KR102054100B1 - 뿌리식물 혼합 발효추출물을 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 - Google Patents

뿌리식물 혼합 발효추출물을 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 유효성분으로 함유하여 우수한 피부 개선 효과를 나타내는 화장료 조성물에 관한 것으로, 상기 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물은 우수한 피부주름개선효과, 보습효과, 피부재생효과를 나타내므로 항노화 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

뿌리식물 혼합 발효추출물을 함유하는 피부개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition containing fermented extract of roots}
본 발명은 뿌리식물 혼합 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 뿌리식물인 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 함유하여 우수한 피부개선 효과를 나타내는 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부 표피의 가장 아랫부분인 기저층에서 세포가 생성되어 위로 조금씩 올라오다가 가장 윗부분인 각질층에 다다르고 다시 떨어져 나가는데 이 과정을 피부 재생 주기, 턴오버 라고 부른다. 일반적으로 피부는 평균적으로 한 달에 한번 자연적으로 재생된다. 피부는 스스로 재생하고 탈락하면서 건강한 세포로 탈바꿈하게 된다. 어린이의 피부 턴오버 주기는 1~2주 정도이며 2~30대는 3~4주로 점점 늘어나 묵은 각질이 쉽게 쌓일 수 있다. 또한 나이뿐 아니라 부족한 수면, 음주, 흡연 등 좋지 않은 생활 습관도 피부 세포의 재생을 더디게 하는 원인이 된다. 다양한 원인들로 인해 피부가 재생되는 과정이 점점 느려지게 되고 이로 인해 죽은 세포가 피부 표면에 남아 새로운 세포의 성장을 막게 된다. 이로 인해 피부가 새로운 세포로 원활하게 바뀌지 않아 기미가 생겨 칙칙해지거나 주름이 생기며 탄력이 떨어지는 등의 피부 고민이 나타나게 된다.
본 발명자들은 피부개선 효과가 있는 천연물을 연구하던 중, 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합추출물을 제조하여 그 활성에 대해 연구하였으며, 이때 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물이 우수한 피부 개선 효과를 나타내어 화장료로 유용하게 사용될 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
(0001) 대한민국 공개특허 제10-2016-0054668호(2016.05.17.) (0002) 대한민국 등록특허 제10-1308669호(2013.09.13.)
본 발명은 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 유효성분으로 함유하여 우수한 피부 개선 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~90 중량% 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 혼합 발효추출물은 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근의 혼합물을 추출하여 혼합추출물을 제조한 후, 상기 혼합추출물에 효모균을 접종하고 발효시켜 제조되는 것이다. 가장 바람직하게는 사카로미세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae)로 발효시키는 것이다.
상기 혼합추출물은 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근의 열수추출물이거나 물, 탄소수 1~4의 저급 알코올, 에틸아세테이드, 글리세린, 에킬렌글리콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매에 의한 용매추출물이다. 더욱 바람직하게는 물과 탄소수 1~4의 알코올의 혼합용매에 의하여 추출된 추출물이다.
상기 혼합추출물은 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 각각 1~5:1~5:1~5:1~5:1~5의 중량비율로 혼합하여 추출된 것이다.
상기 화장료 조성물은 피부주름개선용, 피부보습용, 피부세포증식용 또는 피부재생용 임을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물은 주름개선, 보습, 피부세포증식 및 피부재생 효과가 우수하여, 피부개선용 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.
이하 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
본 발명은 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
우엉(Arctium lappa)은 당질을 많이 함유한 알칼리성식품으로 이눌린 성분이 풍부하고 섬유질을 많이 함유하고 있어 혈액순환을 원활하게 해준다. 우엉의 껍질에는 사포닌이 함유되어 있어 세균이나 벌레로부터 보호하고 상처가 났을 때 스스로 치료하는 재생효과를 갖는다. 본 발명에서는 우엉의 뿌리를 사용한다.
포공영(Taraxacum Officinale)은 국화과의 민들레(Taraxacum platycarpum H. Dahlstedt) 또는 동속 식물의 전초를 말린 약재로서, 포공이 이것을 써서 종기를 치료하는데 효험을 보았다고 하여 붙여진 이름이다. 상처가 나고 종기가 생겼을 때 이것을 달여서 복용하거나 즙을 내어 환부에 바르면 좋은 효능이 있으며 세균 감염으로부터 보호하는 효과를 갖는다. 또한 독소를 풀어주는 효능이 있어 다양한 염증성 질환에 응용할수 있다.
지모(Anemarrhena asphodeloide)는 백합과에 속하는 다년생 초본으로 근경을 약재로 사용하며 한방에서는 해열, 당뇨, 소염 등의 목적으로 사용되고 있다. 또한 화를 내리고 음기를 보강하기 때문에 열이 달아오를 때 효과적으로 피부 질환에 사용되어 왔다.
칡(Pueraria thunbergiana)은 콩과의 다년생 낙엽 덩굴나무로서 한방에서 그 뿌리를 갈근이라고 한다. 국내 산야 어디서나 볼 수 있는 칡은 넝쿨이 무성하고 뿌리가 땅 속 깊이 뻗어나가 강한 생명력을 자랑하고 겨울에도 얼어 죽지 않고 대부분의 줄기가 살아남는 생명력 강한 식물이다. 갈근에는 당분, 섬유질, 단백질 등이 골고루 들어있으며 물을 빨아들이는 힘이 강하고 항산화, 주름 완화 등의 효과를 갖는 것으로 알려져 있다.
연꽃(Nelumbo Nucifera)은 연꽃과의 식물로 늪이나 연못 등에서 사는 다년생 풀로 연꽃의 뿌리를 연근(蓮根)이라고 한다. 연꽃은 탁하고 더러운 진흙 속에 뿌리를 내리고 자라면서도 싱싱하고 깨끗한 상태를 유지하고 진흙을 정화시키는 강력한 자정 능력을 갖는다. 연근에는 뮤신, 점액질, 식이섬유 등의 다양한 생리활성 성분을 함유하고 있다.
본 발명에 따르면, 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선 화장료 조성물이 제공된다. 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 추출물 자체로도 우수한 피부개선활성을 나타내지만, 이들의 혼합 발효추출물은 더욱 우수한 피부개선활성을 나타냄을 확인하였다.
상기 발효추출물은 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 혼합하여 추출한 후 또는 추출과 동시에 발효시켜 제조된다. 발효 균주로는 효모균, 더욱 바람직하게는 사카로미세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)을 사용한다. 상기 발효추출물은 우수한 주름개선, 피부보습, 피부세포증식 및 피부재생 활성을 나타내었다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 먼저, 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 각각 건조 중량비가 1~5:1~5:1~5:1~5:1~5인 비율로 혼합하여 혼합물을 제조한다. 상기 혼합물을 물, 탄소수 1~4의 저급 알코올, 에틸아세테이드, 글리세린, 에킬렌글리콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매, 바람직하게는 물과 탄소수 1~4의 알코올의 혼합용매로 추출하여 혼합추출물을 제조한다.
상기 혼합추출물에 사카로미세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)를 접종하고, 22~28℃에서 3~5일간 발효시킨다. 멸균 후 여과하고 농축하여 혼합 발효추출물을 제조한다. 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 각각 1:2:1:2:1의 중량비로 혼합추출하고, 이를 사카로미세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)로 발효하는 경우에 그 수율이나 주름개선, 보습, 피부세포증식 및 피부재생 효과 면에서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
이와 같이 제조되는 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물은 유효성분으로서 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~90 중량% 함유된다.
이와 같이 제조된 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물은 혼합에 따른 상승작용과 발효에 따른 효과의 증진에 의하여 더욱 우수한 주름관련 인자 발현증가 효과(시험예 1), 보습 관련인자 발현 증가효과(시험예 2), 피부세포 증식효과(시험예 3) 및 피부세포 재생효과 (시험예 4)를 나타내었다.
본 발명의 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 그 예로는 화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 바디 로션, 바디 오일, 바디 젤, 샴푸, 린스, 헤어 콘디셔너, 헤어 젤, 화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스, 마스크시트, 썬제품, 비누 등을 들 수 있다.
[실시예]
이하, 하기의 실시예와 시험예들을 통하여 본 발명을 상세하게 설명하지만, 본 발명이 이 예들에 의하여 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효 추출물 제조
건조된 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 각각 30g씩 준비하여 정제수로 세척 후 건조하여 혼합하고 에탄올과 정제수 7:3 (w/w) 비율의 혼합용매 500g과 혼합하였다. 이 혼합물을 3일간 침적하여 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출하였다. 추출물에 사카로미세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae)를 접종 후 25℃에 3일간 발효시킨 뒤 95℃에 1시간 동안 멸균 후 여과지(Qualitive Filter Papers NO.2)를 이용하여 여과한 후 여액 상태로 수득하였다.
실시예 2~10: 혼합 비율에 따른 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물 제조
건조된 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근의 중량비를 하기 표 1과 같이 조절하여 실시예 1과 동일한 방법으로 혼합 발효추출물을 제조하였다.
구분 혼합비율 수득률(%)
실시예 2 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 1:2:1:1:1 73
실시예 3 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 1:1:1:2:1 83
실시예 4 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 1:2:1:2:1 98
실시예 5 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 2:2:1:1:1 72
실시예 6 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 2:3:1:1:1 60
실시예 7 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 2:2:1:3:1 57
실시예 8 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 3:1:1:2:1 72
실시예 9 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 3:2:1:1:1 50
실시예 10 우엉:포공영:지모:갈근:연근= 4:1:1:1:1 48
비교예 1: 우엉 발효추출물의 제조
건조된 우엉 150g을 정제수로 세척 후 건조하고 에탄올과 정제수 7:3 (w/w) 비율의 혼합용매 500g과 혼합하였다. 이 혼합물을 3일간 침적하여 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출하였다. 추출물에 사카로미세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae)를 접종 후 25℃에 3일간 발효시킨 뒤 95℃에 1시간 동안 멸균 후 여과지(Qualitive Filter Papers NO.2)를 이용하여 여과한 후 여액 상태로 수득하였다.
비교예 2: 포공영 발효추출물의 제조
건조된 포공영 150g을 사용한 것을 제외하고는 상기 비교예 1과 동일한 방법으로 포공영 발효추출물을 제조하였다.
비교예 3: 지모 발효추출물의 제조
건조된 지모 150g을 사용한 것을 제외하고는 상기 비교예 1과 동일한 방법으로 지모 발효추출물을 제조하였다.
비교예 4: 갈근 발효추출물의 제조
건조된 갈근 150g을 사용한 것을 제외하고는 상기 비교예 1과 동일한 방법으로 갈근 발효추출물을 제조하였다.
비교예 5: 연근 발효추출물의 제조
건조된 연근 150g을 사용한 것을 제외하고는 상기 비교예 1과 동일한 방법으로 연근 발효추출물을 제조하였다.
비교예 6: 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합추출물 제조
건조된 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 준비하여 정제수로 세척 후 건조하여 가장 높은 수율을 나타내는 상기 실시예 4의 비율로 혼합하고 에탄올과 정제수 7:3 (w/w) 비율의 혼합 용매 500g과 혼합하였다. 이 혼합물을 3일간 침적하여 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출하였다. 효모로 발효하지 않은 것을 제외하고는 상기 실시예 4의 방법과 동일한 방법으로 실시하여 제조하였다.
비교예 7: 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 유산균 발효혼합추출물 제조
실시예 4의 방법에서, 사카로미세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae) 대신에 락토바실러스(Lactobacillus plantarum)를 사용하여 발효시킨 것을 제외하고는 실시예 4의 방법과 동일한 방법으로 실시하여, 유산균 발효 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 제조하였다.
비교예 8: 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 초발효 혼합추출물 제조
건조된 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 실시예 4의 방법과 동일하게 혼합한 시료에 현미식초(오뚜기, 총 산도 6 ~ 7%) 1%가 함유된 정제수 900g을 넣고 용액에 잠기도록 하여 실온에서 1일간 침지하였다. 이 후 여과지(Qualitive Filter Papers NO.2)를 이용하여 여과한 후 여액 상태로 수득하여 초발효 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 초발효 추출물을 제조하였다.
시험예 1: 주름 관련인자 발현 증가 확인
섬유아세포(HDFa)를 Low Serum Growth Supplement (LSGS)가 첨가된 Medium 106 배지를 이용하여 5×106 cell/well로 조절한 후 6 well plate에 접종하고 24시간 동안 배양하였다. 배양한 뒤, 상기 실시예 및 비교예의 시료를 처리하고 48시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction)을 통해 콜라겐(collagen)의 발현 증가율을 확인하였다. 콜라겐(Collagen) 발현 증가율은 하기 식에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 대조군으로는 레티놀팔미테이트(retinol palmitate)를 사용하였다.
Collagen 발현율(%)=(시료 collagen 발현양/대조군 collagen 발현양)×100
시료명 처리농도(w/v%) collagen 발현율(%)
실시예 1 0.5 85.1
실시예 4 0.5 93.4
비교예 1 0.5 75.2
비교예 2 0.5 78.6
비교예 3 0.5 73.5
비교예 4 0.5 80.2
비교예 5 0.5 81.3
비교예 6 0.5 86.5
비교예 7 0.5 88.3
비교예 8 0.5 87.1
레티놀 팔미테이트 0.5 84.5
상기 표 2에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 본 발명 실시예의 혼합 발효추출물은 각각의 발효추출물인 비교예 1~5, 발효하지 않은 혼합추출물인 비교예 6, 유산균 발효추출물인 비교예 7, 초 발효추출물인 비교예 8에 비하여 높은 콜라겐 발현율을 나타내었다. 대조군에 비하여도 더 높은 발현율을 나타내었다.
시험예 2: 피부 보습 관련 인자 발현 증가 확인
섬유아세포(HDFa)를 Low Serum Growth Supplement (LSGS)가 첨가된 Medium 106 배지를 이용하여 5×106 cell/well로 조절한 후 6 well plate에 접종하고 24시간 동안 배양하였다. 배양한 뒤, 상기 실시예 및 비교예의 시료를 처리하고 48시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction)을 통해 Hyaluronan synthase-2(HAS-2)의 발현 증가율을 확인하였다. HAS-2 발현 증가율은 하기 식에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다. 대조군으로는 히알루론산(Hyaluronic Acid)을 사용하였다.
HAS-2 발현율(%)=(시료 HAS-2 발현양/대조군 HAS-2 발현양)×100
시료명 처리농도(w/v%) HAS-2 발현율(%)
실시예 1 0.5 84.3
실시예 4 0.5 93.5
비교예 1 0.5 83.2
비교예 2 0.5 82.1
비교예 3 0.5 82.5
비교예 4 0.5 83.6
비교예 5 0.5 84.0
비교예 6 0.5 88.6
비교예 7 0.5 87.2
비교예 8 0.5 86.2
히알루론산 0.01 85.4
상기 표 3에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 본 발명 실시예의 혼합 발효추출물은 대조군이나 각각의 발효추출물인 비교예 1~5, 발효하지 않은 혼합추출물인 비교예 6, 유산균 발효추출물인 비교예 7, 초 발효추출물인 비교예 8에 비하여 높은 HAS-2 발현율을 나타내었으며, 실시예 4의 혼합추출물에서 보다 높은 발현율을 나타내었다.
시험예 3: 피부 세포 증식 효과 확인
각질형성세포(HEKa)를 Human Keratinocyte Growth Supplement(HKGK)가 첨가된 Medium 154 배지를 이용하여 1×105 cell/well로 조절한 후 96 well plate에 접종하고 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에 상기 실시예 및 비교예의 시료를 처리하고 18시간 동안 배양한 뒤 세포의 생존율을 비교하기 위하여 MTT solution(5mg/mL)을 첨가하여 세포 생존율을 ELISA READER를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하고 대조군의 세포증식을 100%로 하고 세포 증식률을 계산하였다.
세포생존율(%)=(시료 세포생존율/대조군 세포생존율)×100
시료명 처리농도(w/v%) 세포 생존율(%)
실시예 1 0.5 109.3
실시예 4 0.5 132.5
비교예 1 0.5 102.3
비교예 2 0.5 104.5
비교예 3 0.5 102.8
비교예 4 0.5 109.2
비교예 5 0.5 105.5
비교예 6 0.5 110.2
비교예 7 0.5 108.7
비교예 8 0.5 111.7
레티놀 팔미테이트 0.5 110.4
상기 표 4에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 본 발명 실시예의 혼합발효추출물은 대조군에 비교하여 높고, 비교예들에 비하여 높은 세포 증식율을 나타내었다.
시험예 4: 피부 재생 효과 확인
피부 재생 효과를 확인하기 위하여 wound healing assay를 진행하였다. 각질형성세포(HEKa)를 Human Keratinocyte Growth Supplement(HKGK)가 첨가된 Medium 154 배지를 이용하여 1×106 cell/well로 조절한 후 6 well plate에 접종하고 18시간 동안 배양하였다. 세포의 일부분에 스크래치를 낸 뒤 상기 실시예 및 비교예의 시료를 처리하여 8시간 배양하였다. 피부 재생율은 wound gap을 측정하여 하기 식에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다. 대조군으로는 마데카소사이드(madecassocide)를 사용하였다.
피부 재생율(%)=(시료 세포 재생율/대조군 세포 재생율)×100
시료명 처리농도(w/v%) 피부재생율(%)
실시예 1 0.5 87.2
실시예 4 0.5 90.5
비교예 1 0.5 83.2
비교예 2 0.5 81.5
비교예 3 0.5 81.4
비교예 4 0.5 82.0
비교예 5 0.5 80.3
비교예 6 0.5 84.2
비교예 7 0.5 86.5
비교예 8 0.5 88.7
레티놀 팔미테이트 0.5 88.6
상기 표 5에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 본 발명 실시예의 혼합 발효추출물은 대조군이나 각각의 발효추출물인 비교예 1~5, 발효하지 않은 혼합추출물인 비교예 6, 유산균 발효추출물인 비교예 7, 초 발효추출물인 비교예 8에 비하여 높은 피부세포재생율을 나타내었으며, 실시예 4의 혼합추출물에서 가장 높은 피부재생효과를 나타내었다.
실시예 11: 혼합 발효추출물을 함유하는 로션 제조
상기 실시예 4에서 제조된 혼합 발효추출물을 함유하는 로션을 하기의 표 6의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
(중량%) 실시예 11
혼합 발효추출물(실시예 4) 2
글리세린 8
부틸렌글라이콜 4
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 10
세테아릴글루코사이드 1.5
소르비탄스테아레이트 0.4
세테아릴알코올 1
페녹시에탄올 0.3
에칠헥실글리세린 0.05
향 0.15
정제수 To 100

Claims (6)

  1. 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근을 각각 1:2:1:2:1의 중량비율로 혼합한 혼합물을 추출하여 혼합추출물을 제조한 후, 상기 혼합추출물에 사카로미세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)를 접종하고 발효시켜 제조되는 우엉, 포공영, 지모, 갈근 및 연근 혼합 발효추출물을 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~90 중량% 함유하는 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부주름개선용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 보습용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 재생용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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