KR101978915B1 - The composition comprising extract of Euphorbia pulcherrima for improving acne - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 포인세티아 추출물을 포함하는 여드름 예방 및 개선용 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균, 항염 효과를 갖는 포인세티아 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 및 개선용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for prevention and improvement of acne comprising Poincetia extract, and more particularly, to a composition for preventing and treating acne, which contains Poincetia extract having anti-bacterial and anti-inflammatory effects against Propionibacterium acnes as an active ingredient And compositions for improvement.
여드름(Acne vulgaris)은 청소년기부터 중년에 이르기까지 발생하는 가장 흔한 피부질환 중 하나이며, 모낭 상피의 이상 과각화, 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)로부터 유도된 염증, 피지 과분비 등의 다양한 요인이 그 원인으로 작용한다. 피지는 모낭이라 불리는 모발을 포함한 관과 연결된 피지선에서 분비된다. 피지선은 얼굴, 등, 가슴 부위에 많이 존재하므로 이들 부위에서 여드름이 흔히 발생하게 된다. 정상적인 피부에서 피지는 모낭의 개구를 통해 피부 표면으로 배출되지만, 모낭의 이상각화나 피지 과분비로 인해 모낭의 폐색이 일어나 피지 배출이 잘 되지 않으면 여드름의 기본 병변인 면포(comedone)를 형성하기도 한다. Acne vulgaris is one of the most common skin diseases that occur from adolescence to middle age and is characterized by various factors such as abnormal epidermal hair follicle, inflammation induced by Propionibacterium acnes, It acts as a cause. The sebaceous glands are secreted from the sebaceous glands, which are connected to ducts containing hair called hair follicles. Since sebaceous glands are present in many parts of the face, back, and chest, acne is common in these areas. In normal skin, sebum is released to the surface of the skin through the opening of the hair follicle. However, when the hair follicles are clogged due to the abnormal angle of the hair follicle or sebaceous hyperplasia and the sebum does not discharge well, the skin may form a basic lesion of acne.
여드름의 증상은 과다 분비된 피지가 피지선 주변의 모공에 쌓이면서 면포를 형성하게 되는 면포성 여드름부터, 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 번식되어 염증 반응이 생기면서 붉은 여드름인 구진이 생기는 구진성 여드름, 구진의 염증 반응이 더 심해지면서 내부에 고름 주머니인 농포가 생기는 화농성 여드름, 농포가 피부 안에서 터져 여드름 환부 주변에 더 많은 염증을 유발시켜 손가락만한 덩어리인 결절이 생기는 결절성 여드름까지 다양한 피부 병변으로 나타난다. 여드름은 흔하게 발생하는 피부 질환이기 때문에 면포성 여드름처럼 증상이 가벼울 때는 일시적인 생리 현상으로 간주하기도 하지만, 주위조직의 손상과 염증세포 침윤을 보이는 화농성, 결절성 여드름 같은 경우 흉터나 색소 침착 등을 남기기 쉽다.Symptoms of acne include the accumulation of excess sebum in the pores around the sebaceous glands and the formation of cottonseed pores, acne from the Propionibacterium acnes Propionibacterium acnes (Propionibacterium acnes) Acne, acne vulgaris, acne vulgaris, acne vulgaris, acne vulgaris, pustular pustules, pustules, pustules, and nodular acne, which cause more inflammation around the acne lesion, It manifests as various skin lesions. Because acne is a common skin disease, it is considered to be a temporary physiological phenomenon when the symptoms are light, such as acne pimples, but it is prone to leave scarring or pigmentation in the case of acne vulgaris or nodular acne which shows damage to surrounding tissues and inflammatory cell infiltration.
여드름을 치료하기 위해 경구 항생제와 레티노이드의 복용 등의 방법들이 보편적으로 이용되고 있다. 특히, 세균 감염에 의해 생성되는 염증성 여드름의 경우 항생제 처리를 통해 증상을 완화시킬 수 있으나 여러 부작용이 보고되고 있으며, 대다수의 이러한 항생제에 대한 세균 내성이 급속하게 나타나고 있다. 최근 테트라사이클린(tetracycline), 에리트로마이신(erythromycin) 등은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 증식 억제와 염증 반응을 감소에 이용되는 항생제이지만 항생제 내성 발생으로 인하여 지속적인 사용이 어렵고 다량 사용시 간독성이 심한 것으로 알려져 있다. 또한, 국소 치료요법으로 주로 사용되는 과산화 벤조일(Benzoyl peroxide)은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대해 강한 항균작용이 있고, 항염 및 면포 용해작용이 있다. 하지만 피부에 심각한 자극을 주어 홍진, 발진, 건조 등 여러 부작용의 위험성이 있다. To treat acne, oral antibiotics and retinoids are commonly used. In particular, inflammatory acne caused by bacterial infection can alleviate symptoms through antibiotic treatment, but many side effects have been reported, and the majority of these bacterial resistance to antibiotics is rapidly emerging. Recently, tetracycline, erythromycin and others have been used to reduce the proliferation of Propionibacterium acnes and to decrease the inflammatory response. However, due to the development of antibiotic resistance, it is difficult to use continuously. . Benzoyl peroxide, which is mainly used as a topical therapy, has a strong antimicrobial action against Propionibacterium acnes and has anti-inflammatory and cotton-soluble properties. However, there is a risk of various side effects such as erythema, rash, dryness by giving serious stimulus to skin.
따라서 이러한 문제점을 극복하기 위해 비교적 피부에 자극이 적고 부작용이 적은 천연물질을 이용한 효능물질 개발에 관한 연구가 활발하게 이루어지고 있다.Therefore, in order to overcome these problems, studies on the development of effective substances using natural substances having relatively little skin irritation and few side effects have been actively carried out.
상기 문제점을 해결하기 위한 본 발명의 목적은 항균 및 항염 효과가 있는 포인세티아 추출물을 유효성분으로 함유하여 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생육 및 염증 반응을 억제하는 여드름 예방 및 개선용 조성물을 제공하는 것이다.An object of the present invention to solve the above problems is to provide a composition for prevention and improvement of acne which inhibits the growth and inflammation reaction of Propionibacterium acnes containing an extract of Poinsettia having an antibacterial and anti- .
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 양상은,According to an aspect of the present invention,
포인세티아 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 예방 및 개선용 조성물을 제공하는 것이다.The present invention provides a composition for preventing and improving acne comprising an extract of Poinsettia as an active ingredient.
본 발명에 있어서, 포인세티아 추출물을 포함하는 여드름 예방 및 개선용 조성물은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균화성과 염증반응 억제 효과를 가짐으로써, 여드름 예방 및 개선에 효과적이다.In the present invention, the composition for prevention and improvement of acne comprising Poincetia extract is effective for prevention and improvement of acne by having antimicrobial activity against Propionibacterium acnes and inhibiting inflammation reaction.
또한, 상기 여드름 예방 및 개선용 조성물은 천연 물질로 이루어져 있으므로 합성 물질에 의한 부작용이나 위험도가 없으며, 인체에 무해하고, 안전하다.In addition, since the composition for preventing and improving acne is made of a natural substance, it has no side effects or risks due to a synthetic substance, and is harmless and safe to human body.
도 1은 포인세티아 추출물의 처리 유/무에 따른 항균활성 시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 2는 포인세티아 추출물의 농도에 따른 균 생육 저해도를 나타낸 그래프이다.
도 3은 포인세티아 추출물의 처리 유/무에 TNF-a 발현 양상을 나타낸 그래프이다.
도 4는 피부각질 세포에 대한 포인세티아 추출물의 세포 독성 실험 결과를 나타낸 그래프이다.FIG. 1 is a photograph showing the results of an antimicrobial activity test according to the treatment with or without a Poincitia extract.
FIG. 2 is a graph showing inhibition of mycelial growth according to the concentration of Poincetia extract. FIG.
Fig. 3 is a graph showing the expression pattern of TNF-a on treated / unexposed of Poinsettia extract. Fig.
FIG. 4 is a graph showing cytotoxicity test results of Poincitia extract on keratinocytes. FIG.
이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 구체적으로 기재한 것뿐이며, 본 발명의 범위는 청구범위를 기초로 해석된다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail. It should be noted, however, that the present invention has been specifically described to facilitate understanding of the present invention, and the scope of the present invention is interpreted based on the claims.
본 발명은 포인세티아 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 예방 및 개선용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing and improving acne comprising an extract of Poinsettia as an active ingredient.
상기 포인세티아(Euphorbia pulcherrima)는 홍성목(紅星木)이라고도 불리는 멕시코 원산의 열대 상록 관목으로, 일장이 짧아지고 온도가 내려가면 포(苞)가 붉게 착색되어 관상가치를 갖게 된다. 또한, 붉은색을 띠는 포가 녹색 잎과 뚜렷이 대비되기 때문에 크리스마스 계절에 장식용으로 인기가 있다.The Poinsettia (Euphorbia pulcherrima) is a tropical evergreen shrub of the Mexican origin, also known as a red star tree. When the temperature is shortened, the bract is reddishly colored to have the ornamental value. In addition, red-tinted wares contrast with green leaves, making them popular for Christmas season decorations.
상기 포인세티아의 잎과 줄기 속에는 소량의 알칼로이드가 함유되어 있고, 밝혀진 성분으로는 germanicol, beta-amyrin, pseudotaraxasterol, pulcherrol, octaeicosanol, rubber, beta-sitosterol, caffeic acid, anthocyanin 등이 함유되어 있다.The leaves and stems of Poinsettia contain a small amount of alkaloids. The components found include germanicol, beta-amyrin, pseudotaraxasterol, pulcherrol, octaeicosanol, rubber, beta-sitosterol, caffeic acid and anthocyanin.
본 발명에 있어서, 상기 포인세티아 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 당업계에 잘 알려진 통상의 추출 방법에 의하여 추출할 수 있으며, 유기용매를 이용하여 추출하는 것이 바람직하다.In the present invention, the extract of Poinsettia may be extracted by a conventional extraction method well known in the art using water, an organic solvent, or a mixed solvent thereof, and is preferably extracted using an organic solvent.
상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 에틸아세테이트, 헥산 및 크로로포름으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상일 수 있다.The organic solvent may be at least one selected from the group consisting of alcohols having 1 to 4 carbon atoms, ethyl acetate, hexane, and chloroform.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 가장 바람직한 추출물로는 상기 포인세티아 전초의 에탄올 추출물이 사용될 수 있다.In one embodiment of the present invention, the ethanol extract of the Poinsettia outpost may be used as the most preferable extract.
상기 추출물은 냉침 추출법, 온침 추출법 또는 열 추출법 등의 방법이 사용될 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파 분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다.The extract may be obtained by a method such as a cold extraction method, a warm-up extraction method or a heat extraction method, and a conventional extracting device, an ultrasonic pulverizing extractor or a fractionator may be used.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제조된 추출물은 여과하거나 농축 또는 건조하여 용매를 제거할 수 있으며, 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압 여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일예로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있고, 상기 건조는 일예로 동결 건조법으로 수행할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the extract may be filtered, concentrated or dried to remove the solvent. Specifically, the filtration may be performed using a filter paper or a vacuum filter. The concentration may be performed using a vacuum concentrator, , Followed by concentration under reduced pressure using a rotary evaporator. The drying can be carried out, for example, by the lyophilization method.
본 발명에 있어서, 상기 여드름 예방 및 개선용 조성물은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대하여 항균 활성을 가질 수 있다. 또한 상기 조성물은 항염증 조성물일 수 있다.In the present invention, the composition for prevention and improvement of acne may have an antibacterial activity against Propionibacterium acnes. The composition may also be an anti-inflammatory composition.
여드름 원인 균인 상기 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)는 혐기성의 그람 양성균으로 포자를 형성하지 않으며, 막대(rod) 형태를 가지고 있어 여드름 간균이라고도 불린다. 제한적으로 호기성 증식도 가능하며, 피부와 모낭의 대표적인 상재균 중 하나이고, 각질세포(keratinocytes), 피지세포(sebocytes) 및 대식세포(macrophage)의 pro-inflammatory cytokine의 생성을 촉진하여 염증성 여드름을 발생시킬 수 있다. 또한, 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)와 침윤성 단핵구(monocyte) 및 림프구 사이의 상호작용 또한 염증성 여드름의 발생에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)는 낮은 분자량의 펩타이드를 생산하는데 이것은 다형핵백혈구(polymorphonuclear leukocyte; PMNK)를 화학적으로 유인하여 염증을 유발시키고, 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 생성하는 다양한 염증성 연결인자들에 의해 면역세포를 자극하여 IL-8, IL-1b, TNF-a 등의 염증성 싸이토카인(cytokine)을 생성하여 피부 내 염증반응을 심화시킨다. 모낭의 이상각화나 피지 과분비로 인해 모낭의 폐색이 일어나게 되면, 모낭 내로 산소 유입이 감소하게 되고 이는 혐기성인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생육에 더욱 유리한 조건을 형성하여 여드름 병소에서 증식이 촉진된다. 또한 피지선에서 피지 분비가 증가하게 되면 호지성(lipophilic)인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생육이 유리해지고, 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 생성하는 리파아제 효소는 피지를 분해하여 지방산을 형성한다. 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)로 인해 생성된 지방산은 모낭을 자극하여 모낭벽을 파괴하고 그 부위에 면역 세포들이 몰려들어 염증을 일으키게 된다. Propionibacterium acnes is an anaerobic Gram-positive bacterium that does not form spores but also has a rod shape and is also called acne bacillus. It is also one of the representative fungi of skin and hair follicles and promotes the production of pro-inflammatory cytokines of keratinocytes, sebocytes and macrophages, resulting in inflammatory acne . In addition, the interaction between Propionibacterium acnes, infiltrating monocytes and lymphocytes is also known to play an important role in the development of inflammatory acne. Propionibacterium acnes produces low molecular weight peptides that chemically induce polymorphonuclear leukocyte (PMNK) to induce inflammation and produce Propionibacterium acnes Inflammatory cytokines such as IL-8, IL-1b, and TNF-a are produced by stimulating immune cells with various inflammatory connective factors such as TNF-α and TNF-α. When the hair follicle occlusion or follicle occlusion occurs due to an abnormal angle of the hair follicle, oxygen inflow into the hair follicle is reduced, which is a more favorable condition for the growth of the anaerobic propionibacterium acnes, . In addition, when sebaceous glands are increased in sebaceous glands, the growth of lipophilic Propionibacterium acnes is favored, and the lipase enzyme produced by Propionibacterium acnes degrades sebum To form a fatty acid. Fatty acid produced by Propionibacterium acnes destroys the hair follicle by stimulating the hair follicle, causing inflammation of the area by the immune cells.
상기 여드름 예방 및 개선용 조성물은 포인세티아 추출물을 유효성분으로 포함하여 상기 프로피오니박테리움 아크네스의 생육 및 염증 반응을 억제함으로 여드름의 예방 및 개선에 우수한 효과를 나타낸다.The composition for prevention and improvement of acne has an excellent effect for prevention and improvement of acne by suppressing the growth and inflammation reaction of Propionibacterium acnes containing poinsetia extract as an active ingredient.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 포인세티아 추출물은 상기 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 내지 5.0중량%로 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.01 내지 0.2중량%로 포함될 수 있다.In one embodiment of the present invention, the Poissyntia extract may be contained in an amount of 0.001 to 5.0% by weight, preferably 0.01 to 0.2% by weight based on the total weight of the composition.
상기 함량이 0.001중량% 미만이면 유효한 효과를 나타낼 수 없으며, 5.0 중량%를 초과하면 변색, 변취 등 제형 안정성에 문제가 있다.If the content is less than 0.001% by weight, the effective effect can not be exhibited. If the content is more than 5.0% by weight, there is a problem in formulation stability such as discoloration and detachment.
본 발명에 있어서, 상기 여드름의 개선 및 예방용 조성물은 포인세티아 추출물 외에 사용방법 및 사용 목적에 따라 다양한 성분들을 더 포함할 수 있다.In the present invention, the composition for improving and preventing acne may further comprise various components depending on the method of use and the purpose of use, in addition to the extract of Poincetia.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 여드름 예방 및 개선을 위한 조성물은 스킨, 로션, 크림 및 파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형으로 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.According to one embodiment of the present invention, the composition for prevention and improvement of acne can be used as one or more formulations selected from the group consisting of skins, lotions, creams and powders, but is not limited thereto.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실험예 및 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실험예는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실험예와 실시예에 한정되는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 발명의 실험예 및 실시예는 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to experimental examples and examples. However, the experimental examples according to the present invention can be modified into various other forms, and the scope of the present invention should not be construed as being limited to the experimental examples and the embodiments described below. Experimental examples and embodiments of the present invention are provided to enable those skilled in the art to more fully understand the present invention.
제조예 1 : 포인세티아 추출물 제조Production Example 1: Production of Poincetia extract
건조된 포인세티아 전초를 분쇄하여 2배량의 에탄올에 침지시킨 상태로 초음파 장치에 30분간 노출시켰다. 24시간 침지 후 여과지에 거른 다음 회전감압농축기로 용매를 제거하여 추출물을 제조하였다.The dried Poissetia outpost was pulverized and immersed in 2-fold volume of ethanol and exposed to an ultrasonic apparatus for 30 minutes. After soaking for 24 hours, the mixture was filtered through a filter paper, and then the solvent was removed with a rotary evaporator to prepare an extract.
실험예 1 : 균주 및 배양조건Experimental Example 1: Strain and culture conditions
균주는 KCTC 생물자원센터에서 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes, KCTC 3314) 균을 분양받아 사용하였다. Propionibacterium acnes (KCTC 3314) was purchased from the KCTC BRC.
상기 분양받은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)균을 Reinforced Clostridial broth 배지에 접종한 후 이를 37 ℃, 혐기조건에서 72시간 정치배양하여 실험에 사용하였다.Propionibacterium acnes was inoculated into a Reinforced Clostridial broth medium and incubated at 37 ° C under anaerobic conditions for 72 hours.
실험예 2 : 항균활성 확인- 평판배지 확산법Experimental Example 2: Identification of antibacterial activity - Flat plate diffusion method
포인세티아 추출물의 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균활성을 측정하기 위해 평판배지 확산시험(Agar diffusion method)을 진행하였다. The Agar diffusion method was performed to determine the antimicrobial activity against Propionibacterium acnes of Poinsettia extract.
Reinforced Clostridial Agar 한 plate 당 약 1 x 10^6의 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)를 균일하게 도포하였다. 3.0 mg의 포인세티아 추출물이 loading된 8 x 0.7 mm disc와 loading되지 않은 disc를 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 도포되어있는 배지 위에 핀셋을 이용하여 올려놓고 이를 37 ℃, 혐기조건에서 72시간 정치배양시켰다.Approximately 1 x 10 ^ 6 of Propionibacterium acnes was applied uniformly to a Reinforced Clostridial Agar plate. 3.0 mg of poinsetia extract loaded with 8 x 0.7 mm discs and unloaded discs were placed on Propionibacterium acnes media using tweezers and incubated at 37 ° C in anaerobic condition for 72 hours And cultured.
항균활성의 판정은 추출물 미처리 대조군 대비 실험군의 clear zone의 지름을 측정하였다.The antimicrobial activity was determined by measuring the clear zone diameter of the experimental group compared to the untreated control group.
도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 포인세티아 추출물을 처리한 실험군에서는 평균 28.75 mm의 clear zone이 나타났다.As shown in Fig. 1, in the experimental group treated with the extract of Poinsettia of the present invention, an average clear zone of 28.75 mm was obtained.
실험예 3 : 항균활성 확인- 최소억제농도(MIC) testExperimental Example 3: Identification of antibacterial activity - Minimum inhibitory concentration (MIC) test
96 well-plate에 최종 혼합액이 200 uL가 되도록 약 5x10^5 CFU/mL 농도의 세균 배양액에 각 농도에 따른 추출물을 처리하였다. 추출물의 경우 감압 농축된 포인세티아 추출물을 DMSO에 50 mg/mL의 농도로 녹인 것을 사용하여, 멸균된 액체배지로 2.0, 1.0, 0.5, 0.25, 0.125, 0.0625 mg/mL 농도가 되도록 희석해서 사용하도록 했다.To the 96 well plate was added 200 μL of the final mixture, and the extracts were treated at a concentration of about 5 × 10 5 CFU / mL in the bacterial culture. In the case of the extract, the concentrated extract of the Poinsettia was dissolved in DMSO at a concentration of 50 mg / mL and diluted to a concentration of 2.0, 1.0, 0.5, 0.25, 0.125 and 0.0625 mg / mL in the sterilized liquid medium .
세균 배양액, 추출물을 포함하는 상기 혼합액을 처리한 96-well plate를 37 ℃, 혐기조건에서 72 시간 배양하였다.The 96-well plate treated with the above mixture containing the bacterial culture and the extract was incubated at 37 ° C under anaerobic conditions for 72 hours.
항균활성의 판정은 추출물 미처리 대조군 대비 실험군의 흡광도를 샘플 처리 직후와 72시간 배양 후 microplate reader를 이용하여 600 nm에서 흡광도를 측정하여 그 변화 값을 계산, 비교하여 진행하였다.The antimicrobial activity was determined by comparing the absorbance of the experimental group with that of the untreated control group by measuring the absorbance at 600 nm using a microplate reader immediately after the sample treatment and for 72 hours.
상기 도 2는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 포인세티아 추출물의 농도별 생육 억제도를 나타낸 것으로, 포인세티아 추출물의 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 MIC값이 0.125mg/mL 임을 확인하였다.FIG. 2 shows the inhibition of growth of Propionibacterium acnes according to the concentration of Poissyntia extract. The MIC value of Propionibacterium acnes of Poinsettia extract was 0.125 mg / mL Respectively.
실험예 4 : THP-1 cell의 TNF-a 분비량 측정Experimental Example 4: Measurement of TNF-a secretion in THP-1 cells
포인세티아 추출물의 항염 효능을 확인하기 위해 ELISA 실험을 진행하였다.An ELISA experiment was conducted to confirm the anti-inflammatory activity of the extract of Poinsettia.
THP-1 cell을 96 well plate에 약 1x10^5 cells/well로 처리한 다음 RPMI-1640, 10% FBS, 1% penicillin-streptomycin 배지에서 37℃, 5% CO2조건으로 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후 이전 배양에 사용된 배지를 제거하고 배지에 THP-1 성장에 영향을 주지 않는 농도인 50, 25, 12.5 ug/mL로 희석한 포인세티아 추출물과 heat-killed P. acnes를 함께 처리하여 37℃, 5% CO2에서 24시간 반응시켰다. 반응 후 상등액을 이용하여 TNF-a ELISA kit로 정량분석을 진행하였다.THP-1 cells were treated with 1 × 10 5 cells / well in a 96-well plate and cultured in RPMI-1640, 10% FBS, 1% penicillin-streptomycin medium at 37 ° C and 5% CO 2 for 24 hours. After 24 hours, the medium used for the previous culture was removed and the medium supplemented with the Poinsettia extract diluted at 50, 25, 12.5 ug / mL with heat-killed P. acnes at concentrations not affecting THP-1 growth was 37 Lt; 0 > C and 5% CO 2 for 24 hours. After the reaction, the supernatant was quantitatively analyzed with a TNF-a ELISA kit.
여기서, "THP-1"은 인간의 단핵구 유래 대식세포의 속성을 가진, 면역세포화학 분석(immunocytochemical analysis)에 폭넓게 사용하는 세포주이다.Here, " THP-1 " is a cell line widely used for immunocytochemical analysis, which has properties of human monocyte-derived macrophages.
도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 포인세티아 추출물을 처리한 실험군에서는 대조군과 비교하여 THP-1 cell에서 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)로 인한 염증반응 유발인자인 TNF-a(Tumor necrosis factor a)의 분비가 억제된 것을 확인하였다. (도 3에서 C+P는 THP-1 세포에 heat-killed P. acnes를 처리한 군, C-P는 처리하지 않은 군을 뜻한다.)As shown in FIG. 3, in the experimental group treated with the extract of Poinsettia of the present invention, TNF-a (Tumor necrosis factor (TNF)) induced by Propionibacterium acnes in THP- a) secretion was inhibited. (In FIG. 3, C + P means heat-killed P. acnes treated group and C-P treated THP-1 cells.)
실험예 5 : 피부각질세포에 대한 세포독성Experimental Example 5: Cytotoxicity to keratinocytes
피부각질세포에 대한 포인세티아 추출물의 독성을 측정하기 위해 MTT 실험을 진행하였다.MTT experiments were conducted to determine the toxicity of Poincetia extracts on keratinocytes.
HaCaT cell을 96 well plate에 약 1x10^4 cells/well로 처리한 다음 DMEM, 10% FBS, 1% penicillin-streptomycin 배지에서 37℃, 5% CO2조건으로 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후 이전 배양에 사용된 배지를 제거하고 배지에 100, 50, 25, 12.5 ug/mL로 희석한 포인세티아 추출물을 처리하여 37℃, 5% CO2에서 24시간 반응시켰다. HaCaT cells were treated with 1 × 10 4 cells / well in a 96-well plate and cultured in DMEM, 10% FBS, 1% penicillin-streptomycin medium at 37 ° C and 5% CO 2 for 24 hours. After 24 hours, the medium used for the previous culture was removed, and the Poincetia extract diluted with 100, 50, 25, and 12.5 ug / mL was treated in the medium and reacted at 37 ° C and 5% CO 2 for 24 hours.
처리 후 각 웰 당 5 mg/mL MTT 용액을 20 uL 씩 첨가하여 37℃, 5% CO2에서 3시간 동안 반응시켰다. 반응 후 상등액을 모두 제거하고 DMSO 150 uL씩 첨가하여 상온에서 10분간 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.After treatment, 20 μL of 5 mg / mL MTT solution was added to each well, followed by reaction at 37 ° C and 5% CO 2 for 3 hours. After the reaction, the supernatant was removed and 150 μL of DMSO was added. The reaction was carried out at room temperature for 10 minutes, and the absorbance was measured at 540 nm using a microplate reader.
그 결과, 도 4와 같이 포인세티아 추출물은 200 ug/mL 이하에서 피부각질세포에 대하여 세포독성을 나타내지 않았다.As a result, as shown in Fig. 4, Poincetia extract did not show cytotoxicity on keratinocytes below 200 ug / mL.
상기 실험 결과에 따르면, 본 발명에 따른 포인세티아 추출물이 여드름의 원인인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생육을 저해하고, 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)로 인한 피부의 염증 반응을 저해 함으로써 여드름 예방 및 개선하는 천연 소재임을 확인하였다.According to the above experimental results, the extract of Poinsettia according to the present invention inhibits the growth of Propionibacterium acnes, which is the cause of acne, and the inflammation reaction of the skin caused by Propionibacterium acnes It is confirmed that it is a natural material to prevent and improve acne.
이하, 상기 실험예의 결과를 근거로 하여 포인세티아 추출물을 이용한 여러 제형예를 조성하여 제시한다. 그러나 이들 제형예는 본 발명을 설명하기 위한 것으로 본 발명의 제형이 이들 제형예에만 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명한 것이다.Based on the results of the above experimental examples, various formulation examples using the extract of Poinsettia are prepared and presented. It will be apparent to those skilled in the art, however, that these formulation examples are for the purpose of illustrating the present invention and that the formulation of the present invention is not limited to these formulation examples.
제형예 1 내지 3 : 포인세티아 추추물을 함유하는 화장료 조성물 제조Formulation Examples 1 to 3: Preparation of Cosmetic Composition Containing Poinsettia Extract
제형예 1 : 로션(emulsion)Formulation Example 1: Emulsion
제형예 2 : 유연 화장수(skin toner)Formulation Example 2: Flexible lotion (skin toner)
제형예 3 : 크림(cream)Formulation Example 3: Cream
Claims (8)
상기 포인세티아 추출물은 상기 포인세티아의 줄기, 잎, 꽃, 열매 및 종자로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추출물인 여드름 예방 및 개선용 조성물.
The present invention relates to a cosmetic composition comprising a poinsettia extract as an active ingredient,
Wherein said Poinsettia extract is at least one extract selected from the group consisting of stem, leaf, flower, fruit and seed of said Poinsettia.
상기 포인세티아 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매로 추출된 추출물인 여드름 예방 및 개선용 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the Poinsettia extract is an extract extracted with water, an organic solvent or a mixed solvent thereof.
상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 에틸아세테이트, 핵산 및 클로로포름으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상인 여드름 예방 및 개선용 조성물.
The method of claim 3,
Wherein the organic solvent is at least one selected from the group consisting of alcohols having 1 to 4 carbon atoms, ethyl acetate, nucleic acid and chloroform.
상기 여드름 예방 및 개선용 조성물은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대하여 항균 활성을 갖는 여드름 예방 및 개선용 조성물.
The method according to claim 1,
The composition for preventing and improving acne has an antibacterial activity against Propionibacterium acnes.
상기 여드름 예방 및 개선용 조성물은 항염증 조성물인 여드름 예방 및 개선용 조성물.
The method according to claim 1,
The composition for preventing and improving acne is a composition for preventing and improving acne which is an anti-inflammatory composition.
상기 포인세티아 추출물은 상기 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 내지 5.0중량%로 포함되는 여드름 예방 및 개선용 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the Poinsettia extract is contained in an amount of 0.001 to 5.0% by weight based on the total weight of the composition.
상기 여드름 예방 및 개선용 조성물은 스킨, 로션, 크림 및 파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형인 여드름 예방 및 개선용 조성물.The method according to claim 1,
Wherein the composition for preventing and improving acne is at least one type of formulation selected from the group consisting of skins, lotions, creams and powders.
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