KR101883096B1 - 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물 - Google Patents

쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물 Download PDF

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박정란
양세란
장상호
김석인
황정순
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강원대학교산학협력단
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Abstract

본 발명은 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물, 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 개선용 건강기능성 식품 조성물 및 상기 약학 조성물을 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 발병 가능성이 있거나 또는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군을 앓고 있는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료방법에 관한 것이다. 본 발명의 GHK-Cu를 포함하는 조성물은 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 유도 동물 모델에서 우수한 치료효과를 나타내었으므로, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방, 치료 또는 개선에 널리 활용될 수 있을 것이다.

Description

쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물{Pharmaceutical composition for preventing or treating acute lung injury or acute respiratory distress syndrome, comprising copper peptide}
본 발명은 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물, 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 개선용 건강기능성 식품 조성물 및 상기 약학 조성물을 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 발병 가능성이 있거나 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군을 앓고 있는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료방법에 관한 것이다.
급성 호흡곤란 증후군(acute respiratory distress syndrome, ARDS)은 고농도의 산소를 공급하여도 호전되지 않는 호흡곤란을 일으키는 폐질환의 일종으로서, 병원균의 감염, 외상, 유전적 소인과 같은 다양한 원인에 의하여 발병되는 질환으로서, 성인에서는 물론 소아연령에서도 높은 이환율과 사망률로 인하여 임상적으로 매우 중요한 질환으로 여겨지고 있다. 상기 급성 호흡곤란 증후군은 질환의 중증도에 따라, 급성 폐 손상과 급성 호흡곤란 증후군으로 구별되기도 하는데, 아메리칸-유럽 컨센서스 컨퍼런스(American-European consensus conference)의 진단기준에 따라 좌심방 압력이 높지 않은 상태(좌심방 압력 18 mmHg 이하)에서 흉부 X-선 검사상 양측 폐에 음영이 증가한 폐부종 소견을 보이면서, PaO2/FiO2 값이 300 이하이면 급성 폐 손상으로 정의되고, 200 이하이면 급성 호흡곤란 증후군으로 정의된다.
급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군은 폐포 또는 폐 혈관에서 진행된 경우 모두 궁극적으로는 폐의 심한 염증 반응으로 진행되어 여러 가지 병태생리적 현상을 나타내는데, 급성 폐 손상의 병리 소견을 보면 주로 염증반응에 의하여 폐포 내에 공기 대신 염증 세포와 단백질이 차게 되고, 유리질 막이 생기게 되며, 폐간질(pulmonary interstitium)에도 염증세포의 침윤을 보인다. 이러한 과정에서 여러 가지 사이토카인들이 역할을 하게 되고, 특히 혈액 응고 기능에 이상을 나타내는 경우가 빈번한 것으로 알려져 있다.
상기 급성 호흡곤란 증후군은 병원균의 감염, 외상, 유전적 소인과 같은 다양한 원인에 의하여 발병되기 때문에, 급성 호흡곤란 증후군에 대한 특이적인 치료제는 아직까지 개발되고 있지 않으며, 현재로서는 급성 호흡곤란 증후군의 증상을 경감시키는 제제를 개발하려는 연구가 활발히 진행되고 있다. 예를 들어, 한국등록특허 제1636563호에는 (테트라하이드로피란-4-일)-[2-페닐-5-(1,1-디옥소-티오몰포린-4-일)메틸-1H-인돌-7-일]아민을 유효성분으로 포함하는 급성 폐 손상 및 급성 호흡 곤란 증후군의 예방 또는 치료용 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1128629호에는 인슐린 유사 성장인자 결합 단백질-3을 함유하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 치료용 약학적 조성물이 개시되어 있다. 그러나, 이들 치료제는 급성 호흡곤란 증후군의 부분적인 증상에만 작용할 뿐, 전체적인 증상에 대한 치료효과를 나타내지 못한다는 단점이 있으므로, 새로운 급성 호흡곤란 증후군의 치료제가 절실히 요구되고 있는 실정이다.
이러한 배경하에서, 본 발명자들은 급성 호흡곤란 증후군에 대하여 치료효과를 나타낼 수 있는 치료제를 개발하고자 예의 연구노력한 결과, 3개의 아미노산으로 구성된 펩타이드의 말단에 구리이온이 결합된 쿠퍼펩타이드가 급성 호흡곤란 증후군에 대한 치료효과를 나타낼 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은, 쿠퍼펩타이드를 유효성분으로 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 개선용 건강기능성 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 약학적 조성물을 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 발병 가능성이 있거나 또는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군을 앓고 있는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위한 일 실시양태로서, 본 발명은 쿠퍼펩타이드인 GHK-Cu를 유효성분으로 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 "급성 폐 손상(acute lung injury, ALI)" 또는 "급성 호흡곤란 증후군(acute respiratory distress syndrome, ARDS)"이란, 고농도의 산소를 공급하여도 호전되지 않는 호흡곤란을 일으키는, 심장이 아닌 원인에 의해 급성으로 시작되고, 폐 부종을 유발하는 호흡기 질환을 의미한다. 증상의 중증도에 따라, 상기 급성 폐 손상과 급성 호흡곤란 증후군이 구별되는데, 아메리칸-유럽 컨센서스 컨퍼런스(American-European consensus conference)의 진단기준에 따라 좌심방 압력이 높지 않은 상태(좌심방 압력 18 mmHg 이하)에서 흉부 X-선 검사상 양측 폐에 음영이 증가한 폐부종 소견을 보이면서, PaO2/FiO2 값이 300 이하이면 급성 폐 손상으로 정의되고, 200 이하이면 급성 호흡곤란 증후군으로 정의된다. 이들 질환의 주요 증상으로는 폐부종, 폐탄성 감소, 염증 증가, 광범위한 폐침윤 등이 알려져 있다.
본 발명의 용어 "GHK-Cu"이란, 글리신-히스티딘-리신의 3개 아미노산으로 구성된 펩타이드의 C-말단에 구리이온이 결합된 형태의 쿠퍼펩타이드를 의미한다.
본 발명에 있어서, 상기 GHK-Cu는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군을 예방, 개선 또는 치료하는 유효성분으로서 사용될 수 있다.
본 발명의 용어, "예방"은 본 발명에 따른 조성물의 투여로 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 용어, "치료"는 본 발명에 따른 조성물의 투여로 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 증상을 억제, 경감 또는 완화시키는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 약학적 조성물은 단일제제로도 사용할 수 있으며, 공인된 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군에 대한 치료효과를 가진다고 알려진 약물을 추가로 포함하여 복합제제로 제조하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함하는 것일 수 있다.
상기 "약학적으로 허용가능한"이란 생물체를 상당히 자극하지 않고 투여 활성 물질의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 것을 의미한다.
상기 담체는 자연적이거나 또는 비자연적인 담체가 될 수 있는데, 제형에 따라, 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제와 같은 다양한 담체를 사용하여 제제화 할 수 있다. 예를 들어, 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 탄산칼슘, 수크로오스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양의 GHK-Cu를 포함할 수 있다.
본 발명에서 용어 "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용을 유발하지 않으면서 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 바람직하게는 본 발명에 따른 약학적 조성물은 GHK-Cu를 0.001 내지 1500 ㎍/ml로 포함할 수 있으며, 보다 바람직하게는 0.001 내지 1000 ㎍/ml으로 포함할 수 있다.
다른 실시양태로서, 본 발명은 쿠퍼펩타이드인 GHK-Cu를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 개선용 건강기능성 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어, "개선"은 상기 조성물을 이용하여 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 식품 조성물은 식품학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함하는 것일 수 있다.
상기 식품 조성물은 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 억제에 도움을 주는 기능을 가질 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 GHK-Cu를 첨가할 수 있는 식품의 종류에는 별다른 제한이 없으며, 예를 들어 각종 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있다.
상기 식품 조성물에는 GHK-Cu 이외에도 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 억제활성에 방해가 되지 않는 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
상기 천연 탄수화물의 예는 포도당, 과당 등의 단당류; 말토스, 수크로스 등의 이당류; 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 Ａ, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 식품 조성물은 건강기능성 식품의 제조를 위하여 사용되거나, 건강기능성 식품에 포함될 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "건강기능성 식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능성 식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
본 발명의 조성물을 건강기능식품에 포함하여 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 건강기능식품 또는 건강기능식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
일반적으로, 식품의 제조 시에 본 발명의 GHK-Cu는 원료 조성물 중 1 내지 10 중량%, 바람직하게는 5 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능성 식품을 모두 포함한다.
본 발명의 조성물을 포함할 수 있는 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없으며, 구체적인 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물이 음료의 형태로 사용될 경우에는 통상의 음료와 같이 여러 가지 감미제, 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드, 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨과 같은 당알콜일 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 이에 제한되지는 않으나, 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 바람직하게는 약 0.01 내지 0.04g, 보다 바람직하게는 0.02 내지 0.03g일 수 있다. 상기 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제 및 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제일 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
또 다른 양태로서, 본 발명은 GHK-Cu를 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 발병 가능성이 있거나 또는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군을 앓고 있는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료방법을 제공한다.
본 발명에서 상기 개체는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미하며, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학적 조성물을 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 의심 개체에 투여함으로써, 개체를 효율적으로 치료할 수 있다.
구체적으로, 상기 개체는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료가 필요한 개체로서, 인간뿐만 아니라 이와 유사한 증상의 치료를 필요로 하는 소, 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개, 고양이 등의 포유동물일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에서 사용된 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명의 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 치료방법은 GHK-Cu를 포함하는 본 발명의 약학적 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 것을 포함한다.
본 발명에서 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르며, 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으나, 일반적으로 0.001 내지 1000 mg/kg의 양, 바람직하게는 0.05 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 상기 조성물은 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료를 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 개체이든 적용가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비인간동물, 인간, 조류 및 어류 등 어느 개체에나 적용할 수 있으며, 투여의 방식은 당업계의 통상적인 방법이라면 제한없이 포함한다. 예를 들어, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 GHK-Cu를 포함하는 조성물은 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 유도 동물 모델에서 우수한 치료효과를 나타내었으므로, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방, 치료 또는 개선에 널리 활용될 수 있을 것이다.
도 1a는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 생성된 활성산소에 미치는 GHK-Cu의 항산화 활성을 측정한 결과를 나타내는 유세포분석 그래프이다.
도 1b는 상기 유세포분석 그래프에서 측정된 항산화 활성을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 생성된 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-α의 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3a는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 측정된 p-NFκBp65의 활성을 비교한 결과를 나타내는 전기영동사진 및 그래프이다.
도 3b는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 측정된 p65의 위치를 측정한 결과를 나타내는 면역형광염색사진 및 핵과 세포질에 존재하는 p65의 비율을 산출한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4a는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 측정된 p38, ERK 및 JNK 단백질과 이들의 인산화된 단백질의 수준을 나타내는 웨스턴블럿 분석결과를 나타내는 사진이다.
도 4b는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 측정된 인산화된 p38, ERK 및 JNK 단백질의 수준을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 5a는 급성폐손상 모델을 이용한 실험설계전략을 나타내는 개략도이다.
도 5b는 대조군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이다.
도 5c는 GHK-Cu 처리군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이다.
도 5d는 LPS 처리군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이다.
도 5e는 1㎍/g의 GHK-Cu를 투여한 실험군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이다.
도 5f는 10㎍/g의 GHK-Cu를 투여한 실험군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이다.
도 5g는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 치료효과를 정량화한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6a는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 폐세포의 SOD 활성의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6b는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 폐세포의 GSH 수준의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6c는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액에 포함된 IL-6 수준의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6d는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액에 포함된 TNF-α 수준의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6e는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 MPO 활성의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6f는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 BALF(Bronchoalveolar lavage fluid)에 포함된 호중구의 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6g는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 BALF에 포함된 총 세포수를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6h는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 BALF에 포함된 총 단백질 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6i는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액에 포함된 p65, p38, ERK 및 JNK 단백질과 이들의 인산화된 단백질의 수준을 나타내는 웨스턴블럿 분석결과를 나타내는 사진이다.
도 6j는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액에 포함된 인산화된 p65, p38, ERK 및 JNK 단백질의 수준을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: GHK -Cu의 항산화 활성
RPMI 1640 배지에 10% FBS, 1% PS를 첨가한 세포 배양액을 사용하여 배양된 5x105개의 Raw 264.7 세포에 100ng/ml의 LPS와 0, 1, 5 또는 10 μM의 GHK-Cu를 조합하여 처리하고 4시간 동안 배양한 다음, 10 μM DCF-DA를 가하고 30분 동안 반응시켰다. 이어, 상기 세포를 PBS로 세척하고, 상기 세포에서 생성된 DCF의 수준을 유세포분석을 통해 측정하였다(도 1a 및 1b).
도 1a는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 생성된 활성산소에 미치는 GHK-Cu의 항산화 활성을 측정한 결과를 나타내는 유세포분석 그래프이고, 도 1b는 상기 유세포분석 그래프에서 측정된 항산화 활성을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 1a 및 1b에서 보듯이, Raw 264.7 세포에 LPS를 처리하면 활성산소의 수준이 약 59% 증가하고, 이에 부합되도록 항산화 활성이 감소되지만, 상기 LPS와 함께 GHK-Cu를 처리하면, 활성산소의 수준이 증가되지 않고, 항산화 활성이 회복됨을 확인하였다.
실시예 2: 사이토카인의 발현수준에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 1에서 수득한 LPS와 GHK-Cu가 처리된 Raw 264.7 세포에서 발현된 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-α의 수준을 비교하였다(도 2).
도 2는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 생성된 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-α의 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 2에서 보듯이, LPS의 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 염증성 사이토카인의 수준이 증가되며, 이처럼 증가된 염증성 사이토카인의 수준은 GHK-Cu의 처리에 의하여 농도의존적으로 감소되는 경향을 나타냄을 확인하였다.
실시예 3: p- NFκBp65의 활성에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 2의 결과에서 LPS에 의해 염증성 사이토카인의 수준이 증가됨을 확인하였는데, 이러한 염증성 사이토카인의 수준에 영향을 미치는 주요 원인으로서 NFκB의 활성이 알려져 있다. 즉, 상기 NFκB가 인산화되어 활성화되면, 이에 의하여 염증성 사이토카인의 수준이 증가된다고 알려져 있다. 이에 따라, 본 발명에서 제공하는 GHK-Cu가 NFκB의 활성에 영향을 미칠 수 있는지를 확인하고자 하였다. 상기 NFκB의 활성을 측정하는 수단으로서 NFκB에 의하여 활성화되는 p65를 사용하였다.
대략적으로, 상기 실시예 1에서 수득한 LPS와 GHK-Cu가 처리된 Raw 264.7 세포에서 측정된 p-NFκBp65의 활성을 비교하였다(도 3a).
도 3a는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 측정된 p-NFκBp65의 활성을 비교한 결과를 나타내는 전기영동사진 및 그래프이다. 도 3a에서 보듯이, LPS의 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 p-NFκBp65의 활성이 증가되고, 이처험 증가된 p-NFκBp65의 활성은 GHK-Cu의 처리에 의하여 감소됨을 확인하였다.
또한, 상기 p65는 NFκB에 의해 활성화된 후, 핵으로 이동한다고 알려져 있으므로, 상기 LPS와 GHK-Cu가 처리된 Raw 264.7 세포에서 p65의 세포내 위치를 확인하고자, 면역형광염색을 수행하고, 핵과 세포질에 존재하는 p65의 비율을 산출하였다(도 3b).
도 3b는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 측정된 p65의 위치를 측정한 결과를 나타내는 면역형광염색사진 및 핵과 세포질에 존재하는 p65의 비율을 산출한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 3b에서 보듯이, LPS의 처리에 의해 Raw 264.7 세포의 핵에서 p65의 함량이 급격히 증가되며, 핵에서 증가된 p65의 함량은 GHK-Cu의 처리에 의하여 감소됨을 확인하였다.
상기 도 3a 및 3b의 결과로부터, 본 발명의 GHK-Cu는 비정상적으로 증가된 NFκB의 활성을 억제하는 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
실시예 4: MAPK ( Mitogen -activated protein kinase ) 신호전달경로에 미치는 GHK-Cu의 효과
MAPK 신호전달경로가 폐의 염증반응과 연관됨이 알려져 있으므로, MAPK 신호전달경로에 관여하는 단백질의 활성에 미치는 GHK-Cu의 효과를 분석하였다.
대략적으로, 상기 실시예 1에서 수득한 LPS와 GHK-Cu가 처리된 Raw 264.7 세포에서 측정된 MAPK 신호전달경로에 관여하는 p38, ERK 및 JNK 단백질과 이들의 인산화된 단백질의 수준을 분석하였다(도 4a 및 4b).
도 4a는 LPS 처리에 의해 Raw 264.7 세포에서 측정된 p38, ERK 및 JNK 단백질과 이들의 인산화된 단백질의 수준을 나타내는 웨스턴블럿 분석결과를 나타내는 사진이고, 도 4b는 상기 인산화된 단백질의 수준을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4a 및 4b에서 보듯이, LPS 처리에 의하여 인산화된 p38, ERK 및 JNK 단백질의 수준이 급격히 증가되었고, GHK-Cu를 처리하면, 인산화된 단백질 중에서 p38의 수준만이 감소됨을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 GHK-Cu는 p38에 특이적으로 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
실시예 5: LPS를 이용한 급성폐손상 모델에 대한 GHK -Cu의 효과분석
실시예 5-1: LPS를 이용한 급성폐손상 모델의 폐손상에 미치는 GHK -Cu의 효과
10주령 된 체중 25-30g의 수컷 C57BL/6 마우스를 대상으로, 1주간 실험실 조건에 적응 시킨 후 각각의 모델 제작에 사용하였다(도 5a).
먼저, 대조군 모델로는 상기 마우스를 하루에 한번씩 생리식염수를 4회 주사하고 4일째에 희생시킨 것을 사용하였다.
다음으로, GHK-Cu 처리군 모델은 하루에 한번씩 GHK-Cu를 10㎍/g의 투여량으로 3회 주사하고, 다음날은 생리식염수를 주사한 후, 4일째에 희생시킨 것을 사용하였다.
다음으로, LPS 처리군 모델은 하루에 한번씩 생리식염수를 3회 주사하고, 다음날은 LPS를 1㎍/g의 투여량으로 주사한 후, 4일째에 희생시킨 것을 사용하였다.
끝으로, 실험군 모델은 하루에 한번씩 GHK-Cu를 1㎍/g 또는 10㎍/g의 투여량으로 3회 주사하고, 다음날은 LPS를 1㎍/g의 투여량으로 주사한 후, 4일째에 희생시킨 것을 사용하였다.
이때, 상기 LPS의 투여는 상기 마우스의 복강에 졸레틸(Zoletil)을 주사하여 마취시킨 후, 기관내로 LPS로 투여하는 방법으로 수행하였다.
상기 준비된 각 모델의 폐조직을 적출한 후, 폐 조직을 10%의 포르말린을 사용하여 24시간 동안 고정시킨 다음, 함수-탈수 처리를 거쳐 파라핀 블록을 제작하여 4μm 두께의 미세절편을 만들어 슬라이드글라스에 부착하였다. 제작된 슬라이드는 hematoxylin and eosin (H&E) 염색을 시행하여 광학현미경(Olympus BX53, Japan)으로 관찰하여, 폐의 손상정도를 비교하고, 이를 정량분석하였다(도 5b 내지 5g).
도 5b는 대조군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이고, 도 5c는 GHK-Cu 처리군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이며, 도 5d는 LPS 처리군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이고, 도 5e는 1㎍/g의 GHK-Cu를 투여한 실험군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이며, 도 5f는 10㎍/g의 GHK-Cu를 투여한 실험군 모델의 폐조직을 나타내는 현미경 사진이고, 도 5g는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 치료효과를 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 5g의 결과에서 보듯이, LPS의 처리에 의한 폐손상에 대하여, GHK-Cu가 농도의존적으로 치료하는 효과를 나타냄을 확인하였다.
실시예 5-2: SOD 활성에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-1에서 사용된 각 모델에서 측정된 SOD 활성을 비교하였다.
대략적으로, 실시예 5-1에서 사용된 각 모델의 폐세포를 파쇄하고, 이를 원심분리(10000 rpm, 5min, 4℃)하여, 상층액을 수득하였다. 상기 수득한 상층액을 이용하여 SOD 활성을 측정하였다(도 6a).
도 6a는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 폐세포의 SOD 활성의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6a에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델의 SOD 활성이 증가되었고, LPS 처리군 모델에서는 SOD 활성이 저하되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 저하된 SOD 활성은 GHK-Cu의 처리에 의해 회복됨을 확인하였다.
실시예 5-3: GSH 수준에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-1에서 사용된 각 모델에서 측정된 GSH 수준을 비교하였다.
대략적으로, 상기 실시예 5-2에서 수득한 상층액 20㎕, 10mM EDTA 가 포함되어 있는 0.1 M 인산 완충 용액 160㎕, 4.8mM NADPH 10㎕, 6units/㎖ GSH 환원효소 5㎕ 및 3.78mM DTNB(5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid)) 5㎕를 혼합하고, 25℃에서 10분 동안 반응시켰다. 반응 후 ELISA reader를 이용하여 450㎚에서 흡광도를 측정함으로써, GSH 수준을 산출하였다(도 6b).
도 6b는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 폐세포의 GSH 수준의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6b에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델에서 GSH 수준은 별다른 차이를 나타내지 않았고, LPS 처리군 모델에서는 GSH 수준이 저하되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 저하된 GSH 수준은 GHK-Cu의 처리에 의해 회복됨을 확인하였다.
실시예 5-4: IL-6 수준에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-1에서 사용된 각 모델에서 측정된 IL-6 수준을 비교하였다.
대략적으로, 실시예 5-1에서 사용된 각 모델을 마취시킨 후, 기관에 삽관한 후, 식염수를 주입하여 기관을 세척하였다. 세척후 회수된 기관지폐세포세척액을 원심분리(3,000 rpm, 4℃, 5분)하여 상층액을 수득하였다. 상기 수득한 상층액을 ELISA 방법에 적용하여, 이에 포함된 IL-6의 수준을 측정하였다(도 6c).
도 6c는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액에 포함된 IL-6 수준의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6c에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델에서 IL-6 수준은 별다른 차이를 나타내지 않았고, LPS 처리군 모델에서는 IL-6 수준이 급격히 증가되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 증가된 IL-6 수준은 GHK-Cu의 처리에 의해 저하되는 경향을 나타냄을 확인하였다.
실시예 5-5: TNF -α 수준에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-4에서 수득한 각 모델에서 채취한 기관지폐세포세척액의 상층액에 포함된 TNF-α 수준을 비교하였다(도 6d).
도 6d는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액에 포함된 TNF-α 수준의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6d에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델에서 TNF-α 수준은 별다른 차이를 나타내지 않았고, LPS 처리군 모델에서는 TNF-α 수준이 급격히 증가되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 증가된 TNF-α 수준은 GHK-Cu의 처리에 의해 저하되는 경향을 나타냄을 확인하였다.
실시예 5-6: MPO 활성에 미치는 GHK -Cu의 효과
LPS로 유도한 급성폐손상 모델의 병리학적 소견으로 중요한 것 중하나는 폐포안으로의 호중구(neutrophil)의 유입이다. 과다하게 호중구의 유입이 많아지면 산화스트레스가 발생되므로 폐의 손상을 가져온다고 알려져 있다. 이에 따라, GHK-Cu가 호중구의 유입을 감소시킬 수 있는지 확인하기 위하여, 호중구의 지표로 알려진 MPO 활성을 측정하였다.
대략적으로, 상기 실시예 5-4에서 수득한 각 모델에서 채취한 기관지폐세포세척액의 상층액에 포함된 MPO의 활성을 비교하였다(도 6e). 상기 MPO 활성은 상기 상층액에 O-dianisidine dihydrochloride (1.25mg/ml in PBS)와 H2O2 (0.05%)를 가하여 반응시킨 후, 450 nm에서 흡광도의 변화를 측정하여 결정하였다.
도 6e는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 MPO 활성의 변화를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6e에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델에서 MPO 활성은 별다른 차이를 나타내지 않았고, LPS 처리군 모델에서는 MPO 활성이 급격히 증가되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 증가된 MPO 활성은 GHK-Cu의 처리에 의해 농도의존적으로 저하됨을 확인하였다.
실시예 5-7: BALF내 호중구의 수준에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-4에서 수득한 각 모델에서 채취한 기관지폐세포세척액의 BALF(Bronchoalveolar lavage fluid)에 포함된 호중구의 수준을 분석하였다(도 6f).
도 6f는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 BALF(Bronchoalveolar lavage fluid)에 포함된 호중구의 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6f에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델에서 호중구 수준은 별다른 차이를 나타내지 않았고, LPS 처리군 모델에서는 호중구 수준이 급격히 증가되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 증가된 호중구 수준은 GHK-Cu의 처리에 의해 농도의존적으로 저하됨을 확인하였다.
실시예 5-8: BALF내 총 세포수에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-4에서 수득한 각 모델에서 채취한 기관지폐세포세척액의 BALF에 포함된 총 세포의 수를 분석하였다(도 6g).
도 6g는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 BALF에 포함된 총 세포수를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6g에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델에서 BALF에 포함된 총 세포수는 별다른 차이를 나타내지 않았고, LPS 처리군 모델에서는 BALF에 포함된 총 세포수가 급격히 증가되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 증가된 BALF에 포함된 총 세포수는 GHK-Cu의 처리에 의해 농도의존적으로 저하됨을 확인하였다.
실시예 5-9: BALF내 총 단백질 수준에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-4에서 수득한 각 모델에서 채취한 기관지폐세포세척액의 BALF에 포함된 총 단백질의 수준을 분석하였다(도 6h).
도 6h는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액의 BALF에 포함된 총 단백질 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 6h에서 보듯이, 대조군 모델에 비하여 GHK-Cu 처리군 모델에서 BALF에 포함된 총 단백질 수준은 별다른 차이를 나타내지 않았고, LPS 처리군 모델에서는 BALF에 포함된 총 단백질 수준이 급격히 증가되었으나, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 증가된 BALF에 포함된 총 단백질 수준은 GHK-Cu의 처리에 의해 농도의존적으로 저하됨을 확인하였다.
실시예 5-10: 신호전달 단백질 활성화에 미치는 GHK -Cu의 효과
상기 실시예 5-4에서 수득한 각 모델에서 채취한 기관지폐세포세척액의 상층액에 포함된 p65, p38, ERK 및 JNK 단백질과 이들의 인산화된 단백질의 수준을 분석하였다(도 6i 및 6j).
도 6i는 LPS의 처리에 의한 급성폐손상 모델에서 GHK-Cu의 처리에 따른 기관지폐세포세척액에 포함된 p65, p38, ERK 및 JNK 단백질과 이들의 인산화된 단백질의 수준을 나타내는 웨스턴블럿 분석결과를 나타내는 사진이고, 도 6j는 상기 인산화된 단백질의 수준을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6i 및 6j에서 보듯이, LPS 처리군 모델에서는 인산화된 p65, p38, ERK 및 JNK 단백질의 수준이 모두 증가하였고, 실험군 모델에서 보듯이, 상기 증가된 인산화된 단백질 중에서, p65, p38 및 JNK 단백질의 수준은 GHK-Cu의 처리에 의해 농도의존적으로 저하된 반면, ERK 단백질의 수준은 GHK-Cu를 처리하여도 저하되지 않음을 확인하였다.
Raw 264.7 세포를 대상으로 GHK-Cu의 효능을 분석한 실시예 4의 결과와 생체내에서 GHK-Cu의 효능을 분석한 실시예 5-10의 결과에 다소 차이가 있으나, 이는 시료의 차이에 기인한 것으로 분석되었다.
즉, 단일세포인 Raw 264.7 세포와는 달리, 생체내에는 마크로파지 세포 이외에도 다양한 종류의 세포가 함께 공존하고 있기 때문에, GHK-Cu의 투여에 대한 반응성이 구별되는 것으로 분석되었다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (4)

  1. 쿠퍼펩타이드인 GHK-Cu를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함하는 것인, 약학 조성물.
  3. 쿠퍼펩타이드인 GHK-Cu를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 개선용 건강기능성 식품 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항의 약학 조성물을, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 발병 가능성이 있거나, 또는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군을 앓고 있는 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군의 예방 또는 치료방법.
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