KR101966576B1

KR101966576B1 - 5-ht4 수용체 작용제로서 아미드 화합물

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Publication number: KR101966576B1
Application number: KR1020177025584A
Authority: KR
Inventors: 라마크리쉬나 니로기; 애닐 카브하리 신데; 압둘 라쉬드 모하메드; 산그램 케쉬아리 사라프; 나르심하 보가라주; 람쿠마르 서브라마니안; 프라딥 자야라잔; 고피나드 비라푸네니; 벤카테스왈루 자스티
Original assignee: 수벤 라이프 사이언시스 리미티드
Priority date: 2015-02-13
Filing date: 2016-01-07
Publication date: 2019-04-05
Also published as: WO2016128990A1; HRP20191179T1; LT3265459T; TR201909997T4; IL253848A0; MD3265459T2; NZ734400A; AU2016217461A1; EP3265459A1; BR112017017275A2; EA034618B1; ZA201705292B; ME03430B; EA201791829A1; SI3265459T1; US20180051011A1; SG11201706501VA; JP2018509396A; ES2734734T3; DK3265459T3

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 및 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이러한 화합물의 제조 방법 및 이러한 화합물을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 5-하이드록시트립타민 4(5-HT₄) 수용체와 관련된 다양한 질환의 치료에 유용하다:

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Description

5-HT4 수용체 작용제로서 아미드 화합물

본 발명은 5-하이드록시트립타민 4(5-HT₄) 수용체 작용제로서 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이러한 화합물의 제조 방법 및 이러한 화합물을 포함하는 약학 조성물을 기술한다.

5-HT₄ 수용체는 5-하이드록시트립타민(5-HT) 수용체의 7개의 아형 중 하나이다. 이것은 아데닐레이트 사이클라제의 활성화와 양성적으로 연결된 G-단백질에 커플링된 7-막관통 도메인 단백질이다(문헌[Molecular Pharmacology, 1990, 37, 408-411]). 5-HT₄수용체 작용제는 알츠하이머병(AD), 정신분열증, 우울증, 주의력 결핍 과잉행동 장애, 헌팅톤병, 파킨슨병 및 다수의 다른 정신 질환의 치료에 잠재적인 유용성을 갖는 것으로 밝혀졌다(문헌[Current Topics in Medicinal Chemistry, 2010, 10, 527-553]). 5-HT₄ 수용체 작용제는 설치류의 상이한 거동 실험에서 기억력을 개선하는 것으로 공지되어 있다(문헌[Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology, 2003, 367: 621-628]). 5-HT₄ 수용체는 또한 시냅스 가소성의 조절 및 저장된 시냅스 정보의 구체적인 특성의 결정에서 핵심 역할을 한다(문헌[Cerebral Cortex, 2005, 15, 1037-1043]). 래트, 마우스, 기니아 피그 또는 사후 인간 뇌에서 5-HT₄ 수용체 길항제 [¹²⁵I] SB207710 및 [³H]GR113808을 사용하는 방사선사진촬영 연구는 5-HT₄ 수용체가 해마 및 전두엽을 비롯한 대뇌변연계에 고밀도로 존재함을 나타냈고(문헌[Neuropharmacology 1994, 33, 527-541]; 문헌[European Neuropsychopharmacology, 2003, 13, 228-234]), 이는 기억 및 인지에서 5-HT₄ 수용체의 역할을 시사한다.

알츠하이머병(AD)의 세포 기전, 즉 아밀로이드 전구체 단백질(APP)로부터의 신경독성 아밀로이드 β-단백질(Aβ)을 특이적으로 표적화하는 어떠한 약물도 시판되지 않는다. AD는 주로 아밀로이드 β-단백질(Aβ)로 구성되는 노인성 반점의 출현 및 환자의 뇌에서의 신경섬유 다발의 발생에 의해 특징지어지는 진행성 신경퇴행 질환이다(문헌[Journal of Neuropathology & Experimental Neurology, 1997, 56, 321-339]). AD 환자는 또한 인지 결핍, 손상된 장기 증강(LTP), 학습 및 기억 결핍(문헌[Neuron, 2004, 44, 181-193]) 및 콜린성 신경전달에서의 지속적 결핍을 갖는다.

국제특허공개 제2005/049608호, 제2006/090224호, 제2011/099305호, 제2011/101774호, 제2007/048643호, 제2007/068739호 및 제2007/096352호, 및 미국특허공개 제2008/0207690호 및 제2008/0269211호는 일부 5-HT₄ 수용체 화합물을 개시하였다. 다수의 5-HT₄ 수용체 작용제/부분 작용제가 문헌에 개시되어 있지만, 5-HT₄ 수용체를 표적화하는 작용제 또는 부분 작용제인 어떠한 화합물도 치매-관련 질환을 위해 현재까지 시장에 출시되지 않았다. 따라서, 5-HT₄수용체에 의해 영향을 받는 질환의 치료를 위한, 신규한 화학 구조를 갖는 신규한 5-HT₄ 수용체 작용제/부분 작용제를 개발하려는 요구 및 영역이 존재한다.

한 양상에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염의 5-HT₄ 수용체 작용제에 관한 것이다:

[화학식 I]

상기 식에서,

X는 할로겐 또는 수소이고;

"

"는 부착 지점이고;

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

R₁은 수소, 불소 또는 하이드록실이고;

R₂는 각각의 경우에 수소 또는 불소이고;

"n"은 1 또는 2이다.

다른 양상에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염의 제조 방법에 관한 것이다.

또 다른 양상에서, 본 발명은 하나 이상의 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염의 치료 효과량, 및 약학적으로 허용되는 부형제 또는 담체를 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.

또 다른 양상에서, 본 발명은 5-HT₄ 수용체 작용제로서 사용하기 위한 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.

또 다른 양상에서, 본 발명은 AD, 정신분열증, 주의력 결핍 과잉행동 장애, 헌팅톤병, 파킨슨병 및 정신 질환으로부터 선택되는 다양한 질환의 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.

또 다른 양상에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하는, 5-HT₄ 수용체와 관련된 질환의 치료 방법에 관한 것이다.

또 다른 양상에서, 본 발명은 5-HT₄ 수용체와 관련된 질환의 치료용 약제의 제조를 위한 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 대표적인 화합물은 하기 특정된 화합물을 포함한다. 본 발명은 이들로 제한되는 것으로 간주되어서는 안된다.

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 하이드로클로라이드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 헤미푸마레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

(R,S) 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-3-퓨라닐메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

(R,S) 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-3-퓨라닐메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[4-플루오로-1-(테트라하이드로-3-퓨라닐메틸)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-브로모-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-브로모-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;

4-아미노-5-클로로-N-[(3-이소프로필-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메틸]-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-[(3-이소프로필-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메틸]-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(사이클로부틸메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(사이클로부틸메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

4-아미노-5-브로모-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-브로모-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[1-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-4-하이드록시-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[1-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-4-하이드록시-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;

5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-6-브로모-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-브로모-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-6-브로모-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-브로모-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-플루오로-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-플루오로-2-메틸프로필)-4-플루오로-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-플루오로-2-메틸프로필)-4-플루오로-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[1-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[3-(3-메톡시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;

5-아미노-6-클로로-N-{[4-플루오로-1-(3-메톡시프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;

4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;

4-아미노-5-브로모-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트; 및

5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-플루오로에틸)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드.

도 1은 마우스 뇌 피질 sAPPα 수준에 대한 시험 화합물의 효과를 도시한다.
도 2는 수컷 위스타(Wistar) 래트의 복부 해마로부터의 아세틸콜린의 조절에 대한 시험 화합물의 효과를 도시한다.
도 3은 수컷 위스타 래트의 복부 해마로부터의 아세틸콜린의 조절에 대한 시험 화합물의 효과의 평가를 도시한다.
도 4는 수컷 위스타 래트의 전두엽으로부터의 아세틸콜린의 조절에 대한 시험 화합물의 효과를 도시한다.
도 5는 수컷 위스타 래트의 복부 해마로부터의 아세틸콜린의 조절에 대한 시험 화합물의 효과의 평가를 도시한다.

달리 언급되지 않는 한, 명세서 및 청구범위에 사용된 하기 용어는 하기 제공된 의미를 갖는다:

용어 "할로겐"은 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 의미한다.

용어 "작용제"는 완전 작용제 또는 부분 작용제를 의미한다.

어구 "치료 효과량"은 (i) 특정 질병, 병태 또는 질환을 치료하거나, (ii) 특정 질병, 병태 또는 질환의 하나 이상의 증상을 제거하거나, (iii) 본원에 기술된 특정 질병, 병태 또는 질환의 하나 이상의 증상의 발생을 지연시키는 본 발명의 화합물의 양으로서 정의된다.

시판 중인 시약이 추가 정제 없이 사용되었다. RT는 전형적으로 약 25 내지 약 35℃의 상온 범위로서 정의된다. 달리 언급되지 않는 한, 모든 질량 스펙트럼은 ESI 조건을 사용하여 수득되었다. ¹H-NMR 스펙트럼을 브루커(Bruker) 기기 상에서 400 MHz에서 기록하였다. 중수소화된 클로로포름, 메탄올 또는 다이메틸설폭사이드를 용매로서 사용하였다. TMS를 내부 기준 표준으로서 사용하였다. 화학적 이동 값을 백만당부(δ) 값으로 표시한다. 하기 약어를 NMR 신호의 다중도에 사용한다: s=단일선, bs=넓은 단일선, d=이중선, t=삼중선, q=사중선, qui=오중선, h=칠중선, dd=이중 이중선, dt=이중 삼중선, tt=삼중 삼중선, m=다중선. 크로마토그래피는 100 내지 200 메쉬 실리카 겔을 사용하여 수행되고 질소 압력(플래시 크로마토그래피) 조건 하에 실시되는 컬럼 크로마토그래피를 지칭한다.

양태

화학식 I의 화합물은 하기 언급된 양태를 포함할 수 있다. 하기 양태가 본 발명을 설명하는 것이고 예시된 특정 양태로 청구범위를 제한함을 의도하지 않는 것이 이해되어야 한다.

한 양태에 따라서, 하기 화학식 Ia의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Ia]

상기 식에서,

X는 염소, 브롬 또는 수소이고;

"

"는 부착 지점이고;

R₁은 수소, 불소 또는 하이드록실이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 Ib-1의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Ib-1]

상기 식에서,

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 Ib-2의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Ib-2]

상기 식에서,

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 Ic-1의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Ic-1]

상기 식에서,

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 Id-1의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Id-1]

상기 식에서,

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소 또는 브롬이고;

R₂는 수소 또는 불소이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 Id-2의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Id-2]

상기 식에서,

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소이고;

R₂는 수소 또는 불소이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 Ie-1의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Ie-1]

상기 식에서,

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 Ie-2의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 Ie-2]

상기 식에서,

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 If-1의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 If-1]

상기 식에서,

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소 또는 브롬이고;

R₂는 수소 또는 불소이다.

"n"은 1 또는 2이다.

다른 양태에 따라서, 화학식 I의 화합물로부터 유도된 하기 화학식 If-2의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염이 제공된다:

[화학식 If-2]

상기 식에서,

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

"

"는 부착 지점이고;

X는 염소이고;

"n"은 1 또는 2이다.

다른 양태에 따라서,

X가 염소, 브롬 또는 수소이고;

"

"가 부착 지점이고;

R₁이 수소인,

화학식 I의 화합물이 제공된다.

다른 양태에 따라서, R₁이 수소인 화학식 I의 화합물이 제공된다.

약학 조성물

화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염을 치료법에 사용하기 위하여, 이들은 통상적으로 표준 약학 실무에 따라서 약학 조성물로 제형화될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 사용하는 통상적인 방식으로 제형화될 수 있다. 약학적으로 허용되는 부형제는 담체 또는 희석제이다. 따라서, 본 발명의 활성 화합물은 경구 투여를 위해 제형화될 수 있다. 이러한 약학 조성물 및 이의 제조 방법은 당해 분야에 널리 공지되어 있다(문헌[The Science and Practice of Pharmacy, D.B. Troy, 21^st Edition, Williams & Wilkins, 2006]).

활성 화합물의 투여량은 환자의 연령 및 중량, 치료될 질병의 성질 및 중증도 및 기타 인자와 같은 인자에 따라 변할 수 있다. 따라서, 화학식 I의 화합물, 또는 입체 이성질체 및 약학적으로 허용되는 염의 약리 효과량에 관한 임의의 언급은 상기 인자를 지칭한다.

제조 방법

화학식 I의 화합물을 하기 제시된 반응식 I 내지 VI을 사용하여 제조할 수 있다:

[반응식 I]

상기 반응식 I에서,

R₁은 수소 또는 불소이고;

m은 0 또는 1이고;

"------"는 결합이거나 결합이 아니고;

R₆은 이소프로필 또는 사이클로부틸이고;

모든 나머지 기호는 상기 정의된 바와 같다.

화학식 Ia의 화합물은 반응식 I에 따라 제조된다.

화학식 II의 화합물을 환원적 아민화에 의해 화학식 III의 화합물과 커플링시켜 화학식 Ia의 화합물을 형성한다. 상기 반응은 환원제, 예컨대 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드, 나트륨 비스(2-메톡시에톡시)알루미늄하이드라이드, 나트륨 하이드로설파이트, 나트륨 보로하이드라이드, 나트륨 시아노보로하이드라이드, 나트륨 다이티오나이트 등의 존재 하에, 바람직하게는 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드를 사용함으로써 수행될 수 있다.

이러한 반응은 바람직하게는 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 다이클로로에탄 또는 다이클로로메탄을 사용함으로써 수행된다. 상기 반응은 실온(RT)에서 수행된다. 반응 기간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 기간이다.

화학식 II의 화합물을 제조예 7, 8, 9, 11, 12, 15, 16 및 19에 언급된 유사한 방법을 사용함으로써 제조할 수 있다.

화학식 II 및 III의 화합물은 상업적으로 입수될 수 있거나, 통상적인 방법 또는 공지된 공정을 사용하는 변형에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 II]

상기 반응식 II에서,

R₁은 수소이고;

"------"는 결합이고;

Ar은 상기 정의된 바와 같다.

화학식 Ib-1 및 Ib-2의 화합물을 반응식 II에 따라 제조한다.

화학식 II의 화합물을 화학식 IV의 화합물과 커플링시켜 화학식 Ib-1의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 메탄올, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이메틸포름아미드, 다이메틸 설폭사이드, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 메탄올을 사용함으로써 수행된다. 상기 반응은 트라이에틸아민, 칼륨 카보네이트, 다이이소프로필에틸아민, 피리딘 등 또는 이들의 혼합물과 같은 염기의 존재 하에, 바람직하게는 트라이에틸아민을 사용함으로써 수행될 수 있다. 반응 온도는 용매의 선택에 따라 70 내지 86℃, 바람직하게는 74 내지 82℃의 온도일 수 있다. 반응 기간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 기간이다.

화학식 Ib-1의 화합물을 다이에틸아미노황 트라이플루오라이드의 존재하에 화학식 Ib-2의 화합물로 전환시킨다. 이러한 반응은 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 다이클로로메탄을 사용함으로써 수행된다. 상기 반응은 실온에서 수행된다. 반응의 지속 시간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 범위일 수 있다.

화학식 II의 화합물을 제조예 8, 12 및 19에 의해 제조할 수 있다.

화학식 II 및 IV의 화합물은 시판 중일 수 있거나, 통상적인 방법에 의해 또는 공지된 공정을 사용하는 변형에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 III]

상기 반응식 III에서,

R₁은 하이드록시이고;

"------"는 결합이 아님을 나타내고;

Ar은 상기 정의된 바와 같다.

화학식 Ic-1의 화합물을 반응식 III에 따라 제조한다.

화학식 II의 화합물을 화합물 IV와 커플링시켜 화학식 Ic-1의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 메탄올, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이메틸포름아미드, 다이메틸 설폭사이드, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 메탄올을 사용함으로써 수행된다. 상기 반응은 트라이에틸아민, 칼륨 카보네이트, 다이이소프로필에틸아민, 피리딘 등 또는 이들의 혼합물과 같은 염기의 존재 하에, 바람직하게는 트라이에틸아민을 사용함으로써 수행될 수 있다. 반응 온도을 용매의 선택을 기준으로 70 내지 86℃, 바람직하게는 74 내지 82℃의 범위일 수 있다. 반응의 지속 시간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 범위일 수 있다.

화학식 II의 화합물을 제조예 14를 사용하여 제조할 수 있다.

[반응식 IV]

상기 반응식 IV에서,

R₂는 수소 또는 불소이고;

모든 나머지 기호는 상기 정의된 바와 같다.

화학식 Id-1 및 Id-2의 화합물을 반응식 IV에 따라 제조할 수 있다.

화학식 IIa의 화합물을 화합물 V와 반응시켜 화학식 Id-1의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 메탄올을 사용함으로써 수행된다. 상기 반응은 트라이에틸아민, 칼륨 카보네이트, 다이이소프로필에틸아민, 피리딘 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매의 존재 하에, 바람직하게는 트라이에틸아민을 사용함으로써 수행될 수 있다. 반응 온도는 용매의 선택을 기준으로 65 내지 85℃, 바람직하게는 70 내지 80℃의 범위일 수 있다. 상기 반응은 실온에서 수행된다. 반응의 지속 시간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 범위일 수 있다.

화학식 Id-1의 화합물은 다이에틸아미노황 트라이플루오라이드의 존재 하에 불화되어 화학식 Id-2의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 다이클로로메탄을 사용하여 수행된다. 상기 반응은 실온에서 수행된다. 반응의 지속 시간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 범위일 수 있다.

화학식 IIa의 화합물을 제조예 7, 8, 9, 11, 12, 13, 15, 16, 17 및 19에 사용된 바와 유사한 방법에 의해 제조할 수 있다.

화학식 IIa 및 V의 화합물은 시판 중일 수 있거나, 통상적인 방법에 의해 또는 공지된 공정을 사용하는 변형에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 V]

상기 반응식 V에서,

R₁은 수소이고;

모든 나머지 기호는 상기 정의된 바와 같다.

화학식 Ie-1 및 Ie-2의 화합물을 반응식 V에 따라 제조한다.

화학식 II의 화합물을 화합물 VI과 커플링시켜 화학식 Ie-1의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 아세토니트릴, 메탄올, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 아세토니트릴을 사용함으로써 수행된다. 상기 반응은 나트륨 하이드록사이드, 칼륨 하이드록사이드, 나트륨 카보네이트, 칼륨 카보네이트 등 또는 이들의 혼합물과 같은 염기의 존재 하에, 바람직하게는 칼륨 카보네이트를 사용하여 수행될 수 있다. 반응 온도는 용매의 선택을 기준으로 75 내지 95℃, 바람직하게는 80 내지 90℃의 범위일 수 있다. 반응의 지속 시간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 범위일 수 있다.

화학식 II의 화합물을 화합물 VII과 세슘 카보네이트 및 칼륨 요오다이드의 존재 하에 화학식 Ie-2의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 다이메틸포름아미드, 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 다이메틸포름아미드를 사용하여 수행된다. 반응 온도는 용매의 선택을 기준으로 110 내지 130℃, 바람직하게는 115 내지 125℃의 범위일 수 있다. 반응의 지속 시간은 23 내지 25시간, 바람직하게는 24시간의 범위일 수 있다.

화학식 II의 화합물을 제조예 7, 8, 15 및 16을 사용하여 제조할 수 있다.

화합물 VII을 제조예 20을 사용하여 제조할 수 있다.

화학식 II의 화합물 및 화합물 VI 및 VII의 화합물은 시판 중일 수 있거나, 통상적인 방법에 의해 또는 공지된 공정을 사용하는 변형에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 VI]

상기 반응식 VI에서,

R₂는 수소 또는 불소이고;

모든 나머지 기호는 상기 정의된 바와 같다.

화학식 If-1 및 If-2의 화합물을 반응식 VI에 따라 제조한다.

화학식 IIa의 화합물을 화학식 VIII의 화합물과 커플링시켜 화학식 If-1의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 아세토니트릴 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이메틸포름아미드, 다이메틸 설폭사이드, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 아세토니트릴을 사용하여 수행한다. 상기 반응은 칼륨 바이카보네이트, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드, 트라이에틸아민, 칼륨 카보네이트, 다이이소프로필에틸아민, 피리딘 등 또는 이들의 혼합물과 같은 염기의 존재 하에, 바람직하게는 칼륨 카보네이트를 사용하여 수행될 수 있다. 반응 온도는 용매의 선택을 기준으로 75 내지 95℃, 바람직하게는 82 내지 88℃의 범위일 수 있다. 반응의 지속 시간은 4 내지 8시간, 바람직하게는 5 내지 7시간의 범위일 수 있다.

화학식 IIa의 화합물을 화학식 IX의 화합물과 커플링시켜 화학식 X의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 아세토니트릴, 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이메틸포름아미드, 다이메틸 설폭사이드, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 아세토니트릴을 사용하여 수행된다. 상기 반응은 칼륨 바이카보네이트, 트라이에틸아민, 칼륨 카보네이트, 다이이소프로필에틸아민, 피리딘 등 또는 이들의 혼합물과 같은 염기의 존재 하에, 바람직하게는 칼륨 바이카보네이트를 사용하여 수행될 수 있다. 반응 온도는 용매의 선택을 기준으로 75 내지 95℃, 바람직하게는 82 내지 88℃의 범위일 수 있다. 반응의 지속 시간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 범위일 수 있다.

화학식 X의 화합물은 다이에틸아미노황 트라이플루오라이드의 존재 하에 불화되어 화학식 If-2의 화합물을 형성한다. 이러한 반응은 메탄올, 다이클로로에탄, 다이클로로메탄, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 다이메틸포름아미드, 다이메틸 설폭사이드, 다이에틸 에터 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서, 바람직하게는 다이클로로메탄을 사용하여 수행된다. 상기 반응은 실온에서 수행된다. 반응의 지속 시간은 10 내지 14시간, 바람직하게는 11 내지 13시간의 범위일 수 있다.

화학식 IIa의 화합물은 제조예 7, 8, 9, 11, 12, 15, 16 및 19를 사용하여 제조될 수 있다.

화학식 IIa, VIII 및 IX의 화합물은 시판 중일 수 있거나, 통상적인 방법에 의해 또는 공지된 공정을 사용하는 변형에 의해 제조될 수 있다.

필요에 따라, 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 적절한 산 또는 산 유도체와의 반응에 의해 통상적으로 제조할 수 있다.

적합한 약학적으로 허용되는 염은 당해 분야의 숙련자에게 명백하고, 문헌[Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19]에 기술된 것들을 포함한다. 염은 무기 산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산 및 인산, 또는 유기 산, 예컨대 석신산, 말레산, 아세트산, 푸마르산, 시트르산, 말산, 타르타르산, 벤조산, p-톨루엔산, p-톨루엔설폰산, 벤젠설폰산, 메탄설폰산 또는 나프탈렌설폰산에 의해 형성된다. 화학식 I의 화합물의 가장 바람직한 염은 타르타레이트, 푸마레이트, 옥살레이트 및 하이드로클로라이드이다.

화학식 I의 특정 화합물은 입체 이성질 형태(예컨대, 부분입체 이성질체 및 거울상 이성질체)로 존재할 수 있고, 본 발명은 각각의 이들 입체 이성질 형태, 및 라세미체를 비롯한 이들의 혼합물로 확장된다. 상이한 입체 이성질 형태는 통상적인 방법에 의해 서로 분리될 수 있고, 임의의 소정 이성질체는 입체특이적 또는 비대칭 합성의 의해 수득될 수 있다. 본 발명은 또한 호변이성질 형태 및 이들의 혼합물로 확장된다.

일반적인 입체 이성질체는 일반적으로 원래 공지된 방식으로 광학적으로 활성인 이성질체로 분리될 수 있다. 하나의 비대칭 탄소 원자를 갖는 화학식 I의 화합물의 경우, 본 발명은 D-형태, L-형태 및 D,L-혼합물에 관한 것이고, 다수의 비대칭 탄소 원자를 함유하는 화학식 I의 화합물의 경우, 본 발명은 부분입체 이성질 형태에 관한 것이고, 본 발명은 이들 입체 이성질 형태, 및 라세미체를 비롯한 이들의 혼합물로 확장된다. 비대칭 탄소 원자를 갖고 대체로 라세미체로서 수득되는 이들 화학식 I의 화합물은 통상적인 방법에 의해 서로 분리될 수 있거나, 임의의 소정 이성질체는 임의의 입체특이적 또는 비대칭 합성에 의해 수득될 수 있다. 그러나, 출발 시 광학적으로 활성인 화합물을 사용하는 것이 또한 가능하고, 이때 상응하는 광학적으로 활성인 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체 화합물이 최종 화합물로서 수득된다.

화학식 I의 화합물의 입체 이성질체는 하기 제공된 하나 이상의 방식으로 제조될 수 있다:

i) 하나 이상의 시약이 이들의 광학적으로 활성인 형태로 사용될 수 있다.

ii) 금속 촉매와 함께 광학적으로 순수한 촉매 또는 키랄 리간드가 환원 공정에서 사용될 수 있다. 금속 촉매는 로듐, 루테늄, 인듐 등일 수 있다. 키랄 리간드는 바람직하게는 키랄 포스핀일 수 있다(문헌[Principles of Asymmetric synthesis, J. E. Baldwin Ed., Tetrahedron series, 14, 311-316]).

iii) 입체 이성질체의 혼합물은 키랄 산 또는 키랄 아민 또는 키랄 아미노 알코올, 키랄 아미노산에 의한 부분입체 이성질체 염의 형성과 같은 통상적인 방법에 의해 분해될 수 있다. 이때, 부분입체 이성질체의 생성된 혼합물은 분별 결정, 크로마토그래피 등과 같은 방법에 의해 분리될 수 있고, 이어서 유도체를 가수분해시킴으로써 광학적으로 활성인 생성물을 단리하는 추가적인 단계가 수행된다(문헌[Jacques et. al., "Enantiomers, Racemates and Re용액", Wiley Interscience, 1981]).

iv) 입체 이성질체의 혼합물은 미생물 분해, 키랄 산 또는 키랄 염기에 의한 부분입체 이성질체 염의 분해와 같은 통상적인 방법에 의해 분해될 수 있다.

사용될 수 있는 키랄 산은 타르타르산, 만델산, 락트산, 캠퍼설폰산, 아미노산 등일 수 있다. 사용될 수 있는 키랄 염기는 신코나 알칼로이드, 브루신 또는 염기성 아미노산, 예컨대 리신, 아르기닌 등일 수 있다. 기하 이성질성을 갖는 화학식 I의 화합물의 경우, 본 발명은 이들 모든 기하 이성질체에 관한 것이다.

실시예

본 발명의 화합물은 적절한 물질 및 조건을 사용하여 하기 실험 과정에 따라 제조되었다.

제조예 1: 5-아미노-6-클로로-크로만-8-카복실산의 제조

단계 (i): 메틸 4-아미노-2-하이드록시 벤조에이트

황산(H₂SO₄)(200 mL)을 0℃의 메탄올(MeOH)(1500 mL) 중 4-아미노-2-하이드록시 벤조산(100 g, 0.653 mole)의 교반 용액에 적가하였다. 이어서, 반응 매스를 80℃까지 교반 하에 천천히 가열하고, 동일한 온도에서 6시간 동안 교반하고, 이러는 동안 박막 크로마토그래피(TLC)에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 실온(RT)까지 냉각하고, MeOH를 증발시켰다. 잔사를 물에 용해시키고, 나트륨 하이드록사이드(NaOH) 용액을 사용하여 pH를 약 7로 조정하였다. 수득된 고체를 여과하였다. 고체 매스를 다이클로로메탄(DCM)(2000 mL)에 용해시키고, 염수 용액(500 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 나트륨 설페이트(Na₂SO₄) 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 98.3 g(수율: 90%).

¹H - NMR (δ ppm): 3.76 (3H, s), 5.97 - 5.98 (1H, d, J = 1.88 Hz), 6.08 - 6.12 (3H, m), 7.42 - 7.44 (1H, d, J = 8.72 Hz), 10.75 (1H, s); 질량 (m/z): 168.1 (M+H)⁺.

단계 (ii): 메틸 4-아세틸아미노-2-하이드록시 벤조에이트의 제조

아세트산 무수물(Ac₂O)(66.50 mL, 0.704 mole)을 0℃의 DCM(980 mL) 중 메틸 4-아미노-2-하이드록시 벤조에이트(98 g, 0.586 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 적가하였다. 이어서, 반응 매스를 천천히 10℃가 되게 하고, 동일한 온도에서 4시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 냉각된 물(1000 mL)에 붓고, 30분 동안 교반하였다. 수득된 고체를 여과하고, 에틸 아세테이트(EtOAc)(1000 mL)에 용해시켰다. 유기 상을 염수 용액(500 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 88.8 g(수율: 72.4%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.03 (3H, s), 3.82 (3H, s), 7.00 - 7.03 (1H,dd, J = 8.68, 1.60 Hz), 7.33 - 7.34 (1H, d, J = 1.72 Hz), 7.66 - 7.68 (1H, d, J = 8.72 Hz), 10.18 (1H, bs), 10.57 (1H, s); 질량 (m/z): 210.2 (M+H)⁺.

단계 (iii): 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-하이드록시 벤조에이트의 제조

N-클로로석신이미드(NCS)(69 g, 0.509 mole)를 실온의 1,2-다이클로로에탄(2 L) 중 메틸 4-아세틸아미노-2-하이드록시 벤조에이트(88.8 g, 0.424 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 80℃까지 천천히 가열하고, 동일한 온도에서 추가로 4시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 생성물을 실온으로 냉각하고, 1,2-다이클로로에탄을 증발시켰다. 잔사를 물(1 L)로 희석하고, 수득된 고체를 여과하였다. 수득된 고체를 DCM(2 L)에 용해시키고, 염수 용액(500 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 97 g(수율: 93.9%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.15 (3H,s), 3.84 (3H,s), 7.72 (1H, s ), 7.76 (1H, s), 9.48 (1H, bs), 10.49 (1H, s); 질량 (m/z): 244.1 (M+H)⁺, 246.0 (M+H)⁺.

단계 (iv): 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-(프로파길옥시)벤조에이트의 제조

프로파길 브로마이드(53.57 mL, 0.479 mole)를 0℃의 다이메틸포름아미드(DMF)(1 L) 중 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-하이드록시 벤조에이트(97 g, 0.399 mole, 상기 단계에서 수득됨) 및 칼륨 카보네이트(K₂CO₃)(110.17 g, 0.798 mole)의 교반 용액에 첨가하였다. 이어서, 반응 매스를 실온까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 추가로 28시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 생성물을 냉각된 물(10 L)에 붓고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고, n-헥산(3 x 500 mL)으로 세척하고, EtOAc(3 L)에 용해시켰다. 유기 상을 염수 용액(500 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 99.6 g(수율: 88.64%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.15 (3H, s), 3.62 (1H, s), 3.77 (3H, s), 4.81 - 4.82 (2H, d), 7.75 (1H, s), 7.90 (1H, s), 9.60 (1H, s); 질량 (m/z): 282.0 (M+H)⁺, 284.1 (M+H)⁺.

단계 (v): 메틸 5-아세틸아미노-6-클로로-2H-크로멘-8-카복실레이트의 제조

다우섬(dowtherm)(495 mL) 중 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-프로파길옥시 벤조에이트(99 g, 0.509 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액을 240℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응 매스를 60℃까지 냉각하고, n-헥산(3.5 L)에 천천히 붓고, 1시간 동안 교반하였다. 수득된 고체를 여과하고, DCM(2 L)에 용해시키고, 염수 용액(500 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(60:40)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 더욱 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 38.0 g(수율: 38.3%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.06 (3H, s), 3.77 (3H, s), 4.82 - 484 (2H, m), 6.01 - 6.06 (1H, m), 6.40 - 6.43 1H, m), 7.57 (1H, s), 9.77 (1H, s); 질량 (m/z): 282.0 (M+H)⁺, 284.0 (M+H)⁺.

단계 (vi): 메틸 5-아세틸아미노-6-클로로-2H-크로만-8-카복실레이트의 제조

수소 기체를 에탄올(540 mL) 중 메틸 5-아세틸아미노-6-클로로-2H-크로멘-8-카복실레이트(38 g, 0.134 mole, 상기 단계에서 수득됨) 및 팔라듐 하이드록사이드(19 g, 50% w/w)의 교반 용액 내로 4시간의 기간에 걸쳐 통과시키고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 셀라이트 층을 통해 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 34.7 g(수율: 90.69%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.85 - 1.88 (2H, m), 2.06 (3H, s), 2.56 - 2.61 (2H, m), 3.76 (3H, s), 4.13 - 4.15 (2H, m), 7.54 (1H, s), 9.65 (1H, s); 질량 (m/z): 284.1 (M+H)⁺, 286.1 (M+H)⁺.

단계 (vii): 5-아미노-6-클로로크로만-8-카복실산의 제조

메틸 5-아세틸아미노-6-클로로-2H-크로만-8-카복실레이트(34.7 g, 0.122 mole, 상기 단계에서 수득됨)를 실온의 1.7 N NaOH 용액(861 mL)에 첨가하고, 8시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 생성물을 0℃까지 냉각하고, 5 N 염산으로 pH 약 3까지 산성화시켰다. 수득된 고체를 여과하고, 테트라하이드로퓨란(THF):EtOAc(20:80, 1 L)에 용해시키고, 염수 용액(200 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 25 g(수율: 89.79%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.88 - 1.97 (2H, m), 2.49 - 2.52 (2H, m), 4.07 - 4.10 (2H, m), 5.75 (2H, bs), 7.47 (1H, s), 11.75 (1H, bs); 질량 (m/z): 228.1 (M+H)⁺, 230.0 (M+H)⁺.

제조예 2: 4-아미노-5-클로로벤조퓨란-7-카복실산의 제조

단계 (i): 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-하이드록시-3-요오도 벤조에이트의 제조

벤질트라이메틸암모늄 다이클로로요오데이트(17.33 g, 0.0498 mole)를 실온의 DCM 및 MeOH(120 mL:50 mL)의 혼합물 중 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-하이드록시 벤조에이트(12.13 g, 0.0498 mole, 제조예 1의 상기 단계 (iii)에서 수득됨) 및 나트륨 바이카보네이트(NaHCO₃)(10.46 g, 0.124 mole)의 교반 용액에 핀치식(pinchwise)으로 첨가하였다. 반응 매스를 18시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 증발시켰다. 잔사를 냉각된 물(500 mL)에 붓고, 1시간 동안 교반하였다. 수득된 고체를 클로로포름(500 mL)에 용해시키고, 나트륨 메타바이설파이트 용액(3 x 250 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 15.8 g(수율: 85.8%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.05 (3H, s), 3.92 (3H, s), 7.78 (1H, s), 9.98 (1H, s), 11.29 (1H, bs); 질량 (m/z): 370.1 (M+H)⁺, 372.0 (M+H)⁺.

단계 (ii): 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-트라이메틸실란일 벤조퓨란-7-카복실레이트의 제조

트라이에틸아민(TEA) 및 1,4-다이옥산(10 mL:80 mL) 중 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-하이드록시-3-요오도 벤조에이트(15.8 g, 0.0427 mole, 상기 단계에서 수득됨), 트라이메틸실릴아세틸렌, 구리(I) 요오다이드 및 트랜스-비스(트라이페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드의 용액을 70℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 매스를 실온으로 천천히 냉각하고, 용매를 진공 하에 농축하고, 생성된 슬러리를 톨루엔(100 mL) 중 1,1,3,3-테트라메틸 구아니딘(10.09 g, 0.0876 mole)의 용액으로 처리하였다. 반응 매스를 3시간 동안 환류시키고, 실온으로 냉각하고, 클로로포름(400 mL)으로 희석하였다. 용해되지 않은 무기 고체를 여과에 의해 분리하였다. 여액을 물(250 mL)로 세척하였다. 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(20:80)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 4.0 g(수율: 69%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.34 (9H, s), 2.14 (3H, s), 3.91 (3H, s), 7.06 (1H, s), 7.85 (1H, s), 10.12 (1H, s); 질량 (m/z): 340.3 (M+H)⁺, 342.2 (M+H)⁺.

단계 (iii): 4-아미노-5-클로로벤조퓨란-7-카복실산의 제조

칼륨 하이드록사이드(2.3 g, 0.029 mole)를 물 및 1,4-다이옥산(20 mL:20 mL)의 혼합물 중 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-트라이메틸실란일 벤조퓨란-7-카복실레이트(4.0 g, 0.011 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 핀치식으로 첨가하였다. 반응 매스를 70℃에서 18시간 동안 교반하고, 실온까지 냉각하고, 물(100 mL)로 희석하고, EtOAc(2 x 50 mL)로 세척하였다. 수성 층을 5 N HCl로 산성화시키고(pH = 약 4), 수득된 고체를 여과하고, 고 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 1.65 g(수율: 66.7%).

¹H - NMR (δ ppm): 6.63 (2H, bs), 7.21 - 7.22 (1H, d, J = 2.07 Hz), 7.63 (1H, s), 7.88 - 7.89 (1H, d, J = 2.00 Hz); 질량 (m/z): 210.2 (M-H⁺), 212.3 (M-H⁺).

제조예 3: 4-아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실산의 제조

단계 (i): 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실레이트의 제조

N-메틸피롤리딘 중 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-프로파길옥시 벤조에이트(14.83 g, 0.052 mole)의 용액을 환류 온도에서 5시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 생성물을 실온으로 냉각하고, 냉각된 물(150 mL)에 부었다. 6 N NaOH를 사용하여 용액의 pH를 약 9.5로 조정하고, 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 100 mL). 합한 유기 상을 물(100 mL), 염수 용액(100 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, MeOH:EtOAc(10:90)를 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 11.77 g(수율: 79.36%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.30 (3H, s), 2.51 (3H, s), 3.98 (3H, s), 6.45 (1H, s), 7.48 (1H, bs), 7.90 (1H, s); 질량 (m/z): 282.0 (M+H)⁺, 284.0 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실산의 제조

칼륨 하이드록사이드(3.2 g, 0.057 mole)를 물 및 1,4-다이옥산(15 mL:15 mL)의 혼합물 중 메틸 4-아세틸아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실레이트(4.0 g, 0.014 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 핀치식으로 첨가하고, 반응 매스를 18시간의 기간 동안 85℃까지 가열하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc로 세척하였다(2 x 25 mL). 수성 상을 5 N HCl(pH= 약 4)로 산성화시키고, 수득된 고체를 여과하고, 고 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 2.93 g(수율: 91.56%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.38 (3H, s), 6.43 (2H, bs), 6.77 (1H, s), 7.52 (1H, s), 12.43 (1H, bs); 질량 (m/z): 226.2 (M+H)⁺, 228.0 (M+H)⁺.

제조예 4: tert-부틸 6-아미노메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트의 제조

단계 (i): (3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메탄올의 제조

수소 기체를 6시간의 기간에 걸쳐 MeOH(150 mL) 중 (3-벤질-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메탄올(15.50 g, 0.076 mole) 및 팔라듐 하이드록사이드(7.75 g, 50% w/w)의 교반 용액 내에 통과시키고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 셀라이트 층을 통해 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 8.20 g(수율: 69%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.89 - 0.96 (1H, m), 1.35 - 1.42 (2H, m), 2.05 - 2.07 (2H, m), 2.85 - 2.88 (2H, m), 2.98 - 3.01 (2H, m), 3.50 - 3.52 (1H, m), 3.94 - 3.96 (1H, m); 질량 (m/z): 114.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): tert-부틸 6-하이드록시메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트의 제조

다이-tert-부틸 다이카보네이트(16.96 g, 0.077 mole)를 10℃의 DCM(150 mL) 중 (3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메탄올(8.00 g, 0.07 mole, 상기 단계에서 수득됨) 및 TEA(11.40 g, 0.112 mole)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 10℃에서 2시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 냉각된 물(50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(50:50)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 7.84 g(수율: 52%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.92 - 0.97 (1H, m), 1.33 - 1.36 (1H, m), 1.43 (9H, s), 1.55 - 1.60 (2H, m), 3.32 - 3.37 (2H, m), 3.43 - 3.48 (1H, m), 3.53 - 3.58 (2H, m), 3.61 - 3.64 (1H, m); 질량 (m/z): 214.2 (M+H)⁺.

단계 (iii): tert-부틸 6-메탄설포닐옥시메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트의 제조

DCM(25 mL) 중 메탄설포닐 클로라이드(4.42 g, 0.038 mole)의 용액을 0℃의 DCM(100 mL) 중 tert-부틸 6-하이드록시메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(7.80 g, 0.036 mole, 상기 단계에서 수득됨) 및 TEA(5.58 g, 0.055 mole)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 냉각된 물(50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 9.30 g(수율: 87%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.11 - 1.15 (1H, m), 1.40 - 1.42 (1H, m), 1.45 (9H, s), 3.05 (3H, s), 3.17 - 3.19 (1H, m), 3.37 - 3.41 (2H, m), 3.58 - 3.68 (2H, m), 4.09 - 4.18 (2H, m).

단계 (iv): tert-부틸 6-아지도메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트의 제조

나트륨 아자이드(7.30 g, 0.112 mole)를 10℃의 DMF(100 mL) 중 tert-부틸 6-메탄설포닐옥시메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(9.30 g, 0.039 mole, 상기 단계에서 수득됨) 및 칼륨 카보네이트(11.00 g, 0.079 mole)의 용액에 첨가하였다. 이어서, 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 냉각된 물(200 mL)에 부었다. 생성물을 EtOAc(3 x 150 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 냉각된 물(150 mL), 염수 용액(150 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 7 g(수율: 90%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.97 - 1.00 (1H, m), 1.45 (9H, s), 1.50 - 1.53 (2H, m), 3.10 - 3.15 (1H, m), 3.22 - 3.27 (1H, m), 3.35 - 3.39 (2H, m), 3.57 - 3.67 (2H, m).

단계 (v): tert-부틸 6-아미노메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트의 제조

THF(30 mL) 및 물(3 mL) 혼합물 중 tert-부틸 6-아지도메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(1.50 g, 0.006 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액을 트라이페닐포스핀(2.1 g, 0.008 mole)으로 처리하였다. 반응 매스를 실온에서 36시간 동안 교반하고, 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:DCM(2:8:90)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 1.20 g(수율: 90%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.66 - 0.70 (1H, m), 0.95 - 0.99 (1H, t), 1.17 - 1.19 (1H, m), 1.33 (9H, s), 1.53 - 1.55 (2H, m), 2.67 - 2.69 (2H, m), 3.36 - 3.41 (2H, m), 7.73 (2H, bs); 질량 (m/z): 213.3 (M+H)⁺.

제조예 5: tert-부틸 4-아미노메틸-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트의 제조

단계 (i): tert-부틸 1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트의 제조

트라이메틸설폭소늄 요오다이드(13.3 g, 0.06 mole)를 10℃의 THF(150 mL) 중 나트륨 하이드라이드(오일 중 60% 분산액, 3.0 g, 0.126 mole)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 온도를 실온까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 매스를 10℃까지 냉각하고, 동일한 온도에서 THF(50 mL) 중 N-Boc 피페리딘-4-온(10 g, 0.05 mole)의 용액을 첨가하였다. 이어서, 반응 온도를 실온까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 3시간 동안 교반하고, 냉각된 물(300 mL) 상으로 급랭시키고, 화합물을 DCM으로 추출하였다(3 x 150 mL). 합한 유기 상을 물(100 mL), 염수 용액(100 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(15:85)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 7.1 g(수율: 66%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.47 (9H, s), 1.59 - 1.62 (2H, m), 1.76 - 1.83 (2H, m), 2.69 (2H, s), 3.39 - 3.45 (2H, m), 3.70 - 3.73 (2H, m); 질량 (m/z): 214.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): tert-부틸 4-[(N,N-다이벤질아미노)메틸]-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트의 제조

다이벤질아민(7.98 g, 0.04 mole)을 실온의 MeOH(100 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트(7.86 g, 0.036 mole, 상기 단계에서 수득됨) 및 TEA(11.19 g, 0.118 mole)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 온도를 75℃까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 추가로 38시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후, 반응 매스를 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(15:85)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 7.1 g(수율: 46%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.43 (9H, s), 1.89 - 1.94 (2H, m), 2.14 - 2.19 (1H, m), 2.55 - 2.60 (2H, m), 2.92 (1H, s), 3.03 -3.09 (2H, m), 3.43 - 3.45 (1H, m), 3.64 - 3.67 (4H, m), 3.69 - 3.84 (2H, m), 7.16 - 7.35 (10H, m); 질량 (m/z): 411.3 (M+H)⁺.

단계 (iii): tert-부틸 4-[(N,N-다이벤질아미노)메틸]-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트의 제조

다이에틸아미노황 트라이플루오라이드(DAST)(3.3 g, 0.02 mole)를 -40℃의 DCM(70 mL) 중 tert-부틸 4-[(N,N-다이벤질아미노)메틸]-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(7 g, 0.017 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 이어서, 반응 온도를 실온까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 냉각된 물(100 mL) 중에서 급랭시켰다. 수성 암모니아를 사용하여 생성물의 pH를 약 9.5로 조정하고, 화합물을 DCM으로 추출하였다(3 x 50 mL). 합한 유기 상을 물(75 mL), 염수 용액(75 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(5:95)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 4.35 g(수율: 61%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.45 (9H, s), 1.89 - 1.94 (2H, m), 2.14 - 2.19 (1H, m), 2.55 - 2.60 (2H, m), 3.03 -3.09 (2H, m), 3.43 - 3.45 (1H, m), 3.64 - 3.67 (4H, m), 3.69 - 3.84 (2H, m), 7.16 - 7.35 (10H, m); 질량 (m/z): 413.3 (M+H)⁺.

단계 (iv): tert-부틸 4-아미노메틸-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트의 제조

수소 기체를 MeOH(30 mL) 중 tert-부틸 4-[(N,N-다이벤질아미노)메틸]-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트(1.37 g, 3.28 mmole, 상기 단계에서 수득됨) 및 팔라듐 하이드록사이드(1.37 g, 50% w/w)의 교반 용액 내로 8시간의 기간에 걸쳐 통과시켰다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응 매스를 셀라이트 층을 통해 여과하고, 여액을 로타배큠(rotavacuum) 상에서 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.66 g(수율: 85%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.38 (9H, s), 1.44 - 1.71 (6H, m), 2.60 - 2.64 (2H, m), 2.95 - 3.04 (2H, m), 3.73 - 3.76 (2H, m); 질량 (m/z): 233.2 (M+H)⁺.

제조예 6: t-부틸 4-아미노메틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트의 제조

tert-부틸 1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트(0.5 g, 2.34 mmole, 제조예 5의 단계 (i)에서 수득됨)를 실온의 메탄올계 암모니아 용액(20 mL, 14.83% w/v)에 첨가하였다. 이어서, 반응 매스를 밀폐된 용기 중에서 실온에서 40시간 동안 교반하였다. 반응 매스를 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.41 g(수율: 76%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.35 - 1.69 (16H, m), 2.61 - 2.69 (2H, m), 3.10 - 3.20 (2H, m), 3.81 - 3.90 (2H, m); 질량 (m/z): 231.3 (M+H)⁺.

제조예 7: 5-아미노-6-클로로- N -(4-피페리딘일메틸)크로만-8-카복사미드의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

DCM(15 mL) 중 5-아미노-6-클로로-크로만-8-카복실산(0.40 g, 1.758 mmole, 제조예 1에서 수득됨) 및 카보닐다이이미다졸(CDI)(0.427 g, 2.637 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, DCM(10 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸 피페리딘-1-카복실레이트(0.45 g, 2.109 mmole)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하고, 냉각된 물(20 mL), 염수 용액(20 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(80: 20)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.595 g(수율: 79.9%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.21 - 1.29 (4H, m), 1.34 (9H, s), 1.51 - 1.70 (3H, m), 1.86 - 1.95 (2H, m), 2.41 - 2.46 (2H, m), 3.09 - 3.12 (2H, m), 3.86 -3.92 (2H, m), 4.15 - 4.17 (2H, m), 5.55 (2H, bs), 7.53 (1H, s), 7.91 - 7.94 (1H, t); 질량 (m/z): 424.2 (M+H)⁺, 426.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -(4-피페리딘일메틸)크로만-8-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(23% w/w, 0.508 g, 13.93 mmole)를 10℃의 DCM(20 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.59 g, 1.393 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 냉각된 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 암모니아 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 100 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL), 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.425 g(수율: 95%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.20 - 1.30 (4H, m), 1.55 - 1.62 (3H, m), 1.91 - 1.98 (2H, m), 2.41 - 2.46 (3H, m), 2.91 - 2.99 (2H, m), 3.08 - 3.11 (2H, m), 4.15 - 4.17 (2H, m), 5.55 (2H, bs), 7.54 (1H, s), 7.90 - 7.93 (1H, t); 질량 (m/z): 324.2 (M+H)⁺, 326.3 (M+H)⁺.

제조예 8: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

DCM(280 mL) 중 5-아미노-6-클로로크로만-8-카복실산(2.80 g, 0.012 mole, 제조예 1에서 수득됨) 및 CDI(2.79 g, 0.017 mole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. DCM(30 mL) 중 tert-부틸 6-아미노메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(3.13 g, 0.013 mole, 제조예 4에서 수득됨)의 용액을 실온에서 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새(12시간) 교반하였다. 반응 매스를 냉각된 물(50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(30:70)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 3.68 g(수율: 71.04%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.34 (9H, s), 1.43 - 1.55 (2H, m), 1.94 - 1.97 (2H, m), 2.44 - 2.49 (3H, m), 3.14 - 3.38 (6H, m), 4.18 - 4.21 (2H, m), 5.59 (2H, bs), 7.57 (1H, s), 8.02 - 8.05 (1H, t); 질량 (m/z): 422.2 (M+H)⁺, 424.2 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(37% w/w, 3.18 g, 87.12 mmole)를 10℃의 DCM(35 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(3.68 g, 8.73 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 물(45 mL)에 용해시키고, 수성 암모니아 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, DCM으로 추출하였다(3 x 25 mL). 합한 유기 상을 물(25 mL), 염수 용액(25 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 2.7 g(수율: 96.42%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.22 - 1.30 (3H, m), 1.94 - 1.98 (2H, m), 2.43 - 2.79 (6H, m), 3.12 - 3.15 (2H, m), 3.30 - 3.35 (1H, m), 4.18 - 4.21 (2H, m), 5.60 (2H, bs), 7.59 (1H, s), 7.95 - 7.98 (1H, t); 질량 (m/z): 322.3 (M+H)⁺, 324.3 (M+H)⁺.

제조예 9: 5-아미노-6-클로로- N -[(4-플루오로-4-피페리딘일)메틸]크로만-8-카복사미드의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[4-플루오로-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

DCM(100 mL) 중 5-아미노-6-클로로-크로만-8-카복실산(2 g, 87.91 mmole, 제조예 1에서 수득됨) 및 CDI(2.13 g, 13.18 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, DCM(20 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트(2.44 g, 10.51 mmole, 제조예 5에서 수득됨)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하였다. 반응의 완료 후, 반응 매스를 냉각된 물(50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(30:70)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.73 g(수율:47.16%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.35 (9H, s), 1.49 - 1.66 (4H, m), 1.91 - 1.95 (2H, m), 2.42 - 2.46 (2H, m), 2.95 - 2.97 (2H, m), 3.46 - 3.53 (2H, m), 3.70 - 3.73 (2H, m), 4.16 - 4.18 (2H, m), 5.62 (2H, bs), 7.56 (1H, s), 7.99 - 8.02 (1H, t); 질량 (m/z): 442.3 (M+H)⁺, 444.2 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -[(4-플루오로-4-피페리딘일)메틸]크로만-8-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(20% w/w, 1.51 g, 414.5 mmole)를 10℃의 DCM(30 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[4-플루오로-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드(1.83 g, 41.44 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 냉각된 물(35 mL)에 용해시켰다. 수성 암모니아 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 20 mL). 합한 유기 상을 물(20 mL), 염수 용액(20 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 1.40 g(수율: 99%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.56 - 1.70 (4H, m), 1.94 - 1.97 (2H, m), 2.42 - 2.49 (3H, m), 2.65 - 2.73 (4H, m), 3.45 - 3.53 (2H, m), 4.19 - 4.21 (2H, m), 5.64 (2H, bs), 7.61 (1H, s), 7.98 - 8.01 (1H, t); 질량 (m/z): 342.3 (M+H)⁺, 344.2 (M+H)⁺.

제조예 10: 5-아미노-6-클로로- N -[(4-하이드록시-4-피페리딘일)메틸]크로만-8-카복사미드의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[4-하이드록시-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

DCM(6 mL) 중 5-아미노-6-클로로크로만-8-카복실산(0.200 g, 0.878 mmole, 제조예 1에서 수득됨) 및 카보닐다이이미다졸(CDI)(0.170 g, 1.054 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, DCM(4 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(0.222 g, 0.967 mmole)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 냉각된 물(10 mL), 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(30:70)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.266 g(수율: 69%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.24 - 1.32 (4H, m), 1.36 (9H, s), 1.54 - 1.70 (2H, m), 1.87 - 1.95 (2H, m), 2.41 - 2.46 (2H, m), 3.09 - 3.13 (2H, m), 3.34 - 3.36 (2H, d), 3.86 - 3.94 (2H, m), 4.80 (1H, s), 5.56 (2H, bs), 7.54 (1H, s), 7.92 - 7.94 (1H, t); 질량 (m/z): 440.1 (M+H)⁺, 442.3(M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -[(4-하이드록시-4-피페리딘일)메틸]크로만-8-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(30% w/w, 0.110 g, 3.026 mmole)를 10℃의 DCM(10 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[4-하이드록시-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.266 g, 0.605 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하고, 반응 매스를 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 냉각된 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 암모니아를 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 생성물을 다이클로로메탄(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 물(10 mL), 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.178 g(수율: 87%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.26 - 1.34 (4H, m), 1.57 - 1.69 (2H, m), 1.90 - 1.99 (2H, m), 2.45 - 2.52 (2H, m), 3.08 - 3.11 (3H, m), 3.38 - 3.41 (2H, d), 3.88 - 3.98 (2H, m), 4.75 (1H, s), 5.65 (2H, bs), 7.58 (1H, s), 7.95 - 7.97 (1H, t); 질량 (m/z): 340.1 (M+H)⁺, 342.4 (M+H)⁺.

제조예 11: 4-아미노-5-클로로- N -(4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로- N -[1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

DCM(3 mL) 중 4-아미노-5-클로로벤조퓨란-7-카복실산(0.50 g, 2.362 mmole, 제조예 2로부터 수득됨) 및 CDI(0.421 g, 2.599 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. DCM(2 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸 피페리딘-1-카복실레이트(0.658 g, 3.071 mmole)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하였다. 반응의 완료 후, 반응 매스를 냉각된 물(20 mL), 염수 용액(20 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(50:50)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.611 g(수율: 64.3%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.98 - 1.07 (2H, m), 1.37 (9H, s), 1.63 - 1.66 (2H, m), 1.71 - 1.75 (1H, m), 2.66 -2.78 (2H, m), 3.18 - 3.21 (2H, m), 3.90 - 3.93 (2H, m), 6.41 (2H, bs), 7.24 - 7.25 (1H, d, J = 1.96 Hz), 7.58 (1H, s), 7.79 - 7.82 (1H, t), 7.91 (1H, d, J = 2.00 Hz); 질량 (m/z): 408.1 (M+H)⁺, 410.1 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-4-클로로- N -(4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(23% w/w, 0.273 g, 7.49 mmole)를 10℃의 DCM(20 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-[1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드(0.611 g, 1.498 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 농축하고, 슬러리를 냉각된 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 암모니아를 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 100 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL), 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.415 g(수율: 90%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.02 - 1.13 (2H, m), 1.60 - 1.66 (3H, m), 2.42 - 2.48 (2H, m), 2.86 - 2.96 (3H, m), 3.16 - 3.19 (2H, m), 6.41 (2H, bs), 7.25 (1H, d, J = 1.77 Hz), 7.58 (1H, s), 7.74 - 7.77 (1H, t), 7.92 (1H, d, J = 1.64 Hz); 질량 (m/z): 308.4 (M+H)⁺, 310.0 (M+H)⁺.

제조예 12: 4-아미노-5-클로로- N -{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로- N -{[3-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

무수 THF(3 mL) 중 4-아미노-5-클로로벤조퓨란-7-카복실산(0.095 g, 0.448 mmole, 제조예 2에서 수득됨) 및 CDI(0.080 g, 0.493 mmole)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 무수 THF(2 mL) 중 tert-부틸 6-아미노메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(0.095 g, 0.448 mmole, 제조예 4에서 수득됨)의 용액을 실온에서 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하였다. 반응의 완료(TLC) 후에, 반응 매스를 농축하고, EtOAc(50 mL)로 희석하고, 냉각된 물(15 mL), 염수 용액(15 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(30:70)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.131 g(수율: 72%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.77 - 0.81 (1H, m), 1.18 - 1.19 (2H, m), 1.32 (9H, s), 3.18 - 3.21 (2H, m), 3.35 - 3.38 (2H, m), 6.40 (2H, bs), 7.22 - 7.23 (1H, d, J = 2.10 Hz), 7.57 (1H, s), 7.85 - 7.88 (1H, t), 7.89 - 7.90 (1H, d, J = 2.12 Hz); 질량 (m/z): 406.3 (M+H)⁺, 408.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로- N -{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(23% w/w, 0.053 g, 1.462 mmole)를 10℃의 에탄올(5 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-{[3-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드(0.118 g, 0.292 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 NH₃ 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 10 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL) 및 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.075 g(수율: 84%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.98 - 1.03 (1H, m), 1.27 - 1.29 (2H, m), 1.46 - 1.49 (1H, m), 2.91 - 2.94 (2H, m), 3.03 - 3.06 (2H, m), 3.47 - 3.51 (2H, m), 6.42 (2H, bs), 7.25 - 7.26 (1H, d, J = 2.10 Hz ), 7.59 (1H, s), 7.86 - 8.88 (1H, t), 7.91 - 7.92 (1H, d, J = 2.12 Hz); 질량 (m/z): 306.2 (M+H)⁺, 308.4 (M+H)⁺.

제조예 13: 4-아미노-5-클로로- N -(4-플루오로-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로- N -[4-플루오로-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

DMF(350 mL) 4-아미노-5-클로로벤조퓨란-7-카복실산(18.3 g, 0.0866 mole, 제조예 2에서 수득됨)의 용액에 실온의 CDI(17.8 g, 0.109 mole)를 첨가하고, 8시간 동안 교반하였다. TLC는 산의 부재를 나타냈다. DMF(50 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트(24.5 g, 0.105 mole, 제조예 5에서 수득됨)의 용액을 반응 매스에 적가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 추가로 18시간 동안 교반하고, 교반 하에 1800 mL의 빙랭 수에 붓고, 추가로 40분 동안 교반하였다. 수득된 고체를 여과하고, 진공 하에 건조하여 조질 화합물(41.2 g)을 수득하고, EtOAc:n-헥산(45:55)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 29.8 g(수율: 81%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.37 (9H, s), 1.53 - 1.77 (4H, m), 2.99 (2H, bs), 3.55 - 3.62 (2H, dd), 3.73 - 3.77 (2H, d), 6.49 (2H, s), 7.26 (1H, d), 7.62 (1H, s), 7.80 - 7.83 (1H, t), 7.94 (1H, d); 질량 (m/z): 426.3 (M+H)⁺, 428.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로- N -(4-플루오로-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(23% w/w, 0.541 mole)를 10℃의 DCM(600 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-[4-플루오로-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드(28.8 g, 0.0676 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 투명한 용액을 질소 대기 하에 실온에서 추가로 18시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 생성물을 농축하고, 400 mL의 빙랭 수를 첨가하고, 10℃의 수성 암모니아를 사용하여 pH 약 11까지 염기성화시키고, 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 250 mL). 합한 유기 상을 물(500 mL), 염수 용액(500 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 19.5 g(수율: 89%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.48 - 1.67 (4H, m), 2.01 - 2.04 (1H, bs), 2.63 - 2.74 (4H, m), 3.52 - 3.58 (2H, dd), 6.49 (2H, s), 7.26 - 7.27 (1H, d; J = 2 Hz), 7.63 (1H, s), 7.72 - 7.75 (1H, t), 7.95 (1H, d; J = 2 Hz); 질량 (m/z): 326.1 (M+H)⁺, 328.2 (M+H)⁺.

제조예 14: 4-아미노-5-클로로- N -(4-하이드록시-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로- N -[4-하이드록시-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

DCM(3 mL) 중 4-아미노-5-클로로벤조퓨란-7-카복실산(0.050 g, 0.236 mmole, 제조예 2에서 수득됨) 및 CDI(0.042 g, 0.259 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, DCM(2 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(0.081 g, 0.354 mmole, 제조예 6에서 수득됨)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 냉각된 물(10 mL) 및 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(70:30)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.064 g(수율: 64%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.14 - 1.28 (2H, m), 1.36 (9H, s), 1.40 - 1.46 (2H, m), 3.08 - 3.11 (2H, m), 3.34 - 3.36 (2H, d), 3.59 - 3.62 (2H, m), 4.79 (1H, s), 6.47 (2H, bs), 7.2 (1H, d, J = 1.95 Hz), 7.64 (1H, s), 7.66 - 7.69 (1H, t), 7.95 (1H, d, J = 1.83 Hz); 질량 (m/z): 424.2 (M+H)⁺, 426.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로- N -(4-하이드록시-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(30% w/w, 0.027 g, 0.755 mmole)를 10℃의 DCM(10 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-[4-하이드록시-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드(0.064 g, 0.151 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 냉각된 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 암모니아를 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, DCM으로 추출하였다(3 x 10 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL) 및 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.040 g(수율: 83%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.66 - 1.69 (4H, m), 2.86 - 3.04 (4H, m), 3.49 - 3.53 (2H, m), 7.11 (1H, d; J = 2.02 Hz), 7.80 (2H, m); 질량 (m/z): 324.2 (M+H)⁺, 326.2 (M+H)⁺.

제조예 15: 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -(4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -[1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

DCM(6 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실산(0.300 g, 1.330 mmole, 제조예 3에서 수득됨) 및 CDI(0.323 g, 1.995 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, DCM(4 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸 피페리딘-1-카복실레이트(0.341 g, 1.596 mmole)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하고, 냉각된 물(20 mL) 및 염수 용액(20 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(50:50)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.560 g(수율: 100%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.19 - 1.29 (2H, m), 1.45 (9H, s), 1.75 - 1.78 (2H, m), 1.82 - 1.87 (1H, m), 2.50 (3H, s), 2.61 - 2.71 (2H, m), 2.43 - 2.48 (2H, m), 4.09 - 4.15 (2H, m), 4.52 (2H, bs), 6.37 (1H, s), 7.29 - 7.31 (1H, t), 7.95 (1H, s); 질량 (m/z): 422.3 (M+H)⁺, 424.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -(4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(23% w/w, 0.259 g, 7.11 mmole)를 10℃의 DCM(20 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-[[1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드(0.60 g, 1.423 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 냉각된 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 암모니아 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, DCM으로 추출하였다(3 x 100 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL) 및 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.450 g(수율: 98%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.02 - 1.13 (2H, m), 1.60 - 1.66 (3H, m), 2.42 - 2.48 (2H, m), 2.54 (3H, s), 2.86 -2.96 (3H, m), 3.16 - 3.19 (2H, m), 4.54 (2H, bs), 6.41 (1H, s), 7.31 - 7.33 (1H, t), 7.96 (1H, s); 질량 (m/z): 322.4 (M+H)⁺, 324.4 (M+H)⁺.

제조예 16: 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -[(3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메틸]벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -{[3-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

무수 THF(3 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실산(0.101 g, 0.447 mmole, 제조예 3에서 수득됨) 및 CDI(0.080 g, 0.492 mmole)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, DCM(2 mL) 중 tert-부틸 6-아미노메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(0.095 g, 0.447 mmole, 제조예 4에서 수득됨)의 용액을 실온에서 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 농축하고, EtOAc(50 mL)로 희석하고, 냉각된 물(15 mL) 및 염수 용액(15 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(30:70)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.151 g(수율: 80%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.97 - 1.00 (1H, m), 1.42 (9H, s), 1.55 - 1.58 (4H, m), 2.52 (3H, s), 3.33 - 3.38 (2H, m), 3.51 - 3.64 (2H, m), (2H, bs), 6.37 (1H, s), 7.31 - 7.34 (1H, t), 7.95 (1H, s); 질량 (m/z): 420.2 (M+H)⁺, 422.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -[(3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메틸}벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(23% w/w, 0.065 g, 1.798 mmole)를 10℃의 에탄올(15 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드(0.151 g, 0.359 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 암모니아 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 10 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL), 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.089 g(수율: 77%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.98 - 1.03 (1H, m), 1.27 - 1.29 (2H, m), 1.46 - 1.49 (1H, m), 2.55 (3H, s), 2.91 - 2.94 (2H, m), 3.03 - 3.06 (2H, m), 3.47 - 3.51 (2H, m), 4.55 (2H, bs), 6.41 (1H, s), 7.34 - 7.35 (1H, t), 8.00 (1H, s); 질량 (m/z): 320.2 (M+H)⁺, 322.2 (M+H)⁺.

제조예 17: 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -(4-플루오로-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -[4-플루오로-1-(tert-부톡시카보닐) -4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

DCM(3 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실산(0.100 g, 0.443 mmole, 제조예 3에서 수득됨) 및 CDI(0.079 g, 0.487 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, DCM(2 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸-4-플루오로피페리딘-1-카복실레이트(0.123 g, 0.532 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 냉각된 물(10 mL) 및 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(30:70)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.188 g(수율: 97%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.86 - 0.93 (2H, m), 1.45 (9H, s), 1.59 - 1.74 (2H, m), 1.87 - 1.90 (2H, m), 2.23 - 2.29 (2H, m), 2.51 (3H, s), 3.11 - 3.16 (2H, m), 4.54 (2H, bs), 6.37 (1H, s), 7.50 - 7.52 (1H, t), 7.96 (1H, s); 질량 (m/z): 440.2 (M+H)⁺, 442.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -(4-플루오로-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(23% w/w, 0.074 g, 2.047 mmole)를 10℃의 에탄올(10 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-[4-플루오로-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드(0.180 g, 0.409 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 냉각된 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 NH₃ 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 수득한 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 10 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL) 및 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.140 g(수율: 100%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.09 - 1.15 (2H, m), 1.64 - 1.70 (2H, m), 1.98 - 2.21 (3H, m), 2.43 (3H, s), 2.67 - 2.79 (2H, m), 3.52 - 3.58 (2H, m), 6.33 (2H, bs), 6.85 (1H, s), 7.54 (1H, s), 7.73 - 7.74 (1H, t); 질량 (m/z): 340.2 (M+H)⁺, 342.2 (M+H)⁺.

제조예 18: 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -(4-하이드록시-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -[4-하이드록시-1-(tert-부톡시 카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

DCM(3 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸벤조퓨란-7-카복실산(0.100 g, 0.443 mmole, 제조예 3에서 수득됨) 및 CDI(0.093 g, 0.576 mmole)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, DCM(2 mL) 중 tert-부틸 4-아미노메틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(0.112 g, 0.487 mmole)의 용액을 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(12시간) 교반하고, 냉각된 물(10 mL), 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, EtOAc:n-헥산(80:20)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.184 g(수율: 95%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.35 (9H, s), 1.39 - 1.51 (4H, m), 2.43 (3H, s), 3.08 - 3.10 (2H, m), 3.33 - 3.35 (2H, m), 3.60 - 3.63 (2H, m), 4.80 (1H, s), 6.31 (2H, bs), 6.85 (1H, s), 7.54 (1H, s), 7.67 - 7.70 (1H, t); 질량 (m/z): 438.4 (M+H)⁺, 440.1 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로-2-메틸- N -(4-하이드록시-4-피페리딘일메틸)벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

에탄올계 수소 클로라이드(30% w/w, 0.075 g, 2.05 mmole)를 10℃의 DCM(5 mL) 중 4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-[4-하이드록시-1-(tert-부톡시카보닐)-4-피페리딘일메틸]벤조퓨란-7-카복사미드(0.180 g, 0.411 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 실온에서 2시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 냉각된 물(15 mL)에 용해시켰다. 수성 NH₃ 용액을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 수득한 생성물을 DCM으로 추출하였다(3 x 10 mL). 합한 유기 상을 물(10 mL) 및 염수 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.134 g(수율: 97%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.60 - 1.77 (4H, m), 2.44 (3H, s), 2.49 (2H, s), 2.96 - 3.10 (5H, m), 5.18 (1H, s), 6.35 (2H, bs), 6.88 (1H, s), 7.56 (1H, s), 7.77 - 7.80 (1H, t); 질량 (m/z): 338.1 (M+H)⁺, 340.4 (M+H)⁺.

제조예 19: 4-아미노-5-클로로- N -{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

0℃에서 냉각된 DCM(11.4 mL) 및 DMF(2.0 mL)의 혼합물 중 4-아미노-5-클로로-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복실산(1.22 g, 5.71 mmole, 문헌[Chem.Pharm.Bull. 1998, 46(1), 42-52]에 제공된 과정에 따라 제조됨)의 교반 용액에, 다이이소프로필에틸아민(1.48 mL, 8.56 mmole)을 첨가하였다. 10분 동안 교반한 후, DCM(11.4 mL) 중 tert-부틸 6-아미노메틸-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-카복실레이트(1.27 g, 5.99 mmole, 제조예 4에서 수득됨)의 용액을 첨가하고, 이어서 TBTU(2.01 g, 6.28 mmole)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 휘발물을 감압 하에 제거하고, 조질 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 2.45 g.

¹H - NMR (δ ppm): 0.95 - 0.96 (m, 1H), 1.45 - 1.50 (2H, m), 3.07 (2H, t, J = 8.6 Hz), 3.20 - 3.30 (1H, m), 3.30 - 3.40 (2H, m), 3.40 - 3.50 (1H, m), 3.53 (1H, d, J = 10.7 Hz), 3.62 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.27 (2H, bs), 4.79 (2H, t, J = 8.6 Hz), 7.39 (1H, bs), 7.85 (1H, s); 질량 (m/z): 408.1, 410.2 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로- N -{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드의 제조

0℃에서 냉각된 이소프로판올(1.1 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[1-(tert-부톡시카보닐)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드(452.0 mg, 1.11 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에, 이소프로판올 중 무수 HCl의 용액(3 M, 6 mL)을 첨가하였다. 반응 매스를 점진적으로 실온까지 가온하고, 16시간 동안 교반한 후, 휘발물을 감압 하에 제거하고, 조질 생성물을 에터로 마쇄하여 생성물을 백색 고체로서 수득하였다.

중량: 337.3 mg(수율: 88%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.16 - 1.26 (1H, m), 1.65 - 1.72 (2H, m), 3.02 (2H, t, J = 8.7 Hz), 3.10 - 3.38 (6H, m), 4.71 (2H, t, J = 8.7 Hz), 4.83 (2H, bs), 4.79 (2H, t, J = 8.6 Hz), 7.50 (1H, s), 7.58 (1H, bs), 8.85 (1H, bs), 9.49 (1H, bs). 질량 (m/z): 308.2, 310.2 (M+H)⁺.

제조예 20: 2,2-다이메틸-3-메톡시프로필톨루엔-4-설폰에이트의 제조

단계 (i): 2,2-다이메틸-3-메톡시프로판-1-올의 제조

THF(40 mL) 중 2,2-다이메틸프로판-1,3-다이올(10 g, 0.096 mole)의 용액을 0℃의 THF(60 mL) 중 NaH(60%, 3.84 g, 0.160 mole)의 교반 용액에 적가하였다. 이어서, 반응 매스를 80℃까지 천천히 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 메틸요오다이드(15 g, 0.105 mole)를 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(20시간) 교반하고, 냉각된 물(100 mL)에 붓고, 수득한 생성물을 다이에틸 에터(DEE)(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 물(100 mL) 및 염수 용액(100 mL)으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, MeOH:CHCl₃(1.5:98.5)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 6.5 g(수율: 57.52%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.90 (6H, s), 2.66 - 2.68 (1H, t), 3.23 (2H, s), 3.33 (3H, s), 3.42 - 3.43 (2H, d); 질량 (m/z): 119.4 (M+H)⁺.

단계 (ii): 2,2-다이메틸-3-메톡시프로필톨루엔-4-설폰에이트의 제조

p-톨루엔 설포닐 클로라이드(3.74 g, 0.019 mole)를 0℃의 피리딘(60 mL) 중 2,2-다이메틸-3-메톡시프로판-1-올(2.0 g, 0.160 mole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 분획식으로 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 밤새(20시간) 교반하였다. 반응의 완료 후(TLC), 반응 매스를 수성 HCl(60 mL)의 냉각된 1 N 용액에 붓고, 생성물을 DEE(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 물(40 mL), 염수 용액(40 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 4.25 g(수율: 92.19%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.87 (6H, s), 2.44 (3H, s), 3.06 (2H, s), 3.22 (3H, s), 3.78 (2H, s), 7.33 - 7.35 (2H, d, J = 8.00 Hz), 7.77 - 7.79 (2H, d, J = 8.00 Hz); 질량 (m/z): 273.2 (M+H)⁺.

제조예 21: 2-메톡시-2-메틸프로필톨루엔-4-설폰에이트의 제조

단계 (i): 2-메톡시-2-메틸프로판-1-올의 제조

MeOH(20 mL) 중 이소부틸렌옥사이드(1.0 g, 13.888 mmole) 및 인듐 클로라이드(0.61 g, 2.757 mmole)의 용액을 50℃에서 5시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응의 완료 후(TLC), 반응 매스를 진공 하에 농축하고, 잔사를 DCM(50 mL)에 용해시켰다. 유기 상을 포화 나트륨 바이카보네이트 용액(10 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.18 g(수율: 12.5%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.16 (6H, s), 1.94 - 1.97 (1H, t), 3.23 (3H, s), 3.42 - 3.44 (2H, d); 질량 (m/z): 105.1 (M+H)⁺.

단계 (ii): 2-메톡시-2-메틸프로필톨루엔-4-설폰에이트의 제조

p-톨루엔 설포닐 클로라이드(0.36 g, 1.889 mmole)를 0℃의 피리딘(2 mL) 중 2-메톡시-2-메틸프로판-1-올(0.18 g, 1.73 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 분획식으로 첨가하였다. 반응 매스를 질소 대기 하에 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후(TLC), 반응 매스를 냉각된 1 N 수성 HCl(10 mL)에 붓고, 생성물을 에틸 아세테이트(3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 물(5 mL), 염수 용액(5 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.26 g(수율: 12.5%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.13 (6H, s), 2.45 (3H, s), 3.14 (3H, s), 3.85 (2H, s), 7.33 - 7.35 (2H, d, J = 8.00 Hz), 7.79 - 7.81 (2H, d, J = 8.00 Hz); 질량 (m/z): 259.2 (M+H)⁺.

실시예 1: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 하이드로클로라이드의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

다이클로로에탄(DCE)(200 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(7.4 g, 0.023 mole, 제조예 8에서 수득됨) 및 테트라하이드로피란-4-카복스알데하이드(3.14 g, 0.027 mole)의 용액을 10℃까지 냉각하고, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(9.75 g, 0.046 mole)로 처리하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하였다. 반응의 완료 후(TLC), 반응 매스를 물(100 mL)에 부었다. 수성 NH₃ 용액을 사용하여 생성된 생성물의 pH를 약 9.5로 조정하고, 두 층을 분리하였다. 수성 층을 DCM으로 추출하였다(3 x 50 mL). 합한 유기 상을 물(50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(0.5:2:97.5)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 7.4 g(수율: 77%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.04 - 1.20 (2H, m), 1.21 - 1.29 (3H, m), 1.51 - 1.58 (3H, m), 1.94 - 1.98 (2H, m), 2.16 - 2.22 (4H, m), 2.44 - 2.49 (2H, m), 2.87 - 2.89 (2H, d), 3.05 - 3.08 (2H, t), 3.19 - 3.25 (2H, t), 3.75 - 3.79 (2H, m), 4.18 - 4.21 (2H, m), 5.59 (2H, bs), 7.58 (1H, s), 7.97 - 8.00 (1H, t); 질량 (m/z): 420.3 (M+H)⁺, 422.4 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 하이드로클로라이드의 제조

메탄올계 수소 클로라이드(20% w/w, 0.22 g, 6.02 mmole)를 실온의 다이에틸 에터(DEE)(40 mL) 및 MeOH(5 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(1.0 g, 2.38 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 용액에 첨가하였다. 반응 매스를 교반 하에 40℃까지 가열하고, MeOH(5 mL)를 첨가하여 투명한 용액을 수득하였다. 수득된 투명한 생성물을 40℃에서 2시간 동안 추가로 교반하고, 실온까지 냉각하였다. 반응 매스를 실온에서 밤새 교반하고, 생성된 고체 매스를 진공 하에 여과하였다. 이렇게 수득된 고체 매스를 냉각된 DEE(20 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.86 g(수율: 79.6%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.14 - 1.17 (2H, m), 1.55 - 1.65 (2H, m), 1.73 - 1.78 (2H, m), 1.82 - 1.94 (2H, m), 2.31 - 2.48 (2H, m), 2.68 - 2.82 (1H, m), 2.87 - 2.92 (1H, m), 2.97 - 3.11 (2H, m), 3.13 - 3.15 (2H, m), 3.21 - 3.26 (4H, m), 3.62 - 3.65 (2H, m), 3.78 - 3.90 (2H, m), 4.18 - 4.19 (2H, m), 5.62 (2H, bs), 7.58 (1H, s), 8.09 - 8.12 (1H, t), 9.50 (1H, bs); 질량 (m/z): 420.3 (M+H)⁺, 422.4 (M+H)⁺.

실시예 2: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 헤미푸마레이트의 제조

DEE(80 mL) 및 에탄올(20 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(2 g, 4.76 mmole, 실시예 1의 단계 (i)에서 수득됨)의 용액을 교반 하에 1시간 동안 40℃에서 가열하였다. 에탄올(4 mL) 중 푸마르산(0.387 g, 3.33 mmole)의 용액을 40℃에서 천천히 첨가하였다. 첨가하는 동안, 투명한 용액을 수득하였다. 첨가의 완료 후(약 10분), 상기 매스를 40℃에서 추가로 10분 동안 교반하고, 교반하는 동안, 고체 형성이 관찰되었다. 생성물을 실온까지 냉각하고, 동일한 온도에서 밤새 교반하고, 생성된 고체를 진공 하에 여과하였다. 이렇게 수득된 고체 매스를 냉각된 DEE(20 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 1.85 g(수율: 81.4%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.98 - 1.07 (2H, m), 1.28 - 1.29 (1H, m), 1.52 - 1.58 (3H, m), 1.94 - 1.96 (2H, m), 2.21 - 2.24 (4H, m), 2.44 - 2.45 (2H, m), 2.91 - 2.93 (2H, m), 3.05 - 3.09 (2H, m), 3.19 - 3.25 (4H, m), 3.75 - 3.79 (2H, m), 4.18 - 4.21 (2H, m), 5.59 (2H, s), 6.58 (1H, s), 7.58 (1H, s), 7.97 - 8.00 (1H, t); 질량 (m/z): 420.4 (M+H)⁺, 422.3 (M+H)⁺.

실시예 3: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

5 mL MeOH 중 L(+)-타르타르산(0.212 g, 1.42 mmole)의 용액을 MeOH(15 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.6 g, 1.43 mmole, 실시예 1의 단계 (i)에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 수득된 투명한 매스를 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 고체 매스를 수득하였다. 고체 매스를 DEE(20 mL)로 마쇄하고, 감압 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

수율: 0.79 g(97.9%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.25 - 1.36 (4H, m), 1.49 - 1.51 (1H, m), 1.66 - 1.76 (2H, m), 1.86 - 1.88 (2H, m), 2.04 - 2.06 (1H, m), 2.07 - 2.09 (2H, m), 2.51 - 2.55 (2H, t), 2.98 - 3.00 (2H, d), 3.37 - 3.46 (4H, m), 3.48 - 3.55 (2H, m), 3.89 - 3.93 (2H, m), 4.25 - 4.28 (2H, t), 4.41 (2H, s), 7.71 (1H, s), 8.40 - 8.43 (1H, t); 질량 (m/z): 420.3 (M+H)⁺, 422.4 (M+H)⁺.

실시예 4 내지 29: 실시예 4 내지 29의 화합물을 상기 제공된 실시예 1 내지 3에 기술된 실험 과정(일부 중요하지 않은 변형이 있음)에 따라 제조하였다.

실시예 30: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

MeOH(10 mL)의 5-아미노-6-클로로-N-{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(100 mg, 0.307 mmole, 제조예 8에서 수득됨), 1,6-다이옥사스피로[2.5]옥탄(71 mg, 0.622 mmole) 및 TEA(95 mg, 0.940 mole)의 용액을 78℃에서 밤새 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응 매스를 농축하고, 이렇게 수득된 조질 잔류 매스를, MeOH:TEA:CHCl₃(5: 2: 93)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 85 mg(수율: 62.5%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.15 - 1.35 (6H, m), 1.42 - 1.52 (2H, m), 1.93 - 2.21 (2H, m), 2.29 - 2.46 (5H, m), 2.97 - 3.05 (4H, m), 3.50 - 3.53 (4H, m), 4.00 (1H, s), 4.17 - 4.19 (2H, m), 5.57 (2H, bs), 7.56 (1H, s), 7.97 - 8.01 (1H, t); 질량 (m/z): 436.4 (M+H)⁺, 438.4 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

2 mL MeOH 중 L(+)-타르타르산(27.5 mg, 0.183 mmole)의 투명한 용액을 실온의 MeOH(20 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(80 mg, 0.183 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 투명한 매스를 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 고체 매스를 수득하였다. 고체 매스를 DEE(2 x 5 mL)로 더욱 마쇄하고, 감압 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 96.7 mg(수율: 89.9%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.52 - 1.58 (3H, m), 1.61 - 1.68 (2H, m), 1.81 - 1.84 (2H, m), 2.05 - 2.08 (2H, m), 2.51 - 2.54 (2H, t), 3.03 - 3.04 (2H, m), 3.11 - 3.14 (1H, m), 3.28 - 3.32 (2H, m), 3.39 - 3.46 (4H, m), 3.70 - 3.75 (4H, m), 4.24 - 4.27 (2H, t), 4.42 (2H, s), 7.71 (1H, s). 질량 (m/z): 436.4 (M+H)⁺, 438.4 (M+H)⁺.

실시예 31 내지 35: 실시예 31 내지 35의 화합물을 상기 제공된 실시예 30에 기술된 실험 과정(일부 중요하지 않은 변형이 있음)에 따라 제조하였다.

실시예 36: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드

DAST(91.7 mg, 0.57 mmole)를 -40℃의 DCM(10 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(100 mg, 0.228 mmole, 실시예 30의 단계 (i)에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 이어서, 반응 온도를 실온까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 밤새 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 매스를 냉각된 물(10 mL)로 급랭시켰다. 수성 NH₃을 사용하여 매스 pH를 pH 약 9.5로 조정하고, 화합물을 DCM으로 추출하였다(3 x 5 mL). 합한 유기 상을 물(5 mL), 염수 용액(5 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(0.5:2:97.5)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 64 mg(수율: 64%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.12 - 1.21 (2H, m), 1.28 - 1.31 (2H, m), 1.43 - 1.54 (1H, m), 1.55 - 1.65 (2H, m), 1.82 - 1.95 (2H, m), 2.13 - 2.22 (2H, m), 2.23 - 2.35 (2H, d), 2.42 - 2.49 (1H, m), 2.53 - 2.59 (1H, m), 2.95 - 2.98 (2H, m), 3.08 - 3.12 (2H, t), 3.42 - 3.56 (2H, m), 3.58 - 3.60 (2H, m), 4.18 - 4.21 (2H, t), 5.59 (2H, bs ), 7.58 (1H, s), 7.98 - 8.01 (1H, t); 질량 (m/z): 438.5 (M+H)⁺, 440.4 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

1 mL MeOH의 L(+)-타르타르산(20.3 mg, 0.135 mole)의 용액을 MeOH(5 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(60 mg, 0.137 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 투명한 매스를 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 고체 매스를 수득하였다. 고체 매스를 DEE(2 x 5 mL)로 추가로 마쇄하고, 감압 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 70.2 mg(수율: 87.1%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.42 - 1.52 (1H, m), 1.62 - 1.64 (2H, m), 1.69 - 1.73 (1H, m), 1.78 - 1.81 (3H, m), 2.06 - 2.21 (2H, m), 2.54 - 2.57 (2H, t), 2.98 - 3.10 (4H, m), 3.25 - 3.31 (4H, m), 3.64 - 3.70 (2H, m), 3.76 - 3.79 (2H, m), 4.27 - 4.30 (2H, t), 4.48 (2H, s), 7.73 (1H, s); 질량 (m/z): 438.5 (M+H)⁺, 440.4 (M+H)⁺.

실시예 37: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

MeOH(15 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.30 g, 0.947 mmole, 제조예 8에서 수득됨), 이소부틸렌옥사이드(0.38 g, 5.33 mmole) 및 TEA(0.54 g, 5.33 mmole)의 용액을 75℃에서 밤새 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후(TLC), 반응 매스를 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(0.25:0.75:99)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.69 g(수율: 67%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.00 (6H, s), 1.09 - 1.18 (2H, m), 1.21 - 1.34 (2H, m), 1.94 - 1.96 (2H, m), 2.25 - 2.28 (1H, m), 2.31 - 2.38 (1H, m), 2.44 - 2.49 (2H, m), 3.00 - 3.08 (2H, m), 3.13 - 3.18 (2H, m), 3.38 - 3.49 (1H, m), 3.96 (1H, bs), 4.19 - 4.21 (2H, t), 5.59 (2H, bs), 7.59 (1H, s), 7.94 - 7.98 (1H, t); 질량 (m/z): 394.1 (M+H)⁺, 396.2 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

2 mL MeOH 중 L(+)-타르타르산(0.155 g, 1.03 mole)의 투명한 용액을 실온의 MeOH(2 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.42 g, 1.07 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 투명한 매스를 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 고체 매스를 수득하였다. 고체 매스를 DEE(2 x 3 mL)로 추가로 마쇄하고, 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.524 g(수율: 89%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.26 (6H, s), 1.49 - 1.58 (2H, m), 1.78 - 1.88 (2H, m), 2.08 - 2.10 (2H, m), 2.54 - 2.57 (2H, t), 3.00 - 3.13 (4H, m), 3.31 - 3.48 (3H, m), 4.27 - 4.29 (2H, t), 4.42 (2H, s), 7.73 (1H, s); 질량 (m/z): 394.0 (M+H)⁺, 396.0 (M+H)⁺.

실시예 38: 4-아미노-5-클로로- N -{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

MeOH(600 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-[4-플루오로-(4-피페리딘일)메틸]벤조퓨란-7-카복사미드(19.4 g, 0.0595 mole, 제조예 13에서 수득됨)의 투명한 용액에 실온의 TEA(24.94 mL, 0.178 mole) 및 이소부틸렌옥사이드(26.7 mL, 0.297 mole, d = 0.808)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 대기 하에 7시간 동안 가열 환류하고, 이어서 실온까지 냉각하였다. 반응 매스를 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사(28.9 gm)를 수득하고, 메탄올계 NH₃:MeOH:CHCl₃(2:3:95)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 2개의 분획으로 수득하였다.

중량: 20.6 g(제1 분획 18.4 g 및 제2 분획 2.2 g)(수율: 87%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.05 (6H, s), 1.62 - 1.77 (4H, m), 2.18 (2H, s), 2.34 - 2.39 (2H, m), 2.69 - 2.72 (2H, m), 3.52 - 3.59 (2H, dd), 4.04 (1H, s), 6.49 (2H, bs), 7.26 (1H, d; J = 2 Hz), 7.63 (1H, s), 7.74 - 7.77 (1H, t), 7.95 (1H, d; J = 1.6 Hz); 질량 (m/z): 398.2 (M+H)⁺, 400.4 (M+H)⁺.

실시예 39: 4-아미노-5-클로로- N -{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드의 제조

DCM(390 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드(19.5 g, 0.0490 mole, 실시예 38에서 수득됨)의 투명한 용액에 에탄올계 HCl(19.2%, 12.06 mL, 0.0637 mole)을 실온에서 적가하였다. 투명한 매스를 질소 대기 하에 실온에서 추가로 1시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하여 고체 매스를 수득하였다. 고체 매스를 DEE(1 x 400 mL)로 마쇄하고, 에터 층을 경사분리하고, 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 HCl 염(21.30 g)으로서 수득하였다. 이러한 염(21.012 g)을 별개의 플라스크에 취하고, 에탄올(105 mL, 5 부피/중량)을 실온에서 첨가하고, 가열 환류하였다. 환류 온도에서, DM 물(12 mL)을 적가하여 투명한 용액을 수득하였다. 가열을 중단하고, 내용물을 교반 하에 냉각되도록 하였다. 45℃에서, 고체 형성이 관찰되었다. 실온까지, 이어서 10℃까지 추가로 냉각하였다. 수득된 고체를 여과하고, 고 진공 하에 건조하였다.

중량: 16.96 g(수율: 80%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.25 (6H, s), 1.94 - 2.39 (4H, m), 3.11 - 3.21 (4H, m), 3.56 - 3.74 (4H, m), 5.28 (1H, s), 6.52 (2H, s), 7.32 (1H, s), 7.65 (1H, s), 7.90 - 7.94 (2H, bs), 9.70 - 9.91 (1H, d); 질량 (m/z): 398.4 (M+H)⁺, 400.3 (M+H)⁺.

실시예 40: 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

MeOH(15 mL) 중 N-[(피페리딘-4-일)메틸]-5-아미노-6-클로로크로만-8-카복사미드(0.40 g, 1.236 mmole, 제조예 7에서 수득됨), 이소부틸렌옥사이드(0.17 g, 2.36 mmole) 및 TEA(0.24 g, 2.37 mmole)의 용액을 75℃에서 밤새 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후(TLC), 반응 매스를 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(0.25:0.75:99)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.38 g(수율: 79.16%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.12 - 1.22 (8H, m), 1.40 - 1.54 (2H, m), 1.65 - 1.73 (2H, m), 1.93 - 1.97 (2H, m), 2.03 - 2.13 (2H, m), 2.44 - 2.49 (2H, t), 2.89 - 3.01 (3H, m), 3.13 - 3.21 (2H, m), 3.97 (1H, bs), 4.17 -4.20 (2H, t), 5.58 (2H, s), 7.56 (1H, s), 7.92 - 8.00 (1H, m); 질량 (m/z): 396.3 (M+H)⁺, 398.3 (M+H)⁺.

실시예 41: 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

MeOH(5 mL) 중 L(+)-타르타르산(0.04 g, 0.266 mmole)의 용액을 MeOH(10 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.12 g, 0.303 mmole, 실시예 40에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 이렇게 수득된 투명한 매스를 실온에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 고체 매스를 수득하였다. 고체 매스를 DEE(10 mL)로 마쇄하고, 감압 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.15 g(수율: 93.75%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.29 - 1.34 (8H, m), 1.65 - 1.71 (2H, m), 1.92 - 1.95 (2H, m), 2.06 - 2.11 (2H, m), 2.54 - 2.57 (2H, t), 3.14 - 3.22 (2H, m), 3.33 - 3.36 (3H, m), 3.58 - 3.82 (2H, m), 4.26 - 4.29 (2H, t), 4.48 (2H, s) 7.72 (1H, s); 질량 (m/z): 396.2 (M+H)⁺, 398.3 (M+H)⁺.

실시예 42: 4-아미노-5-클로로- N -{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로- N -{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

MeOH(4.6 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드(160.0 mg, 0.46 mmol; 제조예 19에서 수득됨)의 교반 용액에, TEA(0.4 mL, 2.76 mmole) 및 이어서 이소부틸렌옥사이드(0.2 mL, 2.3 mmole)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 교반하고, 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 고무질 액체로서 수득하였다.

중량: 160 mg(수율: 91%);

¹H - NMR (δ ppm): 1.13 (6H, s), 1.40 - 1.46 (1H, m), 1.55 - 1.70 (2H, m), 2.41 (2H, s), 2.58 (2H, d, J = 8.5 Hz), 3.07 (2H, t, J = 8.6 Hz), 3.13 (2H, d, J = 8.8 Hz), 3.28 (2H, t, J = 5.9 Hz), 4.24 (2H, bs), 4.80 (2H, t, J = 8.6 Hz), 7.37 (1H, bs), 7.87 (1H, s); 질량 (m/z): 380.2, 382.2 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로- N -{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트의 제조

실온의 이소프로판올(6.0 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드(160.0 mg, 0.42 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에, 옥살산(37.0 mg, 0.42 mmole)을 첨가하였다. 반응 매스를 4시간 동안 교반한 후, 휘발물을 감압 하에 제거하였다. 조질 생성물을 용매 에터로 여러번 마쇄하여 상기 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다.

중량: 160.3 mg(수율: 89%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.11 (6H, s), 1.50 - 1.60 (1H, m), 1.60 - 1.72 (2H, m), 2.85 (2H, s), 3.02 (2H, t, J = 8.6 Hz), 3.12 (2H, t, J = 6.1 Hz), 3.20 - 3.50 (4H, m), 4.71 (2H, t, J = 8.6 Hz), 5.88 (2H, bs), 7.46 (1H, s), 7.56 (1H, bs); 질량 (m/z): 380.1, 382.3 (M+H)⁺.

실시예 43 내지 54: 실시예 43 내지 54의 화합물을 상기 제공된 실시예 36 내지 42에 기술된 실험 과정(일부 중요하지 않은 변형이 있음)에 따라 제조하였다.

실시예 55: 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(2-플루오로-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

DAST(0.15 g, 0.924 mmole)를 -30℃의 DCM(10 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.30 g, 0.947 mmole, 실시예 40에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 이어서, 반응 온도를 실온까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 밤새 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 생성물을 냉각된 물(10 mL)로 급랭시켰다. 수성 NH₃을 사용하여 매스 pH를 pH 약 9.5로 조정하고, 화합물을 DCM으로 추출하였다(3 x 5 mL). 합한 유기 상을 물(5 mL), 염수 용액(5 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(0.5:2:97.5)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.052 g(수율: 52%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.27 - 1.33 (6H, m), 1.35 - 1.46 (4H, m), 1.82 - 1.92 (2H, m), 2.06 - 2.12 (3H, m), 2.54 - 2.57 (2H, t), 3.18 - 3.26 (6H, m), 4.26 - 4.29 (2H, t), 4.59 (2H, bs), 7.72 (1H, s), 8.33 - 8.37 (1H, t); 질량 (m/z): 398.3 (M+H)⁺, 400.3 (M+H)⁺.

실시예 56 및 57: 실시예 56 및 57의 화합물을 상기 제공된 실시예 55에 기술된 실험 과정(일부 중요하지 않은 변형이 있음)에 따라 제조하였다.

실시예 58: 5-아미노-6-클로로 -N -{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

아세토니트릴(15 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.30 g, 0.947 mmole, 제조예 8에서 수득됨), 3-브로모-2,2-다이메틸프로판-1-올(0.047 g, 0.376 mmole), K₂CO₃(0.086 g, 0.623 mmole) 및 칼륨 요오다이드(0.086 g, 0.623 mmole)의 용액을 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 농축하고, 수득된 슬러리를 물(30 mL) 및 화합물을 DCM으로 추출하였다(3 x 15 mL). 합한 유기 상을 물(15 mL), 염수 용액(15 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(1:3:96)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.07 g(수율: 62%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.72 (6H, s), 1.22 - 1.32 (4H, s), 1.94 - 1.98 (2H, m), 2.23 - 2.25 (1H, m), 2.40 - 2.49 (4H, m), 2.94 - 2.98 (2H, m), 3.06 - 3.12 (4H, m), 4.18 - 4.21 (2H, t), 4.39 - 4.52 (1H, m), 5.57 (2H, bs), 7.59 (1H, s), 7.97 - 8.00 (1H, t); 질량 (m/z): 408.2 (M+H)⁺, 410.2 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트의 제조

2 mL MeOH 중 L(+)-타르타르산(0.155 g, 1.03 mole)의 투명한 용액을 실온의 MeOH(2 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.42 g, 1.07 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 투명한 매스를 실온에서 2시간 동안 추가로 교반하였다. 용매를 증발시켜 고체 매스를 수득하였다. 고체 매스를 DEE(2 x 3 mL)로 추가로 마쇄하고, 진공 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.524 g(수율: 89%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.93 (6H, s), 1.18 - 1.38 (2H, m), 1.82 - 1.84 (2H, m), 2.06 - 2.12 (3H, m), 2.54 - 2.57 (3H, m), 3.06 - 3.15 (3H, m), 3.33 - 3.54 (4H, m), 4.27 - 4.29 (2H, t), 4.41 (2H, s), 7.73 (1H, s); 질량 (m/z): 408.2 (M+H)⁺, 410.2 (M+H)⁺.

실시예 59: 실시예 59의 화합물을 상기 제공된 실시예 58에 기술된 실험 과정(일부 중요하지 않은 변형이 있음)에 따라 제조하였다.

실시예 60: 5-아미노-6-클로로- N -{[3-(3-메톡시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

DMF(5 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.15 g, 0.466 mmole, 제조예 8에서 수득됨), 3-메톡시-2,2-다이메틸프로필톨루엔-4-설폰에이트(0.25 g, 0.919 mmole), 세슘 카보네이트(0.30 g, 0.920 mmole) 및 칼륨 요오다이드(0.15 g, 0.903 mmole)의 용액을 120℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 매스를 실온으로 냉각하고, 냉각된 물(10 mL) 상으로 급냉시켰다. 생성물을 EtOAc(3 x 5 mL)로 추출하고, 유기 추출물을 물(5 mL), 염수 용액(5 mL)으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:클로로포름(CHCl₃)(0.5:2:97.5)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.011 g(수율: 5.59%).

¹H - NMR (δ ppm): 0.74 (6H, s), 1.22 - 1.28 (2H, m), 1.94 - 1.96 (2H, m), 2.20 (2H, s), 2.39 - 2.49 (3H, m), 2.71 (1H, s), 2.87 - 2.90 (3H, m), 2.96 (2H, s), 3.06 - 3.10 (2H, t), 3.32 (3H, s), 4.18 - 4.21 (2H, m), 5.59 (2H, s), 7.58 (1H, s), 7.97 - 8.00 (1H, t); 질량 (m/z): 422.3 (M+H)⁺, 424.3 (M+H)⁺.

실시예 61: 5-아미노-6-클로로- N -{[4-플루오로-1-(3-메톡시프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

아세토니트릴(5 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-[(4-플루오로-4-피페리딘일)메틸]크로만-8-카복사미드(0.05 g, 0.141 mmole, 제조예 9에서 수득됨), 1-브로모-3-메톡시프로판(0.03 g, 196 mmole) 및 K₂CO₃(0.065 g, 0.471 mmole)의 용액을 85℃에서 6시간 동안 교반하고, 그러는 동안 TLC에 의해 반응의 진행을 모니터링하였다. 반응 매스를 냉각된 물(5 mL) 내로 급랭시켰다. 화합물을 EtOAc(3 x 5 mL)로 추출하고, 추출물을 물(5 mL), 염수 용액(5 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(0.5:2:97.5)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.03 g(수율: 55%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.15 - 1.26 (7H, m), 1.58 - 1.63 (3H, m), 1.85 - 1.93 (4H, m), 2.25 - 2.27 (1H, m), 2.38 - 2.42 (2H, t), 2.58 - 2.69 (1H, m), 3.16 - 3.20 (2H, m), 3.29 (3H, s), 4.05 - 4.07 (2H, t), 5.72 (2H, bs), 7.12 - 7.23 (1H, t), 7.42 (1H, s); 질량 (m/z): 414.3 (M+H)⁺, 416.3 (M+H)⁺.

실시예 62: 4-아미노-5-클로로- N -{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트의 제조

단계 (i): 4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드의 제조

실온의 무수 DMF(1.0 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-{[3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드(80.0 mg, 0.23 mmole, 제조예 19에서 수득됨)의 교반 용액에, K₂CO₃(80.0 mg, 0.58 mmole) 및 이어서 1-브로모-3-메톡시프로판(0.03 mL, 0.276 mmole)을 첨가하였다. 반응 매스를 80℃까지 점진적으로 가열하고, 이러한 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각한 후, 상기 반응 매스를 물 및 EtOAc로 희석하였다. 2개의 층을 분리하고; 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 조질 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 55.0 mg(수율: 62%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.35 - 1.45 (1H, m), 1.55 - 1.65 (4H, m), 1.70 - 1.81 (2H, m), 2.25 - 2.42 (2H, m), 2.45 - 2.60 (2H, m), 3.07 (2H, t, J = 8.6 Hz), 3.28 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.31 (3H, s), 3.38 (2H, t, J = 6.2 Hz), 4.23 (2H, bs), 4.79 (2H, t, J = 8.6 Hz), 7.38 (1H, bs), 7.86 (1H, s); 질량 (m/z): 380.1, 382.2 (M+H)⁺.

단계 (ii): 4-아미노-5-클로로- N -{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트의 제조

실온의 이소프로판올(2.0 mL) 중 4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드(55.0 mg, 0.144 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에, 옥살산(12.0 mg, 0.144 mmole)을 첨가하였다. 반응 매스를 16시간 동안 교반한 후, 휘발물을 감압 하에 제거하였다. 조질 생성물을 에터로 마쇄하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 53.5 mg(수율: 78%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.30 - 1.45 (1H, m), 1.65 - 1.86 (4H, m), 2.95 - 3.10 (4H, m), 3.15 - 3.20 (2H, m), 3.19 (3H, s), 3.25 - 3.40 (2H, m), 3.50 - 3.70 (2H, m), 4.70 (2H, t, J = 8.4 Hz), 5.89 (2H, bs), 7.45 (1H, s), 7.58 (1H, bs); 질량 (m/z): 380.2, 382.3 (M+H)⁺.

실시예 63 내지 65: 실시예 63 내지 65의 화합물을 상기 제공된 실시예 61 및 62에 기술된 실험 과정(일부 중요하지 않은 변형이 있음)에 따라 제조하였다.

실시예 66: 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(2-플루오로에틸)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

단계 (i): 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(2-하이드록시 에틸)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

아세토니트릴(15 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-(4-피페리딘일메틸)크로만-8-카복사미드(0.1 g, 0.313 mmole, 제조예 7에서 수득됨), 브로모에탄올(0.047 g, 0.376 mmole) 및 칼륨 카보네이트(0.086 g, 0.623 mmole)의 용액을 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응의 완료 후(TLC), 반응 매스를 농축하고, 수득한 슬러리를 물(30 mL)에 급랭시키고, 화합물을 DCM으로 추출하였다(3 x 15 mL). 합한 유기 상을 물(15 mL), 염수 용액(15 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 진공 하에 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(1:3:96)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.07 g(수율: 62%).

¹H - NMR (δ ppm): 1.52 - 1.58 (2H, m), 1.88 - 1.96 (4H, m), 2.06 - 2.11 (2H, m), 2.54 - 2.57 (2H, t), 2.71 - 2.86 (3H, m), 3.08 - 3.18 (2H, m), 3.47 - 3.50 (2H, m), 3.82 - 3.84 (2H, t), 4.26 - 4.29 (2H, t), 7.72 (1H, s); 질량 (m/z): 368.3 (M+H)⁺, 370.3 (M+H)⁺.

단계 (ii): 5-아미노-6-클로로- N -{[1-(2-플루오로에틸)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드의 제조

DAST(0.072 g, 0.448 mmole)를 -30℃의 DCM(5 mL) 중 5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-하이드록시에틸)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드(0.07 g, 0.179 mmole, 상기 단계에서 수득됨)의 교반 용액에 첨가하였다. 상기 반응 매스 온도를 실온까지 천천히 상승시키고, 동일한 온도에서 밤새 교반하였다. 반응 매스를 냉각된 물(10 mL)로 급랭시켰다. 수성 NH₃을 사용하여 pH를 약 9.5로 조정하고, 화합물을 DCM으로 추출하였다(3 x 5 mL). 합한 유기 상을 물(5 mL), 염수 용액(5 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 유기 상을 로타배큠 상에서 농축하여 조질 잔사를 수득하고, TEA:MeOH:CHCl₃(0.5:2:97.5)을 사용하는 플래시 크로마토그래피로 추가 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

중량: 0.014 g(수율: 20%).

¹H - NMR (δ ppm): 2.04 - 2.15 (3H, m), 2.51 - 2.54 (2H, t), 2.71 - 2.78 (2H, m), 3.02 - 3.05 (2H, m), 3.31 - 3.34 (2H, t), 3.64 - 3.72 (4H, m), 4.25 - 4.28 (4H, m), 4.54 - 4.56 (1H, t), 4.66 - 4.68 (1H, t), 7.87 - 7.91 (1H, t), 8.02 (1H, s); 질량 (m/z): 370.3 (M+H)⁺, 372.3 (M+H)⁺.

생물학적 검정

실시예 67: 5-HT ₄ 수용체의 EC ₅₀ 값의 측정

재조합 인간 5-HT₄ 수용체 및 pCRE-Luc 리포터 시스템을 발현하는 안정한 CHO 세포주를 세포-기반 검정에 사용하였다. GPCR로의 화합물의 결합을 측정하기 위한 비-방사능 기반 접근법을 제공한다. 이러한 특정 검정에서, 수용체의 활성화 또는 억제에 의해 조절되는 세포내 사이클릭 AMP의 수준을 측정한다. 재조합 세포는 cAMP 반응 원소의 조절 하에 루시퍼라제 리포터 유전자를 품는다.

상기 세포를 10% 소 태아 혈청(FBS)을 함유하는 Hams F12 매질에서 96 웰 투명 바닥 백색 플레이트에서 성장시켰다. 화합물 또는 표준 작용제의 첨가 전에, 세포를 밤새 혈청이 결핍되도록 하였다. 증가하는 농도의 시험 화합물을 세포에 대한 OptiMEM 매질에 첨가하였다. CO₂ 인큐베이터 중에서 37℃에서 4시간 동안 항온처리를 계속하였다. 매질을 제거하고, 세포를 포스페이트 완충된 염수로 세척하였다. 세포를 용해시키고, 루시퍼라제 활성을 루미노미터(Luminometer)에서 측정하였다. 그래프패드(Graphpad) 소프트웨어를 사용하여 발광 단위를 화합물 농도에 대해 플로팅(plotting)하였다. 화합물의 EC₅₀ 값은 루시퍼라제 활성을 50%만큼 자극하는데 요구되는 농도로서 정의되었다.

이러한 프로토콜을 사용함으로써, 본원에 기술된 화합물은 5-HT₄ 수용체에 대한 결합 친화도를 나타내는 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, 본원에 기술된 실시예 1, 3, 4, 8, 9, 36, 40, 46, 52, 55, 58, 59 및 60은 1 nM 이하의 5-HT₄ 수용체 작용성 결합 시험관내 EC₅₀ 값을 나타냈고; 본원에 기술된 실시예 6, 10, 12, 18, 22, 26, 30, 35, 37, 43, 44, 49, 60, 62, 64 및 66은 1.1 내지 5 nM의 5-HT₄ 수용체 작용성 결합 시험관내 EC₅₀ 값을 나타냈고; 본원에 기술된 실시예 13, 17, 20, 24, 28, 32, 38, 39, 42, 50, 54, 57 및 63은 5.1 내지 10 nM의 5-HT₄ 수용체 작용성 결합 시험관내 EC₅₀ 값을 나타냈고; 본원에 기술된 실시예 7, 15, 29, 41, 51, 53 및 65는 10.1 내지 20 nM의 5-HT₄ 수용체 작용성 결합 시험관내 EC₅₀ 값을 나타냈다.

실시예 68: 설치류 약동학적 연구

수컷 위스타 래트(225 ± 25 g)를 실험 동물로서 사용하였다. 3 내지 5마리의 동물을 각각의 우리에서 사육하였다. 투여 일의 2일 전에, 수컷 위스타 래트(225 내지 250 g)를 경정맥 카테터의 외과적인 설치를 위해 이소플루란으로 마취하였다. 동물들은 경구 투여(p.o) 전에 밤새 금식시키고, 식품 펠렛을 투여 후 2시간에 허락한 반면, 정맥내 투여 중에 식품 및 물을 무제한으로 제공하였다. 3마리의 래트에 시험 화합물(3 mg/kg)을 경구로 및 정맥내로(1 mg/kg) 투여하였다.

각각의 시점에 혈액을 경정맥을 통해 수집하고, 자유롭게 움직이는 래트로부터의 등가 부피의 식염수를 즉시 보충하였다. 수집된 혈액을 10 μL의 헤파린을 항응고제로서 함유하는 표지된 에펜도르프(eppendorf) 내로 전달하였다. 전형적으로, 혈액 샘플을 하기 시점에 수집하였다: 투여 전, 투여(n=3) 후 0.08(단지 i.v.), 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8 및 24시간. 혈액을 4000 rpm으로 10분 동안 원심분리하였다. 혈장을 제조하고, 분석 시까지 -20℃에서 냉동 보관하였다. 시험 화합물의 농도를 적합한 추출 기술을 사용하는 적당한 LC-MS/MS 방법에 의해 혈장에서 정량하였다. 시험 화합물을 혈장 중에서 약 2 내지 2000 ng/mL의 교정 범위 내에서 정량하였다. 연구 샘플을 회분 전역에 펼쳐진 회분 및 품질 대조 샘플에서의 교정 샘플을 사용하여 분석하였다.

약동학 변수 C_max, T_max, AUC_t, T_1/2 및 생체이용률을 윈논린(WinNonLin) 5.0.1 또는 피닉스(Phoenix) 윈논린 6.2 버전 소프트웨어 패키지를 사용함으로써, 표준 비-구획 모델을 사용하는 비-구획 모델에 의해 계산하였다.

실시예 69: 설치류 뇌 침투 연구

수컷 위스타 래트(225 ± 25 g)를 실험 동물로서 사용하였다. 3마리 동물을 각각의 우리에서 사육하였다. 실험 전반에 걸쳐 동물에게 물 및 식품을 무제한 제공하고, 12시간 광/암 사이클을 유지하였다.

뇌 침투를 래트에서 별개의 방식으로 측정하였다. 투여 일의 1일 전, 수컷 위스타 래트(225 내지 250 g)는 익숙해졌다. 익숙해진 후, 래트를 이들의 체중에 따라 분류하였다. 각각의 군에서, 3마리 동물은 개별적인 우리에 있었고, 식품 및 물에 자유롭게 접근하였다. 각각의 시점(0.50, 1 및 2시간)에서, n = 3 동물을 사용하였다.

시험 화합물을 적절히 사전제형화시키고, (유리 염기 당량) 3 mg/kg으로 경구 투여하였다. 이소플루란 마취를 사용함으로써, 혈액 샘플을 심장 천자를 통해 제거하였다. 동물을 희생시켜 뇌 조직을 수집하였다. 혈장을 분리하고, 뇌 샘플을 균질화시키고, 분석 시까지 -20℃에서 냉동 보관하였다. 혈장 및 뇌 내의 시험 화합물의 농도를 LC-MS/MS 방법을 사용하여 측정하였다.

적합한 추출 기술을 사용하는 적합한 LC-MS/MS 방법에 의해 시험 화합물을 혈장 및 뇌 균질현탁액 내에서 정량하였다. 시험 화합물을 혈장 및 뇌 균질현탁액 내에서 1 내지 500 ng/mL의 교정 범위로 정량하였다. 연구 샘플을 회분 전역에 펼쳐진 회분 및 품질 대조 샘플에서의 교정 샘플을 사용하여 분석하였다. 뇌-혈장 비(C_b/C_p)의 크기를 계산하였다.

실시예 70: 마우스 뇌 피질 sAPPα 수준의 평가

실험 과정:

수컷 C57BL/6J 마우스(20 내지 30 g)를 상이한 치료군으로 임의로 나누었다(n=7/군). 마우스의 대조군에 멸균 주사용 물을 피하(s.c.) 투여하였다. 치료군으로부터의 마우스는 멸균 주사용 물에 용해된 시험 화합물(10 mL/kg의 투여 부피) 또는 프루칼로프라이드(10 mg/kg)의 단일 피하 주사를 수용하였다. 각각 시험 화합물, 실시예 50 또는 프루칼로프라이드의 투여 후 60 또는 90분에 경추 탈골에 의해 마우스를 희생시켰다. 뇌를 신속하게 분리하고, 피질을 -20℃에서 절개하였다. 피질을 드라이아이스 상에 바로 위치시키고, 칭량한 후, 효소-연결된 면역흡착 검정(ELISA)을 사용하여 sAPPα를 정량할 때까지 -80℃에서 보관하였다.

샘플 제조예:

1. 피질 조직을 해동하고, 프로테아제 억제제를 함유하는 트리스 완충제 염수(Tris Buffer Saline: TBS)를 각각 200 mg의 조직에 대해 0.8 mL의 비율로 첨가하였다.

2. 유리-테플론(Teflon) 균질화기를 10 스트로크로 사용하여 수득된 샘플을 균질화시켰다. 생성된 균질현탁액을 4℃에서 90분 동안 15,000 rpm으로 원심분리시켰다.

3. 상청액을 폐기하고, 침전물에 4배 부피(0.8 mL/200 mg 조직)의 TBS를 첨가하였다. 다시 균질화시키고, 이어서 4℃에서 30분 동안 원심분리하였다.

4. 상기 원심분리된 혼합물로부터 상청액을 폐기하고, 50 mM 트리스 완충액 중 T6 M 구아니딘-HCl의 10배 부피(500 μL/50 mg 조직)를 첨가하였다. 생성된 용액을 5초 동안 초음파처리하였다(4회).

5. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 항온처리하고, 이어서 4℃에서 30분 동안 15,000 rpm으로 원심분리하였다. 이러한 5 μL의 상청액 용액을 취하고, 155 μL의 EIA 완충제(희석 인자 32)로 희석하였다.

ELISA 키트에 의한 sAPPα의 측정:

sAPPα 수준에 대한 시험 화합물의 급성 처치의 역할의 조사하기 위하여, 이러한 단백질의 발현을, ELISA 검정을 사용하여, 처치된 마우스 및 미처치된 마우스의 피질로부터 수득한 균질현탁액에서 측정하였다. 전체 과정은 ELISA 키트 매뉴얼(마우스/래트 sAPPα ELISA, 카탈로그 번호: JP27415, 독일 함부르크 소재 이노베이션 비욘드 리미츠 인터내셔널(Innovation Beyond Limits International))에 기술된 바에 따랐다.

통계적인 분석:

통계적인 분석을 그래프 패드 프리즘(Graph Pad Prism)(버전 4)을 사용하여 수행하였다. 데이터는 대조군 값(주사용 물을 수용한 마우스)의 백분율로서 표시된 sAPPa 수준의 평균 ± SD이다. 값을 언페어드(unpaired) 시험에 의해 상이한 군 사이에서 비교하였다. 유의 수준은 *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001로 설정되었다.

참고문헌:

문헌[Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2003, 305, 864 - 871]; 문헌[Current Pharmaceutical Design 2006, 12, 671 - 676]; 및 문헌[Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 2006, 317, 786 - 790].

시험 화합물의 결과(도 1):

처치 후 60분에, 시험 화합물은 마우스 뇌 피질 sAPPα 수준에서의 유의한 증가를 유발하였고, 즉 투여량 1 mg/kg, 피하 투여로 시험되는 경우 44%의 증가가 관찰되었다(도 1). 양성 대조군, 5-HT₄수용체 작용제, 프루칼로프라이드는 10.0 mg/kg s.c.에서 성숙한 마우스 피질 내의 sAPPα의 수준을 유의하게 증가시켰다. 이러한 결과는 문헌[British Journal of Pharmacology, 2007, 150, 883 - 892]에 보고된 결과와 일치한다.

실시예 71: 수컷 위스타 래트의 복부 해마로부터의 아세틸콜린의 조절에 대한 본 발명의 화합물의 효과의 평가.

실험 과정:

수컷 위스타 래트(240 내지 300 g)의 복부 해마 내에 마이크로투석 가이드 캐뉼라를 정위적으로 이식하였다(AP: -5.2 mm, ML: + 5.0 mm, DV: -3.8 mm). 대천문으로부터 취해진 점 및 두개골로부터의 수직선을 참고하여 문헌[Paxinos and Watson (2004)]에 따라 좌표를 취하였다. 래트가 환저 플렉시글라스 보울(Plexiglas bowl)에서 사료 및 물에 자유롭게 접근하면서 4 내지 5일 동안 개별적으로 회복하도록 하였다.

마이크로투석 실험 1일 전에, 래트를 카운터 밸런스 레버 암(counter balance lever arm) 상에서 이중 석영 라이닝된 2-채널 액체 스위벨(swivel)(인스텍(Instech), 영국)에 연결시키고, 이는 동물의 비제한적인 운동을 가능하게 하였다. 연구 시작 16시간 전에, 사전-평형화된(pre-equilibrated) 마이크로투석 프로브(4 mm 투석 막)를 가이드 캐뉼라를 통해 복부 해마 내에 삽입하였다.

연구 일에, 인공 뇌척수액(aCSF; NaCl 147 mM, KCl 3.0 mM, MgCl₂ 1.0 mM, CaCl₂·2H₂O 1.3 mM, NaH₂PO₄·2H₂O 0.2 mM 및 Na₂HPO₄·7H₂O 1.0 mM, pH 7.2)을 사용하여 1.5 μL/분의 일정한 유량으로 프로브를 관류하였다. 2시간의 안정화 기간을 유지하고, 5개의 기본 샘플을 20분 간격으로 수집하였다. 시험 화합물, 실시예 50 또는 비히클을 투여하고, 투석물 샘플을 4시간의 추가적인 기간 동안 20분 간격으로 수집하였다. 투석물을 아세틸콜린의 정량화까지 -70℃ 미만으로 저장하였다.

아세틸콜린의 정량화:

투석물 중 아세틸콜린을 LC-MS/MS 방법을 사용하는 0.103 내지 103.491 nmol의 교정 범위에서 정량하였다.

통계적인 분석:

모든 마이크로투석 데이터를 5개의 투여 전 값의 평균으로서 정의된 100%를 기준으로 평균 투석물 기준 농도로부터의 백분율 변화로서 플로팅하였다. AUC를 윈놀린(5.0.1 버전, 캐나다 소재 파르사이트 코포레이션(Pharsight Corp.))을 사용하는 사다리꼴 규칙에 의해 계산하였다. 치료군과 비히클의 평균 AUC 값 사이의 통계학적 유의성을 1-방식 ANOVA 및 이어서 던넷(Dunnett) 시험을 사용하여 계산하였다. 각각의 치료군의 경우, 아세틸콜린 수준의 백분율 증가를, 분산의 2-방식 분석(시간 및 치료) 및 이어서 본페로니(Bonferroni) 다중 비교 시험을 사용하여 비히클 군과 비교하였다. 통계학적 유의성은 0.05 미만의 p 값에서 간주되었다.

부정확한 프로브 배치는 동물로부터의 데이터를 거절하기 위한 기준으로서 간주되었다.

참고문헌:

문헌[Neuropharmacology, 2007, 53, 563 - 573].

시험 화합물의 결과:

시험 화합물(1.0 mg/kg, p.o.)은 수컷 위스타 래트의 복부 해마로부터의 아세틸콜린 수준에서 51% 증가를 유발하였다(도 2). 3.0 및 10.0 mg/kg, p.o.의 시험 화합물에 의한 처치는 해마 아세틸콜린 수준에서 유사한 크기의 증가를 유발하였다. 치료의 전반적인 효과를 평가하기 위해 계산된 곡선 하 면적 값은 시험 화합물(1.0 mg/kg, p.o.)에 의한 처치 후 31% 증가를 나타냈다(도 3).

실시예 72: 수컷 위스타 래트의 전두 피질로부터의 아세틸콜린의 조절에 대한 본 발명의 화합물의 효과의 평가.

실험 과정:

수컷 위스타 래트(240 내지 300 g)의 전두 피질 내에 마이크로투석 가이드 캐뉼라를 정위적으로 이식하였다(AP: +3.2 mm, ML: -3.2 mm, DV: -1.5 mm). 대천문으로부터 취해진 점 및 두개골로부터의 수직선을 참고하여 문헌[Paxinos and Watson (2004)]에 따라 좌표를 취하였다. 래트가 환저 플렉시글라스 보울에서 사료 및 물에 자유롭게 접근하면서 4 내지 5일 동안 개별적으로 회복하도록 하였다.

마이크로투석 실험 1일 전에, 래트를 카운터 밸런스 레버 암 상에서 이중 석영 라이닝된 2-채널 액체 스위벨(인스텍, 영국)에 연결시키고, 이는 동물의 비제한적인 운동을 가능하게 하였다. 연구 시작 16시간 전에, 사전-평형화된 마이크로투석 프로브(3 mm 투석 막)를 가이드 캐뉼라를 통해 전두 피질 내에 삽입하였다.

아세틸콜린의 정량화:

통계학적 분석:

모든 마이크로투석 데이터를 5개의 투여 전 값의 평균으로서 정의된 100%를 기준으로 평균 투석물 기준 농도로부터의 백분율 변화로서 플로팅하였다. AUC를 윈놀린(5.0.1 버전, 캐나다 소재 파르사이트 코포레이션)을 사용하는 사다리꼴 규칙에 의해 계산하였다. 치료군과 비히클의 평균 AUC 값 사이의 통계학적 유의성을 1-방식 ANOVA 및 이어서 던넷 시험을 사용하여 계산하였다. 각각의 치료군의 경우, 아세틸콜린 수준의 백분율 증가를, 분산의 2-방식 분석(시간 및 치료) 및 이어서 본페로니 다중 비교 시험을 사용하여 비히클 군과 비교하였다. 통계학적 유의성은 0.05 미만의 p 값에서 간주되었다.

참고문헌:

문헌[Current Drug Targets - CNS & Neurological Disorders, 2004, 3, 39-51].

시험 화합물의 결과:

시험 화합물은 수컷 위스타 래트의 전두 피질의 아세틸콜린 수준에서 투여량-의존적 증가를 유발하였다(도 4). 10.0 mg/kg, p.o의 투여 전 수준의 204%의 정도에 도달하였다. 처치의 전반적인 효과를 평가하기 위해 계산된 곡선 하 면적(AUC) 값은 10.0 mg/kg, p.o.의 시험 화합물에 의한 처치 후 AUC에서 유의한 증가를 나타냈다(도 5).

실시예 73: 물체 인식 작업 모델

본 발명의 화합물의 인지 강화 특성을 본 모델을 사용하여 평가하였다.

수컷 위스타 래트(230 내지 280 g)를 실험 동물로서 사용하였다. 4개의 동물을 각각의 우리에서 사육하였다. 동물은 1일 전에 20% 식품 결핍 상태로 유지되었고, 실험 전반에 걸쳐 무제한으로 물이 제공되었고, 12시간 광/암 사이클이 유지되었다. 또한, 래트가 어떠한 물제도 없이 1시간 동안 개별적인 활동 장소에 익숙해지도록 하였다.

익숙한 시험(T1) 및 선택 시험(T2) 1시간 전에, 12마리 래트의 1개의 군은 비히클(1 mL/kg)을 경구적으로 수용하였고, 동물의 다른 집합은 화학식 I의 화합물을 경구적으로 또는 i.p.로 수용하였다.

실험은 아크릴로 이루어진 50 x 50 x 50 cm의 개방된 틀에서 수행되었다. 익숙한 상(T1)에서, 래트를 개방된 틀에 3분 동안 위치시키고, 이때 황색 보호 테이프만으로 덮힌 2개의 동일한 물체(플라스틱 병, 12.5 cm 높이 x 5.5 cm 직경)(a1 및 a2)를 벽으로부터 10 cm인 2개의 인접한 코너에 위치시켰다. 장기 기억 시험을 위한 (T1) 시험 24시간 후, 동일한 래트를 T1 시험에서 위치한 동일한 활동 장소에 위치시켰다. 선택 상(T2) 래트가 하나의 익숙한 물건(a3) 및 하나의 새로운 물건(b)(호박색 유리 병, 12 cm 높이 및 5 cm 직경)의 존재 하에 3분 동안 개방된 틀을 탐험하도록 하였다. 익숙한 물건은 유사한 질감, 색 및 크기를 제공하였다. T1 및 T2 시험 동안, 각각의 물체의 탐구(킁킁거림, 핥기, 또는 코가 1 cm 미만의 거리에 있는 물체를 향하면서 코털을 움직이기로서 정의됨)를 스톱워치로 별도로 기록하였다. 물체 위에 앉는 것은 탐구 활동으로 간주하지 않았지만, 드물게 관찰되었다.

T1은 익숙한 물건(a1 + a2)을 탐구하는데 소비한 총 시간이다.

T2는 익숙한 물건 및 새로운 물건(a3 + b)을 탐구하는데 소비한 총 시간이다.

물체 인식 시험을 문헌[Behaviour Brain Research, 31 (1988), 47 - 59]에 기술된 바와 같이 수행하였다.

실시예 74: 방사성 암(Radial arm) 미로

본 발명의 시험 화합물의 인지 강화 특성을 본 모델을 사용하여 평가하였다.

방사성 암 미로는 45 cm 직경의 중심 허브로 이루어진다. 각각의 암은 치수 42.5 x 15 x 24 cm이었다. 미로를 지면 위 1 m의 높이까지 상승시켰다. 동물이 이의 자유 급식 체중의 약 85%에 도달할 때까지 제한 급식 상태에 위치시켰다. 이러한 급식 제한 기간 동안, 동물을 새로운 사료(펠렛)에 익숙하게 하였다. 일단 래트가 이의 자유 급식 체중의 약 85%에 도달하면, 래트는 제1일 및 제2일에 미로에 익숙해졌다. 펠렛을 먹지 않는 동물을 연구로부터 배제하였다. 동물을 제2일에 무작위화하였다. 다음 날에, 분배된 동물에 대해 처치를 수행하였다. 각각의 동물을 각각 10분의 기간 동안 미로에 넣었다. 암에 단지 1회만 먹이를 달고, 동물은 반복된 암 진입이 보상을 주지 않으리라는 것을 학습해야 했다. 래트가 16개의 암에 방문했거나 10분이 경과했거나 모든 펠렛을 먹으면 시험을 종료하였다. 소프트웨어를 사용하여 암 도입을 기록하였다. 시험이 종료하면, 래트를 제거하고, 미로를 비눗물로 깨끗하게 청소하였다.

실시예 75: 자동화된 hERG 패치 클램프 검정:

자동화된 hERG 패치 클램프 검정을 사용하여 시험 화합물의 심장 안정성을 연구하기 위하여, hERG-HEK293 세포를 70% 컨플루언시(confluency)까지 성장시키고, 아큐맥스(accumax)를 사용하여 수집하였다. 이어서, 세포를 완전한 매질에 현탁시키고, 전세포 패치 클램프 검정에 이들 세포를 사용하기 전에 37℃ 및 5% CO₂에서 30분 동안 항온처리하였다. 500 ms 동안 -80 mV 내지 +40 mV의 홀딩 전위(holding potential)로부터, 이어서 500 ms 동안 시험 전위까지, 이어서 다시 -80 mV의 홀딩 전위까지의 전압 단계의 I-V 프로토콜을 사용하는 나니온즈 패치라이너(Nanion's Patchliner) 상에서 전세포 패치 클램프 기록을 수행하였다. 펄스는 10초마다 유도되었다. 각각의 시험 화합물 농축물을 5분 동안 항온처리하였다. 이고르 프로(Igor Pro) 소프트웨어를 사용하여 원 데이터를 플로팅함으로써 데이터 분석을 수행하고, IC₅₀ 값을 계산하였다. 1 Gohm 초과의 내성 및 200 pA 초과의 후미 전류를 갖는 세포를 데이터 분석을 위해 고려하였다. 퀴니딘을 양성 대조군으로서 사용하였다.

Claims

하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 I]

상기 식에서,

X는 할로겐 또는 수소이고;

는 부착 지점이고;
------는 결합이거나 결합이 아니고;
R₁은 수소, 불소 또는 하이드록실이고;
R₂는 수소 또는 불소이되, ------가 결합이 아닐 때, R₂는 불소이고;
n은 1 또는 2이다.
제1항에 있어서,

X가 염소, 브롬 또는 수소이고;

가 부착 지점이고;
R₁이 수소인,
화합물.
제1항에 있어서,
(a) 하기 화학식 Ib-1의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 Ib-1]

[상기 식에서,

는 부착 지점이고;
X는 염소이다];
(b) 하기 화학식 Ib-2의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 Ib-2]

[상기 식에서,

X는 염소이고;

는 부착 지점이다];
(c) 하기 화학식 Id-1의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 Id-1]

[상기 식에서,
------는 결합이거나 결합이 아니고;

X는 염소 또는 브롬이고;

는 부착 지점이고;
R₂는 수소 또는 불소이되, ------가 결합이 아닐 때, R₂는 불소이다];
(d) 하기 화학식 Id-2의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 Id-2]

[상기 식에서,
------는 결합이거나 결합이 아니고;

X는 염소이고;

는 부착 지점이고;
R₂는 수소 또는 불소이되, ------가 결합이 아닐 때, R₂는 불소이다];
(e) 하기 화학식 Ie-1a의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 Ie-1a]

[상기 식에서,

X는 염소이고;

는 부착 지점이다];
(f) 하기 화학식 Ie-2a의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 Ie-2a]

[상기 식에서,

X는 염소이고;

는 부착 지점이다]; 및
(g) 하기 화학식 If-1a의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체 또는 약학적으로 허용되는 염:
[화학식 If-1a]

[상기 식에서,

X는 염소 또는 브롬이고;
R₂는 수소 또는 불소이고;
n은 1 또는 2이다]
으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물.
제1항에 있어서,
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 하이드로클로라이드;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 헤미푸마레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
(R,S) 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-3-퓨라닐메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
(R,S) 5-아미노-6-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-3-퓨라닐메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-6-브로모-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-브로모-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;
4-아미노-5-클로로-N-[(3-이소프로필-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메틸]-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-[(3-이소프로필-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일)메틸]-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(사이클로부틸메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(사이클로부틸메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(1-메톡시카보닐피페리딘-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
4-아미노-5-브로모-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-브로모-N-{[3-(테트라하이드로피란-4-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(4-플루오로테트라하이드로-2H-피란-4-일메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-6-브로모-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-브로모-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[4-플루오로-1-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-4-피페리딘일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-플루오로-2-메틸프로필)-4-플루오로-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[1-(2-플루오로-2-메틸프로필)-4-플루오로-4-피페리딘일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(3-하이드록시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드 L(+)-타르타레이트;
5-아미노-6-클로로-N-{[3-(3-메톡시-2,2-다이메틸프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}크로만-8-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드;
4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드;
4-아미노-5-클로로-2-메틸-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}벤조퓨란-7-카복사미드 하이드로클로라이드; 및
4-아미노-5-브로모-N-{[3-(3-메톡시프로필)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥스-6-일]메틸}-2,3-다이하이드로벤조퓨란-7-카복사미드 옥살레이트
로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 및 약학적으로 허용되는 부형제 또는 담체를 포함하는, 알츠하이머병, 정신분열증, 주의력 결핍 과잉행동 장애, 헌팅톤병, 파킨슨병, 우울증 또는 정신 질환의 치료에 사용하기 위한 약학 조성물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
알츠하이머병, 정신분열증, 주의력 결핍 과잉행동 장애, 헌팅톤병, 파킨슨병, 우울증 또는 정신 질환의 치료에 사용하기 위한 화합물.
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