KR101888549B1 - 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료 및 그 제조방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 굼벵이를 주원료로 하여 늙은 호박 추출액, 구기자 추출액, 백복령 추출액, 차전자 추출액, 당귀 추출액 및 칡 추출액을 조성 비율에 따라 일정량씩 조합한 혼합 추출액을 키토산으로 표면코팅하여 집적화(self-aggregation)함으로써 굼벵이 특유의 역겨운 냄새를 없애고, 음용하기에 편리하며, 세포독성이 없으며, 생체 이용율이 향상되며, 항균활성이 우수할 뿐만 아니라, 혈중 콜레스테롤 및 중성지질 저하 효과가 우수한 다이어트 음료에 응용할 수 있다.
본 발명에 따른 실시예에서 마우스를 이용한 효율성 실험을 통하여, 혈장 중성지질, 혈장 콜레스테롤, 부고환 신장 조직의 중성지질, 신장 조직의 중성지질 및 간조직에서의 콜레스테롤 감소에 우수한 효과가 있음을 확인하여, 고콜레스테롤혈증, 고지혈증 또는 이들의 합병증으로서 관상 동맥 질환, 협심증, 경동맥 질환, 뇌졸증, 뇌동맥경화증, 콜레스테롤 담석, 제Ⅱ형 당뇨병, 지질 이상증, 비만 및 만성 염증성 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환의 개선 또는 예방이 가능한 다이어트 음료임을 입증하였다.

Description

굼벵이를 함유하는 다이어트 음료 및 그 제조방법{Diet beverage comprising white grup and preparation method thereof}
본 발명은 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 굼벵이를 주원료로 하여 늙은 호박 추출액, 구기자 추출액, 백복령 추출액, 차전자 추출액, 당귀 추출액 및 칡 추출액을 조성 비율에 따라 일정량씩 조합한 혼합 추출액을 키토산으로 표면코팅하여 집적화(self-aggregation)함으로써 굼벵이 특유의 역겨운 냄새를 없애고, 음용하기에 편리하며, 세포독성이 없으며, 생체 이용율이 향상되며, 항균활성이 우수할 뿐만 아니라, 혈중 콜레스테롤 및 중성지질 저하 효과가 우수한 다이어트 음료로 응용하는 기술에 관한 것이다.
비만은 그 자체로서도 위험하지만 동반되는 호흡장애, 심장질환, 동맥경화, 암 등의 합병증을 유발하여 현대인의 식이관리로서도 관리와 치료에 매우 중요하다. 현재 우리나라는 비만 치료제로서 식욕억제제의 일종인 시부트라민(sibutramine)과 지방흡수억제제인 올리스탄트(orlistant)를 사용하고 있는데 이는 혈압을 높이고, 심장박동을 빠르게 하여 관련 질환을 가지고 있는 사람에게는 주의를 요하는 부작용을 보이고 있다. 그러므로 천연물을 활용한 비만제어와 다이어트 관련 연구는 농산업의 발달과 함께 자원이 빈약한 우리나라의 전통적 한의학의 융합 기술이 접목되면 발전가능성은 물론 세계적 경쟁성도 가질 수 있는 분야로 필요성이 크다고 본다.
한편, 굼벵이(학명: Protaetia brevitarsis seulensis (Kolbe))는 흰점박이꽃무지 풍뎅이류에 속하는 애벌레(grub worm)를 지칭하며, 이것의 생약적 성질은 약간 차고 맛은 짜며 주로 악혈(惡血 나쁜 피), 어혈(血瘀 뭉친 피), 비기(痺氣 저리는 증세), 눈의 군살, 눈을 뜨고도 못보는 증세, 백막(白膜 눈동자에 하얀 것이 낌), 뼈가 부러지거나 부스러지거나 삔데, 쇠에 다쳐 속이 막힌 증세 등을 치료하며 젖을 잘나오게 한다고 우리나라 전통 의학서인 동의보감(東醫寶鑑)에 소개된 약재이며, 2014년 경기도 농업기술원에서 발표한 흰점박이꽃무지 유충(굼벵이)를 Rat을 상대로 3주간 개선 효과를 확인 발표한바 간기능을 실험한 결과 활성산소 제거 성분은 33.1%, 간 해독작용을 하는 총 글루타치온 함량은 51.2%, 간 손상 시 발생하는 효소 함량은 36.0~44.1% 낮아졌고, 중성지방 23.4%, 총콜레스테롤 18.4%, 동맥경화지수는 58.7%가 각각 낮아진 것으로 확인됐다.
상기와 같이 굼벵이 관련 특허에는 꽃무지 유충(굼벵이) 유래 단백질원을 등록특허 제10-1359507호 식용 흰점박이꽃무지 유충 분말의 제조 방법, 등록특허 제10-1491771호 흰점박이꽃무지 현탁액의 제조방법 및 이를 포함하는 항비만 조성물, 등록특허 제10-1382400호 흰점박이꽃무지를 유효성분으로 포함하는 염증성질환의 예방 및 치료용조성물, 등록특허 제 10-1474900호 굼벵이를 주원료로 하는 스낵의 제조방법, 등록특허 제10-1616688호 굼벵이를 이용한 기능성식품 제조방법, 등록특허 제10-1349136호 곤충 글라이코사미노글리칸을 유효성분으로 포함하는 지방간 또는 고지혈증 예방 또는 치료용 조성물, 등록특허 제10-1622784 식용곤충을 이용한 다이어트 에너지바 및 그 제조방법, 등록특허 제 10-1493916호 곤충의 식용화 방법, 그 식용화된 곤충, 이러한 식용화된 곤충을 이용한 식품용 반죽의 제조방법 등 식품과 기능성으로서 연구되고 있다.
한편, 키토산(Chitosan)은 곤충 및 갑각류의 껍질인 새우, 게와 버섯 등에 키틴질로 존재하고 있으며 화학명이 Poly (1→4) 2-amino-2-deoxy-β-D-Glucan이다. 키틴질은 유효 이용율이 적어, 주로 수용화하거나, 발효시키거나, 다른 유도체로 제조하여 다양한 범위에 활용하고 있다. 키토산의 특성은 항산화력과 항균력, 콜레스테롤 조절, 지방흡착, 전달 기능이 이미 알려진 생체재료로서 제약과 식품, 화장품분야, 생활용품분야에서 우수성이 알려져 있어 천연 생체재로서 다양하게 이용되고 있다.
약재 발효키토산 관련 특허에는 등록특허 제10-1564668호 본초 발효 키토산의 제조방법과 그 이용, 등록특허 제10-1659927호　본초의 약효 증대방법, 면역증강용 발효 키토산의 제조방법, 및 그 이용 및 등록특허 제10-0735675호 저분자량 및 친수성을 높여 콜라겐의 유효 이용율을 향상시키기 위한 제조방법이 있다.
최근에는 웰빙, 건강, 다이어트, 전통 등을 결합한 다양한 건강 음료가 인기를 얻으며 음료 및 외식업계의 관련 제품 출시경쟁이 치열하다. 이에 따라 굼벵이 또는 키토산을 이용한 건강 제품이 다수 개발되어 출시되고 있지만, 굼벵이 특유의 역한 냄새가 제거되지 못하고 관능 기호도가 낮아 소비자들의 욕구를 만족시키지 못한 문제가 있으며, 생체 이용율, 항균 활성 및 내장지방과 콜레스테롤 저하 효과는 미비한 있는 실정이다.
따라서, 굼벵이 특유의 냄새가 제거되고 관능 기호도가 우수하여 소비자의 욕구를 만족시킬 수 있으며, 생체 이용율, 항균 활성 및 내장지방과 콜레스테롤 저하 효과가 우수한 굼벵이 함유 다이어트 음료가 요구되고 있다.
1. 한국등록특허 제10-1359507호 2. 한국등록특허 제10-1491771호 3. 한국등록특허 제10-1382400호 4. 한국등록특허 제10-1564668호 5. 한국등록특허 제10-1659927호 6. 한국등록특허 제10-0735675호 7. 미국등록특허 제6,521,268호
1. Rolls B.J et al., Obes. Res. 6: 1-11, 1988 2. Hansen D.L. et al., Am. J. Clin. Nutr. 68: 1180-1186, 1998 3. 중소기업기술혁신개발사업과제: 연구책임자 유향자 "대체의약소재개발(Netraceuticals peptide 결합 glucan 천연 면역강화소재의 개발"- (2001. 5 ~ 2002. 4) 4. SangBong Seo, "A Study on the Development of Novel Water-soluble Chitosan and Its Applications to Environment, Fine Chemicals and Medical Use" Tokyo Institute of Technology (2003) 5. Hyung-Min Kim, SangBong Seo et.al"Nitric oxide production by high molecular weight water-soluble chitosan via nuclear factor-kB activation" International Journal of Immunopharmacology 22 (2000) 923-933
본 발명은 상기와 같은 문제점을 고려하여 안출된 것으로, 본 발명의 목적은 굼벵이를 주원료로 하여, 굼벵이 특유의 역겨운 냄새를 없애고, 음용하기에 편리하며, 세포독성이 없으며, 생체 이용율이 향상되며, 항균활성이 우수할 뿐만 아니라, 혈중 콜레스테롤 및 중성지질 저하 효과가 우수한 다이어트 음료를 제공하고자 하는 것이다.
상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명은, 굼벵이 추출액 10 내지 50 중량%, 늙은 호박 추출액 5 내지 30 중량%, 구기자 추출액 3 내지 20 중량%, 백복령 추출액 5 내지 20 중량%, 차전자 추출액 5 내지 30 중량%, 칡 추출액 3 내지 10 중량% 및 당귀 추출액 5 내지 20 중량%를 함유하는 혼합 추출액; 및 상기 혼합 추출액 전체 중량에 대해 0.5 내지 10 중량%의 키토산;을 포함하는 것을 특징으로 하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료를 제공한다.
상기 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료는 고콜레스테롤혈증, 고지혈증 또는 이들의 합병증으로서 관상 동맥 질환, 협심증, 경동맥 질환, 뇌졸증, 뇌동맥경화증, 콜레스테롤 담석, 제Ⅱ형 당뇨병, 지질 이상증, 비만 및 만성 염증성 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환의 개선 또는 예방이 가능할 수 있다.
또한, 본 발명은 (a) 굼벵이 추출액 10 내지 50 중량%, 늙은 호박 추출액 5 내지 30 중량%, 구기자 추출액 3 내지 20 중량%, 백복령 추출액 5 내지 20 중량%, 차전자 추출액 5 내지 30 중량%, 칡 추출액 3 내지 10 중량% 및 당귀 추출액 5 내지 20 중량%를 혼합하여 혼합 추출액을 수득하는 단계; 및 (b) 상기 혼합 추출액 전체 중량에 대해 0.5 내지 10 중량%의 키토산을 혼합하여 혼합액을 수득하는 단계;를 포함하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 제조방법을 제공한다.
상기 굼벵이 추출액은, 고압멸균 및 동결건조된 굼벵이에 물을 6 내지 15 배 중량으로 혼합한 혼합물을 80 내지 150 ℃에서 8 내지 20 시간 동안 증류 추출하여 제조될 수 있다.
상기 늙은 호박 추출액, 구기자 추출액, 백복령 추출액, 차전자 추출액, 칡 추출액 및 당귀 추출액 각각은, 늙은 호박, 구기자, 백복령, 차전자, 칡 또는 당귀에 물을 25 내지 50 배 중량으로 혼합한 혼합물을 80 내지 150 ℃에서 8 내지 20 시간 동안 증류 추출하여 제조될 수 있다.
상기 (b) 단계는 질소 분위기 및 60 내지 120 ℃ 조건에서 3000 내지 5000 RPM으로 교반하여 수행될 수 있다.
상기 제조방법은 (c) 상기 혼합액 및 한천을 혼합하여 겔상화 한 후 살균하는 단계;를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명에 따르면, 굼벵이를 주원료로 하여 늙은 호박 추출액, 구기자 추출액, 백복령 추출액, 차전자 추출액, 당귀 추출액 및 칡 추출액을 조성 비율에 따라 일정량씩 조합한 혼합 추출액을 키토산으로 표면코팅하여 집적화(self-aggregation)함으로써 굼벵이 특유의 역겨운 냄새를 없애고, 음용하기에 편리하며, 세포독성이 없으며, 생체 이용율이 향상되며, 항균활성이 우수할 뿐만 아니라, 혈중 콜레스테롤 및 중성지질 저하 효과가 우수한 다이어트 음료를 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예 1로부터 제조된 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 (a) 투과전자현미경(TEM) 이미지 및 (b) 직접화(self-aggregation)된 입자 모식도이다.
이하에서, 본 발명의 여러 측면 및 다양한 구현예에 대해 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명은 굼벵이 추출액 10 내지 50 중량%, 늙은 호박 추출액 5 내지 30 중량%, 구기자 추출액 3 내지 20 중량%, 백복령 추출액 5 내지 20 중량%, 차전자 추출액 5 내지 30 중량%, 칡 추출액 3 내지 10 중량% 및 당귀 추출액 5 내지 20 중량%를 함유하는 혼합 추출액; 및 상기 혼합 추출액 전체 중량에 대해 0.5 내지 10 중량%의 키토산;을 포함하는 것을 특징으로 하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료에 관한 것이다.
늙은 호박(南瓜, Cucurbita spp.)은 칼로리가 적고 몸속 노폐물을 배출하며 이뇨작용을 촉진해 다이어트와 피부미용에 좋고, 산후 및 수술 후 부기를 빼는데도 많이 애용된다.
구기자(枸杞子, Lycium chinense Miller)는 수렴성으로 예로부터 성기능개선에 많이 사용되어 오고 있으며 약성은 달고(甘) 차다(寒). 허리와 무릎에 힘이 없으며 음혈이 허약해져 얼굴이 누렇고 머리털이 희어지며 잠을 못 이룰 때나 소갈증에 효과가 있고 약리작용으로 비특이성면역증강 작용, 조혈작용, 콜레스테롤강하작용, 항지방간작용, 혈압강하, 혈당강하 등이 보고되었다. 무더위에 땀을 많이 흘려 지치고 피로한 몸의 기운을 보충하는데 좋으며 베타인(Betaine) 성분이 간에 지방축적을 억제하고, 손상된 간을 회복시키며 베타카로틴과 비타민C도 많아 피부미용 등에도 좋은 소재이다.
백복령(白茯笭, Poria cocas Wolf)은 맛은 달고 담담하며 성질은 어느 한 쪽으로 치우지지 않고 평(平)하며, 심장, 비장 및 폐에 작용한다. 주로 비장 기능을 튼튼하게 하고 이뇨작용을 촉진하는 작용이 있어 비장의 기능이 허약하고 인체의 수액대사가 원활하지 못하여 발생하는 여러 증상에 모두 응용되며 특별한 부작용은 없는 소재로서 다공균과(구멍쟁이버섯과)에 속한 진균인 복령의 균핵을 말한다. 복령은 특징과 가공방법에 따라 적복령(赤茯笭), 복신(茯神), 복령피(茯笭皮) 등으로 구분되며 각각의 약효는 조금씩 다르다. 7 월부터 다음 해 3 월 사이에 소나무 숲에서 채취하여 약재로 이용한다.
차전자(車前子, Plantaginis Semen)는 질경이 씨앗으로 열을 제거하며 담(痰)을 없애며 시력을 좋게 하는 효능을 가지고 있다. 맛은 달고(甘) 성질은 차며(寒) 이수통림, 삼습지사, 청간명목에 잎과 씨를 약재로 사용하며 잎을 차전(車前), 씨를 차전자(車前子)라고 한다. 잎과 씨는 모두 이뇨, 해열, 거담, 진해의 효능을 가지고 있다. 씨는 방광염, 요도염, 임질, 설사, 간염, 고혈압 등에 효과를 보이며, 잎은 소변이 잘 나오지 않는 증세를 비롯하여 감기, 기침, 기관지염, 인후염, 황달, 간염, 혈뇨 등의 치료에 쓰인다. 잎에는 플란타기닌(Plantaginin)과 아우쿠빈(Aucubin)이 함유되어 있으며 씨는 물을 흡수하여 팽윤되는 섬유질이 많이 함유되어 배변활동에도 도움이 된다.
칡(葛根, Pueraria lobata (Willd.) ohwi)은 주로 흙속의 진주라 하는 뿌리를 이른 봄·늦가을에 채취하여 잘라서 햇볕에 말려 사용한다. 성미귀경은 감(甘), 신(辛), 량(凉). 무독(無毒)하고, 비(脾), 위(胃), 폐(肺), 방광(膀胱)에 귀경한다. 외감으로 인한 발열 두통, 무한, 항배강통 등의 증후를 치료한다. 땀을 나게 하여 술독으로 인한 번갈을 없애주며, 음식 맛을 나게 하고 소화를 잘 되게 하며 가슴의 열을 없애 준다. 고혈압, 뇌질환, 이명, 사지가 저리는 증상 등을 개선하며 석류의 600 배 넘는 식물성 에스트로겐 성분 다량 함유로 여성갱년기 건강에 효과적이다라는 보고도 있다.
당귀(當歸, Angelica gigas Nakai)는 우리나라에서 참당귀(Angelica gigas Nakai) 뿌리를 사용한다. 늦가을에 캐어 노두(蘆頭)와 수근(鬚根)은 제거하고 얇게 썰어서 술로 반죽하거나 혹은 술로 볶아서 사용한다. 맛은 달고 매우며 성질은 따뜻하다. 당귀에는 정유, 저당, 비타민B12 등이 포함되어 있다. 혈을 보하고 지통의 효능도 매우 우수하여 월경부조, 폐경, 통경 등 여성에게 매우 좋은 약재이다. 혈허로 인한 장조변비, 즉 대변이 딱딱하고 건조한 변비, 노인성 변비에도 좋다. 당귀를 삶은 물로 세안을 하면 피부가 윤택해지고 여드름에도 효과가 있다.
본 발명에 따른 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료는 키토산을 이용하여 상술한 천연 생약식품의 유효성분이 효율적으로 집적되도록 하여, 음용하기에 편리할 뿐만 아니라, 굼벵이의 역겨운 냄새를 제거하고, 항균활성 및 생체 이용율을 증대시킨 효과가 있다.
도 1의 본 발명의 실시예 1로부터 제조된 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 (a) 투과전자현미경(TEM) 이미지 및 (b) 직접화(self-aggregation)된 입자 모식도를 통하여 이를 설명할 수 있다.
도 1(a)를 참조하면, 키토산의 표면처리에 의해 혼합 추출액이 집적화(self-aggregation)되어 마이셀(micelle) 형태를 나타낼 수 있음을 확인할 수 있다.
도 1(b)에는 도 1(a)의 마이셀 입자 하나를 구체적으로 형상화하여 나타내었는데, 4 개의 초록색 입자는 본 발명에 따른 혼합 추출액을 나타내며, 4 개의 초록색 입자를 감싸고 있는 황토색의 형상은 키토산을 나타낸다. 이를 통하여, 키토산에 의하여 혼합 추출액이 표면코팅되어 있음을 이해할 수 있다. 즉, 혼합 추출액의 추출성분, 약성성분 또는 유효성분이 키토산에 의하여 집적화(self-aggregation) 되었음을 의미할 수 있다.
상기 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료는 고콜레스테롤혈증, 고지혈증 또는 이들의 합병증으로서 관상 동맥 질환, 협심증, 경동맥 질환, 뇌졸증, 뇌동맥경화증, 콜레스테롤 담석, 제Ⅱ형 당뇨병, 지질 이상증, 비만 및 만성 염증성 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환의 개선 또는 예방이 가능할 수 있다. 상기 나열된 질환에만 국한되는 것은 아니다.
콜렉스테롤을 과다하게 섭취하고, 운동 등으로 과다 섭취한 콜레스테롤을 소비하지 않는 경우, 콜레스테롤 과다 섭취에 의한 질환이 발생될 수 있다. 상기 과다 섭취로 인한 질환이란 콜레스테롤 조절 기능에 이상이 생겨 체내 또는 혈관에 콜레스테롤이 적정 수준 이상으로 축적되는 질환인 고콜레스테롤증 또는 이로 인해 유발되는 질병을 의미하며, 콜레스테롤 대사 이상 관련 질환이라고도 한다.
또한, 본 발명은 (a) 굼벵이 추출액 10 내지 50 중량%, 늙은 호박 추출액 5 내지 30 중량%, 구기자 추출액 3 내지 20 중량%, 백복령 추출액 5 내지 20 중량%, 차전자 추출액 5 내지 30 중량%, 칡 추출액 3 내지 10 중량% 및 당귀 추출액 5 내지 20 중량%를 혼합하여 혼합 추출액을 수득하는 단계; 및 (b) 상기 혼합 추출액 전체 중량에 대해 0.5 내지 10 중량%의 키토산을 혼합하여 혼합액을 수득하는 단계;를 포함하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 제조방법을 제공한다.
상기 굼벵이 추출액은, 고압멸균 및 동결건조된 굼벵이에 물을 6 내지 15 배 중량으로 혼합한 혼합물을 80 내지 150 ℃에서 8 내지 20 시간 동안 증류 추출하여 제조될 수 있다.
구체적인 예로, 먼저, 2 내지 5일 동안 절식한 굼벵이를 90 내지 160 ℃, 바람직하게는 110 내지 130 ℃, 0.5 내지 2.0 kgf/cm3, 바람직하게는 0.8 내지 1.5 kgf/cm3 및 포화수증기 조건으로 5 내지 25 분, 바람직하게는 10 내지 15 분 동안 고압멸균 하는 단계;를 통하여 효소와 조직 단백질의 비가역적 응고와 변성을 막을 수 있다.
상기 고압멸균된 굼벵이를 -40 내지 -100 ℃, 바람직하게는 -60 내지 -80 ℃에서 8 내지 30 시간, 바람직하게는 12 내지 24 시간 동안 냉동시킨 후 20 내지 55 시간, 바람직하게는 24 내지 48 시간 동안 동결건조하는 단계; 및
상기 동결건조된 굼벵이에 물을 8 내지 12 배 중량, 바람직하게는 9 내지 11 배 중량으로 혼합한 혼합물을 110 내지 120 ℃, 바람직하게는 113 내지 117 ℃에서 10 내지 14 시간, 바람직하게는 11 내지 13 시간 동안 증류 추출하는 단계;를 통하여 굼벵이 추출액을 제조할 수 있다.
이러한 굼벵이 추출액 제조 단계를 통하여, 굼벵이의 식품화에 있어서 혐오성 및 풍미 등의 문제를 개선시킬 수 있다.
상기 늙은 호박 추출액, 구기자 추출액, 백복령 추출액, 차전자 추출액, 칡 추출액 및 당귀 추출액 각각은, 늙은 호박, 구기자, 백복령, 차전자, 칡 또는 당귀에 물을 25 내지 50 배 중량, 바람직하게는 30 내지 40 배 중량으로 혼합한 혼합물을 80 내지 150 ℃, 바람직하게는 110 내지 120 ℃, 더욱 바람직하게는 113 내지 117 ℃에서 8 내지 20 시간, 바람직하게는 10 내지 14 시간, 더욱 바람직하게는 11 내지 13 시간 동안 증류 추출하여 제조될 수 있다.
상기 키토산의 수평균 분자량은 10 만 내지 25 만, 바람직하게는 13 내지 18 만, 더욱 바람직하게는 14 만 내지 16 만일 수 있으며, 키토산의 혼합량은 바람직하게는 1 내지 3%일 수 있다.
상기 키토산 제조의 구체적인 예로, 곤충의 갑각 및 2 내지 8 중량%의 염산 수용액의 혼합물을 상온에서 20 내지 25 시간, 바람직하게는 22 내지 23 시간 동안 교반하여 무기질을 제거하는 단계; 상기 무기질이 제거된 혼합물 및 1 내지 6 중량% 가성소다 수용액의 혼합물을 80 내지 100 ℃, 바람직하게는 85 내지 90 ℃에서 3 내지 8 시간, 바람직하게는 5 내지 6 시간 동안 교반 및 가열하여 유기질을 제거하는 단계; 상기 유기질이 제거된 혼합물 및 40 내지 50 중량% 가성소다 수용액의 혼합물을 가열하여 탈아세틸화시키는 단계; 및 상기 탈아세틸화된 혼합물을 여과하여 수득한 고형상을 진공건조하는 단계;를 통하여 수평균 분자량 10 만 내지 25 만의 키토산을 제조할 수 있다.
상기 (b) 단계는 질소 분위기 및 60 내지 120 ℃, 바람직하게는 80 내지 100 ℃ 조건에서 3000 내지 5000 RPM, 바람직하게는 3500 내지 4000 RPM으로 교반하여 수행될 수 있으며, 교반시간은 제한되진 않지만 1 내지 30 분, 바람직하게는 10 내지 20 분 동안 수행될 수 있다.
상기 (b) 단계의 수행 조건에서, 온도 범위 및 교반속도 범위가 상기 수치범위를 벗어나거나, 질소 분위기가 아닐 경우에는 제조되는 다이어트 음료의 생체 이용율, 항균활성, 체중감량 효과, 혈중 콜레스테롤 및 중성지질 감소 효과가 현저히 저하됨을 확인하였다.
상기 제조방법은 (c) 상기 혼합액 및 한천을 혼합하여 겔상화 한 후 살균하는 단계;를 더욱 포함할 수 있다.
구체적인 예로, 혼합액 대비 0.5 내지 5 중량%, 바람직하게는 1 내지 3 중량%의 한천을 혼합할 수 있으며, 살균은 90 내지 100 ℃에서 3 내지 10 분 동안 수행될 수 있다.
이하에서는 본 발명에 따른 제조예 및 실시예를 첨부된 도면과 함께 구체적으로 설명한다.
제조예 1: 굼벵이 추출액의 제조
굼벵이는 3 일간 절식시키고 잘 세척한 후 동결건조하여 사용하였다. 먼저 3 령 이후의 3 g 이상의 굼벵이로 선별하여 포화수증기하의 고압멸균기에서 120 ℃ 및 1.0 kgf/cm3의 조건으로 13 분 동안 고압멸균 후 -70 ℃의 냉동고에서 20 시간 냉동시키고, 동결건조기에서 30 시간 건조하였다. 이후, 건조된 굼벵이 1,000 g을 정제수 10,000 mL에 넣고 115 ℃에서 12 시간에 걸쳐 증류 추출하여 굼벵이 추출액을 제조하였다.
제조예 2: 혼합 추출액의 제조
잘 건조된 늙은 호박의 추출액은 300 g의 늙은 호박을 정제수 10,000 ml에 넣고 115 ℃에서 12 시간에 걸쳐 증류 추출하여 제조하였다.
상기와 동일한 방식으로 구기자, 백복령, 차전자, 칡 및 당귀를 각각 추출하여 각각의 추출액을 제조하였고, 상기 제조예 1로부터 제조된 굼벵이 추출액 30 중량%, 늙은 호박 추출액 10 중량%, 구기자 추출액 8 중량%, 백복령 추출액 13 중량%, 차전자 추출액 15 중량%, 당귀 추출액 15 중량% 및 칡 추출액 9 중량%을 30 분 동안 혼합하여 혼합 추출액을 제조하였다.
제조예 3: 키토산의 제조
수거한 곤충 갑각을 5% 염산용액에서 20 시간 상온에서 교반하며 무기질을 제거 하였으며, 가성소다 3% 용액하에서 5 시간 80 ℃에서 교반 가열하여 유기질을 제거하여 키틴질을 얻어내었으며, 이것을 45% 가성소다 용액하에 가열하면서 탈아세틸화 반응을 하여 여과로 걸러진 고형상을 진공건조하여, 수평균 분자량 15 만의 키토산을 제조하였다.
실시예 1: 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 제조
상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 혼합하여 질소 분위기 및 90 ℃ 조건에서 4000 RPM으로 교반하여, 상기 혼합 추출액이 키토산에 의해 표면코팅되어 집적화(self-aggregation)된 상태의 다이어트 음료를 제조하였다.
실시예 2
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 80 ℃의 질소 분위기에서 4000 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
실시예 3
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 100 ℃의 질소 분위기에서 4000 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
실시예 4
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 90 ℃의 질소 분위기에서 3500 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
실시예 4
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 90 ℃의 질소 분위기에서 4500 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
비교예 1
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 실온의 공기 중에서 4000 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
비교예 2
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 90 ℃의 공기 중에서 4000 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
비교예 3
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 40 ℃의 질소 분위기에서 4000 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
비교예 4
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 140 ℃의 질소 분위기에서 4000 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
비교예 5
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 90 ℃의 질소 분위기에서 2500 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
비교예 6
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 전체 중량에 대해 3 중량%의 키토산을 90 ℃의 질소 분위기에서 5500 RPM으로 교반 혼합하여 다이어트 음료를 제조하였다.
실험예 1: 세포독성 실험
상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액, 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 6으로부터 제조된 다이어트 음료를 PC-12 세포주를 사용하여 그 세포독성을 MTS assay로 측정하였다. 양성대조물로는 아지드화나트륨(NaN3, sodiumazide)을 사용하여 37 ℃, 5% CO2 조건에서 48 시간 배양하였다. 상기 시료를 각각 0.1, 0.05, 0.001, 0.005 중량% 에 각각 아지드화나트륨을 0.2 ml씩 가하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액, 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 6의 상기 어느 농도에서도 세포독성이 없었음을 확인하였다.
실험예 2: 생체 이용율 실험
상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액, 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 6으로부터 제조된 다이어트 음료를 각 1 중량% 용액으로 제조한 후 형광 표적물질인 FITC를 부착시키고 실험동물 200 g의 정상 쥐의 꼬리 정맥에 주사 후 쥐의 간, 혈액 및 뇨에서 48 시간 뒤의 생체 이용율을 비교하여 하기 표 1에 나타내었다. 생체 이용율은 각 시간에 배출된 FITC의 질량을 투입된 FITC의 질량으로 나눈 백분율로 계산하였다.
하기 표 1을 참조하면, 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액은 48 시간 째에 68.1%만이 간에서 흡수되었으며, 77.0%만이 혈액을 통해 뇨로 배출되었다. 실시예 1 내지 5의 시료는 48 시간 째에 84% 이상 간에서 흡수되었으며, 95% 이상 혈액을 통해 뇨로 배출되었다. 그러나 키토산을 교반하여 단순 혼합한 비교예 1의 시료는 48 시간째 뇨로 배출되는 비율이 실시예들에 비해 10% 이상 낮았고, 키토산을 공기 중에서 교반한 비교예 2, 60 내지 120 ℃를 벗어나는 온도 범위에서 혼합한 비교예 3 내지 4 및 3000 내지 5000 RPM을 벗어나는 교반속도 범위에서 혼합한 비교예 5 내지 6에서도 비교예 1 보다는 높지만 실시예들에 비해서 5 내지 6% 정도 낮은 생체 이용율을 나타냄을 확인할 수 있다.
구분 간 혈액 뇨
제조예 2 68.1% 79.2% 77.0%
실시예 1 84.4% 96.1% 95.2%
실시예 2 84.5% 96.0% 95.5%
실시예 3 84.2% 96.3% 95.2%
실시예 4 84.7% 96.5% 95.0%
실시예 5 84.3% 96.6% 95.1%
비교예 1 74.2% 84.3% 84.1%
비교예 2 80.5% 87.5% 88.2%
비교예 3 80.1% 87.1% 88.1%
비교예 4 79.5% 87.0% 88.4%
비교예 5 78.3% 87.3% 88.5%
비교예 6 79.2% 86.9% 88.1%
실험예 3: 효율성 실험
실험동물로 ICR 마우스를 이용하여, 상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액, 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 6으로부터 제조된 다이어트 음료를 재료로 한 시험대조군과 정상군을 식이 급여하며 사육 비교하였다.
본 실험에서 기본 식이는 AIN-76을 기본으로 단백질급원은 카제인(Japan), 탄수화물급원은 옥수수전분(제일제당), 지방급원으로 옥수수유(대상)을 사용한 정상군과 시험대조군을 비교하는 방식으로 진행하였다. 본 실험에 사용한 다이어트 음료는 매일 일정시간에 1 ml씩 경구 급여하였으며 식이와 식수는 임의로 자유롭게 섭취하도록 하였다. 시험동물 사육환경은 항온(20±2℃), 항습(50±5%)하고 12 시간 광주기로 일정 조건을 유지하면서 폴리카보네이트 케이지에서 2 마리씩 분리하여 사육하였다. 동물에서 콜레스테롤은 혈류를 따라 순환하며 몇몇 기관에서 합성되며 혈류 내에서 콜레스테롤 수치가 크면 동맥경화의 주요 원인이 되므로 분석항목은 (1) 체중변화 및 식이섭취량, (2) 혈중 콜레스테롤 및 중성지질을 측정하는 것으로 진행하였다.
사육이 끝난 실험동물은 12 시간 절식시킨 후 에테르(Ether)를 흡입시켜 마취시킨 다음 복부 하대정맥으로부터 채혈하였으며, 헤파린을 처리하여 원심분리(15 mins, 3,000 RPM)로 혈장을 분리하여 지질함량을 측정하였다.
각 실험동물의 내장(간, 부고환, 신장)을 혈액채취 후 즉시 적출하여 PBS(Phosphate Buffered saline) 용액으로 수차례 헹군 후 표면 수분을 제거하여 비교 정량하였다. 혈장 중성지질은 McGowan 등(1983)의 효소법을 이용한 발색방식의 중성지방 측정용 시액(Asan kit)를 사용하여 550 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 혈장 총 콜레스테롤은 Allain 등(1974)의 효소법을 응용한 총콜레스테롤 측정용 시액(Asan kit)를 사용하여 발색처리하여 500 nm에서 흡광도를 측정하여 이를 콜레스테롤 표준곡선과 비교 정량하는 방식으로 하였으며, 장기의 지질은 Folch 등(1957)의 방법으로 잘게 자른 후 2 ml, Chloroform: Methyl alcohol 2:1 용액하에서 추출하여 중성지질, 콜레스테롤은 혈장에서와 동일 방법으로 정량하였다. 각 항목은 통계처리하여 평균값으로 하였다.
(1) 체중변화
실험동물의 체중변화 및 식이섭취량을 하기 표 2 및 3에 각각 나타내었다.
하기 표 2를 참조하면, 실시예 1 내지 5로부터 제조된 다이어트 음료를 경구 급여한 실험동물의 경우 실험전에 비하여 체중이 유사 또는 저하되었고, 반면 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액, 비교예 1 내지 6으로부터 제조된 다이어트 음료를 경구 급여한 실험동물 및 정상군의 경우 실험전에 비하여 체중이 증가했음을 확인할 수 있다.
하기 표 3을 참조하면, 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액, 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 6으로부터 제조된 다이어트 음료를 경구 급여한 실험동물 및 정상군의 식이섭취량은 모두 유사한 것으로 확인하였다.
이를 통하여 모든 실험동물의 식이 섭취량이 유사함에도 불구하고, 실시예 1 내지 5의 다이어트 음료를 섭취한 실험동물의 체중이 모두 증가하지 않고, 실험 전과 유사하거나 실험전에 비하여 감소하여 다이어트 음료로서 활용 가능함을 확인하였다.
구분 실험전(g) 실험후(g)
제조예 2 27.01 29.95
실시예 1 27.65 26.68
실시예 2 27.51 27.05
실시예 3 27.00 26.65
실시예 4 27.11 26.98
실시예 5 27.80 27.01
비교예 1 27.75 28.32
비교예 2 27.55 28.85
비교예 3 27.45 28.48
비교예 4 27.23 28.42
비교예 5 26.89 28.06
비교예 6 27.88 29.11
정상군 27.85 30.04
구분 시험대조군(g)
제조예 2 4.0
실시예 1 3.9
실시예 2 4.1
실시예 3 4.3
실시예 4 4.0
실시예 5 3.9
비교예 1 4.0
비교예 2 4.1
비교예 3 4.2
비교예 4 4.2
비교예 5 4.3
비교예 6 4.2
정상군 5.1
(2) 혈중 콜레스테롤 및 중성지질
실험동물의 혈장 중성지질, 혈장 콜레스테롤, 부고환 중성지질, 신장 조직의 중성지질 및 간조직에서의 콜레스테롤을 하기 표 4 내지 8에 나타내었다.
하기 표 4를 참조하면, 실시예 1 내지 5의 다이어트 음료를 섭취한 시험대조군은 실험전에 비해 혈장 중성지질이 현저히 감소한 반면, 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액 및 비교예 1 내지 6의 다이어트 음료를 섭취한 시험대조군은 유의적인 변화가 나타나지 않았으며, 정상군의 경우 오히려 혈장 중성지질이 증가한 것을 확인할 수 있다.
구분 실험전(mg/dL) 실험후(mg/dL)
제조예 2 121 119
실시예 1 125 92
실시예 2 126 95
실시예 3 116 90
실시예 4 126 101
실시예 5 121 99
비교예 1 121 120
비교예 2 129 128
비교예 3 110 118
비교예 4 115 113
비교예 5 118 118
비교예 6 121 115
정상군 124 136
하기 표 5를 참조하면, 실시예 1 내지 5의 다이어트 음료를 섭취한 시험대조군은 실험전에 비해 혈장 콜레스테롤이 현저히 감소한 반면, 제조예 2, 비교예 1 내지 6 및 정상군은 유의적인 변화가 나타나지 않았음을 확인할 수 있다.
구분 실험전(mg/dL) 실험후(mg/dL)
제조예 2 154 153
실시예 1 156 122
실시예 2 155 131
실시예 3 149 130
실시예 4 151 128
실시예 5 152 118
실시예 6 153 119
실시예 7 159 121
비교예 1 158 159
비교예 2 157 156
비교예 3 156 158
비교예 4 150 148
비교예 5 149 143
비교예 6 151 148
정상군 155 154
표 6을 참조하면, 실시예 1 내지 5의 다이어트 음료를 섭취한 시험대조군은 실험전에 비해 부고환의 중성지질이 현저히 감소한 반면, 제조예 2 및 비교예 1 내지 6은 유의적인 변화가 나타나지 않았으며, 정상군은 오히여 부고환의 중성지질이 증가하였음을 확인할 수 있다.
구분 실험전(mg/g) 실험후(mg/g)
제조예 2 24 23
실시예 1 23 12
실시예 2 28 18
실시예 3 25 12
실시예 4 26 10
실시예 5 21 11
비교예 1 22 21
비교예 2 24 23
비교예 3 25 26
비교예 4 28 28
비교예 5 26 30
비교예 6 23 24
정상군 24 34
표 7을 참조하면, 실시예 1 내지 5의 다이어트 음료를 섭취한 시험대조군은 실험전에 비해 신장 조직의 중성지질이 현저히 감소한 반면, 제조예 2 및 비교예 1 내지 6은 유의적인 변화가 나타나지 않았으며, 정상군은 신장 조직의 중성지질이 증가했음을 확인할 수 있다.
구분 실험전(mg/dL) 실험후(mg/dL)
제조예 2 3.2 3.1
실시예 1 3.1 1.6
실시예 2 3.0 1.7
실시예 3 3.1 1.8
실시예 4 3.0 1.6
실시예 5 3.2 1.5
비교예 1 3.2 2.8
비교예 2 3.0 2.9
비교예 3 3.1 3.2
비교예 4 3.3 3.2
비교예 5 3.0 3.0
비교예 6 3.1 3.1
정상군 3.4 3.8
표 8을 참조하면, 실시예 1 내지 5의 다이어트 음료를 섭취한 시험대조군은 실험전에 비해 간조직의 콜레스테롤이 현저히 감소한 반면, 제조예 2, 비교예 1 내지 6 및 정상군은 유의적인 변화가 나타나지 않았음을 확인할 수 있다.
구분 실험전(mg/dL) 실험후(mg/dL)
제조예 2 3.3 3.2
실시예 1 3.3 2.1
실시예 2 3.2 2.2
실시예 3 3.1 2.0
실시예 4 3.3 2.4
실시예 5 3.5 2.4
비교예 1 3.1 2.9
비교예 2 3.5 3.4
비교예 3 3.3 3.3
비교예 4 3.6 3.5
비교예 5 3.4 3.3
비교예 6 3.0 2.8
정상군 3.0 2.9
상기 결과를 통하여, 본 발명에 따른 실시예들을 통해 제조된 다이어트 음료는 부고환 및 신장 조직에서 중성지질의 양의 감소현상을 확인할 수 있어 내장지방 개선효과가 있음을 확인할 수 있었으며, 특히 간조직에서 콜레스테롤 수치가 개선되는 것을 확인할 수 있는 등 전반적으로 지방과 콜레스테롤을 개선시키는 특징을 확인하였다.
실험예 4: 항균활성 실험
상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 6으로부터 제조된 다이어트 음료를 1 중량% 용액으로 희석하여 Streptococcus mutans 및 Escherichia coli ATCC8739에 대하여 MIC((minimal inhibitory concentration: 미생물의 생육을 저해하는데 필요한 최저 농도)를 측정하여 하기 표 9에 나타내었다.
하기 표 9를 참조하면, 실시예 1은 비교예 1 내지 6에 비하여 스트렙토코커스 뮤탄스와 대장균에 대한 MIX가 1/5 내지 1/6 에 불과하여 항균 활성이 현저히 우수함을 확인하였다.
구분 Streptococcus mutans Escherichia coli ATCC8739
실시예 1 25 μM 50 μM
비교예 1 100 μM 250 μM
비교예 2 120 μM 300 μM
비교예 3 100 μM 260 μM
비교예 4 125 μM 270 μM
비교예 5 115 μM 260 μM
비교예 6 118 μM 250 μM
실험예 5: 관능검사
상기 제조예 2로부터 제조된 혼합 추출액, 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 6으로부터 제조된 다이어트 음료에 대한 관능검사를 실시하였다.
식품관련 분야에서 3 년 이상의 관능검사 경력을 지닌 패널 20 명(남여 각각 10 명)으로 하여금 실시예 및 비교예의 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료를 시음하게 한 후 관능검사를 하여 9 점 척도법(정도가 클수록 9점에 가까움)으로 측정하였으며, 이를 하기 표 10에 나타내었다.
하기 표 10을 참조하면, 실시예 1 내지 5로부터 제조된 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료는 제조예 2 및 비교예 1 내지 6에 비하여 전체적인 향, 전체적인 맛, 목넘김, 후미 및 종합적인 기호도 모두 우수하며, 굼벵이 특유의 역겨운 냄새 및 맛이 상당히 감소한 것을 확인할 수 있다.
-전체적인 향, 전체적인 맛, 목넘김, 후미 및 종합적인 기호도: 1점= 매우 나쁘다, 9점= 매우 좋다
-굼벵이 특유의 역겨운 냄새 및 맛: 1점= 매우 약하다, 9점= 매우 강하다
구분 제조예 2 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5 비교예 1 비교예 2 비교예 3 비교예 4 비교예 5 비교예 6
전체적인 향 3.05 6.50 6.25 6.15 6.25 6.15 3.85 4.00 3.75 3.65 3.55 3.80
전체적인 맛 3.20 6.45 6.05 6.20 6.20 6.10 4.05 3.80 3.85 3.60 3.50 3.75
목넘김 1.80 6.55 6.45 6.50 6.55 6.40 3.50 3.55 3.30 3.35 1.95 2.85
후미 1.95 6.75 6.15 6.65 6.60 6.65 2.35 2.85 2.55 2.50 2.70 2.40
굼벵이 특유의 역겨운 냄새 7.85 1.05 1.35 1.10 1.15 1.20 6.25 5.85 6.70 6.55 6.85 6.15
굼벵이 특유의 역겨운 맛 7.90 1.25 1.25 1.30 1.20 1.05 5.90 6.05 5.85 6.80 6.20 6.15
종합적인 기호도 1.98 6.45 6.30 6.25 6.30 6.25 2.05 2.35 2.10 2.15 2.05 2.20

Claims (7)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. (a) 굼벵이 추출액 10 내지 50 중량%, 늙은 호박 추출액 5 내지 30 중량%, 구기자 추출액 3 내지 20 중량%, 백복령 추출액 5 내지 20 중량%, 차전자 추출액 5 내지 30 중량%, 칡 추출액 3 내지 10 중량% 및 당귀 추출액 5 내지 20 중량%를 혼합하여 혼합 추출액을 수득하는 단계; 및
    (b) 상기 혼합 추출액 전체 중량에 대해 0.5 내지 10 중량%의 키토산을 혼합하여 혼합액을 수득하는 단계;를 포함하고,
    상기 (b) 단계는 질소 분위기 및 60 내지 120 ℃ 조건에서 3000 내지 5000 RPM으로 교반하여 수행되는 것을 특징으로 하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 제조방법.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 굼벵이 추출액은, 고압멸균 및 동결건조된 굼벵이에 물을 6 내지 15 배 중량으로 혼합한 혼합물을 80 내지 150 ℃에서 8 내지 20 시간 동안 증류 추출하여 제조된 것을 특징으로 하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 제조방법.
  5. 제3항에 있어서,
    상기 늙은 호박 추출액, 구기자 추출액, 백복령 추출액, 차전자 추출액, 칡 추출액 및 당귀 추출액 각각은, 늙은 호박, 구기자, 백복령, 차전자, 칡 또는 당귀에 물을 25 내지 50 배 중량으로 혼합한 혼합물을 80 내지 150 ℃에서 8 내지 20 시간 동안 증류 추출하여 제조된 것을 특징으로 하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 제조방법.
  6. 삭제
  7. 제3항에 있어서,
    (c) 상기 혼합액 및 한천을 혼합하여 겔상화 한 후 살균하는 단계;를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 굼벵이를 함유하는 다이어트 음료의 제조방법.
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