KR101743572B1 - 백토와 미네랄 수를 이용한 당나귀 유래 아교 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
백토와 미네랄 수를 이용한 당나귀 유래 아교 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101743572B1 KR101743572B1 KR1020170047379A KR20170047379A KR101743572B1 KR 101743572 B1 KR101743572 B1 KR 101743572B1 KR 1020170047379 A KR1020170047379 A KR 1020170047379A KR 20170047379 A KR20170047379 A KR 20170047379A KR 101743572 B1 KR101743572 B1 KR 101743572B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- skin
- donkey
- cosmetic composition
- mineral water
- glue
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
- A61K8/981—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of mammals or bird
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
본 발명은 백토와 미네랄 수의 미네랄 성분을 이용하여 당나귀 유래 아교를 제조하는 방법 및 그 아교를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는 당나귀 껍질을 백토와 미네랄 수의 반죽으로 감싸 열을 가한 후, 미네랄수로 추출함으로써 당나귀의 독성을 낮추고 항산화 효과, 피부 자극 완화 효과, 피부 세포 재생 활성, 피부주름 개선, 피부 보습 및 피부 장벽 강화 효과가 우수한 화장료 조성물을 제조하는 기술에 관한 것이다.
Description
본 발명은 백토와 미네랄 수를 이용하여 당나귀 유래 아교를 제조하는 방법 및 그 아교를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는 당나귀 유래 아교를 제조함에 있어서 백토와 미네랄 수를 이용하여 추출함으로써 항산화효과, 피부 자극 완화 효과, 피부 세포 재생 활성, 피부 보습 및 피부 장벽 강화 효과가 우수한 아교를 제조하고 이를 피부 개선용 화장료로 이용하는 기술에 관한 것이다.
피부노화는 유전적, 환경적 등의 다양한 요인에 의해 영향을 받는데 크게 두 종류로 나눌 수 있다. 하나는 내인성 노화(intrinsic aging)로 이는 자연노화로써 유전정보에 따라 시간이 지나면서 일어나는 노화현상이며, 다른 하나는 외인성 노화(extrinsic aging)로 광노화(photoaging)라고도 하며, 외부환경 요인, 그 중에서도 햇빛에 존재하는 자외선에 의해 일어나는 노화 현상을 말한다.
자외선에 의해 활성산소가 발생하고 광노화가 일어나게 되는 것이다. 이들 활성산소 중 O2- 및 ·OH는 피부 광 손상에 있어서 중요하게 작용하여 피부 항산화제 파괴, 지질 과산화반응의 개시, 단백질 및 DNA 산화, 결합 조직 성분의 사슬절단 및 비정산적인 교차결합에 의한 주름생성, 멜라닌 생성 과정 등에 참여하여 피부 노화를 가속화시킨다. 따라서 자외선으로부터 피부의 노화를 억제하고 지연시키는 것이 중요하다.
한편 피부는 여러 가지 유해물질 또는 유해 작용에 대한 보호막으로서의 역할을 한다. 뿐만 아니라 몸속의 수분 손실을 막아주며 체온을 조절하는데 매우 중요한 역할을 담당한다. 이런 피부 장벽 기능이 약해지면 수분이 손실이 되어 피부가 건조해지고, 외부 자극으로부터 쉽게 민감해지는 등 면역력이 약화되어 여러 피부 염증 및 피부 질환을 유발한다.
본 발명자들은 노화를 억제하고 피부 장벽을 강화하는 당나귀 아교 소재의 제조 방법을 연구 하던 중, 추출과정 중에 백토와 미네랄 성분을 가하여 추출하는 경우 미네랄 성분에 의해 피부 자극이 감소되고 아교의 추출수율 및 단백질 함유량 및 순도가 증가됨을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 백토 및 미네랄 수를 이용하여 당나귀 유래 아교를 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 상기 방법에 의하여 제조되어 피부 자극 및 세포 독성이 낮고 피부 재생효과, 피부 보습 및 피부 장벽 강화 효과가 우수한 당나귀 유래 아교 성분을 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, (A)당나귀 껍질의 이물질을 제거하고 당나귀 냄새를 제거하는 당나귀 껍질 전처리 단계; (B)백토와 미네랄 수(水)를 1~3:1 중량비로 혼합하여 반죽하는 단계; (C)상기 백토 반죽으로 당나귀 껍질을 감싼 후 열을 가하는 단계; 및 (D)백토를 제거하고 당나귀 껍질을 미네랄 수(水)로 추출하는 단계를 포함하는 당나귀 유래 아교의 제조방법이 제공된다.
상기 (C)단계에서 상기 당나귀 껍질과 백토반죽은 1:4~6의 중량비로 사용하며, 50~80℃에서 1~2시간 열을 가하는 것이 바람직하다.
바람직하게는 상기 (D)단계에서 추출은 당나귀 껍질을 4~5배 중량의 미네랄 수(水)에 침지한 후, 80~90℃에서 4~5시간 동안 환류 추출하는 것임을 특징으로 한다.
상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 상기 제조방법에 의해 제조된 아교를 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~15 중량% 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 화장료 조성물은 피부 자극 완화 및 피부 재생용, 피부보습용, 피부 장벽 강화용임을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 제조방법에 의하여 제조되는 당나귀 유래 아교는 추출수율이 높고 세포 독성이 낮으며, 항산화 효과, 피부 세포 재생 효과, 보습 및 장벽 강화 효과가 우수하여, 피부 자극 완화 및 피부 재생용, 피부보습용, 피부 장벽 강화용 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명은 아교의 제조과정 중에 백토와 미네랄 수를 사용하는 것을 특징으로 한다. 백토(terra alba, 白土)는 백선토, 백악이라고도 하며 백색의 점토로 도자기를 만드는데 쓰는 흙으로 주원료는 카올리나이트와 할로이사이트이다. 한국에서는 온양, 아산, 광주, 포천, 양구 등에서 채토되는 것을 많이 이용한다. 동의보감에서는 약재로 쓰이는 흙으로 기록하고 있으며, 성질이 따뜻하고, 맛은 쓰고 매우며, 독이 없고 설사와 적리를 멈추게 한다.
미네랄 수(mineral water)는 칼슘, 마그네슘, 칼륨 등의 미네랄 성분이 미량 함유된 물로 광천수(鑛泉水)라고도 한다. 우리 몸의 여러 가지 생리기능을 조절, 유지하는 중요한 역할을 하는 미네랄 구성요소에는 칼슘(Ca), 칼륨(K), 마그네슘(Mg), 나트륨(Na), 염소(Cl), 인(P), 아연(Zn), 철(Fe) 등이 그것이다. 본 발명에 사용되는 미네랄 워터는 칼슘(Ca) 0.01~100 ppm, 칼륨(K) 0.01~100 ppm, 마그네슘(Mg) 0.001~10 ppm, 나트륨(Na) 0.01~100 ppm, 망간(Mn) 0.01~100 ppm, 아연(Zn) 0.001~10 ppm을 포함하는 물을 의미한다. 직접 취수하거나 제조하여 사용할 수 있으며, 본 발명에서는 칼슘(Ca) 2.0 ppm, 칼륨(K) 1.0 ppm, 마그네슘(Mg) 0.5 ppm, 나트륨(Na) 10 ppm, 망간(Mn) 0.1ppm, 아연(Zn) 1.0 ppm 정도를 함유한 미네랄수를 사용하였다.
본 발명에 따르면, (A)당나귀 껍질의 이물질을 제거하고 당나귀 냄새를 제거하는 당나귀 껍질 전처리 단계; (B)백토와 미네랄 수(水)를 1~3:1 중량비로 혼합하여 반죽하는 단계; (C)상기 백토 반죽으로 당나귀 껍질을 감싼 후 열을 가하는 단계; 및 (D)백토를 제거하고 당나귀 껍질을 미네랄 수(水)로 추출하는 단계를 포함하는 당나귀 유래 아교의 제조방법이 제공된다.
각 단계를 보다 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
먼저, 당나귀 껍질을 추출하기 전에 잔털과 이물질을 제거하고, 당나귀의 냄새를 제거하는 전처리를 수행한다. 전처리를 수행 후 적당한 크기로 잘라 냉장 보관한다.
백토와 미네랄 수를 1~3:1의 중량비로 혼합하여 백토반죽을 제조한다. 더욱 바람직하게는 2:1의 중량비로 혼합하여 제조한다.
이어 상기 백토 반죽으로 당나귀 껍질을 감싸고 열을 가한다. 구체적으로는 이때, 상기 당나귀 껍질과 백토반죽은 1:4~6의 중량비로 사용하며, 50~80℃에서 1~2시간 열을 가하는 것이 바람직하다.
열을 가한 후, 백토를 제거하고 당나귀 껍질을 미네랄 수로 추출한다. 이때, 구체적으로는 당나귀 껍질을 4~5배 중량의 미네랄 수에 침지한 후, 80~90℃에서 4~5시간 동안 환류 추출하는 것이 바람직하다. 바람직하게는 당나귀 껍질을 상온에서 3~4시간 침지한 후, 환류 추출한다.
상기 제조방법으로 제조된 당나귀 유래 아교는 화장료조성물 총 중량에 대하여 0.005~50 중량%, 바람직하게는 0.01~15 중량% 함유된다. 당나귀 유래 아교를 활성성분으로 포함하는 화장료 조성물은 피부의 자극이 낮고 보다 우수한 피부 세포 재생 효과, 피부 보습 및 피부 장벽 강화 효과를 나타내었다.
본 발명 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 화장품 이외에도 피부 과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.
또한, 본 발명에서 상기 화장료 조성물의 제형은 제한되지는 않으나 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 구성된 그룹에서 선택된 어느 하나의 제형으로 적용되어질 수 있다.
[실시예]
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 시험예에 의거하여 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명은 하기 실시예에 의해 한정되는 것이 아니다.
제조예 1: 당나귀 껍질 전처리
당나귀 껍질의 잔털과 이물질을 제거한 뒤 쌀 전분과 굵은 소금을 1:1로 혼합하여 첨가하여 3회 세척하여 당나귀 냄새를 제거하였다. 당나귀 껍질 2kg을 가로, 세로 각 2cm가 되게 잘라 냉장 보관하였다.
제조예 2: 백토 반죽 제조
백토와 미네랄 수를 2:1의 중량비로 혼합하여 백토 반죽을 제조하였다.
실시예 1: 백토 및 미네랄 수로 추출한 당나귀 유래 아교성분 제조
상기 제조예 1의 당나귀 껍질을 6배 중량의 백토 반죽(제조예 2)으로 감싼 후 밀폐된 용기에 넣어 완전히 밀봉한 다음, 65℃에서 2시간동안 열처리하였다. 백토 제거 후 열 처리한 당나귀 껍질을 5배 중량의 미네랄 수에 넣고 상온에서 3시간 침지 후, 85℃에서 5시간 동안 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지 (Qualitive Filter Pater No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 60℃ 이하에서 감압농축하여 제조하였다.
비교예 1: 당나귀 유래 아교 성분 제조
상기 제조예 1의 당나귀껍질을 5배 중량에 해당하는 정제수에 넣고 상온에서 3시간 침지 후, 85℃에서 5시간 동안 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지 (Qualitive Filter Pater No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 60℃ 이하에서 감압 농축하여 제조하였다.
비교예 2: 미네랄수로 추출한 당나귀 유래 아교 성분 제조
상기 제조예 1의 당나귀껍질을 5배 중량에 해당하는 미네랄 수에 넣고 상온에서 3시간 침지 후, 85℃에서 5시간 동안 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지 (Qualitive Filter Pater No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 60℃ 이하에서 감압 농축하여 제조하였다.
비교예 3: 백토처리 한 당나귀 유래 아교 성분 제조
상기 제조예 1의 당나귀 껍질을 6배 중량의 상기 제조예 2의 백토 반죽으로 감싼 후 밀폐된 용기에 넣어 완전히 밀봉한 다음, 65℃에서 2시간동안 열처리하였다. 열 처리한 당나귀 껍질을 5배 중량의 정제수에 넣고 상온에서 3시간 침지 후, 85℃에서 5시간 동안 환류 추출하였다. 추출한 뒤 여과지(Qualitive Filter Pater No.2)를 이용하여 여과한 후 여액을 60℃ 이하에서 감압 농축하여 제조하였다.
시험예 1: 당나귀 유래 아교 단백질 측정
상기 실시예 및 비교예의 방법으로 제조된 당나귀 유래 아교의 추출 수율 및 단백질 함량을 측정하였다.
시료명 | 추출 수율(%) | 단백질 함량(%) |
실시예 1 | 8.8 | 41.69 |
비교예 1 | 2.6 | 32.78 |
비교예 2 | 3.8 | 33.02 |
비교예 3 | 7.3 | 40.97 |
상기 표 1에서 확인되는 바와 같이, 백토와 미네랄 수를 이용하여 추출하는 본 발명의 실시예 1에서 비교예들에 비하여 아교의 추출 수율과 단백질 함량이 높게 나타났다.
시험예 2: 시료의 세포독성 확인 시험
상기 실시예 및 비교예에서 제조된 아교 성분 시료 처리에 의한 피부 세포의 세포독성을 확인하였다. 사람 유래 섬유아세포 2×105 cells/well의 농도로 96 well plate에 배양하고 10% FBS를 함유하는 IMDM 배지 0.2㎖를 공급한 후 24시간 동안 CO2 배양기에서 배양하였다. 여기에 DMSO에 녹인 시료용액을 처리 한 다음 24시간 동안 배양하였다. 이후, 세포의 생존력을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1㎖을 가한 후, 4시간 동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5㎖를 넣어 형성된 포마잔을 ELISA를 사용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 하기 식에 의해 세포생존율(%)을 측정하였으며, 세포의 생존에 영향을 미치지 않는 시료의 농도를 결정하였다.
세포 생존율(
%
)=[(St-Bo/(
Bt
-Bo)]×100
Bo : 세포배양 배지만을 발색 반응한 웰의 570nm 흡광도
Bt : 시료를 처리하지 않고 발색 반응한 웰의 570nm 흡광도
St : 시료를 처리하고 발색 반응한 웰의 570nm 흡광도
시료명 | 100% 세포 생존 농도 (%) |
실시예 1 | 0.50 |
비교예 1 | 0.01 |
비교예 2 | 0.01 |
비교예 3 | 0.10 |
상기 표 2에서 알 수 있듯이 백토 및 미네랄 수로 추출한 실시예 1의 당나귀 유래 아교 시료에서 100% 세포생존농도가 0.5%로 세포 독성이 크게 개선되어 상대적으로 피부 자극 유발 가능성이 낮고 안전한 것으로 확인되었다.
시험예 3: 자외선 조사에 의한 세포 독성 완화 효과
사람 유래 섬유아세포 2×105 cells/well의 농도로 96 well plate에 배양하고 10% FBS를 함유하는 IMDM 배지 0.2㎖를 공급한 후 24시간 동안 CO2 배양기에서 배양하였다. 여기에 DMSO에 녹인 시료용액을 처리 한 다음 UVB를 10분간 조사한 후 24시간 동안 배양하였다. 이후, 세포의 생존력을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1㎖을 가한 후 4시간 동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5㎖를 넣어 형성된 포마잔을 ELISA를 사용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 Ascorbic acid를 사용하였다.
시료 농도 (㎍/㎖) |
세포 생존율(%) | ||||
실시예 1 | 비교예 1 | 비교예 2 | 비교예 3 | Ascorbic acid | |
0 | 44.8 | 44.8 | 44.8 | 44.8 | 44.8 |
50 | 52.5 | 46.0 | 46.2 | 51.9 | 53.7 |
100 | 61.9 | 51.9 | 52.6 | 59.6 | 61.2 |
500 | 75.6 | 58.7 | 60.7 | 73.1 | 73.0 |
1000 | 82.3 | 61.1 | 68.4 | 79.6 | 79.9 |
상기 표 3에서 확인되는 바와 같이, 실시예 1의 백토처리 및 미네랄수로 추출한 당나귀 유래 아교 시료에서 가장 우수한 세포독성 완화 효과를 나타냈으며, Ascorbic acid 보다도 우수한 세포독성 완화 효과를 나타내었다.
시험예 4: NBT법을 이용한 항산화 효과 측정 실험
상기 실시예 및 비교예에서 수득한 시료의 항산화 효과를 확인하기 위해 실험실 조건에서 다른 항산화제 즉, Ascorbic acid를 비교샘플로 하여, NBT법을 이용하여 항산화 활성을 측정하였다. 항산화 효과를 측정하기 위해서 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 생성되는 활성산소를 NBT법에 의해 측정하고 피검물질이 활성 산소를 제거하는 효과, 즉 활성산소 소거효과를 평가하였다. 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 생성된 활성산소를 니트로블루테트라졸리움(Nitro Blue Tetrazolium;NBT)과 반응시켜 이것에 의해 생성되는 청색을 파장 560nm에서 측정하는 것으로 활성산소 소거율을 측정하였으며, 구체적인 활성산소 소거율 측정방법은 다음과 같다. 바이알(5ml vial)에 0.05M Na2CO3 2.4ml, 3mM 크산틴 용액 0.1ml, 3mM EDTA 용액 0.1ml, BSA 용액 0.1ml 및 0.72mM NBT 용액 0.1ml를 가하고, 여기에 DMSO(dimethyl sulfoxide)에 0.1(wt/v)%농도로 제조한 시료용액 0.1ml을 첨가하고 25℃에서 10분간 방치한다. 그 후 크산틴 옥시다제 용액 0.1ml을 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 20분간의 배양을 개시한다. 그 후 6Mm CuCl2 용액 0.1ml를 가하여 반응을 정지시키고 560nm에서의 흡광도St를 측정한다. 공시험은 시료용액 대신에 증류수를 사용한 것을 상기와 똑같이 조작해 흡광도 Bt를 측정한다. 역시, 시료용액의 블랭크(Blank)는 크산틴 옥시다제 용액 대신에 증류수를 사용해 똑같이 조작하여 흡광도 Bo를 측정한다. 효과의 결과는 하기 식에 의하여 산출하였으며 결과는 하기 표 4에 나타내었다.
억제율(
%
)=[1-(St-So)/(
Bt
-Bo)]×100
St : 시료용액의 효소 반응 후의 560nm에서의 흡광도
Bt : 공시험용액의 효소 반응 후의 560nm에서의 흡광도
So : 시료용액의 효소 무첨가시 반응전의 560nm에서의 흡광도
Bo : 공시험용액의 효소 무첨가시 반응전의 560nm에서의 흡광도
시료명 | 처리 농도 (%) | 항산화 효과(%) |
실시예 1 | 0.1 | 92.6 |
비교예 1 | 0.1 | 81.8 |
비교예 2 | 0.1 | 87.4 |
비교예 3 | 0.1 | 91.2 |
Ascorbic acid | 0.1 | 90.3 |
상기 표 4에서 확인되는 바와 같이 백토처리 및 미네랄 수로 추출한 당나귀 유래 아교 시료인 실시예 1에서 가장 우수한 항산화 효과를 나타냈으며, Ascorbic acid 보다도 우수한 항산화 효과를 나타내었다.
시험예 5: Hyaluronic acid 생성량 측정
상기 실시예에서 제조된 시료를 사용하여 Hyaluronic acid 생성량을 측정하였다. HaCaT 세포를 6 well plate에 1×106cells/well의 농도로 분주하여 배양한 후, FBS가 첨가되지 않은 배지로 교체하여 18시간 starvation 시키고, 24시간 동안 배양하였다. HaCaT 세포에 각 시료 50ug/ml씩 처리하고, 24시간 배양 한 후 회수한 배양액은 ELISA kit를 이용하여 hyaluronic acid(HA)의 생성량을 측정하였다.
시료명 | 처리 농도 (%) | HA 생성율 (%) |
실시예 1 | 0.1 | 55.8 |
비교예 1 | 0.1 | 44.1 |
비교예 2 | 0.1 | 47.6 |
비교예 3 | 0.1 | 53.3 |
히알루론산 | 0.05 | 54.0 |
상기 표 5에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리시, 백토로 감싸 열처리한 실시예 1 및 비교예 3에서 우수한 Hyaluronic acid 생성율을 보였으며, 그 중에서도 미네랄 수 추출을 병행한 실시예 1에서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
시험예 6: 콜라겐 생합성 촉진 효과 시험
섬유아세포(CCD-986Sk)를 10% FBS가 첨가된 IMDM 배지를 이용하여 5×105 cell/well로 조절한 후 12 well plate에 접종하고 18시간 동안 배양하였다. 배양한 뒤, 상기 실시예 및 비교예의 시료를 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction)을 통해 콜라겐(collagen)의 발현 증가율을 확인하였다. 콜라겐(Collagen) 발현 증가율은 하기 식에 의해 산출되었고, 대조군으로는 아데노신(Adenosine)을 사용하였다.
Collagen 발현율(
%
)=(시료 collagen
발현양
/대조군 collagen
발현양
)×100
시료명 | 처리 농도 (%) | Collagen 발현율(%) |
실시예 1 | 0.1 | 87.5 |
비교예 1 | 0.1 | 78.3 |
비교예 2 | 0.1 | 80.2 |
비교예 3 | 0.1 | 84.9 |
아데노신 | 0.05 | 81.7 |
상기 표 6에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 백토로 감싸 열처리한 실시예 1, 비교예 3에서 아데노신 보다 우수한 콜라겐 발현 효과를 나타내었으며, 미네랄 수로 추출한 실시예 1에서 더욱 우수한 효과를 나타내었다.
시험예 7: 피부 세포 재생 효과 확인
상기 당나귀 껍질 추출물의 피부 재생 효과를 확인하기 위해 wound healing assay를 수행하였다. 각질형성세포(HaCaT)를 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 5×105 cell/well로 조절한 후 6 well plate에 접종하고 18시간 동안 배양하였다. 6 well plate에 가득 자란 세포에 스크래치를 내어 세포의 일부분을 6 well plate 바닥에서 떨어지게 한 뒤, 상기 실시예 및 비교예의 시료를 처리하여 18시간 배양하였다. 세포가 재생된 정도를 확인하여 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다. 세포재생율은 하기 식에 의해 산출되었고, 정상 각질형성세포를 기준으로 하였다.
세포
재생율
(
%
)=(시료 세포
재생율
/대조군 세포
재생율
)×100
시료명 | 처리 농도 (%) | 피부 세포 재생율(%) |
실시예 1 | 0.1 | 90.6 |
비교예 1 | 0.1 | 80.5 |
비교예 2 | 0.1 | 83.1 |
비교예 3 | 0.1 | 88.3 |
상기 표 7에서 확인되는 바와 같이 동일 농도 처리 시, 실시예 1과 비교예 3에서 우수한 피부 세포 재생효과를 나타내었다. 특히, 실시예 1에서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
실시예 2: 당나귀 유래 아교성분을 함유 크림 제조
상기 실시예 1의 아교를 포함하는 크림을 하기 표 8의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성 분 | 함량(중량%) | |
대조예 1 | 실시예 2 | |
실시예 1 | - | 2.0 |
친유형 모노스테아린산글리세린 | 2.0 | 2.0 |
스테아릴알콜 | 2.2 | 2.2 |
스테아린산 | 1.5 | 1.5 |
밀납 | 1.0 | 1.0 |
폴리솔베이트 60 | 1.5 | 1.5 |
솔비탄스테아레이트 | 0.6 | 0.6 |
정화식물유 | 1.0 | 1.0 |
스쿠알란 | 3.0 | 3.0 |
광물유 | 5.0 | 5.0 |
트리옥타노인 | 5.0 | 5.0 |
디메치콘 | 1.0 | 1.0 |
소듐마그네슘실리케이트 | 0.1 | 0.1 |
글리세린 | 5.0 | 5.0 |
베타인 | 3.0 | 3.0 |
트리에탄올아민 | 1.0 | 1.0 |
소듐히아루로네이트 | 4.0 | 4.0 |
방부제, 향, 색소 | 미량 | 미량 |
정제수 | 잔량 | 잔량 |
합계 | 100 | 100 |
시험예 8: 피부 자극 완화 효과 확인
현재 피부 알레르기 증상이 없는 20 내지 30대 남녀 10명을 대상으로 하완의 안쪽 부위에 테잎 스트리핑 법(Tape Stripping Method)을 통한 피부자극을 유발한 후, 본 발명에 따른 백토처리 및 미네랄수로 추출한 당나귀 유래 아교 성분을 함유한 화장료와 함유되지 않는 화장료를 도포하여 유발된 자극이 진정되는 정도를 상대 평가하였다. 먼저 하완의 안쪽 부위 두 곳에 일반 스카치 테잎으로 30회 테이핑을 하여 피부 홍반을 유발하였다. 홍반 유발된 후, 본 발명에 따른 백토처리 및 미네랄수로 추출한 당나귀 유래 아교 성분을 함유한 화장료를 도포하였으며, 본 발명에 따른 아교성분을 함유하지 않은 화장료를 도포하였다. 도포 후 3시간 후 피부자극 정도를 평가하였다.
<피부자극정도(홍반) 평가>
0 (무반응) 1 (매우 경미한 홍반흔적) 2 (희미한 또는 가벼운 홍반)
3 (경계가 뚜렷하나 약한 홍반) 4 (뚜렷한 홍반) 5 (심한 홍반)
시료명 | 피부자극 정도 | |
좌 | 우 | |
대조예 1 | 2 | 1 |
실시예 2 | 0 | 0 |
상기 표 9에서 확인되는 바와 같이, 본 발명 백토 및 미네랄 수를 이용하여 추출한 당나귀 유래 아교 성분을 함유하는 크림 조성물은 이를 함유하지 않은 대조예 1에 비해 피부자극완화 효과가 우수하였다.
시험예 9: 피부 장벽기능 회복 효과
실험은 사람의 상박에 태핑 스티리핑 방법(Taping stripping Method)을 이용하여 피부의 장벽을 손상시킨 후, 표피 수분 손실량(TEWL,transdermal water loss)을 servomed사(스웨덴) evaporimeter EP1으로 측정하여 4.0g/㎡/h에 도달하면, 상기 실시예 2에서 제조한, 본 발명의 백토 및 미네랄 수로 추출한 당나귀 유래 아교 성분을 함유한 크림을 각각을 5 ㎠ 면적에 도포한 후, 표피 수분 손실량을 2시간, 4시간, 6시간, 8시간 경과 후에 측정하여 감소하는 정도를 평가함으로써 장벽기능이 회복되는 정도를 평가하였다. 결과는 초기 손상된 장벽 상태에서의 표피 수분 손실량을 기준(100%)으로 하여 시간에 따른 변화를 비교한 후, 하기 표 10에 나타내었다.
시료 | 0시간 | 2시간 | 4시간 | 6시간 | 8시간 |
대조예 1 | 83 | 63 | 54 | 47 | 38 |
실시예 2 | 83 | 41 | 32 | 28 | 21 |
상기 표 10의 결과에서 보는 바와 같이, 피부 장벽기능 회복 시험 결과 본 발명 백토 및 미네랄 수로 추출한 당나귀 유래 아교 성분을 함유하는 크림 조성물은 이를 함유하지 않은 대조예 1에 비해 우수한 피부 장벽기능 회복을 보였다.
실시예 3: 유연 화장수
본 발명의 백토처리 및 미네랄수로 추출한 당나귀 유래 아교 성분(실시예 1)을 함유한 유연 화장수를 하기의 표 11의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분(중량%) | 실시예 3 |
실시예 1 | 2.0 |
1,3-부틸렌 글리콜 | 5.2 |
올레일알코올 | 1.5 |
에탄올 | 3.2 |
폴리솔베이트 20 | 3.2 |
벤조페논-9 | 2.0 |
카르복실비닐폴리머 | 1.0 |
글리세린 | 3.5 |
향 | 미량 |
방부제 | 미량 |
정제수 | 잔량 |
계 | 100 |
실시예 4: 영양 화장수(밀크로션)
본 발명의 백토처리 및 미네랄수로 추출한 당나귀 유래 아교 성분(실시예 1)을 함유한 영양 화장수를 하기의 표 12의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분(중량%) | 실시예 4 |
실시예 1 | 2.0 |
글리세린 | 5.1 |
프로필렌글리콜 | 4.2 |
토코페릴아세테이트 | 3.0 |
유동파라핀 | 4.6 |
트리에탄올아민 | 1.0 |
스쿠알란 | 3.1 |
마카다미아너트오일 | 2.5 |
폴리솔베이트 20 | 1.6 |
솔비탄세스퀴롤레이트 | 1.6 |
프로필파라벤 | 0.6 |
카르복실비닐폴리머 | 1.5 |
향 | 미량 |
방부제 | 미량 |
정제수 | 잔량 |
계 | 100 |
Claims (10)
- (A)당나귀 껍질의 이물질을 제거하고 당나귀 냄새를 제거하는 당나귀 껍질 전처리 단계;
(B)백토와 미네랄 수(水)를 1~3:1 중량비로 혼합하여 반죽하는 단계;
(C)상기 백토 반죽으로 당나귀 껍질을 감싼 후 열을 가하는 단계; 및
(D)백토를 제거하고 당나귀 껍질을 미네랄 수(水)로 추출하는 단계를 포함하는 당나귀 유래 아교의 제조방법. - 제1항에 있어서, 상기 (C)단계에서 상기 당나귀 껍질과 백토반죽은 1:4~6의 중량비로 사용하며, 50~80℃에서 1~2시간 열을 가하는 것임을 특징으로 하는 당나귀 유래 아교의 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 (D)단계에서 추출은 당나귀 껍질을 4~5배 중량의 미네랄 수(水)에 침지한 후, 80~90℃에서 4~5시간 동안 환류 추출하는 것임을 특징으로 하는 당나귀 유래 아교의 제조방법.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 의하여 제조된 상기 당나귀 유래 아교를 화장료 조성물 전체 중량에 대해 0.01~15 중량% 포함하는 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부자극완화용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항산화용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부보습용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부세포재생용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 주름 개선용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 장벽 강화용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020170047379A KR101743572B1 (ko) | 2017-04-12 | 2017-04-12 | 백토와 미네랄 수를 이용한 당나귀 유래 아교 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020170047379A KR101743572B1 (ko) | 2017-04-12 | 2017-04-12 | 백토와 미네랄 수를 이용한 당나귀 유래 아교 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR101743572B1 true KR101743572B1 (ko) | 2017-06-05 |
Family
ID=59222938
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020170047379A KR101743572B1 (ko) | 2017-04-12 | 2017-04-12 | 백토와 미네랄 수를 이용한 당나귀 유래 아교 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR101743572B1 (ko) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20220108628A (ko) | 2021-01-27 | 2022-08-03 | 주식회사 한국인삼공사 | 피부 탄력 또는 보습 개선용 식품 조성물 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101525876B1 (ko) | 2015-02-11 | 2015-06-03 | 소망화장품주식회사 | 당나귀 껍질로부터 아교를 제조하는 방법 및 그 아교를 함유하는 화장료 조성물 |
KR101550275B1 (ko) | 2015-04-07 | 2015-09-07 | 주식회사 더마랩 | 거북으로부터 아교를 제조하는 방법 및 그 아교를 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 |
-
2017
- 2017-04-12 KR KR1020170047379A patent/KR101743572B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101525876B1 (ko) | 2015-02-11 | 2015-06-03 | 소망화장품주식회사 | 당나귀 껍질로부터 아교를 제조하는 방법 및 그 아교를 함유하는 화장료 조성물 |
KR101550275B1 (ko) | 2015-04-07 | 2015-09-07 | 주식회사 더마랩 | 거북으로부터 아교를 제조하는 방법 및 그 아교를 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20220108628A (ko) | 2021-01-27 | 2022-08-03 | 주식회사 한국인삼공사 | 피부 탄력 또는 보습 개선용 식품 조성물 |
KR20240029006A (ko) | 2021-01-27 | 2024-03-05 | 주식회사 한국인삼공사 | 피부 탄력 또는 보습 개선용 식품 조성물 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101176529B1 (ko) | 황칠나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR101873028B1 (ko) | 허브 복합 추출물을 함유하는 화장료 조성물 | |
US5916576A (en) | Method of scavenging free radicals using orange extract | |
JP3635081B2 (ja) | 美白剤、抗酸化剤、コラゲナーゼ活性阻害剤、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤、老化防止剤、皮膚外用剤、化粧料及び食料品 | |
JPS6234005B2 (ko) | ||
KR101014219B1 (ko) | 항산화제, 피부외용제, 화장료 및 식료품 | |
KR102063686B1 (ko) | 콩뿌리 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
KR101743572B1 (ko) | 백토와 미네랄 수를 이용한 당나귀 유래 아교 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 | |
KR101987421B1 (ko) | 브라질넛씨 오일, 아프리칸월넛 오일, 망고 추출물 및 딸기 추출물을 포함하는 항산화 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물 | |
KR20090081631A (ko) | 미선나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR101817129B1 (ko) | 구주소나무 솔방울 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR100926073B1 (ko) | 비타민 c와 백년초 꽃 추출물을 함유하는 각질박리용 화장료 조성물 | |
KR100903654B1 (ko) | 하고초 추출물과 아데노신을 함유하는 화장료 조성물 | |
KR20110037462A (ko) | 님추출물을 함유하는 피부 염증 완화용 화장료 조성물 | |
KR101445642B1 (ko) | 배롱나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR101931654B1 (ko) | 항산화 및 피부미백용 누에고치 발효물의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR100530669B1 (ko) | 락테이트 및 감초 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료조성물 | |
KR101086227B1 (ko) | 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR20110103604A (ko) | 피부보호 및 개선용 조성물 | |
KR101525090B1 (ko) | 피부미백용 화장료 조성물 | |
KR101926782B1 (ko) | 갯취 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 | |
KR101664878B1 (ko) | 삼채 분획물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
KR20150034371A (ko) | 닭의장풀 추출물을 함유하는 주름 개선 화장료 조성물 | |
JP5557973B2 (ja) | 皮膚外用剤 | |
KR20150132753A (ko) | 항산화 및 항균 효과를 가지는 상엽 초임계 추출물의 제조 방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
A302 | Request for accelerated examination | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |