KR102088113B1 - 브라시닌을 포함하는 피부 미백용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 브라시닌을 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 브라시닌을 포함하는 조성물은 멜라닌의 생성을 억제하고 멜라닌 생성의 조절효소인 티로시나아제의 활성을 저해함으로써 피부 미백에 탁월한 효과가 있어 화장품 및 식품분야에서 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 브라시닌을 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.
생체 내에 존재하는 멜라닌은 피부의 색상을 변화시키는 주요한 생물학적 색소로서 작용한다. 피부 기저층에는 존재하는 멜라노사이트에서 멜라노좀과 멜라닌이 생성되는데 멜라닌은 멜라노좀이라는 세포에 의해 만들어진다. 피부의 멜라닌 생합성에는 다양한 기전들이 연관되어 있는데 그 중에서도 자외선에 의한 자극으로 p53유전자가 만들어 내는 알파-멜라노사이트-조절호르몬에 의한 조절과, 이 호르몬에 의해 증가된 마이크로프탈미아 연합 전이 요소(MITF)가 멜라노좀 안에 존재하는 타이로시네이즈의 활성화를 촉진하고, 활성화된 타이로시네이즈에 의해 DOPA의 하이드록실레이션 과정이 개시되며, 타이로시네이즈 하위 단백질들인 TRP1과 TRP2에 의해 멜라닌 생합성을 촉진 및 조절하게 된다. 최종 산물인 멜라닌은 표피 세포 안으로 들어가 자외선과 같은 피부 자극 물질로부터 피부세포를 보호하는 역할을 수행하게 된다. 그러나 멜라닌 합성의 과다 촉진은 피부에 과색소 침착과 염증성 침착과 같은 기전을 일으키게 된다.
사람 피부에 있는 멜라민 형성 멜라노사이트가 어떤 이유에서건 균일하게 분포되지 않으면 색소 반점이 생성되어 피부의 주변 영역에 비해 더 밝거나 어두워진다. 이러한 문제점을 해소하기 위하여 적어도 부분적으로 그러한 색소 반점을 균일하게 해주는 미백제가 사용되고 있다. 많은 피부 미백제가 다소 강력한 티로시나아제 억제제를 함유하고 있으며, 이러한 피부 미백제로는 주로 하이드로퀴논, 예를 들면 알부틴과 같은 하이드로퀴논 유도체, 비타민 C, 예를 들어 아스코르빌 팔미테이트와 같은 아스코르브산의 유도체, 코지산, 예를 들어 코지산 디팔미테이트와 같은 코지산 유도체가 특히 상업적으로 유용한 피부 및 모발 미백제로 사용되고 있다.
이 중에서, 비타민 C와 아스코르브산 유도체는 티로시나아제 억제제로서 직접적으로 작용하지 못하여 미백효과가 불충분하며, 코지산의 경우에는 피부 알레르기를 유발할 염려가 있다.
이에 본 발명자들은 브라시닌(Brassinin)이 멜라닌의 생성을 억제하고 멜라닌 생성의 조절효소인 티로시나아제의 활성을 저해함으로써 피부 미백에 탁월한 효과가 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다:
[화학식 1]
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 건강식품 조성물을 제공한다.
나아가 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
더 나아가 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 브라시닌을 포함하는 조성물은 멜라닌의 생성을 억제하고 멜라닌 생성의 조절효소인 티로시나아제의 활성을 저해함으로써 피부 미백에 탁월한 효과가 있어 화장품 및 식품분야에서 유용하게 사용될 수 있다.
도 1a는 브라시닌의 화학구조를 나타낸 것이다.
도 1b는 브라시닌을 B16F10 세포에 처리하여 세포독성을 분석한 결과이다.
도 1c는 브라시닌을 HaCaT 세포에 처리하여 세포독성을 분석한 결과이다.
도 2는 브라시닌의 티로시나아제 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 3a는 브라시닌에 의한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다(Intracellular melanin contents: 멜라노사이트 내 존재하는 멜라닌의 양).
도 3b는 브라시닌에 의한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다(Extracellular melanin contents: 멜라노사이트 밖으로 분비된 멜라닌의 양).
도 1b는 브라시닌을 B16F10 세포에 처리하여 세포독성을 분석한 결과이다.
도 1c는 브라시닌을 HaCaT 세포에 처리하여 세포독성을 분석한 결과이다.
도 2는 브라시닌의 티로시나아제 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 3a는 브라시닌에 의한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다(Intracellular melanin contents: 멜라노사이트 내 존재하는 멜라닌의 양).
도 3b는 브라시닌에 의한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다(Extracellular melanin contents: 멜라노사이트 밖으로 분비된 멜라닌의 양).
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
피부 미백용 화장료 조성물
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
본 발명의 일실시예에 있어서, 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염은 멜라닌의 생성 억제 및 티로시나아제의 저해 활성을 갖는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 용어, "미백"이란 피부의 과다 색소 침착을 억제, 저해 또는 완화시키는 것을 말한다. 피부의 과다 색소 침착은 주근깨, 기미, 자외선 노출 후 과다 색소 침착, 염증 후 과다 색소 침착, 노인흑색점, 갈색 반점 또는 검버섯 등을 포함한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 피부 미백용 화장료 조성물은 상기 화학식 1의 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 상기 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~90 중량%의 양으로 함유할 수 있으며, 바람직하게는 0.0001 내지 10 중량%의 양으로 포함할 수 있다.
본 발명의 용어, "유효량"이란 피부의 과다 색소 침착을 억제, 저해 또는 완화시킬 수 있는 화합물의 양을 의미한다. 본 발명의 피부 미백용 조성물에 포함되는 상기 화합물의 유효량은 피부 미백용 조성물이 제품화되는 형태, 상기 화합물이 피부에 적용되는 방법 및 피부에 머무르는 시간 등에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 상기 피부 미백용 조성물이 피부의 과다 색소 침착에 따른 피부과적 치료를 위한 의약품으로 제품화되는 경우에는 일상적으로 피부에 적용하게 되는 화장품으로 제품화되는 경우에 비해 높은 농도로 상기 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함할 수 있을 것이다. 화장품으로 제품화되는 경우에 있어서도 유효성분이 단기간 내에 피부에 머무르게 되는 메이크업 제거제, 세정제 등과 같은 워쉬-오프(wash-off) 타입의 화장품의 경우에는 비교적 높은 농도의 상기 화합물을 포함할 수 있을 것이다. 반면 유효성분이 장기간 동안 피부에 머무르게 되는 화장수, 유액, 크림, 에센스 등의 리브-온(leave-on) 타입의 화장품의 경우에는 워쉬-오프 타입의 화장품에 비해 낮은 농도의 상기 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함해도 무방할 것이다.
본 발명에 따른 피부 미백용 화장료 조성물은 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 제형을 가질 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 본 발명의 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 피부 미백 활성 성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 피부 미백 활성 성분으로는 코지산 및 이의 유도체, 알부틴, 아스코르브산 및 이의 유도체, 하이드로퀴논 및 이의 유도체, 레조르시놀, 사이클로알카논, 메틸렌디옥시페닐 알칸올, 2,7-디니트로인다졸 또는 덩굴귤 추출물, 쌀 추출물, 감초 추출물과 같은 식물 추출물 등이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습체, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.
상기와 같이 피부 미백용 화장료 조성물을 의약품 또는 화장품으로 제형화할 경우, 활성 성분에 대한 담체로 작용하는 피부에 적용가능한 공지의 부형제를 포함할 수 있다. 의약품으로의 제형화시에는 [Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA]에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있으며, 화장품으로 제형화시에는 [International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed., The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995]에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있을 것이다. 상기 문헌들은 본 명세서의 일부로서 포함된다.
피부 미백용 건강식품 또는 건강기능식품 조성물
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 건강식품 또는 건강기능 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
본 발명의 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 건강기능식품 및 건강식품 조성물로 사용하는 경우, 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품 및 건강식품 조성물을 모두 포함한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 총 조성물 함량에서 상기 브라시닌 또는 이의 허용가능한 염을 0.0001 내지 10 중량% 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에 따른 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 및 건강식품 중의 상기 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 유지를 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트라이톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
피부 미백용 조성물
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 브라시닌(Brassinin) 또는 이의 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
1. 시약 및 재료
본 실험에 사용한 cell culture plate는 SPL사의 제품을 사용하였으며, α-MSH(alpha-melanocyte-stimulating hormone), DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium - High Glucose), DPBS(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline), Tryrosinase from mushroom, L-DOPA, Arbutin, Niacinamide, Brassinin은 Sigma aldrich korea 제품을 이용하였으며, FBS는 ATCC사의 제품을 사용하였다.
1-1. 세포배양
B16F10 cell은 한국 세포주은행에서 분양받아 연구를 진행하였다. Heat inactivated FBS 10%와 100 units/ml, 1% penicillin/streptomycin을 첨가한 DMEM에 37℃5% CO2 의 인큐베이터에서 배양하였다.
1-2. 세포 생존율 측정 (Cell viability assay)
세포 생존율 측정은 Crystal violet(Sigma aldrich) 용액을 이용하여 측정하였다. 6 well plate에 2.5 x 105/ml로 각 well 당 2 ml씩 분주하여 24시간 동안 plate에 안정화 후 대조군을 제외한 실험군에 브라시닌(Brassinin)을 10, 20, 40 μM 농도로 각각 처리한 후 3일 동안 배양하였다. 배양된 세포를 PBS세척 후 4% 파라포름알데히드 용액(Paraformaldehyde solution)에서 10분간 고정(fixation)을 진행한 후 0.5% crystal violet 용액을 이용하여 10분간 염색을 진행하였다.
1-3. 외부 및 내부 멜라닌 함량 측정 (Extra & Intra melanin content assay)
세포배양은 세포 생존율 측정 시와 동일하게 진행하였으나 phenol red가 없는 배지를 이용하였다. 세포 외부 멜라닌(Extracellular melanin content)의 양은 세포배양액에 분비된 멜라닌에 의한 색의 변화를 OD405 nm에서 측정하였으며, 세포 내부 멜라닌(Intracellular melanin content)은 1N NaOH용액을 이용하여 세포 내 멜라닌을 용출시킨 후 80℃에서 1시간 동안 멜라닌을 용해 시킨 후 OD405 nm의 흡광도로 측정하였다.
1-4. 시험관 내 티로시나아제(tyrosinase) 활성 측정 (Cell-free tyrosinase activity assay)
시험관 내 티로시나아제(Tyrosinase) 활성 측정은 Yagi등(1986)의 방법을 이용하여 측정하였다. 모든 시험관(6개)에 동일한 양의 0.175 M sodium phosphate buffer (pH 6.8) 0.5 ㎖과 10mM L-DOPA 0.2 ㎖을 첨가하였다. 다음으로 실험군 시료로써 알부틴(1 mM), 나이아신아미드(50 uM), 브라시닌 (20, 40 uM)을 각각 첨가하였다. 대조군(흰색그래프)을 제외한 5개 시험관(검정색그래프)에 버섯으로부터 분리된 mushroom tyrosinase (100 U/㎖) 0.2 ㎖ 첨가하였다. 모든 시료가 첨가된 용액은 37℃에서 2분간 반응시겼다. 반응과정 중에 생성된 DOPAchrome을 OD475 ㎚파장에서 측정하였다.
2. 결과
2-1. 브라시닌에 의한 피부세포 독성 분석
브라시닌에 의한 세포생존율 변화를 분석하기 위해 B16F10세포와 HaCaT세포에 알부틴(Arbutin, 1 mM), 나이아신아미드(Niacinamide, 50 uM), 브라시닌 (Brassinin, 10, 20, 40 uM)을 각각 처리하였다. 각 물질이 처리된 세포는 3일간 배양하였으며 크리스탈바이올렛(crystal violet) 기법을 통해 세포생존율을 분석하였다.
그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 멜라닌 생성세포(B16F10)와 Keratinocyte (HaCaT)세포에 세포독성이 나타나지 않았다. 따라서 브라시닌은 피부조직을 구성하는 세포성장을 저해하지 않는다는 것을 확인할 수 있었다.
2-2. 브라시닌의 티로시나아제 억제 효과
모든 그룹의 시험관에 티로시나아제 효소에 의해 산화가 되는 기질인 L-DOPA를 첨가하였다. 시험관에 버섯으로부터 분리된 티로시나아제 효소를 첨가하지 않은 그룹을 대조군으로 설정하였으며, 다른 5개 그룹에는 버섯으로부터 분리된 티로시나아제 효소를 첨가하였다. 상기 5개 실험군 중에 1개 실험군에는 알부틴을 첨가하였으며, 다른 1개 실험군에는 나이아신아미드를 첨가, 나머지 두 개 실험군에는 브라시닌을 각각 20uM 그리고 40uM로 첨가하고, 티로시나아제에 의한 L-DOPA의 산화로부터 발생되는 용액의 색깔 변화를 흡광도 분석을 통해 확인하였다.
그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 알부틴은 약 40%정도의 티로시나아제의 활성을 저해하는 것을 확인하였으며, 브라시닌의 경우 40uM농도에서 약 50%정도의 티로시나아제 활성억제 효과를 확인하였다. 상기 결과를 통해 브라시닌이 티로시나아제에 의한 L-DOPA산화를 억제함으로써 멜라닌의 합성을 저해할 수 있다는 것을 확인할 수 있었다.
2-3. 브라시닌에 의한 멜라닌의 합성과 분비억제 효과
멜라닌 생성세포에 나이아신아미드와 브라시닌을 각각 전처리하고 1시간동안 세포배양기에서 약물을 흡수할 수 있도록 하였다. 1시간 후 멜라닌 생성세포에 대조군(도 3 흰색그래프 참조)을 제외한 4개 실험군에 0.1mM의 MSH를 처리하였다. MSH와 실험물질을 첨가한 멜라닌 생성세포를 3일 간 배양한 후 세포추출액으로부터 세포 내 멜라닌 양을 분석하고, 세포배양액을 이용하여 세포 외 멜라닌 양을 분석하였다.
그 결과, 도 3a에 나타낸 바와 같이, 멜라닌 합성을 촉진하는 호르몬인 alpha-MSH (alpha-melanocyte stimulating hormone)에 의해 멜라닌의 합성이 증가되는 것을 확인하였으며, MSH처리군에 나이아신아미드를 첨가할 경우 멜라닌의 합성에 변화가 없는 것을 확인하였다.
나이아신아미드는 멜라닌생성세포에서 합성된 멜라닌이 keratinocyte로 운반되는 과정을 억제하는 물질로써 멜라닌 생성세포에서 멜라닌 합성 저해효과가 없는 것은 기존의 결과와 동일하고, MSH처리군에 브라시닌을 농도(20, 40uM)별로 처리한 결과 MSH에 의해 증가된 멜라닌 합성이 브라시닌에 의해 농도의존적으로 감소하는 것을 확인하였다.
MSH자극에 의해 합성된 멜라닌이 멜라닌 생성세포밖으로 운반되는지 여부를 확인한 결과, 도 3b에 나타낸 바와 같이, MSH처리군에 나이아신아미드를 첨가한 실험군에서 멜라닌 생성세포 밖으로 분비된 멜라닌의 양이 현저하게 감소하는 것을 확인하였으며, 이 결과는 나이아신아미드의 멜라닌 운반억제 기전을 뒷받침하는 결과라고 할 수 있었다. MSH처리군에 브라시닌을 농도(20, 40uM)별로 처리한 결과 브라시닌 농도의존적으로 멜라닌생성세포 밖으로 분비된 멜라닌의 양이 현저하게 감소하는 것을 확인하였으며, 이 결과를 통해 브라시닌은 MSH자극에 의한 멜라닌의 합성과 분비를 억제할 수 있는 효과를 가지고 있다고 볼 수 있다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (11)
- 제1항에 있어서,
상기 브라시닌 또는 이의 허용가능한 염은 멜라닌의 생성 억제 및 티로시나아제의 저해 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크 로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어진 그룹에서 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조된 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서,
총 조성물 함량에서 상기 브라시닌 또는 이의 허용가능한 염을 0.0001 내지 10 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제5항에 있어서,
총 조성물 함량에서 상기 브라시닌 또는 이의 허용가능한 염을 0.0001 내지 10 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제5항에 있어서,
상기 건강식품은 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제에서 선택되는 것을 특징으로 하는 건강식품 조성물.
- 제8항에 있어서,
총 조성물 함량에서 상기 브라시닌 또는 이의 허용가능한 염을 0.0001 내지 10 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제8항에 있어서,
상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 형태의 식품인 것을 특징으로 하는 건강기능식품 조성물.
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KR1020180122676A KR102088113B1 (ko) | 2018-10-15 | 2018-10-15 | 브라시닌을 포함하는 피부 미백용 조성물 |
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Citations (2)
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JP2007320859A (ja) * | 2006-05-30 | 2007-12-13 | Kao Corp | 活性酸素産生酵素発現抑制剤 |
KR20170080074A (ko) * | 2015-12-31 | 2017-07-10 | 주식회사 엘지생활건강 | 브라시놀라이드를 포함하는 피부상태 개선용 조성물 |
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2018
- 2018-10-15 KR KR1020180122676A patent/KR102088113B1/ko active IP Right Grant
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