KR102056665B1 - 4,4,-이치환-1,4-디하이드로피리미딘 및 b형 간염의 치료를 위한 약제로서 이의 용도 - Google Patents

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Abstract

입체화학적 이성질체 형태, 및 이의 염, 수화물, 용매화합물을 포함하는 식(I)의 HBV 복제 저해제로서 R1 내지 R5, B 및 Z는 본원에 정의된 바와 같은 의미를 가진다.
Figure 112014070558363-pct00230

또한 본 발명은 상기 화합물을 제조하는 방법, 이를 함유하는 약학적 조성물 및 HBV 치료요법에서 단독으로 또는 다른 HBV 저해제들과 조합되는 이들의 용도에 관한 것이다.

Description

4,4,-이치환-1,4-디하이드로피리미딘 및 B형 간염의 치료를 위한 약제로서 이의 용도{4,4-disubstituted-1,4-dihydropyrimidines and the use thereof as medicaments for the treatment of hepatitis B}
본 발명은 4,4,-이치환-1,4-디하이드로피리미딘 및 B형 간염의 치료를 위한 약제로서 이의 용도에 관한 것이다.
B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus, HBV)는 헤파드나바이러스과(Hepadnaviridae)의 외피보유, 부분적 이중 가닥 DNA(dsDNA) 바이러스이다. 이들의 게놈은 4개의 중첩되는 해독틀을 포함한다: 프리코어/코어 유전자; 중합효소 유전자; 3개의 외피 단백질을 암호화하는 L, M, 및 S 유전자; 및 X 유전자.
감염 시, 부분적인 이중가닥 DNA 게놈(이완된 환상 DNA, rcDNA)은 숙주 세포의 핵 내에서 공유결합 폐쇄 환상 DNA(cccDNA)로 전환되고 바이러스 mRNA는 전사된다. 일단 캡시드화되면, 코어 단백질 및 Pol도 또한 암호화하는 프리지노믹 RNA(pgRNA)는 역전사를 위한 주형의 역할을 하여 뉴클레오캡시드 내에 부분적 dsDNA 게놈(rcDNA)을 재생성한다.
HBV는 아시아 및 아프리카의 부분들에서 유행성병을 유발하고 있으며, 중국에서는 풍토병이다. HBV는 세계적으로 대략 이십억명을 감염시켰으며, 그 중 대략 3억 5천명은 만성 감염으로 발전하였다. 바이러스는 B형 간염 질환을 유발하고, 만성 감염은 경화 및 간세포 암종 발전의 위험의 강한 증가에 연관된다.
혈청 내 높은 DNA 역가를 가지는 만성 보균자의 침, 눈물, 및 소변에서도 바이러스 DNA가 검출되지만, B형 간염 바이러스의 전파는 감염성 혈액 또는 체액에의 노출에 기인한다.
효과적이고 잘 관용되는(well tolerated) 백신은 존재하지만, 직접적인 치료 옵션은 현재 인터페론 및 다음과 같은 항바이러스제로 제한되어 있다: 테노포비르(tenofovir), 라미부딘(lamivudine), 아데포비르(adefovir), 엔테카비르(entecavir) 및 텔비부딘(telbivudine). 인터페론은 비싸며 종종 잘 관용되지 않고, 뉴클레오시드는 내성 돌연변이를 선택하는 것으로 나타났다.
약물 선별은 조직 배양 및 동물 모델 내에서 헤테로아릴디하이드로피리미딘(HAP)을 나노몰 농도에서 효과적인 HBV 저해 부류로 확인하였다(Weber et al., Antiviral Res. 54: 69-78). 추가의 연구에서 HAP는 Cp를 표적화하는 것으로 나타났으며(Deres et al., Science 299: 893-896), 높은 약물 농도에서 캡시드의 부적절한 조립을 초래한다.
WO00/058302, WO01/68642 및 WO2010/069147을 포함하는 다수의 특허 및 특허 출원은 HBV 저해 활성을 가지는 화합물, 특히 디하이드로피리미딘 유도체를 개시한다.
HBV에 직접적인 항바이러스제들이 마주칠 수 있는 문제들은 독성, 돌연변이, 선택성의 결여, 불량한 효율, 불량한 생체이용률, 키랄 중심의 라세미화 및 합성의 어려움이다.
이러한 단점들 중 적어도 하나를 극복할 수 있는 HBV 저해제에 대한 필요성이 있다.
일 양태에서, 본 발명은 임의의 가능한 입체이성질체 또는 호변체 형태를 포함하는 식 I로 나타나는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화합물을 제공하되,
Figure 112014070558363-pct00001
여기서, B는 선택적으로 하나 이상의 플루오로 원자로 치환된 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되며;
Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나;
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로 원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 여기서, 4 내지 7원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬, 옥소, OH 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 할로겐 및 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3은 C1-C3 알콕시카보닐 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H, 메틸 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 하나 이상의 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬, C2-C3 알케닐이고;
R7은 수소, 헤테로 C3 - 7사이클로알킬, 사이클로프로필, C1-C3알콕시 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택된다.
일 구현예에서,
B는 선택적으로 하나 이상의 플루오로 원자로 치환된 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나;
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로 원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 여기서 4 내지 7원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬, 옥소, 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 할로겐 및 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고,
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3은 C1-C3 알콕시카보닐 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬이고;
R7은 수소, 헤테로 C3 - 7사이클로알킬, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택된다.
본 발명에 따른 식 I의 화합물의 특정 군에서, B는 선택적으로 하나 이상의 플루오로 원자로 치환된 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나;
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로 원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 여기서 4 내지 7원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 헤테로아릴 및 페닐을 포함하는 군으로부터 선택된다.
본 발명은, 또한, 식 I의 화합물, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은, 또한, 약제로 사용하기 위한, 바람직하게는 포유동물에서 HBV 감염의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 식 I의 화합물에 관한 것이다.
추가의 양태에서, 본 발명은 식 I의 화합물과 다른 HBV 저해제와의 조합에 관한 것이다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 식 V에 따른 화합물에 관한 것으로,
Figure 112014070558363-pct00002
여기서, B, Z, R1, R3, R4, 및 R5는 위에서와 같이 정의된다.
본 발명은, 또한, 식 I에 따른 화합물의 합성에서 식 V의 화합물의 용도에 관한 것이다.
정의
기(group) 또는 기의 일부로서 “C1 - 3알킬”이라는 용어는 식 CnH2n +1의 하이드로카빌 라디칼을 지칭하며, 여기서 n은 1 내지 3의 범위의 수이다. C1 - 3알킬이 추가의 라디칼에 커플링된 경우, 이는 식 CnH2n를 지칭한다. C1 - 3알킬기는 1 내지 3개의 탄소 원자, 더욱 바람직하게는 1 내지 2개의 탄소 원자를 포함한다. C1 - 3알킬은 1 내지 3개의 탄소 원자를 가지는 선형, 또는 분지형 알킬기를 모두 포함하고 따라서 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 및 i-프로필을 포함한다.
기 또는 기의 일부로서 “C2 - 4알케닐”이라는 용어는, 예를 들어, 비닐, 프로페닐, 부테닐 등과 같은 적어도 하나의 이중 결합을 함유하는 2 내지 4개의 탄소 원자를 가지는 직쇄 및 분지쇄의 포화된 탄화수소 라디칼을 정의한다.
기 또는 기의 일부로서 “C1 - 3알킬옥시” 또는 C1 - 3알콕시라는 용어는 식 --ORc를 가지는 라디칼을 지칭하되, 여기서 Rc는 C1 - 3알킬이다. 적합한 C1 - 3알킬옥시의 비제한적 예는 메틸옥시(또한 메톡시), 에틸옥시(또한 에톡시), 프로필옥시 및 이소프로필옥시를 포함한다.
본원에서 사용된 카보닐, 또는 "(=O)" 또는 "옥소" 라는 용어는 탄소 원자에 부착될 때 카보닐 모이어티를 형성한다. 원자는 그 원자의 원자가가 그렇게 하도록 허용할 때에만 옥소기로 치환될 수 있다는 점을 주지해야 한다.
본원에서 사용된 "헤테로 C3 - 7사이클로알킬”이라는 용어는 "헤테로 C3 - 7사이클로알킬"에 대해 정의된 바와 같은 포화된 환형 탄화수소기를 의미하며, 여기서 적어도 하나의 탄소 원자는 N, O, 및 S, 특히 N 및 O로부터 선택된 헤테로원자에 의해 대체된다. 헤테로 C3 - 7사이클로알킬의 예는 테트라하이드로-2H-피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 모포리닐 및 피롤리디닐을 포함한다.
“헤테로아릴”이라는 용어는 탄소 원자, 수소 원자 및 하나 이상의 헤테로원자(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택됨), 바람직하게는 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 단일환- 또는 다환 방향족 고리를 의미한다. 본 발명의 목적에서, 헤테로아릴기는 단지 약간의 정도의 방향족 성질을 가지는 것을 필요로 한다. 헤테로아릴기의 예시적인 예는, 이에 제한되지는 않지만, 피리딜, 피리다지닐, 피리미딜, 피라질(pyrazyl), 트리아지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, (1,2,3,)- 및 (1,2,4)-트리아졸릴, 피라지닐, 피리미디닐, 테트라졸릴, 푸릴, 티에닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이속사졸릴, 및 옥사졸릴을 포함한다. 헤테로아릴기는 치환되지 않거나 하나 또는 두 개의 적합한 치환기로 치환될 수 있다. 바람직하게, 헤테로아릴기는 본원에서 "(C2-C5)헤테로아릴"로 지칭되는 단일환 고리이며, 여기서 고리는 2 내지 5개의 탄소 원자 및 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함한다.
본 명세서 전체에 걸쳐 사용되는 정의 내에 다양한 헤테로사이클의 상이한 이성질체들이 존재할 수 있다는 점을 주지해야 한다. 예를 들어, 피롤릴은 1H-피롤릴 또는 2H-피롤릴일 수 있다.
할로라는 용어는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오드의 일반명칭이다.
정의에서 사용된 임의의 분자 모이어티 상의 라디칼 위치는 그것이 화학적으로 안정한 한 이러한 모이어티 상의 어디에나 있을 수 있다는 점 또한 주지해야 한다. 예를 들어, 피리딜은 2-피리딜, 3-피리딜 및 4-피리딜을 포함하고; 펜틸은 1-펜틸, 2-펜틸, 및 3-펜틸을 포함한다.
“B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 4 내지 7원 고리를 형성한다”라는 말은 B 및 Z는 함께 1, 2, 3, 또는 4개의 원자로 구성된 다리를 형성한다는 것을 나타낸다. B 및 Z는 함께 하나의 원자를 나타낼 수 있다. B 및 Z는 직접적으로 포화 또는 불포화 결합을 통해 커플링될 수 있거나 B 및 Z는 1 또는 2개의 추가적인 원자를 통하는 포화 또는 불포화 결합을 통해 커플링될 수 있다. 도식적으로, 다음의 구조식 (I)4, (I)5, (I)6 및 (I)7에 의해 하기와 같이 제시되며, 여기서 R1-R5은 본 출원에서 정의된 바와 같은 의미를 가지고, X, B 및 Z는 탄소 또는 헤테로원자, 바람직하게는 탄소 또는 산소를 나타낸다.
4원 고리:
Figure 112014070558363-pct00003
5원 고리:
Figure 112014070558363-pct00004
6원 고리:
Figure 112014070558363-pct00005
및 7원 고리:
Figure 112014070558363-pct00006
임의의 가변(예컨대, 할로겐 또는 C1 - 4알킬)이 임의의 구성에서 1회를 초과하여 발생하는 경우, 각각의 정의는 독립적이다.
치료용도에서, 식(I)의 화합물의 염은 카운터이온이 약학적이거나 생리학적으로 허용가능한 것들이다. 그러나, 약학적으로 허용가능하지 않은 카운터이온을 가지는 염도, 또한, 예를 들어, 약학적으로 허용가능한 식(I)의 화합물의 제조 또는 정제에서 용도를 발견할 수 있다. 약학적으로 허용가능하든지 또는 그렇지 않든지, 모든 염들은 본 발명의 범위 내에 포함된다.
본 발명의 화합물이 형성할 수 있는 약학적으로 허용가능하거나 생리학적으로 관용되는 부가염 형태들은, 예를 들어 무기산(예를 들면 할로겐화수소산, 예컨대, 염산 또는 브롬화수소산; 황산; 헤미황산, 질산; 인산 등); 또는 유기산(예를 들어, 아세트산, 아스파르트산, 도데실-황산, 헵탄산, 헥산산, 니코틴산, 프로판산, 하이드록시아세트산, 락트산, 피루브산, 옥살산, 말론산, 숙신산, 말레인산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 사이클람산, 살리실산, p-아미노-살리신산, 팜산 등)과 같은 적절한 산을 사용하여 편리하게 제조될 수 있다.
역으로, 상기 산 부가염 형태는 적절한 염기로 처리함으로써 유리 염기 형태로 전환될 수 있다.
“염”이라는 용어는 또한 본 발명의 화합물이 형성할 수 있는 수화물 및 용매 부가 형태를 포함한다. 이러한 형태의 예는, 예컨대, 수화물, 알코올레이트 등이다.
본 화합물은 또한 그들의 호변체 형태로도 존재할 수 있다. 예를 들어, 아미드(-C(=O)-NH-) 기의 호변체 형태는 이미노알코올(-C(OH)=N-)이다. 호변체 형태는, 비록 본원에 나타낸 구조식에 명확하게 지시되지 않았더라도, 본 발명의 범주 내에 포함되는 것으로 의도된다.
본원에서 앞서 사용된 본 발명의 화합물의 입체화학적 이성질 형태라는 용어는 동일한 결합 서열에 의해 결합되지만 상호교환적이지 않은 본 발명의 화합물이 가질 수 있는 상이한 3차원 구조를 가지는 동일한 원자로 구성된 모든 가능한 화합물을 정의한다. 다르게 언급되거나 지시되지 않는 한, 화합물의 화학적 지명은 상기 화합물이 가질 수 있는 모든 가능한 입체화학적 이성질 형태의 혼합물을 포함한다. 상기 혼합물은 상기 화합물의 기본 분자 구조의 모든 부분입체이성질체 및/또는 거울상이성질체를 함유할 수 있다. 본 발명의 화합물의 모든 입체화학적 이성질체 형태는, 순수한 형태 또는 서로 혼합된 형태 둘 다, 본 발명의 범주 내에 포함되는 것으로 의도된다.
본원에서 언급된 화합물 및 중간체의 순수한 입체이성질 형태는 상기 화합물 또는 중간체의 동일한 기본 분자 구조의 다른 거울상이성질 또는 부분입체이성질 형태가 실질적으로 없는 이성질체로 정의된다. 특히, "입체이성질적 순수”는 적어도 80%를 초과하는 입체이성질체(즉, 최소 90%의 하나의 이성질체 및 최대 10%의 다른 가능한 이성질체)부터 최대 100%를 초과하는 입체 이성질체(즉, 다른 이성질체가 전혀 없고, 100%의 하나의 이성질체)를 가지는 화합물 또는 중간체, 더욱 상세하게는 90%를 초과하고 최대 100% 입체이성질체를 가지고, 더욱 더 상세하게는 94%를 초과하고 최대 100% 입체이성질체를 가지며, 가장 상세하게는 97%를 초과하고 최대 100%의 입체이성질체를 가지는 화합물 또는 중간체와 관련된다."거울상이성질적 순수” 및 "부분입체이성질적 순수”라는 용어는 유사한 방식이지만 논의되고 있는 혼합물의 거울상이성질 초과, 부분입체이성질 초과를 각각 고려하는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명의 화합물 및 중간체의 순수한 입체이성질 형태는 당해 분야에 공지된 절차의 적용에 의해 수득될 수 있다. 예를 들어, 거울상이성질체는 광학적으로 활성인 산 또는 염기를 사용한 거울상이성질체의 부분입체이성질 염의 선택적 결정화에 의해 서로 분리될 수 있다. 이의 예시는 타르타르 산, 디벤조일-타르타르 산, 디톨루오일타르타르 산 및 캄포술폰 산이다. 대안적으로, 거울상이성질체는 키랄 고정상을 사용한 크로마토그래피 기술에 의해 분리될 수 있다. 상기 순수한 입체화학적 이성질 형태는, 또한 반응이 입체특이적으로 일어나면, 적절한 출발 물질의 상응하는 순수한 입체화학적 이성질 형태로부터 유래할 수 있다. 바람직하게는, 특정한 입체이성질체를 원하는 경우, 상기 화합물은 입체특이적 제조 방법에 의해 합성될 것이다. 이러한 방법은 유리하게는 거울상이성질적으로 순수한 출발 물질을 사용할 것이다.
식(I)의 부분입체이성질 라세미체는 통상적인 방법에 의해 별도로 수득될 수 있다. 유리하게 사용될 수 있는 적절한 물리적 분리법은, 예를 들어, 선택적인 결정화 및 크로마토그래피, 예컨대, 컬럼 크로마토그래피이다.
본 발명은 또한 본 화합물 상에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함하는 것으로 의도된다. 동위원소는 동일한 원자 번호를 가지지만 질량수가 상이한 원자를 포함한다. 일반적인 예시로서, 제한없이, 수소의 동위원소는 삼중수소 및 중수소를 포함한다. 탄소의 동위원소는 C-13 및 C-14를 포함한다.
이하에서 사용될 때마다, "식(I)의 화합물” 또는 "본 화합물”이라는 용어 또는 유사한 용어는 일반식(I)의 화합물, 이의 염, 입체이성질 형태 및 라세미 혼합물 또는 임의의 서브그룹(subgroup)을 포함하는 것을 의미한다.
Figure 112014070558363-pct00007
본 발명은 임의의 가능한 입체이성질체 또는 호변체 형태를 포함하는 식 I로 나타낼 수 있는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물을 제공한다:
Figure 112014070558363-pct00008
여기서 B는 선택적으로 하나 이상의 플루오로 원자로 치환된 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나;
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 4 내지 7원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬, 옥소, OH 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 할로겐 및 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 헤테로아릴 및 페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3은 C1-C3알콕시카보닐, 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H, 메틸 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 하나 이상의 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬, C2-C3알케닐이고;
R7은 수소, 헤테로C3 - 7사이클로알킬, 사이클로프로필, C1-C3알콕시 및 CF3을 포함하는 군으로부터 선택된다.
본 발명에 따른 화합물의 관심있는 서브그룹은 임의의 가능한 입체이성질체 또는 호변체 형태를 포함하는 식(I)의 화합물이다:
여기서, B는 선택적으로 하나 이상의 플루오로 원자로 치환된 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나;
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 4 내지 7원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 헤테로아릴 및 페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3는 C1-C3알콕시카보닐, 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬이고;
R7은 수소, 헤테로C3 - 7사이클로알킬, 사이클로프로필 및 CF3을 포함하는 군으로부터 선택된다.
식(I)의 화합물의 다른 관심있는 서브그룹은 다음의 식(I)의 화합물로서:
여기서 B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5- 또는 6-원 고리를 형성하되, 5- 또는 6-원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬, 옥소, 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 헤테로아릴이고;
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3는 C1-C3알콕시카보닐, 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬이고;
R7은 수소, 헤테로C3 - 7사이클로알킬, 또는 CF3을 포함하는 군으로부터 선택된다.
이러한 서브그룹의 일 구현예에서, B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 6원 고리를 형성하되, 5 내지 6원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된다.
화합물의 특정 그룹은 R1의 헤테로아릴이 4,4-이치환-1,4-디하이드로피리미딘에 부착된 탄소에 이웃한 질소 원자를 포함하는 (예컨대, R1은 2-피리디닐 또는 2-티아졸릴임) 식(I)의 화합물이다.
화합물의 다른 특정 그룹은 R6-R7이 메틸을 나타내는 식(I)의 화합물이다.
식(I)의 화합물의 관심있는 서브그룹은 다음의 제한들 중 임의의 조합이 적용되는 식(I)의 화합물 또는 이의 서브그룹이다:
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로는 하나 이상의 CH3 또는 플루오로 치환기로 치환된 5 또는 6원 고리를 형성한다;
R1은 피리디닐 또는 티아졸릴으로부터 선택된다;
R2는 -R6-R7, C?, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택된다;
R3은 C1- 또는 C2-알킬옥시카보닐, 바람직하게는 C1-알킬옥시카보닐이다;
R6은 CH2이다;
R7은 수소, 모포리닐 또는 피페리디닐로부터 선택된다;
R4 및 R5는 플루오로 및 H의 군으로부터 독립적으로 선택된다.
본 발명의 바람직한 서브그룹은 임의의 가능한 입체이성질체 또는 호변체 형태를 포함하는 식 Ia에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화합물이다:
Figure 112014070558363-pct00009
여기서, B는 선택적으로 하나 이상의 플루오로 원자로 치환된 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나;
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 4 내지 7원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬, 옥소 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 할로겐 및 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 헤테로아릴 및 페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3는 C1-C3알콕시카보닐, 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬이고;
R7은 수소, 헤테로C3 - 7사이클로알킬, 사이클로프로필, 및 CF3을 포함하는 군으로부터 선택된다.
본 발명에 따른 화합물의 관심있는 서브그룹은 임의의 가능한 입체이성질체 또는 호변체 형태를 포함하는 식(Ia)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화합물로서:
여기서, B는 선택적으로 하나 이상의 플루오로 원자로 치환된 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나;
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 4 내지 7원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 헤테로아릴 및 페닐을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3는 C1-C3알콕시카보닐, 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬이고;
R7은 수소, 헤테로C3 - 7사이클로알킬, 사이클로프로필, 및 CF3을 포함하는 군으로부터 선택된다.
식(Ia)의 화합물의 관심있는 서브그룹은 식(Ia)의 화합물로서:
여기서, B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5- 또는 6-원 고리를 형성하되, 5- 또는 6-원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬, 옥소, 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 헤테로아릴이고;
R2는 -R6-R7, C?, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3는 C1-C3알콕시카보닐, 및 C?을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬이고;
R7은 수소, 헤테로C3 - 7사이클로알킬, 또는 CF3을 포함하는 군으로부터 선택된다.
이러한 서브그룹의 일 구현예에서, B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 6원 고리를 형성하되, 5 내지 6원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된다.
화합물의 특정 그룹은 R1의 헤테로아릴이 4,4-이치환-1,4-디하이드로피리미딘에 부착된 탄소에 이웃한 질소 원자를 포함하는 (예컨대, R1은 2-피리디닐 또는 2-티아졸릴임) 식(Ia)의 화합물이다.
화합물의 다른 특정 그룹은 R6-R7이 메틸을 나타내는 식(Ia)의 화합물이다.
식(Ia)의 화합물의 관심있는 서브그룹은 다음의 제한들 중 임의의 조합이 적용되는 식(Ia)의 화합물 또는 이의 서브그룹이다:
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로는 하나 이상의 CH3 또는 플루오로 치환기로 치환된 5 또는 6원 고리를 형성한다;
R1은 피리디닐 또는 티아졸릴으로부터 선택된다;
R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택된다;
R3은 C1- 또는 C2-알킬옥시카보닐, 바람직하게는 C1-알킬옥시카보닐이다;
R6은 CH2이다;
R7은 수소, 모포리닐 또는 피페리디닐로부터 선택된다;
R4 및 R5는 H 및 플루오로의 군으로부터 독립적으로 선택된다.
가장 바람직한 것은 표1에 도시된 바와 같은 화합물들이다.
추가의 일 양태에서, 본 발명은 치료적 또는 예방적 유효량으로 본원에 명시된 바와 같은 식(I)의 화합물(R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함함) 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 이러한 맥락에서 예방적 유효량은 감염될 위험이 있는 대상체에서 HBV 감염을 예방하는데 충분한 양이다. 본 맥락에서 치료적 유효량은 감염된 대상체에서 HBV 감염을 안정화하거나 HBV 감염을 낮추거나 HBV 감염을 근절하기에 충분한 양이다. 추가의 일 양태에서, 본 발명은 본원에 명시된 바와 같은 약학적 조성물을 제조하는 방법에 관한 것으로, 약학적으로 허용가능한 담체를 치료적 또는 예방적 유효량의, 본원에 명시된 바와 같은, 식(I)의 화합물(R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함함)과 직접적으로 혼합하는 단계를 포함한다.
따라서, R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 본 발명의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹은 투여 목적에 따라 다양한 약학적 형태로 제형화될 수 있다. 적절한 조성물로서, 대개 전신 투여 약물에 사용되는 모든 조성물이 인용될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물을 제조하기 위해, 선택적으로는 부가 염 형태인, 유효량의 특정 화합물이 활성 성분으로서 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 직접적인 혼화물로 조합되며, 담체는 투여하기를 원하는 제제의 형태에 따라 매우 다양한 형태를 취할 수 있다. 이러한 약학적 조성물은, 특히, 경구, 직장, 경피, 또는 비경구 주사에 의한 투여에 적합한 단일 투여 형태인 것이 바람직하다. 예를 들어, 경구 투여 형태인 조성물 제조에서, 임의의 통상적인 약학적 매체, 예를 들어, 현탁액, 시럽, 엘릭서, 에멀젼 및 용액과 같은 경구 액체 제제의 경우 물, 글리콜, 오일, 알코올 등; 또는 분말, 알약, 캡슐, 및 정제의 경우 녹말, 당, 카올린, 윤활제, 결합제, 붕해제 등과 같은 고체 담체가 사용될 수 있다. 투여의 용이성 때문에, 고체 약학적 담체가 사용되는 경우 정제 및 캡슐은 가장 유리한 경구 투여 단위 형태를 나타낸다. 비경구 조성물의 경우, 담체는 대개 적어도 큰 부분에서 멸균수를 포함하지만, 예를 들어, 용해도를 보조하기 위한 다른 성분들도 포함될 수 있다. 예를 들어, 담체가 식염수, 글루코스 용액 또는 식염수 및 글루코스 용액의 혼합물을 포함하는 주사가능한 용액이 제조될 수 있다. 적절한 액체 담체, 현탁제 등이 사용될 수 있는 주사가능한 현탁액이 또한 제조될 수 있다. 또한, 사용 직전에 액체 형태 제제로 전환되도록 의도된 고체 형태 제제도 포함된다. 경피 투여에 적합한 조성물에서, 담체는 선택적으로 적은 비율의 임의의 성질의 적합한 첨가제와 조합되는 투과 증진제 및/또는 적합한 습윤제를 선택적으로 포함하며, 첨가제는 피부에 유의하게 해로운 효과를 도입하지 않는다. 본 발명의 조성물은 또한 임의의 당해 분야에 공지된 전달 시스템을 사용하는 용액, 현탁액 또는 건조 분말의 형태로 경구 흡입 또는 통기를 통하여 투여될 수 있다.
투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해서는, 전술된 약학적 조성물을 단위 투여 형태로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 단위 투여 형태는 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 구분되는 단위를 지칭하며, 각각의 단위는 요구되는 약학적 담체와 함께 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 소정량의 활성 성분을 함유한다. 이러한 단위 투여 형태의 예는 정제(분할선이 있는 정제(scored tablet) 또는 코팅된 정제를 포함함), 캡슐, 알약, 좌제, 분말 패킷, 웨이퍼(wafer), 주사가능한 용액 또는 현탁액 등, 및 이의 분리되는 복합들이다.
R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식 I의 화합물은 HBV 복제 사이클의 저해제로서의 활성이 있고, HBV 감염 또는 HBV와 연관된 질환의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 후자는 진행성 간 섬유증, 경화로 이어지는 염증 및 괴사, 말기 간 질환 및 간세포 암종을 포함한다.
그들의 항바이러스 성질, 특히 항-HBV 성질로 인해, R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식 I의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹은 HBV 복제 사이클의 저해, 특히 HBV에 감염된 온혈 동물, 특히 인간의 치료 및 HBV 감염의 예방에 유용하다. 또한 본 발명은 HBV에 의해 감염되거나 HBV에 의해 감염될 위험이 있는 온혈 동물, 특히 인간을 치료하는 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식 I의 화합물의 치료적 유효량을 투여하는 단계를 포함한다.
본원에 명시된 바와 같은, R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식 I의 화합물은, 따라서, 약제, 특히 HBV 감염을 치료하거나 예방하기 위한 약제로서 사용될 수 있다. 약제로서의 상기 용도 또는 치료 방법은 HBV 감염된 대상체 또는 HBV에 감염되기 쉬운 대상체로의 HBV 감염과 연관된 병태를 제거하기 위한 유효량 또는 HBV 감염을 예방하기 위한 유효량의 전신적 투여를 포함한다.
본 발명은 또한 HBV 감염의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서의 본 화합물의 용도에 관한 것이다.
일반적으로, 항바이러스제의 유효한 일일 양은 약 0.01 내지 약 50 mg/kg, 또는 약 0.01 내지 약 30 mg/kg 체중일 수 있는 것으로 고려된다. 요구되는 용량을 하루에 걸쳐 적절한 간격으로 2, 3, 4회 이상의 서브용량으로 투여하는 것이 적절할 수 있다. 상기 서브 용량은, 예를 들어 단위 투여 형태 당 약 1 내지 약 500 mg, 또는 약 1 내지 약 300 mg, 또는 약 1 내지 약 100 mg, 또는 약 2 내지 약 50 mg의 활성 성분을 함유하는 단위 투여 형태로 제형화될 수 있다.
본 발명은 또한 본원에 명시된 바와 같은 R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식(I)의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹과 다른 항 HBV 제제와의 조합에 관한 것이다. "조합"이라는 용어는 HBV 감염의 치료에서 동시에, 별개로 또는 순차적으로 사용하기 위한 조합된 제제로서, (a) 위에 명시된 바와 같이, R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식(I)의 화합물 및 (b) HBV 감염을 치료할 수 있는 적어도 하나의 다른 화합물(본원에서 항 HBV 제제로 명명됨)을 함유하는 생성물 또는 키트에 관련된 것일 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명은 R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식(I)의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹과 적어도 하나의 항 HBV 제제와의 조합에 관한 것이다. 특정 구현예에서, 본 발명은 R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식(I)의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹과 적어도 2종의 항 HBV 제제와의 조합에 관한 것이다. 특정 구현예에서, 본 발명은 R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식(I)의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹과 적어도 3종의 항 HBV 제제와의 조합에 관한 것이다. 특정 구현예에서, 본 발명은 R1이 S-메틸인 식(I)의 부가 화합물을 포함하는 식(I)의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹과 적어도 4종의 항 HBV 제제와의 조합에 관한 것이다.
인터페론-α(IFN-α), 페길화된 인터페론-α 3TC, 아데포비르 또는 이의 조합과 같은 미리 공지된 항 HBV 제제와 식(I)의 화합물 또는 이의 임의의 서브그룹의 조합은 조합 치료요법에서 약제로서 사용될 수 있다.
추가의 일 양태에서, 본 발명은 식 V에 따른 화합물에 관한 것으로,
Figure 112014070558363-pct00010
여기서, R1, R3, R4, 및 R5는 식 I 및 Ia에 대해 위에서 정의된 바와 같다.
또한, 본 발명은 식 I에 따른 화합물의 합성에서 식 V의 화합물의 용도에 관한 것이다. 일반적인 합성이 하기의 도식 1에 나타나있다. 적합한 반응 조건의 예시는 일반적인 합성법 부분 및 더 자세하게는 실험 섹션에 나타나 있다.
식(V)의 화합물의 관심있는 서브그룹은 다음의 식(V)의 화합물로서:
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5- 또는 6-원 고리를 형성하되, 5- 또는 6-원 고리는 선택적으로 C1-C3 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R1은 선택적으로 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 헤테로아릴이고;
R2는 -R6-R7, C?, 및 CF3를 포함하는 군으로부터 선택되고;
R3는 C1-C3알콕시카보닐, 및 C≡N을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R4 및 R5는 H 및 할로겐을 포함하는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 선택적으로 플루오로로 치환된 C1-C3 알킬이고;
R7은 수소, 헤테로C3-7사이클로알킬, 또는 CF3을 포함하는 군으로부터 선택된다.
화합물의 특정 그룹은, R1의 헤테로아릴이 4,4-이치환-1,4-디하이드로피리미딘에 부착된 탄소에 이웃한 질소 원자를 포함하는 (예컨대, R1은 2-피리디닐 또는 2-티아졸릴임) 식(V)의 화합물이다.
식(V)의 화합물의 관심있는 서브그룹은 다음의 제한들 중 임의의 조합이 적용되는 식(V)의 화합물 또는 이의 서브그룹이다:
B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 선택적으로는 하나 이상의 CH3 치환기로 치환된 5- 또는 6-원 고리를 형성한다;
R1은 피리디닐 또는 티아졸릴로부터 선택된다;
R3은 C1- 또는 C2-알킬옥시카보닐, 바람직하게는 C1-알킬옥시시카보닐이다;
R6은 CH2이다;
R7은 수소, 모포리닐 또는 피페리디닐로부터 선택된다;
R4 및 R5는 H 및 플루오로의 군으로부터 독립적으로 선택된다.
일반적인 합성법
식 I의 화합물의 가능한 합성은 도식 1에 기술되어 있다.
일반식 II의 화합물은, 가능하게는 염기(예를 들어, Na2CO3, KOtBu 또는 NaHCO3)의 존재 하에, 일반식 III의 아미딘 화합물과 반응하여 일반식 IV의 환형 화합물이 된다. 일반식 IV의 이러한 화합물은 일반식 V의 화합물로, 예를 들어, POCl3 중에서 가열함으로써 염소화된다. 그 후, 일반식 V의 화합물은, 예를 들어 R2가 -CH2-Het(여기서 het는 헤테로-C3 - 7사이클로알킬 또는 사이클로프로필임)과 동일한 경우는 스즈키형의 커플링; R2가 Me와 동일한 경우에는 스틸레형 커플링; R2가 CN과 동일하거나 실험 섹션에 예시된 바와 같은 경우에는 치환에 의해 일반식 I의 화합물로 변환된다. 대안적으로, 화합물 V 내 2개의 아미딘-질소 중 하나는, 예를 들어, Boc기로 보호될 수 있고, 예를 들어, 스즈키 또는 스틸레 커플링이 수행된 후, 질소의 탈보호가 후속되어 화합물 I이 된다.
도식 1:
Figure 112014070558363-pct00011
일반식 II의 화합물은 도식 2(a, b, c, d)에 기술된 바와 같이 합성될 수 있고, 사용되는 조건들은 일반식 II의 화합물 상의 치환기 Z, B 및 R3에 의존한다. R8은 C1-C3알킬, 바람직하게는 메틸 또는 에틸을 나타낸다.
일반식 IIa를 가지는 화합물을 합성하기 위해 가능한 방법이 도식 2a에 기술되어 있다. B가 C1-3알킬 또는 CF3와 같거나, B 및 Z가 연결되어 일반식 VI의 화합물이 인단-1-온 유도체인 경우, 레너트(Lehnnert) 조건(예를 들어 Tetrahedron Letters No.34, pp. 4723-4724, 1970에 기술된 TiCl4/피리딘, 또는 이의 변형)이 VI 및 VII의 노베나겔(knoevenagel) 축합을 위해 사용될 수 있다. 대안적으로, B가 C1 -3알킬과 동일한 경우, 일반식 IIb의 화합물은, 문헌(Journal of Organic Chemistry 2004, 69, 20, 6920-6922)에 기술된 바와 같이, 일반식 IX의 보론산(또는 다른 보론 유도체)과 일반식 VIII 염화 비닐(문헌에 기술된 바와 같이 Organic Syntheses, Coll. Vol. 8, p.247 (1993); Vol. 66, p.173 (1988)과 유사한 조건으로 제조됨)의 스즈키형 반응을 통하여 도식 2b에 기술된 바와 같이 합성될 수 있다. 다른 대안은 도식 2c에 기술되며, 문헌(Tetrahedron 2005, 61, 32, 7807-7813)에 기재된 바와 같이 InCl3 존재 하의 일반식 X의 알킨과 일반식 VII의 말로네이트의 반응으로 일반식 IIc의 화합물이 된다.
도식 2a
Figure 112014070558363-pct00012
도식 2b
Figure 112014070558363-pct00013
도식 2c
Figure 112014070558363-pct00014
일반식 XI의 알킬 2-시아노아세테이트 및 일반식 VI의 화합물을 사용하여, 도식 2d에 기술된 바와 같이, 노베나겔 축합이 수행되는 경우, 예를 들어, 벤젠 중 β-알라닌/아세트산이 일반식 IId의 부가물을 형성하기 위한 조건으로 사용될 수 있다.
도식 2d
Figure 112014070558363-pct00015
일반식 II의 화합물의 합성을 위한 추가적인 예시는 문헌(Jones, G. 2011. The Knoevenagel Condensation. Organic Reactions. 204-599)에서 찾을 수 있다. 일반식 IId의 화합물이, 가능하게는 예를 들어 KOAc, NaHCO3 또는 Na2CO3와 같은 염기 존재 하에, 일반식 III의 아미딘과 반응하는 경우, 식 IVa의 화합물이 도식 3에 기술된 바와 같이 형성될 수 있다. 이러한 화합물을 도식 1에 기술된 바와 같은 반응 순서로 직접적으로 사용하는 것 외에, 화합물은 또한 니트릴 알코올분해를 수행함으로써 일반식 IVb의 에스테르 유도체로 전환될 수도 있는데, 예를 들어, MeOH 또는 EtOH 중 염산을 사용한 다음에 물과 반응시킴으로써 도식 3에 기술된 바와 같은 화합물 IVb가 될 수 있다.
도식 3
Figure 112014070558363-pct00016
도식 4
Figure 112014070558363-pct00017
대안적으로, 일반식 XII의 화합물은, 예를 들어, POCl3 중에서 가열함으로써 도식 4에 기술된 바와 같은 일반식 XIII의 화합물로 변환될 수 있다. 식 XIII의 화합물은, 그 후, 전이 금속 촉매 반응, 예를 들어, R1Sn(Bu)3 및 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)과 같은 촉매를 사용하는 스틸레형 커플링에 의해 일반식 I의 화합물로 변환될 수 있다. 이러한 연속적인 사건들 동안, 관능기가 사용되는 조건과 융화되지 않는 경우, 보호기 전략, 예를 들어 NH 관능기 상의 p-메톡시벤질 보호가 사용될 수 있다.
도식 5
Figure 112014070558363-pct00018
식 XIIa의 화합물은 문헌(Synthetic Communications, 41(19), 2899-2904; 2011)에 기술된 조건에 따라, 도식 5에 기술된 바와 같이 합성될 수 있다. R9는 R8 또는 H이다.
일반식 Ib의 화합물의 합성의 예는 도식 6에 도시되어 있다. 화합물 XIV는, 예를 들어 50˚C에서 2-메틸-2-티오슈도우레아의 헤미설페이트 및 DMF 중의 중탄산 나트륨으로 처리함으로써 2-메틸-2-티오슈도우레아와 축합되어 화합물 XV의 형성이 초래된다. XV는 일반 구조식 Ib를 가지는 화합물로, 예를 들어, 전이 금속으로 촉진되는 C-C 결합 형성, 예를 들어 140˚C에서 마이크로파 조사에 의해 팔라듐(II) 아세테이트/부틸디-1-아다만틸포스핀 및 구리(I)브로마이드-디메틸 설파이드 존재 하에 R1-Sn(Bu)3과의 커플링을 사용함으로써 변환된다.
도식 6
Figure 112014070558363-pct00019
일반식 XIV을 가지는 화합물의 합성의 예는 도식 7a 및 7b에 기술되어 있다. B가 -CH3와 같은 경우에, InCl3는 알킨 X 및 C1-C3알킬-3-옥소부타노에이트의 커플링을 촉진하고 일반식 XIVc의 부가물이 초래된다.
도식 7a
Figure 112014070558363-pct00020
대안적으로, 레너트 조건(TiCl4/피리딘 또는 이의 변형)하에 화합물 VI 및 C1-C3알킬-3-옥소부타노에이트의 축합은 일반식 XIV의 화합물을 초래한다. VI로 나타나는 적합한 화합물의 예는, 이 경우, 2,2-디플루오로-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-온 유도체이다.
도식 7b
Figure 112014070558363-pct00021
실험 파트 :
LCMS 방법
방법 A: LC 측정은 Acquity UPLC(Waters) 시스템을 사용하여 수행하였다. 역상 초고성능 액체 크로마토그래피(Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC)를 다리결합된 에틸실록산/실리카 혼성(BEH) C18 컬럼(1.7 μm, 2.1 x 50 mm; Waters Acquity) 상에서 0.8 mL/min의 유속으로 수행하였다. 2개의 이동상(H2O/아세토니트릴 95/5 중 10 mM 암모늄 아세테이트; 이동상 B: 아세토니트릴)을 사용하여 95% A 및 5% B 내지 5% A 및 95% B의 구배 조건을 1.3분간 운용하고 0.3분간 홀딩하였다. 0.5 μl의 주입 부피를 사용하였다. 양성 이온화 모드를 위한 콘 전압은 10 V였다.
방법 B 이동상 A: H2O(0.1% TFA; B: CH3CN(0.05% TFA) 정지 시간: 2분; 구배 시간(분)[%A/%B] 0.01[90/10] 내지 0.9[20/80] 내지 1.5[20/80] 내지 1.51 [90/10]; 유동: 1.2 mL/min; 컬럼 온도: 50℃, Xtimate C18 2.1*30분, 3 μm
방법 C: 이동상 A: H2O(0.1% TFA); B: CH3CN(0.05% TFA) 정지 시간: 10 분; 구배 시간(분) [%A/%B] 0.0[90/10] 내지 0.8[90/10] 내지 4.5[20/80] 내지 7.5[20/80]; 9.5[90/10] 유동: 0.8 mL/min; 컬럼 온도: 50℃, Agilent TC-C18, 2.1*50 mm, 5 μm
방법 D: LC 측정을 Acquity UPLC(Waters) 시스템을 사용하여 수행하였다. 역상 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC)를 다리결합된 에틸실록산/실리카 혼성(BEH) C18 컬럼(1.7μm, 2.1 x 50 mm; Waters Acquity) 상에서 0.8 mL/min의 유속으로 수행하였다. 2개의 이동상(이동상 A: H2O/아세토니트릴 95/5 중 10 mM 암모늄 아세테이트; 이동상 B: 아세토니트릴)을 사용하여 95% A 및 5% B 내지 5% A 및 95% B의 구배 조건을 1.3분간 운용하고 0.2분간 홀딩하였다. 0.5 μl의 주입 부피를 사용하였다. 양성 이온화 모드를 위한 콘 전압은 10 V였다.
방법 E: LC 측정은 Acquity UPLC(Waters) 시스템을 사용하여 수행하였다. 역상 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC)를 다리결합된 에틸실록산/실리카 혼성(BEH) C18 컬럼(1.7 μm, 2.1 x 50 mm; Waters Acquity) 상에서 0.8 mL/min의 유속으로 수행하였다. 2개의 이동상(이동상 A: H2O/아세토니트릴 95/5 중 10 mM 암모늄 아세테이트; 이동상 B: 아세토니트릴)을 사용하여 95% A 및 5% B 내지 5% A 및 95% B의 구배 조건을 1.3분간 운용하고 0.3분간 홀딩하였다. 0.5 μl의 주입 부피를 사용하였다.
양성 이온화 모드를 위한 콘 전압은 10 V였다.
방법 F: HPLC 측정은 Alliance HT 2790(Waters) 시스템을 사용하여 수행하였다. 역상 HPLC를 Xterra MS C18 컬럼(3.5 μm, 4.6 x 100 mm)상에서 1.6 mL/min의 유속으로 수행하였다. 3개의 이동상(이동상 A: 95% 25 mM 암모늄아세테이트 + 5% 아세토니트릴; 이동상 B: 아세토니트릴; 이동상 C: 메탄올)을 사용하여 6.5분간 100% A 내지 1% A, 49% B 및 50% C 내지 1 분간 1% A 및 99% B 구배조건으로 운영하고, 이러한 조건을 1분간 홀딩하고 100% A로 1.5분 간 재평형화하였다. 10 μl의 주입 부피를 사용하였다. 양성 이온화 모드용 콘 전압은 10 V였고, 음성 이온화 모드용은 20 V였다.
방법 G: Agilent TC-C18, 50×2.1mm, 5μm, 이동상 A: H2O(0.1% TFA; B: CH3CN(0.05% TFA) 정지 시간: 10 분; 포스트 시간: 0.5 분; 구배 시간(분) [%A/%B] 0[100/0] 내지 1[100/0] 내지 5[40/60] 내지 7.5[15/85] 내지 9.5[100/0]; 유동: 0.8 mL/min; 컬럼 온도: 50˚C
방법 H: YMC-PACK ODS-AQ, 50×2.0mm, 5μm, 이동상 A: H2O(0.1% TFA; B: CH3CN(0.05% TFA) 정지 시간: 10 분; 구배 시간(분) [%A/%B] 0.0[90/10] 내지 0.8[90/10] 내지 4.5[20/80] 내지 7.5[20/80] 내지 8.0[90/10]; 유동: 0.8 mL/min; 컬럼 온도: 50˚C
방법 I: YMC-PACK ODS-AQ, 50×2.0mm, 5μm, 이동상 A: H2O(0.1%TFA; B: CH3CN(0.05% TFA) 정지 시간: 10 min; 구배 시간(min) [%A/%B] 0.0[100/0] 내지 1[100/0] 내지 5[40/60] 내지 7.5[40/60] 내지 8.0[100/0]; 유동: 0.8 mL/min; 컬럼 온도: 50˚C
방법 J: XBridge ShieldRP18, 50*2.1mm, 5μm; 이동상: A: H2O(0.05% NH3.H2O); B: CH3CN; 정지 시간: 10분; 구배 시간(분) [%A/%B] 0.0[100/0] 내지 1[100/0] 내지 5[40/60] 내지 7.5[40/60] 내지 8.0[100/0]; 유동: 0.8 mL/min; 컬럼 온도: 40˚C
방법 K: 바이너리 펌프, 시료 오가나이저, (55℃에 설정된) 컬럼 히터, 다이오드 배열 검출기(DAD)를 포함하는 Acquity UPLC(Waters) 시스템을 사용하여 LC 측정을 수행하였다. 역상 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC)를 Acquity UPLC HSS T3 컬럼(1.8 μm, 2.1 x 100 mm; Waters Acquity) 상에서 0.8 mL/min의 유속으로 수행하였다. 2개의 이동상(이동상 A: H2O/아세토니트릴 95/5 중 10 mM 암모늄 아세테이트; 이동상 B: 아세토니트릴)을 사용하여 2.5분간 95% A 및 5% B 로부터 0% A 및 100% B까지, 이어서 0.5분의 5% A 및 95% B까지의 구배조건으로 운용하였다. 1 μl의 주입 부피를 사용하였다. 양성 이온화 모드용 콘 전압은 30 V였고, 음성 이온화 모드용은 30 V였다.
방법 L: 바이너리 펌프, 시료 오가나이저, (55℃에 설정된) 컬럼 히터, 다이오드 배열 검출기(DAD)를 포함하는 Acquity UPLC(Waters) 시스템을 사용하여 LC 측정을 수행하였다. 역상 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC)를 Acquity UPLC HSS T3 컬럼(1.8 μm, 2.1 x 100 mm; Waters Acquity) 상에서 0.8 mL/min의 유속으로 수행하였다. 2개의 이동상(이동상 A: H2O/아세토니트릴 95/5 중 10 mM 암모늄 아세테이트; 이동상 B: 아세토니트릴)을 사용하여 2.1분간 100% A 및 0% B로부터 5% A 및 95% B까지, 이어서 0.9분의 0% A 및 100% B까지, 그리고 0.5분의 5% A 및 95% B까지의 구배조건으로 운용하였다. 1 μl의 주입 부피를 사용하였다. 양성 이온화 모드용 콘 전압은 30 V였고, 음성 이온화 모드용은 30 V였다.
약어/용어:
NMP: 1-메틸-2-피롤리디논
DME: 1,2-디메톡시에탄
POPd: [(t-Bu)2P(OH)]2PdCl2
Isolute ®HMN: 규조토의 변형된 형태를 함유하는 일회용 액체-액체 추출 컬럼
PEPPSI(TM)-IPr: [1,3-비스(2,6-디이소프로필페닐)이미다졸-2-일리덴](3-클로로-피리딜)팔라듐(II)디클로라이드
Figure 112014070558363-pct00022
압력튜브를 자일렌(30 mL), 디에틸 말로네이트(13.3 g, 83.3 mmol), 인듐 클로라이드(368.2 mg, 1.66 mmol) 및 4-플루오로페닐아세틸렌(15 g, 125 mmol)으로 채웠다. 튜브를 질소로 충진하고, 폐쇄하여, 135˚C의 유조(oil bath)에서 17시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 상온으로 냉각되었고 용액은 아래에서 다음과 같이 사용되었다. 압력튜브를 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(14.2 g, 90.3 mmol) 및 1-메틸-2-피롤리디논(NMP, 100 mL)으로 채웠다. 질소 하에 칼륨 tert-부톡사이드(18.42g, 164 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30분간 교반하였다. 그 후, 앞서 수득된 자일렌 중 용액을 첨가하였고, 압력튜브를 80˚C 유조에서 5시간 동안 가열하고 교반하였다.
반응 혼합물을 얼음조에서 냉각하고, NMP만 남을 때까지 진공에서 농축하였다. 혼합물을 얼음물에 투입하고, 30분간 교반하였다. 디이소프로필에테르(3 x 100 mL)를 사용한 추출 후. 조합된 추출물을 브린으로 세척하고, 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하여 갈색 오일을 산출하였다. 이 오일을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50:50 내지 100:0의 CH2Cl2-헵탄 구배)로 정제하였다. 원하는 분획들을 수집하고 진공에서 농축하여, 방치(standing) 시 응고되는 황색의 오일로서 화합물 1을 산출하였다(21.3g).
방법 A; Rt: 1.03 및 1.07 min. m/z: 356.3 (M+H)+ 정확한 질량: 355.1
Figure 112014070558363-pct00023
화합물 1(420 mg, 1.18 mmol), 메탄올(15 mL) 및 칼륨 tert-부톡사이드(199 mg, 1.77 mmol)를 80˚C 유조에서 17시간 동안 교반하였다.
얻어진 반응 혼합물을 물로 희석하고 CH2Cl2(3 x 100 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하여 메틸 에스테르(주) 및 에틸 에스테르(부)의 혼합물로서 잔류물을 산출하였다. 혼합물 및 옥시 염화인(2 mL, 21.5 mmol)을 1시간 동안 환류하였다. 혼합물을 진공에서 농축하였다. 얻어진 잔류물을 CH2Cl2 내로 취하고, NaHCO3(sat/aq)로 세척하였다. (MgSO4)를 사용하여 유기층을 건조하고, 진공에서 농축하여 메틸 에스테르(주) 및 에틸 에스테르(부)의 혼합물을 산출하였다. 이렇게 수득된 마이크로파 바이알 내의 잔류물에, 탄산 세슘(4.08 g, 12.51 mmol), 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(0.86 g, 4.17 mmol), 물(증류됨 1.1 mL, 62.5 mmol) 및 DME(11 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 5분간 질소 퍼지하였다. 그 다음, 팔라듐(II) 아세테이트(47 mg, 0.21 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(120 mg, 0.33 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 추가 2분 간 질소로 퍼지하였다. 바이알을 캡핑하고 마이크로파 조사 하에 140˚C까지 30분간 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물은 물-디클로로메탄(50 mL/50 mL)으로 취해졌다. 수층을 디클로로메탄(2 x 50 mL)으로 더 추출하였다. 조합된 추출물을 건조하고(MgSO4), 진공에서 농축하였다. 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(10:90 내지 50:50 에틸아세테이트-헵탄 구배)로 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 투명한 오일로서 화합물 2를 산출하였고, 이는 분취 HPLC(preparative HPLC(Uptisphere C18 ODB - 10μm, 200 g, 5cm))에 의해 더 정제되었다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, CH3CN). 관련있는 분획을 진공에서 농축하고, MeOH(2 x 10 mL)를 사용하여 50˚C에서 공동 증발시키고, 55˚C 진공 오븐에서 밤새 건조하여 백색 분말로서 화합물 2(170 mg)를 얻었다. 방법 A; Rt: 1.16 분. m/z: 425.5 (M+H)+ 정확한 질량: 424.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 1.91 (s, 3 H), 2.52 - 2.66 (m, 4 H), 3.48 (s, 3 H), 3.66 (d, J=16.3 Hz, 1 H), 3.73 (d, J=16.3 Hz, 1 H), 3.82 (t, J=4.8 Hz, 4 H), 6.88 - 7.04 (m, 2 H), 7.37 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.40 - 7.49 (m, 2 H), 7.74 (td, J=7.5, 1.8 Hz, 1 H), 8.21 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.50 - 8.69 (m, 1 H), 10.02 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00024
조건A : 플라스크를 화합물 1(4 g, 11.0 mmol) 및 옥시염화인(10.3 mL, 110.3 mmol)으로 채웠다. 반응 혼합물을 120˚C 유조에서 30분간 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄(100 mL)에 용해하고 포화된 NaHCO3(50 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고 물로 세척하고, 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하였다. 미정제물을 실리카 겔 크로마토그래피(등용매 CH2Cl2)로 정제하여 투명한 오일로서 화합물 3을 산출하였고, 오일은 방치 후 고체가 되었다(2.73 g). 방법 A; Rt: 1.18 min. m/z: 374.3 (M+H)+ 정확한 질량: 373.1
조건 B : 50 mL 둥근 바닥 플라스크에 교반용 막대, 화합물 1(10.0 g, 28.1 mmol)을 로딩하고, 옥시 염화인(26.2 mL, 281 mmol)과 혼합하였다. 혼합물은 질소 분위기 하에 30분간 환류하며 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 -20˚C에 40 시간 동안 저장하고, 디클로로메탄(200 mL)에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 100 mL)으로 세척하고, 건조하고(MgSO4), 진공에서 건조상태까지 증발시켜 갈색 오일로서 화합물 3(9.9 g)을 얻었고, 이는 다음의 단계들에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00025
라세미 화합물 4의 거울상이성질체들: 화합물 4a 및 화합물 4b
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(665 mg, 3.05 mmol), 화합물 3(조건B를 통해 수득됨, 600 mg, 1.53 mmol), 탄산 세슘(2.98 g, 9.15 mmol), 증류수(826 μl, 45.7 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(7.92 mL, 76.2 mmol)을 로딩하였고, 10분 동안 질소 기체를 버블링하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(34.5 mg, 0.152 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(87.5 mg, 0.244 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 140˚C 마이크로파 오븐 내에서 10분 간 교반하였다. 1,2-디메톡시에탄을 디캔팅하고 수층을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층들을 조합하고 건조상태까지 증발시킨 후 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트: 헵탄 30 내지 100%)를 사용하여 정제하여, 라세미 화합물 4(683 mg)를 얻었으며, 화합물 4는 분취 SFC 분리(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)를 사용하여 더 정제되었다. 이동상(0.2% 이소프로필 아민을 가지는 에탄올, 이산화탄소). 원하는 분획들을 수집하고, 진공에서 용매를 제거하고 수득된 잔류물을 메탄올 내에 용해시키고 다시 증발시켰다. 라세미 화합물 4의 거울상이성질체인 화합물4a(243 mg) 및 화합물 4b(238 mg)가 얻어졌다. 방법 E; Rt: 1.21 min. m/z: 439.3 (M+H)+ 정확한 질량: 438.2. 1H NMR (600 MHz, 클로로포름-d) ppm 0.99 (t, J=7.1 Hz, 3 H), 1.90 (s, 3 H), 2.52 - 2.66 (m, 4 H), 3.67 (d, J=16.4 Hz, 1 H), 3.75 (d, J=16.3 Hz, 1 H), 3.81 (t, J=4.6 Hz, 4 H), 3.86 - 3.97 (m, 2 H), 6.96 (t, J=8.8 Hz, 2 H), 7.36 (ddd, J=7.4, 4.9, 1.0 Hz, 1 H), 7.43 (dd, J=8.8, 5.4 Hz, 2 H), 7.72 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 8.18 (d, J=7.9 Hz, 1 H), 8.59 (ddd, J=4.8, 1.6, 0.9 Hz, 1 H), 10.00 (s, 1 H); 컬럼: OJ-H 500 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5 % EtOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 컬럼 온도: 30℃; Rt, 화합물 4a: 3.40 min; 화합물 4b: 4.43 min.
Figure 112014070558363-pct00026
화합물 3(조건 A를 통하여 수득됨, 0.5 g, 1.34 mmol), 1,4-디아자바이사이클로[2.2.2]-옥탄(0.23 g, 2.01 mmol), 테트라부틸암모늄 시아나이드(0.54 g, 2.01 mmol) 및 아세토니트릴(25 mL)을 17시간 동안 압력 튜브 내에서 교반하고 100˚C까지 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고 수득된 잔류물은 디클로로메탄/물(50 mL/50 mL) 내로 취해졌다. 수층을 디클로로메탄(2 x 50 mL)으로 추출하고, 조합된 추출물들은 브린(50 mL)으로 세척하고 건조(MgSO4)하고 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50:50 내지 100:0의 CH2Cl2-헵탄 구배 용리)로 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 황색의 오일을 얻었다. 오일을 디이소프로필에테르에 용해하고 형성된 침전물을 유리 필터 상에서 여과하고 진공 오븐에서 55˚C로 밤새 건조하여, 유백색의 고체로서 화합물 5(80 mg)를 얻었다. 방법 D; Rt: 1.10 min. m/z: 365.0 (M+H)+ 정확한 질량: 364.1.
Figure 112014070558363-pct00027
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(144 mg, 1.18 mmol), 화합물 3(조건B를 통해 수득됨, 170 mg, 0.455 mmol), 탄산 세슘(889 mg, 2.73 mmol), 증류수(200 μl, 11.1 mmol) 및 톨루엔(2 mL, 18.8 mmol)을 로딩하였고, 10분에 걸쳐 질소 기체를 버블링을 하였다. 질소 분위기 하에서, 팔라듐(II) 아세테이트(20.6 mg, 0.0910 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(52.2 mg, 0.146 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 오븐에서 질소 분위기 하에 100˚C로 30분간 교반하고 상온에 도달되도록 하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 오븐에서 질소 분위기 하에 30분간 125˚C에서 교반하고 상온에 도달되도록 하였다. 팔라듐(II) 아세테이트(20.6 mg, 0.0910 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(52.2 mg, 0.146 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 마이크로파 오븐에서 125˚C로 1시간 동안 교반하였다. 질소 분위기 하에, 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(144 mg, 1.18 mmol) 및 탄산 세슘(889 mg, 2.73 mmol)을 첨가하였다.
반응 혼합물을 질소 분위기 하 마이크로파 오븐 내에서 10시간 동안 125˚C에서 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(100 mL)에 희석하고 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 20 mL) 및 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 아이솔루트(isolute) HM-N 카트리지로 건조하고, 건조상태까지 농축하여 갈색의 점성 잔류물을 제공하였고, 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리; 메탄올: 디클로로메탄 0 내지 7%)를 사용하여 정제되어 진한 황색의 점성 분말을 제공하였고, 분말을 디에틸 에테르(2 mL)에 용해하고 페트롤륨 에테르(10 mL)를 첨가하였다. 2 mL의 용매를 유지하도록 용매를 농축하여(rotavap), 진한 주황색 고체 침전물을 얻었다. 용매를 디캔팅하였고 고체를 페트롤륨 에테르로 세척하였다. 조합된 용액들은 건조상태까지 농축하였고 분말을 50˚C 진공 오븐에서 밤새 건조하여 황색 분말로서 화합물 6(57 mg)을 얻었다. 방법 A; Rt: 1.15 min. m/z: 354.6 (M+H)+ 정확한 질량: 353.2.
Figure 112014070558363-pct00028
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(피롤리딘-1-일)-메틸트리플루오로보레이트(204 mg, 1.07 mmol), 화합물 3(조건 A를 통해 수득됨, 200 mg, 0.535 mmol), 탄산 세슘(1.05 g, 3.21 mmol), 증류수(290 μl, 16.1 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(2.78 mL, 26.8 mmol)을 로딩하였고, 10분간 질소 기체를 버블링 하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(12.1 mg, 0.0535 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(30.7 mg, 0.0856 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 마이크로파 오븐에서 140˚C로 20분 간 교반하였다. 1,2-디메톡시에탄을 디캔팅하였고, 수층을 디클로로메탄으로 추출하고 유기층들을 조합하고 건조상태까지 증발시켰다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리; 에틸 아세테이트: 헵탄 10 내지 80%)를 사용하여 정제하여, 화합물 7(119 mg)을 얻었다. 방법 A; Rt: 1.01 min. m/z: 423.4 (M+H)+ 정확한 질량: 422.2.
Figure 112014070558363-pct00029
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(티오모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(227 mg, 1.02 mmol), 화합물 3(조건 B를 통해 수득됨, 200 mg, 0.508 mmol), 탄산 세슘(994 mg, 3.05 mmol), 증류수(275 μl, 15.2 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(2.64 mL, 25.4 mmol)을 로딩하였고, 10분 동안 질소 기체를 버블링 하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(11.5 mg, 0.0508 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(29.2 mg, 0.0813 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 140˚C 마이크로파 오븐 내에서 10분 간 교반하였다. 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였고, 유기층들을 조합하여 건조상태까지 증발시켰다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트: 헵탄 5 내지 70%)를 사용하여 정제하여, 원하는 분획들을 수집하고 진공에서 농축하고 50˚C 진공 오븐 내에서 밤새 건조하여 화합물 8(172 mg)을 얻었다. 방법 A; Rt: 1.38 min. m/z: 423.4 (M+H)+ 정확한 질량: 422.2.
Figure 112014070558363-pct00030
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(티오모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(227 mg, 1.02 mmol), 화합물 3(조건 B를 통해 수득됨, 200 mg, 0.508 mmol), 탄산 세슘(994 mg, 3.05 mmol), 증류수(275 μl, 15.2 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(2.64 mL)을 로딩하였고, 10분 동안 걸쳐 질소 기체를 버블링을 하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(11.5 mg, 0.0508 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(29.2 mg, 0.0813 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 140˚C 마이크로파 오븐 내에서 10분 간 교반하였다. 생성물을 디클로로메탄으로 추출하고, 유기층들을 조합하여 건조상태까지 증발시키고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(1차; 에틸 아세테이트: 헵탄 5 내지 70%; 2차; 메탄올 중 암모니아(7N)/CH2Cl2 0 내지 5%)를 이용하여 2회 정제하여, 50˚C진공 오븐에서 밤새 건조한 후, 화합물 9(127 mg)를 얻었다. 방법 A; Rt: 1.33 min. m/z: 437.4 (M+H)+ 정확한 질량: 436.2.
Figure 112014070558363-pct00031
불화 칼륨(75 mg, 1.29 mmol) 및 요오드화 구리(i)(250 mg, 1.31 mmol)의 혼합물을 교반하고, 균일한 녹색의 혼합물이 수득될 때까지 진공에서 가열하였다. 반응을 상온으로 냉각하였고, 동일한 절차를 3회 수행하였다. 상온으로 냉각한 후, 질소 하에 N-메틸-피롤리돈(2.00 mL, 20.8 mmol) 및 트리메틸(트리플루오로메틸)실란(74.2 mg, 1.00 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50˚C에서 45분간 교반하였다. 혼합물을 상온으로 냉각하였고, 질소 하에 화합물 3(393 mg, 1.00 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50˚C에서 44 시간 동안 교반하고, 상온으로 냉각하고, 수용성 암모니아를 첨가하였다. 유기층은 분리되었다. 수층을 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 세척하였다. 조합된 유기층을 황산 나트륨으로 건조하였다. 용매는 진공에서 증발에 의해 제거되었다. 미정제 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트: 헵탄 5 내지 50%)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 수집하고 건조상태까지 농축하여 밝은 황색 오일로서 화합물 10(1.2 mg)(방법 A; Rt: 1.26 min. m/z: 408.5 (M+H)+ 정확한 질량: 407.1). 및 화합물 11(43 mg)(방법 A; Rt: 1.36 min. m/z: 458.5 (M+H)+ 정확한 질량: 457.1)을 얻었다.
Figure 112014070558363-pct00032
압력 튜브를 교반용 막대, 디메틸 말로네이트(4.03 g, 30.5 mmol), 1-클로로-2-에티닐벤젠(5.00 g, 36.6 mmol), 인듐(III) 클로라이드(162 mg, 0.731 mmol), 자일렌(15 mL)으로 채우고 질소로 충진하고 폐쇄하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 135˚C에서 17시간 동안 교반하고 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물에 인듐(III) 클로라이드(405 mg, 1,83 mmol)를 첨가하고 질소로 충진하고 폐쇄하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 130˚C에서 16시간 동안 교반하고 상온에 도달하도록 하고, 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: 헵탄 중 20 내지 80% 디클로로메탄)를 사용하여 정제하여 오일로서 화합물 12를 얻었다(1.26 g).
Figure 112014070558363-pct00033
피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(0.813 g, 5.16 mmol)에, 디메틸-포름아미드(22 mL, 281 mmol) 및 탄산 나트륨(0.994 g, 9.38 mmol)를 질소 분위기 하에서, 반응 혼합물을 5분간 교반하였다. 다음으로, 화합물 12(1.26 g, 4.69 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 60˚C에서 90 시간 동안 가열하고 교반하고, 음파처리하였고, 현탁액을 50 mL 둥근 바닥 플라스크로 가져와 68˚C에서 18시간 동안 교반하였고 상온이 되도록 하였다. 반응 혼합물을 얼음물 상에 투입하고, 30분간 교반하였다. 디이소프로필 에테르(3 x 50 mL)를 사용하여 추출하였다. 조합된 유기 추출물들을 건조(Na2SO4)하였고, 감압 하에 농축하여 점성의 오일을 제공하였고, 오일은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리, 헵탄 중 30 내지 100% 디클로로메탄)를 사용하여 정제되었다. 원하는 분획들을 수집하고 진공에서 농축하여 잔류물을 얻었다(356 mg). 잔류물(356 mg, 0.995 mmol)을 옥시염화인(1.61 mL, 22.4 mmol)에 용해하고 120˚C에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 40˚C에서 밤새 질소 유동을 사용하여 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액, 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜서 진한 갈색 점성 오일로서 잔류물(219 mg)이 얻어졌고, 오일은 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다. 10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일) 메틸트리플루오로보레이트(254 mg, 1.16 mmol), 앞에서 수득된 잔류물(219 mg), 증류수(315 μl, 17.5 mmol), 및 1,2-디메톡시-에탄(3 mL)을 로딩하였다. 질소 기체를 10분 동안 버블링하였다. 질소 분위기 하에, 탄산 세슘(1.14 g, 3.49 mmol) 팔라듐(II) 아세테이트(13.2 mg, 0.0582 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(33.4 mg, 0.0931 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 140˚C마이크로파 오븐 내에서 10분 간 교반하였다. 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였고, 유기층들을 조합하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: 헵탄 중 5 내지 100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 백색 분말로서 화합물 13을 얻었다(59 mg).
방법 A; Rt: 1.17 min. m/z: 441.5 (M+H)+ 정확한 질량: 440.2
Figure 112014070558363-pct00034
마이크로파 튜브 내 물(3 mL) 및 테트라하이드로-퓨란(16 mL) 중 디에틸-2 (1-클로로에틸리덴)말로네이트(3.00 g, 13.6 mmol), 3-클로로-4-플루오로페닐보론산(3.55 g, 20.4 mmol), 및 탄산 칼륨(5.64 g, 40.8 mmol)의 N2-퍼지된 교반 혼합물에 POPd(582 mg, 1.16 mmol)를 첨가하였고, 실리콘 격막으로 밀봉하였다. 반응 혼합물은 100˚C에서 30분 간 마이크로파 조사를 거쳤다. 반응 용기가 상온에 도달하도록 하고, 디클로로메탄(150 mL)으로 희석하고, 물, 탄산 나트륨 포화 수용액 및 물로 세척하고(3 x 40 mL), 건조하였고(Na2SO4), 용매는 제거되었다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: 헵탄 중 0 내지 15% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 화합물 14를 얻었다(1.89 g).
Figure 112014070558363-pct00035
밀봉된 압력 튜브에 질소 분위기 하에 교반용 막대, 화합물 14(939 mg, 2.98 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(470 mg, 2.98 mmol), 건조 N,N-디메틸포름아미드(23.1 mL, 298 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(670 mg, 5.97 mmol)를 로딩하였다. 반응 혼합물을 60˚C에서 45분 간 교반하여, 상온에 도달하도록 하고, 얼음물에 투입하였다. 에멀젼을 염산 수용액(1M)을 사용하여 중화(pH= 7)하고(pH 종이 검사) 디클로로메탄으로 추출하였다. 조합된 유기층들은 건조하였고(Na2SO4) 건조상태까지 농축하였다. N,N-디메틸포름아미드는 톨루엔을 사용하여 공비적으로 제거되어 담황색 오일이 제공되었고, 오일은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 10 내지 40% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제되어, 화합물 15(681 mg)를 얻었으며, 이는 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 1.15 및 1.17 min. m/z: 390.1 (M+H)+ 정확한 질량: 389.1
Figure 112014070558363-pct00036
폐쇄된 바이알 내에서 화합물 15(650 mg, 1.67 mmol)에 옥시염화인(2.14 mL, 23.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반하고 환류하에 30분 간 가열하고, 상온으로 냉각하고, 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고 중탄산 나트륨(3 x 10 mL)으로 세척하고 아이솔루트(isolute) HMN으로 건조하고 건조상태까지 농축하여, 황색 폼(foam)으로서 화합물 16(724 mg)을 얻었고, 이는 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 1.23 min. m/z: 408.1 (M+H)+ 정확한 질량: 407.1
Figure 112014070558363-pct00037
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨 메틸트리플루오로보레이트(389 mg, 3.18 mmol), 화합물 16(250 mg, 0.612 mmol), 탄산 세슘(2.39 g, 7.35 mmol), 증류수(500 μl, 27.7 mmol) 및 톨루엔(5 mL, 47.0 mmol)을 로딩하였고, 10분간 질소 기체를 버블링하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(27.7 mg, 0.122 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸-포스핀(70.3 mg, 0.196 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 125˚C마이크로파 오븐 내에서 10 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 통상적으로 120˚C에서 24시간 동안 추가로 가열하고, 상온으로 냉각되고 CH2Cl2(40 mL)에 희석하고 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL) 및 물(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 아이솔루트(isolute) HMN 카트리지 상에서 건조하고, 건조상태까지 농축하여 갈색의 점성 잔류물을 제공하였으며, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리, 디클로로메탄 중 0 내지 5% 메탄올)를 사용하여 정제하여, 화합물 17(94 mg)이 얻어졌다.
방법 A; Rt: 1.27 min. m/z: 388.3 (M+H)+ 정확한 질량: 387.1
Figure 112014070558363-pct00038
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(159 mg, 0.767 mmol), 화합물 16(222 mg, 0.511 mmol), 탄산 세슘(500 mg, 1.53 mmol), 물(417 μl, 23.1 mmol) 및 톨루엔(3 mL)을 로딩하였고, 질소로 5분 간 퍼지하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(11.6 mg, 0.051 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(29.3 mg, 0.082 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 115˚C에서 1시간 교반하였다. 질소 분위기 하에 추가의 팔라듐(II) 아세테이트(11.6 mg, 0.051 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(29.3 mg, 0.082 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 110˚C에서 9시간 교반한 다음, 상온으로 냉각되도록 하였다. 혼합물을 디클로로메탄(30 mL)에 희석하고 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL) 및 물(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 아이솔루트(isolute) HMN 카트리지로 건조하고, 건조상태까지 농축하여 갈색의 점성 잔류물을 제공하였고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 0 내지 2% MeOH 및 헵탄 중 10 내지 100% 에틸 아세테이트를 사용한 구배 용리)를 사용하여 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고, 농축하고 50˚C 진공 오븐에서 밤새 건조하여, 밝은 황색 점성 오일로서 화합물 18이 얻어졌다(71 mg). 방법 A; Rt: 1.33 min. m/z: 473.4 (M+H)+ 정확한 질량: 472.2; 1H NMR (400 MHz,86.7˚C, DMSO-d6) ppm 1.01 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 1.81 (s, 3 H), 2.51 (m., 4 H), 3.53 - 3.75 (m, 6 H), 3.93 (q, J=7.0 Hz, 2 H), 7.20 - 7.30 (m, 1 H), 7.33 - 7.43 (m, 1 H), 7.45 - 7.58 (m, 2 H), 7.89 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.08 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.65 (d, J=4.3 Hz, 1 H), 9.85 (br. s., 1 H)
Figure 112014070558363-pct00039
밀봉된 압력 튜브에 교반용 막대, 화합물 14(952 mg, 3.297 mmol), 2-티아졸카복시미드아미드 하이드로클로라이드(539 mg, 3.30 mmol), 건조 N,N-디메틸포름아미드(25 mL) 및 칼륨 tert-부톡사이드(740 mg, 6.59 mmol)를 질소 분위기 하에 로딩하였다. 반응 혼합물을 60˚C에서 112 시간 교반하고 물에 투입하였고, 염산 수용액(1M) 을 사용하여 에멀젼을 중화(pH = 5 내지 6)하고(pH 종이 검사), 디클로로메탄으로 추출하였다. 조합된 유기층들을 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 농축하였고, 톨루엔을 사용하여 N,N 디메틸포름아미드를 공비적으로 제거하여 엷은 황색 오일을 제공하였고, 오일은 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트: 헵탄 10 내지 40%)를 사용하여 정제되어 밝은 황색 분말로서 화합물 19(379 mg)을 제공하였고, 이는 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00040
화합물 19(335 mg, 0.846 mmol)에 옥시염화인(1.10 mL, 11.8 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 환류 하에 30분간 가열하면서 교반하고 상온으로 냉각되도록 하고 질소 유동 하에 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고 포화 중탄산 나트륨 및 물로 세척하고 아이솔루트(isolute) HMN 카트리지로 건조하고 건조상태까지 농축하여 화합물 20을 황색 폼으로 제공하였고, 이는 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00041
마이크로파 바이알을 톨루엔(4 mL) 및 물(400 μL)로 채우고, 5분간 질소 퍼지하였다. 다음으로, 화합물 20(100 mg), 뒤이어 탄산 세슘(944 mg, 2.9 mmol) 및 칼륨 메틸트리플루오로보레이트(153 mg, 1.26 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 추가 2 분간 퍼지하였다. 그 후, 팔라듐(II) 아세테이트(10.9 mg, 0.048 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(27.7 mg, 0.077 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 추가 2분 간 퍼지하였다. 마이크로파 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 1시간 동안 140˚C까지 가열하였다. 반응 혼합물은 상온으로 냉각되고 디클로로메탄-물(50 mL-50 mL)에 투입되었다. 층들은 분리되었고, 수층은 디클로로메탄(2 x 50 mL)을 사용하여 2회 추출하였다. 조합된 추출물들을 브린으로 세척하고, 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하였다. 여과물을 농축하고 헵탄 중 10% 내지 100% EtOAc를 사용한 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였고, 분취 HPLC(Uptisphere C18 ODB - 10μm, 200 g, 5 cm)에 의해 더 정제하였다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, CH3CN), 화합물 21(4.6 mg)이 초래됨.
Figure 112014070558363-pct00042
압력 튜브를 교반용 막대, 디에틸 말로네이트(15.4 g, 96.1 mmol), 4-플루오로페닐아세틸렌(15.0 g, 125 mmol), 인듐(III) 클로라이드(1.06 g, 4.80 mmol), o-자일렌(35 mL)으로 채우고 질소로 충진하고 폐쇄하였다. 그 후, 반응 혼합물을 135˚C오일조에서 17시간 동안 교반하고 상온으로 냉각하였다. 반응 혼합물은 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
압력 튜브를 3,5-플루오로-피리딘-2-카복시미드아미드(2.91 g, 15.0 mmol), NMP(16.6 mL, 173 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(3.06 g, 27.3 mmol)로 질소 분위기 하에 채웠고, 반응 혼합물을 30분간 교반하였다. 그 후, 앞서 수득된 o-자일렌 중 반응 혼합물의 일부(13.6 mmol, o-자일렌 중 5 mL 반응 혼합물)를 첨가하였고, 반응 혼합물은 오일조 내에서 80˚C로 3시간동안 가열하고 교반하였다. 상온으로 냉각한 후, o-자일렌을 제거하기 위해 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 다음으로, 반응 혼합물을 얼음으로 냉각된 물에 투입하고 염산 수용액(1M)을 사용하여 중화(pH=7)하였다(pH 종이 검사). 혼합물을 30분 간 교반한 다음, 디이소프로필 에테르(3 x 50 mL)로 추출하였다. 조합된 유기 추출물들을 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 진공에서 농축하고, 주말 동안 50˚C로 진공 오븐 내에서 건조하였다. 수득된 갈색 오일을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 40 내지 100% 디클로로메탄)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 백색 분말로서 화합물 22(740 mg)를 얻었다.
Figure 112014070558363-pct00043
교반용 막대를 가진 튜브에, 화합물 22(740 mg, 1.86 mmol) 및 옥시염화인(1.34 mL, 18.6 mmol)을 첨가하였고, 튜브를 테프론 마개로 폐쇄하였다. 반응 혼합물을 120˚C에서 30분간 가열하고, 40˚C에서 질소 유동을 사용하여 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액 및 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜, 진한 갈색 점성 오일로서 화합물 23(750 mg)을 얻었고, 이는 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00044
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(189 mg, 0.869 mmol), 화합물 23(250 mg, 0.58 mmol), 증류수(314 μl, 17.4 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(3 mL)을 로딩하였고, 10분 동안 질소 기체를 버블링하였다. 질소 분위기 하에, 탄산 세슘(944 mg, 2.90 mmol), 팔라듐(II) 아세테이트(13.1 mg, 0.058 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(33.2 mg, 0.0927 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 140˚C 마이크로파 오븐 내에서 10분 간 교반하였다. 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였고, 유기층들을 조합하고, 황산 나트륨으로 건조하고, 건조 상태까지 증발시키고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 80% 에틸 아세테이트를 사용한 구배 용리)를 사용하여 정제하여 백색 분말로서 화합물 24(65 mg)가 얻어졌으며, 화합물 24를 50˚C 진공 오븐 내에서 밤새 건조하였다. 방법 A; Rt: 1.21 min. m/z: 475.5 (M+H)+ 정확한 질량: 474.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) ppm 0.95 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 1.79 (s, 3 H), 2.37 - 2.48 (m, 4 H), 3.52 (d, J=15.6 Hz, 1 H), 3.57 - 3.69 (m, 5 H), 3.79 - 3.96 (m, 2 H), 7.09 (t, J=8.9 Hz, 2 H), 7.36 - 7.46 (m, 2 H), 8.05 (ddd, J=10.9, 9.0, 2.3 Hz, 1 H), 8.65 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.61 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00045
마이크로파 튜브를 교반용 막대, 디메틸 말로네이트(0.712 g, 5.39 mmol), 3-클로로-5-플루오로페닐아세틸렌(1.00 g, 6.47 mmol), 인듐(III) 클로라이드(71.5 mg, 0.324 mmol), 자일렌(3 mL)으로 채우고 질소로 충진하고 폐쇄하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 135˚C에서 17시간 동안 교반하고 상온으로 냉각하도록 하였다. 인듐(III) 클로라이드(71.5 mg, 0.324 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 135˚C에서 17 시간 동안 교반한 다음 상온으로 냉각하였다. 반응 혼합물은 아래와 같이 사용되었다.
질소 분위기 하에, 3,5-플루오로-피리딘-2-카복시미드아미드(1.15 g, 5.93 mmol), N-메틸피롤리돈(6.57 mL, 68.2 mmol)으로 채워진 압력 튜브에, 칼륨 tert-부톡사이드(1.21 g, 10.8 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분간 교반하였다. 그 후, 위의 자일렌 중 반응 혼합물의 부분(5.39 mmol, 자일렌 중 3 mL 용액)을 첨가하였고, 압력 튜브를 오일조 내에서 80˚C로 4시간 동안 가열하고 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음 물에 투입하고 염산 수용액(1M)을 사용하여 중화(pH=7)하였다(pH 종이 검사). 혼합물을 30분 간 교반한 다음, 디이소프로필에테르(3 x 50 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물들을 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 여과하고, 진공에서 농축하였고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 40 내지 100% 디클로로메탄 구배 용리)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 갈색을 띠는 점성 오일로서 화합물 25(400 mg)를 얻었다.
Figure 112014070558363-pct00046
튜브를 교반용 막대, 화합물 25(400 mg, 0.826 mmol), 옥시염화인(1.19 mL, 16.5 mmol)으로 채웠고, 120˚C에서 45분간 가열하였다. 반응 혼합물을 40˚C에서 밤새 질소 유동을 사용하여 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액, 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜, 진한 갈색 오일로서 화합물 26(239 mg)이 얻어졌고, 이는 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00047
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(182 mg, 0.833 mmol), 화합물 26(239 mg, 0.556 mmol), 증류수(301 μl, 16.7 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(2.88 mL)을 로딩하였고, 10분 동안 질소 기체를 버블링 하였다. 질소 분위기 하에, 탄산 세슘(905 mg, 2.78 mmol), 팔라듐(II) 아세테이트(12.6 mg, 0.0556 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(31.9 mg, 0.0889 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 140˚C 마이크로파 오븐 내에서 10분 간 교반하였다. 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였고, 유기층들을 조합하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켰다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 70% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 황백색 분말로서 화합물 27(19 mg)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.26 min. m/z: 495.5 (M+H)+ 정확한 질량: 494.1; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 1.89 (s, 3 H), 2.48 - 2.65 (m, 4 H), 3.53 (s, 3 H), 3.67 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.72 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.78 (t, J=4.6 Hz, 4 H), 6.90 (dt, J=8.3, 2.1 Hz, 1 H), 7.24-7.27 (m, 1 H), 7.30 (ddd, J=10.0, 7.9, 2.4 Hz, 1 H), 8.35 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.69 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00048
10 mL 마이크로파 튜브를 디메틸 말로네이트(1.21 g, 9.17 mmol), 3-클로로-5-플루오로페닐아세틸렌(1.70 g, 11.0 mmol), 인듐(III) 트리클로라이드(243 mg, 1.10 mmol), 자일렌(6 mL)으로 채우고 질소로 충진하고 폐쇄하였다. 반응 혼합물을 135˚C에서 40 시간 동안 교반하여, 상온으로 냉각되도록 하고, 다음 단계에서 아래와 같이 사용하였다. 50 mL 둥근 바닥 플라스크를 질소 분위기 하에 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(1.52 g, 9.62 mmol), 디메틸포름아미드(8.98 mL), 및 탄산 나트륨(2.91 g, 27.5 mmol)으로 채웠고, 반응 혼합물을 10분간 상온에서 교반하였다. 그 다음, 앞서 수득된 자일렌 중 반응 혼합물(9.17 mmol)을 첨가하였고, 수득된 혼합물을 60˚C에서 밤새 가열하고 교반하였다. 혼합물을 얼음물 안으로 투입하고, 30분 간 교반하고, 디이소프로필 에테르(3 x 50 mL)로 추출하였다. 조합된 유기 추출물들을 건조(Na2SO4)하고, 감압 하에 농축하였고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리, 헵탄 중 30 내지 100% 디클로로메탄)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 갈색 오일로서 화합물 28(1.14 g)를 얻었다.
Figure 112014070558363-pct00049
질소 분위기 하에, 튜브에 교반용 막대, 화합물 28(1.14 g, 3.03 mmol), 옥시염화인(4.37 mL, 60.7 mmol)을 로딩하였고, 120˚C에서 45분간 가열하였다. 반응 혼합물을 40˚C에서 밤새 질소 유동을 사용하여 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고 중탄산 나트륨 포화 수용액 및 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜서 다음 단계에서 아래와 같이 사용되는 잔류물이 제공되었다.
20 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(1.03 g, 4.72 mmol), 앞에서 수득된 잔류물(969 mg, 2.36 mmol), 증류수(1.28 mL, 70.9 mmol), 및 1,2-디메톡시에탄(12.3 mL, 118 mmol)을 로딩하였다. 질소 기체를 10분 동안 버블링하였다. 질소 분위기 하에, 탄산 세슘(4.62 g, 14.2mmol), 팔라듐(II) 아세테이트(53.5 mg, 0.236 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(135 mg, 0.378 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 140˚C 마이크로파 오븐 내에서 10분 간 교반하였다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였고, 유기층들을 조합하고 탄산 나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 50% 에틸 아세테이트 구배 용리)를 사용하여 정제하여 화합물 29를 얻었다(453 mg). 방법 A; Rt: 1.30 min. m/z: 459.5 (M+H)+ 정확한 질량: 458.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 1.87 (s, 3 H), 2.52 - 2.69 (m, 4 H), 3.50 (s, 3 H), 3.69 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.76 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.82 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 6.90 (dt, J=8.3, 2.0 Hz, 1 H), 7.07 (dt, J=10.1, 1.9 Hz, 1 H), 7.24 (t, J= 1.8 Hz, 1 H), 7.38 (ddd, J=7.5, 5.0, 0.9 Hz, 1 H), 7.75 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.18 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.60 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 10.14 (s, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00050
Figure 112014070558363-pct00051
화합물 29(175 mg, 0.378 mmol) 및 아세트산 칼륨(148 mg, 1.51 mmol)을 메탄올(50 mL)에 용해하였고, 반응 혼합물을 교반하고, 5분간 질소 기체로 퍼지하였다. 탄소 상 팔라듐(10%, 201 mg, 0.189 mmol)을 용액에 첨가하였고, 용액을 수소 분위기 하에 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 질소 분위기 하에 디칼라이트(dicalite) 상에서 여과하였고, 고체를 메탄올로 세척하였다. 여과물을 건조상태까지 농축하고 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 65% 에틸 아세테이트 구배 용리)를 사용하여 정제하여 화합물 30(66 mg) 및 화합물 31(13 mg)을 얻었다. 화합물 30: 방법 A; Rt: 1.18 min. m/z: 425.5 (M+H)+ 정확한 질량: 424.2;
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 1.90 (s, 3 H), 2.51 - 2.68 (m, 4 H), 3.47 (s, 3 H), 3.67 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.74 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.81 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 6.79 - 6.91 (m, 1 H), 7.13 - 7.20 (m, 1 H), 7.21 - 7.26 (m, 2 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 5.0, 1.1 Hz, 1 H), 7.73 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.19 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.59 (ddd, J=4.8, 1.8, 0.8 Hz, 1 H), 10.05 (s, 1 H)
화합물 31: 방법 A; Rt: 1.12 min. m/z: 340.4 (M+H)+ 정확한 질량: 339.1
Figure 112014070558363-pct00052
얼음 조 내에서 THF(300 mL)를 천천히 TiCl4(디클로로메탄 중 1 M; 20.3 mL 184.0 mmol)에 첨가하였다. CCl4(4 mL)를 첨가하였다. 그 다음, 2,2,2,4'-테트라플루오로-아세토페논(18.9 g, 98.1 mmol) 및 디에틸말로네이트(15.7 g, 98.1 mmol)의 혼합물을 0 내지 5˚C의 온도에서 첨가하였다. 수용물을 CCl4(1 mL)로 헹구었다. 반응 혼합물을 상온에서 90분간 교반하였다. 그런 다음, 피리딘(30.7 mL)을 5분 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 90분간 교반하였다. 백색 침전물이 완전히 용해될 때까지 물을 첨가하였다. 디에틸에테르(250 mL)로 혼합물을 2회 추출하였다. 유기층을 분리하고, 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 0 내지 10% EtOAc 구배 용리를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 순수한 분획들을 조합하고 농축하여 투명한 액체로서 디에틸 2-(2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로페닐)에틸리덴)말로네이트(5.35g)를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) ppm 0.88 (t, J=1.0 Hz, 3 H), 1.27 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 3.99 (q, J=7.2 Hz, 2 H), 4.33 (q, J=7.1 Hz, 2 H), 7.28 - 7.37 (m, 2 H), 7.37 - 7.45 (m, 2 H).
DMF(23 mL) 중 디에틸 2-(2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로페닐)에틸리덴)말로네이트(15.4 mmol), (2.43g, 15.4 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드, 아세트산 칼륨(2.27 g; 23.1mmol)을 2 시간 동안 110˚C에서 교반하고 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 물(50 mL) 및 디클로로메탄(50 mL) 내로 취하였다. 유기 층을 HM-N isolute 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물은 1 내지 10% 메탄올 구배를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 수집하고 농축하였다. 순수하지 않은 분획들은 90/10 헵탄/에틸아세테이트 혼합물로부터 결정화되었다. 백색 분말을 여과하여 제거한 후 진공에서 50˚C로 밤새 건조하여 화합물 32(2.33 g)가 얻어졌다. 여과물을 조합하고 농축하여 오일의 잔류물(2.06g)이 얻어졌고, 잔류물은 분취 HPLC(RP Vydac Denali C18 - 10μm, 200g, 5cm)에 의해 더 정제되었다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, CH3CN), 원하는 분획들을 수집하고 증발시키고 MeOH 내에 용해하고, 다시 증발시켜 백색 분말로서 화합물 32(1.48g)를 더 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) ppm 0.74 (t, J=7.0 Hz, 2 H), 1.14 (t, J=7.2 Hz, 1 H), 3.68 - 3.83 (m, 1 H), 4.07 - 4.19 (m, 1 H), 4.57 - 4.65 (m, 1 H), 7.20 - 7.37 (m, 2 H), 7.61 - 7.81 (m, 2 H), 8.00 (dd, J=8.8, 5.5 Hz, 1 H), 8.05 - 8.14 (m, 1 H), 8.37 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.47 (dt, J=7.8, 1.0 Hz, 1 H), 8.68 - 8.78 (m, 1 H), 11.25 (s, 1 H), 11.42 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00053
옥시염화인(30 mL)에 용해된 화합물 32(2.29 g, 5.48mmol)를 밤새 환류하였다. 반응 혼합물을 농축하였고, 잔류물은 CH2Cl2(50 mL) 내에 용해하고 NaHCO3 용액 내에 투입하였다. 혼합물을 5분간 활발하게 교반하였다. 유기 층을 아이솔루트(isolute) HM-N 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물을 소량의 CH2Cl2에 용해하고, 10 내지 100% EtOAc 구배를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 거쳤다. 생성물 분획들을 수집하고 농축하여, 화합물 33을 얻었고, 화합물은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00054
라세미 화합물 34의 거울상 이성질체: 화합물 34a 및 화합물 34b
화합물 33(0.48 g, 1.04mmol), 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(0.34 g, 1.56 mmol) 탄산 칼륨(0.216g, 1.56mmol), 디옥산(47mL) 및 증류수(9mL)의 혼합물에 질소를 버블링하였다. 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(0.16g, 0.31mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 내에서 140˚C로 30 분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하고 물 및 CH2Cl2에 용해하였다. 유기 층을 HM-N 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 화합물 34(320 mg)를 산출하였고, SFC 상에서 거울상이성질체 분리를 위해 사용되었다. 잔류물의 부분(253 mg)이 분취 SFC(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)에 의해 거울상이성질체로 분리되었다. 이동상(CO2, MeOH), 원하는 분획들을 수집하고, 증발시키고 MeOH 내에 용해하고 다시 증발시켜서 화합물 34a(98.5 mg) 및 화합물 34b(89 mg)를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) ppm 1.00 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 2.51 - 2.65 (m, 4 H), 3.70 (s, 2 H), 3.81 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 3.95 (dddd, J=18.3, 11.1, 7.2, 3.6 Hz, 2 H), 6.95 - 7.04 (m, 2 H), 7.42 (ddd, J=7.5, 4.9, 1.1 Hz, 1 H), 7.50 (dd, J=8.3, 5.3 Hz, 2 H), 7.79 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.29 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.62 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 10.39 (br. s., 1 H). 방법 E; Rt: 1.26 min. m/z: 493.2 (M+H)+ 정확한 질량: 492.2; SFC: OJ-H 500 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5% MeOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 컬럼 온도: 30℃ 34a: 2.57 min; 34b: 3.55 min.
Figure 112014070558363-pct00055
DMF(2 mL) 중 SnMe4(112 mg, 0.628 mmol) 및 화합물 33(145 mg, 0.314 mmol)의 용액에 10분간 질소를 버블링하였다. 그 후, 비스(트리-t-부틸-포스핀)팔라듐(0)(80.3 mg, 0.157 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C로 10 분간 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였고, 수득된 잔류물을 CH2Cl2(25 mL)에 용해하고, 물로 세척하고(2x), HM-N isolute 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 여과하고 진공에서 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 헵탄 중 10 내지 50% EtOAc 구배 용리를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 수집하고 건조상태까지 농축하였다. 잔류물은 CH2Cl2을 용리제로 사용하여 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 다시 정제되었다. 생성물 분획들을 수집하고 농축하였다. 얻어진 잔류물은 분취 HPLC(RP SunFire Prep C18 OBD-10 μm, 30x150 mm)에 의해 정제하였다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, CH3CN), 화합물 35(36 mg)가 얻어짐. 방법 E; Rt: 1.19 min. m/z: 408.2 (M+H)+ 정확한 질량: 407.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) ppm 1.00 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 2.22 (s, 3 H), 3.87 - 4.02 (m, 2 H), 7.12 - 7.23 (m, 2 H), 7.53 (dd, J=8.5, 5.5 Hz, 2 H), 7.59 - 7.66 (m, 1 H), 7.94 - 8.01 (m, 1 H), 8.13 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.65 - 8.74 (m, 1 H), 10.10 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00056
5-플루오로-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-온(20 g, 133 mmol) 및 디에틸 말로네이트(13.5 g, 146 mmol)를 건조 THF(560 mL)에 용해하였다. 건조 CH2Cl2(260 mL) 중 TiCl4(29.3 g, 266 mmol)를 0℃에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 피리딘(56 mL)을 0℃에서 N2 하에 적가하였다. 20℃에서 밤새 혼합물을 교반하였다. 고체는 여과하여 제거하였다. 여과물을 진공에서 농축하였고 에틸 아세테이트(400 mL)를 첨가하였다. 얻어진 침전물을 여과하여 제거하였다. 여과물은 브린으로 세척하였고(2 x 200 mL), Na2SO4로 건조하였다. 용매를 높은 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 100:0 내지 10:1)에 의해 정제하여, 잔류물(9.8 g)이 얻어졌다. 수득된 생성물은 고성능 액체 크로마토그래피(C18, 용리제: 0.1% HCl을 완충액으로 사용하는 15/85 내지 45/55 CH3CN/H2O)에 의해 더 정제되었다. 순수한 분획들을 수집하였고, 혼합물을 NaHCO3으로 pH=8까지 염기화시켰다. 휘발물을 진공에서 제거하였다. 수층을 에틸 아세테이트(200 mL)로 추출하였다. 유기층은 브린으로 세척하고 Na2SO4에서 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하여, 화합물 36(5 g)이 얻어졌다.
Figure 112014070558363-pct00057
DMF(70 mL) 중 화합물 36(7 g, 23.9 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(5.7 g) 및 Na2CO3(7.6 g, 71.8 mmol)의 혼합물을 N2하에 60℃에서 밤새 교반하였다. 용매는 진공에서 제거되었다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄(100 mL) 내에 현탁하였고, 침전물을 여과하여 제거하였다. 여과물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 100:0 내지 60:40)에 의해 정제하여, 화합물 37(1.78 g)이 얻어졌다. 방법 B; Rt: 1.12 min. m/z: 368.1 (M+H)+ 정확한 질량: 367.1
Figure 112014070558363-pct00058
POCl3(7.9 mL, 86 mmol) 중 화합물 37(1.58 g, 4.3 mmol)을 120℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄(50 mL)에 용해하였다. 유기층은 NaHCO3(3x 20 mL) 포화 수용액 및 브린으로 세척하고, Na2SO4로 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 100:0 내지 70:30)에 의해 정제하여, 화합물 38(1.1 g)이 얻어졌다. 방법 B; Rt: 1.19 min. m/z: 386.1 (M+H)+ 정확한 질량: 385.1
Figure 112014070558363-pct00059
DME(1.4 mL) 및 H2O(0.14 mL) 중 화합물 38(0.1 g, 0.26 mmol), 칼륨 트리플루오로(모폴리노-메틸)보레이트(0.11 g, 0.52 mmol), Pd(OAc)2(0.006 g, 0.026 mmol), 부틸디-1-아다만틸포스핀(0.015 g, 0.042 mmol) 및 Cs2CO3(0.51 g, 1.55 mmol)의 혼합물을 N2 하에 140℃에서 마이크로파 조사 하에 20분간 교반하였다. 물(5 mL) 및 디클로로메탄(5 mL)을 첨가하였다. 유기층을 분리하였고 물(2 x 5 mL)로 세척하였다. 유기층을 1N HCl(5 mL)로 세척하였다. 수층은 디클로로메탄(2 x 5 mL)으로 세척하고 NaHCO3로 pH=7~8까지 염기화하였다. 디클로로메탄(15 mL)으로 혼합물을 추출하였다. 유기층을 브린으로 세척하고 Na2SO4로 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하여, 화합물 39(0.1 g)가 얻어졌다. 방법 C; Rt: 3.24 min. m/z: 451.2 (M+H)+ 정확한 질량: 450.2
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 9.99 (br. s, 1 H) 8.49 - 8.69 (m, 1 H) 8.16 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H) 7.71 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H) 7.35 (ddd, J=7.5, 5.0, 1.1 Hz, 1 H) 7.04 (dd, J=8.3, 5.5 Hz, 1 H) 6.86 - 6.96 (m, 1 H) 6.73 - 6.86 (m, 1 H) 3.88 (q, J=7.3 Hz, 2 H) 3.80 - 3.85 (m, 4 H) 3.81 (d, J=16.6 Hz, 1 H) 3.71 (d, J=16.6 Hz, 1 H) 3.16 - 3.27 (m, 1 H) 2.92 - 3.03 (m, 1 H) 2.64 - 2.71 (m, 1 H) 2.57 - 2.63 (m, 4 H) 2.28 - 2.38 (m, 1 H) 0.89 (t, J=7.2 Hz, 3 H)
Figure 112014070558363-pct00060
건조 THF(4 mL) 중 화합물 38(0.2 g, 0.52 mmol), 2,4,6-트리메틸-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리보리난(trioxatriborinane)(0.13 g, 1.04 mmol), PEPPSI(TM)-IPr 촉매(0.035 g, 0.052 mmol) 및 K2CO3(0.21 g, 1.55 mmol)의 혼합물을 N2 분위기 하에 150℃로 5분간 마이크로파 조사 하에 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여과물을 건조상태까지 농축하고 박막 크로마토그래피(용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트=2:1)에 의해 정제하였다. 수득된 생성물을 고성능 액체 크로마토그래피(C18, 용리제: 0.1% HCl을 완충액으로 사용하는 15/85 내지 45/55 CH3CN/H2O)에 의해 더 정제하였다. 순수한 분획들을 수집하였고, 혼합물을 건조상태까지 증발시켜서, (HCl 염으로서) 화합물 40(60 mg)을 얻었다. 방법 C; Rt: 3.05 min. m/z: 366.1 (M+H)+ 정확한 질량: 365.2
Figure 112014070558363-pct00061
POPd(126 mg, 0.250 mmol) 및 탄산 칼륨(2.08 g, 15.0 mmol)을 마이크로파 튜브 내 디에틸 2-(1-클로로에틸리덴)말로네이트(1.10 g, 5.00 mmol), 2-클로로-4-플루오로페닐보론 산(1.57 g, 9.00 mmol), 테트라하이드로퓨란(10.0 mL) 및 물(1.0 mL)의 질소 퍼지된 교반 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실리콘 격막으로 밀봉하고 100˚C에서 60분 간 마이크로파 조사를 수행하였다. 반응을 총 5회 반복하였고, 분리된 반응 용기는 상온으로 냉각되도록 하고, 반응 혼합물을 조합하고, 헵탄(600 mL)으로 희석하고 탄산 나트륨(2 x 100 mL), 물(1 x 50 mL), 및 브린(50 mL)으로 세척하였다. 건조 후(MgSO4), 용매는 진공에서 제거되었다. 헵탄 중 0 내지 6% 에틸 아세테이트를 사용하는 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 잔류물을 정제하여서, 액체로서 디에틸2-(1-(2-클로로-4-플루오로-페닐)에틸리덴)말로네이트(860 mg)를 얻었다. 교반용 막대, 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(0.594 g, 3.77 mmol) 및 N-메틸-2-피롤리돈(10 mL)을 가지는 압력 튜브는 질소 분위기 하에 0˚C로 냉각되었다. 질소 분위기 하에 칼륨 tert-부톡사이드(0.564 g, 5.03 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 상온에서 15분간 교반하였다. N-메틸-2-피롤리돈(5 mL) 중 디에틸 2-(1-(2-클로로-4-플루오로페닐)에틸리덴)말로네이트(860 mg, 2.51 mmol)를 첨가하였고, 압력 튜브를 오일조에서 88˚C로 44 시간 동안 가열하고 교반하였다. 상온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 물(200 mL) 내로 투입하였고, 염산(1N, 4 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 간 교반하고, 디이소프로필 에테르(3 x 100 mL)로 추출하였다. 조합된 유기 추출물들을 건조하였고(Na2SO4), 감압 하에 농축하였다. 수득된 잔류물은 헵탄 중 30 내지 100% 디클로로메탄 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제되었다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여, 에틸 4-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-6-옥소-2-(피리딘-2-일)-1,4,5,6-테트라하이드로피리미딘-5-카복실레이트(311 mg)를 얻었다. 질소 분위기 하에, 에틸 4-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-메틸-6-옥소-2-(피리딘-2-일)-1,4,5,6-테트라하이드로피리미딘-5-카복실레이트(311 mg, 0.798 mmol) 및 옥시염화인(1.48 mL, 16.0 mmol)을 교반하고 110˚C에서 30분간 가열하였다. 냉각 후, 반응 혼합물을 건조상태까지 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄(50 mL)에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 20 mL) 및 브린(20 mL)으로 세척하였다. 건조 후(Na2SO4), 휘발물을 진공에서 제거하여 다음 단계에서 아래와 같이 사용된 잔류물(260 mg)을 얻었다. 마이크로파 튜브(10 mL)에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일) 메틸트리플루오로보레이트(128 mg, 0.588 mmol), 앞서 수득된 잔류물(260 mg, 0.452 mmol), 물(245 μL, 13.6 mmol) 및 1, 2-디메톡시에탄(2.35 mL)을 로딩하고 10분 간 질소로 퍼지하였다. 질소 분위기 하에, 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(23.1 mg, 0.0452 mmol) 및 탄산 칼륨(281 mg, 2.04 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C로 10 분 간 교반하였다. 냉각 후, 반응 혼합물에 질소 기체를 버블링하였고, 추가의 부틸디-1-아다만틸포스핀(24.3 mg, 0.0678 mmol) 및 팔라듐(II) 아세테이트(10.2 mg, 0.0452 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 140˚C에서 10분 간 마이크로파 조사 하에 교반하였다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였고, 유기층들을 조합하고 탄산 나트륨으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 헵탄 중 5 내지 50% 에틸 아세테이트를 사용하는 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하여서, 화합물 41(73 mg)이 얻어졌다.
방법 D; Rt: 1.22 min. m/z: 473.1 (M+H)+ 정확한 질량: 472.2 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 0.92 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 1.92 (s, 3 H), 2.53 - 2.67 (m, 4 H), 3.67 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.77 - 3.90 (m, 7 H), 6.97 (td, J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 7.04 (dd, J=8.8, 2.8 Hz, 1 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 5.0, 1.1 Hz, 1 H), 7.61 (dd, J=9.0, 6.3 Hz, 1 H), 7.72 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.13 (br. d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.61 (br. d, J=4.5 Hz, 1 H), 10.19 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00062
POPd(582 mg, 1.16 mmol)를 마이크로 튜브 내 디에틸 2-(1-클로로에틸리덴)말로네이트(3.00 g, 13.6 mmol), 2,4-디플루오로페닐보론산(3.22 g, 20.4 mmol), 탄산 칼륨(5.64 g, 40.8 mmol), 테트라하이드로퓨란(16.0 mL) 및 물(3.00 mL)의 질소 퍼지된 교반 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 밀봉하고 100˚C에서 1 시간 동안 마이크로파 조사를 거쳤다. 상온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 디클로로메탄(150 mL)으로 희석하고, 물, 탄산 나트륨 포화 수용액, 및 물로 세척하고(3 x 40 mL), 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켰다. 헵탄 중 0 내지 15% 에틸 아세테이트를 사용하는 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 잔류물을 정제하여서, 오일로서 디에틸2-(1-(2,4-디플루오로페닐)에틸리덴)말로네이트(1.06 g)를 얻었다.
질소 분위기 하에, 압력 튜브를 교반용 막대 자석, 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(268 mg, 1.70 mmol), N,N-디메틸-포름아미드(13.2 mL), 칼륨 tert-부톡사이드(382 mg, 3.41 mmol) 및 디에틸 2-(1-(2,4-디플루오로페닐)에틸리덴)말로네이트(508 mg, 1.70 mmol)로 채웠다. 반응 혼합물을 밀봉하고 60˚C에서 45분 간 교반하였다. 상온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 얼음물(200 mL)에 투입하였고, 얻어진 에멀젼은 염산(1N)을 사용하여 중화(pH= 7)되었다. 혼합물은 디클로로메탄으로 추출하였다. 조합된 유기 추출물들을 건조하였고(Na2SO4), 감압 하에 농축하였다. N,N-디메틸포름아미드는 톨루엔을 사용하여 공동 증발시켰고, 얻어진 황색 오일은 10 내지 40%의 구배로 헵탄 중 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여, 에틸 4-(2,4-디플루오로페닐)-4-메틸-6-옥소-2-(피리딘-2-일)-1,4,5,6-테트라하이드로피리미딘-5-카복실레이트(203 mg)를 얻었다. 질소 분위기 하에, 튜브를 교반용 막대, 에틸 4-(2,4-디플루오로페닐)-4-메틸-6-옥소-2-(피리딘-2-일)-1,4,5,6-테트라하이드로피라미딘-5-카복실레이트(137 mg, 0.367 mmol) 및 옥시염화 인(0.509 mL, 5.48 mmol)으로 채웠다. 혼합물은 30분 간 환류 하에 교반하고 가열하였다. 상온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액(3 x 10 mL)으로 세척하고, 건조하고(isolute HM-N), 증발시켜 황색 분말인 에틸 6-클로로-4-(2,4-디플루오로-페닐)-4-메틸-2-(피리딘-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(154 mg)가 얻어졌고, 분말은 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, 칼륨(모폴린-4-일)-메틸트리플루오로보레이트(381 mg, 1.84 mmol), 에틸 6-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-(피리딘-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(154 mg, 0.354 mmol), 탄산 세슘(1.38 g, 4.25 mmol), 증류수(300 μL) 및 톨루엔(3mL)을 로딩하였다. 질소 기체를 5분 간에 버블링하였고, 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(16.0 mg, 0.0708 mmol) 및 부틸디-1-아만틸포스핀(40.6 mg, 0.113 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 120˚C에서 18 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각하고, 디클로로메탄(50 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL) 및 물(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 HM-N 카트리지로 건조하고, 건조 상태까지 농축하여 갈색 점성 잔류물을 제공하였다. 50 진공 오븐에서 밤새 건조 후, 이 잔류물은 디클로로메탄 중 0 내지 2% 메탄올(7 N 암모니아) 구배 용리, 그리고 다시 디클로로메탄 중 0 내지 2% 메탄올을 사용한 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제되어, 화합물 42(81 mg)가 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.23 min. m/z: 457.4 (M+H)+ 정확한 질량: 456.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d): ppm 1.00 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 1.91 (s, 3 H), 2.54 - 2.65 (m, 4 H), 3.65 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.77 - 3.85 (m, 5 H), 3.92 (m, 2 H), 6.69 (ddd, J=11.7, 9.0, 2.6 Hz, 1 H), 6.78-6.86 (m, 1 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.44 (td, J=9.0, 6.5 Hz, 1 H), 7.72 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.14 (dt, J=7.8, 1.1 Hz, 1 H), 8.60 (ddd, J=4.8, 1.5, 0.8 Hz, 1 H), 10.10 (br. s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00063
절차 C:
HOAc(3.82 mL, 66.74 mmol), 4,4-디메틸-3,4-디하이드로-2H-나프탈렌-1-온(5 g, 28.7 mmol), 에틸시아노아세테이트(3.37 mL, 31.6 mmol), 벤젠(19 mL), 베타-알라닌(0.639 g, 7.17 mmol)의 혼합물을 환류 하에 Dean Stark 장치에서 약 65시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 NaHCO3(12.6 g)를 함유하는 H2O(100 mL)에 천천히 투입하고, 20분 간 교반하였다. 얻어진 수층을 톨루엔으로 추출하였다. 조합된 추출물들을 브린으로 세척하고 MgSO4로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여 오일로서 화합물 43a을 얻었고, 오일은 아래와 같이 사용되었다.
절차 C에 기술된 바와 유사한 조건을 사용하여 수득된 다른 화합물들:
Figure 112014070558363-pct00064
7-플루오로-3,4-디하이드로나프탈렌-1(2H)-온을 출발물질로 사용한 화합물 43b
Figure 112014070558363-pct00065
6-플루오로-3,4-디하이드로나프탈렌-1(2H)-온을 출발물질로 사용한 화합물 43c
Figure 112014070558363-pct00066
출발물질로서 3,4-디하이드로나프탈렌-1(2H)-온을 사용하고 17시간의 반응 시간을 사용한 화합물 43d
Figure 112014070558363-pct00067
5-플루오로-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-온을 출발물질로 사용한 화합물 43e
Figure 112014070558363-pct00068
2,3-디하이드로-1H-인덴-1-온을 출발물질로 사용한 화합물 43f
Figure 112014070558363-pct00069
크로만-4-온을 출발 물질로 사용하고 20 시간의 반응 시간을 사용한 화합물 43g
Figure 112014070558363-pct00070
화합물 43a(미정제 혼합물, 3 g, 11.14 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(1.93 g, 12.25 mmol), Na2CO3(1.77 g, 16.7 mmol) 및 DMF(13.6 mL)를 오일조 내 압력 튜브에서 75˚C로 1 시간 동안 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물을 상온으로 냉각하고, 진공에서 농축하였다. 얻어진 잔류물은 물-CH2Cl2(150 mL/150 mL) 내로 취해지고, 수층을 CH2Cl2(2 x 100 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물들을 브린으로 세척하고, 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 CH2Cl2)에 의해 색층분석하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 화합물 44가 산출되었고, 화합물 44는 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.09 min. m/z: 345.4 (M+H)+ 정확한 질량: 344.2;
Figure 112014070558363-pct00071
절차 D :
화합물 43b(9.4 g, 36.3 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(6.86 g, 43.5 mmol), KOAc(5.34 g, 54.4 mmol) 및 DMF(87 mL)를 압력 튜브 내에서 110˚C로 1시간 동안 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물은 상온으로 냉각하고, 진공에서 농축하였다. 잔류물은 물-CH2Cl2(150 mL-150 mL) 내로 취해졌다. 수층을 2회 추출하였고(CH2Cl2, 2 x 100 mL), 조합된 추출물들을 브린으로 세척하고 건조(MgSO4)하고 여과하고 진공에서 농축하여, 갈색 오일이 산출되었다. 오일을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: EtOAc-헵탄 1:9 내지 3:7)에 의해 정제하여 화합물 45(4.7 g)를 산출하였고, 화합물 45는 다음과 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 0.95 min. m/z: 335.1 (M+H)+ 정확한 질량: 334.1;
Figure 112014070558363-pct00072
화합물 43c으로부터 출발하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: CH2Cl2-MeOH 100:0 --> 98:2) 정제, 절차 D에 따라 제조되었다. 방법 A; Rt: 0.99 min. m/z: 335.3 (M+H)+ 정확한 질량: 334.1;
Figure 112014070558363-pct00073
화합물 43d로부터 출발하여 절차 D에 따라 제조되었다.
방법 A; Rt: 0.97 min. m/z: 317.3 (M+H)+ 정확한 질량: 316.1;
Figure 112014070558363-pct00074
절차 E :
EtOH(30 mL)는 HCl(기체 버블링)로 90분간 포화되었다.
화합물 44(0.5 g, 1.45 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 오일조 내에서 60˚C로 20 시간 동안 교반하였다. 얻어진 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고, CH2Cl2(50 mL)/H2O(50 mL) 내로 취해졌다. 층들은 분리되었고, 수층을 CH2Cl2(2 x 50 mL)을 사용하여 추출하였다. 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하여 오일로서 화합물 48(560 mg)을 산출하였고, 이는 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.24 min. m/z: 392.5 (M+H)+ 정확한 질량: 391.2;
Figure 112014070558363-pct00075
EtOH(10 mL) 중 화합물 45(1 g, 2.991 mmol)를 얼음조 내 압력 튜브에서 부드러운 질소 유동 하에 냉각하였다. 혼합물을 농축된 H2SO4(3.2 mL, 59.8 mmol)로 적정 처리하였고 바이알을 캡핑하였다. 얻어진 반응 혼합물을 오일조 내에서 40˚C로 20 시간 동안 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물을 상온으로 냉각하였고, H2O(20 mL)를 첨가하였다. NaHCO3(10.05 g, 119.6 mmol)를 교반 하에 조금씩 첨가하였다. 수층을 추출하였고(3 x 100 mL), 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(isocracic CH2Cl2-MeOH 98:2)를 사용하여 색층분석하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 화합물 49를 산출하였고, 화합물 49는 아래와 같이 사용되었다
Figure 112014070558363-pct00076
절차 F :
화합물 48(560 mg)을 POCl3(5 mL, 53.8 mmol)로 처리하고, 이를 오일조 내에서 105 내지 110˚C로 1 시간 동안 교반하였다. 얻어진 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 얼음물로 처리한 다음 CH2Cl2(3 x 50 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물을 MgSO4로 건조하고, 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 CH2Cl2)에 의해 정제하여서 황색 고체로서 화합물 50(359 mg)을 산출하였고, 화합물은 아래와 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 1.34 min. m/z: 410.2 (M+H)+ 정확한 질량: 409.2;
절차 F에 기술된 바와 유사하게 제조되었다:
크로만-4-온을 출발 물질로 사용하고 20 시간의 반응 시간을 사용한 화합물 43g
Figure 112014070558363-pct00077
화합물 43a(미정제 혼합물, 3 g, 11.14 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(1.93 g, 12.25 mmol), Na2CO3(1.77 g, 16.7 mmol) 및 DMF(13.6 mL)를 오일조 내 압력 튜브에서 75˚C로 1 시간 동안 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물을 상온으로 냉각하고, 진공에서 농축하였다. 얻어진 잔류물은 물-CH2Cl2(150 mL/150 mL) 내로 취해지고, 수층을 CH2Cl2(2 x 100 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물들을 브린으로 세척하고, 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 CH2Cl2)에 의해 색층분석하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 화합물 44가 산출되었고, 화합물 44는 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.09 min. m/z: 345.4 (M+H)+ 정확한 질량: 344.2;
Figure 112014070558363-pct00078
절차 D :
화합물 43b(9.4 g, 36.3 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(6.86 g, 43.5 mmol), KOAc(5.34 g, 54.4 mmol) 및 DMF(87 mL)를 압력 튜브 내에서 110˚C로 1시간 동안 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물은 상온으로 냉각하고, 진공에서 농축하였다. 잔류물은 물-CH2Cl2(150 mL-150 mL) 내로 취해졌다. 수층을 2회 추출하였고(CH2Cl2, 2 x 100 mL), 조합된 추출물들을 브린으로 세척하고 건조(MgSO4)하고 여과하고 진공에서 농축하여, 갈색 오일이 산출되었다. 오일을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: EtOAc-헵탄 1:9 내지 3:7)에 의해 정제하여 화합물 45(4.7 g)를 산출하였고, 화합물 45는 다음과 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 0.95 min. m/z: 335.1 (M+H)+ 정확한 질량: 334.1;
Figure 112014070558363-pct00079
화합물 43c으로부터 출발하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: CH2Cl2-MeOH 100:0 --> 98:2) 정제, 절차 D에 따라 제조되었다. 방법 A; Rt: 0.99 min. m/z: 335.3 (M+H)+ 정확한 질량: 334.1;
Figure 112014070558363-pct00080
화합물 43d로부터 출발하여 절차 D에 따라 제조되었다.
방법 A; Rt: 0.97 min. m/z: 317.3 (M+H)+ 정확한 질량: 316.1;
Figure 112014070558363-pct00081
절차 E :
EtOH(30 mL)는 HCl(기체 버블링)로 90분간 포화되었다.
화합물 44(0.5 g, 1.45 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 오일조 내에서 60˚C로 20 시간 동안 교반하였다. 얻어진 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고, CH2Cl2(50 mL)/H2O(50 mL) 내로 취해졌다. 층들은 분리되었고, 수층을 CH2Cl2(2 x 50 mL)을 사용하여 추출하였다. 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하여 오일로서 화합물 48(560 mg)을 산출하였고, 이는 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.24 min. m/z: 392.5 (M+H)+ 정확한 질량: 391.2;
Figure 112014070558363-pct00082
EtOH(10 mL) 중 화합물 45(1 g, 2.991 mmol)를 얼음조 내 압력 튜브에서 부드러운 질소 유동 하에 냉각하였다. 혼합물을 농축된 H2SO4(3.2 mL, 59.8 mmol)로 적정 처리하였고 바이알을 캡핑하였다. 얻어진 반응 혼합물을 오일조 내에서 40˚C로 20 시간 동안 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물을 상온으로 냉각하였고, H2O(20 mL)를 첨가하였다. NaHCO3(10.05 g, 119.6 mmol)를 교반 하에 조금씩 첨가하였다. 수층을 추출하였고(3 x 100 mL), 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(isocracic CH2Cl2-MeOH 98:2)를 사용하여 색층분석하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 화합물 49를 산출하였고, 화합물 49는 아래와 같이 사용되었다
Figure 112014070558363-pct00083
절차 F :
화합물 48(560 mg)을 POCl3(5 mL, 53.8 mmol)로 처리하고, 이를 오일조 내에서 105 내지 110˚C로 1 시간 동안 교반하였다. 얻어진 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 얼음물로 처리한 다음 CH2Cl2(3 x 50 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물을 MgSO4로 건조하고, 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 CH2Cl2)에 의해 정제하여서 황색 고체로서 화합물 50(359 mg)을 산출하였고, 화합물은 아래와 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 1.34 min. m/z: 410.2 (M+H)+ 정확한 질량: 409.2;
절차 F에 기술된 바와 유사하게 제조되었다:
Figure 112014070558363-pct00084
화합물 44로부터 출발한 화합물 51. 방법 A; Rt: 1.28 min. m/z: 363.4 (M+H)+ 정확한 질량: 362.1;
Figure 112014070558363-pct00085
화합물 45로부터 출발한 화합물 52. 화합물은 컬럼 크로마토그래피 없이 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.17 min. m/z: 353.3 (M+H)+ 정확한 질량: 352.1;
Figure 112014070558363-pct00086
화합물 49로부터 출발한 화합물 53. 방법 D; Rt: 1.29 min. m/z: 400.0 (M+H)+ 정확한 질량: 399.1;
Figure 112014070558363-pct00087
화합물 46로부터 출발한 화합물 54.
Figure 112014070558363-pct00088
화합물 47로부터 출발한 화합물 55. 105˚C 대신 120˚C에서 1시간 동안 교반되었고, 화합물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 없이 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.17 min. m/z: 335.3 (M+H)+ 정확한 질량: 334.1;
Figure 112014070558363-pct00089
절차 G:
마이크로파 바이알을 화합물 50(0.1 g, 0.244 mmol), Cs2CO3(0.477 g, 1.464 mmol), 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(0.101 g, 0.488 mmol), 물(0.13 mL, 7.32 mmol) 및 DME(1.3 mL, 12.2 mmol)로 채웠다. 혼합물을 5분간 질소 퍼지하였다. 그 후, 팔라듐(II) 아세테이트(0.0055 g, 0.0244 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(0.014 g, 0.039 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 추가 2분 간 퍼지하였다. 바이알을 캡핑하고 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분간 교반하였다. 얻어진 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고 잔류물은 H2O-CH2Cl2(50 mL/50 mL) 내로 취해지고, 수층을 CH2Cl2(2 x 50 mL)로 더 추출하였다. 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리 EtOAc-헵탄 10:90 --> 50:50)에 의해 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하여 황색 분말로서 화합물 56(44.7 mg)을 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.34 min. m/z: 475.3 (M+H)+ 정확한 질량: 474.3;
1H NMR (600 MHz, 클로로포름-d): ppm 0.70 (t, J=7.1 Hz, 3 H), 1.35 (s, 3 H), 1.39 - 1.43 (m, 1 H), 1.44 (s, 3 H), 1.90 - 1.99 (m, 1 H), 2.45 - 2.55 (m, 2 H), 2.57 - 2.68 (m, 4 H), 3.68 - 3.74 (m, 1 H), 3.71 (d, J=16.5 Hz, 1 H), 3.83 (t, J=4.6 Hz, 4 H), 3.85 - 3.91 (m, 1 H), 3.88 (d, J=16.4 Hz, 1 H), 7.05 (ddd, J=7.6, 7.2, 1.4 Hz, 1 H), 7.13 (ddd, J=7.9, 7.1, 1.5 Hz, 1 H), 7.17 (dd, J=7.8, 1.5 Hz, 1 H), 7.32 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.35 (dd, J=7.9, 1.4 Hz, 1 H), 7.68 (td, J=7.7, 1.7 Hz, 1 H), 8.18 (dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.57 (ddd, J=4.8, 1.7, 0.9 Hz, 1 H), 10.01 (s, 1 H)
절차 G에 따라 제조되었다:
Figure 112014070558363-pct00090
화합물 51로부터 출발한 화합물 57. 방법 F; Rt: 6.63 min. m/z: 428.2 (M+H)+ 정확한 질량: 427.2;
Figure 112014070558363-pct00091
화합물 52로부터 출발한 화합물 58.
CH2Cl2-MeOH 100:0 --> 98:2)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제되었다, 헵탄/디이소프로필에테르로 연마되었다. 방법 A; Rt: 1.20 min. m/z: 418.5 (M+H)+ 정확한 질량: 417.2;
Figure 112014070558363-pct00092
화합물 53으로부터 출발한 화합물 59; 1H NMR (600 MHz, 클로로포름-d) ppm 0.83 (t, J=7.1 Hz, 3 H), 1.71 - 1.78 (m, 1 H), 2.02 - 2.09 (m, 1 H), 2.23 - 2.30 (m, 1 H), 2.30 - 2.36 (m, 1 H), 2.56 - 2.68 (m, 4 H), 2.74 - 2.88 (m, 2 H), 3.74 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.80 - 3.86 (m, 6 H), 3.90 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 6.77 (td, J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 6.89 (dd, J=10.3, 2.7 Hz, 1 H), 7.03 (dd, J=8.4, 5.8 Hz, 1 H), 7.34 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.70 (td, J=7.7, 1.7 Hz, 1 H), 8.16 (dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.58 (ddd, J=4.8, 1.7, 1.0 Hz, 1 H), 10.09 (s, 1 H); 방법 A; Rt: 1.38 min. m/z: 465.2 (M+H)+ 정확한 질량: 464.2;
Figure 112014070558363-pct00093
화합물 54로부터 출발한 화합물 60.
10:90 내지 50:50 EtOAc-헵탄 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제되었다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 1.93 - 2.29 (m, 4 H), 2.54-2.61 (m, 4 H), 2.83 - 2.95 (m, 2 H), 3.52(d, Jab=15.1 Hz, 1 H), 3.56 (d, Jab=15.1 Hz, 1 H), 3.77-3.82 (m, 4 H), 6.80 - 6.91 (m, 2 H), 7.24 (dd, J=8.7, 5.9 Hz, 1 H), 7.37 - 7.41 (m, 1 H), 7.75 (td, J=7.8, 1.5 Hz, 1 H), 8.20 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.59 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 9.70 (s, 1 H). 방법 A; Rt: 1.19 min. m/z: 418.5 (M+H)+ 정확한 질량: 417.2;
라세미 혼합물을 Chiralpak Diacel AD의 분취 SFC(30 x 250 mm)에 의해 거울상이성질체 60a 및 60b로 분리하였다. 이동상(CO2, 0.2% iPrNH2를 가지는 iPrOH), 둘 다 황색 분말인 화합물 60a 및 화합물 60b를 산출함. SFC: 컬럼: AD -H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: CO2 중 10% iPrOH(0.2 % iPrNH2를 함유함), 홀드 15.00 min, 온도: 30˚C, Rt: 화합물 60a: 5.62 min, 60b: 8.72 min
Figure 112014070558363-pct00094
화합물 55로부터 출발한 화합물 61; 10:90 내지 50:50 EtOAc-헵탄을 사용하는 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제되었다. 디이소프로필에테르-CH3CN로부터 침전되었다.
방법 A; Rt: 1.17 min. m/z: 400.5 (M+H)+ 정확한 질량: 399.2;
Figure 112014070558363-pct00095
테트라하이드로퓨란(278 mL) 중 디에틸 말로네이트(11.734 g, 73.3 mmol), 4-플루오로-1-인다논(10 g, 66.6 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 0˚C까지 냉각하였다. 티타늄 테트라클로라이드(140 mL, 1 M 디클로로메탄 중 140 mmol), 뒤이어 피리딘(27.8 mL, 345 mmol)을 적가하였다. 얻어진 혼합물을 상온에서 밤새 교반하였다. 여과 후, 여과물을 에틸 아세테이트(300 mL)로 희석하였다. 유기층을 브린으로 세척하고(3 x 200 mL), 건조하고(Na2SO4) 증발시켰다. 잔류물을 헵탄 중 에틸 아세테이트를 0 내지 10%의 구배로 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 모든 원하는 분획들을 조합하고 약 200 mL의 부피가 얻어질 때까지 증발시켰다. 추가의 헵탄을 첨가하였고, 형성된 주황색 침전물을 여과하고 헵탄으로 세척하였다. 수득된 여과물을 진공에서 건조상태까지 농축하여 주황색 오일로서 화합물 62(8.81 g)를 얻었으며, 오일은 방치 시 응고되었다.
Figure 112014070558363-pct00096
질소 분위기 하에, 둥근 바닥 플라스크를 교반용 막대 자석, 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(9.50 g, 60.3 mmol), N,N-디메틸-포름아미드(120 mL) 및 탄산 나트륨(12.8 g, 121 mmol)으로 채웠다. 반응 혼합물을 상온에서 10분간 교반하였다. 화합물 62(8.81 g, 30.1 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 고무 격막으로 밀봉하고 70˚C에서 17시간 동안 가열하였다. 상온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 얼음 물(300 mL) 내로 투입하고 디이소프로필 에테르로 추출하였다(3 x 200 mL). 조합된 유기 추출물들을 건조하고(Na2SO4), 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 에틸 아세테이트를 0 내지 100%의 구배로 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하였고, 잔류물은 헵탄 중 30% 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하였고, 잔류물은 디클로로메탄 100%를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하여, 화합물 63(430 mg)을 얻었다.
Figure 112014070558363-pct00097
100 mL의 둥근 바닥 플라스크를 화합물 63(430 mg, 1.17 mmol), 메탄올(14.9 mL) 및 KOtBu(197 mg, 1.76 mmol)로 채웠다. 반응 혼합물을 80˚C에서 17시간 동안 교반하고 가열하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였고, 수득된 잔류물을 물로 희석하고 디클로로메탄으로 추출하였다(3 x 100 mL). 조합된 추출물들을 건조하고(Na2SO4), 농축하고 건조하여 고체 폼(foam)으로서 화합물 64(300 mg)를 얻었고, 화합물 64는 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00098
질소 분위기 하에, 튜브를 교반용 막대, 화합물 64(300 mg, 0.841 mmol) 및 옥시염화인(1.17 mL, 12.6 mmol)으로 채웠다. 혼합물을 30분 간 120℃에서 교반하고 가열하였다. 상온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 진공 하에 건조상태까지 증발시켜서, 황갈색 폼으로서 화합물 65(311 mg)가 얻어졌고, 화합물은 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00099
라세미 화합물 66의 거울상이성질체: 화합물 66a 및 화합물 66b
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, (모폴린-4-일)메틸-트리플루오로보레이트 내부 염(287 mg, 1.61 mmol), 화합물 65(300 mg, 0.807 mmol), 탄산 세슘(1.57 g, 4.84 mmol), 물(0.44 μl) 및 1,2-디메톡시에탄(4 mL)을 로딩하였고, 10분 간 질소 기체를 버블링하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(18.3 mg, 0.0807 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(46.3 mg, 0.129 mmol)을 함께 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 오븐 내에서 140˚C로 교반하였다. 반응 혼합물은 상온으로 냉각되었다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였고, 유기층들을 조합하고 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL) 및 물(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하였고(Na2SO4) 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 에틸 아세테이트를 5 내지 100%의 구배로 사용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하여서, 화합물 66(250 mg)이 얻어졌다. 화합물 66(200 mg)을 분취 SFC(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)에 의해 더 정제하였다. 이동상(0.2% iPrNH2를 가지는 메탄올, CO2), 원하는 분획들을 수집하고, 증발시키고, 메탄올에 용해하고 다시 증발시켜서, 진공 오븐에서 50˚C로 밤새 건조한 후, 화합물 66a(70 mg) 및 화합물 66b(80 mg)를 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.23 min. m/z: 437.5 (M+H)+ 정확한 질량: 436.2;
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 2.35 (ddd, J=13.1, 9.1, 3.9 Hz, 1 H), 2.56 - 2.68 (m, 5 H), 2.96-3.12 (m, 1 H), 3.14 - 3.32 (m, 1 H), 3.42 (s, 3 H), 3.71 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.79 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.83 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 6.80 - 6.93 (m, 2 H), 7.12 (td, J=7.8, 5.0 Hz, 1 H), 7.34 (ddd, J=7.4, 4.9, 1.0 Hz, 1 H), 7.70 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.15 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.58 (br. d, J=4.3 Hz, 1 H), 10.03 (br. s., 1 H); SFC: 컬럼: OJ-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: CO2 중 5 % EtOH(0.2 % iPrNH2를 함유함), 홀드 15.00 min, 온도: 30˚C, Rt: 화합물 66a:5.26 min, 66b: 8.34 min
Figure 112014070558363-pct00100
화합물 43e으로부터 출발하여, 절차 D를 사용하고, KOAc 대신 Na2CO3를 사용하고, 110˚C에서 1 시간 대신 70˚C에서 1시간 동안 가열함. 정제는 CH2Cl2를 용리제로 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 수행되었다.
Figure 112014070558363-pct00101
절차 F를 사용하고, 100˚C에서 1.5 시간 동안 가열하여, 화합물 67로부터 제조되었다.
Figure 112014070558363-pct00102
절차 G에 따라 제조되었다. 화합물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: CH2Cl2-MeOH 100:0 내지 98:2)를 사용하여 정제되었다.
방법 A; Rt: 1.14 min. m/z: 404.2 (M+H)+ 정확한 질량: 403.2;
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 2.45 (ddd, J=13.2, 8.5, 5.8 Hz, 1 H), 2.50 - 2.67 (m, 5 H), 3.04 - 3.22 (m, 2 H), 3.52 (s, 2 H), 3.79 (t, J=4.8 Hz, 4 H), 6.88 (td, J=8.7, 2.3 Hz, 1 H), 6.95 (dd, J=8.8, 2.3 Hz, 1 H), 7.10 (dd, J=8.4, 5.1 Hz, 1 H), 7.39 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.75 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.19 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.57 - 8.62 (m, 1 H), 9.67 (br. s., 1 H)
Figure 112014070558363-pct00103
화합물 44로부터 출발하여, EtOH 대신 MeOH를 사용하여, 절차 E에 따라 제조되었다. 수득된 잔류물은 정제 없이 추가로 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00104
110˚C에서 1시간 동안, 화합물 70으로부터 출발하여, 절차 F에 따라 제조되었다.
방법 A; Rt: 1.33 min. m/z: 396.2 (M+H)+ 정확한 질량: 395.1
Figure 112014070558363-pct00105
화합물 71로부터 출발하여, EtOAc-헵탄 0:100 내지 50:50 구배 용리를 사용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되어 절차 G에 따라 제조되었다. 방법 A; Rt: 1.39 min. m/z: 461.2 (M+H)+ 정확한 질량: 460.3; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 1.34 (s, 3 H), 1.40 - 1.47 (m, 1 H), 1.44 (s, 3 H), 1.90 - 1.97 (m, 1 H), 2.44 - 2.57(m, 2 H), 2.57 - 2.68 (m, 4 H), 3.29 (s, 3 H), 3.55 - 3.98 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.80 - 3.88 (m, 5 H), 7.03 - 7.19 (m, 3 H), 7.29 - 7.39 (m, 2 H), 7.68 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.17 (dt, J=8.0 Hz, 1.0 Hz, 1 H), 8.55 - 8.58 (m, 1 H), 10.00 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00106
EtOH 대신 MeOH를 사용하고 60˚C에서 16 시간 동안 교반하여서, 절차 E에 따라 화합물 46으로부터 출발하여 제조되었다.
Figure 112014070558363-pct00107
화합물 73으로부터 출발하여, CH2Cl2-MeOH 100:0 내지 98:2을 가지는 구배 용리를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 정제되어서, 절차 F, 뒤이어 절차 G에 따라 제조되었다. 방법 A; Rt: 1.27 min. m/z: 451.2 (M+H)+ 정확한 질량: 450.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d): ppm 1.72 - 1.82 (m, 1 H), 2.03 - 2.10 (m, 1 H), 2.25 - 2.38(m, 2 H), 2.59 - 2.67 (m, 4 H), 2.83 - 2.90 (m, 2 H), 3.38(s, 3 H), 3.73 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.80 - 3.87 (m, 5 H), 6.74 - 6.83 (m, 2 H), 7.14-7.19 (m, 1 H), 7.32 - 7.37 (m, 1 H), 7.71 (td, J=7.8, 1.5 Hz, 1 H), 8.18 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.57-8.61 (m, 1 H), 9.99 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00108
화합물 43f로부터 출발하여, KOAc 대신에 Na2CO3를 사용하고, 110˚C에서 1시간 대신 75˚C에서 2시간 가열하여, 절차 D에 따라 제조되었다. 정제는 CH2Cl2를 용리제로 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 수행되었다.
Figure 112014070558363-pct00109
화합물 75로부터 출발하여, CH2Cl2-MeOH 100:0 내지 98:2)을 가지는 구배 용리를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 정제되어서, 절차F, 뒤이어 절차 G에 따라 제조되었다. 방법 A; Rt: 1.11 min. m/z: 386.2 (M+H)+ 정확한 질량: 385.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 2.37 - 2.49 (m, 1 H), 2.50 - 2.61 (m, 5 H), 3.02 - 3.25 (m, 2 H), 3.52 (s, 2 H), 3.79 (t, J=4.8 Hz, 4 H), 7.12 - 7.34 (m, 4 H), 7.38 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.74 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.20 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.59 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 9.64 (br. s., 1 H)
Figure 112014070558363-pct00110
화합물 43c(1000 mg, 3.86 mmol), 3,5-디플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드(727 mg, 4.63 mmol) 및 1,4-디옥산(30 mL)을 압력 튜브 내에서 40˚C로 17시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각하고, 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트-헵탄 1:9 내지 10:0 구배)에 의해 색층분석하여 화합물 77(670 mg)이 백색 고체로서 산출되었고, 화합물 77은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 0.98 min. m/z: 371.1 (M+H)+ 정확한 질량: 370.1.
Figure 112014070558363-pct00111
압력 튜브를 메탄올(25 mL)로 채웠다. 혼합물을 얼음수조에서 냉각하였다. 그 후, 냉각을 계속하면서, 30분 간 HCl기체를 버블링하였다. 화합물 77(670 mg) 및 물(증류됨, 78 μl, 4.3 mmol)을 첨가하였고, 압력 튜브를 폐쇄하고 30분간 냉각을 계속하면서 교반하였다. 반응 혼합물을 40˚C 유조에서 주말 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고, CH2Cl2-물(50 mL/50 mL)로 취했다. 수층을 디클로로메탄으로 2회 더 추출하였다(2 x 50 mL). 조합된 추출물을 MgSO4로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여 갈색 오일로서 순수하지 않은 화합물 78이 산출되었고, 화합물 78은 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00112
화합물 78(693 mg)을 옥시염화인(5 mL, 53.8 mmol)에 용해하였고, 이 혼합물을 110˚C 오일조에서 1시간 동안 환류하였다. 진한 갈색 반응 혼합물을 진공에서 농축하고, 얼음물(50 mL)로 처리하였고, 수득된 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 수득된 수층을 CH2Cl2을 사용하여 추출하였다(3 x 50 mL). 조합된 추출물을 MgSO4로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 진한 갈색 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 CH2Cl2)로 색층분석하여 황색 고체로서 화합물 79(180 mg)를 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.17 min. m/z: 422.1 (M+H)+ 정확한 질량: 421.1;
Figure 112014070558363-pct00113
화합물 79(0.18 g)를 마이크로파 바이알 내 DMF(2.6 mL)에 용해하였고, 10분 간 질소로 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(0.084 mL, 0.61 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0.021 g, 0.041 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10분간 가열하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였고, 톨루엔으로 공동 증발시켰다(2 x 5 mL). 수득된 잔류물은 물-CH2Cl2(30 mL-30 mL) 내로 취해지고, 수층을 CH2Cl2(2 x 30 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물들을 Na2SO4로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 미정제물은 분취 HPLC(RP SunFire Prep C18 OBD-10?, 30x150mm)에 의해 정제되었다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, CH3CN), 화합물 80(69 mg) 및 화합물 81(4.6 mg)이 산출됨. 화합물 80: 방법 A; Rt: 1.16 min. m/z: 402.1 (M+H)+ 정확한 질량:401.1; 1H NMR (600 MHz, 클로로포름-d): 70/30 호변체 혼합물(둘 다 기술됨): ppm 1.70 - 1.78 (m, 1 H), 1.80 - 1.86 (m, 2 H), 2.06 - 2.14 (m, 1 H), 2.34 (s, 7 H), 2.39 (s, 3 H), 2.76 - 2.81 (m, 2 H), 2.81 - 2.88 (m, 2 H), 3.38 (s, 3 H), 3.41 (s, 3 H), 6.75 - 6.81 (m, 3 H), 6.87 (td, J=8.5, 2.7 Hz, 1 H), 7.19 - 7.23 (m, 1 H), 7.24 (ddd, J=10.0, 8.0, 2.3 Hz, 1 H), 7.32 (ddd, J=10.3, 8.0, 2.3 Hz, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.7, 5.9 Hz, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 8.24 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 8.27 (d, J=2.2 Hz, 1 H); 화합물 81: 방법 A; Rt: 1.27 min. m/z: 398.2 (M+H)+ 정확한 질량: 397.2;
Figure 112014070558363-pct00114
절차 D에 따라, 화합물 43g으로부터 출발하여, KOAc 대신 중탄산 나트륨(6 당량)을 사용하여 70˚C에서 3시간 동안 가열하고, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: CH2Cl2-MeOH 100:0 --> 98:2)에 의해 정제되어 제조된다. 방법 A; Rt: 0.86 min. m/z: 319.1 (M+H)+ 정확한 질량: 318.1;
Figure 112014070558363-pct00115
압력 튜브를 메탄올(30 mL)로 채우고, 얼음수조에서 냉각하였다. 그 후, 냉각을 계속하면서, HCl 기체를 40분 간 버블링하였다. 화합물 82(1 g)를 혼합물에 첨가하였고, 튜브를 폐쇄하였고, 반응 혼합물을 얼음수조에서 40분간 교반하였다. 다음으로, 반응 혼합물을 40˚C 유조에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각하였고, 진공에서 농축하였다. 잔류물은 H2O-CH2Cl2(50 mL-50 mL) 내로 취해지고, 층들은 분리되었다. 수층을 CH2Cl2을 사용하여 추출하였다(2 x 100 mL). 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 여과하고 진공에서 농축하여 연한 갈색 오일로서 순수하지 않은 화합물 83(890 mg)을 산출하였고, 화합물 83은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00116
화합물 83으로부터 출발하여 절차 F에 따라 제조되었다. 방법 A; Rt: 1.12 min. m/z: 370.1 (M+H)+ 정확한 질량: 369.1;
Figure 112014070558363-pct00117
화합물 84(220 mg)를 마이크로파 바이알 내 N,N-디메틸포름아미드(3.4 mL)에 용해하였고, 10분 간 질소로 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(111 μL, 0.8 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(82 mg, 0.16 mmol)을 첨가하고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였고, 톨루엔으로 공동 증발시켰다(2 x 5 mL). 그 후, 반응 혼합물을 H2O-CH2Cl2(30 mL-30 mL) 내로 취하고, 수층을 CH2Cl2(2 x 30 mL)로 2회 더 추출하였다. 조합된 추출물들을 Na2SO4에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2-메탄올 100:0 내지 98:2 구배)에 의해 색층분석하였고, 화합물을 함유하는 분획들을 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트-헵탄 0:100 -- 15:85 구배)에 의해 재정제하였고, 화합물을 함유하는 분획들을 농축하여, 수득된 잔류물을 분취 HPLC(RP SunFire Prep C18 OBD-10?,30x150 mm)에 의해 정제하였다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, CH3CN). 수득된 잔류물을 메탄올로 공동 증발(2 x 15 mL)시켰고, 진공에서 건조하여, 황색 분말로서 화합물 85(5 mg)를 얻었다. 방법 E; Rt: 1.05 min. m/z: 350.2 (M+H)+ 정확한 질량: 349.1;
Figure 112014070558363-pct00118
절차 G에 따라, 화합물 84로부터 출발하여, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2-메탄올 100:0 내지 98:2 구배)에 의해 정제되어 제조된다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하였고, 수득된 분말을 진공에서 건조하였다.
방법 A; Rt: 1.18 min. m/z: 435.2 (M+H)+ 정확한 질량:434.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.97 (dt, J=13.5, 2.5 Hz, 1 H), 2.50 - 2.68 (m, 4 H), 2.73 (ddd, J=13.5, 12.5, 4.0 Hz, 1 H), 3.37 (s, 3 H), 3.73 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.78 - 3.93 (m, 5 H), 4.24 (ddd, J=10.5, 4.0, 2.5 Hz, 1 H), 4.76 (ddd, J=12.5, 10.5, 2.5 Hz, 1 H), 6.76 - 6.91 (m, 2 H), 7.08 (ddd, J=8.3, 7.3, 1.5 Hz, 1 H), 7.15 (dd, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 7.35 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.71 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.19 (m, J=8.0 Hz, 1 H), 8.58 (m, J=4.5 Hz, 1 H), 10.10 (s, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00119
압력 튜브를 메탄올로 채우고, 얼움수조에서 냉각하였다. 다음으로, 냉각을 계속하면서, HCl 기체를 30분간 버블링하였다. 그 후, 화합물 75(1 g, 3.31 mmol)를 첨가하였고, 압력 튜브를 폐쇄하고 30분간 냉각을 계속하면서 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 오일조 내에서 40˚C로 7 시간 동안 교반하였다. 물(0.15 mL)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 오일조 내에서 40˚C로 17 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각하고, 진공에서 농축하였다. 잔류물은 CH2Cl2-H2O(50 mL-50 mL) 내로 취해졌다. 층들은 분리되었고, 수층을 추출하였다(CH2Cl2-2 x 100 mL). 조합된 추출물들을 MgSO4로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여 갈색 오일로서 화합물 87(750 mg)을 얻었고, 화합물 87은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 0.99 및 1.01 min. m/z: 336.2 (M+H)+ 정확한 질량: 335.1;
Figure 112014070558363-pct00120
화합물 87(0.75 g)을 옥시염화인(5 mL, 53.81 mmol)에 용해하였고, 이 혼합물을 110˚C 오일조에서 1시간 동안 환류하였다. 진한 갈색 반응 혼합물을 진공에서 농축하고, 얼음물(100 mL)로 처리하였다. 수득된 수층을 CH2Cl2을 사용하여 추출하였다(3 x 50 mL). 조합된 추출물들을 MgSO4에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 진한 갈색 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 CH2Cl2)에 의해 색층분석하여, 진한 황색 오일로서 화합물 88(460 mg)이 얻어졌고, 이는 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.15 min. m/z: 354.1 (M+H)+ 정확한 질량: 353.1;
Figure 112014070558363-pct00121
마이크로파 바이알을 화합물 88(0.3 g, 0.81 mmol), 탄산 세슘(1.57 g, 4.83 mmol), 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(0.33 g, 1.61 mmol), 물(증류됨, 0.44 mL) 및 1,2-디메톡시에탄(4.2 mL)으로 채웠다. 혼합물을 5분간 질소 퍼지하였다. 그 후, 팔라듐(II) 아세테이트(0.018 g, 0.081 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(0.046 g, 0.13 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 추가 2분 간 퍼지하였다. 바이알을 캡핑하고 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분간 가열하였다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각하고 CH2Cl2-H2O(50 mL-50 mL)로 취했다. 층들은 분리되었고, 수층을 2회 추출하였다(CH2Cl2 2 x 100 mL). 조합된 추출물들을 건조하고(MgSO4), 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(100:0 내지 98:2 CH2Cl2-메탄올 구배)에 의해 색층분석하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하고 진공에서 더 건조하여, 황색 분말로서 화합물 89(230 mg)을 얻었다. 방법 A; Rt: 1.20 min. m/z: 419.2 (M+H)+ 정확한 질량: 418.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ˚C ppm 2.33 (ddd, J=13.2, 9.0, 4.0 Hz, 1 H), 2.56 - 2.85 (m, 5 H), 3.01 (ddd, J=15.8, 9.5, 4.0 Hz, 1 H), 3.24 (ddd, J=15.8, 9.0, 7.0 Hz, 1 H), 3.40 (s, 3 H), 3.71 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.78 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.80-3.86 (m, 4 H), 7.05 - 7.20 (m, 3 H), 7.21 - 7.25 (m, 1 H), 7.34 (ddd, J=7.5, 5.0, 1.1 Hz, 1 H), 7.70 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 8.17 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.59 (m, 1 H), 9.97 (bs, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00122
화합물 88(160 mg, 0.43 mmol)을 마이크로파 바이알 내 N,N-디메틸포름아미드(2.8 mL)에 용해하였고, 10분 간 질소로 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(89.3 μL, 0.64 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0.066 g, 0.13 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10분 간 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고, 톨루엔으로 공동 증발시켰다(2 x 5 mL). 혼합물을 물-CH2Cl2(30 mL-30 mL)로 취하고, 수층을 CH2Cl2(2 x 30 mL)로 추가 2회 추출하였다. 조합된 추출물들을 Na2SO4에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(100:0 내지 98:2 CH2Cl2-메탄올 구배)에 의해 색층분석하였다. 화합물을 함유하는 분획들을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배: 0:100 내지 15:85 에틸아세테이트 - 헵탄)에 의해 정제하였다. 관련있는 분획들을 농축하고, 분취 HPLC(RP SunFire Prep C18 OBD-10μm, 30x150mm)에 의해 재정제하였다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, 메탄올) 및 분취 HPLC(RP SunFire Prep C18 OBD-10?,30x150mm)에 의해 추가. 이동상(0.1% TFA 수용액 + 5% CH3CN, CH3CN). 수득된 분획들을 CH2Cl2(15 mL)에 용해한 다음 수산화 나트륨(1M aq/10 mL)으로 처리하였다. 층들은 분리되었고, 수층을 CH2Cl2(2 X 15 mL)을 사용하여 2회 추출하였다. 조합된 추출물들을 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(100:0 내지 98:2 CH2Cl2-메탄올 구배)에 의해 색층분석하여, 순수한 황색 오일로서 화합물 90(3.2 mg)을 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.14 min. m/z: 334.1 (M+H)+ 정확한 질량: 333.2
Figure 112014070558363-pct00123
튜브를 교반용 막대, 디메틸 2-(3,3-디메틸-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-일리덴)말로네이트(2.50 g, 9.11 mmol; 화합물 62에 대해 예시된 바와 유사하게 3,3-디메틸인단-1-온 및 디메틸말로네이트로부터 제조됨)으로 채웠다. 워크업(work-up) 및 용매의 증발 후 형성된 결정을 여과하고, 질소 분위기 하에 페트롤륨 에테르, 3,5-디플루오로피리딘-2-카복사미딘(1.72 g, 10.9 mmol), 및 1,4-디옥산(100 mL)으로 세척하였고, 반응 혼합물을 50˚C에서 24시간 및 60˚C에서 5 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(20 내지 100%의 구배인 헵탄 중 디클로로메탄)를 사용하여 정제되어 화합물 91(380 mg)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.11 및 1.14 min. m/z: 400.2 (M+H)+ 정확한 질량: 399.1
Figure 112014070558363-pct00124
교반용 막대가 로딩된 튜브에, 화합물 91(380 mg) 및 옥시염화 인(1.3 mL, 14.3 mmol)을 첨가하였고, 튜브를 테프론 마개로 폐쇄하였다. 반응 혼합물을 120˚C에서 30분간 가열하고, 40˚C에서 질소 유동을 사용하여 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액 및 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜, 황갈색 점성 오일로서 화합물 92(270 mg)가 얻어졌고, 화합물은 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.24. m/z: 418.1 (M+H)+ 정확한 질량: 417.1
Figure 112014070558363-pct00125
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, (모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트 내부 염(230 mg, 1.29 mmol), 화합물 92(270 mg), 탄산 세슘(1.26 g, 3.88 mmol), 물(350 μL, 19.4 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(3.4 mL, 32.3 mmol)을 로딩하였고, 10분 간 질소 기체를 버블링하였다. 질소 분위기 하에 팔라듐(II) 아세테이트(14.6 mg, 0.065 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(37.1 mg, 0.103 mmol)을 함께 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 오븐 내에서 140˚C로 10분간 교반하였다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각하였다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였고(2 x 20 mL), 유기층들을 조합하고 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL) 및 물(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고(Na2SO4) 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 5 내지 50%의 구배로 헵탄 중 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하여, 건조 상태까지 농축 및 진공에서 건조 후 유백색 분말로서 화합물 93(169 mg)이 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.36 m/z: 483.2 (M+H)+ 정확한 질량: 482.2
Figure 112014070558363-pct00126
DMF(20 mL) 중 디메틸 2-(6-플루오로-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-일리덴)말로네이트(2 g, 7.57 mmol; 화합물 62에 대하여 예시된 바와 유사하게 6-플루오로-1-인다논 및 디메틸말로네이트로부터 제조됨), 피리딘-2-카복사미딘 하이드로클로라이드(1.63 g, 10.3 mmol) 및 Na2CO3(2.17 g, 20.5 mmol)의 혼합물을 질소 분위기 하에 60˚C에서 밤새 교반하였다. 용매는 진공에서 제거되었다. 잔류물을 디클로로메탄(100 mL)에 현탁하였고, 형성된 침전물을 여과하여 제거하였다. 진공에서 농축한 후, 여과물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 2회 정제되어(구배: 헵탄 중 0 내지 40% 에틸 아세테이트), 그 다음 CH2Cl2 중 0 내지 2% 메탄올) 화합물 94(254 mg)를 제공하였고, 화합물 94는 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.00 m/z: 354.1 (M+H)+ 정확한 질량: 353.1
Figure 112014070558363-pct00127
질소 분위기 하에, 튜브를 교반용 막대, 화합물 94(254 mg) 및 옥시염화인(0.952 mL, 10.2 mmol)으로 채우고, 테프론 마개로 폐쇄하였다. 혼합물을 120℃에서 30분간 가열하면서 교반하였다. 상온에 도달한 후, 반응 혼합물을 질소 유동 하에 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고, 중탄산 나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 진공 하에 건조상태까지 증발시켜, 진한 갈색 점성 오일로서 화합물 95(230 mg)가 얻어졌고, 화합물 95는 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.14 m/z: 372.1 (M+H)+ 정확한 질량: 371.1
Figure 112014070558363-pct00128
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, (모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트 내부 염(220 mg, 1.24 mmol), 화합물 95(230 mg, 0.619 mmol), 탄산 세슘(1,209 mg, 3.71 mmol), 물(335 μL, 18.6 mmol) 및 1,2-디메톡시에탄(3.2 mL)이 로딩되었고, 10분 간 질소 기체를 버블링 하였다. 질소 분위기 하에, 팔라듐(II) 아세테이트(14.0 mg, 0.062 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(35.5 mg, 0.099 mmol)을 함께 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 오븐 내에서 140˚C로 10분간 교반하였다. 반응 혼합물을 상온에 도달하도록 하였다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였고(2 x 20 mL), 유기층들을 조합하고 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL) 및 물(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고(Na2SO4) 건조상태까지 농축하였다. 잔류물은 5 내지 50%의 구배로 헵탄 중 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제되어, 분말로써 화합물 96(216 mg)이 얻어졌고, 진공에서 건조되었다. 방법 A; Rt: 1.21 m/z: 437.2 (M+H)+ 정확한 질량: 436.2. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.34 (ddd, J=13.1, 9.1, 4.1 Hz, 1 H), 2.58 - 2.68 (m, 5 H), 2.90 - 3.01 (m, 1 H), 3.12-3.22 (m, 1 H), 3.45 (s, 3 H), 3.71 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.80 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.82 - 3.87 (m, 4 H), 6.79 (dd, J=8.9, 2.4 Hz, 1 H), 6.87 (td, J=8.7, 2.5 Hz, 1 H), 7.16 (dd, J=8.3, 5.0 Hz, 1 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.71 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.16 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.59 (br. d, J=4.3 Hz, 1 H), 10.04 (br. s., 1 H). 화합물 96은 분취 SFC(Chiralcel Diacel OD 20 x 250 mm)에 의해 정제되었다. 이동상(CO2, 0.2% iPrNH2를 가지는 메탄올), 원하는 분획들을 수집하고, 증발시키고, 메탄올 내에 용해하고 다시 증발시켜서, 밝은 황색 분말로서 화합물 96a 및 96b를 산출하였다. SFC: OD -H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5% MeOH(0.2 % iPrNH2를 함유함), 10% 비율에서 5-50# MeOH(0.2 % iPrNH2를 함유함)에서부터 홀드 17.00 분 및 50%에서 홀드 3.10 분; 온도: 30˚C. Rt (96a): 10.8 min; Rt (96b): 11.9 min
Figure 112014070558363-pct00129
테트라하이드로퓨란(500 mL) 중 4,5-디플루오로-1-인다논(15 g, 89.2 mmol) 및 디메틸말로네이트(11.2 mL, 98.1 mmol)의 용액을 질소 분위기 하에 0˚C로 냉각하였고, 디클로로메탄(50 mL) 중 티타늄 테트라클로라이드(20.6 mL, 187 mmol)를 적가하였다. 피리딘(37.4 mL, 462 mmol)을 최종적으로 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 상온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 데칼라이트로 여과하였고, 에틸 아세테이트(500 mL)를 여과물 내에 첨가하였다. 유기층을 브린(3 x 200 mL)으로 세척하였다. 조합된 수층을 1N 염산(100 mL)으로 산성화하였고, 에틸 아세테이트(200 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층들을 브린(50 mL)으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4) 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 50% 디클로로메탄 구배)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 조합하고 200 mL의 부피까지 농축하였다. 형성된 고체를 여과하고 헵탄으로 세척하였다. 여과물을 건조상태까지 증발시켜서 갈색 분말로서 화합물 97(3.74 g)을 얻었다. 방법 A; Rt: 1.10 m/z: 300.1 (M+NH4)+ 정확한 질량: 282.1
Figure 112014070558363-pct00130
튜브를 질소 분위기 하에 교반용 막대, 화합물 97(3.00 g, 10.6 mmol), 3,5-디플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드(3.34 g, 21.3 mmol) 및 1,4-디옥산(30 mL)으로 채웠다. 반응 혼합물을 50˚C에서 4시간 동안 가열하고, 밤새 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하였고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 10 내지 50% 에틸 아세테이트 구배)를 사용하여 정제하여 갈색 분말로서 화합물 98(500 mg)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.06 (2종의 이성질체) m/z: 408.1 (M+H)+ 정확한 질량: 407.1
Figure 112014070558363-pct00131
질소 분위기 하에, 튜브를 교반용 막대, 화합물 98(500 mg) 및 옥시염화인(1.0 mL, 11 mmol)으로 채웠다. 혼합물을 120℃에서 30분간 가열하면서 교반하였다. 상온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 질소 유동 하에 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고 중탄산 나트륨 포화 수용액으로 세척하고 건조하고(Na2SO4), 진공에서 건조상태까지 증발하였다. 수득된 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 디클로로메탄)를 사용하여 정제되어 갈색 분말로서 화합물 99(130 mg)가 제공되었다. 방법 A; Rt: 1.12 m/z: 426.1 (M+H)+ 정확한 질량: 425.1
Figure 112014070558363-pct00132
화합물 99(100 mg)를 마이크로파 바이알 내 1,2-디메톡시에탄(1.60 mL, 15.4 mmol)으로 용해하고, 10분간 질소 기체를 버블링함으로써 용액을 탈산소화하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(0.039 mL, 0.28 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(36.0 mg, 0.071 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10분 간 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 질소 기체를 10분 간 버블링하였다. 그 후, 추가의 테트라메틸틴(0.039 mL, 0.282 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(36.0 mg, 0.071 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 20분 간 가열하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하였다. 잔류물은 분취 HPLC(RP SunFire Preperative C18 OBD-10?, 30x150mm)에 의해 정제되었다. 이동상(0.1% TFA 수용액 + 5% 아세토니트릴, 아세토니트릴). 원하는 분획들을 조합하고 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 중탄산 나트륨 포화 수용액으로 중화하고, 디클로로메탄(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층들을 건조하고(Na2SO4) 진공에서 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 메탄올로 공동 증발(2 x 5 mL)시키고, 진공에서 건조하여, 황색 분말로서 화합물 100(21 mg)을 얻었다. 방법 A; Rt: 1.12 m/z: 406.1 (M+H)+ 정확한 질량: 405.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d): ppm 2.25 - 2.46 (m, 4 H), 2.61 - 2.82 (m, 1 H), 2.96 - 3.10 (m, 1 H), 3.12 - 3.30 (m, 1 H), 3.47 (s, 3 H), 6.71 - 7.12 (m, 2 H), 7.17 - 7.39 (m, 1 H), 7.98 (br. s, 1 H), 8.27 (d, J=2.0 Hz, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00133
10 mL 마이크로파 튜브에 교반용 막대, (모폴린-4-일) 메틸트리플루오로보레이트 내부 염(22.6 mg, 0.127 mmol), 화합물 99(30 mg, 0.0705 mmol), 물(34.3 μL, 1.90 mmol), 및 1,2-디메톡시에탄(1.5 mL)을 로딩하였다. 질소 기체를 10분간 버블링하였다. 질소 분위기 하에, 탄산 세슘(124 mg, 0.38 mmol), 팔라듐(II) 아세테이트(1.60 mg, 0.00705 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(4.04 mg, 0.0113 mmol)을 함께 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 오븐 내에서 140˚C로 10분간 교반하였다. 반응 혼합물은 상온으로 냉각되었다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였고(10 mL), 유기층들을 조합하고 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL) 및 브린(5 mL)으로 세척하였다. 유기층을 건조하고(Na2SO4) 건조상태까지 농축하였다. 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(5 내지 50%의 구배인 헵탄 중 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제되어, 진공에서 농축 및 건조 후 황색 분말로서 화합물 101(3.2 mg)이 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.21 m/z: 491.1 (M+H)+ 정확한 질량: 490.2 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 2.40 (ddd, J=13.0, 9.0, 3.8 Hz, 1 H), 2.55 - 2.71 (m, 5 H), 2.98 - 3.10 (m, 1 H), 3.14 - 3.28 (m, 1 H), 3.45 (s, 3 H), 3.67 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.73 - 3.84 (m, 5 H), 6.79 (dd, J=8.3, 4.0 Hz, 1 H), 6.93 (dt, J=10.4, 7.7 Hz, 1 H), 7.20 - 7.33 (m, 1 H), 8.34 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.61 (br. s, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00134
DMF(100 mL) 중 2-브로모페놀(8.6 g, 49.7 mmol)에, K2CO3(34.4 g, 248 mmol)를 상온에서 첨가하였다. 5분 후, 에틸 2-브로모-2,2-디플루오로아세테이트(12.1 g; 59.65 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 상온에서 밤새 교반하였다. 다음으로, 포화 NH4Cl(200 mL)를 첨가하였고, 혼합물을 CH2Cl2로 추출하였다(3x). 조합된 유기층들을 MgSO4로 건조하고, 여과하였고, 용매는 진공에서 제거되었다. 수득된 잔류물은 헵탄/EtOAc를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 상 구배 용리에 의해 정제되어, 에틸 2-(2-브로모페녹시)-2,2-디플루오로아세테이트(7.78 g)가 얻어졌다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) ppm 1.27 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 4.40 (q, J=7.1 Hz, 2 H), 7.30 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 7.36 - 7.45 (m, 1 H), 7.45 - 7.54 (m, 1 H), 7.78 (dd, J=8.0, 1.5 Hz, 1 H). 방법 A; Rt: 1.19.
THF/H2O(50 mL/50 mL) 중 2-(2-브로모페녹시)-2,2-디플루오로아세테이트(3 g, 10.2 mmol)에 LiOH(320 mg, 13.4 mmol)를 첨가하였고, 혼합물을 40˚C에서 교반하였다. 2.5 시간 후, 혼합물은 상온으로 냉각되고, 1 N HCl로 산성화되었고, THF는 진공에서 제거되었다. 수층을 CH2Cl2로 추출하였고, 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고, 여과하였고, 용매를 진공에서 제거하여, 무색 오일로서 2-(2-브로모페녹시)-2,2-디플루오로아세트산(3011 mg, 1H-NMR에 따르면 14 w% THF를 함유함)이 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.21 m/z: 266.9 (M-H)- 정확한 질량: 267.9. 위에서 기술된 바와 같이 제조된 건조 THF(150 mL) 중 2-(2-브로모페녹시)-2,2-디플루오로 아세트산(6.04 g)에 -10˚C에서 아르곤 하에 BuLi(헥산 중 2.5 M; 24.2 mL; 60.4 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 10분간 교반하고, 1 N HCl(200 mL)내로 투입하고, CH2Cl2(3 x)로 추출하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하였다. 용매를 제거(40˚C, 100 mbar까지)하여, 화합물 102를 함유하는 5.5 g의 오일 잔류물이 얻어졌고, 이는 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 D; Rt: 0.99; 19 F NMR (377 MHz, DMSO-d6) ppm -92.77. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) ppm 7.43 (td, J=7.7, 0.7 Hz, 1 H), 7.50 (dt, J=8.5, 0.7 Hz, 1 H), 7.91 (ddd, J=7.7, 1.5, 0.7 Hz, 1 H), 7.98 (ddd, J=8.5, 7.5, 1.5 Hz, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00135
티타늄(IV) 클로라이드를 얼음조(0℃)에서 냉각된 THF(60 mL) 중 2,2-디플루오로인단-1-온(화합물 102; 3.18 g) 및 디메틸 말로네이트(2.5 mL, 21.8 mmol) 용액에 적가하였다. 다음으로, 피리딘(5.8 mL, 73 mmol)을 적가하였고, 반응 혼합물을 0℃에서 2.5 시간, 그 다음 상온에서 64시간 동안 교반하였다. 물(100 mL)을 반응 혼합물에 첨가한 후, CH2Cl2을 사용하여 추출했다(2 x 300 mL). 유기층을 조합하고 건조하였다(Na2SO4). 여과 및 농축 후, 잔류물이 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 10% 에틸 아세테이트)에 의해 정제되어 무색 액체로서 화합물 103(2.6 g)이 산출되었다. 방법 A; Rt: 1.10 m/z: 302.1 (M+NH4)+ 정확한 질량: 284.1
Figure 112014070558363-pct00136
튜브에 교반용 막대, 화합물 103(1.00 g, 3.52 mmol), 3,5-디플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드(693 mg, 3.56 mmol) 및 1, 4-디옥산(5 mL)을 로딩하고 테프론 마개로 폐쇄하였다. 반응 혼합물을 상온에서 12시간 동안 교반하고 40˚C에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 추가의 3,5-디플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드(315 mg, 1.62 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 40˚C에서 4시간 동안 가열하고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 증발시켜 화합물 104를 함유하는 연한 주황색 오일 잔류물을 얻었고, 화합물 104는 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.02 m/z: 410.1 (M+H)+ 정확한 질량: 409.1
Figure 112014070558363-pct00137
튜브에 교반용 막대, 화합물 104(1.32 g, 3.24 mmol), 옥시염화인(4.56 mL, 49.1 mmol)을 로딩하였고, 테프론 마개로 폐쇄하였다. 반응 혼합물을 90˚C에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고 톨루엔으로 공동 증발시켰다. 갈색-검은색 잔류물을 CH2Cl2에 용해하고, 상온에서 30분간 중탄산 나트륨 포화 수용액과 같이 교반하였다. 수상을 디클로로메탄으로 추출하였고, 조합된 유기층들을 건조하고(Na2SO4), 여과 후, 건조상태까지 증발시켰다. 검은 타르질 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄)을 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들 모두를 조합하고 건조상태까지 증발시켜, 황색 분말로서 화합물 105(580 mg)를 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.11 m/z: 428.0 (M+H)+ 정확한 질량: 427.0
Figure 112014070558363-pct00138
마이크로파 바이알 내 DMF(5 mL) 중 화합물 105(580 mg, 1.36 mmol)의 용액을 교반하였고, 10분간 질소를 버블링하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(0.28 mL, 2.0 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(69.3 mg, 0.136 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다.
반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분간 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 여과하였고, 여과물을 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 메탄올(40 mL)과 혼합하고, 여과하였고, 여과물을 건조상태까지 증발시켜 주황색 점성 잔류물(635 mg)을 제공하였다. 540 mg의 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 30% 에틸 아세테이트 구배)를 사용하여 정제되었다. 원하는 분획들을 조합하고 100 mL의 용매를 유지하기 위해 증발시켰다. 고체를 여과하고 헵탄으로 세척하고 50˚C 진공 오븐에서 2시간 동안 건조하여, 밝은 황색 분말로서 화합물 106(32 mg)을 제공하였다. 방법 E; Rt: 1.00 m/z: 408.1 (M+H)+ 정확한 질량: 407.1. 여과물을 건조상태까지 증발시켜서 황색 분말을 제공하였고, 황색 분말은 Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm의 분취 SFC에 의해 정제되었다. 이동상(CO2, 이소프로판올), 원하는 분획들을 수집하고, 증발시키고 메탄올에 용해하고 다시 증발시켜서 화합물 106a(111 mg) 및 화합물 106b를 산출하였다. SFC: 컬럼: OJ-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5% iPrOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.0 min 온도: 23˚C; Rt (106a): 8.37 min; Rt (106b): 9.95 min.
Figure 112014070558363-pct00139
얼음조에서 냉각되면서, 디클로로메탄(30 mL)에 용해된 TiCl4(9.8 mL)를 THF(125 mL)에 용해된 2,2-디플루오로인단-1-온(8.0 g; 47.6 mmol) 및 디메틸 말로네이트(6.3 g; 47.6 mmol) 용액에 10분 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 10분간 교반하였다. 그런 다음, 피리딘(14.9 mL; 185 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 밤새 교반하면서 상온에 도달하도록 하였다. 혼합물을 물(100 mL)로 ?칭하였고 디클로로메탄(300 mL)으로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 2 내지 100% EtOAc 구배 용리에 의한 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 조합하고 농축하여 화합물 107(7.51 g)이 산출되었고, 화합물 107은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.01 m/z: 300.1 (M+NH4)+ 정확한 질량: 282.1; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) ppm 3.50 (t, J=13.4 Hz, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 7.27 - 7.35 (m, 2 H), 7.39 - 7.47 (m, 1 H), 7.66 (d, J=8.5 Hz, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00140
디옥산(100 mL) 중 화합물 107(6.8 g), 2-아미디노피리디늄클로라이드(3.35g; 21.3 mmol), 및 중탄산 나트륨(7.15g)의 혼합물을 교반하고 120˚C에서 5시간 동안 가열하였다. 여전히 따듯하게 유지하면서 반응 혼합물을 여과하였고 여과물을 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물은 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc의 구배 용리를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 조합하고, 농축하고, 진공에서 밤새 건조하여 백색 분말로서 화합물 108(부분입체이성질체 혼합물; 3.83 g)을 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.00 및 1.03 m/z: 372.1 (M+H)+ 정확한 질량: 371.1.
Figure 112014070558363-pct00141
화합물 108(1.05 g)을 옥시염화인(25 mL)에 용해하고, 100˚C에서 210분간 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄(100 mL)에 용해하였고, 혼합물을 교반하면서 NaHCO3(200 mL) 포화 용액에 투입함으로써 ?칭하였다. 유기층을 분리하고, 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하여 황색 미정제 수지(1.05g)를 산출하였고, 수지는 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.15 m/z: 390.1 (M+H)+ 정확한 질량: 389.1.
Figure 112014070558363-pct00142
화합물 109(681 mg) 칼륨(모홀린(morholin)-4-일)메틸트리플루오로보레이트(345.5 mg; 1.67 mmol), K2CO3(319.3 mg; 2.31 mmol), 에틸렌 글리콜 디메틸에테르(5 mL) 및 물(1 mL)의 혼합물에 질소를 버블링하였다. 그 후, (164 mg; 0.32 mmol) 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10 분간 교반하였다. 혼합물을 농축하였고, 잔류물을 물(50 mL) 및 디클로로메탄(50 mL)내로 취하였다. 유기 층을 분리하고, HM-N 카트리지에서 건조하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 조합하고 농축하고, 진공에서 건조하여 황색 수지(214mg)를 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.14 m/z: 455.1 (M+H)+ 정확한 질량: 454.2. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.57 - 2.69 (m, 4 H), 3.36 (s, 3 H), 3.41 - 3.58 (m, 1 H), 3.59 - 3.71 (m, 1 H), 3.75 - 3.88 (m, 6 H), 7.08 - 7.16 (m, 1 H), 7.20 - 7.26 (m, 3 H), 7.37 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.71 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.19 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.56 - 8.64 (m, 1 H), 10.35 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00143
화합물 109(365mg) 테트라메틸틴(185 mg; 1.03 mmol) 에틸렌 글리콜 디메틸에테르(5 mL) 및 DMF(1 mL)의 혼합물에 5분 동안 질소를 버블링하였다. 그 후, (105.5 mg; 0.21 mmol) 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 15 분간 교반하였다. 다른 테트라메틸틴(100 mg)을 첨가하였고, 질소를 5분 동안 버블링하였다. 그 후, 추가의 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(100 mg)을 첨가하였고, 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고, 수득된 잔류물을 CH2Cl2(50 mL) 및 물(50 mL)로 취하였다. 유기 층을 HM-N 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 농축된 생성물 분획들에 대하여 디클로로메탄 중 0 내지 10%의 메탄올 구배를 사용하여 절차를 반복하였다. 생성물 분획들을 조합하고, 농축하고, 진공에서 건조하여, 화합물 111(54 mg)이 산출되었다. 방법 E; Rt: 1.05 m/z: 370.2 (M+H)+ 정확한 질량: 369.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.35 (s, 3 H), 3.27 (s, 3 H), 3.38 - 3.64 (m, 2 H), 7.03 - 7.11 (m, 1 H), 7.18 - 7.30 (m, 3 H), 7.57 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.88 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 7.94 - 8.00 (m, 1 H), 8.64 - 8.70 (m, 1 H), 9.83 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00144
화합물 110(106 mg), 1 M NaOH(2 mL, 2 mmol) 및 메탄올(4 mL)을 마이크로파 조사 하에 140˚C로 3분간 뒤이어 140˚C에서 3분간 더 가열되었다. 메탄올은 진공에서 증류하여 제거하였고, 오일은 디클로로메탄(50 mL)을 사용하여 수층으로부터 추출되었다. 유기 층을 HM-N 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 5 내지 15% EtOAc의 구배를 사용하는 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 농축하고, 진공에서 건조하여, 화합물 112(18.5 mg)가 얻어졌다. 방법 E; Rt: 1.09 m/z: 435.2 (M+H)+ 정확한 질량: 434.2; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.61-2.68 (m, 4 H), 3.39 (s, 3 H), 3.81 - 3.88 (m, 6 H), 5.96 (s, 1 H), 7.04 - 7.10 (m, 1 H), 7.12 - 7.23 (m, 3 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.71 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 8.18 (dt, J=7.9, 1.0 Hz, 1 H), 8.56 - 8.63 (m, 1 H), 10.36 (br. s., 1 H)
Figure 112014070558363-pct00145
디옥산(30 mL) 중 화합물 107(850 mg), 3,5-디플루오로피리딘-2-카복사미딘(627 mg; 3.99 mmol), NaHCO3(894 mg)를 교반하고 60˚C에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하였고, 잔류물을 CH2Cl2(50 mL)내로 취하였다. 용액을 물로 세척하고, HM-N 카트리지로 건조하고, 농축하였다. 잔류물은 5 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피를 거쳤다. 생성물 분획들을 조합하고 농축하고 진공에서 건조하여, 약 8 내지 2 비율의 부분입체이성질체 혼합물인 백색 분말로서 화합물 113(494 mg)이 얻어졌다. 방법 E; Rt: 0.93 및 0.95 m/z: 408.2 (M+H)+ 정확한 질량: 407.1
Figure 112014070558363-pct00146
화합물 113(459 mg)을 옥시염화인에 용해하고 120˚C에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고, 수득된 잔류물을 CH2Cl2(50 mL) 내로 취하고, NaHCO3 포화 용액(150 mL)으로 ?칭하였다. 혼합물을 15분간 활발하게 교반하였다. 유기층을 분리하고, 아이솔루트(isolute) HM-N 카트리지로 건조하고 농축하여 미정제 갈색 분말로서 화합물 114(375 mg)를 산출하였고, 화합물 114는 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 1.05 m/z: 426.1 (M+H)+ 정확한 질량: 425.1
Figure 112014070558363-pct00147
DMF(7 mL)에 용해된 테트라메틸틴(187 mg) 및 화합물 114(375 mg)의 용액에 10분 동안 질소를 버블링하였다. 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(107 mg)을 첨가하였고, 반응은 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 15 분간 교반되었다. 질소를 5분 동안 다시 버블링하였고, 추가의 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(100mg) 및 테트라메틸틴(185mg)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분간 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축하였다. 잔류물을 CH2Cl2(50 mL)에 용해하고, 물로 세척하고, HM-N 카트리지로 건조하고, 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 2.5% 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 조합하고, 농축하고, 진공에서 건조하여, 황색 수지로서 화합물 115(71.7 mg)가 산출되었다. 방법 A; Rt: 1.07 m/z: 406.1 (M+H)+ 정확한 질량: 405.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6; 주요 호변체가 기술됨) ppm 2.27 (s, 3 H), 3.27 (s, 3 H), 3.37 - 3.55 (m, 2 H), 7.02 - 7.13 (m, 1 H), 7.16 - 7.31 (m, 3 H), 8.04 (ddd, J=10.3, 9.1, 2.4 Hz, 1 H), 8.60 (d, J=2.4 Hz, 1 H), 9.91 (s, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00148
아세토니트릴(150 mL) 중 6-플루오로-1-메틸-2,3-디하이드로-1H-인돌-2,3-디온(1751 mg, 9.78 mmol), 우레아(587 mg, 9.78 mmol), 메틸 아세토아세테이트(1.14 g, 9.78 mmol), p-TSA(84.2 mg; 0.49 mmol)를 4일간 환류하였다. 반응 혼합물이 상온으로 냉각되도록 하고 밤새 교반하였다. 결정화되어 나간 생성물 및 밝은 황색 결정을 여과하여 제거하고 진공에서 건조하여 화합물 116(602 mg)이 얻어졌다. 방법 D; Rt: 0.71 m/z: 337.1 (M+NH4)+ 정확한 질량: 319.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.24 (s, 3 H), 3.09 (s, 3 H), 3.30 (s, 3 H), 6.75 (ddd, J=10.0, 8.0, 2.3 Hz, 1 H), 6.93 (dd, J=9.5, 2.3 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J=8.3, 5.5 Hz, 1 H), 7.77 (d, J=1.3 Hz, 1 H), 9.49 (m, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00149
POCl3(25 mL) 중 화합물 116(580 mg 1.82 mmol)을 95˚C에서 6 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔류물을 CH2Cl2(100 mL)에 용해하고 NaHCO3(100 mL) 포화 용액에 투입하였다. 혼합물을 20분간 활발하게 교반하였고, 유기층을 분리하고, HM-N 카트리지로 건조하고, 농축하여 진한 갈색 분말로서 화합물 117을 산출하였고, 화합물 117은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 E; Rt: 0.73 m/z: 338.2 (M+H)+ 정확한 질량: 337.1
Figure 112014070558363-pct00150
DMF(7mL)에 용해된 3,5-디플루오로-2-트리부틸스탄닐피리딘(722 mg, 1.79 mmol), 화합물 117(525 mg)의 혼합물에 질소를 버블링하였다. 그 다음, 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(159 mg, 0.31 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10 분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하고 분취 HPLC(RP Vydac Denali C18 - 10?, 200g, 5cm)에 의해 정제하였다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, CH3CN), 원하는 분획들을 수집하고 증발시키고 MeOH에 용해하고, 다시 증발시키고, 최종적으로 진공에서 건조하여 화합물 118(21 mg)을 얻었다. 방법 E; Rt: 0.85 m/z: 417.1 (M+H)+ 정확한 질량: 416.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.37 (s, 3 H), 3.13 (s, 3 H), 3.35 (s, 3 H), 6.67 - 6.80 (m, 1 H), 6.92 (dd, J=9.7, 2.4 Hz, 1 H), 7.15 (dd, J=8.2, 5.6 Hz, 1 H), 7.93 - 8.15 (m, 1 H), 8.60 (d, J=2.3 Hz, 1 H), 9.13 - 10.47 (bs, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00151
아세토니트릴(500 mL) 중 6-플루오로인돌린-2,3-디온(15.05 g, 91.1 mmol), 우레아(5.47 g, 91.1 mmol), p-TSA(7.85 g, 45.57 mmol) 및 메틸 아세토아세테이트(10.6 g, 91.1 mmol)를 주말 동안 환류하였다. 반응 혼합물이 상온으로 냉각되도록 하였다. 침전물은 여과하여 제거하였다. 침전물을 CH2Cl2(1L) 및 NaHCO3 포화 용액(500mL) 내로 취하였다. 혼합물을 15분간 활발하게 교반하였다. 침전물을 여과하여 제거하고 진공에서 건조하여 미색 분말로서 화합물 119(9.25 g)를 얻었다. 방법 A; Rt: 0.61 m/z: 323.1 (M+NH4)+ 정확한 질량: 305.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.24 (s, 3 H), 3.32 (s, 3 H), 6.57 (dd, J=9.4, 2.3 Hz, 1 H), 6.63 - 6.75 (m, 1 H), 7.13 (dd, J=8.0, 5.6 Hz, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 8.31 - 11.56 (m, 2 H).
Figure 112014070558363-pct00152
아세토니트릴(30 mL) 중 화합물 119(1225mg; 4.0 mmol), 4-메톡시벤질클로라이드(660 mg; 4.2 mmol) 및 탄산 칼륨(693 mg)을 밤새 교반하고 환류하였다. 반응 혼합물을 농축하였고, 잔류물은 CH2Cl2(100 mL) 및 물(100 mL)에 용해하였다. 유기 층을 HM-N 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물은 CH2Cl2 중 2 내지 10% CH3OH의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 조합하고, 농축하고, 진공에서 밤새 건조하여 백색 분말로서 화합물 120(818 mg)을 얻었다. 방법 A; Rt: 0.91 m/z: 443.1 (M+NH4)+ 정확한 질량: 425.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.24 (s, 3 H), 3.07 (s, 3 H), 3.73 (s, 3 H), 4.69 (d, J=15.4 Hz, 1 H), 4.81 (d, J=15.4 Hz, 1 H), 6.68 - 6.81 (m, 2 H), 6.86 - 6.95 (m, J=8.8 Hz 2 H), 7.20 (dd, J=7.9, 5.5 Hz, 1 H), 7.39-745 (m, J=8.8 Hz, 2 H), 7.92 (d, J=1.3 Hz, 1 H), 9.51 (bs, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00153
POCl3(30 mL) 중 화합물 120(758 mg 1.78 mmol)을 100˚C에서 1 시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응 혼합물을 110˚C에서 110 분간 더 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔류물을 CH2Cl2(50 mL)에 용해하고 NaHCO3(100 mL) 포화 용액에 투입하고, 15분간 활발하게 교반하였다. 유기물을 HM-N 카트리지로 건조하고 농축하여서, 진한 갈색 분말을 산출하였고, 갈색 분말은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다. 방법 A; Rt: 1.03 m/z: 444.0 (M+H)+ 정확한 질량: 443.1
Figure 112014070558363-pct00154
화합물 121(513 mg, 1.16 mmol), 3,5-디플루오로-2-트리부틸스탄닐피리딘(700 mg; 1.73mmol) 및 DMF(7mL)의 혼합물에 5분 동안 질소를 버블링하였다. 비스(트리-tert-부틸-포스핀)팔라듐(0)(59 mg, 0.116 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C로 10 분간 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔류물은 CH2Cl2 중 0 내지 10% CH3OH의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 농축하고, 진공에서 건조하여, 미색 분말로서 화합물 122(50 mg)가 산출되었다. 방법 E; Rt: 1.07 m/z: 523.2 (M+H)+ 정확한 질량: 522.2
Figure 112014070558363-pct00155
트리플루오로메탄술폰산(0.1 mL)을 디클로로메탄(10 mL) 중 화합물 122(23 mg)의 용액에 첨가하고, 150분 동안 상온에서 교반하였다. NaHCO3(30 mL) 포화 용액을 첨가하였고, 혼합물을 10분 동안 활발하게 교반하였다. 유기 층을 HM-N 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물은 디클로로메탄 중 0.5 내지 10% CH3OH의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 농축하고, 진공에서 건조하여, 분말로서 화합물 123(10.4 mg)이 얻어졌다. 방법 E; Rt: 0.80 m/z: 403.2 (M+H)+ 정확한 질량: 402.1; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.49 (s, 3 H), 3.51 (s, 3 H), 6.59 (dd, J=8.8, 2.2 Hz, 1 H), 6.61 - 6.68 (m, 1 H), 7.09-7.14 (m, 1 H), 7.23 - 7.30 (m, 1 H), 7.34 (bs, 1 H), 8.29 (m, 2 H)
Figure 112014070558363-pct00156
DMF 중 화합물 103(245 mg; 0.761 mmol), 2-아미디노피리디늄클로라이드(240 mg; 1.52 mmol), 중탄산 나트륨(340 mg, 4.05 mmol)을 80˚C에서 2시간 동안 교반하고 가열하였다. 혼합물은 상온으로 냉각되고, Et2O 및 H2O로 희석하고, Et2O로 추출하였다. 조합된 유기 상들을 Na2SO4로 건조하였다. 여과 및 용매의 증발 후, 수득된 잔류물(239 mg)을 POCl3(5 mL) 내에서 90˚C로 2.5시간 동안 교반하였다. 휘발물들을 진공에서 제거하고, 수득된 잔류물을 CH2Cl2에 용해하고 포화 NaHCO3과 함께 30분간 교반하였다. 혼합물을 CH2Cl2로 추출하고, Na2SO4로 건조하고, 여과 후, 용매를 제거하였다. 검은색 잔류물을 CH2Cl2에 용해하고, 실리카 경로 상에서 여과하였다. CH2Cl2로 헹군 후, 용매가 제거되어 약간 황색을 띄는 잔류물이 얻어졌다. 이 잔류물을 에틸렌 글리콜디메틸에테르(5 mL), 물(0.26 mL), 모폴린-4-일)메틸-트리플루오로보레이트 내부 염(70 mg, 0.41 mmol) 및 K2CO3(79 mg; 0.57 mmol)의 혼합물 내에서 교반하였다. 혼합물에 10분간 질소를 버블링한 다음, 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(40.7 mg, 0.08 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 15분간 가열하였다. CH2Cl2를 첨가하였고, 혼합물은 H2O로 세척하였고, 수층은 CH2Cl2로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물은 헵탄 내지 헵탄/EtOAc 50/50을 사용하는 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되어 화합물 124(35 mg)를 얻었다.
방법 E; Rt: 1.13 m/z: 457.2 (M+H)+ 정확한 질량: 456.2
Figure 112014070558363-pct00157
튜브를 교반용 막대, 디메틸 말로네이트(9.56 mL, 83.2 mmol), 4-플루오로페닐아세틸렌(10 g, 83.2 mmol) 및 인듐(III) 클로라이드(550 mg, 2.49 mmol)로 채우고 폐쇄하였다. 그 후, 반응 혼합물을 130˚C 오일조에서 18 시간 동안 교반하고 상온에 도달하도록 하였다. 수득된 반응 혼합물은 다음 단계에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00158
1,4-디옥산(100 mL) 중 화합물 125(5 g의 위에서 수득된 반응 혼합물), 3,5-디플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드 아세테이트 염(6.46 g, 29.7 mmol) 및 중탄산 나트륨(3.33 g, 39.6)의 혼합물을 교반하고 60˚C에서 1시간 동안 가열하였다. DMF(30 mL)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 60˚C에서 18 시간 동안 더 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 물 내로 투입하였다. 유기물들을 디에틸 에테르(3 x 200 mL)로 추출하고, 조합된 유기층들을 건조하고(Na2SO4), 여과 후, 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 10 내지 50%의 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여, 화합물 126(200 mg)을 얻었다. 방법 A; Rt: 0.97 및 1.02 m/z: 378.1 (M+H)+ 정확한 질량: 377.1.
Figure 112014070558363-pct00159
화합물 126(200 mg)을 옥시염화인(1 mL, 10.8 mmol)에 현탁하고, 120˚C에서 30분간 가열하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 차가운 중탄산 나트륨 포화 수용액에서 10분간 교반하고 CH2Cl2(3 x 5 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층들을 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 농축하였다. 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄 등용매)를 사용하여 정제되어 황색 분말로서 화합물 127(90 mg)이 제공되었다. 방법 A; Rt: 1.07 m/z: 396.0 (M+H)+ 정확한 질량: 395.1
Figure 112014070558363-pct00160
화합물 127(90 mg)을 마이크로파 바이알 내 건조 DME(3 mL)에 용해하였고, 10분 간 질소로 버블링하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(270 μL, 0.195 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(19.9 mg, 0.0389 mmol)을 첨가하였고, 바이알은 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 20분 동안 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(270 μL, 0.195 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(19.9 mg, 0.0389 mmol)을 첨가하였고, 바이알은 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 20분 동안 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 증발시켰고, 잔류물을 분취 HPLC(RP SunFire Prep C18 OBD-10?, 30x150mm)에 의해 정제하였다. 이동상(0.1% TFA 수용액 + 5% 아세토니트릴, 메탄올). 원하는 분획들을 조합하고 건조상태까지 농축하였다. 잔류물은 중탄산 나트륨 포화 수용액으로 중화하고, 디클로로메탄(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층들을 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 메탄올(2x 5 mL)로 공동 증발시켰다. 진공에서 건조한 후, 황색 고체로서 화합물 128(14 mg)이 수득되었다. 방법 A; Rt: 1.04 m/z: 376.1 (M+H)+ 정확한 질량: 375.1; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) d ppm 1.92 (s, 3 H), 2.29 (s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 6.91-7.04 (m, 2 H), 7.20 - 7.37 (m, 1 H), 7.38 - 7.62 (m, 2 H), 7.93 (br. s, 1 H), 8.27 (d, J=2.0 Hz, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00161
튜브를 교반용 막대, 디메틸 말로네이트(8.32 mL, 72.4 mmol), 3,4-플루오로페닐아세틸렌(10.0 g, 72.4 mmol) 및 인듐(III) 클로라이드(479 mg, 2.16 mmol)로 채우고 폐쇄하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 130˚C에서 18시간 동안 교반하고 상온에 도달하도록 하였다. 미정제 반응 혼합물은 다음 반응에서 아래와 같이 사용되었다.
Figure 112014070558363-pct00162
둥근 바닥 플라스크(250 mL) 내에서 DMF(100 mL) 중 화합물 129(15 g의 위에서 수득된 반응 혼합물), 3,5-디플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드(11.3 g, 72 mmol)를 40˚C로 20시간 동안 교반하였다. 용액을 상온으로 냉각하였다. 반응 혼합물을 물(800 mL) 내로 투입하였다. 고체는 여과하여 제거되고 물로 세척되어 점성의 밝은 주황색 검을 제공하였다. 검을 디클로로메탄에 용해하고, 건조하고(Na2SO4), 완전한 건조상태까지 증발시켜, 화합물 130을 함유하는 미정제 혼합물이 얻어졌다(15.6 g). 방법 A; Rt: 1.04 및 1.08 m/z: 396.0 (M+H)+ 정확한 질량: 395.1;
Figure 112014070558363-pct00163
131의 거울상 이성질체: 131a 및 131b
튜브에 교반용 막대, 화합물 130(8.64 g) 및 옥시염화인(30 mL, 323 mmol)을 로딩하였고, 반응 혼합물을 110˚C에서 2.5 시간 및 상온에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시키고, 톨루엔을 첨가하였고, 혼합물을 증발시켜 진한 갈색 잔류물을 제공하였다. 잔류물을 디클로로메탄(200 mL)에 용해하고 중탄산 나트륨 포화 수용액(150 mL)으로 세척하였다. 수층을 디클로로메탄(2 x 200 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층들을 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜서, 진한 갈색 오일을 제공하였다. 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 디클로로메탄)를 사용하여 오일을 정제하여 화합물 131(4.30 g)을 얻었다. 방법 A; Rt: 1.11 m/z: 414.0 (M+H)+ 정확한 질량: 413.1;
라세미 혼합물 131이 분취 SFC(고정상: Chiralcel Diacel OD 20 x 250 mm), 이동상: CO2, 에탄올)에 의해 그의 거울상이성질체 131a 및 131b로 분리되어, 화합물 131a(634 mg) 및 화합물 131b(661 mg)가 산출되었다. OD-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 3 % EtOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 온도: 30˚C; 화합물 131a: Rt: 11.2 min; 화합물 131b: Rt: 12.1 min.
Figure 112014070558363-pct00164
라세미 혼합물 132의 거울상 이성질체: 132a, 132b
마이크로파 바이알 내에서 DMF(10 mL) 중 화합물 131(1500 mg)의 용액을 교반하였고, 10분간에 걸쳐 질소를 버블링하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(0.753 mL, 5.44 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(185 mg, 0.363 mmol)을 첨가하였고, 바이알은 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분 동안 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 여과하였고 여과물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 메탄올(40 mL)과 혼합하고 여과하였다. 여과물을 건조상태까지 증발시켜서 주황색 점성 잔류물을 제공하였고, 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 30%의 에틸 아세테이트 구배 및 등용매 디클로로메탄)를 사용하여 정제되어 황색 고체로서 화합물 132(546 mg)가 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.09 m/z: 394.1 (M+H)+ 정확한 질량: 393.1; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d,); ~9 내지 1 호변체 비율; 주요 호변체가 기술됨) δ ppm 1.89 (s, 3 H), 2.30 (s, 3 H), 3.52 (s, 3 H), 7.05 (dt, J=10.2, 8.4 Hz, 1 H), 7.20-7.24 (m, 1 H), 7.27 - 7.35 (m, 2 H), 7.98 (br. s., 1 H), 8.29 (d, J=1.8 Hz, 1 H). 라세미 혼합물 132(230 mg)는 분취 SFC(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)에 의해 그의 거울상이성질체 132a 및 132b로 분리되었다. 이동상(CO2, 0.2% iPrNH2를 가지는 에탄올), 점성 수지로서 화합물 132a(79 mg) 및 화합물 132b(83 mg)가 산출됨. 컬럼: OJ-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 3% EtOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 온도: 30˚C; 화합물 132a Rt: 7.2 min; 화합물 132b Rt: 8.7 min. 화합물 132a: [α]D 20 : -19.7 ˚(c 0.47 w/v %, DMF). 화합물 132b: [α]D 20: +20.3 ˚(c 0.37 w/v %, DMF)
화합물 132b의 메실화 염
위에서 기술된 바와 유사하게 제조된 화합물 132b(3.01 g, 7.66 mmol)를 이소프로판올(20 mL)에 용해하였고, 이소프로판올(5 mL) 중 메탄술폰산(0.488 mL, 7.51 mmol)을 적가하였다. 용액을 환류하에 가열하면서 디이소프로필 에테르(250 mL)를 포화점에 첨가하였다. 화합물은 환류된 용액으로부터 결정화되었고, 이소프로판올(150 mL)이 첨가되었다. 용액을 30분간 환류한 다음 상온으로 냉각하였다. 형성된 침전물은 여과하여 제거되고, 디이소프로필 에테르(10 mL)로 세척하여 백색 고체로서 화합물 132b.MsOH가 얻어졌고, 화합물 132b.MsOH는 50˚C 진공 오븐에서 건조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δppm 2.03 (br. s, 3 H), 2.27 (s, 3 H), 2.29 (s, 3 H), 3.50 (s, 3 H), 7.40 - 7.46 (m, 1 H), 7.46-7.57 (m, 1 H), 7.61 - 7.81 (m, 1 H), 8.37 (br. t, J=9.0 Hz, 1 H), 8.79 - 8.86 (m, 1 H), 11.92 (br. s., NH). 용융점(DSC; 10˚C/min에서 30 내지 300 ˚C): 196˚C
화합물 132b.(-)-캄판 산(camphanic acid)
마이크로파 바이알 내 DMF(5 mL) 중 화합물 131b(600 mg, 1.45 mmol)의 용액을 교반하였고, 10분간 질소를 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(0.301 mL, 2.18 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(148 mg, 0.29 mmol)을 첨가하였고, 바이알은 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사에 의해 140˚C에서 30분 동안 가열하였고, 그 다음 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르에 용해하고, 물 및 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트)(헵탄 중 10 내지 25%의 에틸 아세테이트)를 사용하여 2회 정제하였다. 원하는 분획들을 약 50 mL까지 농축하고, 고체를 여과해서 제거하고, 여과물을 건조상태까지 증발시켜 점성 오일로서 화합물 132b(287 mg)를 제공하였다. 화합물 132b(287 mg, 0.73 mmol) 및 (-)-캄판산(camphanic acid, 145 mg, 0.73 mmol)을 끓는 에탄올(10 mL)에 용해하였다. 상온으로 냉각한 후, 에탄올을 증발시켰고, 고체를 따듯한 디이소프로필 에테르(12 mL)로부터 재결정화하였고, 혼합물을 상온으로 밤새 냉각하였다. 고체를 여과하고 차가운 디이소프로필 에테르로 세척하였다. 결정들을 50˚C에서 진공하에 건조하여, 밝은 황색 고체로서 화합물 132b.(-)-캄판 산(221 mg)이 얻어졌다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.84 (s, 3 H), 1.00 (s, 6 H), 1.44 - 1.60 (m, 1 H), 1.76 (s, 3 H), 1.84 - 2.03 (m, 2 H), 2.18 (s, 3 H), 2.27 - 2.41 (m, 1 H), 3.43 (s, 3 H), 7.17 - 7.43 (m, 3 H), 8.05 (ddd, J=10.5, 9.0, 2.5 Hz, 1 H), 8.58 (d, J=2.5 Hz, 1 H), 9.55 (br. s., 1 H), 13.52 (br. s, 1H)
Figure 112014070558363-pct00165
메탄올(50 mL)에 용해된 카본 상의 Pd(10%; 100 mg), 아세테이트산 칼륨(84.8 mg; 0.87 mmol) 및 화합물 132(88.5 mg, 0.22 mmol)를 수소 분위기 하에 105분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축하였다. 잔류물을 CH2Cl2(20 mL)에 용해하고, 물로 세척하고, HM-N 카트리지로 건조하고, 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 농축하였고, 수득된 잔류물을 진공에서 건조하여, 황색 수지로서 화합물 133(24.5 mg)이 얻어졌다. 방법 D; Rt: 1.21 m/z: 376.1 (M+H)+ 정확한 질량: 375.1 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, ~9 내지 1의 수득된 호변체, 주요 호변체가 기술됨) ppm 1.77 (s, 3 H), 2.25 (s, 3 H), 3.42 (s, 3 H), 7.16 - 7.24 (m, 1 H), 7.27 - 7.10 (m, 2 H), 7.81 (td, J=8.8, 2.9 Hz, 1 H), 8.09 (dd, J=8.9, 4.7 Hz, 1 H), 8.58 - 8.66 (m, 1 H), 9.47 (s, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00166
마이크로파 바이알에 교반용 막대, 화합물 92(80 mg, 0.191 mmol) 및 DMF(건조)(1.22 mL, 15.7 mmol)를 로딩하였다. 질소 기체를 10분간 버블링하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(39.8 μL, 0.287 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(29.4 mg, 0.0574 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10분간 가열하고, 상온에 도달하도록 하였다. 질소를 10분간 버블링하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(39.8 μL, 0.287 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(29.4 mg, 0.0574 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 20분간 가열하였다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르(50 mL)에 희석하고, 물(3 x 5 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하였고(Na2SO4) 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(1차 정제: 헵탄 중 5 내지 50% 에틸 아세테이트; 2차 CH2Cl2)를 사용하여 2회 정제하였고, 분취 SFC(Chiralpak Diacel AD 30 x 250 mm)를 사용하여 더 정제하였다. 이동상(CO2, 0.2% 이소프로필 아민을 가지는 이소프로판올), 원하는 분획들을 수집하고, 증발시키고 메탄올에 용해하고 다시 증발시켜서 화합물 134a(5.6 mg) 및 화합물 134b(5 mg)를 산출하였다. SFC: 컬럼: AD -H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: CO2 중 10 % iPrOH(0.2 % iPrNH2를 함유함), 홀드 15.00 min, 온도: 30˚C, Rt: 화합물 134a: 6.4 min, 134b: 8.4 min
Figure 112014070558363-pct00167
5-플루오로-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-온(40 g, 266.4 mmol) 및 디메틸 말로네이트(42.2 g, 319.4 mmol)를 건조 THF(1400 mL)에 용해하였다. 건조 CH2Cl2(400 mL) 중 TiCl4(101 g, 532.5 mmol)를 -20℃ 내지 -10℃에서 N2하에 적가하였다. 첨가 후, 피리딘(200 mL)을 -20℃ 내지 -10℃에서 N2 하에 적가하였다. 20℃에서 밤새 혼합물을 교반하였다. 고체는 여과하여 제거하였다. 케이크를 에틸 아세테이트(800 mL)에 용해하고, 현탁액을 5분간 교반하고 여과하였다. 여과물을 진공에서 농축하였고 에틸 아세테이트(800 mL)를 첨가하였다. 침전물은 여과하여 제거하였다. 여과물을 브린(200 mL)으로 세척하였고, Na2SO4로 건조하였다. 용매는 높은 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 DMSO(400 mL)에 용해하고, 여과지, 그 다음으로는 여과막(0.45um) 상에서 여과하였다. 수득된 여과물을 고성능 액체 크로마토그래피(C18, 용리제: 0.1% HCl을 완충액으로 사용하는 15/85 내지 45/55 CH3CN/H2O)에 의해 더 정제하였다. 순수한 분획들을 진공에서 농축하였다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였다(3 x 400 mL). 유기층을 브린(200 mL)으로 세척하고, Na2SO4로 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하여, 화합물 135(24 g)가 얻어졌다.
Figure 112014070558363-pct00168
DMF(60 mL) 중 화합물 135(6 g, 22.7 mmol), 2-아미디노피리디늄클로라이드(5.3 g, 33.6 mmol) 및 Na2CO3(7.2 g, 67.9 mmol)의 혼합물을 N2하에 60℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄(100 mL)에 현탁하였다. 침전물은 여과하여 제거되었다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. (구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 100:0 내지 60:40), 화합물 136(2.5 g)이 얻어짐. 방법 B; Rt: 1.04 m/z: 353.9 (M+H)+ 정확한 질량: 353.1.
Figure 112014070558363-pct00169
POCl3(20 mL, 217 mmol) 중 화합물 136(2.5 g, 7.1 mmol)을 120℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄(60 mL)에 용해하였다. 유기층을 NaHCO3(3x 30 mL) 포화 수용액 및 브린으로 세척하고, Na2SO4로 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 100:0 내지 70:30)에 의해 정제하여, 화합물 137(1.4 g)이 얻어졌다. 방법 B; Rt: 1.20 m/z: 372.0 (M+H)+ 정확한 질량: 371.1
Figure 112014070558363-pct00170
CrO3(34 mg, 0.34 mmol) 및 70% t-BuOOH 수용액(3.02 mL)을 건조 CH2Cl2(4 mL)에 용해하였다. 건조 CH2Cl2(4 mL) 중 화합물 137(385 mg, 1.03 mmol)을 상온에서 N2하에 적가하였다. 첨가 후, 20℃에서 밤새 혼합물을 교반하였다. 고체를 여과하여 제거하였다. 여과물을 진공에서 농축하였고 에틸 아세테이트(15 mL)를 첨가하였다. 얻어진 침전물을 여과하여 제거하였다. 여과물을 브린으로 세척하고(2 x 10 mL), Na2SO4로 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 100:0 내지 10:1)에 의해 정제하여, 화합물 138(110 mg)이 얻어졌다. 방법 B; Rt: 1.05 m/z: 385.9 (M+H)+ 정확한 질량: 385.1
Figure 112014070558363-pct00171
H2O(0.14 mL) 및 DME(1.4 mL) 중 Cs2CO3(0.51 g, 1.56 mmol), 부틸디-1-아다만틸포스핀(CAS:321921-71-5; 0.015 g, 0.042 mmol), Pd(OAc)2(0.006 g, 0.027 mmol), 칼륨 (모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(0.11 g, 0.53 mmol), 및 화합물 138(0.1 g, 0.26 mmol)의 혼합물을 N2하에 140℃에서 마이크로파 조사 하에 20분간 교반하였다. 물(5 mL) 및 디클로로메탄(5 mL)을 첨가하였다. 유기층을 분리하고 물(2 x 5 mL)로 세척하였다. 유기층을 1 N HCl(5 mL)로 세척하였다. 수층을 디클로로메탄(2 x 5 mL)으로 세척하고 pH=7~8까지 NaHCO3로 염기화하였다. 혼합물을 디클로로메탄(15 mL)으로 추출하였다. 유기층을 브린으로 세척하고 Na2SO4로 건조하였다. 잔류물을 RP-18의 분취 고성능 액체 크로마토그래피(용리제: H2O 중 CH3CN(0.1% TFA) 20% 내지 60%, v/v)에 의해 정제하였다. 순수한 분획들을 수집하였고, 용매를 진공에서 제거하여 TFA 염으로서 화합물 139를 얻었다(55 mg). 방법 G; Rt: 3.75 m/z: 451.2 (M+H)+ 정확한 질량: 450.2.
Figure 112014070558363-pct00172
바이알을 연속적으로 화합물 131(2.80 g, 5.96 mmol), 아세토니트릴(25 mL, 481 mmol), 4-디메틸아미노피리딘(72.8 mg, 0.596 mmol) 및 디-tert-부틸 디카보네이트(3.90 g, 17.9 mmol)로 채우고 테프론 마개로 폐쇄하였다. 반응 혼합물을 상온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 10% 내지 20% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 화합물 140(2.73 g)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.32 m/z: 514.1 (M+H)+ 정확한 질량: 513.1.
Figure 112014070558363-pct00173
튜브에 화합물 140(335 mg, 0.652 mmol), 1,4-디옥산(10 mL) 및 탄산 칼륨 포화 수용액(5 mL)을 로딩하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분간 퍼지하였고, 사이클로프로필 트리플루오로보레이트 칼륨 염(144 mg, 0.978 mmol) 및 디클로로 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 팔라듐 II 디클로로메탄 부가물(26.6 mg, 0.0326 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 충진하였고, 튜브를 폐쇄하고 80˚C에서 20시간 동안 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 디클로로메탄(50 mL)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 분리된 유기층을 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 10 mL), 물(5 mL) 및 브린(5 mL)으로 세척하였다. 유기 용액을 건조하였고(Na2SO4), 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0% 내지 15% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 화합물 141(270 mg)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.35 m/z: 520.1 (M+H)+ 정확한 질량: 519.2.
Figure 112014070558363-pct00174
화합물 141(270 mg)을 HCl(메탄올 중 3 M)(20 mL, 60 mmol)에 용해하고, 교반용 막대를 첨가하여 버블링된 용액을 얻었다. 반응 혼합물의 부분(약 1/4)을 45˚C에서 1.5 시간 동안 폐쇄된 튜브 내에서 교반하였다. 용액을 건조상태까지 증발시켜서 점성 잔류물을 얻었다. 디에틸 에테르를 첨가하고 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄(30 mL)에 용해하고 중탄산 나트륨 포화 수용액(10 mL) 및 물(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜서 화합물 142(50.5 mg)를 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.24 m/z: 420.1 (M+H)+ 정확한 질량: 419.1. 1H NMR (400 MHz, 한 방울의 TFA를 함유하는 클로로포름-d) d ppm 0.76 - 0.94 (m, 2 H), 1.07 - 1.23 (m, 2 H), 2.17 (s, 3 H), 2.31 (tt, J=8.6, 5.6 Hz, 1 H), 3.63 (s, 3 H), 7.15 - 7.29 (m, 2 H), 7.33 (ddd, J=10.9, 7.2, 2.3 Hz, 1 H), 7.58 (ddd, J=10.9, 7.1, 2.2 Hz, 1 H), 8.51 (d, J=2.0 Hz, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00175
DME(2.1 mL) 및 물(0.21 mL) 중 Cs2CO3(0.787 g, 2.418 mmol), Pd(OAc)2(9 mg, 0.040 mmol), 부틸디-1-아다만티-일포스핀(23 mg, 0.064 mmol), 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(167 mg, 0.806 mmol), 및 화합물 137(150 mg, 0.403 mmol)의 혼합물을 마이크로파 조사에 의해 140˚C에서 20분 간 N2 분위기 하에 가열하였다. 물(10 mL) 및 디클로로메탄(10 mL)을 첨가하였다. 유기층을 분리하고 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 1N HCl(5 mL)로 추출하였다. 수층을 디클로로메탄(2 x 10 mL)으로 세척하고, NaHCO3로 pH=7 내지 8까지 염기화하였다. 혼합물을 디클로로메탄(2 x 10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 브린으로 세척하고 Na2SO4로 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하였고, 수득된 잔류물을 페트롤륨 에테르(2 mL)로 세척하여 화합물 143(120 mg)이 얻어졌다. 방법 H; Rt: 3.28 m/z: 437.2 (M+H)+ 정확한 질량: 436.2.
Figure 112014070558363-pct00176
NaBH4(12.6 mg, 0.333 mmol)를 MeOH(2 mL) 중 화합물 139(50 mg)에 첨가하였고, 얻어진 혼합물을 20˚C에서 10분간 교반하였다. 용매는 진공에서 제거하였다. 디클로로메탄(10 mL)을 첨가하였고, 혼합물을 물(2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기층을 1N HCl(2 x 10 mL)로 추출하였다. 조합된 수층들은 디클로로메탄(2 x 10 mL)으로 세척하고, 고체 NaHCO3로 pH=7 내지 8로 조정하였다. 수층을 디클로로메탄으로 추출하였다(2 x 10 mL). 조합된 유기층들을 브린으로 세척하고 Na2SO4로 건조하였다. 용매는 진공에서 제거하였다. 잔류물은 RP-18 분취 고성능 액체 크로마토그래피(용리제: H2O 중 CH3CN(0.1% TFA) 15% 내지 25%, v/v)에 의해 정제하였다. 순수한 분획들을 수집하였고, 휘발물을 진공에서 제거하였다. 수층은 Amberlite IRA-900（OH）음이온 교환 수지로 pH=7로 조정되고 수지는 여과하여 제거하였다. 수층을 건조상태까지 동결건조하여 화합물 144(20 mg)가 얻어졌다. 방법 I Rt: 3.80 m/z; 453.3 (M+H)+ 정확한 질량: 452.2.
Figure 112014070558363-pct00177
CCl4(120 mL) 중 화합물 135(12.5 g, 47.3 mmol), NBS(9.3 g, 52.3 mmol) 및 벤조일 페록사이드(12 mg, 0.05 mmol)의 혼합물을 N2하에 80℃에서 밤새 교반하였다. 용매는 진공에서 제거하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 200:1 내지 100:1)에 의해 정제하여, 화합물 135의 모노브롬화 유도체(7.2 g)가 얻어졌다. DMF(60 mL) 중 위에서 수득된 화합물 135의 모노브롬화 유도체(3.6 g, 10.5 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(2.5 g, 16.0 mmol) 및 Na2CO3(3.38 g, 31.9 mmol)의 혼합물을 N2하에 90℃에서 4시간 동안 교반하였다. 용매는 진공에서 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄(100 mL)에 현탁하였다. 침전물을 여과하였고, 수득된 여과물을 진공에서 농축하였다. 얻어진 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세티에트: 50:1 내지 1:5)에 의해 정제하여, 메틸 5-플루오로-6'-옥소-2'-(피리딘-2-일)-5',6'-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(0.4 g)가 얻어졌다. POCl3(10 mL, 105.7 mmol) 중 메틸 5-플루오로-6'-옥소-2'-(피리딘-2-일)-5',6'-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(0.6 g, 1.71 mmol)를 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄(10 mL)에 용해하였다. 유기층을 NaHCO3 포화 수용액(3x 30 mL) 및 브린으로 세척하고, Na2SO4로 건조하였다. 용매는 진공에서 제거하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리제: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트: 100:0 내지 70:30)에 의해 정제하여 메틸 6'-클로로-5-플루오로-2'-(피리딘-2-일)-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(0.07 g)를 얻었다. H2O(0.14 mL) 및 DME(1.4 mL) 중 Cs2CO3(390 mg, 1.20 mmol), 부틸디-1-아다만틸-포스핀(11 mg, 0.033 mmol), Pd(OAc)2(45 mg, 0.2 mmol), 칼륨 (모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(84 mg, 0.41 mmol), 메틸 6'-클로로-5-플루오로-2'-(피리딘-2-일)-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(75 mg, 0.2 mmol)의 혼합물을 N2 분위기 하에 마이크로파 조사에 의해 140℃로 20분간 가열하였다. 물(5 mL) 및 디클로로메탄(5 mL)을 첨가하였다. 유기층을 분리하고 물(2 x 5 mL)로 세척하였다. 유기층을 1N HCl(5 mL)로 추출하였다. 수층은 디클로로메탄(2 x 5 mL)으로 세척하고 pH=7~8까지 NaHCO3로 염기화하였다. 혼합물은 디클로로메탄(15 mL)으로 추출하였다. 유기층은 브린으로 세척하고 Na2SO4로 건조하였다. 용매를 진공에서 제거하여, 화합물 145(12 mg)가 얻어졌다. 방법 H; Rt: 3.29 m/z; 435.2 (M+H)+ 정확한 질량: 434.2. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 10.22 (1 H, br. s), 8.61 (1 H, d, J=4.5 Hz), 8.14 (1 H, d, J=8.0 Hz), 7.71 (1 H, td, J=7.5, 1.5 Hz), 7.36 (1 H, ddd, J=7.5, 5.0, 1.5 Hz), 7.19 (1 H, dd, J=8.0, 5.5 Hz), 6.97 (1 H, dd, J=8.8, 2.5 Hz), 6.81 (1 H, ddd, J=10.0, 8.0, 2.0 Hz), 6.65 (1 H, d, J=5.5 Hz), 6.54 (1 H, d, J=5.5 Hz), 3.82 - 3.89 (4 H, m), 3.81 (1 H, d, J=16.5 Hz), 3.73 (1 H, d, J=16.5 Hz), 3.33 (3 H, s), 2.57 - 2.71 (4 H, m).
Figure 112014070558363-pct00178
THF(500 mL) 및 CH2Cl2(500 mL) 중 디메틸 말로네이트(57.9 g, 439 mmol) 및 5-플루오로-3-메틸-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-온(24 g, 146 mmol)의 용액에 TiCl4(54.7 g, 292 mmol)를 -40℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -40℃에서 30분간 교반하였다. 피리딘(57 g, 731 mmol)을 -40℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 12 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하여 제거하였고, 여과물은 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헥산: 에틸 아세테이트=5:1)에 의해 정제하여, 디메틸 2-(5-플루오로-3-메틸-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-일리덴)말로네이트(9.5 g)가 얻어졌다. ClCH2CH2Cl(50 mL) 중 디메틸 2-(5-플루오로-3-메틸-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-일리덴)말로네이트(9.2 g, 33.09 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드(12 g, 99.2 mmol), Na2CO3(10.5 g, 99.2 mmol) 및 4A 분자체(molecular sieve)(10 g)의 혼합물을 질소 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 용매는 진공에서 제거하였고, 수득된 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헥산: 에틸 아세테이트=1:1)에 의해 정제하여 메틸 5-플루오로-3-메틸-6'-옥소-2'-(피리딘-2-일)-2,3,5',6'-테트라하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(1.5 g)가 얻어졌다. 메틸 5-플루오로-3-메틸-6'-옥소-2'-(피리딘-2-일)-2,3,5',6'-테트라하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(1 g, 2.74 mmol) 및 POCl3(10 mL)의 혼합물을 환류 하에 5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되면, 혼합물을 얼음물(20mL)에 투입하고 에틸 아세테이트로 추출하였다(3 x 10 mL). 조합된 층들을 건조하고 건조상태까지 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(헥산: 에틸 아세테이트=1:1)에 의해 정제하여, 메틸 6'-클로로-5-플루오로-3-메틸-2'-(피리딘-2-일)-2,3-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(0.42 g)가 얻어졌다. 메틸 6'-클로로-5-플루오로-3-메틸-2'-(피리딘-2-일)-2,3-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(400 mg, 1.03 mmol), Pd(OAc)2(22 mg, 0.10 mmol), 부틸디-1-아다만티-일포스핀(35.8 mg, 0.103 mmol), 칼륨 (모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(256 mg, 1.23 mmol), Cs2CO3(669 mg, 2.06 mmol), DME(10 mL) 및 H2O(1 mL)의 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140℃로 50분간 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였고, 수득된 잔류물은 에틸 아세테이트에 용해하고 브린으로 세척하였다(2 x 10 mL). 유기층을 건조상태까지 농축하였다. 미정제 생성물을 분취 고성능 크로마토그래피(용리제: CH3CN/H2O= 30/70 내지 80/ 20, 0.1% CF3COOH)에 의해 정제하였다. 원하는 분획을 수집하였고, 용액의 pH 값을 K2CO3를 사용하여 약 8로 조정하였다. 그런 다음, 유기 용매를 감압 하에 제거하였다. 수층을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층들을 조합하고 Na2SO4로 건조하였다. 용액을 증발시키고 순수한 생성물을 진공에서 건조하여 화합물 146(60 mg, 7/3 부분입체이성질체 혼합물)이 얻어졌다. 방법 J; Rt: 6.44 m/z; 451.2 (M+H)+ 정확한 질량: 450.2.
Figure 112014070558363-pct00179
디옥산(4 mL) 중 탄산 칼륨 포화 용액(2.5 mL) 및 화합물 140(130 mg, 0.24 mmol)의 용액에 10분 동안 질소를 버블링하였다. 칼륨 트랜스-3-메톡시-1-프로페닐트리플루오로보레이트(64 mg, 0.36 mmol) 및 디클로로 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐(II) 디클로로메탄 부가물(9.8 mg, 0.012 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 폐쇄된 튜브에서 2시간 동안 80˚C로 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔류물을 CH2Cl2(30 mL) 및 물(20 mL)에 용해하였다. 유기 층을 HM-N 카트리지로 건조하고 농축하였다. 잔류물은 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 100% EtOAc 용리제)에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 농축하여 투명한 오일로서 (E)-1-tert-부틸5-메틸 4-(3,4-디플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-6-(3-메톡시프로프-1-에닐)-4-메틸피리미딘-1,5(4H)-디카복실레이트(94 mg)가 산출되었다. 디옥산 중 HCl(1 mL, 4 M)을 메탄올(5 mL) 중 위의 화합물(94 mg)의 용액에 첨가하고 상온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 진공에서 밤새 건조하였다. 수득된 잔류물을 CH2Cl2(5 mL)에 용해하고, 포화 NaHCO3(5 mL)로 세척하였고, 유기층은 HM-N 카트리지로 건조하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 진공에서 50˚C로 밤새 건조하여 황색 수지로서 화합물 147(61 mg)이 산출되었다. 방법 K; Rt: 2.20 m/z; 450.2 (M+H)+ 정확한 질량: 449.1.
Figure 112014070558363-pct00180
Figure 112014070558363-pct00181
바이알을 3-클로로-4-플루오로페닐아세틸렌(6 g, 38.8 mmol), 디메틸 말로네이트(4.4 mL, 38.8 mmol) 및 인듐(III) 클로라이드(257 mg, 1.16 mmol)로 채웠다. 혼합물을 130˚C에서 18시간 동안 교반하고, 상온에 도달하도록 하고 아래와 같이 사용하였다. 1,4-디옥산(63 mL) 중 3,5-디플루오로피콜린이미드아미드(3.46 g, 22 mmol) 및 이러한 반응 혼합물의 부분(4.21 g 미정제 혼합물)을 40˚C에서 90분간 교반하고 가열하였다. 얻어진 반응 혼합물을 감압하에 농축하였고, 옥시염화인(27.3 mL, 293.81 mmol)을 첨가하였고, 이 혼합물을 오일조에서 110˚C로 7시간 동안 가열하고 교반하였다. 얻어진 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 수득된 잔류물에 중탄산 나트륨(포화 수용액 150 mL)을 처리하고 30분간 교반하였다. 이를 디클로로메탄(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물들을 Na2SO4로 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하였다. 미정제물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배: 헵탄 - 디클로로메탄 60:40 내지 40:60)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 감압 하에 농축하였다. 수득된 미정제물을 실리카 컬럼 크로마토그래피(구배: 헵탄-에틸 아세테이트 100:0 내지 90:10)를 사용하여 다시 정제하여, 황색 고체로서 메틸 6-클로로-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-4-메틸-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(774 mg)를 산출하였다. 이 화합물(500 mg, 1.16 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 용해하였고, 용액을 10분 간 질소 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(322 μl, 2.32 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(59.4 mg, 0.12 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 60분 간 가열하였다. 혼합물을 진공에서 건조상태까지 증발시켰다. 수득된 잔류물을 디에틸에테르에 용해하고, 유기층을 증류수(3 x 10 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 미정제물을 분취 HPLC(Hypersyl C18 BDS-3?, 100 x 4.6 mm)에 의해 정제하였다. 이동상(물 중 NH4OAc 0.5%, ACN). 원하는 분획들을 수집하였고, 유기 용매를 진공에서 제거하였고, 수층을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층들을 조합하고 감압 하에 농축하여, 황색 고체로서 화합물 148(211 mg) 및 화합물 149(29 mg)를 산출하였다.
화합물 148 방법 A; Rt: 1.13 m/z; 410.1 (M+H)+ 정확한 질량: 409.1.
화합물 149 방법 A; Rt: 1.09 m/z; 390.1 (M+H)+ 정확한 질량: 389.1.
Figure 112014070558363-pct00182
마이크로파 바이알을 메틸 6-클로로-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-4-메틸-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(478 mg, 1.11 mmol), 탄산 세슘(2.18 g, 6.68 mmol), 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(276.5 mg, 1.34 mmol), 증류수(1 mL) 및 1,2- 디메톡시에탄(3 mL)으로 채웠다. 혼합물을 5분간 질소 퍼지하였다. 그 후, 팔라듐(II) 아세테이트(50.4 mg, 0.22 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(63.8 mg, 0.18 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 추가 2분 간 질소로 퍼지하였다. 바이알을 캡핑하고 마이크로파 조사 하에 100˚C에서 25분간 가열하였다. 혼합물을 상온으로 냉각하고 디클로로메탄(5 mL) 및 물(5 mL) 내로 취하였다. 층들은 분리하였고, 수층을 디클로로메탄(2 x 5 mL)으로 추출하였다. 조합된 추출물들을 Na2SO4에서 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하였다. 수득된 미정제물은 분취 HPLC(Hypersyl C18 BDS-3?, 100 x 4.6 mm)에 의해 정제되었다. 이동상(물/아세토니트릴 중 NH4OAc 0.5%). 원하는 분획들을 수집하였고, 유기 용매를 진공에서 제거하였고, 수득된 물은 디클로로메탄(2 x 10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기 층들을 Na2SO4로 건조하였고, 감압 하에 농축하여, 화합물 150을 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.22 m/z; 495.1 (M+H)+ 정확한 질량: 494.1.
Figure 112014070558363-pct00183
라세미 혼합물 151의 거울상이성질체: 151a 및 151b
디클로로메탄(28 mL) 중 티타늄 테트라클로라이드(11.4 mL, 104.1 mmol)를 테트라하이드로퓨란(205 mL)을 함유하는 얼음조에서 냉각된 플라스크에 질소 분위기 하에 적가하였다. 다음으로, 1-(3,4-디플루오로페닐)-2,2-디플루오로-에타논(10 g, 52 mmol) 및 디메틸 말로네이트(5.93 mL, 52 mmol)를 동시에 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 냉각을 계속하면서 질소 분위기 하에 60분간 교반하였다. 그런 다음, 테트라하이드로퓨란(37 mL) 중 피리딘(16.8 mL, 208 mmol)을 혼합물에 첨가하였고, 혼합물은 상온까지 데워지도록 한 후 밤새 교반하였다. 다음으로, 증류수(40 mL) 및 디에틸에테르(40 mL)를 혼합물에 첨가하였다. 층들은 분리되었고, 수층을 디에틸에테르(2 x 40 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물들을 브린(60 mL), NaHCO3(60 mL)(aq/sat), 다시 브린(60 mL)으로 세척하였다. 유기층을 MgSO4로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축하여, 투명한 오일로서 디메틸 2-(1-(3,4-디플루오로페닐)-2,2-디플루오로에틸리덴)말로네이트(15.6 g)가 산출되었다. 디메틸 2-(1-(3,4-디플루오로페닐)-2,2-디플루오로에틸리덴)말로네이트(5 g)를 1,4-디옥산(25 mL)에 용해하고 3,5-디플루오로피리딘-2-카복시미드아미드(3.1 g, 19.6 mmol)를 처리하였다. 얻어진 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축하였고, 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트 - 헵탄 0:100 내지 50:50)에 의해 정제하여, 황색 고체로서 메틸 4-(디플루오로메틸)-4-(3,4-디플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-6-옥소-1,4,5,6-테트라하이드로피리미딘-5-카복실레이트(5.45 g)를 산출하였고, 이는 다음과 같이 사용되었다. 메틸 4-(디플루오로메틸)-4-(3,4-디플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-6-옥소-1,4,5,6-테트라하이드로피리미딘-5-카복실레이트에 옥시염화인(10 mL, 107.6 mmol)을 처리하였고, 혼합물을 환류 하에 2시간 동안 교반하였다.
혼합물을 감압 하에 농축하여 검은 타르를 산출하였고, 검은색 타르에 얼음물(50 mL)을 처리하였다. 검은색 타르는 디클로로메탄(3 x 30 mL)으로 추출하였다. 조합된 추출물을 브린(30 mL)으로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하였다. 수득된 미정제물을 (헵탄 - 디클로로메탄 100:0 내지 25:75)구배 용리를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 약간 황색을 띄는 고체로서 메틸 6-클로로-4-(디플루오로메틸)-4-(3,4-디플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(1.95 g)를 산출하였고, 이는 다음과 같이 사용되었다. 메틸 6-클로로-4-(디플루오로메틸)-4-(3,4-디플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(450 mg, 1 mmol)를 마이크로파 바이알 내에서 N,N-디메틸포름아미드(6.4 mL)에 용해하였고, 이를 10분간 질소로 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(0.21 mL, 1.5 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(51 mg, 0.1 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 10분 간 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하였고, 톨루엔으로 공동 증발시켰다(2 x 20 mL). 수득된 잔류물을 물-디클로로메탄(30 mL-30 mL) 내로 취하였고, 수층을 추가 2회 추출(2 x 30 mL 디클로로메탄)하였다. 조합된 추출물들을 Na2SO4로 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 분취 HPLC(Hypersyl C18 BDS-3?, 100 x 4.6 mm)에 의해 정제하였다. 이동상(물 중 NaHCO3 0.5%, CH3CN). 원하는 분획들을 농축하고, 메탄올(2 x 10 mL)로 공동증발시켰다. 수득된 잔류물을 진공에서 건조하여, 황색 오일로서 화합물 151이 산출되었다. 라세미 혼합물 151은 분취 SFC(고정상: Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm/이동상: CO2, 0.2% iPrNH2를 가지는 EtOH)를 사용하여 거울상이성질체 151a 및 151b로 분리되어, 황색 점성 고체로서 화합물 151a(93 mg) 및 황색 점성 고체로서 화합물 151b(100 mg)가 산출되었다. 화합물 151: 방법 A; Rt: 1.11 m/z; 430.0 (M+H)+ 정확한 질량: 429.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d, 호변체 혼합물, 주요 이성질체가 기술됨) δ ppm 2.36 (s, 3 H), 3.69 (s, 3 H), 6.71 (t, J= 56 Hz, 1 H), 7.07 (dt, J= 10.0, 8.5 Hz, 1 H), 7.26 - 7.31 (m, 1 H), 7.32 - 7.43 (m, 2 H), 8.29 (d, J= 2.0 Hz, 1 H), 8.34 (br. s., 1 H). SFC: 컬럼: OJ-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5 % EtOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min, 온도: 30˚C: 화합물 151a Rt: 3.9 min; 화합물 151b Rt: 4.4 min)
Figure 112014070558363-pct00184
마이크로파 바이알 내에서 DMF(2 mL) 중 화합물 131(180 mg, 0.435 mmol)의 용액을 교반하고, 10분간 질소로 퍼지하였다. 다음으로, 트리부틸(메톡시메틸)스탄난(219 mg, 0.653 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(44.5 mg, 0.087 mmol)을 첨가하고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분 동안 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 점성 오일을 제공하였다. 이 오일은 분취 HPLC(Hypersyl C18 BDS-3?, 100 x 4.6 mm; 이동상(수 중 NH4HCO3 0.2%, 아세토니트릴))를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 조합하고 증발시켜서 잔류 용매(물) 내에 침전물이 형성되었다. 고체를 여과하고 물로 세척하여 50˚C에서 진공하에 건조 후, 유백색 고체인 화합물 152(23 mg)가 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.18 m/z; 424.1 (M+H)+ 정확한 질량: 423.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.92 (s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 3.51 (s, 3 H), 4.61 (d, J=16.0 Hz, 1 H), 4.67 (d, J=16.0 Hz, 1 H), 7.06 (dt, J=10.0, 8.5 Hz, 1 H), 7.15 - 7.22 (m, 1 H), 7.24 - 7.33 (m, 2 H), 8.33 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.04 (br. s, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00185
튜브에 화합물 140(150 mg, 0.277 mmol), 1,4-디옥산(4 mL) 및 탄산 칼륨 포화 수용액(3 mL)을 로딩하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 10분간 퍼지하였고, 칼륨 비닐트리플루오로보레이트(55.7 mg, 0.416 mmol) 및 디클로로 [1,1'-비스 (디페닐포스피노)페로센] 팔라듐 II 디클로로메탄 부가물(11.3 mg, 0.0139 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 충진하였고, 튜브를 폐쇄하고 80˚C에서 20시간 동안 가열하고, 상온에 도달하도록 하였다. 디클로로메탄(25 mL)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 분리된 유기층을 탄산 나트륨 포화 수용액(2 x 5 mL), 물(5 mL) 및 브린(5 mL)으로 세척하였다. 유기 용액을 건조하고(Na2SO4), 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0% 내지 15% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여, 점성의 황색 오일로서 1-tert-부틸 5-메틸 4-(3,4-디플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-4-메틸-6-비닐피리미딘-1,5(4H)-디카복실레이트(60 mg)를 제공하였고, 진공 오븐에서 40˚C로 밤새 건조하였고 다음 단계에서 아래와 같이 사용하였다. 방법 A; Rt: 1.30 m/z; 506.1 (M+H)+ 정확한 질량: 505.2. 1-tert-부틸 5-메틸 4-(3,4-디플루오로페닐)-2-(3,5-디플루오로피리딘-2-일)-4-메틸-6-비닐피리미딘-1,5(4H)-디카복실레이트(60 mg, 0.119 mmol), HCl(디옥산 중 4M)(4.00 mL, 16.0 mmol) 및 메탄올(2 mL)을 1시간 동안 50˚C에서 교반하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 농축하여 황색 점성 잔류물을 제공하였고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 40 내지 100% 디클로로메탄)를 사용하여 정제하여 진공에서 건조 후 화합물 153(41 mg)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.18 m/z; 406.1 (M+H)+ 정확한 질량: 405.1.
Figure 112014070558363-pct00186
마이크로파 바이알 내 DMF(1 mL) 중 화합물 132(75 mg, 0.183 mmol)의 용액을 교반하고, 10분간 질소로 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(38.0 μL, 0.275 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(18.7 mg, 0.0366 mmol)을 첨가하고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 1시간 동안 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 진한 수지를 제공하였다. 생성물을 메탄올(10 mL)과 혼합하고 여과하였다. 여과물을 건조상태까지 증발시켜서 진한 오일 잔류물을 제공하였다. 오일을 디클로로메탄(30 mL)에 용해하고, 물(2 x 10 mL), 브린(5 mL)으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 여과하고, 증발시켜 갈색 오일을 제공하였다. 오일은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 5 내지 30% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 모든 분획들을 조합하고 진공에서 농축하여 황색 점성 오일로서 화합물 154를 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.17 m/z; 390.1 (M+H)+ 정확한 질량: 389.1. 1H-NMR (600 MHz, 벤젠-d6); 호변체 혼합물(~9/1), 주요 이성질체가 기술됨; δ ppm 1.90 (s, 3 H), 2.00 (s, 3 H), 2.34 (t, J=0.6 Hz, 3 H), 3.18 (s, 3 H), 6.52 (ddd, J=9.1, 2.8, 0.7 Hz, 1 H), 6.81 (dt, J=10.2, 8.5 Hz, 1 H), 7.14 - 7.18 (m, 1 H), 7.50 (ddd, J=12.2, 7.8, 2.3 Hz, 1 H), 7.91 (d, J=2.8 Hz, 1 H), 8.21 (br. s., 1 H)
Figure 112014070558363-pct00187
라세미 혼합물 155의 거울상이성질체: 155a 및 155b
DMF(10 mL) 중 2-티아졸카복시미드아미드(1.04 g, 8.18 mmol) 및 화합물 129(2 g, 6.29 mmol)의 혼합물을 60˚C에서 6시간 동안 교반하고 가열하였다. 반응 혼합물을 물 안으로 투입하였고 침전물을 여과하고 디클로로메탄에 용해하였다. 유기 용매를 건조하고(Na2SO4), 진공에서 건조상태까지 농축하여, 메틸 4-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-6-옥소-2-(티아졸-2-일)-1,4,5,6-테트라하이드로피리미딘-5-카복실레이트(1.91 g)를 함유하는 미정제 혼합물이 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.04 m/z; 366.0 (M+H)+ 정확한 질량: 365.1. 폐쇄된 튜브 내 메틸 4-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-6-옥소-2-(티아졸-2-일)-1,4,5,6-테트라하이드로피리미딘-5-카복실레이트(1.91 g 미정제물) 및 POCl3(7 mL, 78 mmol)의 혼합물을 120˚C에서 75분간 교반하였다. 반응 혼합물을 50˚C에서 질소 유동 하에 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄(50 mL)에 용해하고 중탄산 나트륨 포화 수용액(50 mL)으로 세척하였다. 유기상을 건조하고(Na2SO4), 진공에서 농축하여 진한 갈색 잔류물을 제공하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 디클로로메탄)를 사용하여 정제하여 메틸 6-클로로-4-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-(티아졸-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(721 mg 미정제)가 얻어졌다. 방법 A; Rt: 1.10 m/z; 384.0 (M+H)+ 정확한 질량: 383.0. 마이크로파 바이알 내 DMF(2 mL) 중 메틸 6-클로로-4-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-(티아졸-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(356 mg, 0.751 mmol)의 용액을 교반하고 질소로 10분간 퍼지하였다. 테트라메틸틴(156 μL, 1.13 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(76.8 mg, 0.15 mmol)을 첨가하고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분간 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄에 용해하고 물 및 브린으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 건조상태까지 증발시켜서 갈색 오일을 제공하였다. 수득된 미정제물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 10 내지 30% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 화합물 155(153 mg)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.12 m/z; 364.1 (M+H)+ 정확한 질량: 363.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d, 호변체 혼합물(~8/2), 주요 이성질체가 기술됨) δ ppm 1.87 (s, 3 H), 2.29 (s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 7.06 (dt, J=10.0, 8.5 Hz, 1 H), 7.13-7.20 (m, 1 H), 7.23 - 7.32 (m, 1 H), 7.44 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 7.73 (br. s., 1 H), 7.82 (d, J=3.0 Hz, 1 H). 라세미 혼합물 155가 분취 SFC(고정상: Chiralpak Diacel AD 30 x 250 mm), 이동상: CO2, 에탄올)에 의해 거울상이성질체 155a 및 155b로 분리되어, 화합물 155a(54 mg) 및 화합물 155b(50 mg)가 산출되었다. 컬럼: AD-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5% EtOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 온도: 30˚C 화합물 155a Rt (4.0 min) 화합물 155b Rt (4.9 min).
Figure 112014070558363-pct00188
3-클로로-4-플루오로페닐아세틸렌 대신 1-클로로-4-에티닐-2-플루오로-벤젠으로부터 출발하여 화합물 148 및 149에 대하여 기술된 바와 유사한 경로를 통하여 제조되었다. 1, 4-디옥산 중 3, 5-디플루오로피콜린이미드아미드와 디메틸 2-(1-(3-클로로-4-플루오로페닐)에틸리덴)말로네이트의 반응은 40˚C에서 18 시간 동안 수행되었다.
화합물 156: 방법 A; Rt: 1.13 m/z; 410.1 (M+H)+ 정확한 질량: 409.1; 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d, 한 방울의 TFA를 함유함) δ ppm 2.22 (s, 3 H), 2.50 (s, 3 H), 3.60 (s, 3 H), 7.28 (ddd, J=8.4, 2.4, 0.7 Hz, 1 H), 7.33 (dd, J=9.7, 2.2 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J=8.4, 7.5 Hz, 1 H), 7.57 (ddd, J=10.8, 7.0, 2.2 Hz, 1 H), 8.49 (d, J=2.2 Hz, 1 H)
화합물 156.MsOH: 화합물 132b 대신 화합물 156으로부터 출발하여 화합물 132b와 유사하게 제조된다.
화합물 157 방법 A; Rt: 1.09 m/z; 390.1 (M+H)+ 정확한 질량: 389.1
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d, 한 방울의 TFA를 함유함) δ ppm 2.20 (s, 3 H), 2.29 (d, J=1.8 Hz, 3 H), 2.48 (s, 3 H), 3.58 (s, 3 H), 7.13 - 7.21 (m, 2 H), 7.22 - 7.29 (m, 1 H), 7.56 (ddd, J=10.8, 7.2, 2.2 Hz, 1 H), 8.49 (d, J=2.0 Hz, 1 H)
Figure 112014070558363-pct00189
라세미 혼합물 158의 거울상이성질체: 158a 및 158b
화합물 158은 3,5-디플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드 대신 3-플루오로-2-피리딘 카복시미드아미드를 사용하여 화합물 129로부터 화합물 132에 대하여 기술된 바와 유사한 경로를 통하여 제조되었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d, 호변체 혼합물(~9/1), 주요 이성질체가 기술됨) δ ppm 1.90 (s, 3 H), 2.30 (s, 3 H), 3.52 (s, 3 H), 7.05 (dt, J=10.0, 8.0 Hz, 1 H), 7.20-7.26 (m, 1 H), 7.33 (ddd, J=12.0, 8.0, 2.0 Hz, 1 H), 7.41 (ddd, J=8.0, 4.5, 3.5 Hz, 1 H), 7.50 (ddd, J=10.0, 8.5, 1.5 Hz, 1 H), 8.16 (br. s., 1 H), 8.38 (dt, J=4.6, 1.3 Hz, 1 H). 라세미 혼합물 158(135 mg)은 분취 SFC(Chiralpak Diacel AD 30 x 250 mm)에 의해 거울상이성질체 158a 및 158b로 분리되었다. 이동상(CO2, 에탄올), 원하는 분획들을 수집하고, 증발시키고 메탄올에 용해하고 다시 증발시켜서 화합물 158a 및 화합물 158b를 산출하였다. 컬럼: AD-H 250 mm x 4.6 mm, 유동: 3 mL/min; 이동상: 3% EtOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 17.5 min; 온도: 30˚C; 화합물 158a Rt (7.2 min; 376.1 (M+H)+), 화합물 158b Rt (8.6 min; 376.1 (M+H)+).
Figure 112014070558363-pct00190
라세미 혼합물 159의 거울상이성질체: 159a 및 159b
화합물 129(4 g 미정제물), 2-피리미딘카복시미드아미드(2.35 g, 19.2 mmol) 및 1, 4-디옥산(25 mL)의 혼합물을 40˚C에서 72시간 동안 교반하고 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 건조상태까지 증발시켜서 갈색 잔류물을 제공하였다. 이 잔류물 및 옥시염화인(20.9 mL, 225 mmol)을 둥근 바닥 플라스크에서 120˚C로 45분간 교반하였다. 반응 혼합물을 50˚C에서 진공 하에 농축하였고, 톨루엔(2 x 100 mL)으로 공동 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄(250 mL)에 용해하고 중탄산 나트륨 포화 수용액(100 mL)으로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 증발시켜서 진한 갈색 잔류물을 제공하였다. 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 50 내지 100% 디클로로메탄)를 사용하여 밝은 황색 고체인 메틸 6-클로로-4-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-(피리미딘-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(1800 mg)로 정제되었다. 마이크로파 바이알 내 1, 4-디옥산(10 mL) 중 메틸 6-클로로-4-(3,4-디플루오로페닐)-4-메틸-2-(피리미딘-2-일)-1,4-디하이드로피리미딘-5-카복실레이트(900 mg)의 용액을 교반하고 질소로 10분간 퍼지하였다. 다음으로, 테트라메틸틴(494 μL, 3.56 mmol), 뒤이어 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(243 mg, 0.475 mmol)을 첨가하고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사 하에 140˚C에서 30분간 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 교반하고 10분간 질소로 퍼지하였고, 비스(트리-t-부틸포스핀) 팔라듐(0)(121 mg, 0.238 mmol)을 첨가하고 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 반응 혼합물을 마이크로파 조사에 의해 145˚C에서 30분간 가열하였고, 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 디클로로메탄(100 mL)과 혼합하였고, 주황색 침전물을 여과하여 제거하였다. 여과물을 물(2 x 20 mL)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 20 내지 100% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 황색 점성 오일로서 화합물 159를 제공하였다. 방법 A; Rt: 0.86 m/z; 359.2 (M+H)+ 정확한 질량: 358.1. 라세미 혼합물 159를 분취 SFC(고정상: Chiralpak Diacel AD 30 x 250 mm), 이동상: CO2, 에탄올)에 의해 정제하여 황색 분말로서 화합물 159a 및 159b가 산출되었다. 컬럼: AD-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 ml/min; 이동상: 10 % EtOH (0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 온도: 30˚C; 화합물 159a: Rt (3.2 min), 화합물 159b Rt (4.5 min). 1H NMR (360 MHz, 클로로포름-d, 호변체 혼합물(~9/1), 주요 이성질체가 기술됨) δ ppm 1.96 (s, 3 H), 2.34 (s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 7.04 (dt, J=10.0, 8.0 Hz, 1 H), 7.19 - 7.24 (m, 1 H), 7.30 (ddd, J=12.0, 8.0, 3.0 Hz, 1 H), 7.40 (t, J=5.0 Hz, 1 H), 8.41 (br. s., 1 H), 8.86 (d, J=5.0 Hz, 2 H).
Figure 112014070558363-pct00191
160의 거울상이성질체: 160a 및 160b
고압력 튜브를 메틸 아세토아세테이트(54.6 mL, 507 mmol), 3, 4-플루오로페닐아세틸렌(70.0 g, 507 mmol) 및 인듐(III) 클로라이드(5.61 g, 25.3 mmol)로 채우고 폐쇄하였다. 반응 혼합물을 130˚C에서 18시간 동안 교반한 다음 상온으로 냉각하였다. 메틸 2-아세틸-3-(3,4-디플루오로페닐)부트-2-에노에이트를 함유하는 반응 혼합물을 다음 단계에서 아래와 같이 사용하였다. 질소의 분위기 하에, S-메틸이소티오우레아 헤미설페이트(85.2 g, 305.9 mmol), 미정제 메틸 2-아세틸-3-(3,4-디플루오로페닐)부트-2-에노에이트(128.9 g), 중탄산 나트륨(170.3 g, 2.03 mol) 및 건조 N,N-디메틸포름아미드(900 mL)의 혼합물을 50˚C에서 20시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각하고, 질소로 45분간 퍼지하였고, 물을 첨가하였다(600 mL). 수용성 혼합물을 디에틸에테르로 추출하였다(4 x 300 mL). 조합된 유기 추출물들을 물(300 mL) 및 브린(300 mL)으로 세척하고 Na2SO4로 건조하고 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 톨루엔(2 x 200 mL)을 사용하여 공동 증발시켜서 갈색 오일이 얻어졌다. 이를 디클로로메탄(150 mL)에 용해하였다. 3시간 후, 필터 상에서 결정을 수집하고 디클로로메탄(2 x 30 mL)으로 세척하여 백색 결정으로서 화합물 160(25.8 g)을 제공하였다. 방법 A; Rt: 1.04 m/z; 327.1 (M+H)+ 정확한 질량: 326.1. 1H-NMR (400 MHz, 클로로포름-d, 한 방울의 TFA를 함유함) δ ppm 2.04 (s, 3 H), 2.31 (s, 3 H), 2.65 (s, 3 H), 3.54 (s, 3 H), 7.10 - 7.33 (m, 3 H). 라세미 혼합물 160(20 g)은 분취 SFC(고정상: Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm), 이동상: CO2, iPrOH)에 의해 그의 거울상 이성질체 160a 및 160b로 분리되어서, 화합물 160a(9.1 g) 및 160b(실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 15% 에틸 아세테이트)를 사용한 추가 정제 후 8.6 g)가 산출되었다. SFC: 컬럼: OJ-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5 % iPrOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min, 온도: 30˚C 화합물 160a: Rt (6.2-7.0 min); 화합물 160b: Rt (7.4-8.2 min)
대안적인 합성 화합물 155b
마이크로파 바이알을 화합물 160b(200 mg, 0.613 mmol), 구리(I) 브로마이드-디메틸 설파이드(504 mg, 2.45 mmol), 2-(트리부틸스탄닐)티아졸(688 mg, 1.8 mmol) 및 1, 2-디메톡시에탄(6 mL)으로 채웠다. 반응 혼합물을 질소로 채우고 10분간 교반하였고, 팔라듐(II)아세테이트(7 mg, 0.0306 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(22.0 mg, 0.0613 mmol)을 첨가하였다. 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 혼합물은 마이크로파 조사에 의해 140˚C에서 30분 간 가열하고 교반하였다. 혼합물을 CH2Cl2(50 mL)로 희석하고, 암모니아(2 x 50 mL; 25%) 및 브린(50 mL)으로 세척하였다. 그 다음, 혼합물을 Na2SO4로 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 15% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 황색 고체로서 화합물 155b를 제공하였다. 1H NMR ghache_915_1 (400 MHz, DMSO-d6, 한 방울의 TFA를 함유함) δ ppm 1.99 (s, 3 H), 2.28 (s, 3 H), 3.46 (s, 3 H), 7.31 - 7.51 (m, 2 H), 7.58 - 7.71 (m, 1 H), 8.19-8.25 (m, 1 H), 8.25 - 8.34 (m, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00192
마이크로파 바이알을 1,2-디메톡시에탄(9 mL), 화합물 160(295 mg, 0.9 mmol), 2-(트리부틸스탄닐)피라진(854 μL, 2.71 mmol), 구리(I) 브로마이드-디메틸 설파이드(743 mg, 3.61 mmol)로 채웠고, 이를 질소로 퍼지하고 10분간 교반하였다. 그 후, 팔라듐(II) 아세테이트(10 mg, 0.045 mmol) 및 부틸디-1-아다만틸포스핀(32 mg, 0.09 mmol)을 첨가하였고, 바이알을 질소로 충진하고 캡핑하였다. 혼합물을 140˚C에서 30분 간 마이크로파 조사에 의해 교반하고 가열하였다. 혼합물을 디에틸에테르(100 mL)로 희석하고, 암모니아(2 x 100 mL; 25%) 및 브린(100 mL)으로 세척하였다. 그 다음, 혼합물을 MgSO4로 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하였다. 수득된 잔류물을 역상 HPLC(메탄올 - NH4HCO3/컬럼: Hypersil C18 BDS_3 마이크로미터)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 감압 하에 농축하고, 메탄올(2 x 50 mL)로 공동증발시켰다. 잔류물을 (헵탄 - 에틸아세테이트 100:0 내지 70:30) 구배 용리에 의한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 수득된 분획들을 감압 하에 농축하고 55˚C로 진공에서 건조하여 약간의 황색을 띄는 분말로서 화합물 161(46 mg)을 산출하였다. 방법 A; Rt: 1.00 m/z; 359.1 (M+H)+ 정확한 질량: 358.1.
Figure 112014070558363-pct00193
질소 분위기 하에 테트라하이드로퓨란(12.5 mL)에 화합물 160(250 mg, 0.77 mmol), 1-메틸-2-(트리부틸스탄닐)이미다졸(0.54 mL, 1.69 mmol) 및 구리(i) 브로마이드-디메틸 설파이드(346 mg, 1.69 mmol)를 첨가하였다. 용액을 상온에서 10분간 교반한 다음 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(44.26 mg, 0.038 mmol)을 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 24시간 동안 환류하였다. 혼합물을 디칼라이트(dicalite)로 여과하였고, 에틸 아세테이트(50 mL)로 헹구었다. 잔류물을 감압 하에 농축하였다. 수득된 미정제물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리: 디클로로메탄-메탄올: 100:0 내지 99:1)를 사용하여 정제하였다. 원하는 분획물들을 수집하고 감압 하에 농축하여 황색 오일을 산출하였다. 이 오일은 분취 HPLC(RP SunFire Prep C18 OBD-10?, 30x150mm)에 의해 정제되었다. 이동상(0.25% NH4HCO3 수용액, MeOH). 수집된 분획들을 감압 하에 농축하고, 메탄올(2 x 20 mL)을 사용하여 공동증발시켰다. 수득된 잔류물을 55˚C 진공에서 건조하여, 황색 오일로서 화합물 162(21 mg)가 산출되었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.85 (s, 3 H), 2.29 (s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 6.92 (s, 1 H), 7.00 (s, 1 H), 7.01 - 7.10 (m, 1 H), 7.12 - 7.20 (m, 1 H), 7.22 - 7.31 (m, 1 H), 7.92 (br. s., 1 H).
Figure 112014070558363-pct00194
라세미 화합물 163의 거울상 이성질체: 163a, 163b
화합물 131(500 mg, 1.21 mmol), 1,4-디아자비사이클로[2.2.2]옥탄(0.203 g, 1.81 mmol), 테트라부틸암모늄 시아나이드(0.487 g, 1.81 mmol) 및 건조 아세토니트릴(10 mL) 및 분자체를 폐쇄된 마이크로파 튜브 내에서 100˚C로 90분간 교반하고 가열하고 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄(50 mL)에 용해하고 물(50 mL)로 세척하였다. 수층을 디클로로메탄(2 x 50 mL)으로 추출하고, 조합된 유기층을 브린(50 mL)으로 세척하고 건조(Na2SO4)하고 여과하고 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(등용매 디클로로메탄)을 사용하여 정제하였다. 원하는 분획들을 진공에서 농축하고 분취 SFC(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)에 의해 더 정제하였다. 이동상(CO2, 0.2% 이소프로필 아민을 가지는 에탄올), 분리된 거울상이성질체가 산출되고 이는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 95% 에틸 아세테이트)를 사용하여 더 정제되어 황색 분말로서 화합물 163a(24 mg) 및 화합물 163b(25 mg)를 제공하였고 분말은 50˚C 진공 오븐에서 밤새 건조되었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d 한 방울의 TFA를 함유함) d ppm 2.33 (s, 3 H), 3.77 (s, 3 H), 7.21 - 7.33 (m, 2 H), 7.39 (ddd, J=10.5, 7.0, 2.0 Hz, 1 H), 7.58 (ddd, J=10.5, 7.0, 2.0 Hz, 1 H), 8.51 (d, J=2.0 Hz, 1 H). 방법 E; Rt: 1.05 m/z; 405.1 (M+H)+ 정확한 질량: 404.1. SFC: 컬럼: OJ-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 10% EtOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 온도: 30˚C; 화합물 163a Rt (4.5 min); 화합물 163b Rt (5.4 min)
Figure 112014070558363-pct00195
건조 THF(50 mL) 중 아연 분말(704 mg, 10.8 mmol)의 혼합물에 질소 분위기 하에 1,2 디브로모에탄(0.016 mL, 0.181 mmol), 뒤이어 트리메틸클로로실란(114 mg, 1.05 mmol)을 첨가하였다. THF(25 mL) 중 에틸브로모디플루오로아세테이트(2.13 g, 10.50 mmol) 및 2-브로모-5-플루오로-벤즈알데하이드(2.13 g 10.50 mmol)의 용액을 첨가하였고 반응 혼합물을 밤새 환류하였다. 혼합물을 냉각하고 얼음/물(250 mL)에 투입하였다. 교반하면서 HCl 1M(100 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 1 시간동안 교반하고 t-부틸메틸에테르(200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 수득된 잔류물을 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 진공에서 농축하여 에틸 3-(2-브로모-5-플루오로페닐)-2,2-디플루오로-3-하이드록시프로파노에이트(1096 mg)를 산출하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.35 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 4.37 (q, J=7.0 Hz, 2 H), 5.72 (ddd, J=15.7, 6.1, 1.0 Hz, 1 H), 6.99 (ddd, J=8.8, 7.7, 3.1 Hz, 1 H), 7.39 (ddd, J=9.5, 3.1, 1.0 Hz, 1 H), 7.54 (dd, J=8.8, 5.3 Hz, 1 H). 큰 규모의 2-브로모-5-플루오로-벤즈알데하이드(71.2 g, 351 mmol)에 절차를 반복하여 에틸 3-(2-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2-디플루오로-3-하이드록시-프로파노에이트(86 g)를 산출하였다. 얼음조 내 디클로로메탄(500 mL) 중 에틸 3-(2-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2-디플루오로-3-하이드록시-프로파노에이트(86 g)의 용액에 15분 동안 DAST(48.3 mL, 394.4 mmol)를 적가하였다. 밤새 반응 혼합물을 교반하고 상온에 도달하도록 하였다. 혼합물을 15분간에 걸쳐 활발하게 교반되는 NaHCO3 포화 용액(1.5 L)에 천천히 첨가하였다. 혼합물을 30분간 더 교반하였다. 유기층을 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고, 농축하여, 밝은 갈색 오일로서 에틸 3-(2-브로모-5-플루오로페닐)-2,2,3-트리플루오로프로파노에이트(78.0 g)를 산출하였고, 오일은 아래와 같이 사용되었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 4.37-4.44 (m, 2 H), 6.19 - 6.41 (m, 1 H), 7.01 - 7.10 (m, 1 H), 7.29 - 7.37 (m, 1 H), 7.58 (ddd, J=8.9, 5.1, 1.2 Hz, 1 H). 에틸 3-(2-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,3-트리플루오로-프로파노에이트(55.4 g 163.5 mmol), 수산화 리튬(3.92 g, 163.5 mmol), THF(100 mL) 및 증류수(200 mL)를 상온에서 5분간 교반하여 투명한 용액(1층)이 되었다. 반응 혼합물을 HCl 1 M(164 mL)로 산성화시켰다. 얻어진 에멀젼을 CH2Cl2(500 mL)로 추출하였다. 유기층을 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여서 밝은 갈색 오일(58.7 g)을 산출하였다. DMF(7 mmol) 및 디클로로메탄(2.6 L) 중 이 오일의 부분(52.5 g)에 옥살릴클로라이드(89.3 g)를 15분 동안 첨가하였고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여, 밝은 갈색 오일을 산출하였고, 오일은 다음과 같이 사용되었다. 디클로로메탄(1000 mL) 중 오일에, N,O-디메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(16.07 g, 149.8 mmol) 및 탄산 나트륨(17.46 g, 164.8 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 90분간 교반하였다. 물(500 mL)을 첨가하고, 혼합물을 5분간 교반하였다. 유기 층을 분리하고, MgSO4로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 CH2Cl2 중 0 내지 10% CH3OH 구배를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 농축하여 3-(2-브로모-5-플루오로페닐)-2,2,3-트리플루오로-N-메톡시-N-메틸프로판아미드(37.1 g)가 되었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 3.32 (s, 3 H), 3.82 (s, 3 H), 6.41 - 6.64 (m, 1 H), 7.01-7.07 (m, 1 H), 7.34 - 7.41 (m, 1 H), 7.56 (ddd, J=8.9, 5.2, 1.1 Hz, 1 H). 부틸리튬(49.5 mL, 헥산 중 1.6 M)을 건조 THF(225 mL) 중 3-(2-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,3-트리플루오로-N-메톡시-N-메틸-프로판아미드(25.9 g, 75.4 mmol) 용액에 -70˚C에서 30분 동안 첨가하였다. 혼합물을 30분간 교반한 다음 90분 동안 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 HCl(1M, 100 mL)로 ?칭하고, 디이소프로필에테르(250 mL)로 희석하였다. 수층을 CH2Cl2(250 mL)로 2회 추출하였다. 조합된 유기층을 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 농축하여 오일로서 화합물 164(12.6 g)를 산출하였다. 방법 L; Rt: 1.69 m/z; 202.8 (M-H)- 정확한 질량: 204.0. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 5.80 - 6.01 (m, 1 H), 7.42 (tt, J=8.6, 1.8 Hz, 1 H), 7.47 - 7.54 (m, 1 H), 8.00 (ddd, J=8.6, 5.1, 1.3 Hz, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00196
얼음조에서 디클로로메탄(100 mL) 및 건조 THF(100 mL) 중 화합물 164-(2,2,3,5-테트라플루오로인단-1-온; 12.6 g, 61.5 mmol) 및 디메틸말로네이트(12.2 g, 92.3 mmol)의 용액에 CH2Cl2(25 mL)에 용해된 티타늄테트라클로라이드(16.29 mL)를 10분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 10분간 교반하였다. 다음으로 피리딘(21.8 mL)을 5분 동안 첨가하였고, 반응 혼합물을 밤새 교반하면서 상온에 도달하도록 하였다. 반응 혼합물을 물(400 mL)로 ?칭하고, CH2Cl2(500 mL)로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 순수한 생성물 분획들을 조합하고 농축하여 화합물 165(21.0 g, 28% w/w 디메틸말로네이트를 함유함)가 얻어졌다.
방법 L; Rt: 1.86 m/z; 318.9 (M+H)+ 정확한 질량: 318.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 3.90 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 5.75 (ddd, J=53.9, 10.6, 2.9 Hz, 1 H), 7.18 - 7.26 (m, 1 H), 7.30 (dt, J=7.5, 2.0 Hz, 1 H), 7.87 (ddd, J=8.9, 4.9, 1.4 Hz, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00197
라세미 화합물 166의 거울상이성질체: 166a 및 166b
디옥산(100 mL) 중 화합물 165(5.0 g, 11.3 mmol), 2-티아졸카복사미딘 하이드로클로라이드(2.78 g; 17.0 mmol), 중탄산 나트륨(3.33 g)을 50˚C에서 밤새 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 60˚C에서 2시간, 70˚C에서 2시간 80˚C에서 4시간 동안 교반하되, 각각의 시점에 추가의 티아졸카복사미딘(500 mg)을 첨가하였다. 다음으로, 혼합물을 냉각하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 수집하고 농축하여 메틸 2,2,3,5-테트라플루오로-6'-옥소-2'-(티아졸-2-일)-2,3,5',6'-테트라하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트를 함유하는 밝은 황색 점성 오일(2.33g)을 산출하였다. 오일성 잔류물(2.33g)을 POCl3(10 mL) 내에서 120˚C로 5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 수득된 잔류물을 CH2Cl2(100 mL)에 용해하고, NaHCO3(200 mL) 포화 용액에 투입하였다. 혼합물을 15분간 활발하게 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 수득된 잔류물을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 진공에서 농축하여 황색 분말로서 메틸 6'-클로로-2,2,3,5-테트라플루오로-2'-(티아졸-2-일)-2,3-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(799 mg)를 수득하였다. (799 mg). 방법 L; Rt: 1.89 및 1.99 (4/6 비율) m/z; 431.9 (M+H)+ 정확한 질량: 431.0.
DMF(7 mL) 중 메틸 6'-클로로-2,2,3,5-테트라플루오로-2'-(티아졸-2-일)-2,3-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(799 mg)의 용액에 질소를 버블링하였다. 그런 다음, 테트라메틸틴(331 mg, 1.85 mmol) 및 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(95mg, 0.185 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 바이오타지(Biotage) 마이크로파 내에서 140˚C 로 1시간동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 농축하고 진공에서 건조하여, 밝은 황색 수지로서 메틸 2,2,3,5-테트라플루오로-6'-메틸-2'-(티아졸-2-일)-2,3-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(577 mg)를 산출하였다. 방법 L; Rt: 1.91 m/z; 412.3 (M+H)+ 정확한 질량: 411.1. 건조 THF(50 mL)에 용해된 메틸 2,2,3,5-테트라플루오로-6'-메틸-2'-(티아졸-2-일)-2,3-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(565 mg)에 10분 동안 질소를 버블링하였다. 칼륨 비스(트리메틸실릴)아미드(11 mL; 0.5 M 톨루엔, 5.5 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 질소 유동 하에 30분간 교반하였다. 혼합물을 물(10 mL)로 ?칭하고 부분적으로 농축하였다. 잔존물을 CH2Cl2(50 mL) 및 물(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 농축하였고, 수득된 잔류물을 진공에서 50˚C로 건조하여, 황색 분말로서 화합물 166(272 mg)이 얻어졌다. 방법 L; Rt: 2.10 m/z; 392.3 (M+H)+ 정확한 질량: 391.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.44 (s, 3 H), 3.40 (s, 3 H), 6.86 (ddd, J=10.0, 8.0, 2.5 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J=8.0, 2.5 Hz, 1 H), 7.15 (ddd, J=8.0, 5.0, 2.5 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 7.85 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 8.01 (br. s., 1 H). 라세미 혼합물 166을 분취SFC(고정상: Chiralcel Diacel OD 20 x 250 mm), 이동상: CO2, 이소프로판올)에 의해 거울상이성질체로 분리하였고, 원하는 분획들을 수집하고 증발시키고 MeOH에 용해하고 다시 증발시켜서 황색 오일로서 화합물 166a(103 mg) 및 화합물 166b(96 mg)가 얻어졌다. 컬럼: OD-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5% iPrOH(0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min; 온도: 30˚C; 화합물 166a Rt (9.9 min) 화합물 166b Rt (11.0 min).
Figure 112014070558363-pct00198
부분 입체이성질체 혼합물 167의 분리된 부분입체이성질체: 167A 및 167B
화합물 165(10.2 g, 23.1 mmol), 피리딘-2-카복시미드아미드 하이드로클로라이드(6.37g, 40.4 mmol), 중탄산 나트륨(7.76 g, 92.4 mmol) 및 디옥산(200 mL)을 60˚C에서 6시간 동안 가열하고 교반하고 40˚C에서 밤새 더 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 농축하여 밝은 황색 무정형 분말로서 메틸 2,2,3,5-테트라플루오로-6'-옥소-2'-(피리딘-2-일)-2,3,5',6'-테트라하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트(6.1g)를 산출하였다. CaCl2 건조 튜브를 가지는 옥시염화인(50 g) 중 메틸 2',2',3',5'-테트라플루오로-6-옥소-2-(2-피리딜)스피로[1,5-디하이드로피리미딘-4,1'-인단]-5-카복실레이트 용액을 110˚C에서 210분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 농축하였고, 잔류물을 CH2Cl2(200 mL)에 용해하고 NaHCO3(200 mL) 포화 용액에 투입하고 30분간 교반하였다. 유기층을 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 메틸 6'-클로로-2,2,3,5-테트라플루오로-2'-(피리딘-2-일)-2,3-디하이드로-1'H-스피로[인덴-1,4'-피리미딘]-5'-카복실레이트를 2종의 별개의 부분입체이성질체로 분리하였다: 그리고 화합물 167A(제2 정제 후 1046 mg) 및 화합물 167B(1705 mg)
화합물 167A: 방법 L; Rt: 1.94 m/z; 425.9 (M+H)+ 정확한 질량: 425.1.
화합물 167B: 방법 L; Rt: 2.06 m/z; 425.9 (M+H)+ 정확한 질량: 425.1.
Figure 112014070558363-pct00199
부분입체이성질체 혼합물 168의 분리된 부분입체이성질체: 168A 및 168B
에틸렌 글리콜 디메틸에테르(5 mL) 및 물(2.3 mL) 중 화합물 167B(1705 mg) 칼륨(모폴린-4-일)메틸트리플루오로보레이트(1658 mg, 8.0 mmol), 탄산 칼륨(1384 mg, 10 mmol)의 혼합물을 10분 동안 질소로 충진하였다. 그런 다음, 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(1614 mg, 20 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 바이오타지 마이크로파 내에서 140˚C로 45분간 가열하였다. 혼합물을 농축하였고, 잔류물을 물(50 mL) 및 CH2Cl2(50 mL)내로 취하였다. 유기 층을 MgSO4로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 농축하고, 진공에서 건조하여서, 황색 분말로서 화합물 168B(923 mg)이 산출되었다. 방법 L; Rt: 2.07 m/z; 491.1 (M+H)+ 정확한 질량: 490.2. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.51 - 2.73 (m, 4 H), 3.43 (s, 3 H), 3.71 - 3.93 (m, 6 H), 5.96 (ddd, J=55.0, 10.1, 3.7 Hz, 1 H), 7.05 - 7.24 (m, 3 H), 7.41 (ddd, J=8.0, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.75 (td, J=8.0, 1.8 Hz, 1 H), 8.23 (dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.56 - 8.68 (m, 1 H), 10.55 (s, 1 H). 화합물 167A는 화합물 168B에 대해 기술한 바와 유사하게 화합물 168A로 전환되어 황색 고체로서 화합물 168A(470 mg)가 얻어졌다. 방법 L; Rt: 2.08 m/z; 491.1 (M+H)+ 정확한 질량: 490.2. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.61-2.68 (m, 4 H), 3.39 (s, 3 H), 3.77 - 3.92 (m, 6 H), 6.12 (dt, J=54.6, 8.1 Hz, 1 H), 7.06-7.14 (m, 1 H), 7.15 - 7.24 (m, 2 H), 7.39 (ddd, J=7.6, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.73 (td, J=7.8, 1.7 Hz, 1 H), 8.07 (dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.57 - 8.65 (m, 1 H), 10.50 (s, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00200
리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(4.0 mL, 1M THF)를 건조 THF (50 mL) 중 화합물 168A(0.811 mmol, 398 mg) 용액에 첨가하고 상온에서 30분간 교반하였다. 반응 혼합물을 물(30 mL)로 ?칭하고 CH2Cl2(50mL)로 2회 추출하였다. 유기층을 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 10 내지 100% EtOAc를 사용한 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 50˚C에서 진공에서 농축하여 황색 분말로서 화합물 169(329 mg)를 산출하였다. 방법 L; Rt: 2.16 m/z; 471.1 (M+H)+ 정확한 질량: 470.2. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.55 - 2.71 (m, 4 H), 3.40 (s, 3 H), 3.78 - 3.92 (m, 6 H), 6.84 (ddd, J=9.7, 8.1, 2.4 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J=8.4, 2.4 Hz, 1 H), 7.11 (ddd, J=8.1, 4.8, 2.1 Hz, 1 H), 7.39 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.1 Hz, 1 H), 7.74 (td, J=7.8, 1.7 Hz, 1 H), 8.15 (dt, J=8.0, 0.9 Hz, 1 H), 8.56 - 8.66 (m, 1 H), 10.47 (s, 1 H). 화합물 169는 화합물 168B로부터 출발하여 168A 에 기술된 바와 유사한 방식으로 제조될 수 있다.
Figure 112014070558363-pct00201
TFA(4.6 mL, 59.8 mmol)를 사이클로헥산(500 mL) 중 4,5-디플루오로-1-인다논(50.3 g, 299.2 mmol) 및 부틸아민(26.3 g, 359 mmol) 용액에 첨가하였고, 혼합물을 Dean Stark 장치에서 밤새 환류하였다. 반응 혼합물을 농축하고 잔류물을 디이소프로필에테르(300 mL)에 용해하였다. 용액을 NaHCO3 포화 용액으로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하여 방치 시 응고되는 진한 적색 액체를 산출하였다. 수득된 미정제물(61.4 g)을 다음과 같이 사용하였다. N-부틸-4,5-디플루오로-인단-1-이민(28.2 g, 위의 미정제 혼합물의 일부)를 건조 아세토니트릴(500 mL)에 용해하고, 황산 나트륨(8.46g, 59.6 mmol), 뒤이어 1-클로로메틸-4-플루오로-1,4-디아조니아비사이클로[2.2.2]옥탄 비스(테트라플루오로보레이트)(60.1 g, 169.7 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 환류하고 교반하였다. 반응 혼합물을 5분간 냉각될 수 있도록 한 후, 교반하면서 HCl 37%(45 mL)을 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 10분간 교반한 다음 진공에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 디이소프로필에테르(800 mL)로 밤새 추출하고, 디캔팅하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 물에 현탁하고 디이소프로필에테르(500 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층들을 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc 용리 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 진공에서 농축하여 화합물 170(6.98 g)을 산출하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 3.61 (t, J=12.3 Hz, 2 H), 7.28 - 7.40 (m, 1 H), 7.65 - 7.76 (m, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00202
CH2Cl2(25 mL)에 용해된 티타늄 테트라클로라이드(7.94 g, 68.4 mmol)를 10분 동안 얼음조에서 THF(150 mL) 및 디클로로메탄(150 mL) 중 2,2,4,5-테트라플루오로인단-1-온(11 mL, 99 mmol) 및 메틸 아세토아세테이트(6.98 g, 34.2 mmol) 용액에 적가하였다. 반응 혼합물을 10분간 교반하였다. 다음으로, 피리딘(13.5 mL, 167.5 mmol)을 5분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 상온에 도달하도록 하고 5일 간 더 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 ?칭하고 디클로로메탄(200 mL)으로 추출하였다. 유기층을 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 5 내지 100% EtOAc 구배를 사용한 실리카 상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 농축하여 갈색 수지로서 화합물 171(E/Z 혼합물, 6.17 g)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) E/Z 또는 Z/E 혼합물 85/15, 주요 이성질체가 기술됨: δ ppm 2.50 (s, 3 H), 3.55 (t, J=13.2 Hz, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 7.04 - 7.19 (m, 1 H), 7.26 - 7.31 (m, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00203
DMF(100 mL) 중 화합물 171(5.86 g, 19.39 mmol), 2-메틸-2-티오슈도우레아 설페이트(4.05 g 14.5 mmol) 및 중탄산 나트륨(6.0 g, 116.3 mmol)을 50˚C에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물(800 mL)에 투입하고 디에틸에테르(400 mL)로 3회 추출하였다. 또한 수층을 디클로로메탄(500 mL)으로 2회 추출하였다. 유기층들을 물로 세척하고, 황산 나트륨으로 건조하고 여과하고 함께 농축하였다. 잔류물을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc 구배를 사용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물 분획들을 조합하고 진공에서 농축하여 갈색 고체로서 화합물 172(5.89 g)를 산출하였다. 방법 L; Rt: 1.97 m/z; 375.3 (M+H)+ 정확한 질량: 374.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d, -4˚C): ~4/1 호변체 혼합물, 주요 이성질체가 기술됨: ppm 2.27 (s, 3 H), 2.33 (s, 3 H), 3.43 (s, 3 H), 3.54 (dd, J=17.3, 9.3 Hz, 2 H), 6.71 (br. s, 1 H), 6.84 (dd, J=8.3, 4.0 Hz, 1 H), 7.02 - 7.11 (m, 1 H).
Figure 112014070558363-pct00204
DME(25 mL) 중 화합물 172(2.83 g, 7.56 mmol) 2-(트리부틸스탄닐)티아졸(8.5g 22,8 mmol), 구리(I)브로마이드-디메틸 설파이드(6.2g 30.24 mmol)의 혼합물에 10분 동안 질소를 버블링하고 3개의 마이크로파 바이알로 나눈다. 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(290mg, 0.257 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 140˚C로 30 분간 마이크로파 조사하였다. 혼합물을 수 중 암모니아(500 mL, 25%)에 투입하였고, 에테르(250 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 황산 나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피를 거쳤다. 생성물 분획들을 진공에서 농축하여 황색 고체(127 mg)를 산출하였다. 방법 L; Rt: 2.03 m/z; 412.3 (M+H)+ 정확한 질량: 411.1. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d); 호변체 혼합물(~8/2), 주요 이성질체가 기술됨; δ ppm 2.41 (s, 3 H), 3.44 (s, 3 H), 3.52 - 3.78 (m, 2 H), 6.88 (dd, 1 H, J= 4.2, 8.6 Hz), 7.01 - 7.17 (m, 1 H), 7.47 (d, J= 3.1 Hz, 1 H), 7.84 (d, J= 3.1 Hz, 1 H), 8.03 (br. s., 1 H).
Figure 112014070558363-pct00205
라세미 화합물 174의 거울상이성질체: 174a 및 174b
메탄올(7 mL) 중, (1.11 g, 2.7 mmol), 소디윰 메틸레이트(874 mg, 16.2 mmol)가 바이오티지 마이크로파 내에서 140˚C로 10분 동안 가열되었다. 반응 혼합물을 농축하였고, 잔류물은 CH2Cl2(50 mL) 및 물(50 mL)에 용해하였다. 수층을 CH2Cl2(50 mL)로 다시 추출하였다. 조합된 유기층들을 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc의 구배를 사용하는 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 농축하고 건조하여 황색 분말(778 mg)을 산출하였다. 방법 L; Rt: 1.93 m/z; 392.2 (M+H)+ 정확한 질량: 391.1
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.44 (s, 3 H), 3.43 (s, 3 H), 6.09 (s, 1 H), 6.78 - 6.93 (m, 2 H), 7.47 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 7.84 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 7.98 (br. s., 1 H). 화합물 174(205 mg)를 분취 SFC(고정상: Chiralcel Diacel ID 20 x 250 mm), 이동상: CO2, 0.2% iPrNH2를 가지는 EtOH)에 의해 거울상이성질체로 분리하였고, 원하는 분획들을 수집하고, 진공에서 농축하고 MeOH에 용해하고, 다시 증발시키고 50˚C 진공에서 밤새 건조하여 화합물 174a (68 mg) 및 화합물 174b(74 mg)을 얻었다. SFC: 컬럼: ID-H 250 mm x 4.6 mm; 유동: 3 mL/min; 이동상: 5% EtOH (0.2% iPrNH2를 함유함) 홀드 15.00 min 온도: 30˚C˚C˚C화합물 174a Rt (~6.2 min); 화합물 174b Rt (~7.0 min)
Figure 112014070558363-pct00206
메탄올(200 mL) 중 Pd/C 10%(203 mg) 및 화합물 169(840 mg, 1.79 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 수소 분위기 하에서 교반하였고, 교반없이 주말동안 방치되었다. 반응 혼합물을 45분간 더 교반하였고, 혼합물을 여과하였다. 여과물에 K2CO3(1 g)를 첨가한 다음 농축하였다. 수득된 잔류물을 CH2Cl2(100 mL) 및 물(50 mL)에 용해하였다. 유기 층을 분리하고, 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물은 헵탄 중 5 내지 100% EtOAc 구배 용리를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제되었다. 생성물 분획들을 조합하고, 농축하고 건조하여, 밝은 황색 분말로서 화합물 175(75 mg)가 산출되었다. 방법 L; Rt: 2.04 m/z; 455.1 (M+H)+ 정확한 질량: 454.2. 1H NMR (600 MHz, 아세톤-d 6 ) δ ppm 2.53 - 2.66 (m, 4 H), 3.22 (ddd, J=25.7, 17.2, 4.4 Hz, 1 H), 3.39 (s, 3 H), 3.53 (td, J=16.0, 7.7 Hz, 1 H), 3.72 (s, 2 H), 3.73 - 3.80 (m, 4 H), 5.15 (ddd, J=53.6, 7.5, 4.7 Hz, 1 H), 6.93 (ddd, J=9.2, 8.5, 2.5 Hz, 1 H), 6.99 (m, J=9.2 Hz, 1 H), 7.16 (dd, J=8.4, 5.3 Hz, 1 H), 7.55 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.90 (td, J=7.7, 1.7 Hz, 1 H), 8.11 (d, J=7.9 Hz, 1 H), 8.71 (ddd, J=4.8, 1.6, 0.9 Hz, 1 H), 10.14 (br. s., 1 H).
생물학적 실시예 -식 I의 화합물들의 항 HBV 활성
항 HBV 활성은 안정적으로 형질감염된 세포주인 HepG2.2.15를 사용하여 측정되었다. 세포주는 비교적 일정하게 높은 수준의 HBV 비리온 입자들을 분비하는 것으로 기술되어 있고, 비리온 입자들은 침팬지에서 급성 및 만성 감염 및 질병을 유발하는 것으로 나타났다.
항바이러스를 위해, 평가 세포는 2반복으로 96-웰 플레이트에서 3일 간 2회 계대희석된 화합물로 처리되었다. 처리 6일 후, 실시간 PCR 및 HBV 특이적 프라이머 세트 및 프로브를 사용하여서 분비된 비리온으로부터 정제된 HBV DNA의 정량화에 의해 항바이러스 활성이 결정되었다.
화합물들의 세포독성은 CellTiter-Blue를 사용하여 HepG2.2.15 분석과 동일한 항온배양 기간 및 투여량 범위로 HepG2 세포에서 시험하였다. 결과는 표 1에 나타나 있다.
항 HBV 활성은 또한, 독시사이클린의 부재(Tet-off 시스템) 하에 HBV를 복제시키는 안정적인 유도성 HBV 생성 세포주인 HepG2.117 세포주를 사용하여서도 측정되었다. 항바이러스 분석을 위해, HBV 복제가 유도되었고, 96-웰 플레이트에서 계대희석된 화합물로의 2반복 처리가 뒤따랐다. 처리 3일 후, 실시간 PCR 및 HBV 특이적 프라이머 세트 및 프로브를 사용한 세포내 HBV DNA의 정량화에 의해 항바이러스 활성이 결정되었다.
화합물들의 세포독성은 화합물들의 존재 하에 4일간 항온배양된 HepG2 세포를 사용하여 시험하였다. 세포 생존율은 레사주린(Resazurin) 분석법을 사용하여 분석되었다. 결과는 표 1에 나타나있다.
Figure 112014070558363-pct00207
Figure 112014070558363-pct00208
Figure 112014070558363-pct00209
Figure 112014070558363-pct00210
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Figure 112014070558363-pct00223
Figure 112014070558363-pct00224
Figure 112014070558363-pct00225

Claims (15)

  1. 임의의 가능한 입체이성질체 또는 호변체 형태를 포함하는 하기 식 (I)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물:
    Figure 112019048950594-pct00231

    상기 식에서,
    B는 하나 이상의 플루오로 원자로 임의로 치환된 C1-C3 알킬이고;
    Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나; 또는
    B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 임의로 하나 이상의 헤테로 원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 상기 4 내지 7원 고리는 C1-C3 알킬, 옥소, OH 및 할로겐으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고;
    R1은 헤테로아릴 및 페닐로 구성되는 군으로부터 선택되되, 상기 헤테로아릴 및 페닐은 할로겐 및 C1-C3 알킬로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고;
    R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필 및 CF3로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R3은 C1-C3 알콕시카보닐 및 C≡N으로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R4 및 R5는 H, 메틸 및 할로겐으로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R6은 하나 이상의 플루오로로 임의로 치환된 C1-C3 알킬 또는 C2-C3 알케닐이고;
    R7은 수소, 헤테로 C3-7사이클로알킬, 사이클로프로필, C1-C3알콕시 및 CF3로 구성되는 군으로부터 선택된다.
  2. 제1항에 있어서,
    B는 하나 이상의 플루오로 원자로 임의로 치환된 C1-C3 알킬이고;
    Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나; 또는
    B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 임의로 하나 이상의 헤테로 원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 상기 4 내지 7원 고리는 C1-C3 알킬, 옥소, 및 할로겐으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고;
    R1은 하나 이상의 할로겐 원자로 임의로 치환된, 헤테로아릴 및 페닐로 구성되는 군으로부터 선택되는 것인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, B 및 Z가 그들이 부착된 탄소와 함께 C1-C3 알킬, 옥소 및 할로겐으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 또는 6-원 고리를 형성하는 것인, 화합물.
  4. 제1항에 있어서, B 및 Z가 그들이 부착된 탄소와 함께 하나 이상의 CH3 치환기로 임의로 치환된 5- 또는 6-원 고리를 형성하는 것인, 화합물.
  5. 제1항에 있어서, R1이 1개 또는 2개의 플루오로로 임의로 치환된 피리디닐, 또는 티아졸릴로부터 선택되는 것인, 화합물.
  6. 제1항에 있어서, R3이 C1- 또는 C2-알킬옥시카보닐인, 화합물.
  7. 제1항에 있어서, R6은 CH2이고, R7은 모포리닐 또는 피페리디닐로부터 선택되는 것인, 화합물.
  8. 하기 식 (Ia)에 따른 화합물:
    Figure 112019048950594-pct00232

    상기 식에서, B, Z, R1, R2, R3, R4, 및 R5는 제1항에 정의된 바와 같다.
  9. 제1항에 있어서, R4 및 R5가 플루오로 및 H로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되는 것인, 화합물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, HBV 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는, HBV 감염의 예방 또는 치료용 약제.
  12. 임의의 가능한 입체이성질체 또는 호변체 형태를 포함하는, 하기 식 (I)에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함하는, HBV 감염의 예방 또는 치료용 약제:
    Figure 112019048950594-pct00233

    상기 식에서,
    B는 하나 이상의 플루오로 원자로 임의로 치환된 C1-C3 알킬이고;
    Z는 H 또는 할로겐으로부터 선택되거나; 또는
    B 및 Z는 그들이 부착된 탄소와 함께 임의로 하나 이상의 헤테로 원자를 함유하는 4 내지 7원 고리를 형성하되, 상기 4 내지 7원 고리는 C1-C3 알킬, 옥소, OH 및 할로겐으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고;
    R1은 S-메틸, 헤테로아릴 및 페닐로 구성되는 군으로부터 선택되되, 상기 S-메틸, 헤테로아릴 및 페닐은 할로겐 및 C1-C3 알킬로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고;
    R2는 -R6-R7, C≡N, 사이클로프로필 및 CF3로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R3은 C1-C3 알콕시카보닐 및 C≡N으로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R4 및 R5는 H, 메틸 및 할로겐으로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R6은 하나 이상의 플루오로로 임의로 치환된 C1-C3 알킬 또는 C2-C3 알케닐이고;
    R7은 수소, 헤테로 C3-7사이클로알킬, 사이클로프로필, C1-C3알콕시 및 CF3로 구성되는 군으로부터 선택된다.
  13. (a) 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 정의된 식 (I)의 화합물; 및
    (b) 다른 HBV 저해제를 함유하는,
    HBV 감염의 치료에 동시에, 별개로 또는 순차적으로 사용하기 위한 조합물.
  14. 하기 식 (V)에 따른 화합물:
    Figure 112019048950594-pct00234

    상기 식에서, B, Z, R1, R3, R4, 및 R5는 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따라 정의된 바와 같다.
  15. 하기 식 (V)에 따른 화합물을 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 합성에 사용하는 방법:
    Figure 112019048950594-pct00235

    상기 식에서, B, Z, R1, R3, R4, 및 R5는 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따라 정의된 바와 같다.
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