KR101715431B1 - 식물 병원균 억제제 조합물 및 사용 방법 - Google Patents
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Abstract
식물 식물병원균에 대한 내성을 유도하는 안트라퀴논 유도체를 포함하는 식물 추출물, 항미생물제, 생물학적 제어제 및/또는 살진균 활성을 가진 계면활성제를 사용하여 식물 병원균 감염을 조절하는데 사용하는 조합물, 조성물 및 방법에 관한 것이다.
Description
본원에서, 식물의 식물병원균에 대한 내성을 유도하는 안트라퀴논 유도체 및 항미생물제, 생물학적 조절제 및/또는 살진균 활성을 가진 계면활성제를 포함하는 식물 추출물을 사용하는 식물 병원균 감염을 조절하기 위한 조합물, 조성물 및 사용 방법이 개시된다.
식물 병원균에 대한 식물 내성
식물은 감염제, 예컨대 박테리아, 진균 및 바이러스에 의해 야기되는 질병에 대한 내성을 위한 매우 효과적인 메카니즘을 발달시켜왔다. 이 내성은 몇 가지 메카니즘에 의해 야기될 수 있으며, 그 중 가장 잘 알려진 것은 전신 획득 내성(SAR; Ross, 1961 ; Durrant and Dong, 2004) 및 전신 유도 내성 (ISR; van Loon et al., 1998)이다. 가장 단순한 경우에서, 유도인자는 식물 병원균 그 자체이며, 다른 경우에서, 유도인자는 화학적 화합물 (살리실산, BTH로도 알려진 벤조(1,2,3)티아디아졸-7-카르보티오산 S-메틸 에스테르) 또는 물리적 영향, 예컨대 물 또는 열 스트레스 (Walters et al., 2005)일 수 있다. 전신 유도 내성이 대사 섭동(metabolic perturbation)의 낮은 수준의 영속성 및 점진적 발현에 의존하는 것으로 보여진다. 적용 부위에서 유출시키거나 국소 보호에 관련있을 수 있는 파이토알렉신 축적의 유출자(elicitor)와 달리, 전신 내성의 유도인자는 식물을 감염 후 빠르게 전체로써 반응하도록 민감하게 한다. 상기 반응은 파이토알렉신 축적, 리그닌화 및 키티나아제 및 글루카나아제의 증진된 활성을 포함한다.
마론 바이오 이노베이션스, 인크.(Marrone Bio Innovations Inc.)의 MILSANA® 및 REGALIA®로 판매되는 자이언트 노트위드 (레이노우트리아 사카리넨시스, Reynoutria sachalinensis)로부터 추출물은 주로 식물에 균류에게 유독한 페놀계 화합물의 축적을 유도시킴으로써 큐커빗(cucurbit) 및 다른 작물에의 백분병(powdery mildew) 및 다른 식물 질병의 조절을 제공한다 (Daayf et al., 1995; Wurms et al. 1999; Schmitt, 2002). 최근, 제형화된 자이언트 노트위드 추출물은 밀 백분병을 포함하는 다양한 작물 및 식물 병원균에 내성을 유도하는 것에 우수한 효율을 또한 보여준다 (Vechet et al., 2009). ISR 작용 모드 외에, 제형화된 레이노우트리아 사카리넨시스 추출물은 최근 또한 밀 백분병에 대하여 직접적인 균발육 저지를 가지는 것을 보여주었다 (Blumeria graminis f. sp. tritici; Randoux et al., 2008).
살진균제
내성
살진균제 내성은 식물 병원균을 포함하는 해충에 일반적인 현상이다. 살진균제, 특히 단일부위 작용 모드를 가진 것들이 빈번하게 사용되는 경우, 목표가 되는 병원균은 높은 선별 압력에 기인하여 살진균제에 적응할 수 있다. 해충은 5-50 세대 이내에 살충제에 내성을 발달시킬 수 있다고 예측된다 (May, 1985). 대부분 식물 병원균은 한 성장 시즌에서 상기 범위에 들어맞으며, 따라서 살진균제 내성을 빠르게 발달시킬 수 있다. 예를 들어, 상업적 사용의 첫 등록 후 베노밀(benomyl)이 큐커빗 백분병의 조절에 대한 효능을 잃는데는 단지 1년이 걸렸다 (McGrath, 2001).
퀴논 아웃사이드 억제제 (QoI 살진균제 또는 스트로빌루린으로도 또한 알려짐)는 1996년 그의 도입 이래로, 농업적으로 중요한 진균 병원균을 제어하는데 널리 사용되어왔다. 스트로빌루린은 미토콘드리아 내 시토크롬 bc1 복합체를 억제함으로써 호흡 경로를 차단하며, 그렇게 함으로써 호흡 사슬에서 전자 이송 과정을 차단하고 아데노신 트리포스페이트(ATP)의 부족에 기인하는 에너지 결핍을 야기한다 (Bartlett et al., 2002). 단일부위 작용 모드, 예컨대 탈메틸화 억제제(DMI)를 가진 스트로빌루린 및 기타 살진균제는 식물 병원균 중에서 내성 발달에 취약하다. 지금까지, 몇 가지 식물 병원균 진균은 스트로빌루린 (Tuttle McGrath, 2003; Fraaije et al., 2003) 및 DMI 살진균제 (Schnabel et al., 2004)에 필드 내성을 발달시켜왔고, 상당한 노력이 세계적으로 이루어져서 내성 발달의 위험을 최소화하기 위한 프로그램 및 로테이션에 살진균제 및 다른 항진균 화합물을 합치는 방법의 상세한 추천이 있는 적합한 내성 관리 전략을 발달시켜왔다 (Tuttle McGrath, 2006; Wyenandt et al., 2009).
살진균제
내성의 제어 방법
살진균제 내성을 관리하는 가장 일반적인 전략은 조합물 (예비 믹스 또는 탱크 믹스) 내 내성 발달에 취약한 부위 특이적 살진균제를 사용하는 것이다. 내성 관리 외에, 탱크 믹스는 또한 하나의 살진균제의 실패 및 병원균에 선별 압력을 감소시키는 복용량을 감소시키는 방법의 경우 보상적인 메카니즘을 제공한다 (van den Bosch and Gilligan, 2008). 일부 경우에서, 탱크 믹스 내 또는 로테이션 내 단일 및 다중부위 살진균제의 조합물은 부가적인 또는 심지어 상승적인 상호작용을 제공할 수 있다 (Gisi, 1996). 홀브(Holb) 및 쉬나벨(Schnabel) (2008)은 DMI 살진균제 및 원소형태 황의 탱크 믹스를 가진 필드 연구에서 브라운 로트 (모닐리니아 프룩티콜라(Monilinia fructicola))의 개선된 제어를 보여줄 수 있었고, 루베니(Reuveni) (2001)는 넥타린(nectarine)에서 백분병을 제어하기 위해 황과 결합한 폴리옥신 B 살진균제 및 스트로빌루린을 사용하는 것의 유익을 설명하였다.
식물 방어 유도인자, 예컨대 레이노우트리아 사카리넨시스의 추출물은 생물제어제 (BCA) (Hafez et al., 1999; Belanger and Benyagoub, 1997; Schmitt et al., 2002; Schmitt and Seddon, 2005; Bardin et al., 2008) 및 다른 SAR/ISR 제품과 탱크 믹스 및 로테이션에서 시험되어졌다. 상기 연구의 목적은 주로 생물제어제와 상이한 유형의 식물 추출물들의 호환성을 설명하는 것이었다. 콘스타티니도우-돌트시니스 외(Konstatinidou-Doltsinis et al.) (2007)는 포도에서의 백분병에 대한 슈도지마 플로쿨로사(Pseudozyma flocculosa) 제품으로 로테이션에서 레이노우트리아 사카리넨시스 제품을 시험하였고, 두 가지 제품의 교대 적용이 레이노우트리아 사카리넨시스의 효능을 개선한다는 것을 발견하였다. 동일 연구에서, 로테이션 내 황 및 레이노우트리아 사카리넨시스의 교대는 유익한 효과를 가지지 못하였다. 벨랭져(Belanger) 및 벤야고브(Benyagoub) (1997)는 온실에서 오이 백분병에 대해 사용될 경우 효모같은 진균, 슈도지마 플로쿨로사가 레이노우트리아 사카리넨시스와 호환가능하다는 것을 발견하였다. 유사하게, 보크시 외(Bokshi et al.) (2008)는 오이 백분병에 대한 전신 획득 내성 활성자 벤조티아디아졸 및 MILSANA®의 결합된 효과를 평가하였고, 벤조티아디아졸과 함께 로테이션에 사용된 MILSANA®가 상기 분야의 백분병에 대하여 효과적인 대조 측정을 제공한다는 것을 밝혔다. 그러나, 질병 중증도 및 수집된 수득량 데이터에 기반하여, 그 포지티브 효과가 부가적이거나 또는 상승적인지 측정이 가능하지 않았다.
살충제 상승작용은 "살충제 조합물에 대한 유기체의 총 반응이 개별 성분의 총합을 초과하는 두 개 이상의 화합물의 동시 작용"으로써 정의된다 (Nash, 1981). 그러나, 살진균제가 상승적으로 상호작용하는 경우, 높은 수준의 질병 제어는 각 개별 살진균제의 라벨 속도 미만으로 달성된다. 보통, 최고의 효과는 상이한 작용 모드 (MOA)를 가진 살진균제의 조합물으로 달성되지만, 상승작용은 유사한 작용 모드를 가진 제품의 합쳐진 사용으로 또한 설명된다 (De Waard, 1996). 살진균제 상승작용은 실험실 연구에서 대부분 설명되지만 (Samoucha and Cohen, 1984; Gisi, 1996), 일부 경우 (Karaogladinis and Karadimos, 2006; Burpee and Latin, 2008), 상승작용은 필드 연구에서 또한 발견된다. 부가적으로, 살진균제 이외의 항진균 화합물 (바이카보네이트 및 정제된 석유 증류액)의 상승작용은 장미 백분병 및 블랙 스팟에 대해 설명된다 (Horst et al., 1992).
(a) 식물병원균(phytopathogen) ("식물 병원균(plant pathogen)"으로써 또한 언급됨)에 대한 식물 내성을 유도하는 하나 이상의 안트라퀴논 유도체를 포함하는, 식물로부터 유래된 추출물, 및
(b) (i) 비-원소적, 비-습윤적 황이 부족하거나 달리 말해 포함하지 않는, 비-벤조디아티아졸, 비-비타민 E, 비-유기인 항미생물제,
(ii) 살진균 활성을 가진 계면활성제, 및
(iii) 비-바실러스(non-Bacillus), 비-슈도모나스(non-Pseudomonas), 비-브레바바실러스(non-Brevabacillus), 비-레카니실리움(non-Lecanicillium), 비-암펠로미세스(non-Ampelomyces), 비-포마(non-Phoma), 비-슈도지마(non-Pseudozyma) 생물학적 제어제 (예, 스트렙토마이세스(Streptomyces) 종, 벌크홀더리아(Burkholderia) 종, 트리초더마(Trichoderma) 종, 글리오클라디움(Gliocladium) 종 또는 살진균 및/또는 살충 활성을 가지는 천연 오일 또는 오일 제품)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 항식물병원균제를 포함하는 조합물이 개시되고 주장된다.
특정 실시양태에서, 상기 조합물은,
(a) 마디풀과 (Polygonaceae)로부터 유래된 추출물, 및
(b) 비-원소적 또는 비-습윤적 황이 부족하거나 포함하지 않는, 비-벤조디아티아졸, 비-비타민 E, 비-유기인 항진균 및/또는 항세균제를 포함한다.
일 특정 실시양태에서, 상기 조합물은,
(a) 마디풀과 (예, 레이노우트리아 사카리넨시스)로부터 유래된 추출물, 및
(b) 미클로부타닐, 퀴녹시펜, 아족시스트로빈, 아시벤졸라-S-메틸, 메페녹삼, 트리플루미졸, 플루디옥소닐, 프로피코나졸을 포함할 수 있지만, 이것으로 한정되는 것은 아닌 단일 부위 살진균제 및/또는 다중부위 살진균제를 포함한다.
다른 특정 실시양태에서, 상기 조합물은,
(a) 마디풀과 (예, 레이노우트리아 사카리넨시스)로부터 유래된 추출물, 및
(b) 살진균 및/또는 살충 활성을 가지는 천연 오일 또는 오일 제품을 포함한다.
또 다른 특정 실시양태에서, 상기 조합물은 조성물, 특히 식물병원균 또는 진균 감염을 조절하는데 사용되는 조성물이다. 본 발명은 추가로 상기 조성물을 제형화하는데에 추출물 및 항식물병원균제의 사용에 관한 것이다.
본 발명은 부가적으로,
(a) 식물병원균에 대한 식물 내성을 유도하는 안트라퀴논 유도체를 포함하는, 식물로부터 유래된 추출물, 및
(b) 비-원소적 또는 비-습윤적 황이 부족하거나 포함하지 않는, 비-비타민 E, 비-유기인 항미생물제 (예, 항진균 및/또는 항세균제)를 포함하는 식물병원균 감염을 조절하는데 사용하기 위한 상승적 조합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 항미생물제는 벤조디아티아졸 (예, 아시벤졸라-S-메틸), 트리아졸 (예, 프로피코나졸) 또는 스트로빌루린 (예, 아족시스트로빈)이다.
상기 언급된 조합물은 조성물로 또한 제형화될 수 있다.
본 발명은 추가로 식물 및/또는 그의 종자 및/또는 상기 식물을 재배하는데 사용되는 기재에 상기 식물병원균 감염을 조절하는데 효율적인 상기 설명된 본 발명의 조합물의 상당량을 적용시키는 것을 포함하는, 식물에서의 식물병원균 감염을 조절하는 방법에 관한 것이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 식물 및/또는 그의 종자 및/또는 상기 식물을 재배하는데 사용되는 기재에 상기 진균 및/또는 세균 감염을 조절하는데 효율적인 본 발명의 조합물의 상당량을 적용시키는 것을 포함하는, 식물에서의 진균 및/또는 세균 감염을 조절하는 방법에 관한 것이다.
추출물 및 상기 항식물병원균제 (예, 항진균 및/또는 항세균제)는 연속적으로, 동시에, 또는 간헐적으로 조합되어 투여될 수 있다. 본원에서 정의된 "식물병원균 감염"은 식물 병원균 세균, 진균, 곤충, 선충 및/또는 연체동물에 의한 식물의 감염을 의미한다.
본 발명은 추가로, 하기 내성의 발현을 감소시키는데 효과적인 본 발명의 조합물의 상당량을 그것이 필요한 식물에 적용하는 것을 포함하는,
(i) 비-원소적, 비-습윤적 황이 부족하거나 달리 말해 포함하지 않는, 비-비타민 E, 비-유기인 항미생물제,
(ii) 살진균 활성을 가진 계면활성제, 및/또는
(iii) 비-바실러스, 비-슈도모나스, 비-브레바바실러스, 비-레카니실리움, 비-암펠로미세스, 비-포마, 비-슈도지마 생물학적 제어제 (예, 스트렙토마이세스 종, 벌크홀더리아 종, 트리초더마 종, 글리오클라디움 종 또는 살진균 및/또는 살충 활성을 가지는 천연 오일 또는 오일 기반 제품)에 대한 식물병원균 (예, 진균 및/또는 세균)의 내성을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 비-원소적 또는 비-습윤적, 황, 비-벤조디아티아졸, 비-비타민 E, 비-유기인 항진균 및/또는 항세균제에 대한 진균 및/또는 세균의 내성을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 또 다른 특정 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 조합물을 사용하여 살진균 및/또는 살충 활성을 가지는 천연 오일 또는 오일 기반 제품에 대한 진균 및/또는 세균의 내성을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 이는 발현 주기 또는 속도를 감소시킴으로써 수행될 수 있다. 상기 언급한 항병원균제에 대한 식물병원균의 내성은 50% 이상까지 감소될 수 있다.
본 발명은 추가로, 식물병원균 감염을 조절하기 위한 조성물을 제조하기 위한,
(a) 식물병원균에 대한 식물 내성을 유도하는 안트라퀴논 유도체를 포함하는, 식물로부터 유래된 추출물, 및
(b) (i) 비-원소적, 비-습윤적 황이 부족한, 비-벤조디아티아졸, 비-비타민 E, 비-유기인 항미생물제,
(ii) 살진균 활성을 가진 계면활성제, 및
(iii) 비-바실러스, 비-슈도모나스, 비-브레바바실러스, 비-레카니실리움, 비-암펠로미세스, 비-포마, 비-슈도지마 생물학적 제어제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 항식물병원균제의 사용, 및
(a) 식물병원균에 대한 식물 내성을 유도하는 안트라퀴논 유도체를 포함하는, 식물로부터 유래된 추출물, 및
(b) 벤조디아티아졸 항미생물제의 식물병원균 감염을 조절하기 위한 상승적 조성물의 제조를 위한 사용에 관한 것이다.
본 발명은 추가로
(a) 마디풀과로부터 유래된 추출물, 및
(b) (i) 비-원소적 또는 비-습윤적 황이 부족한, 비-벤조디아티아졸, 비-비타민 E, 비-유기인 항미생물제,
(ii) 살진균 활성을 가진 계면활성제, 및
(iii) 비-바실러스, 비-슈도모나스, 비-브레바바실러스, 비-레카니실리움, 비-암펠로미세스, 비-포마, 비-슈도지마 생물학적 제어제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 항식물병원균제를 포함하는 키트에 관한 것이다. 상기 키트는 추가로 패키징 지시사항을 포함할 수 있다.
값의 범위가 제공되는 경우, 그 범위의 상한 및 하한 사이에서, 문맥이 명확히 다르게 지시하지 않는다면 하한의 단위의 1/10에 각 중개값 및 임의의 언급된 다른 것 또는 언급된 범위 내 중개값은 본 발명 이내에 포함된다. 상기 더 작은 범위의 상한 및 하한은 더 작은 범위에 독립적으로 포함될 수 있고 또한 본 발명 내에 포함되며, 언급된 범위 내 임의의 특정하게 배제된 한계값에 종속된다. 상기 언급된 범위가 상기 한계값의 하나 또는 모두를 포함하는 경우, 한계값을 포함하는 것 중 하나 또는 둘 모두를 배제하는 범위도 또한 본 발명에 포함된다.
다르게 정의되지 않는다면, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 분야에서 통상적인 기술을 가진 자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 비록 본원에 언급된 것과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 물질이 본 발명의 실행 또는 시험에 또한 사용될 수 있더라도, 바람직한 방법 및 물질은 이제 언급된다. 추가로, 비록 본 발명이 특정 실시양태에 관하여 언급되더라도, 그의 상세설명은 다양한 균등물, 변화 및 수정이 사용될 수 있고 본 발명의 범위 내에 여전히 있다는 것이 명백한 것처럼, 한정으로써 간주되지 않는다.
다양한 참고문헌은 본 명세서 전반에 걸쳐 인용되고, 이들 각각은 본원에 그것의 전체로써 참고문헌으로 인용된다.
본원 및 첨부된 청구항에 사용된 것처럼, 단수 표현은 문맥이 명확히 다르게 지시하지 않는다면 복수 대상도 포함하는 것이라는 것을 주목해야한다. 예를 들어, "진균"은 또한 "진균들"을 포함한다.
본원에 정의된 것처럼, 용어 "조절하다"는 식물병원균 감염의 양 또는 식물병원균 감염의 퍼짐의 속도를 변경하는 것을 의미하는 것으로 사용된다.
추출물
본 발명의 조합물, 조성물 및 방법에 사용된 식물 추출물은 식물 해충, 특히 식물 식물병원균, 예컨대 식물 병원균 세균, 진균, 곤충, 선충에 대한 사용을 위한 생화학적 농업 제품으로써 및/또는 연체동물 구충제로써 안트라퀴논 유도체를 포함한다. "포함하다"는 상기 안트라퀴논 유도체를 생성하는 추출물을 또한 포함한다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 조성물 및 방법에 사용되는 본 발명의 안트라퀴논 유도체(들)은 주요 활성 성분이거나 또는 주요 활성 성분들 중 하나이다.
안트라퀴논 유도체는 피지온(physcion), 에모딘, 크리소패놀, 벤틸로퀴논, 에모딘 글리코시드, 크리소패놀 글리코시드, 피지온 글리코시드, 3,4-디히드록시-1-메톡시 안트라퀴논-2-코르복스알데히드, 담나캔탈을 포함하지만 이것으로 한정되는 것은 아니다. 상기 유도체는 다음과 유사한 구조를 공유한다:
상기 식에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 및 R8은 수소, 히드록실, 히드록실알킬, 할로겐, 카르복실, 알킬, 알키옥실, 알케닐, 알케닐옥실, 알키닐, 알키닐옥실, 헤테로시클릴, 방향족, 또는 아릴기, 글루코스와 같은 당이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 마디풀과, 갈매나무과(Rhamnaceae), 콩과(Fabaceae), 아스포델라과(Asphodelaceae), 및 꼭두서니과(Rubiaceae) 등을 포함하지만 그것으로 한정되는 것은 아닌 식물 과(family)로부터 유래된 추출물에 포함되는 안트라퀴논 유도체에 관한 것이다. 상기 화합물은 식물의 임의의 부분, 예컨대 잎, 줄기, 나무껍질, 뿌리 및 과실로부터의 것일 수 있다. 식물 물질은 습기있고 건조할 수 있으나, 바람직하게 건조한 식물 물질이다. 생화학적 농업 제품을 충족시키기 위하여, 추출 및 정제에 사용되는 용매 및 공정은 내셔널 오가닉 프로그램 (NOP) [http://www.ams.usda.gov/AMSv1.0/nop,]의 요구사항을 충족시켜야 한다.
더 특별한 실시양태에서, 식물 추출물은 마디풀과의 구성원으로부터 유래된다. 본원에 규정하듯이, "로부터 유래된"은 특정 공급원으로부터 직접적으로 단리되거나 얻어지거나, 대안적으로 특정 공급원으로부터 단리되거나 얻어진 물질 또는 유기체의 특징을 식별하는 것을 가지는 것을 의미한다. 특정 실시양태에서, 상기 조합물 내 추출물은 안트라퀴논 유도체에 피지온 및 임의로 에모딘을 포함한다. 마디풀과의 구성원은 아세토셀라(Acetosella), 안티고논(Antigonon), 아리스토카프사(Aristocapsa), 빌더디키아(Bilderdykia), 브룬니키아(Brunnichia), 센트로스테지아(Centrostegia), 코리잔테(Chorizanthe), 코코로바(Coccoloba), 코코로비스(Coccolobis), 코코로보(Coccolobo), 코르쿨럼(Corculum), 데덱커라(Dedeckera), 델로피룸(Delopyrum), 덴토세라스(Dentoceras), 도데카헤마(Dodecahema), 에멕스(Emex), 에리오고눔(Eriogonum), 파포피룸(Fafopyrum), 파고피룸(Fagopyrum), 폴로피아(Fallopia), 길마니아(Gilmania), 굿마니아(Goodmania), 하르포르디아(Harfordia), 홀리스터리아(Hollisteria), 코에니지아(Koenigia), 라스타리아애(Lastarriaea), 무크로네아(Mucronea), 무에렌벡키아(Muehlenbeckia), 네마카울리스(Nemacaulis), 옥시리아(Oxyria), 옥시테카(Oxytheca), 퍼스카리오아(Perscarioa), 퍼시카리아(Persicaria), 플레우롭테러스(Pleuropterus), 포돕테러스(Podopterus), 폴리고넬라(Polygonella), 폴리고눔(Polygonum), 프테로스테지아(Pterostegia), 레움(Rheum), 루멕스(Rumex), 루프레츠티아(Ruprechtia), 스테노고눔(Stenogonum), 시스테노테카(Systenotheca), 티사넬라(Thysanella), 토바라(Tovara), 트라카우론(Tracaulon), 트리플라리스(Triplaris)를 포함하지만 그것으로 한정되는 것은 아니며, 훨씬 더 특별한 실시양태에서, 추출물은 레이노우트리아(대안적으로 폴로피아(Fallopia)로 지칭됨) 종 또는 레움 종으로부터 유래될 수 있다. 가장 특별한 실시양태에서, 추출물은 레이노우트리아 사카리넨시스로부터 유래된다.
항식물병원균제
제형화된 추출물(예컨대, REGALIA® 및 MILSANA® 상표명으로 시판되는 제품)은 그 다음 다른 항식물병원균제 식물 추출물, 생물학적 살충제, 무기 작물 보호제 (예컨대, 구리), 계면활성제 (예컨대 람노리피드(rhamnolipid); Gandhi et al., 2007) 또는 살충 특성을 보유하는 천연 오일, 예컨대 파라핀계 오일 및 티트리 오일 또는 화학적 살진균제 또는 단일부위, 다중부위 또는 알려지지 않은 작용 모드를 가진 살세균제과 결합되어 사용될 수 있다. 본원에 정의된 것처럼, "항식물병원균제"는 식물상에 식물 병원균의 성장을 조절하거나 대안적으로 식물 병원균에 의한 식물의 감염을 방지하는 작용제이다. 식물 병원균은 진균, 세균, 바이러스, 곤충, 선충 및/또는 연체동물을 포함하지만, 그것으로 한정되는 것은 아니다.
특정 실시태양에서, 항식물병원균제는 생물제어제로써 대안적으로 지칭되는 생물학적 살충제이다. 이 생물제어제는 더 특별한 실시양태에서, 비-바실러스, 비-슈도모나스, 비-브레바바실러스, 비-레카니실리움, 비-암펠로미세스, 비-포마, 비-슈도지마 생물학적 제어제이고, 스트렙토미세스 종, 벌크홀더리아 종, 트리초더마 종, 글리오클라디움 종으로부터 유래된 작용제이다. 대안적으로, 상기 작용제는 살진균 및/또는 살충 활성을 가지는 천연 오일 또는 오일 제품(예, 파라핀계 오일, 티트리 오일, 레몬그래스 오일, 클로버 오일, 시나몬 오일, 시트러스 오일, 로즈마리 오일)이다.
상기 언급된 것처럼, 항식물병원균제는 벤즈이미다졸, 탈메틸화 억제제 (DMI) (예를 들면, 이미다졸, 피페라진, 피리미딘, 트리아졸), 모르폴린, 히드록시피리미딘, 아닐리노피리미딘, 포스포로티올레이트, 퀴논 아웃사이드 억제제, 퀴놀린, 디카르복스이미드, 카르복스이미드, 페닐아미드, 아닐리노피리미딘, 페닐피롤, 방향족 탄화수소, 신남산, 히드록시아닐리드, 항생제, 폴리옥신, 아실아민, 프탈이미드, 벤제노이드 (크실릴알라닌)을 포함할 수 있지만, 그것으로 한정되는 것은 아닌 단일부위 항진균제일 수 있다. 더 특별한 실시양태에서, 항진균제는 이미다졸 (예를 들면, 트리플루미졸), 피페라진, 피리미딘 및 트리아졸 (예를 들면, 비테르타놀, 미클로부타닐, 펜코나졸, 프로피코나졸, 트리아디메폰, 브로무코나졸, 시프로코나졸, 디니코나졸, 펜부코나졸, 헥사코나졸, 테부코나졸, 테트라코나졸, 프로피코나졸)로 이루어지는 군으로부터 선택된 탈메틸화 억제제이다. 가장 특별한 실시양태에서, 항진균제는 미클로부타닐이다. 또 다른 특정 실시양태에서, 항진균제는 퀴논 아웃사이드 억제제 (예를 들면, 스트로불루린)이다. 스트로불루린은 아족시스트로빈, 크레속심-메토일 또는 트리플록시스트로빈을 포함할 수 있지만, 그것으로 한정되는 것은 아니다. 또 다른 특정 실시양태에서, 항진균제는 퀴논, 예를 들면, 퀴녹시펜 (5,7-디클로로-4-퀴놀릴 4-플루오로페닐 에테르)이다.
또 추가적인 실시양태에서, 항미생물제는 니트릴 (예를 들면, 클로로니트릴 또는 플루디옥소닐), 퀴녹살린, 술프아미드, 포스포네이트, 포스파이트, 디티오카르바메이트, 클로랄키티오스, 페닐피리딘-아민, 시아노-아세트아미드 옥심으로 이루어지는 군으로부터 선택된 다중부위 비-무기, 화학적 살진균제이다.
또 다른 실시양태에서, 항식물병원균제는 항세균제이다. 이 항세균제는 카르바메이트, 유기인산염, 시클로디엔 유기염화물, 페닐피라졸, 피레트로이드, 피레트린, 네오니코티노이드, 니트로구아나딘, 니코틴, 스피노신, 글리코시드, 청소년 호르몬 유사체 및 다른 곤충 성장 조절제, 피리딘 아조메틴, 피리딘 카르복스아미드, 테트라진, 티아졸리디논, 2,4-디페닐옥스졸린 유도체, 유기주석, 피롤, 부프로페진, 히드라메틸논, 나트토퀴논 유도체, 피리다지논, 페녹시피라졸, 테트론산, 카르바제이트, 로테논, 유기염소-디페닐지방족을 포함하지만, 그것으로 한정되는 것은 아니다.
용도
상기 식물 추출물 또는 제형화된 제품은 성장 시즌 동안 예정된 순서 및 응용 간격을 가진 프로그램 (로테이션이라고 불리는 연속 적용)에서 또는 탱크 믹스로 다른 성분 또는 성분들과 동시에 사용될 수 있다. 제품 라벨에 추천된 것 미만의 농도에서 상술한 살충제 제품과 결합하여 사용될 경우, 둘 이상 제품 (그 중 하나는 상기 식물 추출물임)의 합쳐진 효능은 바람직한 실시양태에서, 함께 첨가된 각각 개별적인 성분의 효과보다 더 높다. 그러나, 살충 효과는 상기 두 (또는 초과) 제품간의 상승작용에 의해 증진되고, 식물 병원균 균주간의 살충 내성이 발전할 위험은 감소된다.
본 발명의 범위 내에서 보호되는 목표 식물은, 예를 들어, 다음 종의 식물을 포함한다:
씨리얼(밀, 보리, 호밀, 오트, 쌀, 수수 및 관련 작물), 비트 (사탕무 및 사료용 비트), 폼므(pomme) 및 연 과일(사과, 배, 플럼, 복숭아, 아몬드, 체리, 딸리, 라즈베리 및 블랙베리), 콩과 식물(콩, 렌틸, 피(pea) 및 대두), 오일 식물 (레이프, 머스타드, 포피, 올리브, 해바라기, 코코넛, 캐스터 오일 식물, 코코아콩 및 땅콩), 큐커빗(오이, 멜론, 호박, 가지), 섬유 식물(면, 아마, 대마 및 황마), 시트러스 과일(오렌지, 레몬, 자몽 및 만다린), 채소(시금치, 상추, 아스파라거스, 양배추, 당근, 양파, 토마토, 감자 및 파프리카), 녹나무과(아보카도, 시나몬 및 캠퍼) 또는 메이즈, 토바코, 넛, 커피, 사탕수수, 차, 바인, 홉, 바나나와 같은 식물 및 천연 고무 식물, 및 관상용 (국화과 식물(composites)), 토양의 침식 또는 건조에 대응하고 나무 및 다년생식물 (과일 농원, 홉 농원, 메이즈 농장, 바인야드 등)에 유용한 소정의 면적의 풀 또는 일반적 낮은 덮힘 작물.
본 발명에 제품의 조합물을 적용하는 바람직한 방법은 캐리어를 가지거나 가지지 않는 엽면(foliar) 적용 (분사, 미립화, 살포, 스캐터링 또는 주입)이다. 적용 수 및 적용 속도는 병원균에 의한 침입의 위험에 의존한다. 예를 들어, 이 특허에 포함되는 조합물 및 혼합물을 가진 엽면 살충 처리는 제품 라벨에 추천되는 것보다 25 내지 10,000 배 더 낮은 속도에서 매 7 내지 14일에 한 번씩 행해질 수 있다. 본 발명에서 목표로 되는 제품 혼합물 및 조합물은 종자를 활성 성분을 포함하는 액체 제형으로 침지시키거나 그것을 고체 제형으로 코팅함으로써 종자에 또한 적용할 수 있다. 특수한 경우에서, 추가적 유형의 적용이 또한 가능하다. 이것들은 식물 줄기 또는 버드의 선별적 처리 또는 토양 관주(soil drench)를 포함한다.
본 발명의 혼합물 및, 적합한 경우 고체 또는 액체 아주반트(adjuvant)는 공지의 방식으로 제조된다. 예를 들어, 혼합물은 균일 혼합 및/또는 증량제, 예컨대 용매, 고체 캐리어 및, 적합할 경우 표면 활성 화합물(계면활성제)로 활성 성분을 분쇄함으로써 제조될 수 있다. 상기 조성물은 특정 효과를 얻기 위하여 안정화제, 점도 조절제, 결합체, 아주반트 및 비료 또는 다른 활성 성분과 같은 추가적 성분을 또한 포함할 수 있다.
실시예
전술한 대상 및 이점의 만족에서, 상승적 또는 부가적 효과를 만드는 속도에서 제품들을 사용함으로써 둘 이상의 제품의 효능을 증가시키는 방법의 실시예들이 하기에서 설명될 것이다. 여기 기술된 조성물 및 방법은 온실-재배 오이 (큐커미스 사티버스(Cucumis sativus))에서의 질병 발생 정도 및 중증도를 감소시키는데 효율적이라는 것이 증명되었지만, 그 개념은 다른 식물 품종 및 종에 대해 효과적으로 사용될 수 있다. 상기 조성물 및 방법은 오이 백분병에 대하여 특히 효과적이지만, 그것들은 다른 진균, 세균, 및 바이러스성 식물 질병, 예컨대 잿빛 곰팡이병, 잎 점무늬병, 세균성 시들음병(bacterial wilt), 붉은 곰팡이병(scab), 탄저병, 담배 모자이크 바이러스 등에 적용될 수 있다.
물질 및 방법
백분병
(
실시예
I-V 및 X-
XI
)
온실에서 상기 연구를 수행하였다. 상승작용에 대한 상기 연구의 실험적 설계는 버피(Burpee) 및 라틴(Latin) (2008)을 따랐다. 스패로테카 풀리지니아(Sphaerotheca fuliginea)에 의해 야기되는 백분병을 치료의 효능을 조사하는데 사용하였다.
오이 종자 재배변종(cv.) "SMR 58" (Irwin & Sons Ag Supply, Inc. Cheshire, OR)를 화분용 영양토 믹스 (로드 맥렌란 컴퍼니(Rod McLellan Company), Marysville, OH)를 가진 플라스틱 4 인치 화분에 재배하였다. 상기 식물을 2-본 엽 단계에서 처리하였다. 다양한 속도에서 상기 화합물을 잎의 상면에서 2 ml/식물, 잎의 하면에서 1 ml/식물에서 2 온스 미스트 분무기로 분사하였다. 처리된 식물을 접종 전에 건조시키기 위하여 형광등 하에서 3-4 시간 동안 두었다.
스패로테카 풀리지니아의 코니디아(conidia) 현탁액, 오이에의 백분병 질병의 병원(causal agent)을 접종원의 보존을 위해 쓰이는 오이 식물의 질병 잎을 절단함으로써 제조하였다. 상기 현탁액을 2.0 × 105 코니디아/ml로 조절하였고, 잎의 상면에 2 ml/식물에서 2 온스 미스트 분무기로 적용시켰다. 접종된 식물을 온실에 두고, 25 ℃ 내지 30 ℃에서 4 내지 6 복제로 무작위 완전 블럭(randomized complete block)에서 상기 처리를 준비하였다.
제1 잎의 질병 중증도 (군집으로 덮힌 면적 백분율)를 제임스(James) (1971)를 따라 평가하였다. 질병 중증도 및 백분율 대조군을 편차 분석 (ANOVA)으로 분석하였고, 처리의 평균을 p=0.05 수준에서 피셔스 프로텍티드 리스트 디퍼런스(Fisher's Protected Least Difference (LSD))로 비교하였다. 림펠식 (Limpel et al., 1962; Richer, 1987)으로 시너지 효과를 계산하고 분석하였다.
상추 노균병 (
실시예
VI
-
VII
)
병원균 난균(Oomycetes)의 특정 군을 제어하는 메페녹삼 또는 아시벤졸라-S-메틸 및 MBI-106간의 상승작용을 수 외 (Su et al. (2004))를 따라 상추 노균병으로 시험하였다.
노균병의 접종원을 제조하기 위하여, 상추 종자를 각각 약 20-30 종자를 가진 5-mm 페트리접시에 놓고 멸균수로 물을 주고, 그 다음 발아 후 호글랜드(Hoagland) 용액의 ½ 강도로 공급하였다. 페트리접시를 7-10일 동안 20 ℃ 성장 챔버에 두었다. 상추 노균병(Bremia lactucae)의 포자를 상추 떡잎에 접종시키고, 발생할 포자형성을 위해 15 ℃에서 7-10일 동안 배양하였다. 포자형성된 떡잎을 절단하고, 멸균수로 팔콘(falcon) 튜브에 두었다. 떡잎을 15초 동안 3회 와동(vortex)시키고 100 uμm 메쉬를 통하여 여과하여 포자낭을 수집하였다. 상기 용액을 접종을 위하여 0.5 내지 1.0 × 105 포자/ml로 조절하였다.
4개의 시험 식물을 각 2-in 화분에 씨를 뿌리고, 그 다음 7-10일 동안 20 ℃에 두어 떡잎을 길렀다. 식물들은 제1 본엽이 나올 때 시험에 대해 준비가 되었다.
상추 식물을 상기 물질로 처리하고 밤새 내버려두어 건조시켰다. 그 다음, 상기 식물을 포자낭 용액으로 접종시켰다. 상기 처리를 4개 복제를 가진 무작위 완전 블럭 설계로 준비하였다. 접종된 식물을 48 시간 동안 성장 챔버에 어둡게 두었고 그 다음 15 ℃에서 12 시간 광주기 하에서 배양하였다. 접종 후 8 내지 10일, 떡잎을 질병 중증도 (분생자경(sporangiophores)으로 덮힌 면적 백분율)에 대해 평가하였다.
종자 처리 (
실시예
VIII
-
IX
)
하기 기술된 실험을 대두로 수행하였으나 씨리얼, 옥수수, 면, 및 감자와 같은 다른 작물에 대해 유사한 절차를 사용하였다.
황 외 (Hwang et al. (2006))에 의해 개발된 절차에 따라 온실에서 실험을 수행하였다. 잎집무늬 마름병원균(Rhizoctonia solani)의 분리균을 감자 덱스트로스 아가 플레이트 상에서 성장시켰고 오트 또는 밀 곡물에 접종시키기 위하여 5일 동안 배양시켰다. 1 리터의 곡물을 실온 (25 ℃)에서 밤새 침지시켰고 수돗물로 3회 헹구었다. 8 × 12-in 오토클레이브 백을 1/3까지 채워지게 곡물로 채우고 15분 동안 121 ℃에서 오토클레이브시켰다. 그 다음 오토클레이브된 곡물을 이어서 백 당 잎집무늬 마름병원균의 5일 배양의 1 × 1 cm 플러그의 5 피스로 접종시켰고, 실온 (25 ℃)에서 5일 동안 배양시켰다. 상기 백을 층류 후드에 개방된 상태로 두어 곡물이 완전하게 건조되게 하였다.
코팅될 10 g의 블랭크 종자(blank seed) 시료를 플라스크에 두었다. 코팅제 SEPIRET® 1171-O (벡커 언더우드 리미티드(Becker Underwood Ltd.), Ames, IA)를 관심대상 화합물과 함께 플라스크에 넣고, 종자가 화합물을 취하도록 격하게 흔들었다. 상기 절차를 상기 처리와 동일한 플라스크에서, cvs. "화이트 라이온(White Lion)" (키타자와 시드 컴퍼니(Kitazawa Seed Co.), Oakland, CA) 또는 "바이킹(Viking) 2265" (자니스 실렉티드 시즈(Johnny's Selected Seeds), Winslow, ME)의 생 종자 시료로 반복하였다. 상기 종자를 코팅한 후, 그것들을 재배 전에 공기 건조되게 내버려 두었다.
토양을 제조하기 위하여, 접종원을 가진 500 밀리리터의 건조 곡물을 3회 15초 동안 블렌딩하였고 상기 분말을 멸균 모래와 1:1 (v/v)로 혼합하여 접종원을 희석시켰다. 모래 믹스를 추가로 사용하여 대두에 대해 1:350 내지 1:800 (접종원:토양)의 다양한 비율로 토양 믹스를 제조하여, 반복되는 시험에 다양한 질병 수준을 발생시켰다.
코팅된 종자를 감염된 토양을 가진 화분에 재배하였다. 무작위 완전 블록 설계로 준비되고 온실에서 25 내지 30 ℃에 놓여진 각 처리에 대한 3개의 복제가 있었다.
질병 압력 및 온도에 의존하여, 10 내지 20일 후, 각 처리의 발현을 평가하고 비교하였다. 상기 식물 물질의 각 복제에 대해 측정된 지상 부분의 중량을 측정함으로써 생물량을 측정하였다.
실시예
Ι.
제형화된
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물 및 미클로부타닐(
myclobutanil)간의
상승적 효과 (시험 Ι).
MBI-106(마론 바이오 이노베이션스, 인크.(Davis, CA)의 REGALIA® SC로 판매되는 제형화된 레이노우트리아 사카리넨시스 추출물)을 1500x 및 2000x의 라벨 양보다 10 배 더 낮게 희석했고, 0. 25 μg/ml, 0.1 μg/ml 및 0.05 μg/ml 농도(추천 라벨 양보다 450 내지 2,250 배 더 낮음)의 미클로부타닐(다우 어그로사이언스 엘엘씨(Dow AgroSciences LLC) (Indianapolis, IN)의 RALLY® 40W로 제형화)을 단독으로 또는 탱크 믹스로 적용했다.
질환 중증도는 0.25 μg/ml의 미클로부타닐과 1500x 및 2000x의 MBI-106의 조합에서 그들이 단독으로 사용되었을 때에 비해 상당히 감소했다 (표 1). 대조군 효능에서 상당한 증가가 0. 25 μg/ml 및 0.05 μg/ml의 양인 미클로부타닐과 탱크 혼합된 MBI-106 2000x의 조합에서 발견되었다 (표 2).
실시예
Ⅱ.
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물과
미클로부타닐간의
상승적 효과(시험 Ⅱ).
MBI-106(REGALIA® SC로 제형화) 및 미클로부타닐(RALLY® 40W로 제형화)을 사용한 두 번째 시험에서, 0.25, 0.1 및 0.05 μg/ml의 양의 미클로부타닐과 2000x(라벨 양보다 10 배 더 낮음) 희석의 MBI-106의 조합일 경우, 그리고 1500x의 MBI-106이 0.05 μg/ml의 미클로부타닐과 탱크 혼합되었을 경우 더 높은 효능을 발견했다 (표 3). 1500x 및 2000x로 희석된 MBI-106이 0.05 μg/ml의 가장 낮은 양에서의 미클로부타닐과 합해질 경우 상당한 상승적 효과가 나타났다 (표 4).
실시예
Ⅲ.
제형화된
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물과
퀴녹시펜간의
상승적 효과.
1500x 또는 2000x로 희석된 MBI-106을 단독으로 또는 0.05 및 0.01 μg/ml(라벨 양보다 2,000 내지 10,000 배 더 낮음)의 퀴녹시펜(다우 어그로사이언스 엘엘씨(Indianapolis, IN)의 QUINTEC®으로 제형화)과의 조합으로 단독으로 또는 탱크 믹스로 적용했다. 그 결과는 표 5 및 6에 나타나있다. 0.01 μg/ml의 퀴녹시펜으로 2000x로의 레이노우트리아 사카리넨시스 생성물 희석에서 가장 상당한 상승적 효과 및 향상된 질환 조절이 발견되었다. 퀴녹시펜은 초기 세포 신호 전달에서 G-단백질에 영향을 미치는 신규한 다중-부위 작용 모드를 가졌다.
실시예
Ⅳ.
제형화된
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물과
아족시스트로빈
간의 상승적 효과.
1500x 또는 2000x로 희석된 MBI-106을 단독 또는 0.25, 0.5, 1.0, 5.0 및 10 μg/ml(추천 라벨 양보다 25 내지 1020 배 더 낮음)에서의 아족시스트로빈(신겐타 코포레이션(Syngenta Corporation), (Wilmington, DE)의 QUADRIS®으로 제형화)과의 조합으로 단독으로 또는 탱크 믹스로 적용했다. 결과는 표 7 및 8에 나타나있다. 모든 시험된 조합물 중, 2000x 희석의 레이노우트리아 사카리넨시스 추출물과 5.0 또는 0.5 ug/ml의 아족시스트로빈의 혼합이 가장 우수한 상승작용을 제공했고, 살진균 효능은 단일-화합물 사용 데이터와 비교했을 때 예상된 것보다 상당히 더 우수했다.
실시예
Ⅴ.
제형화된
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물과
트리플루미졸간
의 상승적 효과.
2500x 희석(라벨 양보다 10 배 더 낮음)의 MBI-106(마론 바이오 이노베이션, 인크.(Davis, CA)의 REGALIA® SC로 판매되는 제형화된 레이노우트리아 사카리넨시스 추출물) 및 1.0 ug/ml, 0.5 ug/ml 및 0.25 ug/ml의 농도(추천 라벨 양보다 150 내지 600배 더 낮음)의 트리플루미졸(켐투라 코포레이션(Chemtura Corporation) (Middlebury, CT)의 PROCURE® 480SC로 제형화)을 단독 또는 탱크 믹스로 적용하였다.
트리플루미졸과 2500x 희석의 MBI-106의 조합으로의 스프레이 처리에서 질환 중증도는 MBI-106이 단독으로 사용된 처리에 비해 상당히 감소했다 (P < 0.0001) (표 9). 효능에서 상승적 효과가 1.0 ug/ml, 0.5 ug/ml 및 0.25 ug/ml 양으로 트리플루미졸과 탱크 혼합된 MBI-106 2500x의 조합물에서 발견되었다 (표 10).
실시예
Ⅵ. 상추 노균병의 제어에 있어서의
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물과
아시벤졸라
-S-
메틸간의
상승적 효과.
상추 노균병을 제어하기 위하여, MBI-106(마론 바이오 이노베이션, 인크. (Davis, CA)의 REGALIA® SC로 판매되는 제형화된 레이노우트리아 사카리넨시스 추출물)가 200x 희석으로 단독으로 또는 25 ug/ml의 농도의 아시벤졸라-S-메틸(신겐타 크롭 프로텍션, 인크. (Syngenta Crop Protection, Inc.) (Greensboro, NC)의 ACTIGARD®로 제형화)과의 조합으로 사용되었다.
아시벤졸라-S-메틸과 200x 희석의 MBI-106의 조합에서 질환 중증도는 그들이 단독으로 사용된 처리에 비해 상당히 감소했다 (p = 0.0004) (표 11). MBI-106 200x 및 아시벤졸라-S-메틸의 탱크 믹스에서 효능에서의 상승적 효과가 있었다 (표 12).
실시예
Ⅶ. 상추 노균병의 제어에 있어서의
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물과
메페녹삼간의
상승적 효과.
레이노우트리아 및 MBI-106의 상승적 효과를 조사하기 위하여, 상추 노균병을 제어하는데, 마론 바이오 이노베이션, 인크.(Davis, CA)의 제형화된 생성물 REGALIA® ME를 400x 희석 양에서 37.5 μg/ml, 75.0 μg/ml 및 150 μg/ml의 농도의 메페녹삼(신겐타 크롭 프로텍션, 인크.(Greensboro, NC)의 RIDOMIL GOLD®로 제형화)과의 조합으로 사용했다.
메페녹삼과 400x 희석의 MBI-106의 조합에서 질환 중증도는 그들이 각각의 농도로 단독으로 사용된 처리에 비해 상당히 감소했다 (p < 0.0001) (표 13). MBI-106 200x 및 메페녹삼의 탱크 믹스의 효능에서의 상승적 효과가 각각의 농도의 메페녹삼과 MBI-106의 조합에서 발견되었다 (표 14).
실시예
Ⅷ. 종자
처리제로서의
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물 및
잎집
무늬
마름병원균의
제어에 있어서의 그의
아족시스트로빈과의
상승작용.
레이노우트리아 사카리넨시스를 5%(w/w)의 에탄올로 추출했고, 대두 상에서 잎집무늬 마름병원균을 제어하기 위하여 0.2117 g/kg 종자로 단독으로 또는 0.0298 g/kg 종자의 아족시스트로빈과(신겐타 크롭 프로텍션, 인크.(Greensboro, NC)의 QUADRIS®)의 조합으로 종자 코팅에 대해 사용했다.
발현 양은 접종된 미처리 대조군에 비해 MBI-106으로 처리된 접종 종자에서 더 높았고, 아족시스트로빈과의 조합으로 사용될 경우, 발현 양은 각 생성물을 단독으로 사용했을 경우보다 더 높았다 (표 15). 두 물질 모두가 조합으로 사용될 경우 상승적 효과가 발견되었다 (표 16).
실시예
Ⅸ. 종자
처리제로서
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물 및
잎집무
늬
마름병원균의
제어에 있어서의
플루디옥소닐과의
상승작용.
대두 상에서 잎집무늬 마름병원균을 제어하기 위해, 레이노우트리아 사카리넨시스의 에탄올 추출물을 또한 0.03175 g/kg 종자 및 0.635 g/kg 종자의 양으로 단독으로 또는 플루디옥소닐(신겐타 크롭 프로텍션, 인크.(Greensboro, NC)의 Scholar®로 제형화)과의 조합으로 종자 코팅에 대해 사용했다. 발현량 및 생물량은 접종 미처리 대조군에 비해 MBI-106 처리된 종자에서 더 높았고 0.0596 g/kg 종자의 양의 플루디옥소닐과의 조합으로 사용될 경우 더 높았다 (표 17). 플루디옥소닐과의 조합으로 사용될 경우 두 양의 MBI-106에서 상승적 효과를 발견했다 (표 18).
실시예
Ⅹ. 오이
백분병의
제어에 있어서의
제형화된
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물 및
프로피코나졸간의
상승적 효과.
2500x 희석의 MBI-106(마론 바이오 이노베이션, 인크.(Davis, CA)의 REGALIA® ME로 판매되는 제형화된 레이노우트리아 사카리넨시스 추출물, 및 1.0 ug/ml 농도의 프로피코나졸(다우 아그로사이언스 엘엘씨(Indianapolis, IN)의 PROPIMAX® EC로 제형화)을 단독으로 또는 탱크 믹스로 적용했다.
프로피코나졸과 2500x 희석의 MBI-106의 조합으로의 스프레이 처리에서 질환 중증도는 상당히 감소했다(P < 0.0001) (표 19). 프로피코나졸과 탱크 혼합된 MBI-106 2500x의 조합물에서 제어 효능에 있어 상승적 효과가 있었다 (표 20).
실시예
ⅩΙ. 오이
백분병의
제어에 있어서의
레이노우트리아
사카리넨시스
추출물 및
퀴녹시펜
(시험 Ⅱ) 간의 상승적 효과.
오이 백분병을 제어하기 위해 MBI-106(마론 바이오 이노베이션, 인크.(Davis, CA)의 REGALIA® SC로 판매되는 제형화된 레이노우트리아 사카리넨시스 추출물)을 2000x 희석으로 단독으로 또는 세 농도 0.5, 0.25, 및 0.1 ug/ml의 아족시스트로빈과의 조합으로 사용했다.
아족시스트로빈과 2000x 희석의 MBI-106의 조합 처리에서 제어 효능은 그들이 단독으로 사용되었을 때보다 더 높았다 (표 21). MBI-106 2000x의 탱크 믹스의 제어 효능에서의 상승적 효과는 MBI-106과 각각의 농도의 아족시스트로빈과의 조합에서 존재했다 (표 22).
표
1 3번째 열의 자료(중증도(%))는 6개의 복제의 평균이다. 한 열의 같은 문자를 가지는 평균은 P=0.05 수준에서 피셔스 프로텍티드 리스트 시그니피컨트 디퍼런스(Fisher's Protected Least Significant Difference (LSD))에 따라 상당하게 상이하지 않는다.
2 Ee는 기대 효능이고, 림펠식 Ee=X+Y-(XY)/100 (Limpel et al., 1962; Richer, 1987)으로 계산된다.
3 자료는 6개의 복제의 평균이다. 한 열의 같은 문자를 가지는 평균은 P=0.05 수준에서 피셔스 프로텍티드 리스트 시그니피컨트 디퍼런스 (LSD)에 따라 상당하게 상이하지 않는다.
4 n.s.: 상당하지 않음
5 * 및 ***: P<0.05 및 0.001 각각에서 상당함.
6 자료는 4개의 복제의 평균이다. 한 열의 같은 문자를 가지는 평균은 P=0.05 수준에서 피셔스 프로텍티드 리스트 시그니피컨트 디퍼런스 (LSD)에 따라 상당하게 상이하지 않는다.
z Ee는 기대 효능이고, 림펠식 Ee=X+Y-(XY)/100 (Limpel et al., 1962; Richer, 1987)으로 계산된다.
** 및 ***: P<0.01 및 0.001 각각에서 상당함.
n.s.: 상당하지 않음
자료는 4개의 복제의 평균이다. 한 열의 같은 문자를 가지는 평균은 P=0.05 수준에서 피셔스 프로텍티드 리스트 시그니피컨트 디퍼런스 (LSD)에 따라 상당하게 상이하지 않는다.
z Ee는 기대 효능이고, 림펠식 Ee=X+Y-(XY)/100 (Limpel et al., 1962; Richer, 1987)으로 계산된다.
* 및 **: P<0.05 및 0.01 각각에서 상당함.
n.s.: 상당하지 않음
3번째 열의 자료(중증도(%))는 4개의 복제의 평균이다. 한 열의 같은 문자를 가지는 평균은 P=0.05 수준에서 피셔스 프로텍티드 리스트 시그니피컨트 디퍼런스 (LSD)에 따라 상당하게 상이하지 않는다.
Ee는 기대 효능이고, 림펠식 Ee=X+Y-(XY)/100 (Limpel et al., 1962; Richer, 1987)으로 계산된다.
인용 문헌:
Claims (29)
- (a) 1500X 내지 2000X로 희석된 레이노우트리아 사카리넨시스 (Reynoutria sachalinensis)로부터의 추출물; 및
(b) 0.05 ug/ml 내지 0.25 ug/ml의 농도의 미클로부타닐
을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는데 사용하기 위한 상승적 조성물. - (a) 1500X 내지 2000X로 희석된 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 0.01 ug/ml 내지 0.05 ug/ml의 농도의 퀴녹시펜
을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는데 사용하기 위한 상승적 조성물. - (a) 2000X로 희석된 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 0.5 ug/ml 내지 5.0 ug/ml의 농도의 아족시스트로빈
을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는데 사용하기 위한 상승적 조성물. - (a) 2500X로 희석된 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 0.25 ug/ml 내지 1.0 ug/ml의 농도의 트리플루미졸
을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는데 사용하기 위한 상승적 조성물. - (a) 200X로 희석된 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 25 ug/ml의 농도의 아시벤졸라-S-메틸
을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는데 사용하기 위한 상승적 조성물. - (a) 400X로 희석된 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 37.5 ug/ml 내지 150 ug/ml의 농도의 메페녹삼
을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는데 사용하기 위한 상승적 조성물. - (a) 2500X로 희석된 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 1.0 ug/ml의 농도의 프로피코나졸
을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는데 사용하기 위한 상승적 조성물. - (a) 0.2117 g/kg 종자의 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 0.0298 g/kg 종자의 아족시스트로빈
을 포함하는, 종자 코팅제. - (a) 0.03175 g/kg 종자 내지 0.635 g/kg 종자의 레이노우트리아 사카리넨시스로부터의 추출물; 및
(b) 0.0596 g/kg 종자의 플루디옥소닐
을 포함하는, 종자 코팅제. - 식물병원균 감염을 억제하는데 효과적인 양의 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 조성물을 적용하는 것을 포함하는, 식물병원균 감염을 억제하는 방법.
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