KR102018830B1 - 섬유근통 진단용 바이오마커 및 이의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 섬유근통의 진단 정확성을 향상시키고 특정 증상의 발현을 예측할 수 있는 단일염기다형성(single nucleotide polymorphism; SNP) 바이오마커 및 이의 용도에 대한 것이다.

Description

섬유근통 진단용 바이오마커 및 이의 용도{Genetic biomarker for the diagnosis of, and prediction for symptom severity of, fibromyalgia}
본 발명은 섬유근통(Fibromyalgia)의 진단 정확성을 향상시키고 특정 증상의 발현을 예측할 수 있는 단일염기다형성(single nucleotide polymorphism; SNP) 바이오마커 및 이의 용도에 대한 것이다.
만성전신통증은 신체의 좌/우측 부위와 허리를 기준으로 상하 부위의 3개월 이상 지속되는 통증을 말한다. 미국과 영국의 역학 조사에 의하면 전체 인구의 20-25%가 만성국소통증을 가지고 있고 10-11%는 만성전신통증을 가지고 있다고 한다. 최근 국내의 조사에서도 비슷한 빈도의 만성통증환자가 있는 것으로 보고되고 있다.
1990년 미국류마티스학회에서는 만성전신통증이 있으면서 특정부위에 압통점이 있는 경우를 섬유근통 증후군으로 분류하였는데 이전에 섬유조직염, 비관절성 류마티즘, 정신성 류마티즘 등으로 불리던 질환들이 섬유근통 증후군(이하 섬유근통)으로 통일되게 된 것이다. 압통점은 4 kg의 무게로 신체의 일부를 손가락으로 눌렀을 때 통증을 호소하는 부위를 말하고 1990년 미국류마티스학회의 섬유근통 분류에서는 18개의 가능한 압통점을 제시하였고 이중 11부위 이상에서 통증을 호소하게 되면 섬유근통이라고 하였다. 서구에서는 전체 인구의 1-2%가 섬유근통에 해당된다고 보고되어있고 국내의 조사에서도 서구와 비슷한 빈도의 섬유근통 환자가 있는 것으로 보고된 바 있다.
이와 같이 섬유근통(섬유근통)은, 만성 전신성 동통, 피로, 수면 장애 등을 특징으로 하는 원인 불명의 난치병이고, 여성의 이환율이 매우 높으며, 일본에서는 약 200만명의 환자가 있다고 생각되고 있다. 영국의 경우 섬유근통은 전체 입원 환자의 5%을 차지하고 내과 외래 환자의 6%, 류마티스 외래 환자의 20%를 차지하는 중요한 질환으로 되어 있다. 섬유근통은 다른 류마티스 질환들처럼 유전적인 소인이 있는 사람들이 특정 환경인자에 노출되었을 때 발병한다. 유전적 소인의 증거로는 섬유근통 환자 가족의 섬유근통 유병률이 다른 류마티스 질환이 있는 환자 가족에 비해 증가되어 있다는 것이 중요한 근거가 된다.
그러나, 섬유근통의 진단은 매우 곤란하기 때문에, 발증으로부터 5 ∼ 10 년이 지나 섬유근통에 대한 이환이 의심되고, 겨우 섬유근통이라고 진단되는 경우가 있다. 현재 병원 등에서 일반적으로 사용되고 있는 검사 데이터에 어떤 이상도 보이지 않는 점에서, 섬유근통은 다른 난치병과 근본적으로 상이하다. 이 때문에, 섬유근통 환자는 정신 질환이라고 진단되는 경우가 많고, 또 섬유근통을 질환으로서 인정하지 않는 의사도 많은 점에서, 섬유근통 환자는 신체적으로도 정신적으로도 괴로워하고 있다. 섬유근통은 발증 초기에 있어서 적절한 치료를 실시하면, 그 악화를 방지할 수 있다. 그러나, 발증 초기에 치료 기회를 놓치면 증상은 악화되고, 섬유근통 환자는 참기 어려운 동통과 피로감에 괴로워하여 일상생활도 곤란해지는 경우가 있다. 섬유근통의 정확한 진단을 더 곤란하게 하고 있는 것이 다른 유사 질환과의 혼동이다. 전신성 동통은 섬유근통 에만 한정되는 것이 아니라, 관절 류머티즘 (RA) 및 척추 관절염 (SpA) 등에서도 보인다. 더 복잡한 것으로, 섬유근통환자는 SpA 나 RA를 발병하고 있는 경우가 많다. 이 점에서, RA나 동통의 전문의라도 섬유근통의 감별 진단은 곤란하다는 과제가 있다. 또, 현재 이용되고 있는 섬유근통의 진단은 상술된 바와 같이 압통점에 있어서의 통증을 기준으로 한 것으로 (압통점 시험), 주관적 요소에 의존하기 쉽다는 과제가 있다. 이들 여러 문제로부터, 섬유근통을 신속, 정확하고 또한 객관적으로 다른 유사 질환과 감별하는 방법이 요구되고 있다. 기존에 몇몇 소규모 연구를 통하여 세로토닌 수용체의 유전자 다형성, 세로토닌 전달체의 유전자 다형성, 그리고 카테콜-O-메틸전이효소의 유전자 다형성 등이 섬유근통의 발생과 관련이 있을 수 있다는 보고가 있으나, 섬유근통의 진단의 정확성을 향상시키지는 못하고 있는 실정이다.
따라서, 섬유근통 환자의 발병 원인과 특성을 연구하기 위한 노력이 필요한 시점이다.
본 발명자들은 다수의 연구결과 최근 들어 통증 전단 경로에 중요한 역할을 한다고 밝혀지고 있는 뇌유래 신경성장인자(brain-derived neurotrophic factor :BDNF)의 유전자변이가 섬유근통과 유의한 연관성이 있음을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 BDNF 유전자의 특정부위 변이가 섬유근통의 바이오마커가 될 수 있음을 확인함으로써, 섬유근통의 발병을 예측하고 진단의 정확도를 향상시키며, 섬유근통의 다양한 증상 발현과 관련된 바이오마커를 포함하는 섬유근통 진단용 또는 섬유근통증상 예측용 바이오마커조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 섬유근통 진단용 또는 섬유근통증상예측용 바이오마커를 검출함으로써 섬유근통 또는 섬유근통증상을 정확하고 신속하게 진단할 수 있어 치료약물 또는 치료방법에 대한 의사 결정 과정에 기여할 수 있는 섬유근통진단용 또는 섬유근통증상예측용 진단키트 및 마이크로어레이를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 얻어진 단일염기다형성 바이오마커의 다형성 부위를 확인함으로써 섬유근통진단에 대한 정보제공방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 섬유근통환자로부터 분리한 생물학적 시료에서 얻어진 단일염기다형성 바이오마커의 다형성 부위를 확인함으로써 섬유근통증상의 진단에 대한 정보제공방법 및 진단키트를 제공하는 것이다.
본 발명의 목적들은 이상에서 언급한 목적들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 목적들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상술된 본 발명의 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 뇌유래 신경성장인자(brain-derived neurotrophic factor :BDNF)의 rs11030104(A>G) 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 포함하는 섬유근통진단용 바이오마커조성물을 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 rs11030104(A>G) 폴리뉴클레오티드는 rs11030104의 GG genotype 또는 rs11030104의 G allele의 폴리뉴클레오티드이다.
또한, 본 발명은 BDNF의 rs12273539 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 포함하는 섬유근통진단용 바이오마커조성물을 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 rs12273539 폴리뉴클레오티드는 rs12273539 TT genotype의 폴리뉴클레오티드이다.
또한, 본 발명은 BDNF의 rs10835210(C>A), rs11030101(A>T) 및 rs11030102(C>G) 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나 이상 또는 이들의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 포함하는 섬유근통증상예측용 바이오마커조성물을 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 rs10835210(C>A) 폴리뉴클레오티드는 rs10835210(C>A) C/C , C/A, A/A genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나이다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 rs11030101(A>T) 폴리뉴클레오티드는 rs11030101(A>T) A/A, A/T , T/T genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나이다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 rs11030102(C>G) 폴리뉴클레오티드는 rs11030102(C>G) C/C, C/G genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나이다.
또한, 본 발명은 상술된 어느 하나의 바이오마커조성물을 검출할 수 있는 검출수단을 포함하는 섬유근통 진단키트를 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 검출수단은 상기 바이오마커조성물에 포함된 폴리누클레오티드를 검출할 수 있는 프로브, 상기 폴리뉴클레오티드를 증폭할 수 있는 프라이머쌍, 및 상기 폴리뉴클레오티드의 cDNA 중 하나 이상을 포함한다.
또한, 본 발명은 상술된 어느 하나의 바이오마커조성물을 포함하는 섬유근통 진단용 마이크로어레이를 제공한다.
또한, 본 발명은 상술된 어느 하나의 바이오마커조성물을 검출할 수 있는 검출수단을 포함하는 섬유근통증상예측용 진단키트를 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 검출수단은 상기 바이오마커조성물에 포함된 폴리누클레오티드를 검출할 수 있는 프로브, 상기 폴리뉴클레오티드를 증폭할 수 있는 프라이머쌍, 및 상기 폴리뉴클레오티드의 cDNA 중 하나 이상을 포함한다.
또한, 본 발명은 상술된 어느 하나의 바이오마커조성물을 포함하는 섬유근통증상예측용 마이크로어레이를 제공한다.
또한, 본 발명은 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 및 상기 수득한 DNA 또는 RNA로부터 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물에 포함된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계;를 포함하는 섬유근통 진단에 대한 정보제공방법을 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 다형성 부위가 rs11030104인 경우, GG genotype으로 확인되면 상기 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 섬유근통발생가능성이 40%이상 감소되고, G allele로 확인되면 섬유근통발생가능성이 상기 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 22%이상 감소되는 것으로 진단할 수 있다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 다형성 부위가 rs12273539인 경우, TT genotype으로 확인되면 섬유근통발생가능성이 상기 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 2.5배 이상 증가되는 것으로 진단할 수 있다.
또한, 본 발명은 섬유근통환자로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 및 상기 수득한 DNA 또는 RNA로부터 제 5 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물에 포함된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계;를 포함하는 섬유근통증상의 진단에 대한 정보제공방법을 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 다형성 부위가 rs10835210(C>A)인 경우, C/C , C/A, A/A genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상이 발현되는 것으로 진단된다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 다형성 부위가 rs11030101(A>T)인 경우, A/A, A/T , T/T genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상이 발현되는 것으로 진단된다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 다형성 부위가 rs11030102(C>G)인 경우, C/C, C/G genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상 및 피로감이 발현되는 것으로 진단된다.
또한, 본 발명은 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 상기 수득한 DNA 또는 RNA로부터 BDNF SNP rs11030104(A>G), rs12273539(C>T), rs2883187(C>T), rs7103873(G>C), rs7103411(C>T), rs10835210(C>A), rs11030102 (C>G), rs11030101(A>T), rs6265(G>A) 및 rs7124442(C>T)의 염기를 확인하는 단계; 및 상기 rs11030104(A>G) 및 rs12273539(C>T)의 유전자 변이가 없으면, 상기 염기서열이 확인된 10개의 BDNF SNP의 하플로타입을 구성하여 분석하는 단계;를 포함하는 섬유근통 진단에 대한 정보제공방법을 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 하플로타입의 분석을 통해 결합된 대립유전자가 TGACCACTGC의 염기서열을 가지면 섬유근통발생가능성이 있는 것으로 진단된다.
본 발명은 다음과 같은 우수한 효과를 갖는다.
먼저, 본 발명의 바이오마커조성물에 의하면 섬유근통의 바이오마커가 될 수 있는 특정부위가 변이된 BDNF 유전자를 포함하여 섬유근통의 발병을 예측하고 진단의 정확도를 향상시키며, 섬유근통의 다양한 증상 발현을 진단할 수 있다.
또한, 본 발명의 섬유근통진단용 진단키트 또는 마이크로어레이에 의하면 만성통증 환자의 체액 중 BDNF 유전자의 특정부위 변이를 확인하는 것만으로 섬유근통의 발병가능성 또는 섬유근통증상을 정확하고 신속하게 진단할 수 있으므로 임상적 유용성을 갖는다.
또한, 본 발명의 정보제공방법에 의하면 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 얻어진 단일염기다형성 바이오마커의 다형성 부위를 확인하거나, 섬유근통환자로부터 분리한 생물학적 시료에서 얻어진 단일염기다형성 바이오마커의 다형성 부위를 확인함으로써 섬유근통진단 또는 섬유근통증상의 진단에 대한 정보를 제공하여 치료약물 또는 치료방법에 대한 의사 결정 과정에 기여할 수 있다.
본 발명의 이러한 기술적 효과는 이상에서 언급한 범위만으로 제한되지 않으며, 명시적으로 언급되지 않았더라도 후술되는 발명의 실시를 위한 구체적 내용의 기재로부터 통상의 지식을 가진 자가 인식할 수 있는 발명의 효과 역시 당연히 포함된다.
본 발명에서 사용하는 용어는 단지 특정한 실시예들을 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 출원에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성 요소, 부분품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성 요소, 부분품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
제1, 제2 등의 용어는 다양한 구성 요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 상기 구성 요소들은 상기 용어들에 의해 한정되어서는 안된다. 상기 용어들은 하나의 구성 요소를 다른 구성 요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다. 예를 들어, 본 발명의 권리 범위를 벗어나지 않으면서 제1 구성 요소는 제2 구성 요소로 명명될 수 있고, 유사하게 제2 구성 요소도 제1 구성 요소로 명명될 수 있다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 갖는 것으로 해석되어야 하며, 본 발명에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
인간의 genome은 유전적으로 0.1%이상의 다양성을 보이는데 이러한 차이는 유전지문인식의 도구로 이용할 수가 있다. 개개인의 유전지문인식 패턴으로 단일염기다형성(SNP)을 이용할 수 있으며 human genome project에 의해 1000만개 이상의 다양성이 인종별, 국가별로 광범위하게 알려져 있다. 이러한 SNP은 간단하게 시퀀싱을 통해 detection할 수 있으며, 이런 다양성은 희귀하고 개별적이며 그리고 특이적이다. 하지만 어떤 부분에 있어서는 매우 빈번하게 변이가 있을 수도 있다. 본 발명자들은 상기와 같은 단일염기다형성(SNP)의 특징을 이용하면 간단하게 섬유근통을 진단할 수 있음을 발견하였다.
본 명세서에서 용어, "다형성(polymorphism)"이란 하나의 유전자 좌위(locus)에 두 가지 이상의 대립유전자(allele)가 존재하는 경우를 말하며 다형성 부위 중에서, 사람에 따라 단일 염기만이 다른 것을 단일염기다형성(single nucleotide polymorphism, SNP)이라 한다. 바람직한 다형성 마커는 선택된 집단에서 1% 이상, 더욱 바람직하게는 10% 또는 20% 이상의 발생빈도를 나타내는 두 가지 이상의 대립유전자를 가진다.
본 명세서에서 용어, "대립유전자(allele)"는 상동염색체의 동일한 유전자좌위에 존재하는 한 유전자의 여러 타입을 말한다. 대립유전자는 다형성을 나타내는데 사용되기도 하며, 예컨대, 본 발명에서는 오직 두 가지 대립형질로만 이루어 질 수 있는 단일염기다형성을 마커로 사용하였는바, 본 발명에서 사용되는 SNP는 두 종류의 대립인자(biallele)를 갖는다.
본 명세서에서 용어, "rs_id"란 1998년부터 SNP 정보를 축적하기 시작한 NCBI가 초기에 등록되는 모든 SNP에 대하여 부여한 독립된 표지자인 rs-ID를 의미한다. 이와 같은 표에 기재된 rs_id는 본 발명의 다형성 마커인 SNP마커를 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "진단"은 병리학적 상태의 존재 또는 특징을 확인하는 것을 의미한다. 본 발명의 목적과 관련하여, "진단"은 체액의 생체외 분석에 기초하여 섬유근통의 존재 및 발병 위험도를 결정하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "바이오마커"는 질환 상태를 나타낼 수 있는 물질을 의미한다. 섬유근통의 진단에 관한 본 발명의 문맥에서, "바이오마커"는 BDNF유전자의 특정 SNP부위를 의미한다. "바이오마커"는 그 종류에 따라 섬유근통을 앓고 있거나 또는 정상의 건강한 상태에 비하여 섬유근통에 걸리기 쉬운 개체에서 나타날 수도 있고, 나타나지 않을 수도 있다
본 명세서에서 사용되는 용어 "혈액"은 전혈, 혈청 및 혈장을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "예측하는"은 개체가 생물학적 질환을 발병할 가능성이 현저하게 높다고 발견하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "생물학적 시료"는 개체로부터 얻어진 다양한 시료 유형을 포함하며 또한 진단 또는 모니터링 분석에서 사용될 수 있다. 생물학적 유체 시료는 혈액, 뇌척수액(CSF), 뇨 및 생물 유래의 다른 액체 시료를 포함한다. 필요에 따라, 시료는 예를 들면 농축 및 분리를 위해 미리 처리할 수 있다.
"개체"는 포유동물, 바람직하게는 인간이고, 용어 개체 또는 대상체는 본 명세서에서 서로 교환적으로 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "프로브"는 특정 뉴클레오티드 서열에 혼성화될 수 있는 디옥시리보뉴클레오티드 및 리보뉴클레오티드를 포함하는 자연 또는 변형되는 모노머 또는 결합을 갖는 선형의 올리고머를 의미한다. 구체적으로는, 프로브는 혼성화에서의 최대 효율을 위하여 단일가닥이며, 보다 구체적으로는 디옥시리보뉴클레오티드이다. 본 발명에 이용되는 프로브로서, BDNF SNP를 포함하는 서열에 완전하게(perfectly) 상보적인 서열이 이용될 수 있으나, 특이적 혼성화를 방해하지 않는 범위 내에서 실질적으로(substantially) 상보적인 서열이 이용될 수도 있다.
이하, 첨부한 도면 및 바람직한 실시예들을 참조하여 본 발명의 기술적 구성을 상세하게 설명한다.
그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화 될 수도 있다. 명세서 전체에 걸쳐 본 발명을 설명하기 위해 사용되는 동일한 참조번호는 동일한 구성요소를 나타낸다.
본 발명의 기술적 특징은 섬유근통의 조기진단 및/또는 발병위험의 예측이 가능한 섬유근통진단의 바이오마커로서 뇌유래 신경성장인자(brain-derived neurotrophic factor :BDNF)의 단일염기 다형성(single nucleotide polymorphism, SNP)이 사용될 수 있음을 확인하고, 이에 착안하여 섬유근통을 진단하거나 섬유근통증상을 예측하기 위해 BDNF의 특정 SNP를 검출하는 구성을 포함하는 섬유근통진단용 또는 섬유근통증상예측용 진단키트 및 섬유근통진단 또는 섬유근통증상예측에 대한 정보제공방법을 제공하는 것에 있다.
따라서, 본 발명의 섬유근통진단용 바이오마커조성물은 뇌유래 신경성장인자(brain-derived neurotrophic factor :BDNF)의 rs11030104(A>G) 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 여기서, rs11030104(A>G) 폴리뉴클레오티드는 rs11030104의 GG genotype 또는 rs11030104의 G allele의 폴리뉴클레오티드이다.
또한, 본 발명의 섬유근통진단용 바이오마커조성물은 BDNF의 rs12273539 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 여기서, rs12273539 폴리뉴클레오티드는 rs12273539 TT genotype의 폴리뉴클레오티드이다.
또한, 본 발명의 섬유근통증상예측용 바이오마커조성물은 BDNF의 rs10835210(C>A), rs11030101(A>T) 및 rs11030102(C>G) 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나 이상 또는 이들의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 여기서, rs10835210(C>A) 폴리뉴클레오티드는 rs10835210(C>A) C/C , C/A, A/A genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나이고, rs11030101(A>T) 폴리뉴클레오티드는 rs11030101(A>T) A/A, A/T , T/T genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나이며, rs11030102(C>G) 폴리뉴클레오티드는 rs11030102(C>G) C/C, C/G genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나이다.
본 발명의 바이오마커조성물에 포함된 BDNF의 특정 SNP 폴리누클레오티드는 후술하는 바와 같이 한국인 섬유근통 환자들의 대상으로 대규모로 코호트를 구성하여 BDNF 단일염기 다형성(single nucleotide polymorphism, SNP)이 섬유근통의 진단과 예후예측과 관련이 있는 바이오마커가 될 수 있는지를 조사하여 얻어진 것이다. 즉 총 423명의 국내 대학병원의 섬유근통 환자와 409명의 정상인을 대상으로 섬유근통에서 발현되는 다양한 증상 중에서 통증 척도, 우울증 정도, 불안감 정도, 피로감 정도, 사회적 지지도 정도 등에 대해서 설문지법을 통해 조사한 후, BDNF 유전자 변이를 연구하기 위하여 10개의 BDNF SNPs [rs2883187 (C>T), rs7103873 (G>C), rs7103411(C>T), rs10835210 (C>A), rs11030104 (A>G), rs12273539 (C>T), rs11030102(C>G), rs11030101 (A>T), rs6265 (G>A) 및 rs7124442(C>T)]의 유무를 조사하였고, 얻어진 결과를 통계적으로 처리하여 유전자 변이와 섬유근통의 발생 유무 및 섬유근통의 다양한 증상과의 관계에 대해서 조사하여 얻어진 결과이기 때문이다.
한편, 본 발명의 섬유근통 진단키트는 바이오마커조성물에 포함된 BDNF의 rs11030104(A>G) 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 검출하거나, BDNF의 rs12273539 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 검출할 수 있는 검출수단을 포함한다. 여기서, 검출수단은 바이오마커조성물에 포함된 폴리누클레오티드를 검출할 수 있는 프로브, 폴리뉴클레오티드를 증폭할 수 있는 프라이머쌍, 및 폴리뉴클레오티드의 cDNA 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 섬유근통증상예측용 진단키트는 BDNF의 rs10835210(C>A), rs11030101(A>T) 및 rs11030102(C>G) 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나 이상 또는 이들의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 검출할 수 있는 검출수단을 포함하는데, 특히, 검출수단은 rs10835210(C>A) C/C , C/A, A/A genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나를 검출하거나 rs11030101(A>T) A/A, A/T , T/T genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나를 검출하거나 rs11030102(C>G) C/C, C/G genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나를 검출하는 것이 바람직하다.
필요한 경우 섬유근통 진단이나 섬유근통증상 예측을 위해 바이오마커조성물을 포함하는 마이크로어레이로 구현할 수 있음은 물론이다.
또한, 본 발명의 섬유근통 진단에 대한 정보제공방법은 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 및 수득한 DNA 또는 RNA로부터 섬유근통진단용 바이오마커조성물에 포함된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계;를 포함한다. 여기서, 후술하는 조사결과와 같이 다형성 부위가 rs11030104인 경우, GG genotype으로 확인되면 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 섬유근통발생가능성이 40%이상 감소되고, G allele로 확인되면 섬유근통발생가능성이 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 22%이상 감소되는 것으로 진단할 수 있었으며, 다형성 부위가 rs12273539인 경우, TT genotype으로 확인되면 섬유근통발생가능성이 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 2.5배 이상 증가되는 것으로 진단할 수 있었다.
또한, 본 발명의 섬유근통증상의 진단에 대한 정보제공방법은 섬유근통환자로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 및 수득한 DNA 또는 RNA로부터 섬유근통증상예측용 바이오마커조성물에 포함된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계;를 포함한다. 여기서, 후술하는 조사결과로부터 분명하듯이 다형성 부위가 rs10835210(C>A)인 경우, C/C , C/A, A/A genotype 중 하나 이상으로 확인되거나, 다형성 부위가 rs11030101(A>T)인 경우, A/A, A/T , T/T genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상이 발현되는 것으로 진단될 수 있었고, 다형성 부위가 rs11030102(C>G)인 경우, C/C, C/G genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상 및 피로감이 발현되는 것으로 진단될 수 있었다.
또한, 섬유근통진단용 바이오마커가 없는 경우에도 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 상기 수득한 DNA 또는 RNA로부터 BDNF SNP rs11030104(A>G), rs12273539(C>T), rs2883187(C>T), rs7103873(G>C), rs7103411(C>T), rs10835210(C>A), rs11030102 (C>G), rs11030101(A>T), rs6265(G>A) 및 rs7124442(C>T)의 염기를 확인하는 단계; 및 상기 rs11030104(A>G) 및 rs12273539(C>T)의 유전자 변이가 없으면, 상기 염기서열이 확인된 10개의 BDNF SNP의 하플로타입을 구성하여 분석하는 단계;를 포함하여 섬유근통진단에 대한 정보를 제공할 수 있었다. 이 때, 하플로타입의 분석을 통해 결합된 대립유전자가 TGACCACTGC의 염기서열을 가지면 섬유근통발생가능성이 있는 것으로 진단되었다.
실시예
1. 연구대상
전국의 11개 대학병원 외래에서 섬유근통으로 진단된 환자와 건강검진 상에서 아무런 질병력과 통증 병력이 없는 건강군을 대상으로 연구를 진행하였다. 섬유근통 환자들 중에서 18세 이상이고, 자발적 동의 후에 섬유근통의 다양한 증상에 대한 설문 검사 및 약물력 등에 대해서 조사하였다. 또한 신체 검진으로 압통점의 개수와 섬유근통의 질병 활성도에 대한 평가를 시행하였다. 섬유근통 이외에 다른 질환이 있는 경우나, 섬유근통 증상을 악화시키는 정신과적 질환이아 악성 종양의 치료력이 있는 경우; 환자 보호자에 의하여 중단하는 경우; 임신한 경우 또는 가임기 여성인 경우 이 연구에서 제외하였다. 결과적으로 총 409명의 섬유근통 환자가 이 연구에 등록되어 분석하였다. 모든 환자는 퇴원시 또는 병원 내 사망시까지 추적 관찰 하였다. 임상연구 참여 전에 모든 환자에게 연구에 대해 고지를 하였고 이에 입각한 동의서를 제출받았다. 임상실험은 전남대학교 병원을 포함한 참여한 모든 연구 기관의 임상 심사위원회 (Institutional Review Board)에서 검토하고 승인하였다.
2. 섬유근통 평가
환자 정보와 검사실 결과는 환자 전자 차트에서 수집하였고, 섬유근통의 다양한 증상에 대해서는 설문를 실시하였다. 나이; 성별; 질병 유병 기간; 결혼 여부; 경제력 및 교육 수준 평가; 고혈압, 당뇨, 다른 질환의 기왕력, 흡연/음주 여부; 섬유근통의 약물 종류 등을 수집하였다. 섬유근통의 증상에 대한 설문의 종류는 섬유근통의 질병 활성도 평가를 위한 FIQ, 피로 정도의 평가를 위한 BFI, 우울증 평가를 위한 BDI, 삶의 질의 전반적인 평가를 위한 SF-36, 불안 정도의 평가를 위한 STAI-I, STAI-II 이다.
3. BDNF 유전자 다형성 조사
연구 당시 환자에 대한 혈액 샘플을 동의하에 채취하였고 10개의 BDNF 유전자 변이에 대해서 조사하였다.
조사에 사용한 후보 유전자의 선택에 대한 근거와 각각의 유전자 탐색을 위한 primer sequence는 다음의 표1 및 표 2와 같다. 먼저, BDNF 유전자 선택에 대한 근거는 기존의 논문의 검색과 hanmap 유전자 데이터베이스를 참고하여 12개를 선택하였으나, 최종적으로 하기 표 1같이 10개의 BDNF SNP를 선택하였다.
BDNF 유전자에서 rs2883187(C>T), rs7103873 (G>C), rs7103411(C>T), rs10835210(C>A), rs11030104 (A> G), rs12273539 (C> T), rs11030102 (C> T), rs7103873 (C> T), rs7103811 (C> T), rs11030101 (A> T), rs6265 (G> A) 및 rs7124442 (C> T)의 분석시약은 Applied Biosystems (Applied Biosystems, USA)에 의해 디자인되었다. 시약은 TaqMan MGB 프로브(FAM 및 VIC 염료 표지)로 구성된다.
SNP Minor allele frequency
(in Asia) 		Possible Functional Effects Source 관련질환
rs6265 (Val66Met) 0.2286 Missense hanmap 정신분열병
rs12273539 0.243 Missense hanmap 정신분열병, 우울증과 관련
rs10835210 0.409 intron hanmap 포비아 정신분열병
rs11030101 0.3113 intron hanmap 천식, 우울증의 전기자극 효과와 연관
rs7124442 0.3299 intron hanmap 자살과 관련
rs11030102 0.1377 intron hanmap anorexia and bulimia.
rs11030104 0.2443 intron hanmap 정신분열병, 알츠하이머 질환과 연관
rs7103411 0.2562 intron hanmap
rs7103873 0.4536 intron hanmap
rs2883187 0.4036 intron hanmap 정신분열병
Figure 112018003943383-pat00001
BDNF 유전자의 TaqMan 프로브 유전자 타이핑에 사용되는 프라이머 서열은 상기 표 2와 같다.
10㎕의 반응은 40X 시약 0.125㎕, 2X TaqMan Genotyping Master mix (Applied Biosystems, USA) 5㎕ 및 50ng의 게놈 DNA 2㎕를 사용하여 작업 할 수 있도록 최적화되었다. PCR 조건은 다음과 같다 : 95 ℃에서 10 분간 1 사이클; 95 ℃ 15 초, 60 ℃ 1 분 40 회. PCR은 ABI plus (Applied Biosystems, USA)에서 수행되었다. 샘플을 판독하고 소프트웨어 ABI plus (Applied Biosystems, USA)를 사용하여 분석하였다.
4. 통계분석
환자 정도와 검사실 자료는 변수가 정규분포를 따를 경우 평균, 표준편차로 정규 분포를 따르지 않을 때는 중간값, 사분위 수 (25th 와 75th percentiles)로 표현하였다. 범주형 변수들은 수와 퍼센트로 각각 표현하였다. 두 군의 비교는 Student's t-test 와 Mann-Whitney test, Pearson chi-square, Fisher exact test를 이용하여 분석하였다. 모든 분석은 연령과 성별을 보정하여 분석하였으며 (analysis of covariance (ANCOVA)), 유전자변이에 따른 섬유근통의 위험도를 측정하기 위하여 Logistic regression analysis을 수행하여 Odd ratio 를 산출하였다. 모든 통계 분석은 양측 검정 및 P 값이 0.05 미만인 경우 통계적 유의성이 있다고 정의 하였다. 모든 분석은 Statistical Package for Social Sciences software, 버전 21.0 을 사용하였다.
5. 결과
(1) BDNF 유전자 변이에 따른 섬유근통의 위험도 분석
10개의 BDNF 유전자 변이를 423명의 국내 대학병원의 섬유근통 환자와 409명의 정상인을 대상으로 성공적으로 분석하였으며, BDNF 유전자 변이와 섬유근통의 발병 위험도를 표 3 및 표 4에 나타내었다.
Marker Genotype/Allele Contol: n (%) Fibromyalgia: n (%) Exact p valuea OR (95%CIs, p, adjusted by age, sexb
rs2883187.C.T. C/C 115(27.5) 100(24.4) 0.218 1
C/T 220(52.6) 208(50.9) 1.044(0.747-1.458), p=0.802
T/T 83(19.9) 101(24.7) 1.340(0.897-2.002), p=0.152
C 450(53.8) 408(49.9) 0.119
T 386(46.2) 410(50.1) 1.147(0.943-1.395), p=0.171
rs7103873.G.C. G/G 113(27.8) 98(24) 0.245 1
C/G 210(51.6) 208(51) 1.110(0.791-1.556), p=0.546
C/C 84(20.6) 102(25) 1.345(0.899-2.01), p=0.149
G 436(53.6) 404(49.5) 0.112
C 378(46.4) 412(50.5) 1.153(0.946-1.405), p=0.158
rs7103411.C.T. C/C 120(28.5) 128(31.3) 0.638 1
C/T 208(49.4) 198(48.4) 0.884(0.641-1.22), p=0.454
T/T 93(22.1) 83(20.3) 0.865(0.584-1.28), p=0.468
C 448(53.2) 454(55.5) 0.374
T 394(46.8) 364(44.5) 0.925(0.76-1.125), p=0.435
rs10835210.C.A. C/C 204(49.4) 196(48) 0.725 1
A/C 175(42.4) 172(42.2) 0.991(0.740-1.326), p=0.949
A/A 34(8.2) 40(9.8) 1.183(0.714-1.957), p=0.514
C 583(70.6) 564(69.1) 0.554
A 243(29.4) 252(30.9) 1.048(0.846-1.297), p=0.671
rs11030104.A.G. A/A 101(24) 126(31.0) 0.031 1
A/G 205(48.8) 196(48.2) 0.758(0.544-1.057), p=0.102
G/G 114(27.1) 85(20.9) 0.619(0.419-0.913), p=0.016
A 407(48.5) 448(55) 0.009
G 433(51.5) 366(45) 0.781(0.641-0.95), p=0.013
Marker Genotype/Allele Contol: n (%) Fibromyalgia: n (%) Exact p valuea OR (95%CIs, p, adjusted by age, sexb
rs12273539.C.T. C/C 283(67.1) 268(65.4) 0.101 1
C/T 132(31.3) 125(30.5) 1.009(0.747-1.362), p=0.955
T/T 7(1.7) 17(4.1) 2.586(1.052-6.36), p=0.038
C 698(82.7) 661(80.6) 0.299
T 146(17.3) 159(19.4) 1.161(0.902-1.493), p=0.246
rs11030102.C.G. C/C 419(99.3) 402(98.5) 0.334 1
C/G 3(0.7) 6(1.5) 2.129(0.524-8.649), p=0.291
C 841(99.6) 810(99.3) 0.335
G 3(0.4) 6(0.7) 2.12(0.524-8.58), p=0.292
rs11030101.A.T. A/A 208(49.5) 197(48.3) 0.752 1
A/T 178(42.4) 172(42.2) 0.985(0.737-1.317), p=0.92
T/T 34(8.1) 39(9.6) 1.152(0.694-1.912), p=0.583
A 594(70.7) 566(69.4) 0.585
T 246(29.3) 250(30.6) 1.036(0.837-1.283), p=0.743
rs6265.G.A. G/G 96(22.9) 87(21.3) 0.77 1
A/G 204(48.7) 197(48.3) 1.017(0.712-1.451), p=0.928
A/A 119(28.4) 124(30.4) 1.110(0.752-1.638), p=0.599
G 396(47.3) 371(45.5) 0.496
A 442(52.7) 445(54.5) 1.058(0.869-1.287), p=0.575
rs7124442.C.T. C/C 2(0.5) 0(0) 0.574 1
C/T 51(12.1) 47(11.5) 683123.831(0-Inf), p=0.972
T/T 368(87.4) 360(88.5) 682163.974(0-Inf), p=0.972
C 55(6.5) 47(5.8) 0.59
T 787(93.5) 767(94.2) 1.078(0.716-1.623), p=0.72
누락된 데이터[BDNF rs2883187(5명의 대조군), BDNF rs7103873 (1명의 환자 및 16명의 대조군), BDNF rs7103411 (2명의 대조군), BDNF rs10835210 (1명의 환자 및 10명의 대조군), BDNF rs11030104 (2명의 환자 및 3명의 대조군), BDNF rs12273539 (1명의 대조군), BDNF rs11030102 (1명의 환자 및 1명의 대조군), BDNF rs11030101 (1명의 환자 및 3명의 대조군), BDNF rs6265 (4명의 대조군 및 1명의 환자) 및 BDNF rs7124442 (2명의 환자 및 2명의 대조군)]는 분석에서 제외되었다. aValue는 Fisher 's exact test 또는 χ2test에 의해 결정되었고, bLogistic 회귀 분석을 사용하여 OR (95 % CI; 신뢰 구간)을 계산했다.
표 3 및 4로부터 다음과 같은 사실을 알 수 있었다. 10개의 BDNF 유전자 중에서 BDNF SNP rs11030104는 섬유근통의 발생과 유의하게 연관이 있었다. 특히 BDNF SNP rs11030104의 GG genotype 섬유근통의 발생율을 40% 정도 감소시켰다 (Odd ratio[OR] 0.619 P=0.016). 또한 BDNF SNP rs11030104의 G allele 역시 22% 정도 섬유근통의 발생율을 감소시켰다(OR 0.871, P=0.013). 또한 BDNF SNP rs12273539 TT genotype은 섬유근통의 발생을 2.5 배 이상 증가시키는데 유의미한 관련성이 있었다 (OR 2.586, P=0.038). 그 외에 다른 BDNF유전자 변이는 섬유근통의 발생 또는 예측과는 연관이 없었다.
(2) BDNF 유전자 변이와 섬유근통 환자에서 다양한 증상의 발현과의 관계성분석
BDNF 유전자 변이와 섬유근통 환자에서 다양한 증상의 발현과의 관계성을 분석하고 그 결과를 표 5 및 표 6에 나타내었다.
표 5 및 표 6으로부터, BDNF SNP rs11030102와 rs11030101의 유전자 변이는 섬유근통의 불안 증상의 발현과 의미 있게 연관이 있었다. 또한 SNP rs11030102는 섬유근통 환자에서 피로감의 발현과 상당한 연관 관계가 있었다.
Figure 112018003943383-pat00002
Figure 112018003943383-pat00003
FIQ, Fibromyalgia Impact Questionnaire; BFI, Brief Fatigue Inventory; PCS, Physical Component Summary; MCS, Mental Component Summary; BDI, Brief Depression Inventory; STAI-1, State-Trait Anxiety Inventory-1; STAI-2, State-Trait Anxiety Inventory-2. aMissing data were excluded from analyses
(3) BDNF 하플로타입(Haplotype)과 섬유근통 발생의 관계 분석
추가적인 유전자 통계 분석법으로 10개의 BDNF SNP의 BDNF 하플로타입(Haplotype)을 구성하여 섬유근통 환자와 정상인에서 분석하고 그 결과를 표 7에 나타내었다.
Combined Allele Healthy Controls:n(%) Patients with FM:n(%) Age and Sex adjusted OR(95% CI) p valuea p valueb
TGACCGCTGC 193(26.6) 340(45) 1.0(reference) < 0.001
TATCCAACCT 119(16.4) 232(30.7) 1.106(0.833-1.47) 0.487
TGACCACTGC 160(22) 1(0.1) 0.004(0-0.026) <0.001
TAACTACCCT 66(9.1) 146(19.3) 1.248(0.887-1.756) 0.204
TATCCGACCT 103(14.2) 0(0) 0(0-Inf) 0.963
TAACTGCCCT 65(9) 0(0) 0(0-Inf) 0.97
CAACCACCGC 20(2.8) 37(4.9) 1.088(0.612-1.934) 0.774
aComputed for thee stimated coefficient of each haplotype in the logistic regression. bComputed by Pearson'schi-squaredtest.
누락된 데이터는 제외되었다 (n = 51). 39개 haplotype 구조 중에서 입원 환자와 대조군 모두에서 1 % 이상의 빈도를 갖는 7 개 haplotype이 제시된다. 다른 일배체형 구조의 총 빈도는 대조군의 경우 46명 (6 %), 환자의 경우 30 명 (3.8 %)이었다. 로지스틱 회귀 모델을 사용하여 OR를 계산했다. 가설 검정에 대한 예측 정확도는 이론적 증거보다 높았다.
표 7은 개개의 BDNF SNP뿐 아니라 BDNF 하플로타입(Haplotype)도 섬유근통의 발생과 연관이 있음을 보여주고 있다 (TGACCACTGC, OR 0.004; p<0.001).
(4) 섬유근통과 BDNF 유전자변이의 연관성
상술된 실험결과를 통해 BDNF 유전자 변이의 분석이 섬유근통의 진단의 정확성을 향상시키고 증상의 발현을 예측하는데 중요한 바이오 마커로 작용할 수 있다는 점을 규명하였음을 알 수 있다.
따라서, 본 발명은 진단하고자 하는 개체의 생체시료로부터 얻어진 BDNF 유전자 변이 분석을 시행하는 것만으로 섬유근통의 설문이나 신체검진 등의 복잡한 절차를 거치지 않고 섬유근통을 쉽고 빠르게 진단할 수 있고, 섬유근통이 발생 가능한 만성 통증 환자에서도 섬유근통의 발병을 예측할 수 있으며, 섬유근통이 이미 발병한 섬유근통환자의 경우 섬유근통의 증상을 예측할 수 있어 의사의 처치에 도움이 될 수 있음을 알 수 있다.
임상적 함의 측면에서 특정 BDNF SNP를 섬유근통진단을 위한 바이오마커로 사용하는 것은 비 침습성과 편리성의 이점을 제공하므로 본 발명은 현재 및 미래의 섬유근통에 걸릴 위험이 있는 환자를 식별 할 수 있는 잠재적 도구로서 큰 도움이 될 수 있을 것이다.
본 발명은 이상에서 살펴본 바와 같이 바람직한 실시 예를 들어 도시하고 설명하였으나, 상기한 실시 예에 한정되지 아니하며 본 발명의 정신을 벗어나지 않는 범위 내에서 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 다양한 변경과 수정이 가능할 것이다.

Claims (23)

  1. 뇌유래 신경성장인자(brain-derived neurotrophic factor :BDNF)의 rs11030104(A>G) 부위를 포함하는 10 내지 100개 뉴클레오티드 길이의 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 대조군으로 포함하는 섬유근통진단용 바이오마커조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 rs11030104(A>G) 폴리뉴클레오티드는 rs11030104의 GG genotype 또는 rs11030104의 G allele의 폴리뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 섬유근통진단용 바이오마커조성물.
  3. BDNF의 rs12273539 부위를 포함하는 10 내지 100개 뉴클레오티드 길이의 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 대조군으로 포함하는 섬유근통진단용 바이오마커조성물.
  4. 제 3 항에 있어서,
    상기 rs12273539 폴리뉴클레오티드는 rs12273539 TT genotype의 폴리뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 섬유근통진단용 바이오마커조성물.
  5. BDNF의 rs10835210(C>A), rs11030101(A>T) 및 rs11030102(C>G) 부위 중 어느 하나 이상을 포함하는 10 내지 100개 뉴클레오티드 길이의 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드를 대조군으로 포함하는 섬유근통증상예측용 바이오마커조성물.
  6. 제 5 항에 있어서,
    상기 rs10835210(C>A) 폴리뉴클레오티드는 rs10835210(C>A) C/C , C/A, A/A genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 섬유근통증상예측용 바이오마커조성물.
  7. 제 5 항에 있어서,
    상기 rs11030101(A>T) 폴리뉴클레오티드는 rs11030101(A>T) A/A, A/T , T/T genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 섬유근통증상예측용 바이오마커조성물.
  8. 제 5 항에 있어서,
    상기 rs11030102(C>G) 폴리뉴클레오티드는 rs11030102(C>G) C/C, C/G genotype의 폴리뉴클레오티드 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 섬유근통증상예측용 바이오마커조성물.
  9. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물을 검출할 수 있는 검출수단을 포함하는 섬유근통 진단키트.
  10. 제 9 항에 있어서,
    상기 검출수단은 상기 바이오마커조성물에 포함된 폴리뉴클레오티드를 검출할 수 있는 프로브, 상기 폴리뉴클레오티드를 증폭할 수 있는 프라이머쌍, 및 상기 폴리뉴클레오티드의 cDNA 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 섬유근통 진단키트.
  11. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물을 포함하는 섬유근통 진단용 마이크로어레이.
  12. 제 5 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물을 검출할 수 있는 검출수단을 포함하는 섬유근통증상예측용 진단키트.
  13. 제 12 항에 있어서,
    상기 검출수단은 상기 바이오마커조성물에 포함된 폴리뉴클레오티드를 검출할 수 있는 프로브, 상기 폴리뉴클레오티드를 증폭할 수 있는 프라이머쌍, 및 상기 폴리뉴클레오티드의 cDNA 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 섬유근통증상예측용 진단키트.
  14. 제 5 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물을 포함하는 섬유근통증상예측용 마이크로어레이.
  15. 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 및
    상기 수득한 DNA 또는 RNA로부터 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물에 포함된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계;를 포함하는 섬유근통 진단에 대한 정보제공방법.
  16. 제 15 항에 있어서,
    상기 다형성 부위가 rs11030104인 경우, GG genotype으로 확인되면 상기 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 섬유근통발생가능성이 40%이상 감소되고, G allele로 확인되면 섬유근통발생가능성이 상기 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 22%이상 감소되는 것으로 진단할 수 있는 것을 특징으로 하는 섬유근통 진단에 대한 정보제공방법.
  17. 제 15 항에 있어서,
    상기 다형성 부위가 rs12273539인 경우, TT genotype으로 확인되면 섬유근통발생가능성이 상기 다형성 부위가 없는 대조군과 비교하여 2.5배 이상 증가되는 것으로 진단할 수 있는 것을 특징으로 하는 섬유근통 진단에 대한 정보제공방법.
  18. 섬유근통환자로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계; 및
    상기 수득한 DNA 또는 RNA로부터 제 5 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 바이오마커조성물에 포함된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계;를 포함하는 섬유근통증상의 진단에 대한 정보제공방법.
  19. 제 18 항에 있어서,
    상기 다형성 부위가 rs10835210(C>A)인 경우, C/C , C/A genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상이 발현되는 것으로 진단되는 것을 특징으로 하는 섬유근통증상의 진단에 대한 정보제공방법.
  20. 제 18 항에 있어서,
    상기 다형성 부위가 rs11030101(A>T)인 경우, A/A, A/T genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상이 발현되는 것으로 진단되는 것을 특징으로 하는 섬유근통증상의 진단에 대한 정보제공방법.
  21. 제 18 항에 있어서,
    상기 다형성 부위가 rs11030102(C>G)인 경우, C/C, C/G genotype 중 하나 이상으로 확인되면 섬유근통의 불안 증상 및 피로감이 발현되는 것으로 진단되는 것을 특징으로 하는 섬유근통증상의 진단에 대한 정보제공방법.
  22. 개체로부터 분리한 생물학적 시료에서 BDNF 유전자의 DNA 또는 RNA를 수득하는 단계;
    상기 수득한 DNA 또는 RNA로부터 BDNF SNP rs11030104(A>G), rs12273539(C>T), rs2883187(C>T), rs7103873(G>C), rs7103411(C>T), rs10835210(C>A), rs11030102 (C>G), rs11030101(A>T), rs6265(G>A) 및 rs7124442(C>T)의 염기를 확인하는 단계; 및
    상기 rs11030104(A>G) 및 rs12273539(C>T)의 유전자 변이가 없으면, 상기 염기서열이 확인된 10개의 BDNF SNP의 하플로타입을 구성하여 분석하는 단계;를 포함하는 섬유근통 진단에 대한 정보제공방법.
  23. 삭제
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