KR101900304B1 - 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물 및 이의 제조방법{Compositions for Detoxifying Nicotine Containing Green Tea Extract and Black Tea Extract and Method for Preparing the Same}

본 발명은 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

일반적으로 장기간의 흡연으로 생성된 활성 산소종은 세포의 구성물질인 단백질, 지질, 핵산 등을 공격하여 손상시킴으로써 세포손상을 유발하고 이러한 세포와 조직의 산화적 손상과 노화 및 노화 관련 질병들 즉, 암, 십이지장궤양, 궤양성 대장염, 기관지염, 뇌혈관 질환, 폐색증 등 각종 질환을 유발시킨다. 이외에도 흡연은 수면장애, 조기폐경, 생식능력 저하, 운동기능 저하 등의 관련성이 보고되었다. 이런 질환들은 담배 연기 속에 들어 있는 40여종의 독성 발암 물질에 의해 생기는데, 그 중 대표적인 유해성분으로는 니코틴, 타르 및 일산화탄소 등이 있다(Hoffmann, Melikian & Wynder, 1996; Trushine & Hecht, 1998; Witschi, Espiritu, Maronpot, Pinkerton & Jones, 1997; Hecht, 1995; Wynder & Muscat, 1995).

흡연은 정신적으로나 육체적으로 의존성이 생기게 하는데, 이는 담배 속에 들어 있는 니코틴 성분에 의해 생긴다. 니코틴은 흡연을 통하여 폐에 흡수되어 빠른 속도로 체내에서 물질대사가 일어나는 무색 또는 연황색의 강독성 물질로, 신경 마디의 세포막 상에 작용하여 혈압상승, 골격 근섬유 경련초래 및 흥분으로 인한 구강 내 마비 등을 일으키는 것으로 알려져 있다. 또한, 니코틴은 노화촉진 등에 중요한 요인으로 작용한다(Damaj, Welch & Martin, 1996).

니코틴은 신체 어느 곳을 통해서나 즉시 흡수된다. 담배를 피우면 니코틴이 7 내지 19초만 지나면 뇌에 도달하는데 이런 빠른 작용발현이 흡연 행동을 강화시킨다. 흡연 시 니코틴은 폐를 통해 동맥으로 흡수되어 빠른 시간 안에 뇌로 도달한다. 체내에 흡입된 니코틴의 70 내지 80% 정도는 코티닌으로 전환되고, 코티닌의 약 10%가 소변으로 배출되며, 나머지는 4-oxo-4(3-phridyl)butanoic acid(hydroxy acid)로 전환되어 소변으로 배출된다(주왕기, 곽영숙, 주진형, 2000, Benowitz, Jacob, Fong & Gupta, 1994).

흡연 후 동맥혈액과 뇌에서 니코틴 농도는 급격히 상승했다가 근육을 위주로 전신으로 분배되면서 20 내지 30분간에 걸쳐서 감소하게 된다. 니코틴은 주로 신장에서 그 주요 대사산물인 코티닌으로 산화되고, 일부는 니코틴 그 자체로 신장에 의해 뇨 중으로 배출된다. 그러므로 소변 중 니코틴 및 코티닌의 농도는 직접흡연 및 간접흡연의 척도가 될 수 있다. 즉, 코티닌은 체내 배출 반감기가 17 내지 20여 시간으로 니코틴의 2시간보다 훨씬 길어 니코틴의 표지인자로 사용 할 수 있다(강복수, 2000).

흡연의 피해를 최소화하기 위해 여러 가지 방법들이 모색되고 있으며, 이러한 방법들에는 전자담배, 담배 파이프, 니코틴대체요법 및 식품 형태의 금연 보조제 등이 있다. 이와 같은 금연제는 일시적인 담배의 맛, 습관을 줄이는 데 불과하며, 근본적으로 금연을 할 수 있는 제품은 아니다.

기존에 니코틴 해독제라고 보고되고 있는 식품등은 정확한 과학적인 기전이 밝혀지지 않았으며, 흡연의 중독을 야기 시키는 니코틴 농도 감소로 금단현상이 더욱 증가 될 수 있다는 문제점도 제기 되고 있다. 또한, 흡연 시 상당량의 비타민 C가 체내에서 소모되는데, 녹차와 흑차에는 레몬의 5-8배의 비타민 C가 포함되어 있으며, 카테킨은 매우 낮은 농도에서도 니코틴과 결합하여 침전을 형성함을 보여 주고 있다(경윤주, 이동희, 2000). 이와 같은 기능들은 기존 니코틴 해독제의 문제점을 보완할 수 있는 특징이라고 할 수 있다.

녹차와 흑차는 항산화 작용뿐만 아니라 고혈압과 동맥경화 억제 작용, 과산화 지질 생성 억제에 의한 노화예방, 중성지질 생성 억제에 따른 비만 방지, 수은 및 카드뮴 등 유독성 중금속의 해독은 물론, 니코틴 등 알칼로이드 성분과의 결합에 의한 해독 작용 등 다양한 생리활성 효능이 있는 것으로 알려져 있다(Kim & Rhee, 1994).

녹차와 흑차의 성분상 차이는 발효 유무에 기인되는데 흑차는 폴리머의 (multimeric) 폴리페놀 함량이 높고 녹차는 모노머의(monomeric) 폴리페놀 함량이 높은 차이가 있다. 이와 같이 녹차와 흑차는 다량의 카테킨과 폴리페놀을 함유하고 있어 항산화 효능과 더불어 흡연으로부터 체내로 유입되는 독성물질인 니코틴제거 속도를 증가시켜 금연 시 금단현상을 최소화하는데 본 발명에 목적이 있다. 또한, 일반적으로 항산화 기능을 염두하고 섭취되고 있는 녹차 또는 흑차는 금연 시 금단현상에 의한 거부반응 진정에 효과가 있을 것으로 생각된다.

1. 강복수(2000). 뇨 중 니코틴 측정을 통한 학생 흡연실태조사 및 학생 흡연율 모니터링 체계 구축 방안, 영남대학교, 보건복지부 연구과제 최종보고서. 2. 경윤주, 이동희(2000). 녹차 추출물에 의한 니코틴의 코티닌으로 전이 촉진, 한국환경농학회지. 19(2). 147-153. 3. 주왕기, 곽영숙, 주진형(2000). 약물남용 어떻게 피료할 것인가, 서울: 도서출판 신일상사. 4. Benowitz NL, Jacob P, Fong I & Gupta S. Nicotine metabolic profile in man: Comparision of cigarette smoking and transdermal nicotine. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1994.268,296-301. 5. Damaj MI, Welch SP & Martin BR. Characterization and modulation of acute tolerance to nicotine in mice. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1996.277,454-461. 6. Ghosheh OA, Browne D, Rogers T, de Leon J, Dwoskin LP, Crooks PA. 2000. A simple high performance liquid chromatographic method for the quantification of total cotinine,total 3'-hydroxycotinine and caffeine in the plasma of smokers. J Pharm Biomed Anal 23:543-549. 7. Hecht SS. Tobacco smoke carcinogens and lung cancer, Natl. Center Inst. 1995.91,1194-1210. 8. Hoffmann DAA, Melikian EL & Wynder. Scientific challenges in environmental carcinogenesis, Prev. Med. 1996.25,14-22. 9. Kim MJ, Rhee SJ. Effects of Korean green tea, oolong tea and black tea beverage on the removal of cadmium in fat. J Korean Soc Food Nutr. 1994.23:784-791. 10. Kyerematen GA, Morgan ML, Chattopadhyay B, deBethizy JD, VessllES. 1990. Disposition of nicotine and eight metabolites in smokers and nonsmokers: identification in smokers of two metabolites that are longer lived than cotinine. Clin Pharmacol Ther 48:641-651. 11. Trushine N. Hecht. Streoselective metabolism of nicotine and tabacco-specific N-nitrosamines to 4-hydroxy-4-(3-pyridyl)butanoic acid in rats, Chem. Res. Toxicol. 1998.12,164-171. 12. Witschi HI, Espiritu RR, Maronpot KE, Pinkerton AD, Jonse. The carcinogenic potential of the gas phase of environmental tobacco smoke, Carcinogenesis 1997.18,2035-2042. 13. Wynder EL. Muscat. The changing epidemiology of smoking and lung cancer histology, Environ. Health Perspect. 1995.103,8,143-148.

이에 본 발명자들은 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합비율에 따른 니코틴 분해능력을 평가하고, 흡연을 하고 있는 성인들을 대상으로 녹차 추출물과 흑차 추출물의 혼합물을 섭취시켰을 때 니코틴 분해능력의 효능에 미치는 영향을 검증하여 녹차 추출물과 흑차 추출물 혼합물의 니코틴 분해능력이 월등히 우수한 것을 확인하였다.

이에, 본 발명의 목적은 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물의 제조 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 니코틴 해독 용도를 제공하는 것이다.

본 발명은 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합비율에 따른 니코틴 분해능력을 평가하고, 흡연을 하고 있는 성인들을 대상으로 녹차 추출물과 흑차 추출물의 혼합물을 섭취시켰을 때 니코틴 분해능력의 효능에 미치는 영향을 검증하여 녹차 추출물과 흑차 추출물의 혼합물의 니코틴 분해능력이 월등히 우수한 것을 확인하였다.

이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다

본 발명의 일 예는 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 추출물은 용매 조추출물, 특정 용매 가용 추출물(용매 분획물), 및 용매 조추출물의 용매 분획물을 포함하며, 상기 녹차 추출물 및/또는 흑차 추출물은 용액, 농축물 또는 분말 상태일 수 있다.

본 발명에 따른 니코틴은 하기의 화학식 1과 같은 구조식을 가지며 분자식은 C₁₀H₁₄N₂이다. 피리딘 같은 냄새가 나는 유상의 담황색 액체로, 끓는점 247℃(일부 분해), 비중 1.0097이다. 실온에서는 상당한 휘발성을 지니며, 빛이나 공기와 접촉하면 쉽게 산화되어 갈색으로 변한다. 수용액은 약알칼리성을 보이고, 60℃ 이하 및 210℃ 이상에서는 물에 무제한으로 용해된다.

[화학식 1]

니코틴은 담배의 뿌리에서 합성되어, 무기염과 마찬가지로 증산류에 의해서 식물체를 상승하여 잎에 축적된다. 잎 속에서는 말산, 시트르산으로 존재하며, 건조중량의 0.5 내지 0.8% 이상이 잎에 함유되어 있다. 피리딘고리와 피롤고리로 이루어져 있는데, 그 생합성 메커니즘은 아직 밝혀지지 않았으나, 피롤고리가 오르니틴에 유래한다는 설이 있다.

니코틴은 쌍 떡잎식물이 생산해 내는 화합물인 알칼로이드(alkaloid)의 일종이다. 니코틴은 주로 토마토, 감자와 같은 가지과(Solanaceae) 식물의 잎에서 발견되며, 특히 담배의 잎에 많은 양이 포함되어 있다. 단 합성되는 장소는 뿌리로서, 뿌리에서 합성된 후 잎에 저장된다. 또한 니코틴은 곤충에 대한 신경독성이 있어서, 과거에는 살충제로 사용되기도 하였다. 낮은 농도의 니코틴은 인간을 비롯한 포유류에게 각성 효과를 나타내지만 농도가 높아지면 큰 독성을 나타낼 수 있다. 인간은 주로 담배를 피우는 활동을 통해 니코틴을 흡수하여 각성 효과를 느끼게 되며, 니코틴 중독은 인간에게 있어서 가장 심각한 중독 중 하나로 간주된다.

또한, 니코틴 유사물질로서 노르니코틴, 아나바신 등도 담배에 함유되어 있고, 또 니코틴은 엉거시과의 한련초, 속새과의 쇠뜨기, 석송과에 속하는 식물에도 함유되어 있다. 니코틴은 강한 독성을 지녀 중추신경 및 말초신경을 흥분시키거나 마비시키며, 또 장 및 혈관을 수축시키고, 혈압의 상승을 촉진시킨다. 그러므로 이것에 의한 급성중독이나, 흡연에 따른 니코틴 흡수로 생기는 만성중독 발생이 문제시되고 있다. 니코틴의 황산염은 농업용 살충제(니코틴제)로 사용되기도 하며 접촉제, 훈증제로도 사용한다.

니코틴의 가장 큰 문제는 의존성에 있다. 일반적으로 흡연자가 담배를 끊는 금연 성공률은 상당히 낮은 편인데, 이 가장 큰 원인이 니코틴 의존성에 있는 것으로 보인다. 니코틴이 의존성을 나타내는 가장 큰 원인은 니코틴성 아세틸콜린 수용체의 민감성 감소와, 이에 따른 도파민 분비의 감소로 알려져 있다. 쥐나 고릴라에서도 이러한 니코틴 의존성 실험이 잘 진행되어 있으며, 실제로 의존 효과가 나타나는 것으로 알려져 있다.

니코틴 의존에 대한 해결 방법으로서 니코틴 껌이나 패치를 사용하기도 하지만, 이러한 방법의 효과에 대해서는 아직 논란의 여지가 있는 상황이다. 니코틴은 이러한 중독 증상뿐만이 아니라, 그 자체로도 독성이 강한 물질로서, 흡연이 아닌 직접 섭취를 하게 되면 담배 2개에 들어 있는 니코틴의 양으로도 성인 남성을 죽음에 이르게 할 수 있다. 급성 니코틴 중독 상태가 되면 구토, 맥박, 호흡의 상승 같은 흥분 현상이 나타나며 심각한 경우에는 경련, 기절, 호흡 마비 같은 증상이 나타난다. 또한 흡연은 암에 큰 관련을 가지고 있는 것으로 알려져 있지만, 니코틴은 그 자체로서는 발암 효과가 잘 알려져 있지 않아서 흡연의 암 유발에서 중요한 역할을 차지하지는 않는 것으로 파악된다.

본 발명에 따른 녹차는 생엽에 높은 열을 가하거나 증기로 찌는 살청을 통하여 폴리페놀 산화효소의 활동을 멈추게 해 발효가 되지 않기 때문에 녹색을 유지한다. 투명한 푸른빛 찻물색과 싱그러운 맛이 일품이다. 중국은 차의 총 생산량 가운데 70%이상이 녹차이고, 우리나라에서도 보성, 하동과 제주도를 중심으로 녹차의 생산이 이루어지고 있다. 녹차의 특징은 삼녹(우리기 전 찻잎, 탕색, 차를 우리고 난 잎이 모두 녹색)이다. 싱그럽고 우아한 향기가 오래 지속되며 맛이 매우 깔끔하다. 녹차에서 느낄 수 있는 향기로는 어린잎의 향기인 눈향, 차 표면에 돋은 호의 향기인 호향, 밤의 향기인 율향, 꽃의 향기인 화향, 구수한 향 등 매우 다양하다.

대표적 녹차의 종류로는 한국의 우전과 세작, 일본의 옥로차, 중국의 서호용정, 황산모봉, 안길백차, 은시옥로 등이 있다. 녹차의 경우 폴리페놀과 비타민C의 함량이 높아 고혈압, 당뇨, 비만, 동맥경화 등의 질병에 매우 유익한 음료이다.

상기 녹차는 녹차의 잎, 줄기 및 뿌리로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으며, 예들 들어, 녹차의 잎인 것일 수 있다.

상기 녹차 추출물은 녹차를 물, 및 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻어진 조추출물일 수 있다.

녹차의 조추출물 제조에 사용되는 한 용매에 물과 알코올의 혼합물을 사용하는 경우에는 1%이상 내지 100%(v/v), 10%이상 내지 100%(v/v)미만, 20%이상 내지 100%(v/v)미만, 30%이상 내지 100%(v/v)미만, 40%이상 내지 100%(v/v)미만, 50%이상 내지 100%(v/v)미만, 60%이상 내지 100%(v/v)미만, 또는 70%이상 내지 100%(v/v)미만의 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올 수용액일 수 있다.

또한, 상기 알코올 수용액은 메탄올 수용액, 에탄올 수용액, 프로판올 수용액, 및 부탄올 수용액으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

본 발명에 따른 녹차 추출물은 용매 조추출물을 추가의 용매로 분획한 용매 분획물일 수 있으며, 예를 들면 상기 용매 조추출물에 에틸에테르, 아세트산에틸, 및 부탄올로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용한 용매 분획물일 수 있다.

예를 들면, 상기 녹차를 물 및 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출한 용매 조추출물을 에틸에테르, 아세트산에틸, 및 부탄올로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용한 용매 분획물일 수 있다.

본 발명에 따른 조성물 내의 유효성분으로서의 녹차 추출물의 함량은 사용 형태 및 목적, 환자 상태, 증상의 종류 및 경중 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 고형분 중량 기준으로 0.001 내지 99.9 중량%, 또는 0.1 내지 99.9 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 50 중량%, 또는 0.1 내지 40 중량%일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

본 발명에 따른 흑차는 미생물에 의해 발효가 진행되는 후발효차이다. 차를 일차적으로 가공한 후 다시 퇴적(일차 가공한 찻잎을 쌓아 두는 방법)이나 악퇴(일차 가공한 찻잎에 물을 뿌리고 쌓아 두어 찻잎 자체의 온도와 습도를 높이는 방법)의 과정을 거쳐 2차 가공을 하거나 저장하면서 차에 미생물이 발생하도록 한다. 흑차는 중국의 호남, 호북, 사천, 운남, 광서 등 서남부 지역에서 주로 생산된다. 잎의 색은 윤기가 있는 흑색이나 흑갈색이다. 흑차의 향기와 맛은 순하고 부드러우며 오래될수록 깊어진다. 탕색은 진한 홍색을 띠는 등홍색이다. 흑차는 압제를 하지 않은 산차와 압제를 한 긴압차가 있다. 바구니에 담거나 종이로 포장하여 여러 개를 죽 잎으로 묶어 포장하고 보관한다. 육보차, 복전차, 천량차, 운남보이차가 유명하다. 오래될수록 부드럽고 순해져 늦은 밤이나 몸이 허약한 사람들과 어린아이들까지도 편하게 마실 수 있다.

상기 흑차는 녹차의 잎, 줄기 및 뿌리로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으며, 예들 들어, 녹차의 잎에 열을 가하여 차 내부의 효소를 비활성화 시킨 후, 적정한 수분과 온도 등의 조건 하에서 미생물을 이용하여 발효 및 숙성시킨 차를 의미하고, 찻잎 내부 효소를 이용하는 전발효차와는 구별된다.

구체적으로 본 명세서에서 사용되는 흑차는 추출물의 형태로 포함되거나, 흑차 자체의 분쇄물, 또는 흑차의 건조 분쇄물로서 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 흑차 추출물은 흑차를 물, 및 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻어진 조추출물일 수 있다.

흑차의 조추출물 제조에 사용되는 한 용매에 물과 알코올의 혼합물을 사용하는 경우에는 1%이상 내지 100%(v/v), 10%이상 내지 100%(v/v)미만, 20%이상 내지 100%(v/v)미만, 30%이상 내지 100%(v/v)미만, 40%이상 내지 100%(v/v)미만, 50%이상 내지 100%(v/v)미만, 60%이상 내지 100%(v/v)미만, 또는 70%이상 내지 100%(v/v)미만의 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올 수용액일 수 있다

또한, 상기 알코올 수용액은 메탄올 수용액, 에탄올 수용액, 프로판올 수용액, 및 부탄올 수용액으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

본 발명에 따른 흑차 추출물은 용매 조추출물을 추가의 용매로 분획한 용매 분획물일 수 있으며, 예를 들면 상기 용매 조추출물에 에틸에테르, 아세트산에틸, 및 부탄올로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용한 용매 분획물일 수 있다.

예를 들면, 상기 흑차를 물 및 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출한 용매 조추출물을 에틸에테르, 아세트산에틸, 및 부탄올로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용한 용매 분획물일 수 있다.

본 발명에 따른 조성물 내의 유효성분으로서의 흑차 추출물의 함량은 사용 형태 및 목적, 환자 상태, 증상의 종류 및 경중 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 고형분 중량 기준으로 0.001 내지 99.9 중량%, 또는 0.1 내지 99.9 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 50 중량%, 또는 0.1 내지 40 중량% 일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

본 발명에 따른 조성물 내의 녹차 추출물과 흑차 추출물의 함유 비율은 1 내지 99, 1 내지 1, 99 내지 1인 것일 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 약학적 조성물 또는 식품, 의약품 조성물인 것일 수 있다.

본 발명에 따른 조성물이 약학적 조성물인 경우 인간을 포함하는 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예를 들어, 경구, 피부, 정맥, 근육, 피하 등의 경로로 투여될 수 있으며, 바람직하게는 경구로 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 액상, 환, 편상, 페이스트, 겔, 바, 젤리, 캡슐제, 연고제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 또는 경피제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태의 비경구 제형 등으로 제형화하여 사용될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 상기 혼합 추출물 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제 등의 보조제를 추가로 함유하는 것일 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는, 덱스트린, 결정셀룰로오스, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용할 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.

경구를 위한 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 연고제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제, 경피제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.

좌제의 제제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물을 인간에게 적용하는 구체예에 있어서, 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로 투여방식과 표준 약제학적 관행(standard phamaceutical practice)을 고려하여 선택된 약제학적 담체와 혼합되어 투여될 수 있다.

예를 들면, 본 발명의 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 약학적 조성물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 단독 또는 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 내거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강 내 또는 혀 밑 투여될 수 있다.

이러한 액체 제제는 현탁제(예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔(witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유(apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제형화 될 수 있다.

본 발명의 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 약학적 조성물의 투여 용량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.

예를 들어, 유효성분 함량을 기준으로 1일 투여량이 0.1 내지 500 ㎎/kg, 바람직하게는 0.5 내지 300 ㎎/kg일 수 있다. 상기한 투여량은 평균적인 경우를 예시한 것으로서 개인적인 차이에 따라 그 투여량이 높거나 낮을 수 있다.

본 발명의 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 약학적 조성물의 1일 투여량이 상기 투여 용량 미만이면 유의성 있는 효과를 얻을 수 없으며, 그 이상을 초과하는 경우 비경제적일 뿐만 아니라 상용량의 범위를 벗어나므로 바람직하지 않은 부작용이 나타날 우려가 발생할 수 있으므로, 상기 범위로 하는 것이 좋다.

특히, 본 발명의 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물을 인체에 투여하는 경우 천연추출물의 일반적 특성에 비추어 볼 때 다른 합성 의약품에 비해 부작용의 염려가 없을 것으로 사료되며, 실제로 규격화된 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물에 대한 독성 시험 결과 생체에 아무런 영향이 없는 것으로 판명되었다.

본 발명에 따른 조성물이 식품 조성물인 경우, 상기 식품은 각종 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제, 의약품, 화장품 등일 수 있다

상술한 건강기능식품의 예는 캡슐, 정제, 환, 액상제 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상술한 일반식품의 예는 통조림류, 레토르트류, 냉동식품류, 과자류, 빵류, 잼류, 어육가공품, 커피류, 음료류, 장류, 드레싱류, 주류 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상술한 식품 첨가제의 예는 영양강화제, 향미증진제, 향료 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 건강 기능성 식품에 함유된 유효성분으로서의 녹차 추출물 및/또는 흑차 추출물의 함량은 식품의 형태, 소망하는 용도 등에 따라 적절하게 특별한 제한이 없으며, 예를 들어, 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.

본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한 점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.

상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다.

상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.

상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.

상기 외에 본 발명의 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다

본 발명의 다른 일 예는 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물의 제조방법에 관한 것이다.

상기 녹차 추출물은 녹차의 잎, 줄기 및 뿌리로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을, 물, 및 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻어진 조추출물일 수 있다.

상기 흑차 추출물은 녹차의 잎, 줄기 및 뿌리로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을, 물, 및 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻어진 조추출물일 수 있다.

본 발명에 따른 녹차 추출물의 제조 과정을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다:

녹차를 물로 세척하여 협착물을 제거하고 건조시킨 후, 상기 녹차의 중량에 대하여 약 5 내지 20 부피배, 바람직하게는 7 내지 15 부피배의 추출용매로 환류 추출한다. 추출 후 여과하여 여과액을 모은다.

상기 추출 온도는 특별한 제한은 없지만 40 내지 110℃, 바람직하게는 55 내지 90℃인 것이 좋다.

추출공정은 1회 또는 수회 반복할 수 있으며, 본 발명의 한 바람직한 예에서는 1차 추출 후 다시 재추출하는 방법을 채택할 수 있는데, 이는 생약추출물을 대량 생산하는 경우 효과적으로 여과를 한다 하더라도 생약 자체의 수분 함량이 높기 때문에 손실이 발생하게 되어 1차 추출만으로는 추출효율이 떨어지므로 이를 방지하기 위함이다. 또한, 각 단계별 추출효율을 검증한 결과 2차 추출에 의해 전체 추출량의 80 내지 90% 정도가 추출되는 것으로 밝혀졌다.

본 발명의 일 예에서, 추출공정을 2회 반복하는 경우, 상기 얻어진 잔사에 다시 추출용매, 약 5 내지 15 부피배, 바람직하게는 8 내지 12 부피배로 환류 추출한다. 추출 후 여과하고 이전에 얻어진 여과액과 합쳐서 감압농축을 하여 녹차 추출물을 제조한다. 이와 같이 2차에 걸친 추출 및 각각의 추출 후 얻어진 여과액을 혼합함으로써 추출 효율을 높일 수 있으나, 본 발명의 추출물이 추출 회수에 한정되는 것은 아니다.

상기 녹차 추출물 제조 시에 사용되는 용매의 양이 너무 적으면 교반이 어렵게 되고 추출물의 용해도가 낮아져 추출효율이 떨어지게 되고, 지나치게 많은 경우는 다음의 정제단계에서 사용되는 용매의 사용량이 많아져 경제적이지 못하여 취급상 문제가 발생할 수 있으므로, 용매의 사용량은 상기 범위로 하는 것이 좋다.

이와 같이 얻어진 여과된 녹차 추출물은 의약품 원료로 사용하기에 적합하도록 잔존하는 저급 알코올의 함량을 조절하기 위하여 농축물 총량의 약 10 내지 30배, 바람직하게는 15 내지 25배, 보다 바람직하게는 약 20 중량배의 물로 1 내지 5회, 바람직하게는 2 내지 3회 공비 농축하고 재차 동량의 물을 가하여 균질 하게 현탁시킨 후 동결건조하여 분말상태의 녹차 추출물로서 제조될 수 있다

본 발명에 따른 흑차 추출물의 제조 과정을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다:

흑차를 물로 세척하여 협착물을 제거하고 건조시킨 후, 상기 녹차의 중량에 대하여 약 5 내지 20 부피배, 바람직하게는 7 내지 15 부피배의 추출용매로 환류 추출한다. 추출 후 여과하여 여과액을 모은다.

상기 추출 온도는 특별한 제한은 없지만 40 내지 110℃, 바람직하게는 55 내지 90℃인 것이 좋다.

추출공정은 1회 또는 수회 반복할 수 있으며, 본 발명의 한 바람직한 예에서는 1차 추출 후 다시 재추출하는 방법을 채택할 수 있는데, 이는 생약추출물을 대량 생산하는 경우 효과적으로 여과를 한다 하더라도 생약 자체의 수분 함량이 높기 때문에 손실이 발생하게 되어 1차 추출만으로는 추출효율이 떨어지므로 이를 방지하기 위함이다. 또한, 각 단계별 추출효율을 검증한 결과 2차 추출에 의해 전체 추출량의 80 내지 90% 정도가 추출되는 것으로 밝혀졌다.

본 발명의 일 예에서, 추출공정을 2회 반복하는 경우, 상기 얻어진 잔사에 다시 추출용매, 약 5 내지 15 부피배, 바람직하게는 8 내지 12 부피배로 환류 추출한다. 추출 후 여과하고 이전에 얻어진 여과액과 합쳐서 감압농축을 하여 흑차 추출물을 제조한다. 이와 같이 2차에 걸친 추출 및 각각의 추출 후 얻어진 여과액을 혼합함으로써 추출 효율을 높일 수 있으나, 본 발명의 추출물이 추출 회수에 한정되는 것은 아니다.

상기 흑차 추출물 제조 시에 사용되는 용매의 양이 너무 적으면 교반이 어렵게 되고 추출물의 용해도가 낮아져 추출효율이 떨어지게 되고, 지나치게 많은 경우는 다음의 정제단계에서 사용되는 용매의 사용량이 많아져 경제적이지 못하여 취급상 문제가 발생할 수 있으므로, 용매의 사용량은 상기 범위로 하는 것이 좋다.

이와 같이 얻어진 여과된 흑차 추출물은 의약품 원료로 사용하기에 적합하도록 잔존하는 저급 알코올의 함량을 조절하기 위하여 농축물 총량의 약 10 내지 30배, 바람직하게는 15 내지 25배, 보다 바람직하게는 약 20 중량배의 물로 1 내지 5회, 바람직하게는 2 내지 3회 공비 농축하고 재차 동량의 물을 가하여 균질 하게 현탁시킨 후 동결건조하여 분말상태의 흑차 추출물로서 제조될 수 있다.

본 발명에 사용된 추출 방법은 통상적으로 사용되는 모든 방법일 수 있으며, 예컨대, 냉침, 열수추출, 초음파 추출, 또는 환류 냉각 추출법일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 또 다른 일 예는 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 니코틴 해독 용도에 관한 것이다.

상기 녹차 추출물 및 흑차 추출물은 상기 설명한 바와 동일하다.

본 발명은 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명에 따른 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물은 흡연자들이 섭취하는 경우 체내 니코틴 분해능을 증가시킬 수 있는 것으로 기대된다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 인체시험 진행도표를 보여주는 그림이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 녹차와 흑차 혼합물 섭취 전후에 따른 집단간 코티닌(cotinine) 변화 차이를 보여주는 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 녹차와 흑차 혼합물 섭취 중단 1주 전후에 집단간 코티닌(cotinine) 변화 차이를 보여주는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 녹차와 흑차 혼합물 섭취 전, 섭취 1주 후 및 섭취 중단 1주 후 집단간 코티닌(cotinine) 변화 차이를 보여주는 그래프이다.

이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.

이하에서는 니코틴 해독용 조성물의 바람직한 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 살펴본다.

1-1. 녹차 추출물 제조

100g의 녹차 잎에 정제수 1,000g을 혼합한 다음, 80℃로 유지하여 4시간 동안 가온 추출하였다. 이것을 냉각한 다음, 건더기는 짜서 걷어내고, 200 mesh의 여과망으로　걸러내어, 잔류물을 제거하였다. 그 후 300mesh의 여과망으로 걸러서, 미세한 잔류물까지 제거하였다. 이 여과물을 감압 농축하여 농축 녹차 추출물을 얻었다. 농축 녹차 추출물을 동결 건조하여 녹차 추출물(17.5g, 17.5%)을 얻었다.

1-2. 흑차 추출물 제조

100g의 흑차에 정제수 1,000g을 혼합한 다음, 80℃로 유지하여 4시간 동안 가온 추출하였다. 이것을 냉각한 다음, 건더기는 짜서 걷어내고, 200 mesh의 여과망으로　걸러내어, 잔류물을 제거하였다. 그 후 300mesh의 여과망으로 걸러서, 미세한 잔류물까지 제거하였다. 이 여과물을 감압 농축하여 농축 흑차 추출물을 얻었다. 농축 흑차 추출물을 동결 건조하여 흑차 추출물(17.9g, 17.9%)을 얻었다.

1-3. 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물 제조

150g의 녹차 추출물과 흑차 추출물 50g (녹차 추출물 : 흑차 추출물 = 3 : 1)을 균일하게 혼합하여 녹차-흑차 혼합 추출물(196.0g, 98%)을 얻었다.

아래 실험예 1에서는 실시예 1의 추출물의 혼합비율에 따른 니코틴 분해능력을 측정하였다.

[실험예 1]

1-1. 니코틴 분해능력 측정방법

녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합비율에 따른 니코틴 분해능을 평가하기 위해 각 물 추출물의 직접혼합에 의한 니코틴 분해능 및 세포배양을 이용한 니코틴 분해능을 측정하였다.

<니코틴 대사과정>

체내에 흡입된 니코틴의 70~80%는 코티닌으로 전환되고 전환된 코티닌의 10~15%가 소변으로 배출되며, 나머지는 4-옥소-4-(3-피리딜)부텐 산(4-oxo-4-(3-pyridyl)) butanoic acid) 형태로 전환된다. 상기 4-옥소-4-(3-피리딜)부텐 산(4-oxo-4-(3-pyridyl))butanoic acid)즉, 키토 산(keto acid)의 85%는 4-하이드록시-4-(3-피리딜)부텐 산(4-hydroxy-4-(3-pyridyl)butanoic acid)으로 전환되어 소변으로 배출된다. 코티닌으로 대사되지 않은 니코틴 중 4%는 플라빈(flavin)을 함유하는 모노옥시게나이제(monooxygenase)에 의해서 니코틴-1'-N-산화물(oxide)로 전환되어 대부분 소변으로 배출된다. 니코틴은 약 30여분의 반감기를 가지고 있고, 코티닌의 경우 15시간 이상의 반감기를 가지고 있다. 니코틴의 무독화 생성물로의 전이를 니코틴의 함량은 니코틴의 안정한 분해산물인 코티닌의 함량으로 측정하였다.

HPLC 분석은 시료 3 mL에 다이클로로메테인 2 mL와 5 M NaOH 0.6 mL를 가하고, 15분간 혼합한 다음 2,000 X g에서 5분간 원심분리 하였다. 질소가스를 이용하여 다이클로로메테인 층을 날려 보낸 다음, 이동상 용액 0.5 mL를 가하여 다시 녹인 용액으로 분석하였다. 이동상으로는 0.1 M 인산나트륨/메탄올(v/v, 90/10)을 트리에틸아민(triethylamine)을 넣어 pH 4.7로 조절하여 사용하였으며, 유속은 1 mL/min, UV 파장은 254nm로 하였다.

1-2. 혼합물에 의한 니코틴 분해능력

녹차 추출물과 흑차 추출물의 니코틴(nicotine)의 코티닌(cotinine)으로 분해능력을 평가하기 위해, 1.5ml 시험관에 10mM의 니코틴 200 ul와 녹차추출물과 흑차추출물의 혼합물(0:1, 1:3, 1:1, 3:1, 1:0) 200 ul의 시료(1 ug/mL)를 혼합 후37℃에서 2시간 배양 후 생성된 코티닌의 양을 HPLC로 측정하여, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

녹차 추출물(%)	0	25	50	75	100
흑차 추출물(%)	100	75	50	25	0
코티닌 함량(ng/ml)	40.05	87.09	78.67	123.56	52.87
% vs 흑차	-	117.45%	96.43%	208.51%	32.01%
% vs 녹차	-24.25%	64.72%	48.80%	133.71%	-

표 1에서 확인할 수 있듯이, 녹차 추출물 및 흑차 추출물 단독처리에 의한 니코틴의 코티닌으로의 분해는 각각 40.05ng/ml 및 52.87ng/ml이나, 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물 처리 시에는 단독처리에 비하여 니코틴의 분해능력이 흑차단독추출물에 비하여 녹차:흑차 비율이 1:3, 1:1, 3:1, 1:0 에서는 각각 117.45, 96.43, 208.81 및 32.01% 증가하였으며, 녹차단독추출물에 비하여 녹차:흑차 비율이 1:0, 1:3, 1:1, 3:1에서는 각각 -24.25, 64.72, 48.80 및 133.71% 증가하였다.

2-2. 세포 배양에 의한 니코틴 분해능력 측정

세포 배양을 이용한 니코틴 분해능 측정에 사용된 세포주는 간세포에서 유래한 Hep-G2 세포주를 사용하였으며, 일주일간 DMEM배지에 10% FBS, 1% penicillin/streptomycin.을 첨가하여 5% CO2배양기에서 배양한 간세포를 1 mM 니코틴이 함유되고 5% FBS가 첨가된 DMEM(Dulbecco's modifiedeagle medium) 배지에서 1일간 배양하였다. 그 다음, 배양된 세포에 시료를 1 mg/mL의 농도로 첨가하여 3시간 배양하였다. 배양 후, 배양액과 세포를 회수하여 코티닌을 정량하였다.

세포는 4℃에 보관된 인산염완충식염수(phosphate buffer saline; 이하, PBS)로 3 내지 4차례 세척한 후, 스크래퍼를 이용하여 세포를 수거하였다. 수거한 세포는 PBS 100 uL에 현탁하여 초음파 분쇄기를 이용하여 파쇄하였다. 파쇄한 세포 및 배양액에 대하여 코티닌 함량을 측정하여, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

녹차물추출물(%)	0	25	50	75	100
흑차물추출물(%)	100	75	50	25	0
코티닌 함량(ng/ml)	25.83	82.37	66.08	99.26	40.59
% vs 흑차	-	218.89	155.83	284.28	57.14
% vs 녹차	-36.36	102.93	62.80	144.54	-

표 2에서 확인할 수 있듯이, Hep-G2 세포주을 이용한 세포 배양 실험에서도 직접혼합법의 결과와 유사한 코티닌 생성 패턴이 관찰되었다. 기질실험(표1)에서와 마찬가지로 녹차 3:흑차 1의 배합비율에서 가장 높은 니코틴 분해능을 나타내었으며, 앞서 기질실험은 녹차,흑차 혼합물이 니코틴 분해에 직접 영향을 준다는 의미이며, 본 실험은 표 1과 비교 시 간세포의 detox 능력에 영향을 주어 간세포가 니코틴 분해를 촉진한다는 의미를 가진다.

아래 실험예 2를 통해 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물 섭취에 따른 니코틴 분해능력 변화를 살펴보도록 한다.

[실험예 2]

2-1. 대상자 선정 및 특징

본 실험의 대상자는 연구의 목적과 방법에 대해 자세한 설명과 자발적으로 참여하고자 하는 20세 이상 성인을 대상으로 하루 10 내지 20 개피의 담배를 1년 이상 지속적으로 이용한 사람을 대상자로 선정하였다. 집단 구성은 총 16명을 무작위로 각 집단 당 8명씩 두 집단(시험군 n=8, 위약대조군 n=8)으로 구성하였다. 대상자의 일반적 특성 및 하루 흡연량과 흡연특성은 하기 표 3 및 표 4에 나타난 바와 같다.

	신장	체중	나이	BMI
시험군(n=8)	177.88±4.55	77.13±8.58	36.75±6.36	24.30±1.64
위약대조군(n=8)	174.75±9.79	76.63±14.85	33.63±5.18	24.90±2.53

		시험군 n(%)	위약대조군 n(%)	χ²(p)
흡연량 (개비)	5 10 15 20 25 35	0(0.0) 2(25.0) 1(12.5) 4(50.0) 0(0.0) 1(12.5)	1(12.5) 2(25.5) 0(0.0) 4(50.0) 1(12.5) 0(0.0)	4.000(0.549)
흡연기간 (년)	4 5 8 10 12 14 15 20 21	0(0.0) 1(12.5) 1(12.5) 0(0.0) 1(12.5) 0(0.0) 2(25.0) 2(25.0) 1(12.5)	1(12.5) 0(0.0) 0(0.0) 1(12.5) 0(0.0) 2(25.0) 0(0.0) 4(50.0) 0(0.0)	10.667(0.221)

측정은 스크리닝 측정으로 대상자를 선정하였으며, 시험약인 녹차 및 흑차 혼합물은 하루 1회, 1000mg 섭취하게 하였다. 도 1에 나타낸 바와 같이 선정된 대상자를 대상으로 1차 측정 이후 일주일간 시험약 섭취 후 2차 측정이 진행 되었으며, 시험약 섭취를 중단한 후 일주일 후 3차 측정을 실시하였다. 스크리닝 방문을 포함하여 총 4회 측정으로 실험을 진행하였다. 실험제품구성 (실험제품에 대한 항목별 비율 산정범위)

항목	범위
카페인 (%)	<15
에피갈로카테킨 갈레이트(Epigallocatechin gallate, EGCG) (%)	6-14.6
폴리페놀 (%)	>36
총 카테킨 및 theaflavin (%)	>18

2-2. 분석항목 및 측정방법

니코틴은 소변으로 배설될 때 소변의 pH에 영향을 받으나, 코티닌은 소변 양과 pH에 영향을 거의 받지 않는다. 또한, 소변 중 코티닌 측정은 흔히 흡연 여부 평가에 이용되는 호기 중 일산화탄소 농도 검사와 비교해도 검체 채취 과정에서 대기 중 오염 가능성이 적고 민감도와 특이도가 높은 장점이 있어, 본 실험에서는 코티닌을 유효성 평가항목으로 분석 하였다. 코티닌은 혈액, 타액 및 소변에서 측정할 수 있으나, 비침습적이면서 쉽게 얻을 수 있는 피험자들의 측정 당일 기상 첫 소변을 시료를 ELISA kit을 사용하여, 소변 시료의 코티닌을 측정하였다.

2-3. 통계분석

수집된 자료는 SPSS(SPSS 21.0 for window, SPSS Inc., Chicago, IL., USA) 통계 프로그램을 이용하여 수집된 자료의 기술통계를 통해 평균과 표준편차를 산출하였다. 실험군과 대조군에 따른 섭취전과 섭취후의 상호작용 효과는 two way ANOVA를 사용하였다. 통계적 유의검증 수준은 p<0.05로 설정하였다.

2-4. 섭취 전 및 섭취 1주 후 코티닌 변화 측정 결과

도 2 및 표 6에서 확인할 수 있듯이, 본 인체적용시험에서 녹차 및 흑차 혼합물 섭취 전후에 따른 코티닌의 변화는 실시예의 경우 복용 전 (709.47±138.15ng/ml)에 비해 섭취 후(470.46±310.77ng/ml) 33.69%(39.01±278.34ng/ml) 유의한 감소가 확인되었다.

대조군의 경우는 제품 복용 전(653.60±169.85ng/ml)과 후(654.59±212.78ng/ml)에 평균적 변화차이가 없어, 녹차 및 흑차 혼합물 섭취 집단과 위약집단 간 섭취 전후의 코티닌의 변화경향의 유의한 차이로 상호작용 효과가 확인되었다(p=0.040).

	그룹	사전(n=8)	사후(n=8)	difference	t(p)	F(p)
		mean±SD	mean±SD	mean±SD
코티닌 (ng/ml)	시험군	709.47±138.15	470.46±310.77	-239.01±278.34	2.429(0.046)	5.110(0.040)
	위약대조군	653.60±169.85	654.59±212.78	1.00±111.72	-0.025(0.981)
	t(p)	0.722(0.482)	-1.383(0.188)

2-5. 섭취 1주 후 및 섭취 중단 1주간 코티닌 변화 측정 결과

도 3 및 표 7에서 확인할 수 있듯이, 본 인체적용시험에서 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물 섭취 1주 이후 중단 1주간 코티닌의 변화는 녹차와 흑차 섭취 1주 후(470.46±310.77ng/ml) 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물을 1주간(682.91±96.80ng/ml) 중단시킨 후 31%(212.45±270.34ng/ml)증가하였지만 통계적으로 유의한 차이는 없었다.

위약집단의 경우 섭취 중단 1주 전(654.59±212.78ng/ml)과 후(707.77±198.09ng/ml) 평균적으로 증가하였으나 통계적으로 유의한 변화는 없었다. 따라서 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물 섭취 중단 1주 전후 시험집단과 위약집단의 집단간 유의한 상호작용 효과는 없는 것으로 나타났다.

	그룹	섭취 1주 후(n=8)	중단 1주 후(n=8)	difference	t(p)	F(p)
		mean±SD	mean±SD	mean±SD
코티닌 (ng/ml)	시험군	470.46±310.77	682.91±96.80	212.45±270.34	-2.223(0.062)	2.259(0.155)
	대조군	654.59±212.78	707.77±198.09	53.17±129.45	-1.162(0.283)
	t(p)	-1.383(0.191)	-0.319(0.754)

2-6. 섭취 전, 섭취 1주 후 및 섭취 중단 1주 후 코티닌 변화 측정 결과

도 4 및 표 8에서 확인할 수 있듯이, 본 인체적용시험에서 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물 섭취 전, 섭취 1주 후 및 섭취 중단 1주 후의 코티닌의 변화결과 실시예는 섭취 전(709.47±138.15ng/ml), 섭취 후(470.46±310.77ng/ml) 및 중단 1주 후(682.91±96.80ng/ml)의 전체적인 경향이 섭취 전에 비해 섭취 후 감소하였다가 중단 1주 후 증가하는 경향을 보였으나, 대조군의 경우 섭취 전과 후 그리고 중단에 유의한 평균적 차이가 없는 것으로 나타나 집단과 반복간에 유의한 상호작용 효과가 확인되었다(p=0.044).

	그룹	섭취 전(n=8)	섭취 1주 후(n=8)	섭취 중단 1주 후(n=8)	F(p)
		mean±SD	mean±SD	mean±SD
코티닌 (ng/ml)	시험군	709.47±138.15	470.46±310.77	682.91±96.80	5.007(0.014)
	대조군	653.60±169.85	654.59±212.78	707.77±198.09
	t(p)	0.722(0.482)	-1.383(0.188)	-0.319(0.754)

[실험 결과]

시험군(녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물)와 대조군의 1주간 투여와 투여 중단 1주 후 체내 니코틴 분해에 미치는 영향을 비교 평가한 결과, 1) 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물을 1주간 섭취시켰을 때 코티닌의 배출이 대조군에 비해 유의하게 감소하였으며(p=0.040), 2) 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물을 1주간 섭취 시킨 후 중단 1주간 코티닌의 변화를 관찰한 결과 유의한 증가가 나타나지 않아(p=0.062) 섭취 후 1주간의 효능의 지속성의 개연성을 확인하였다. 따라서, 흡연자들이 녹차 추출물 및 흑차 추출물의 혼합물을 하루 1000mg 섭취하는 경우 체내 니코틴 분해능을 증가시킬 수 있는 것을 확인하였다.

본 발명은 상기의 상세한 설명에서 언급되는 형태로만 한정되는 것은 아님을 잘 이해할 수 있을 것이다. 따라서 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 특허청구범위의 기술적 사상에 의해 정해져야 할 것이다. 또한, 본 발명은 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 정신 그 범위 내에 있는 모든 변형물과 균등물 및 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

Claims (7)

1. 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하되,
   상기 녹차 추출물과 흑차 추출물의 중량비는 3:1 내지 1:3인 것을 특징으로 하는 니코틴 해독용 조성물.
   
2. 삭제
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 삭제
7. 녹차 추출물을 제조하는 단계와, 흑차 추출물을 제조하는 단계와;
   상기 녹차 추출물과 흑차 추출물을 3:1 내지 1:3의 중량비로 혼합하는 단계;
   를 포함하는 것을 특징으로 하는 니코틴 해독용 조성물 제조방법.

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