KR102297398B1 - 맥문동 추출물, 감초 추출물 및 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물 - Google Patents

맥문동 추출물, 감초 추출물 및 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 맥문동 추출물, 감초 추출물 및 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로, 본 발명에 따른 조성물은 미세먼지로 유발되는 기관지 염증 질환에 대한 개선용 건강 기능 식품에 포함될 수 있는 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 맥문동, 감초 및 아로니아를 포함하는 혼합물을 추출한 혼합된 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물은, 미세먼지에 의해 유발되는 폐의 염증을 완화시켜주며, 안정성이 뛰어나면서도 경제성이 있는 천연 기능성 소재로서, 의약품, 식품 분야에서의 소재로 활용이 가능하다.

Description

맥문동 추출물, 감초 추출물 및 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물{Composition for health food for improving of respiratory diseases caused by fine dust comprising extract of Liriope platyphylla, Glycyrrhiza uralensis and Aronia as an effective component}
본 발명은 맥문동 추출물, 감초 추출물 및 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로, 본 발명에 따른 조성물은 미세먼지로 유발되는 호흡기 질환 중 기관지 염증 질환에 대한 개선용 건강 기능 식품에 포함될 수 있는 조성물에 관한 것이다.
미세먼지(Particulate Matter, PM)란 공기 중 장기간 떠다니는 미세한 먼지를 말하며, 입경 2.5 ㎛ 이하의 크기는 초미세먼지로 분류된다. 지난 수십 년간 우리나라의 급격한 산업화 및 공업화로 인해 환경이 지속적으로 악화되어 왔으며, 최근 중국의 높은 석탄 의존도와 급격한 경제 성장과 더불어 스모그 현상이 지속적으로 증가하여 미세먼지의 발생이 빈번해지고 있다. 황산화물, 질소산화물, 납 등의 유해물질들이 포함된 미세먼지는 호흡기 및 피부를 통해 인체 내에 침투할 수 있으며, 폐기능 감소, 천식 악화, 만성기관지염 발생 등 호흡기계 관련 질환을 야기하며, 심근경색, 협심증, 부정맥 등 심혈관계 관련 질환의 발생을 증가시키는 것으로 알려져 있다(김오식 외, 2009, ReSEAT 분석보고서).
미세먼지에 포함된 다환방향족탄화수소(polycyclic aromatic hydrocarbon, PAH)는 세포 내로 침투되어 공통적으로 아릴 하이드로카본 수용체(Aryl hydrocarbon receptor; AhR)를 활성화 시키는 것으로 알려져 있다. AhR 활성화 기전을 통해 세포 내 활성 산소종(Reactive oxygen species; ROS)이 증가되고, 다양한 염증 매개 인자의 발현을 증가시켜 호흡기 질환을 일으키게 된다.
전세계적으로 미세먼지에 대한 호흡기 질환의 증가에 따라 세계보건기구(WHO)에서는 2013년 1군 발암물질로 분류하였으며, 우리나라도 그에 맞게 미세먼지 저감 방안 및 치료제 개발이 절실한 상황이다. 대부분의 호흡기 질환 치료제는 단일 성분의 합성 의약품으로, 미세먼지의 경우 종래 성분들이 지역적, 계절적, 시기적, 기후 환경적인 영향에 따라 달라지므로, 다양한 병리 기전에 대한 효과적인 치료가 어렵다는 문제점이 있다. 따라서 미세먼지의 발생빈도가 점차 증가되고 있는 사회적 현상으로 인해 치료제 개발 및 연구가 중요하다고 할 수 있다.
한편, 맥문동(Liriope platyphylla)은 음지 습한 곳에서 잘 자라고, 7월에 보라색의 꽃이 피어 10월에는 검은색 열매를 맺는 백합과에 속하는 다년생 초본식물로서, 맥문동의 효능으로 혈당강하작용, 항염증작용, 항부정맥효과, 항암작용 등이 있는 것으로 보고된 바 있다. 또한 맥문동의 주된 유효성분으로 steroid계 saponin인 ophiopogenine A, B, methylophiopogonone A, B, ophiopogonanone A, methylophiopoginanone A, B 등의 homo-isoflavonid류가 함유되어있으며, 그 외 β-sitosterol, stigmasterol, β-sitosterol glucoside, oligosaccarides 등의 다양한 polysaccharides가 괴근의 약 60%이상 함유되어 있는 것으로 보고된 바 있다.
또한 맥문동 추출물 이외의 천연물의 유익한 성분들을 이용하여 기능성식품 등을 제공함으로써 사회적인 문제로 부상되고 있는 미세먼지에 의해 야기되는 호흡기 질환을 예방 및 치료할 필요성이 있다.
대한민국 공개특허 제10-2018-0091311호 (2018.08.16 공개)
본 발명은 맥문동 추출물, 감초 추출물 및 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물을 제공한다.
상기 언급한 과제 해결을 위하여,
본 발명은, 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물에 있어서,
상기 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물은, 맥문동, 감초 및 아로니아를 각각 건조하여 분쇄한 파우더를 각각 20g씩 혼합한 후, 70% 에탄올을 600㎖ 투입하고 100℃로 6시간 동안 가온 추출한 추출액을 여과, 감압 및 농축하여 상기 투입된 에탄올을 제거 및 동결 건조하여 35%의 수율로 수득한 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물로서, NO 생성을 억제하고, 염증성 사이토카인 IL-8과 TNF-α 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물을 제공한다.
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본 발명에 따르면, 맥문동, 감초 및 아로니아를 포함하는 혼합물을 추출한 혼합된 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물은, 미세먼지에 의해 유발되는 폐의 염증을 완화시켜주며, 안정성이 뛰어나면서도 경제성이 있는 천연 기능성 소재로서, 의약품, 식품 분야에서의 소재로 활용이 가능하다.
도 1은 맥문동 추출물, 감초 추출물, 아로니아 추출물, 맥문동과 감초 혼합 추출물, 맥문동과 아로니아 혼합 추출물, 감초와 아로니아 혼합 추출물, 맥문동과 감초 및 아로니아 혼합 추출물의 PM2.5에 의해 유발된 NO 생성을 억제하는 효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 맥문동 추출물, 감초 추출물, 아로니아 추출물, 맥문동과 감초 혼합 추출물, 맥문동과 아로니아 혼합 추출물, 감초와 아로니아 혼합 추출물, 맥문동과 감초 및 아로니아 혼합 추출물의 PM2.5에 의해 유발된 NO 생성을 억제하는 효과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 맥문동 추출물, 감초 추출물, 아로니아 추출물, 맥문동과 감초 혼합 추출물, 맥문동과 아로니아 혼합 추출물, 감초와 아로니아 혼합 추출물, 맥문동과 감초 및 아로니아 혼합 추출물의 PM2.5에 의해 유발된 TNF-α 생성을 억제하는 효과를 나타낸 그래프이다.
본 발명은, 일면에 있어서, 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물을 포함하는 건강 식품용 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명에 따른 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물을 포함하는 건강 식품용 조성물을 더욱 상세히 설명한다.
상기 맥문동(Liriope platyphylla)은 그늘지고 물기가 많은 숲속이나 산기슭에 자라는 상록성 여러해살이풀이다. 맥문동의 근연식물로는 소엽맥문동(Ophiopogon japonicus), 개맥문동(Liriope spicata) 등이 있다. 한방에서는 마른기침, 각혈, 가래 등에 사용된다.
상기 감초(Glycyrrhiza uralensis)는 콩과에 속하는 여러해살이풀로 중국 북동부와 시베리아, 몽골, 중국 북부 등지에 분포한다. 뿌리는 건조시켜서 한약재로 사용하는데, 그 맛이 달고, 모든 약물과 배합이 잘 되어 중화작용을 한다.
상기 아로니아(Aronia)는 장미과의 속이다. 아로니아(영어: aronia) 또는 초크베리(영어: chokeberry)라 불리는 열매를 식용 또는 약용으로 사용하며 식용 색소의 원료로 쓰이기도 하고 관상용으로도 역시 재배된다. 탄닌 성분이 많아 바로 수확한 것은 떫은 맛이 있으나, 안토시아닌이 다량 함유되어 있어 항산화 작용이 작하며 노화를 방지할 뿐만 아니라 항암효과에도 좋은 것으로 알려져 있다.
상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득할 수 있으며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올일 수 있고, 보다 구체적으로 에탄올일 수 있다.
본 발명에 대한 맥문동과 감초 및 아로니아의 복합 추출물은 후술하는 시험예에서 확인되는 바와 같이 미세먼지에 의한 NO 생성 억제율 시험에서 30.1%까지 억제하였고, 미세먼지 자극에 의한 폐조직내 염증성 Cytokine인 IL-8의 발현양의 증가를 크게 감소시켰다. 또한, TNF-α의 생성 억제율이 20.8%까지 억제하였다.
본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 맥문동 유효성분을 포함한 천연물 추출물을 유효성분으로 하는 미세먼지 관련 기관지 염증 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 천연물 추출물을 조성물 총 100 중량부에 대하여 0.01 내지 100 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아님을 명시한다.
하나의 예시에서, 본 발명의 조성물이 약학 조성물로 활용될 경우, 투여를 위하여, 상기 기재한 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
상기 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 상세하게는 제형화할 경우 통상 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형 제제로는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 고형 제제는 상기 유효성분 외에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 첨가하여 조제될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 과제를 포함한다. 비수성 용제 및 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로솔, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약학 조성물의 적합한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 시간에 따라 다르지만, 당 업자에 의해 적절하게 선택될 수 있는 바, 상기 조성물의 일일 투여량은 바람직하게는 0.001 mg/kg 내지 50 mg/kg이며, 필요에 따라 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
또한, 본 발명은 특정 추출 방법으로 제조된 맥문동 추출물, 감초 추출물 및 아로니아 추출물을 유효성분을 포함한 천연물 추출물을 유효성분으로서 포함하는 미세먼지 관련 호흡기 질환의 개선용 식품 조성물을 제공한다.
상기 천연물 추출물을 조성물 총 100 중량부에 대하여 0.01 내지 100 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아님을 명시한다.
본 발명의 조성물이 건강 기능 식품 조성물인 경우, 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일 주스, 합성 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 또한, 건강 기능 식품 조성물은 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 기능수, 드링크제, 알코올 및 비타민 복합제 중 어느 하나의 형태일 수 있다.
또한, 상기 건강 기능 식품 조성물은 식품 첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전처에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반 시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
상기 식품첨가물공전에 수재된 품목으로 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산 칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성품, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고랭색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류 첨가 알칼리제, 보존료제제, 타르색소 제제 등의 혼합 제제류 등을 들 수 있다.
이때, 건강 기능 식품 조성물을 제조하는 과정에서 식품에 첨가되는 본 발명에 따른 조성물은 필요에 따라 그 함량을 적절히 가감할 수 있다.
이하에서는 실시예 등을 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예 1: 맥문동과 감초 및 아로니아 혼합 추출물의 제조
건조 분쇄된 맥문동과 감초 및 아로니아 각각 20g 혼합한 후, 각각 정제수와 에탄올의 부피비 30:70으로 혼합한 70% 에탄올을 600 ml 가하고 100℃로 6시간 동안 가온추출하였다. 추출액을 여과하고 감압농축하여 에탄올을 제거한 다음 동결건조하여 맥문동과 감초 및 아로니아 혼합 추출물 35%의 수율로 수득하였다.
비교예 1: 맥문동 추출물의 제조
건조 분쇄된 맥문동 60g을 각각 정제수와 에탄올의 부피비 30:70으로 혼합한 70% 에탄올을 600 ml 가하고 100℃로 6시간 동안 가온추출하였다. 추출액을 여과하고 감압농축하여 에탄올을 제거한 다음 동결건조하여 맥문동 추출물 32%의 수율로 수득하였다.
비교예 2: 감초 추출물의 제조
건조 분쇄된 감초 60g을 각각 정제수와 에탄올의 부피비 30:70으로 혼합한 70% 에탄올을 600 ml 가하고 100℃로 6시간 동안 가온추출하였다. 추출액을 여과하고 감압농축하여 에탄올을 제거한 다음 동결건조하여 감초 추출물 33%의 수율로 수득하였다.
비교예 3: 아로니아 추출물의 제조
건조 분쇄된 아로니아 60g을 각각 정제수와 에탄올의 부피비 30:70으로 혼합한 70% 에탄올을 600 ml 가하고 100℃로 6시간 동안 가온추출하였다. 추출액을 여과하고 감압농축하여 에탄올을 제거한 다음 동결건조하여 아로니아 추출물 35%의 수율로 수득하였다.
비교예 4: 맥문동 및 감초 혼합 추출물의 제조
건조 분쇄된 맥문동 및 감초(중량비 1:1로 혼합) 60g을 각각 정제수와 에탄올의 부피비 30:70으로 혼합한 70% 에탄올을 600 ml 가하고 100℃로 6시간 동안 가온추출하였다. 추출액을 여과하고 감압농축하여 에탄올을 제거한 다음 동결건조하여 맥문동 및 감초 혼합 추출물 33%의 수율로 수득하였다.
비교예 5: 맥문동 및 아로니아 혼합 추출물의 제조
건조 분쇄된 맥문동 및 아로니아(중량비 1:1로 혼합) 60g을 각각 정제수와 에탄올의 부피비 30:70으로 혼합한 70% 에탄올을 600 ml 가하고 100℃로 6시간 동안 가온추출하였다. 추출액을 여과하고 감압농축하여 에탄올을 제거한 다음 동결건조하여 맥문동 및 아로니아 혼합 추출물 34%의 수율로 수득하였다.
비교예 6: 감초 및 아로니아 혼합 추출물의 제조
건조 분쇄된 감초 및 아로니아(중량비 1:1로 혼합) 60g을 각각 정제수와 에탄올의 부피비 30:70으로 혼합한 70% 에탄올을 600 ml 가하고 100℃로 6시간 동안 가온추출하였다. 추출액을 여과하고 감압농축하여 에탄올을 제거한 다음 동결건조하여 감초 및 아로니아 혼합 추출물 34%의 수율로 수득하였다.
시험예 1: 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물의 세포독성 확인
맥문동과 감초 및 아로니아 추출물이 세포독성이 있는지 여부를 확인하기 위하여 다음과 같은 방법으로 실험하였다. Raw 264.7 cell 및 B2B(BEAS-2B) cell을 6.0 x 104 cells/well로 분주한 후 24시간 동안 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 실시예 1과 비교예 1 내지 6의 추출물을 50~1,000 ㎍/ml의 농도로 처리하고 24시간 후 MTT 용액을 가하고 37℃에서 4시간 더 배양하여 생성된 formazan이 배지에 떨어져 나가지 않도록 배지를 제거하고 DMSO 100 ㎕ 분주하여 10분 동안 혼합한 후 540 nm에서 흡광도를 측정함으로써 세포 생존율을 확인하였으며, 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물에 대한 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
하기 표 1 내지 표 7에 나타난 바와 같이, 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물은 50 내지 400(㎍/ml)에서 세포 독성이 나타나지 않음을 확인하였다.
샘플농도 (㎍/ml) Raw 264.7 세포 생존율 (%) B2B 세포 생존율 (%)
실시예 1 Control 100.0 ± 1.4 100.0 ± 1.1
50 99.7 ± 2.7 101.4 ± 0.7
100 98.8 ± 3.2 97.5 ± 3.3
200 98.6 ± 1.3 98.1 ± 1.7
400 91.5 ± 3.4 97.1 ± 1.9
800 81.3 ± 1.7 84.6 ± 2.6
1,000 47.2 ± 4.2 67.4 ± 2.0
샘플농도 (㎍/ml) Raw 264.7 세포 생존율 (%) B2B 세포 생존율 (%)
비교예 1 Control 100.0 ± 1.4 100.0 ± 1.1
50 99.1 ± 1.2 97.8 ± 2.2
100 99.5 ± 2.4 97.1 ± 1.4
200 97.1 ± 3.8 93.9 ± 1.6
400 94.5 ± 2.1 92.5 ± 0.9
800 82.1 ± 2.2 83.0 ± 1.2
1,000 42.2 ± 3.6 57.3 ± 2.3
샘플농도 (㎍/ml) Raw 264.7 세포 생존율 (%) B2B 세포 생존율 (%)
비교예 2 Control 100.0 ± 1.4 100.0 ± 1.1
50 101.2 ± 1.6 99.9 ± 2.9
100 98.0 ± 2.4 97.5 ± 3.1
200 96.4 ± 1.1 98.1 ± 3.3
400 92.8 ± 3.1 96.2 ± 1.4
800 76.5 ± 2.6 81.5 ± 2.3
1,000 51.4 ± 1.9 67.2 ± 2.8
샘플농도 (㎍/ml) Raw 264.7 세포 생존율 (%) B2B 세포 생존율 (%)
비교예 3 Control 100.0 ± 1.4 100.0 ± 1.1
50 99.1 ± 1.7 102.4 ± 2.3
100 97.8 ± 3.3 99.2 ± 2.3
200 92.6 ± 3.1 95.1 ± 0.7
400 91.4 ± 1.0 93.8 ± 1.3
800 80.3 ± 2.2 77.6 ± 1.3
1,000 53.6 ± 3.4 61.3 ± 1.4
샘플농도 (㎍/ml) Raw 264.7 세포 생존율 (%) B2B 세포 생존율 (%)
비교예 4 Control 100.0 ± 1.4 100.0 ± 1.1
50 102.1 ± 1.3 99.7 ± 2.3
100 98.9 ± 2.6 95.8 ± 1.8
200 94.6 ± 2.8 93.9 ± 1.6
400 89.9 ± 1.0 90.6 ± 2.4
800 77.6 ± 2.1 68.9 ± 1.1
1,000 48.3 ± 1.4 51.1 ± 2.9
샘플농도 (㎍/ml) Raw 264.7 세포 생존율 (%) B2B 세포 생존율 (%)
비교예 5 Control 100.0 ± 1.4 100.0 ± 1.1
50 99.8 ± 1.7 100.7 ± 2.0
100 97.1 ± 0.6 98.7 ± 2.9
200 95.2 ± 2.6 96.8 ± 1.6
400 93.0 ± 1.9 94.7 ± 2.2
800 68.9 ± 1.0 67.8 ± 2.8
1,000 55.2 ± 2.4 48.5 ± 3.8
샘플농도 (㎍/ml) Raw 264.7 세포 생존율 (%) B2B 세포 생존율 (%)
비교예 6 Control 100.0 ± 1.4 100.0 ± 1.1
50 102.0 ± 1.7 99.0 ± 2.9
100 97.6 ± 1.8 96.6 ± 2.1
200 95.0 ± 2.7 94.4 ± 1.0
400 90.7 ± 1.7 94.5 ± 3.1
800 72.1 ± 3.1 68.2 ± 2.4
1,000 48.5 ± 2.7 51.3 ± 2.2
시험예 2: 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물의 NO 생성 억제능 평가
상기 시험예 1에서 확인한 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물을 세포독성이 없는 농도인 100~400 ㎍/ml로 처리하여 NO 생성능 억제능을 다음과 같은 방법으로 평가하였다.
Raw 264.7 cell을 96 well plate에 6 x 104 cells/well로 분주한 후, 24시간 동안 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물을 100, 200, 400 ㎍/ml의 농도로 처리하고 미세먼지 표준품을 처리한 후, 다시 24시간 동안 배양하였다. 그 후 세포 배양액을 Griess reagent와 1:1로 혼합하고 540 nm에서 흡광도를 측정하여 NO 생성을 측정하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물은 농도 의존적으로 NO 생성 억제 효과를 나타내었고, 하나의 추출물만 처리하였을 때보다 혼합 추출물이 더 우수한 NO 생성 억제 효과를 나타내었다.
시험예 3: 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물의 IL-8 생성 억제능 평가
상기 시험예 1에서 확인한 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물을 세포독성이 없는 농도인 100~400 ㎍/ml로 처리하여 IL-8 생성 억제능을 다음과 같은 방법으로 평가하였다.
96 well plate에 B2B cell을 6 x 104 cells/well로 분주한 후, 24시간 동안 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물을 100, 200, 400 ㎍/ml의 농도로 처리하고 미세먼지 표준품을 처리한 후, 다시 24시간 동안 배양하였다. 그 후 세포 배양액을 취하여 IL-8의 정량에 대한 ELISA kit를 이용하여 정량하였으며, 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물에 대한 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물은 농도 의존적으로 IL-8 생성 억제효과를 나타내었고, 하나의 추출물만 처리하였을 때보다 혼합 추출물이 더 우수한 억제 효과를 나타내었다.
시험예 4: 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물의 TNF-α 생성 억제능 평가
상기 시험예 1에서 확인한 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물을 세포독성이 없는 농도인 100~400 ㎍/ml로 처리하여 TNF-α 생성 억제능을 다음과 같은 방법으로 평가하였다.
96 well plate에 B2B cell을 6 x 104 cells/well로 분주한 후, 24시간 동안 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물을 100, 200, 400 ㎍/ml의 농도로 처리하고 미세먼지 표준품을 처리한 후, 다시 24시간 동안 배양하였다. 그 후 세포 배양액을 취하여 TNF-α의 정량에 대한 ELISA kit를 이용하여 정량하였으며, 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물에 대한 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 맥문동과 감초 및 아로니아 추출물은 농도 의존적으로 TNF-α 생성 억제효과를 나타내었고, 하나의 추출물만 처리하였을 때보다 혼합 추출물이 더 우수한 억제 효과를 나타내었다.

Claims (7)

  1. 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물에 있어서,
    상기 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물은, 맥문동, 감초 및 아로니아를 각각 건조하여 분쇄한 파우더를 각각 20g씩 혼합한 후, 70% 에탄올을 600㎖ 투입하고 100℃로 6시간 동안 가온 추출한 추출액을 여과, 감압 및 농축하여 상기 투입된 에탄올을 제거 및 동결 건조하여 35%의 수율로 수득한 맥문동(Liriope platyphylla) 추출물, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 아로니아(Aronia) 추출물의 혼합된 추출물로서, NO 생성을 억제하고, 염증성 사이토카인 IL-8과 TNF-α 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 미세먼지에 의한 기관지 염증 질환의 개선용 건강 기능 식품 조성물.





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KR101756284B1 (ko) * 2016-04-01 2017-07-26 중부대학교 산학협력단 백삼복합방 추출물을 함유하는 염증성 질환 개선용 조성물
KR20180091311A (ko) 2017-02-06 2018-08-16 주식회사 한국인삼공사 홍삼 추출물을 함유하는 호흡기 증상 개선용 조성물

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