизации насекомыми, которые имеют суммарный отрицательный электростатический заряд. В некоторых примерах аттрактант может включать минерал или смесь минералов. В одном конкретном примере аттрактант может включать минеральную смесь, продаваемую Agri-Dynamics (Martins Creek, PA) под названием DYNA-MIN™, которая включает следующие минералы: диоксид кремния, оксид алюминия, кальций, железо, магний, калий, натрий, фосфор, титан, марганец, стронций, цирконий, литий, рубидий, бор, цинк, ванадий, хром, медь, иттрий, никель, кобальт, галлий, цезий, скандий, олово, молибден, а также дополнительные микроэлементы. В другом примере аттрактант может включать карбонат кальция.
[0052] В одном варианте осуществления состав включает разбавитель. Разбавитель может представлять собой подходящий крахмал или муку. В тех примерах, где состав должен быть доставлен с помощью векторизации насекомыми, разбавитель может быть выбран таким образом, чтобы он не раздражал или не вредил насекомым и не был съеден насекомыми. Разбавитель может быть дополнительно выбран так, чтобы он не поглощал значительное количество влаги, таким образом, чтобы разбавитель не слеживался. Примерами разбавителей, которые могут быть пригодны для векторизации насекомыми, включают кукурузную муку и зерновую муку, такую как ржаная, пшеничная, рисовая мука и муку пшеницы спельты. В альтернативных примерах разбавитель может представлять собой каолин. В других примерах разбавитель может включать молочный порошок или тальк. Они могут быть особенно полезными в тех примерах, где состав доставляется способом, отличным от векторизации насекомыми, например, путем распыления.
[0053] В одном варианте осуществления состав включает подходящий агент против слеживания. Один конкретный пример агента против слеживания представляет собой оксид магния. Другие агенты против слеживания, известные специалистам в данной области техники, также могут быть использованы в составах, описанных в данном документе.
[0054] В одном варианте осуществления состав представляет собой жидкую композицию, такую как водная суспензия. В одном варианте осуществления состав включает приблизительно от 1 до 6×105 спор/мл и, необязательно, приблизительно от 2 до 5×105 спор/мл. В одном варианте осуществления состав представляет собой жидкую композицию, и включает один или более агрономически приемлемых носителей или разбавителей. В одном варианте осуществления жидкий состав включает один или более стабилизаторов.
Предлагаются также способы получения агента биологической защиты, как описано в данном документе, такого как инокулят, включающий эффективное количество BVT Cr-7. Например, в одном варианте осуществления предлагается способ, включающий предоставление выделенной культуры BVT Cr-7; инокуляцию субстрата выделенной культурой BVT Cr-7 и инкубацию субстрата в условиях, подходящих для роста грибка. В одном варианте осуществления инокулированный субстрат инкубируют при относительной влажности выше 90% или выше 95% и при температуре в диапазоне 20-24 градуса по Цельсию.
[0056] В одном варианте осуществления субстрат представляет собой стерильный субстрат. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает инкубацию субстрата в условиях, подходящих для споруляции гриба. Условия, подходящие для споруляции Clonostachys rosea, известны в данной области техники. Например, в одном варианте осуществления условия, подходящие для споруляции гриба, включают выращивание BVT Cr-7 на субстрате, таком как стерилизованные семена, при температуре приблизительно 20-24 градуса по Цельсию, при высоком уровне влажности (более 95%) в течение нескольких дней, чтобы позволить грибу расти перед снижением относительной влажности до менее приблизительно 50%, необязательно, приблизительно 20-50%, 35-45%, или приблизительно 20-25% в течение, по меньшей мере, 10 дней, по меньшей мере, 2 недель или более 2 недель для содействия обильному получению спор. Авторы настоящего изобретения установили, что снижение уровня относительной влажности приблизительно до 35-45% в течение, по меньшей мере, приблизительно 2 недель особенно эффективно для получения спор гриба BVT Cr7. В одном варианте осуществления стерилизованные семена представляют собой семена ячменя. В одном варианте осуществления субстрат аэрируют в процессе получения спор. Предпочтительно, чтобы субстрат инкубировали в стерильных условиях, чтобы избежать загрязнения другими микробами.
[0057] В одном варианте осуществления способ дополнительно включает удаление спор из субстрата необязательно путем суспендирования в водном растворе. В одном варианте осуществления споры удаляют из субстрата для получения инокулята. Необязательно, споры могут быть удалены из субстрата, и затем лиофилизованы или обработаны иначе, как известно в данной области техники, для получения агента биологической защиты. В одном варианте осуществления способ включает смешивание инокулята с одним или более дополнительными ингредиентами, такими как стабилизирующий агент, агент для поглощения влаги, аттрактант, разбавитель и/или агент против слеживания, для получения состава, как описано в настоящем документе. В одном варианте осуществления способ включает удаление спор из субстрата с помощью смешивания субстрата со стерильной водой. В одном варианте осуществления способ включает встряхивание смеси, отфильтровывание слипшегося или слоистого материала, осторожное центрифугирование фильтрата и ресуспендирование осажденного материала для получения водного раствора.
Дополнительные варианты
[0058] В одном варианте осуществления предлагается способ контролирования патогенов у растений, включающий введение BVT Cr-7, как описано в настоящем документе, в растение или растительный материал. Например, изоляты, споры и композиции BVT Cr-7, как описано в настоящем документе, могут быть использованы в качестве профилактического агента для уменьшения вероятности инфицирования, возникающего у растений или растительного материала, особенно инфицирования патогенным грибком, таким как Botrytis или Sclerotinia.
[0059] Предлагается также способ контролирования патогенов у растений, причем способ включает обработку партии семян культурами или составами, раскрытыми в данном описании, и последующее культивирование обработанных семян до растений.
[0060] Предлагается также композиция, включающая BVT Cr-7, как описано в настоящем документе, и носитель или разбавитель, и, необязательно, дополнительно включающая дополнительный агент биологической защиты, такой как противогрибковый агент или пестицид. Композиция может представлять собой композицию для обработки семян, композицию для обработки растений или композицию для обработки почвы. В одном варианте осуществления носитель или разбавитель представляет собой приемлемый для сельского хозяйства носитель или разбавитель, который помогает обеспечить стабильность и активность композиции. В одном варианте осуществления носитель или разбавитель совместим с агентом биологической защиты, приемлемым для сельского хозяйства, и обладает хорошей абсорбционной способностью и подходящей насыпной плотностью, что позволяет легко диспергировать и присоединять частицы.
[0061] Композиции, описанные в настоящем документе, содержащие BVT Cr-7, могут, например, применяться для семян или при размножении растений, для среды роста (например, почвы или воды), для корней растений и/или для листьев растений, для цветов или пестиков растений, или для любого их сочетания. Примеры растений, которые можно обрабатывать с помощью представленных композиций, включают, но не ограничиваются этим, сельскохозяйственные культуры, такие как семенные культуры, зерновые культуры, лубяные культуры, бобовые культуры, плодовые культуры, лесные культуры и газонные травы.
[0062] Композиции, включающие BVT Cr-7, описанные в настоящем документе, могут быть нанесены на растение в виде водных спреев, гранул и составов пудры/порошка в соответствии с установленной практикой в данной области техники. Водный спрей обычно получают путем смешивания смачиваемого порошка или композиции эмульгируемого концентрата выделенной культуры или спор BVT Cr-7 с относительно большим количеством воды с образованием дисперсии.
[0063] Приведенное выше описание в общих чертах описывает настоящую заявку. Более полное понимание может быть достигнуто путем ссылки на последующие конкретные примеры. Эти примеры описаны только с целью иллюстрации и не предназначены для ограничения объема изобретения. Изменения в форме и замена эквивалентов рассматриваются как обстоятельства, которые могут предлагаться или быть целесообразными. Хотя в данном описании использовались конкретные термины, такие термины предлагаются в описательном смысле, а не с целью ограничения.
[0064] Следующие неограничивающие примеры иллюстрируют варианты осуществления настоящего изобретения:
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Выделение штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea
[0065] Несколько видов культурных растений (пшеницу, сою, кукурузу, люцерну, травы) собирали в полях вблизи Guelph, Ontario в качестве возможных источников новых штаммов Clonostachys roseum f. roseum. Штамм гриба, описанный в настоящем документе как BVT Cr-7, был выделен из корня здорового молодого растения пшеницы (на ранней стадии кущения), взятого с поля вблизи Arkell, Ontario. Ряд других штаммов Clonostachys rosea f. rosea (от BVT Cr-1 до BVT Cr-14) также выделяли, как указано ниже.
[0066] Процедура, используемая для выделения штаммов Clonostachys из корней растений пшеницы и других культур, выполнялась следующим образом. Всегда применялись асептические методы. Корни от нескольких растений промывали в водопроводной воде для удаления почвы, высушивали на бумажных полотенцах и затем разрезали на сегменты длиной 1-2 см. Сегменты промокали досуха бумажными тканями и инкубировали на паракват-хлорамфеникол-агаровой среде в чашках Петри при 20-20°C. Паракват ускоряет старение корней, что позволяет Clonostachys относительно быстро (например, в течение 6-8 дней) образовывать споры на поверхности корней, которые он ранее колонизировал. Структуры споруляции (конидиофоры и конидии, которые они несут) являются основой для выявления и идентификации гриба. Конидии (т.е. споры) могут быть удалены и пророщены в культуре.
[0067] Для выделения гриба споры переносили на стерильной игле с конидиофоров на корнях в чашки Петри со средой картофельного агара с декстрозой (PDA), дополненной стрептомицином (для подавления бактерий). После прорастания спор и получения колоний на агаровой среде, гриб субкультивировали в чашках Петри на среде PDA-стрептомицин. Споры субкультур суспендировали в стерильной дистиллированной воде, и суспензии последовательно разбавляли и высевали на PDA. Колонии, растущие из одиночных спор, переносили в свежую агаровую среду в чашках Петри и поддерживали в культуре при 4°С в виде серий изолятов для дальнейшей характеристики в качестве возможных агентов биологической защиты.
[0068] Серии выделенных штаммов затем тестировали и сравнивали друг с другом и с установленными штаммами Clonostachys rosea f. rosea, включая 88-710 и EV-1a. Штамм 88-710 описан в статье Sutton et al., Evaluation of the Fungal Endophyte Clonostachys rosea as an Inoculant to Enhance Growth, Fitness and Productivity of Crop Plants. Proc. IVth IS on Seed, Transplant and Stand Establishment of Hort. Crops Ed.: D.I. Leskovar, Acta Hort. 782, ISHS 2008 pp. 279-286 (включенной в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме).
[0069] Выделенный штамм BVT Cr-7 [Bee-Vectoring Technology Clonostachys rosea #7] был затем идентифицирован в качестве превосходного изолята с помощью экспериментов, представленных в примерах 2 и 3. Выделенные культуры BVT Cr-7 затем поддерживали и депонировали под номером поступления 040913-01 в международный депозитарный орган Канады, расположенный в национальной микробиологической лаборатории, агентство общественного здравоохранения Канады, 1015 Arlington Street, Winnipeg, Manitoba, R3E 3R2, Canada, 4 сентября 2013 г.
Пример 2: Тестирование и характеристика BVT Cr-7 относительно других штаммов Clonostachys rosea f. rosea
[0070] Новый выделенный штамм BVT Cr-7 и два дополнительных штамма Clonostachys rosea f. rosea (88-710 и EV-1a) сравнивали в сериях экспериментов, предназначенных для оценки их свойств в качестве агентов биологической защиты для обработки растений. BVT Cr-7, как установлено, при сравнении с 88-710 и/или EV-1а является эквивалентным или превосходит их, основываясь на каждом из следующих критериев:
- Рост и обилие продукции спор на стандартных агаровых средах и на субстратах, таких как стерилизованные семена зерновых культур (пшеницы и ячменя), которые могут быть использованы для промышленного производства инокулятов.
- Возможность обильно закрепляться внутри корней (т.е. как эндофит) разнообразных видов культурных растений, включая мелкие озерненные зерновые культуры, газонные травы, горох, канолу, соевые бобы, перец, помидоры и огурцы.
- Возможность закрепляться в качестве эндофита в листьях и цветах нескольких опытных растений (минироз, клубники, подсолнечника, канолы).
- Способность подавлять или контролировать широкий спектр деструктивных заболеваний, которые поражают листья, цветы, плоды и корни, особенно вызванных Botrytis cinerea (заболеванием серой плесенью), Sclerotinia sclerotiorum (заболеванием белой плесенью) и штаммами Pythium spp., Rhizoctonia и Fusarium (корневой гнилью и другими заболеваниями).
[0071] Следовательно, BVT Cr-7 обладает желаемым профилем рабочих характеристик против различных заболеваний у различных видов культур и обычно проявляет предпочтительную активность в качестве агента биологической защиты по сравнению с 88-710 и/или EV-1a.
Пример 3: Характеристики BVT Cr-7 при контролировании заболеваний у растений
[0072] BVT Cr-7 наносили на серии растений и культур с целью оценки его активности в полевых испытаниях. В частности, BVT Cr-7 наносили на цветы следующих растений (например, с помощью векторизации пчелами или обработки спреем) для контролирования заболеваний, вызванных конкретными патогенами:
- подсолнечник: Sclerotinia, Botrytis и Fusarium
- канола: Sclerotinia
- голубика: Monilinia, Sclerotinia, Botrytis и Phomopsis
- клубника: Botrytis, Phomopsis и Rhizopus
- малина: Botrytis
- виноград: Botrytis, Phomopsis
[0073] BVT Cr-7 наносили также на корни парниковых гидропонных культур (с помощью питательного раствора) и, как показано, он контролировал заболевания, вызываемые Pythium и Fusarium, у перцев, огурцов и томатов.
[0074] BVT Cr-7 наносили (в виде спрея) на листья газонных трав, тепличных перцев и тепличных томатов. BVT Cr-7, как обнаружено, контролировал заболевания, вызываемые Sclerotinia, Typhula и Microdochium, у газонных трав, Fusarium у тепличных перцев и Botrytis у тепличных томатов.
Полевые испытания BVT Cr-7 для обработки земляники
[0075] Испытание проводили в Ontario, где четыре колонии шмелей располагали в центре поля из четырех акров экологически чистой клубники. Каждую коробку колонии («улей») оснащали дозатором для опыления шмелей порошковым составом BVT Cr-7 при их выходе из ульев. BVT Cr-7 выявлялся более чем в 80% цветов клубники по всему полю. Уровни гнили плодов на поле с векторизацией BVT Cr-7 шмелями были чрезвычайно низкими по сравнению с соседним полем экологически чистой клубники, которое не было обработано. В этом испытании BVT Cr-7 подавлял ягодную гниль Botrytis на >90%, ягодную гниль Phomopsis на 100% и гниль Rhizopus («раневую водянистую гниль») на 93%.
Полевые испытания BVT Cr-7 для обработки подсолнечника
[0076] Тест с векторизацией BVT Cr-7 шмелями проводили на поле подсолнечника около Ripley Ontario. Собранные семена с обработанного поля и с контрольного поля в области (без шмелей или BVT Cr-7) сравнивали при лабораторных анализах. Всхожесть семян при обработке векторизацией шмелями была на 27% выше, чем у контрольных семян (т.е. 89,7% по сравнению с 70,7%). Обработка BVT Cr-7 также снижала уровень нескольких нежелательных форм плесени на семенах (Fusarium, Botrytis и Penicillium).
[0077] Шмели существенно векторизировали BVT Cr-7, по меньшей мере, на 360 м от ульев до цветов. BVT Cr-7 эффективно закреплялся в качестве эндофита в больших пропорциях в соцветиях и семенах головок подсолнечника. Деструктивный патоген Sclerotinia не был найден в головках подсолнечника, колонизированных BVT Cr-7, но присутствовал в 20-25% головок за пределами диапазона векторизации BVT Cr-7 пчелами. Растениеводы сообщили, что урожайность семян увеличилась более чем на 20% (влияние опыления плюс BVT Cr-7) и качество улучшилось особенно в отношении более крупного размера семян (и, следовательно, большего содержания масла) и снижения плесени на собранных семенах.
Полевые испытания BVT Cr-7 для обработки голубики
[0078] Испытания на острове принца Эдуарда показали, что BVT Cr-7, наносимый шмелями в виде порошковой композиции или в виде спреев суспензий спор в воде, может закрепляться в качестве эндофита в цветах, ягодах и листьях низкорослых кустов голубики. Обработки приводили к увеличению доли здоровых ягод на 70-100%. BVT Cr-7 сильно снижал случаи мумифицирования ягод, основного заболевания голубики, вызванного грибком Monilinia vaccinii- corymbosi, включая случаи, когда погодные условия были чрезвычайно благоприятны для заболевания. BVT Cr-7 также заметно снижал потемнение и преждевременное опускание ягод, что, как нашли изобретатели, обусловлено до сих пор не описанным заболеванием, вызываемым Sclerotinia sclerotiorum. При испытании в течение одного года заболевание Sclerotinia было, по меньшей мере, таким же вредоносным как мумификация ягод у необработанной голубики. Нанесения спреев BVT Cr-7 в надлежащие периоды времени были эффективны против некроза Phomopsis у низкорослых кустов голубики и в испытании на высокорослых кустах голубики в Ontario. Таким образом, BVT Cr-7 представляет собой агент широкого спектра биологической защиты против основных заболеваний, которые поражают голубику в поле.
[0079] Следовательно, штамм BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea способен контролировать широкий спектр заболеваний, имеющих важное экономическое значение у многочисленных видов культур.
Пример 4: Рабочие характеристики BVT Cr-7 в контролируемых условиях
[0080] BVT Cr-7 был протестирован на ряде конкретных культур с целью оценки его использования в качестве агента биологической защиты:
[0081] A. Рассада канолы: Обработка семян BVT Cr-7 дала очень сильное подавление высоко агрессивного штамма Rhizoctonia solani в стерилизованной почве и корневой гнили Pythium в почве поля.
[0082] B. Собранная морковь (корнеплоды): BVT Cr-7 сильно подавлял гниль Sclerotinia при совместной с патогеном инокуляции на морковь при моделируемом хранении.
[0083] C. Кочаны брокколи: Обработка спреем с BVT Cr-7 контролировала Alternaria, Cladosporium и преждевременное обесцвечивание сохраненных кочанов брокколи.
[0084] D. Персики: Аэрозольное нанесение BVT Cr-7 на свежие персики значительно подавляло частоту и скорость развития бурой гнили (Monilia) в плодах.
[0085] E. Мискантус: Погружение корневищ мискантуса в суспензию спор BVT Cr-7 перед хранением обеспечивало защиту от гнили, обусловленной Pythium, Fusarium и Rhizoctonia в течение нескольких месяцев холодного хранения.
[0086] На основании этих результатов BVT Cr-7 продемонстрировал более широкие доказанные высокие рабочие характеристики в отношении устойчивости к болезням при различных условиях у более высокого числа типов культур, чем другие штаммы C. rosea f. rosea.
Пример 5: Обработка тепличных томатов с использованием BVT Cr-7
[0087] Цветы парниковых томатов, обработанные BVT-Cr7 Clonostachys rosea, и необработанные контрольные цветы оценивали на Clonostachys rosea, Botrytis cinerea и обычные плесени.
[0088] BVT Cr-7 C. rosea доставляли на растения с использованием векторизации пчелами с помощью оснащения ящика колонии (улья шмелей) диспенсером инокулята с целью доставки инокулята к цветам томатов в сравнительно небольшой коммерческой теплице (менее четверти акра) на испытательном участке в Новой Шотландии, Канада.
Лабораторные методы
[0089] Образцы цветов томата были получены с испытательного участка в отличном состоянии. Каждый образец включал четыре цветка в небольшом пластиковом пакете. Четыре цветка каждого образца помещали в чашки Петри на паракват-хлорамфеникол-агаровую (PCA) среду 20 июня 2014 г. и инкубировали в прозрачных пластиковых коробках при 21-25°C при слабом дневном свете в течение 7 дней. Каждый цветок затем оценивали микроскопически на Clonostachys rosea, Botrytis cinerea и обычные плесени. Паракват ускоряет естественное старение тканей растений и тем самым позволяет Clonostachys rosea продуцировать споры и таким образом они идентифицируются. Другие грибы также могут расти и образовывать споры на тканях по мере их старения и умирания.
Результаты
[0090] Как показано в таблице 1, споруляция агента биологической защиты BVT Cr-7 Clonostachys rosea наблюдалась на 87,5% обработанных цветов и 0% необработанных цветов. Споруляция C. rosea на кластерах тычинок плюс пестиков обработанных цветов была плотной и интенсивной почти во всех случаях, так что конусообразная форма этих кластеров выглядела почти полностью белой. Споруляция на лепестках большинства обработанных цветов была от умеренной до сильной.
[0091] Споруляция патогена Botrytis cinerea была обнаружена на 12% необработанных цветов (и была светлой во всех случаях) и на 0% цветов, обработанных C. rosea.
[0092] Обычные парниковые плесени наблюдались на образцах в различной степени. Они включали в основном штаммы Cladosporium (не относящиеся к Fulvia fulvum), Aspergillus, Penicillium и, Alternaria alternata и грибок, напоминающий Acremonium. Для предоставления количественной информации о влиянии C. rosea на эти плесени, каждый цветок оценивали на «плесени» (т.е. любые грибы, отличные от С. rosea или Botrytis) по шкале 1-5, представленной в таблице 1, где 1 представляет собой нулевой след плесени и 5 представляет собой очень сильную плесень. Области цветов со споруляцией этих плесеней были очень низкими (средняя оценка 1,80/5,00) в цветах, в которых закрепился и спорулировал С. rosea, но высокие (4,55/5,00) в отсутствие C. rosea (включая все контрольные цветы). Таким образом, агент биологической защиты BVT Cr-7, как обнаружено, заметно подавляет эти плесени в дополнение к Botrytis. По существу высеянные цветы после обработки C. rosea оказались очень «чистыми» по сравнению с необработанными цветами.
No. образца | Цветы, обработанные BVT-Cr7 | Необработанные контрольные цветы | ||||
BVT-Cr7+ из 4 | Степень плесени* | Суммарно | Степень плесени* | Суммарно | B. cinera | |
1 | 4 | 1, 1, 1, 1 | 4 | 5, 5, 5, 5 | 20 | |
2 | 3 | 1, 1, 1, 3 | 6 | 3, 5, 5, 5 | 18 | |
3 | 4 | 1, 1, 1, 1 | 4 | 5, 5, 4, 4 | 18 | ++ |
4 | 4 | 3, 2, 1, 1 | 7 | 5, 5, 5, 4 | 19 | |
5 | 3 | 1, 1, 3, 2 | 7 | 5, 5, 5, 5 | 20 | + |
6 | 4 | 1, 1, 4, 1 | 7 | 5, 5, 5, 5 | 20 | |
7 | 2 | 4, 3, 1, 2 | 10 | 5, 4, 5, 4 | 18 | |
8 | 4 | 1, 2, 1, 4 | 8 | 3, 5, 5, 4 | 17 | |
9 | 4 | 1, 4, 2, 2 | 9 | 5, 5, 5, 5 | 20 | |
10 | 3 | 3, 1, 1, 2 | 7 | 2, 5, 5, 5 | 17 | + |
11 | 3 | 5, 1, 1, 1 | 8 | 5, 5, 5, 5 | 20 | |
12 | 4 | 2, 3, 2, 4 | 11 | 5, 3, 5, 5 | 18 | + |
13 | 3 | 1, 1, 4, 1 | 7 | 5, 5, 5, 5 | 20 | + |
14 | 4 | 1, 3, 1, 1 | 6 | 5, 5, 5, 5 | 20 | + |
49/56=87,5% | Суммарно 101 | Суммарно 255 | 7 | |||
Средняя степень на цветок 1,80 | 4,55 |
[0093] Примечательно, что использование векторизации пчелами для доставки инокулята BVT-Cr7 создавало возможность быстрого и полного эндофитного закрепления агента биологической защиты в цветах, судя по заметным уровням споруляции, наблюдаемым после того, как цветы инкубировали в течение недели на PCA.
[0094] Наблюдалось прекрасное закрепление С. rosea в кластерах «тычинок плюс пестиков», и это имеет особое значение, учитывая, что они являются основными воротами поступления патогенов.
[0095] Наблюдалась явное полное подавление B. cinerea и значительное подавление различных тепличных форм плесени в цветах, колонизированных C. rosea, что указывает на широкий спектр возможностей и активности BVT Cr-7 против других грибов (например, путем конкурентного исключения).
[0096] Несмотря на то, что настоящее изобретение описано со ссылкой на то, что в настоящее время считается предпочтительными примерами, следует понимать, что применение не ограничено описанными примерами. Наоборот, изобретение предназначено для охвата различных модификаций и эквивалентных установок, включенных в рамки сущности и объема прилагаемой формулы изобретения.
[0097] Все публикации, патенты, патентные заявки и биологические депозиты включены в данное описание в качестве ссылки в полном объеме в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация, патент, патентная заявка или биологический депозит были конкретно и индивидуально указаны, как включенные в качестве ссылки в полном объеме.
Claims (39)
1. Выделенный штамм IDAC 040913-01 гриба Clonostachys rosea f. Rosea, используемый в качестве агента биологической защиты растений.
2. Выделенный штамм по п.1, где контактирование растения с выделенным штаммом подавляет или защищает от заболевания серой плесенью, заболевания белой плесенью, бурой гнили, корневой гнили и/или фомопсиса.
3. Выделенный штамм по п.1, где контактирование растения с выделенным штаммом подавляет или защищает от заболевания, вызываемого Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum и/или штаммами Pythium spp., Rhizoctonia и/или Fusarium.
4. Споры гриба, полученные из выделенного штамма Clonostachys rosea f. rosea по любому из пп. 1-3.
5. Споры гриба по п.4, где споры получают путем инкубации выделенного штамма на субстрате в условиях, подходящих для споруляции.
6. Композиция, включающая выделенный штамм по любому из пп. 1-3 или споры гриба по п.4 или 5 и носитель или разбавитель, причем композиция используется в качестве агента биологической защиты растений.
7. Композиция по п.6, где композиция находится в жидкой форме или в твердой форме.
8. Композиция по п.7, где композиция находится в твердой форме и дополнительно включает одно или более из стабилизирующего агента, агента для поглощения влаги, аттрактанта, разбавителя и/или агента, предотвращающего слипание.
9. Композиция по п.8, где стабилизирующий агент представляет собой частицы силиката кальция.
10. Композиция по п.8, где агент для поглощения влаги включает осушители, частицы или гранулы силикагеля, гиперабсорбирующие полимеры, полиакрилат натрия, древесные стружки и/или шарики глины.
11. Композиция по п.8, где аттрактант включает минералы.
12. Композиция по п.11, где минералы включают одно или более из диоксида кремния, оксида алюминия, кальция, железа, магния, калия, натрия, фосфора, титана, марганца, стронция, циркония, лития, рубидия, бора, цинка, ванадия, хрома, меди, иттрия, никеля, кобальта, галлия, цезия, скандия, олова, молибдена и/или карбоната кальция.
13. Композиция по п.8, где аттрактант включает Dyna-MIN™.
14. Композиция по п.6, где композиция включает споры гриба по п.4 или 5, и композиция содержит от приблизительно 1×108 до 4×108 спор на грамм композиции, необязательно от приблизительно 2×108 до 4×108 спор на грамм композиции.
15. Способ обработки растения агентом биологической защиты растений, включающий контактирование растения с выделенным штаммом, спорами гриба или композицией по любому из пп. 1-13.
16. Способ по п.15 для предупреждения или лечения Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum, Pythium spp., Alternaria, Monilia, Monilinia, Colletotrichum, Cladosporium Rhizoctonia, Streptomyces, Didymella и/или Fusarium у растения.
17. Способ по п.15 для предупреждения или лечения заболевания серой плесенью, заболевания белой плесенью, бурой гнили, корневой гнили и/или фомопсиса у растения.
18. Способ по п.15, где растение выбирают из подсолнечника, канолы, голубики, клубники, винограда, перца, огурцов, томатов, газонных трав, перца, томатов, брокколи, персиков, рассады канолы и/или мискантуса.
19. Способ по п.15, где растение выращивают в теплице.
20. Способ по п.15, где контактирование растения с выделенным штаммом, спорами гриба или композицией включает нанесение спрея, мелкокапельного распыления, окунание или нанесение питательного раствора на растение.
21. Способ по п.15, где контактирование растения с выделенным штаммом, спорами гриба или композицией включает векторизацию насекомыми.
22. Применение выделенного штамма, спор гриба или композиции по любому из пп. 1-13 в качестве агента биологической защиты растений.
23. Применение по п.22 для улучшения жизнеспособности, роста и/или урожайности растения.
24. Применение по п.22 для лечения или профилактики заболевания или патогена у растения.
25. Применение по п.24, где патоген представляет собой Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum, Pythium spp., Alternaria, Monilia, Monilinia, Colletotrichum, Cladosporium Rhizoctonia, Streptomyces, Didymella и/или Fusarium.
26. Применение по п.24, где заболевание представляет собой заболевание серой плесенью, заболевание белой плесенью, бурую гниль, корневую гниль и/или фомопсис.
27. Способ уменьшения порчи растительного материала, причем способ включает контактирование растительного материала с выделенным штаммом, спорами гриба или композицией по любому из пп. 1-13.
28. Способ по п.27, где растительный материал представляет собой фрукты, овощи или зерно.
29. Способ по п.27, где контактирование растительного материала включает нанесение спрея, мелкокапельного распыления или окунание растительного материала.
30. Способ по п.27, где растительный материал представляет собой собранный урожай.
31. Способ получения агента биологической защиты растений, включающий:
инокуляцию субстрата выделенным штаммом по п.1; и
инкубацию субстрата в условиях, подходящих для роста гриба, для получения штамма BVT Cr-7 Clonostachys rosea f. rosea.
32. Способ по п.31, где условия, подходящие для роста гриба, включают относительную влажность более 95% и температуру в диапазоне 20-24 градуса по Цельсию.
33. Способ по п.31 или 32, где субстрат представляет собой стерильный субстрат, необязательно стерильные семена, такие как семена ячменя.
34. Способ по любому из пп. 31-33, дополнительно включающий инкубацию субстрата в условиях, подходящих для споруляции гриба.
35. Способ по п.34, где условия, подходящие для споруляции гриба, включают уменьшение относительной влажности до менее приблизительно 50%, необязательно до приблизительно 35-45%.
36. Способ по п.34 или 35, дополнительно включающий удаление спор с субстрата для получения инокулята.
37. Способ по п.36, включающий смешивание спор с носителем или разбавителем.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361876469P | 2013-09-11 | 2013-09-11 | |
US61/876,469 | 2013-09-11 | ||
PCT/CA2014/000683 WO2015035504A1 (en) | 2013-09-11 | 2014-09-11 | Isolated strain of clonostachys rosea for use as a biological control agent |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2016113495A RU2016113495A (ru) | 2017-10-16 |
RU2016113495A3 RU2016113495A3 (ru) | 2018-05-31 |
RU2689608C2 true RU2689608C2 (ru) | 2019-05-28 |
Family
ID=52664874
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016113495A RU2689608C2 (ru) | 2013-09-11 | 2014-09-11 | Выделенный штамм clonostachys rosea для применения в качестве агента биологической защиты |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9758758B2 (ru) |
EP (1) | EP3044307B1 (ru) |
JP (1) | JP6526011B2 (ru) |
KR (1) | KR102243202B1 (ru) |
CN (1) | CN105705629B (ru) |
AU (1) | AU2014321099B2 (ru) |
BR (1) | BR112016005139B1 (ru) |
CA (1) | CA2923773C (ru) |
CL (1) | CL2016000573A1 (ru) |
ES (1) | ES2714873T3 (ru) |
IL (1) | IL244527B (ru) |
MX (1) | MX365159B (ru) |
PE (1) | PE20160949A1 (ru) |
PH (1) | PH12016500478A1 (ru) |
PL (1) | PL3044307T3 (ru) |
PT (1) | PT3044307T (ru) |
RS (1) | RS58533B1 (ru) |
RU (1) | RU2689608C2 (ru) |
TR (1) | TR201903335T4 (ru) |
UA (1) | UA118856C2 (ru) |
WO (1) | WO2015035504A1 (ru) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9758758B2 (en) | 2013-09-11 | 2017-09-12 | Bee Vectoring Technology Inc. | Isolated strain of Clonostachys rosea for use as a biological control agent |
WO2017109802A1 (en) * | 2015-12-24 | 2017-06-29 | Bioagritest Srl | Strains of clonostachys roseae (anam. gliocladium roseum) and their use in the limitation of the growth of pathogenic fungi and as plants growth promoters |
EP3351106A1 (en) * | 2017-01-19 | 2018-07-25 | Danstar Ferment AG | Post-harvest treatment method using clonostachys rosea |
RU2644338C1 (ru) * | 2017-05-18 | 2018-02-08 | Общество с ограниченной ответственостью "ЭКОГЕН" | Штамм микроорганизма Clonostachys rosea f. catenulata в качестве биофунгицида, стимулятора роста растений и продуцента метаболитов для сельскохозяйственного применения |
US20200288723A1 (en) | 2017-09-20 | 2020-09-17 | Bayer Cropscience Biologics Gmbh | Method of improving storage stability and fitness of fungal spores |
EP3726994A4 (en) * | 2017-12-19 | 2021-08-18 | Danstar Ferment AG | BCA CONTROL FROM STB |
WO2019238734A1 (en) | 2018-06-15 | 2019-12-19 | Bayer Aktiengesellschaft | Liquid and storage-stable formulations for fungal spores |
CA3105409A1 (en) | 2018-07-03 | 2020-01-09 | Bayer Aktiengesellschaft | Fungicidally active combination of a clonostachys strain and an azole |
WO2020011819A1 (en) | 2018-07-10 | 2020-01-16 | Bayer Aktiengesellschaft | Novel carrier fluids for liquid fungal spore formulations |
JP2021530529A (ja) | 2018-07-20 | 2021-11-11 | バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト | 液体真菌胞子調製物用の新規担体流体 |
US20220046930A1 (en) | 2018-09-19 | 2022-02-17 | Bayer Cropscience Biologics Gmbh | Method for increasing storage stability of fungal spores |
EP3878282A4 (en) | 2018-11-02 | 2022-08-10 | Nihon Nohyaku Co., Ltd. | PEST CONTROL AGENT COMPOSITION AND METHOD OF USE |
EP3952646A1 (en) | 2019-04-12 | 2022-02-16 | Bayer CropScience Biologics GmbH | Methods of increasing the germination rate of fungal spores |
WO2020245154A1 (en) | 2019-06-07 | 2020-12-10 | Bayer Cropscience Biologics Gmbh | Methods of increasing the germination rate of fungal spores |
CN110558336A (zh) * | 2019-07-19 | 2019-12-13 | 湖南科技学院 | 一种防治莴苣菌核病的生防制剂及其制备和使用方法 |
WO2021239777A2 (en) | 2020-05-28 | 2021-12-02 | Bayer Cropscience Biologics Gmbh | Novel fermentation substrate for solid-state fermentation |
CA3184174A1 (en) | 2020-06-08 | 2021-12-16 | Danstar Ferment Ag | Novel formulations for increasing the germination rate of fungal spores |
CN112760230B (zh) * | 2020-12-31 | 2022-11-11 | 天津开发区坤禾生物技术有限公司 | 粉红粘帚霉、粉红粘帚霉菌液及在防治向日葵菌核病害中的应用 |
CN115486309A (zh) * | 2022-09-02 | 2022-12-20 | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 | 利用丛枝菌根真菌促进玫瑰生长的方法 |
CN118126846B (zh) * | 2024-05-06 | 2024-07-12 | 云南省林业和草原科学院 | 一种拟金茅内生真菌菌株的培养方法和应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2154381C2 (ru) * | 1994-01-31 | 2000-08-20 | Кемира Агро Ой | Штамм гриба nectria pityrodes montagne, используемый в качестве биофунгицида (варианты), биофунгицид, способ его получения (варианты), способ подавления грибковой инфекции у растений, метод скрининга фунгицидных микроорганизмов |
RU2370525C2 (ru) * | 2004-03-31 | 2009-10-20 | Даниско А/С | Способ получения композиции, содержащей высушенные бактерии, и ее применение |
CA2646428C (en) * | 2006-03-22 | 2014-12-09 | Adjuvants Plus Inc. | Use of clonostachys rosea strain 88-710 and natural emulsifiers as an inoculant for promoting enhanced plant vigor |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000018241A1 (en) | 1998-09-30 | 2000-04-06 | Her Majesty The Queen In Right Of Agriculture Of Canada As Represented By The Minister Of Agriculture And Agri-Food Canada | Gliocladium roseum strains useful for the control of fungal pathogens in plants |
JP2005073586A (ja) | 2003-09-01 | 2005-03-24 | Shizuoka Prefecture | 柑橘病害に対する防除能を有する新規なグリオクラディウム属菌及びそれを用いた生物防除方法 |
CN1281609C (zh) * | 2005-03-16 | 2006-10-25 | 云南大学 | 一类具有毒杀松材线虫活性的化合物及其应用 |
WO2010108267A1 (en) | 2009-03-23 | 2010-09-30 | Origro Inc. | Fungal inoculant compositions |
CN101643705B (zh) * | 2009-09-11 | 2011-12-21 | 东北农业大学 | 一种抑制番茄灰霉病的粘帚霉菌菌株 |
GB201100427D0 (en) | 2011-01-11 | 2011-02-23 | Stichting Dienst Landbouwkundi | Agents for biological control of bacterial plant pathogens |
UA116760C2 (uk) | 2011-04-07 | 2018-05-10 | Біі Векторінг Течнолоґи Інк. | Пристрій для обробки рослин |
AU2013232699B2 (en) | 2012-03-12 | 2016-03-03 | Bee Vectoring Technology Inc. | A formulation comprising a particulate calcium silicate and clonostachys rosea for treating plants |
CA2899257C (en) | 2013-02-01 | 2017-05-09 | Bee Vectoring Technology Inc. | Apparatus for treatment of plants |
US9758758B2 (en) | 2013-09-11 | 2017-09-12 | Bee Vectoring Technology Inc. | Isolated strain of Clonostachys rosea for use as a biological control agent |
-
2014
- 2014-09-11 US US15/021,425 patent/US9758758B2/en active Active
- 2014-09-11 KR KR1020167009419A patent/KR102243202B1/ko active IP Right Grant
- 2014-09-11 TR TR2019/03335T patent/TR201903335T4/tr unknown
- 2014-09-11 CA CA2923773A patent/CA2923773C/en active Active
- 2014-09-11 EP EP14843455.8A patent/EP3044307B1/en active Active
- 2014-09-11 PE PE2016000366A patent/PE20160949A1/es unknown
- 2014-09-11 PL PL14843455T patent/PL3044307T3/pl unknown
- 2014-09-11 BR BR112016005139-4A patent/BR112016005139B1/pt active IP Right Grant
- 2014-09-11 MX MX2016003268A patent/MX365159B/es active IP Right Grant
- 2014-09-11 WO PCT/CA2014/000683 patent/WO2015035504A1/en active Application Filing
- 2014-09-11 RS RS20190320A patent/RS58533B1/sr unknown
- 2014-09-11 ES ES14843455T patent/ES2714873T3/es active Active
- 2014-09-11 RU RU2016113495A patent/RU2689608C2/ru active
- 2014-09-11 CN CN201480061566.3A patent/CN105705629B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2014-09-11 JP JP2016541746A patent/JP6526011B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-09-11 PT PT14843455T patent/PT3044307T/pt unknown
- 2014-09-11 AU AU2014321099A patent/AU2014321099B2/en not_active Ceased
- 2014-11-09 UA UAA201603750A patent/UA118856C2/uk unknown
-
2016
- 2016-03-10 IL IL244527A patent/IL244527B/en active IP Right Grant
- 2016-03-10 CL CL2016000573A patent/CL2016000573A1/es unknown
- 2016-03-11 PH PH12016500478A patent/PH12016500478A1/en unknown
-
2017
- 2017-08-03 US US15/667,861 patent/US10273445B2/en active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2154381C2 (ru) * | 1994-01-31 | 2000-08-20 | Кемира Агро Ой | Штамм гриба nectria pityrodes montagne, используемый в качестве биофунгицида (варианты), биофунгицид, способ его получения (варианты), способ подавления грибковой инфекции у растений, метод скрининга фунгицидных микроорганизмов |
RU2370525C2 (ru) * | 2004-03-31 | 2009-10-20 | Даниско А/С | Способ получения композиции, содержащей высушенные бактерии, и ее применение |
CA2646428C (en) * | 2006-03-22 | 2014-12-09 | Adjuvants Plus Inc. | Use of clonostachys rosea strain 88-710 and natural emulsifiers as an inoculant for promoting enhanced plant vigor |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
COTA L.V., MAFFIA L.A. et.al., Brazilian isolates of Clonostachyc rosea: colonization under different temperature and moisture conditions and temporal dynamics on strawberry leaves, The society for applied Microbiology. Letters in applied microbiology, 2008, v. 46, p. 312-317. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2689608C2 (ru) | Выделенный штамм clonostachys rosea для применения в качестве агента биологической защиты | |
US11286458B2 (en) | Methods and compositions for the biological control of plant pathogens | |
JP2016534737A5 (ru) | ||
CN111254086B (zh) | 一株贝莱斯芽孢杆菌及其在生防中的应用 | |
JP2001503642A (ja) | 植物の真菌感染の生物学的コントロール | |
MX2007008234A (es) | Una nueva cepa de trichoderma atroviride, un medio de cultivo conteniendola, asi como la utilizacion de dicha cepa en particular como estimulante de la germinacion y/o del crecimiento de las plantas. | |
EP1774854A1 (en) | Microbial pesticide inhibiting the outbreak of plant disease damage | |
Abada et al. | Management of pepper Verticillium wilt by combinations of inducer chemicals for plant resistance, bacterial bioagents and compost | |
JP5515098B2 (ja) | レカニシリウム・マスカリウムv−5菌株、該菌株を用いた害虫の防除方法、並びに該菌株を含有する微生物農薬 | |
KR100294023B1 (ko) | 작물의병해방제용균주,이를함유하는미생물제제및그용도 | |
KR20110110769A (ko) | 식물 병해 방제용 조성물, 식물 병해 방제 방법, 및 신규 미생물 | |
CN110177865B (zh) | 植物病原性微生物的生物防治 | |
RU2692655C2 (ru) | Штамм Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 в качестве полифункционального средства для растениеводства | |
CN112772657A (zh) | 哌啶酸作为植物抗病激活剂在防治苹果叶部病害中的应用 | |
KR100314323B1 (ko) | 작물의 병해 방제용 균주, 이를 함유하는 미생물제제 및 그 용도 | |
CN111838190A (zh) | 一种防治茎基腐病和流胶病的生防菌剂及其制备方法与应用 | |
CN115039779B (zh) | 二甲基三硫醚在抑制荔枝霜疫霉菌中的应用 | |
Langendorf | Arbuscular mycorrhizal fungi pre-colonisation for improving the growth and health of strawberry (Fragaria x ananassa) | |
Yousif et al. | Evaluation of salicylic acid solution on fungus Botrytis cinerea that caused strawberry gray mold | |
JP2001039810A (ja) | マンゴー炭そ病の防除法 | |
Deshapriya et al. | Allium cepa L.(onion) storage diseases and effect of Trichoderma asperellum and Trichoderma virens pre-harvest treatments on postharvest quality. | |
Shiva et al. | Efficacy of Rhizosphere Bacterial Antagonists and Plant Growth Promoting Rhizobacteria against Sclerotium rolfsii Affecting Tomato Plants | |
Ramachandran et al. | Biocontrol of Aspergillus root rot by tripartite symbiosis in groundnut |