KR101956382B1 - 관능성 및 기능성이 강화된 귀뚜라미차 및 이의 제조 방법 - Google Patents

관능성 및 기능성이 강화된 귀뚜라미차 및 이의 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 관능성 및 기능성이 강화된 귀뚜라미차 및 이의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 귀뚜라미 분말에 우엉 분말 및 페퍼민트 분말을 혼합하여 제조되는 관능성과 기능성이 우수한 귀뚜라미차 및 이의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 따른 귀뚜라미차와 건강 기능 식품은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 기존의 식물성 차보다 영양 성분, 유용 기능 성분 함량이 높고, 항산화, 항균, 항당뇨 및 항혈전 활성이 우수하며, 과립 형태로서 휴대 및 음용이 간편하면서도, 우엉의 구수한 맛과 페퍼민트의 향미가 추가되어 관능성이 우수하며, 기존 곤충 식품에 대한 거부감이 있는 일반인에게도 부담 없이 음용할 수 있는 고영양성, 고기능성, 고관능성을 제공하는 효과가 있으므로 식품 산업상 매우 유용한 발명이다.

Description

관능성 및 기능성이 강화된 귀뚜라미차 및 이의 제조 방법{CRICKET TEA HAVING USEFUL BIOACTIVITIES AND HIGH ACCEPTABILITY, AND ITS PRODUCTION METHOD}
본 발명은 관능성 및 기능성이 강화된 귀뚜라미차 및 이의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 귀뚜라미 분말에 우엉 분말 및 페퍼민트 분말을 혼합하여 제조되는 관능성과 기능성이 우수한 귀뚜라미차 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
현대 사회는 산업화로 인한 생활 수준의 향상과 라이프 스타일의 변화로 전통적인 식생활이 위협받고 있으며, 이러한 식생활 변화에 따라, 비만, 고혈압, 고지혈증, 혈전증 등의 다양한 성인병이 급증하고 있는 실정이다. 이러한 문제점을 극복하고자 다양한 건강 지향성 제품들이 개발되고 있으며, 근래에는 유용 약용 곤충을 이용한 기능성 식품에 대한 관심이 급증하고 있다.
기능성 식품 중 차(茶)는 기호성이 높으면서, 남녀노소가 쉽게 이용 가능하며, 언제 어디서라도 간편하게 음용 할 수 있다는 점에서 관심이 집중되고 있으며, 특히 음료 제품, 분말 제품, 환 제품보다 개발이 용이하다는 장점을 가진다.
한편, 우리나라는 전통적으로 차(다류)를 음료 혹은 약으로 사용하여 왔으며, 차 문화는 종교, 정치, 경제적 여건에 크게 좌우된다. 과거 차류는 고소득층의 기호 식품으로 한정되었으나, 최근에는 일상생활의 필수 식품으로 자리잡고 있으며, 건강 기능성의 약선차는 일반적인 차류, 다류 시장에 비해 기술적인 진입 장벽이 높아 업체 경쟁이 상대적으로 낮은 편이다.
통상 차는 다양한 동물 및 식물의 특정 부위를 그대로 사용하거나 또는 추출물을 제조하여 사용하며, 이러한 원재료는 관능성 뿐만 아니라, 특유한 고도의 생리 활성을 나타내는데, 그 예로서 특정 허브차들은 항암 활성, 항당뇨 활성, 동맥경화 예방 활성, 면역 기능 증강 활성, 숙취 해소 활성, 뇌졸중 예방 및 아토피 치료 활성 등을 나타내는 것으로 알려져 있다.
한편, 최근의 다양한 식품 가공 기술로 인해 새로운 기능성 식품 원재료가 발굴되고 있으며, 약용 및 식용 곤충은 영양적으로, 생리 기능적으로 매우 우수한 식품 재료로 인정되고 있다.
귀뚜라미는 절지동물 메뚜기목 귀뚜라미과에 속하며, 전 세계 1,200여종이 존재하며 국내에는 약 30여종이 알려져 있다. 그 중에서, 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma)는 한국을 포함하는 동아시아에서 주로 서식하는 귀뚜라미로, 현재 외국에서 수입되어온 쌍별귀뚜라미(Gryllus bimaculatus)와 달리 사계절이 뚜렷하고 겨울이 존재하는 우리나라의 기후에 적응한 국내 토착종이다. 반면, 2016년 국내에서 식용으로 등록된 쌍별귀뚜라미는 메뚜기목 귀뚜라미과의 곤충으로 아열대 지역에 서식하는 귀뚜라미이며, 국내로 수입되어 식용, 약용, 애완용, 사료용, 교육용으로 사육되고 있는 곤충이다. 쌍별귀뚜라미는 몸은 전체적으로 검고, 앞날개 기부에 노란 점이 있기 때문에 영어로 'two-spotted cricket', 우리말로는 쌍별귀뚜라미로 불린다.
현재 귀뚜라미에 대한 국내외 연구는 쌍별귀뚜라미에 집중되어 있으며, 왕귀뚜라미 연구는 매우 미진한 상태이다. 왕귀뚜라미에 관한 연구로는 왕귀뚜라미(Teleogryillus emma) 알의 실내 인공 채란 및 저장(김남정 외, 2005. 한국응용곤충학회지, 44, 61-65), 왕귀뚜라미의 대량 사육을 위한 인공 먹이 개발(김남정 외, 2003. 한국응용곤충학회 2003년도 추계 학술발표회 p. 68-68) 및 왕귀뚜라미의 우수한 항염증 활성(황재삼 외;, 2015. 곤충 유용물질의 피부친화성 및 항염증 메카니즘 구명, 국립농업과학원) 등이 알려져 있으며, 왕귀뚜라미와 쌍별귀뚜라미의 비교 연구로 외래종 쌍별귀뚜라미(Gryllus bimaculatus)가 토착종 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma)의 생존율에 미치는 영향(이은아 외, 2013. 생태와 환경, 46, 67-74), 2종의 귀뚜라미(Gryllus bimaculatus, Teleogryllus emma) 추출물의 면역 활성능 비교(서동환 외, 2003. 한국잠사학회 2003년도 제46회 춘계 학술연구 발표회 p.79)가 알려져 있을 뿐이다.
또한, 쌍별귀뚜라미 연구로는 쌍별귀뚜라미의 사육밀도가 섭식량, 성충사망률 및 부화 약충수에 미치는 영향(박영규 외, 2013. 한국잠사곤충학회지 51, 89-94)이 보고되어 있으며, 사료 및 식용화를 위해 귀뚜라미 첨가 사료가 계육과 계란의 성분에 미치는 영향(안미영 외, 2000. 한국가금학회지 27, 197-202), 산지별 식용 귀뚜라미의 이화학적 특성(김은미 외, 2015. 한국식품저장유통학회지, 22, 831-837) 및 랫드에서 귀뚜라미 추출물을 반복투여한 경우 독성이 없음이 보고(황석연 외, 2004. 한국실험동물학회지 20, 194-199)되어 있다. 쌍별귀뚜라미의 유용 생리활성으로는 귀뚜라미의 물 및 메탄올 추출물이 알코올 대사에 미치는 효과(이용우 외, 2004. 생약학회지 35, 175-178), 귀뚜라미의 수용성 및 알콜 추출물의 간보호 효과(안미영 외, 2002, 한국식품과학회지 34, 684-687), TCDD(2, 3, 7, 8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin)에 의해 유발된 Rat의 간독성에 대한 귀뚜라미 추출물의 예방효과(박종배, 2004. 대전대학교 석사논문), 귀뚜라미를 사료로 첨가시 African catfish의 항산화 효소 활성 증대 및 생육속도 증대효과가 알려져 있으며(Taufek 외, 2016. Fish Physiol Biochem. 42, 1143-1155), 렛트에 1달간 투여시 DNA 산화방지에 기여한다는 보고(Ahn MY 등, 2015. Toxicol Res. 31, 173-180)가 있으나, 현재까지 쌍별귀뚜라미 추출물 자체의 항산화 효과도 알려진 바는 없다.
또한, 쌍별귀뚜라미에 대해서는 대한민국 등록특허 제10-1661176호에 [식품용 귀뚜라미 원료의 제조방법 및 이에 따라 제조된 식품용 귀뚜라미 원료], 제10-1716766호에 [귀뚜라미 사육방법 및 귀뚜라미를 함유하는 식품조성물], 제10-1493916호에는 [곤충의 식용화 방법, 그 식용화된 곤충, 이러한 식용화된 곤충을 이용한 식품용 반죽의 제조방법], 제10-1686179호에는 고혈압 예방에 효과적인 [산화질소를 생성하는 아르기닌 함유가 증진된 귀뚜라미]가 알려져 있으며, 쌍별귀뚜라미의 용도와 관련하여, 제10-1429679호에 [귀뚜라미 추출물을 함유하는 피부미백용 화장료 조성물]이, 제10-1660381호에는 혈관신생 억제능 또는 혈관확장반응의 기능장애에 의한 질환 치료효과를 가지는 [곤충 N-글라이칸 및 이의 용도]가 등록되어 있으며, 공개특허 제10-2013-0134097호에는 [귀뚜라미 추출물을 함유하는 피부염증 예방 또는 치료용 조성물], 공개특허 제10-2016-0096548호에는 특이조성의 사료를 먹여 사육된 항산화 활성성분을 증대시킨 쌍별귀뚜라미 이용에 관한 [항산화, 항노화 및 피부미용 개선 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 화장료 조성물]이, 제10-2014-0036369호에는 [건조귀뚜라미를 이용한 펠렛 사료 제조방법], 제10-2016-0128113호에는 [식용곤충을 이용한 김 가공식품 제조방법], 제10-2016-0118860호에는 [분말 혼합물 및 곤충 국수]가 공개되어 있다. 또한, 국내 등록실용실안 제20-0477102호에는 [귀뚜라미 산란 및 부화기구]가, 제20-0477103호에는 [귀뚜라미 대량 포집기]가 등록되어 있다.
그러나, 귀뚜라미를 주재료로 한 관능성과 기능성이 강화된 귀뚜라미차 조성물에 대한 보고는 전혀 없는 실정이다.
KR 10-1493916 B
본 발명은 상기와 같은 기존 곤충류 귀뚜라미의 낮은 관능성과 휴대 및 음용의 어려움을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 영양성과 기능성이 우수한 귀뚜라미를 주재료로 한 기능성 및 관능성이 강화된 귀뚜라미차 및 이의 과립 제조 방법을 제공하고자 하는 것이다.
또한, 본 발명은 상기 귀뚜라미 분말과 우엉 분말 및 페퍼민트 분말을 포함하는 노화, 세균성 질환, 당뇨 및 혈전증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공하고자 하는 것이다.
상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 귀뚜라미차를 제공한다.
상기 귀뚜라미차는 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5~10중량부를 더 포함하는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명은 (1) 귀뚜라미를 선별, 세척, 멸균, 볶음, 건조 및 분쇄하여 귀뚜라미 분말을 제조하는 단계; (2) 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 혼합하고, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5~10중량부를 첨가하여 반죽을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 반죽으로부터 과립을 제조하는 단계를 포함하는 귀뚜라미차의 제조 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 노화, 세균성 질환, 당뇨 및 혈전증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.
본 발명의 제조 방법에 따른 귀뚜라미차와 건강 기능 식품은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 기존의 식물성 차보다 영양 성분, 유용 기능 성분 함량이 높고, 항산화, 항균, 항당뇨 및 항혈전 활성이 우수하며, 과립 형태로서 휴대 및 음용이 간편하면서도, 우엉의 구수한 맛과 페퍼민트의 향미가 추가되어 관능성이 우수하며, 기존 곤충 식품에 대한 거부감이 있는 일반인에게도 부담 없이 음용할 수 있는 고영양성, 고기능성, 고관능성을 제공하는 효과가 있으므로 식품 산업상 매우 유용한 발명이다.
도 1은 본 발명의 귀뚜라미차의 과립 분말 형상을 나타낸 것이다.
도 2는 1회 제공분으로 포장된 귀뚜라미차를 나타낸 것이다.
도 3은 방습 포장 단위의 귀뚜라미차를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 영양성과 기능성이 우수하지만, 선입견에 의해 곤충 식품, 특히, 귀뚜라미 식품에 대해 거부감을 나타내는 청소년, 여성 및 일반인들이 부담감 없이 마실 수 있는 영양성, 관능성 및 기능성이 우수한 귀뚜라미차 및 그 제조 방법과 항산화 활성, 항세균 활성, 항당뇨 활성 및 항혈전 활성을 나타내어 건강 유지에 탁월한 효과를 나타내는 건강 기능 식품에 관한 것이다.
본 발명의 발명자들은 귀뚜라미를 이용한 고기능성, 고관능성 식품을 개발하던 중, 느끼하면서 이취가 심한 귀뚜라미 분말과 식품 궁합이 맞는 우엉 분말 및 페퍼민트 분말을 첨가하여 혼합 반죽을 제조하고, 이에 첨가물을 가해 과립 제품으로 제조함으로써, 기능성과 관능성 및 편의성을 두루 갖춘 차 및 건강 기능 식품을 제조하기에 이르렀다.
본 발명의 발명자에 의하여 조제된 귀뚜라미차의 열수 추출물은 pH 5.5로 기존의 식물성 다류(현미녹차, 메밀차, 둥글레차 등)와 유사하였으며, 색차면에서도 기존의 식물성차(현미녹차, 메밀차 등)와 명도와 적색도는 유사하면서 황색도가 다소 높았으나, 전체적 색차는 유사하였다. 관능평가 결과에서도, 현미녹차, 메밀차보다 우수한 맛, 향, 색을 나타내었으며, 전체적 선호도 역시 높았다. 또한, 귀뚜라미차의 에탄올 추출물을 대상으로 항산화 활성, 항균 활성, 항당뇨 활성 및 항혈전 활성을 평가한 결과, 시판 우엉차보다도 월등하였으며, 3~20배 높은 총 플라보노이드 및 총 폴리페놀 함량을 나타내었다. 최종적으로, 제조된 귀뚜라미차 과립 제품은 기호성이 높으며, 관능성이 우수하였으며, 인간 적혈구에 대한 용혈 활성이 전혀 나타나지 않아 인체 독성이 없음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 귀뚜라미차를 제공한다.
상기 귀뚜라미 분말을 제조의 원료인 귀뚜라미는 특별히 한정되지는 않으나, 쌍별귀뚜라미(Gryllus bimaculatus) 또는 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma)인 것이 바람직하고, 쌍별귀뚜라미(Gryllus bimaculatus)인 것이 보다 바람직하다. 귀뚜라미 분말은, 아래에 상세히 설명되지만, 귀뚜라미를 선별, 세척, 멸균, 볶음, 건조 및 분쇄하여 제조될 수 있다.
상기 우엉 분말은 우엉 식물의 지하부를 분말화시켜 사용하며, 그 함량은 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여 20~40중량부를 사용하는데, 상기 함량 범위가 영양학적으로 귀뚜라미 성분과 잘 조화되며, 관능성 측면에서도 가장 기호도가 높은 혼합 비율에 해당한다.
상기 페퍼민트 분말은 페퍼민트 잎을 분쇄하여 사용하며, 그 함량은 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여 10~20중량부를 사용하는데, 10중량부 미만인 경우에는 귀뚜라미의 이취를 없애는데 충분한 효과를 얻을 수 없으며, 20중량부를 초과하는 경우에는 페퍼민트 향이 너무 강하여 관능성 측면에서 문제된다.
본 발명의 귀뚜라미차를 제조하는데 사용되는 3종의 주성분들 중에서 우엉 분말과 페퍼민트 분말은 각각 차로 만들어져 시판된 바는 있으나, 본 발명과 같이, 3종의 최적 혼합비를 가진 기능성 곤충차는 개발된 바 없다. 아래 표 1에는 귀뚜라미, 우엉 및 페퍼민트의 생리적 활성 및 효능에 대해 표기하였다.
[표 1] 귀뚜라미차 성분의 알려진 효능
Figure 112017040747015-pat00001
본 발명의 귀뚜라미차는 상기 언급된 주성분 이외에도 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 히드록시프로필메틸셀룰로오스(hydroxypropylmethylcellulose) 5~10중량부를 더 포함할 수 있다. 히드록시프로필메틸셀룰로오스는 귀뚜라미차를 과립 형상으로 성형시 사용되는 첨가제로서 증점제의 역할을 한다.
본 발명의 귀뚜라미차는 1~5g의 소포장으로 제품화될 수 있으며, 음용자의 나이, 성별, 체중에 따라 음용량이 달라질 수는 있으나, 1회 1포, 1일 3~6회, 열수를 가하여 음용하는 것이 바람직하다.
한편, 위에서 상세히 설명된 본 발명의 귀뚜라미차는 귀뚜라미 분말에 우엉 분말 및 페퍼민트 분말을 정하여진 함량으로 혼합하고, 혼합된 분말을 과립 형상으로 성형하여 제조될 수 있다.
따라서, 본 발명은 (1) 귀뚜라미를 선별, 세척, 멸균, 볶음, 건조 및 분쇄하여 귀뚜라미 분말을 제조하는 단계; (2) 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 혼합하고, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5~10중량부를 첨가하여 반죽을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 반죽으로부터 과립을 제조하는 단계를 포함하는 귀뚜라미차의 제조 방법을 제공한다.
상기 단계 (1)의 볶음 공정 및 건조 공정은 귀뚜라미의 이미 및 이취를 효과적으로 제거하고, 분말화를 용이하게 하기 위한 공정이다.
상기 단계 (2)에서는 귀뚜라미 분말, 우엉 분말 및 페퍼민트 분말을 혼합한 후, 히드록시프로필메틸셀룰로오스를 첨가하여 반죽하는데, 이때 반죽물의 점도 조절을 위하여 일정량의 물을 첨가할 수 있으며, 이러한 방법들은 본 발명의 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명한 사항이다.
상기 단계 (3)은 반죽물로부터 과립상의 성형물을 제조하는 단계로서, 통상적으로 사용되는 과립 성형기에 반죽을 투입하여 제조될 수 있을 것이다.
바람직한 구체예로서, 본 발명의 귀뚜라미차의 제조 방법은 귀뚜라미를 선별, 세척하고, 이를 121℃에서 20~30분간 멸균하고, 이를 볶음기에 투입하여 150℃에서 40분간 볶은 후, 열풍건조기를 이용하여 55℃에서 16시간 건조하고, 이후 30~50메쉬로 분쇄하여 귀뚜라미 분말을 제조하고, 우엉 지하부 및 페퍼민트 잎을 각각 55℃에서 18시간 열풍건조기에 건조하고, 이를 30~50메쉬로 분쇄하여 우엉 분말 및 페퍼민트 분말을 조제하고, 제조된 귀뚜라미 분말 65중량%, 우엉 분말 20중량% 및 페퍼민트 분말 10중량%에 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5중량%를 첨가하여 반죽을 제조한 후, 과립기를 이용하여 상기 반죽으로부터 과립 제품을 생산할 수 있다.
위에서 설명된 제조 방법으로 제조된 본 발명의 귀뚜라미차는 전통적으로 간 독성을 낮추고, 항당뇨 활성이 우수하며, 높은 영양 성분과 폴리페놀 및 플라보노이드 함량이 높은 것으로 잘 알려져 있으며, 본 발명의 발명자의 연구를 통해, 강력한 항산화, 항균, 항당뇨 및 항혈전 활성으로 노화를 억제하며, 원기를 회복시켜 급성 심근 경색증, 가슴 통증, 호흡 곤란, 허혈성 뇌졸중 등의 혈전성 질환 및 당뇨를 예방하는 식품으로서 유용할 수 있다.
따라서, 본 발명은 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 20~40중량부를 포함하는 노화, 세균성 질환, 당뇨 및 혈전증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.
본 발명의 건강 기능 식품은 우수한 항산화 작용을 가지므로, 산화적 스트레스와 관련된 각종 질환, 예를 들어, 노화, 피부 노화, 기미, 주근깨 등의 개선에 효과적인 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 그 밖에 각종 세균성 질환, 당뇨병을 비롯한 대사성 증후군, 혈전증 등의 예방 또는 개선의 용도로서 이용될 수도 있다.
본 발명의 유효성분을 포함하는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.
본 발명의 유효성분은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물은 100ml를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 기능 식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 것 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제, 예컨대, 천연 탄수화물 및 다양한 향미제 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 예로는 포도당, 과당 등의 단당류, 말토오스, 수크로오스 등의 이당류 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등의 당알코올이 있다.
상기 향미제로는 타우마틴, 레바우디오시드 A, 글리시르히진, 사카린, 아스파르탐 등을 사용할 수 있다. 상기 향미제의 비율은 본 발명의 건강 기능 식품 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g을 사용한다.
상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물, 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수도 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 상기 활성 분획물 100 중량부 당 0.01 내지 약 20중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하에서는, 본 발명의 구체적인 방법을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 바람직한 하나의 구체예일 뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 기재된 사항의 범위로 한정되는 것은 아니다.
[ 실시예 ]
실시예 1: 쌍별귀뚜라미의 분말 조제 및 영양성분 분석
쌍별귀뚜라미의 영양성을 확인하기 위해 쌍별귀뚜라미 건조분말을 조제하고, 이의 조단백질, 조지질, 조탄수화물, 조회분 함량을 식품공전에서 지정한 방법대로 평가하였다. 먼저 쌍별귀뚜라미 분말 조제를 위해 쌍별귀뚜라미를 성숙개체로 사육 후, 수확 전 3일간 절식시켜 분변을 제거하였으며, 이후 선별, 세척하고 이를 121℃에서 20~30분간 멸균하고, 이를 다시 볶음기에서 150℃에서 40분간 볶은 후, 열풍건조기를 이용하여 55℃에서 16시간 건조하고, 이후 30~50메쉬로 분쇄하여 분말을 제조하였다. 대조구로 사용된 쇠고기, 콩, 현미 및 우엉 분말은 시판 재료를 구입하여 사용하였으며, 곤충 대조구로는 최근 식용, 사료용으로 광범위하게 사용되고 있는 시판 갈색거저리 유충의 분말을 사용하였다. 이후, 분말들의 조단백질은 kjeldahl 법, 조지질은 soxhet 지방추출법, 회분은 직접회화법으로 측정하였으며, 조탄수화물 함량은 100%에서 수분, 단백질, 지방, 회분을 제외한 성분으로 계산하였다.
[표 2] 쌍별귀뚜라미의 영양 성분 분석
Figure 112017040747015-pat00002
표 2에 나타낸 바와 같이, 쌍별귀뚜라미 분말은 조단백질 58.3%, 조지질 11.9%, 조탄수화물 9.6%, 조회분 9.6%로 매우 높은 단백질 함량과 조회분 함량을 나타내었으며, 100g 당 378kcal를 나타내었다. 이는 쇠고기, 콩보다 높은 단백질 함량이며, 상대적으로 낮은 조지질을 함유하여 영양적으로 우수함을 확인하였다. 곤충식품 중 갈색거저리 유충은 53.2%의 높은 조단백질 함량 및 34.5%의 조지질 함량으로, 100g 당 가장 높은 549 kcal를 나타내었다. 그러나, 쌍별귀뚜라미 분말은 특유의 이취와 거부감이 있으므로, 다른 부재료 첨가로 제거하는 것이 필요함을 확인하였다. 한편, 우엉은 15,5%의 낮은 단백질 함량과 77.5%의 높은 조탄수화물 함량을 나타내며, 특유의 구수한 맛을 나타내므로, 쌍별귀뚜라미와 우엉을 혼합시 단백질, 지질, 탄수화물, 회분의 영양 밸런스가 우수하면서 관능성이 개선될 수 있음을 알 수 있었다.
실시예 2: 쌍별귀뚜라미의 유용성분 분석
쌍별귀뚜라미의 유용성분 분석을 위해 쌍별귀뚜라미 분말 추출물을 조제한 후, 추출물의 총 플라보노이드(total flavonoid), 총 폴리페놀(total polyphenol), 총당 및 환원당 함량을 갈색거저리 유충 추출물 및 우엉 분말 추출물과 비교하였다. 쌍별귀뚜라미, 갈색거저리 유충 및 우엉 분말 추출물 조제시에는 각각의 시료에 대해 10배의 95% 에탄올을 가하고, 상온에서 2회 반복 추출한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하였다. 이때, 총 플라보노이드 함량 측정은 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고, 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4ml를 첨가하고 다시 1N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na2CO3 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다.
[표 3] 쌍별귀뚜라미의 유용성분 분석
Figure 112017040747015-pat00003
그 결과, 표 3에 나타낸 바와 같이, 쌍별귀뚜라미 추출 수율은 29.4%를 나타내었으며, 15.6mg/g의 총 폴리페놀과 3.9mg/g의 총 플라보노이드 함량을 보였다. 이는 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량이 우수하다고 알려진 우엉 추출물의 3~4배에 해당하는 함량이며, 갈색거저리 유충 추출물에 비해서도 월등히 높은 함량이다. 따라서, 쌍별귀뚜라미는 다양한 유용 생리 활성을 나타낼 것으로 판단되었다.
실시예 3: 쌍별귀뚜라미의 항산화, 항세균 항혈전 활성 평가
실시예 2에서 제조된 쌍별귀뚜라미 추출물을 대상으로 항산화, 항세균, 항당뇨 및 항혈전 활성을 조사하였다. 먼저, 항산화 활성은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical 소거능 및 ABTS[2,2-azobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate)] radical 소거능 측정에 의해 평가하였다. DPPH 소거능의 경우, 다양한 농도로 희석한 시료 20μl에 99.5% 에탄올에 용해시킨 2x10-4M DPPH 용액 380μl를 넣고 혼합하여 37℃에서 30분 동안 반응시킨 후, 516nm에서 microplate reader(Asys Hitech, Expert96, Asys Co., Austria)를 사용하여 흡광도를 측정하였다. DPPH free radical 소거능은 시료첨가구와 비첨가구의 백분율로 표시하였다.
ABTS 소거능의 경우 7mM ABTS(Sigma Co., USA) 5ml와 140mM potassium persulfate 88ml를 섞은 후, 상온에서 16시간 빛을 차단하여 ABTS 양이온을 형성시켰으며, 이후 이 용액을 414nm에서 흡광도 값이 1.5가 되도록 에탄올로 희석하였다. 조제된 희석용액 190ml와 다양한 농도로 조제된 시료 10ml를 혼합한 후, 상온에서 6분간 반응시킨 후 734nm에서 흡광도를 측정하고, 다음의 식에 의해 ABTS radical 소거능를 계산하였다.
ABTS radical 소거능 (%) = [(C-S)/C] x 100,
C: 용매 대조구 DMSO 첨가시의 흡광도,
S: 시료 첨가시의 흡광도.
한편, nitrite 소거능 측정의 경우, 아질산염 용액(1mM)에 시료용액을 가하고, 여기에 0.1N HCl을 가해 pH 1.2로 조정한 후, 37℃에서 1시간 반응시킨 후 Griess reagent(Sigma Co., USA)를 가하고 혼합하였다. 이후 15분간 실온에서 방치 후 520nm에서 흡광도를 측정하여 잔존 nitrite 양을 측정하였다. nitrite 소거능(%)는 다음의 식에 의해 계산하였다.
NSA (%) = [1-(A-C)/B] x100,
A: 1mM nitrite 용액에 시료를 첨가하여 1시간 반응시킨 후의 흡광도,
B: 1mM nitrite 용액의 흡광도,
C: 추출물 시료의 흡광도.
환원력 평가의 경우 Oyaizu 등의 방법을 변형(안선미 등, 2011. J. Life Sci. 21: 576-583)하여 측정하였다. 에탄올에 용해한 시료 2.5ml에 0.2M sodium phosphate buffer(pH 6.6) 2.5ml와 10% potassium ferricyanide 2.5ml를 첨가하고, 50℃에서 20분간 반응시킨 후, 10% trichloroacetic acid 2.5ml를 첨가하여 반응을 종료하고 4,000rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수한 상등액은 증류수로 2배 희석한 후, 신선하게 조제된 0.1% ferric chloride 용액과 5:1(v/v) 비율로 혼합하고 700nm에서 흡광도를 측정하여 평가하였다.
[표 4] 쌍별귀뚜라미 추출물의 항산화능 평가
Figure 112017040747015-pat00004
각각의 항산화력 측정 결과는 표 4에 나타내었으며, 쌍별귀뚜라미 추출물은 동일 농도의 우엉 추출물보다 DPPH 소거능, ABTS 소거능, nitrite 소거능 및 환원력이 더욱 강력함을 확인하였다. 또한, 갈색거저리 유충 추출물에 비해서는 DPPH 소거능은 우수하며, 기타 항산화 활성 측정항목은 유사하였다.
한편, 쌍별귀뚜라미 추출물의 항세균 활성은 고체배지상에서 생육저지환의 크기를 측정하여 평가하였다. 사용 균주로는 그람 음성균으로 Salmonella typhimurium KCTC 1926, Escherichia coli KCTC 1682, Proteus vulgaris KCTC 2433, Pseudomonas aeruginosa KACC 10186, 그람 양성균으로는 Listeria monocytogenes KACC 10550, Staphylococcus aureus KCTC 1916, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Bacillus subtilis KCTC 1924를 사용하였다. 배양배지로는 Nutrient broth(Difco Co., USA)에 각각의 세균을 접종하여 37℃에서 24시간 동안 배양한 후, 각 균주를 O.D.600 0.1로 조정하여 Nutrient agar(Difco Co., USA) 배지를 포함하는 멸균 petri dish(90×15mm, 녹십자, 한국)에 100μl 도말하고, 각각의 시료 5μl를 멸균 disc-paper(지름 6.5mm, Whatsman No. 2)에 가하여, 37℃에서 24시간 동안 배양하였으며, 대조구로는 항세균제인 엠피실린(ampicillin)을 1μg/disc 농도로 사용하였다. 이후, 생육저지환의 크기는 육안으로 생육이 나타나지 않는 부분의 지름을 mm 단위로 측정하였고, 3회 이상 평가 후 대표 결과로 나타내었다. 그 결과, 표 5에 나타낸 바와 같이, 쌍별귀뚜라미 추출물, 갈색거저리 유충 및 우엉 추출물에서 항균 활성이 나타나지 않았다.
[표 5] 쌍별귀뚜라미 추출물의 항세균 활성
Figure 112017040747015-pat00005
쌍별귀뚜라미 추출물의 항당뇨 활성은 α-amylase, β-amylase 및 α-glucosidase를 측정하여 평가하였다. 사용 α-amylase와 β-amylase는 Bacillus amyloiquifaciens 유래, α-glucosidase는 Aspergillus niger 유래의 효소를 국내의 전분 가공업체(ApisBio Co. Deagu, Korea)로부터 구입하여 사용하였다.
α-Amylase 저해 활성
α-Amylase 저해 활성은 Lim 등(J Korean Soc Appl Bio Chem, 48, 100-108)의 방법을 수정하여 사용하였다. 추출물 시료 2.5μl와 50mM phosphate buffer(pH 6.8)로 희석한 α-amylase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation 한 후, 0.5% soluble starch(Samchun Chemicals Co., Korea) 25μl를 가하여 37℃에서 10분간 반응하였다. 이후, 2N acetic acid를 25μl 가하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 0.75% KI/I2 용액 10μl를 가하여 발색하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하였으며, 각각의 실험은 3회 반복한 후 평균값을 구하여 다음의 식으로 저해율을 계산하였다.
저해율( % ) = 시료 첨가구 효소활성/ 대조구 첨가구 효소활성 x 100
β-Amylase 저해 활성
β-Amylase 저해활성은 α-amylase와 동일한 방법으로 반응하였다. 이후, 100℃에서 5분간 가열하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 150μl의 DNS(3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., st. Louis, USA) 용액을 가하여 100℃에서 5분간 가열하여 발색한 후 상온에서 방냉하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다.
저해율( % )=[1-(시료첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)]x100
α- Glucosidase 저해 활성
α-Glucosidase 저해활성은 Lim등(J Korean Soc Appl Bio Chem, 48, 100-108)의 방법을 이용하여 평가하였다. 토복령 시료 2.5μl와 50mM sodium acetate buffer(pH 5.6)로 희석한 α-glucosidase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation하고, 1mM pNPG 용액 25μl를 가하여 60℃에서 10분간 반응하였다. 이후, 1M NaOH 25μl를 가하여 반응을 정지시키고, 405nm에서 흡광도를 측정하여 β-amylase 저해율과 동일한 방법으로 저해율을 계산하였다.
[표 6] 쌍별귀뚜라미 추출물의 항당뇨 활성 (전분분해억제 활성)
Figure 112017040747015-pat00006
그 결과, 표 6에 나타낸 바와 같이 쌍별귀뚜라미 추출물은 임상에서 사용하는 acarbose보다는 미약하나, 우엉 추출물보다는 우수한 양호한 α-amylase 저해활성을 나타내었다.
한편, 항혈전 활성은 혈액응고 저해활성(혈전생성 억제활성)을 평가하였으며, 기존에 보고된 방법(Sohn et al., 2004. Kor. J. Pharmacogn 35. 52-61; Kwon et al., 2004. J. Life Science, 14. 509-513; 류 등 2010. J. Life Science, 20. 922-928)과 동일하게, 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임, 에이피티 타임을 측정하여 평가하였다. 혈장은 시판 control plasma(MD Pacific Technology Co., Ltd, Huayuan Industrial Area, China)를 사용하였으며 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임과 에이피티티 측정법은 다음과 같은 과정으로 수행되었다.
트롬빈 타임(Thrombin Time)
37℃에서 0.5U 트롬빈(Sigma Co., USA) 50μl와 20 mM CaCl2 50μl, 다양한 농도의 시료 추출액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 혼합하여 2분간 반응시킨 후, 혈장 100μl를 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였다. 대조로는 아스피린(Sigma Co., USA)을 사용하였으며, 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 30.5초의 응고시간을 나타내었다. 트롬빈 저해 효과는 3회 이상 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 트롬빈 저해 활성은 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조구의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.
프로트롬빈 타임( prothrombin time)
표준혈장(MD Pacific Co., China) 70μl와 다양한 농도의 시료액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 첨가하여 37℃에서 3분간 가온 후, 130μl의 PT reagent를 첨가하고 혈장이 응고될 때까지의 시간을 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었다. 대조로는 아스피린(Sigma Co., USA)을 사용하였으며, 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 16.7초의 응고시간을 나타내었다. 프로트롬빈 저해활성은 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조구의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.
aPTT (activated Partial Thromboplastin Time)
혈장 100μl와 다양한 농도의 시료 추출액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 첨가하여 37℃에서 3분간 가온한 후, 50μl의 aPTT reagent(Sigma, ALEXINTM)를 첨가하고 다시 37℃에서 3분간 배양하였다. 이후 50μl CaCl2(35mM)을 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였다. 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였으며, 이 경우 58.1초의 응고시간을 나타내었다. aPTT의 결과는 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 혈액응고인자 저해활성은 시료 첨가시의 aPTT를 용매 대조구의 aPTT로 나눈 값으로 나타내었다.
[표 7] 쌍별귀뚜라미 추출물의 혈액응고저해 활성
Figure 112017040747015-pat00007
그 결과, 표 7에 나타낸 바와 같이, 쌍별귀뚜라미 추출물은 아스피린에 비해 미미한 항혈전 활성을 나타내었다. 또한, 갈색거저리 추출물 역시 미미하였으며, 우엉의 경우 미약한 항혈전 활성을 나타내었다.
실시예 4: 관능성 , 기호성이 우수한 쌍별귀뚜라미 , 우엉 및 페퍼민트 분말의 혼합비 결정 및 최종 제품의 특성 평가
상기 실시예 1에서 얻은 쌍별귀뚜라미 분말, 우엉 분말을 혼합한 후, 향미와 기능성을 강화시키기 위해 다양한 향신료를 첨가하였으며, 생강 분말, 타임(thyme) 분말, 로즈마리 분말, 캐모마일 분말, 페퍼민트 분말 등을 사용하였으며, 그 결과 최종적으로 페퍼민트 분말을 선정하였다. 각각의 최적 배합비는 수많은 평가 결과, 귀뚜라미 분말 65중량%, 우엉분말 20중량%, 페퍼민트 분말 10중량%, 및 과립제조를 위한 첨가물로 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5중량%를 결정하였다.
제조된 과립은 도 1에 나타내었으며, 제조 과립은 열수 및 냉수에 잘 녹는 특성을 나타내었으며, 100ml에 1g을 녹인 경우 pH5.5를 나타내었으며, 색차는 명도 15.6, 적색도 -0.04. 황색도 1.77을 나타내어 색차는 79.75를 나타내었다. 이때, 색차 분석은 Hunter Color Difference meter(Super color SP-80 Colormeter, Tokyo Denshoku Co., Japan)를 이용하여 측정하였으며, 명도(백색 100 ~ 0 검정색), 적색도(적색 100 ~ -80 녹색), 황색도(황색 70 ~ -80 검정색)를 측정하였다. 이때, 표준백판의 색도는 L값이 92.44, a값이 -0.06, b값이 1.35로 기준을 정하였으며, 시료당 3회 측정하여 평균값을 구하여 나타내었고 색차(△E)는 다음의 식을 이용하여 계산하였다.
Figure 112017040747015-pat00008
최종 귀뚜라미차의 관능성 평가는 안동대학교 식품영양학과 연구원 20명을 대상으로 5점 척도로 평가하였으며, 그 결과는 표 8에 나타낸 바와 같이 시판 식물성차인 현미녹차 및 메밀차 추출액보다 우수한 관능성을 나타내었다. 즉, 우엉의 구수한 맛과 페퍼민트의 상쾌한 향이 쌍별귀뚜라미 분말의 특이한 이취와 맛을 마스킹하여 귀뚜라미차는 곤충에 거부감을 가지고 있는 일반인에게 우수한 관능성을 제공하는 것으로 판단된다. 최종 제품의 사진도는 도 2 및 도 3에 나타내었다.
[표 8] 최종 개발된 귀뚜라미차의 관능성 평가
Figure 112017040747015-pat00009
실시예 5: 최종 개발된 귀뚜라미차의 유용성분 및 효능 평가
최종 귀뚜라미차의 유용 성분 및 효능을 평가하기 위해, 귀뚜라미차 과립 시료에 대해 10배의 에탄올을 가하고, 상온에서 2회 반복 추출한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하였으며, 추출물을 대상으로 실시예 3에서 기술한 유용성분 함량 분석, 항산화, 항세균, 항당뇨 및 항혈전 활성을 동일한 방법으로 평가하였다.
먼저, 유용 성분 분석 결과, 표 9에 나타낸 바와 같이, 16mg/g의 높은 총 폴리페놀 함량과 159 mg/g의 총당, 54.7mg/g의 환원당 함량을 나타내어 쌍별귀뚜라미의 기능성과 우엉의 관능성이 상승적으로 작용할 것으로 예측되었다.
[표 9] 최종 개발된 귀뚜라미차의 유용성분 평가
Figure 112017040747015-pat00010
또한, 귀뚜라미차의 항산화 활성 평가 결과는 표 10에 나타내었으며, 귀뚜라미차는 쌍별귀뚜라미와 유사한 DPPH 및 ABTS 소거능과, 보다 우수한 nitrite 소거능 및 환원력을 나타내어 다양한 원재료 분말들의 혼합, 반죽 및 과립 제조시 항산화 활성의 소실은 없는 것을 확인하였다. 증가된 nitrite 소거능 및 환원력은 부재료인 페퍼민트에 의해 나타난 것으로 판단된다.
[표 10] 귀뚜라미차 추출물의 항산화능 평가
Figure 112017040747015-pat00011
또한, 귀뚜라미차의 항세균 활성을 평가하였으며, 그 결과, 표 11에 나타낸 바와 같이, 귀뚜라미차 추출물은 피부상재균인 Staphylococcus epidermidis와 피부 염증성 세균인 Staphylococcus aureus, 알러지상 식중독세균인 Proteus vulgarisBacillus subtilis에 대해 양호한 항세균 활성을 나타내었다. 이러한 항세균 활성은 부재료인 페퍼민트 분말에 의해 나타나는 것으로 판단된다.
[표 11] 귀뚜라미차 추출물의 항세균 활성
Figure 112017040747015-pat00012
개발된 귀뚜라미차 추출물의 항당뇨 활성 평가 결과, 임상에서 당뇨 치료제로 사용하는 acarbose보다는 미약하나, 원재료인 쌍별귀뚜라미의 양호한 α-amylase 저해 활성 및 우엉 추출물의 양호한 α-glucosidase 저해 활성을 동시에 나타내었다(표 12). 따라서, 개발된 귀뚜라미차를 상시 응용할 경우 당뇨의 예방과 치료에 도움이 되리라 판단된다.
[표 12] 귀뚜라미차 추출물의 항당뇨 활성 (전분분해억제 활성)
Figure 112017040747015-pat00013
귀뚜라미차의 항혈전 활성 평가결과는 표 13에 나타내었으며, 귀뚜라미차는 5mg/ml 농도에서 아스피린 1.5mg/ml 농도에서의 항혈전 활성보다 우수하였으며, 이러한 항혈전 활성은 농도의존적으로 증가하였다. 따라서, 귀뚜라미차를 상시 응용할 경우 심근경색, 뇌졸중 등과 같은 혈전성 질환의 예방과 치료에 도움이 되리라 판단된다. 또한, 항혈전제로 사용되고 있는 아스피린(상품명: 프로텍트)과 같은 항응고제가 장기복용시 심각한 위장 장해를 유발함을 고려할 때, 귀뚜라미차는 관능성, 기능성, 영양성 측면에서 매우 유리하리라 판단된다.
[표 13] 쌍별귀뚜라미 추출물의 혈액응고저해 활성
Figure 112017040747015-pat00014
실시예 6: 최종 개발된 귀뚜라미차의 인간 적혈구 용혈활성 평가
개발된 귀뚜라미차의 원료는 모두 식품원재료로 등록되어 안전성을 확보하고 있으나, 다양한 분말의 혼합, 과립 제조 가공 중 나타날 수 있는 잠재적 급성 독성을 평가하기 위해, 귀뚜라미차 추출물의 인간 적혈구 용혈 활성을 평가하였다. 이때 용혈 활성은 기존의 보고(정인창, 손호용, 2014년, Korean J. Microbiol. Biotechnol. 42: 285~292)에 준해 평가하였으며, 간단하게는 PBS로 3회 수세한 인간 적혈구 100μl를 96-well microplate에 가하고 다양한 농도의 시료용액 100μl를 가한 다음 37℃에서 30분간 반응시켰으며, 이후, 반응액을 10분간 원심분리(1,500rpm)하여 상등액 100μl를 새로운 microtiter plate로 옮긴 후 용혈에 따른 헤모글로빈 유출 정도를 414nm에서 측정하였다. 시료의 용매 대조구로는 DMSO(2%)를 사용하였으며, 적혈구 용혈을 위한 실험 대조구로는 Triton X-100(1mg/ml)를 사용하였다. 용혈 활성은 다음의 수식을 이용하여 계산하였다.
(%)Hemolysis=[(Abs.S-Abs.C)/(Abs.T-Abs.C)]×100
Abs. S : 시료 첨가구의 흡광도,
Abs. C : DMSO 처가구의 흡광도,
Abs . T : Triton X-100 첨가구의 흡광도.
[표 14] 최종 개발된 귀뚜라미차의 인간적혈구 용혈 활성
Figure 112017040747015-pat00015
표 14에 나타낸 바와 같이, 귀뚜라미차, 쌍별귀뚜라미 및 우엉 추출물은 인간 적혈구에 대해 0.5mg/ml 농도까지 용혈 활성을 나타내지 않아, 급성 용혈독성은 나타나지 않음을 확인하였다.
이상과 같이, 귀뚜라미 분말 65중량%, 우엉 분말 20중량%, 페퍼민트 분말 10중량%, 및 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5중량%를 혼합하여 과립으로 제조한 귀뚜라미차는 영양성, 관능성, 기능성(항산화, 항세균, 항당뇨 및 항혈전 활성)을 조화롭게 가지고 있으며, 안전성을 확보하고 있는 기능성 곤충차임을 확인하였다.

Claims (7)

  1. 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 귀뚜라미차.
  2. 제 1항에 있어서, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5~10중량부를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 귀뚜라미차.
  3. 다음의 단계들을 포함하는 귀뚜라미차의 제조 방법:
    (1) 귀뚜라미를 선별, 세척, 멸균, 볶음, 건조 및 분쇄하여 귀뚜라미 분말을 제조하는 단계;
    (2) 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 혼합하고, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 5~10중량부를 첨가하여 반죽을 제조하는 단계; 및
    (3) 상기 반죽으로부터 과립을 제조하는 단계.
  4. 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 항산화용 건강 기능 식품.
  5. 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 스타필로코커스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 프로테우스 불가리스(Proteus vulgaris) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 세균성 질환의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품.
  6. 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 당뇨의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품.
  7. 귀뚜라미 분말 100중량부에 대하여, 우엉 분말 20~40중량부 및 페퍼민트 분말 10~20중량부를 포함하는 혈전증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품.
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