KR101704533B1

KR101704533B1 - 간암 바이오마커로서의 ＥＲＲγ 및 이의 용도

Info

Publication number: KR101704533B1
Application number: KR1020140137785A
Authority: KR
Inventors: 이인규; 박근규; 장병국; 강유나; 김지현
Original assignee: 경북대학교병원
Priority date: 2014-10-13
Filing date: 2014-10-13
Publication date: 2017-02-09
Also published as: KR20160043419A

Abstract

본 발명은 신규한 간암 진단용 바이오마커 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 간암 진단용 바이오마커로서의 ERRγ(estrogen-related receptor gamma)와 이의 간암 진단용으로서의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 신규한 간암 바이오마커인 ERRγ, 이를 검출하기 위한 수단을 포함하는 간암 진단용 키트 및 이들을 이용하는 간암 진단을 위한 정보 제공 방법은 종래의 AFP를 이용한 진단과 비교하여 간암 진단의 민감도 및 특이도를 현저히 상승시킬 수 있으므로 이를 임상에 효과적으로 적용할 수 있는 우수한 효과가 있다.

Description

간암 바이오마커로서의 ＥＲＲγ 및 이의 용도{ERRγ AS THE BIOMAKER TO LIVER CANCER AND USE THEREOF}

본 발명은 신규한 간암 진단용 바이오마커 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 간암 진단용 바이오마커로서의 ERRγ(estrogen-related receptor gamma)와 이의 간암 진단용으로서의 용도에 관한 것이다.

간암은 전 세계적으로 여섯 번째로 흔한 암이며, 암 관련 사망의 가장 높은 원인을 차지하고 있다. 간암의 근본적 치료로 간절제술이 있으나, 초기에 진단받은 30~40%만이 수술적 치료를 할 수 있으며, 수술을 시행할 수 없는 진행된 간암에 대한 보존적 항암치료는 효과가 낮고 재발율이 높아 초기 진단이 중요시되고 있다.

간암 진단을 위해서는 종양표지자인 알파피토프로테인(alpha-fetoprotein, AFP)을 고전적으로 가장 많이 이용하고 있으나, 고위험군에서의 민감도가 39%~97%, 특이도가 76~95%로 편차가 심하고 양성 예측도 역시 9~32%로 낮다. 뿐만 아니라, 간암에 특이적으로 증가되지 않고, 간암 초기에는 정상인 경우가 많아 초기 진단의 바이오마커로 사용하기에는 제한점도 있었다.

최근에는 간암을 비롯한 다양한 종류의 암에서 아직 리간드가 밝혀지지 않은 고아핵수용체의 발현이 암의 발생과 예후에 영향을 미치며, 이러한 고아핵수용체의 암 특이적인 발현을 진단과 예후 평가에 임상적으로 응용하기 위한 활발한 연구들이 이뤄지고 있다.

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10-1200194

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10-1161789

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10-1004960

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본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 신규한 간암 바이오마커로서 고아핵수용체의 일종인 ERRγ, 상기 바이오마커를 검출할 수 있는 간암 진단용 키트 및 이들을 이용한 간암 진단을 위한 정보 제공 방법을 제공하고자 하는 것이다.

상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 ERRγ를 포함하는 간암 진단용 바이오마커 조성물을 제공한다.

상기 ERRγ는 서열번호 1로 표시되는 염기 서열을 갖는 핵산일 수 있다.

상기 ERRγ는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열을 갖는 단백질일 수 있다.

또한, 본 발명은 ERRγ의 발현량을 측정할 수 있는 수단을 포함하는 간암 진단용 키트를 제공한다.

상기 수단은 프라이머, 프로브, 항체, 항체 단편, 마이크로어레이 및 앱타머로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다.

또한, 본 발명은 생물학적 시료로부터 ERRγ의 발현 여부를 검출하는 것을 포함하는 간암 진단을 위한 정보 제공 방법을 제공한다.

상기 생물학적 시료는 간 조직, 간 세포, 혈액, 혈청, 타액 및 뇨로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다.

상기 발현은 mRNA의 발현 또는 단백질의 발현인 것이 바람직하다.

상기 검출은 mRNA 발현의 검출 또는 단백질 발현의 검출인 것이 바람직하다.

상기 mRNA 발현의 검출은 RT-PCR(reverse transcriptase-polymerase chain reaction), 노던 블라팅(northern blotting) 또는 핵산 마이크로어레이(nucleotide microarray)에 의한 검출인 것이 바람직하다.

상기 단백질 발현의 검출은 항원-항체 반응에 의한 검출인 것이 바람직하다.

상기 항원-항체 반응에 의한 검출은 웨스턴 블라팅(western blotting), ELISA(enzyme linked immunosorbent assay), RIA(radioimmunoassay), 면역조직화학(immunohistochemistry) 또는 단백질 마이크로어레이(protein microarray) 또는 앱타머(aptamer)에 의한 검출인 것이 바람직하다.

본 발명의 신규한 간암 바이오마커인 ERRγ, 이를 검출하기 위한 수단을 포함하는 간암 진단용 키트 및 이들을 이용하는 간암 진단을 위한 정보 제공 방법은 종래의 AFP를 이용한 진단과 비교하여 간암 진단의 민감도 및 특이도를 현저히 상승시킬 수 있으므로 이를 임상에 효과적으로 적용할 수 있는 우수한 효과가 있다.

도 1은 정상 간조직과 간암조직에서 ERRγ의 발현 양상을 분석한 그래프이다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

간암 진단을 위해서는 종양표지자인 AFP를 고전적으로 가장 많이 이용하고 있으나, 고위험군에서의 민감도가 39%~97%, 특이도가 76~95%로 편차가 심하고 양성 예측도 역시 9~32%로 낮았다. 뿐만 아니라, 간암에 특이적으로 증가되지 않고, 간암 초기에는 정상인 것으로 나타나는 경우가 많아 간암 초기 진단의 바이오마커로 사용하기에는 제한점도 있었다. 간암은 초기에 진단되지 않으면 명확한 치료 방법이 없어 AFP 이외에 초기 진단에 도움이 되는 바이오마커의 개발이 요구되었다.

본 발명의 본 발명자들은 초기 간암을 진단하기 위한 새로운 분자 마커를 개발하고자 연구를 지속한 결과, 인간 ERRγ의 발현이 간암에서 증가되어 있고, 반면 정상 간조직에서 발현되지 않음을 임상 데이터에 근거하여 확인하였다. 이로써 간암의 초기 진단에 ERRγ의 발현을 새로운 바이오마커로 활용될 수 있는 가능성을 제시하였다.

따라서, 본 발명은 ERRγ를 포함하는 간암 진단용 바이오마커 조성물을 제공한다.

본 발명에서는, 앞서 설명된 바와 같이, 간암에서 고아핵수용체 ERRγ의 발현이 증가하는 반면, 대부분의 정상 간조직에서는 ERRγ의 발현되지 않음을 확인하였다. 또한, 이러한 ERRγ의 발현 차이는 간암 병기와도 의미 있는 차이를 보여 병기가 높을수록 ERRγ 발현이 증가함을 확인하였다. 특히, 본 발명에서 등록된 환자는 수술이 가능한 초기 진단된 간암 환자들로써 ERRγ의 발현 여부가 간암 초기 환자의 중요한 진단적 표지자로 사용할 수 있는 가능성을 제시한다.

고아핵수용체인 ERRγ은 ERR group 중의 하나로, 본 발명에서는 간암으로 수술적 간 절제술을 시행 받은 190명 환자들의 ERRγ 발현 정도를 분석하여, 병기가 높을수록 발현이 많이 됨을 확인하였다. 또한, 간암 조직과 주변 정상 간 조직에서 ERRγ 발현의 차이를 비교 분석하여, 특이도 97.9%, 민감도는 71%로 높게 측정됨을 확인하였고, 양성예측도와 음성 예측도 역시 97.1%, 76.8%로 기존의 AFP보다 우위에 있음을 확인할 수 있었다.

본 발명의 상기 바이오마커 조성물은 간암의 조기 진단을 목적으로 하는 분자 표지를 의미한다. 상기 바이오마커 조성물을 구성하는 ERRγ는 서열번호 1로 표시되는 염기 서열을 갖는 핵산 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열을 갖는 단백질일 수 있다. 또한, 상기 서열번호 1의 염기 서열 또는 서열번호 2의 아미노산 서열과 70%, 바람직하게는 80%, 보다 바람직하게는 90% 이상의 상동성을 갖는 임의의 염기 서열 또는 아미노산 서열일 수도 있다.

상기 "ERRγ"은 앞서 설명된 본 발명의 바이오마커 조성물에 대한 내용과 동일한 의미이다.

상기 "ERRγ의 발현량"이라 함은 ERRγ의 mRNA 발현량 또는 단백질 발현량을 의미한다.

상기 수단은 공지된 분자생물학적 수단 또는 면역화학적 수단일 수 있다.

바람직한 구체예로서, 상기 수단은 프라이머, 프로브, 항체, 항체 단편, 마이크로어레이 및 앱타머로 이루어지는 군으로부터 선택되는 측정 수단일 수 있다. 여기에서, 프라이머, 프로브 또는 핵산 마이크로어레이는 mRNA의 발현량을 측정하는 수단에 해당하고, 항체, 항체 단편, 단백질 마이크로어레이 또는 앱타머는 단백질의 발현량을 측정하는 수단에 해당한다.

상기 "프라이머"는 적합한 온도 및 적합한 완충액 내에서 적합한 조건(즉, 4종의 다른 뉴클레오시드 트리포스페이트 및 중합반응 효소) 하에서 주형-지시 DNA 합성의 개시점으로 작용할 수 있는 단일-가닥 올리고뉴클레오타이드를 의미한다. 프라이머의 적합한 길이는 다양한 요소, 예컨대, 온도와 프라이머의 용도에 따라 변화가 있을 수 있다. 또한, 프라이머의 서열은 주형의 일부 서열과 완전하게 상보적인 서열을 가질 필요는 없으며, 주형과 혼성화되어 프라이머 고유의 작용을 할 수 있는 범위 내에서의 충분한 상보성을 가지면 충분하다. 따라서, 본 발명에서의 프라이머는 주형인 ERRγ 유전자의 뉴클레오타이드 서열에 완벽하게 상보적인 서열을 가질 필요는 없으며, 이 유전자 서열에 혼성화되어 프라이머 작용을 할 수 있는 범위 내에서 충분한 상보성을 가지면 충분하다.

상기 "프로브"는 천연의 또는 변형된 모노머 또는 연쇄(linkages)의 선형 올리고머를 의미하며, 디옥시리보뉴클레오타이드 및 리보뉴클레오타이드를 포함하고 타켓 뉴클레오타이드인 ERRγ의 염기 서열에 특이적으로 혼성화할 수 있으며, 자연적으로 존재하거나 또는 인위적으로 합성된 것을 말한다. 본 발명에 따른 프로브는 단일쇄일 수 있으며, 바람직하게는 올리고디옥시리보뉴클레오티드일 수 있다. 본 발명의 프로브는 자연 dNMP(즉, dAMP, dGMP, dCMP 및 dTMP), 뉴클레오타이드 유사체 또는 유도체를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 프로브는 리보뉴클레오타이드도 포함할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 프로브는 골격 변형된 뉴클레오타이드, 예컨대, 펩타이드 핵산(PNA)(M. Egholm et al., Nature, 365:566-568(1993)), 포스포로티오에이트 DNA, 포스포로디티오에이트 DNA, 포스포로아미데이트 DNA, 아마이드-연결된 DNA, MMI-연결된 DNA, 2'-O-메틸 RNA, 알파-DNA 및 메틸포스포네이트 DNA, 당 변형된 뉴클레오타이드 예컨대, 2'-O-메틸 RNA, 2'-플루오로 RNA, 2'-아미노 RNA, 2'-O-알킬 DNA, 2'-O-알릴 DNA, 2'-O-알카이닐 DNA, 헥소스 DNA, 피라노실 RNA 및 안히드로헥시톨 DNA, 및 염기 변형을 갖는 뉴클레오타이드, 예컨대, C-5 치환된 피리미딘(치환기는 플루오로-, 브로모-, 클로로-, 아이오도-, 메틸-, 에틸-, 비닐-, 포르밀-, 에티틸-, 프로피닐-, 알카이닐-, 티아조릴-, 이미다조릴-, 피리딜- 포함), C-7 치환기를 갖는 7-데아자퓨린(치환기는 플루오로-, 브로모-, 클로로-, 아이오도-, 메틸-, 에틸-, 비닐-, 포르밀-, 알카이닐-, 알켄일-, 티아조릴-, 이미다조릴-, 피리딜-), 이노신 및 디아미노퓨린을 포함할 수 있다.

상기 "항체"는 상기 ERRγ 단백질에 대해 특이적으로 결합할 수 있는 다클론 항체, 단일클론 항체 및 재조합 항체 등을 포함할 수 있다.

상기 항체는 상업적으로 구입하여 사용할 수 있으며, 상기 기술한 바와 같이 ERRγ 단백질의 아미노산 서열이 공지되어 있으므로, 상기 아미노산 서열을 이용하여 항체를 직접 제조하여 사용할 수도 있다.

항체 제조 방법은 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에 공지된 다양한 항체 생산 기술을 이용할 수 있으며, 예컨대, 다클론 항체의 경우에는 ERRγ 항원을 동물에 주사하고, 동물로부터 채혈하여 항체를 포함하는 혈청을 수득하는 당업계에 널리 공지된 방법에 의해 생산할 수 있으며, 이러한 다클론 항체는 염소, 토끼, 양, 원숭이, 말, 돼지, 소, 개 등의 임의의 동물 종 숙주로부터 제조가능하다. 단일클론 항체의 경우에는 당업계에 널리 공지된 하이브리도마(hybridoma) 방법(Kohler et al., European Jounral of Immunology, 6, 511-519, 1976)을 이용하여 제조할 수 있거나 또는 파지 항체 라이브러리(Clackson et al, Nature, 352, 624-628, 1991, Marks et al, J. Mol. Biol., 222:58, 1-597, 1991) 기술을 이용하여 제조할 수 있다.

상기 "항체 단편"은 항체 분자의 기능적인 단편을 의미하며, 항체 분자의 기능적인 단편이란 적어도 항원 결합 기능을 보유하고 있는 항체 단편으로서, 예를 들어, Fab, F(ab'), F(ab')2 및 Fv 등이 있다.

상기 "마이크로어레이"는, 예를 들어 ERRγ 유전자를 검출하기 위한 핵산 마이크로어레이 또는 ERRγ 단백질을 검출하기 위한 단백질 마이크로어레이일 수 있다.

본 발명의 마이크로어레이는 ERRγ 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정할 수 있는 프라이머, 프로브 또는 항체는 혼성화 어레이 요소(hybridizable array element)로서 이용되며, 기질(substrate) 상에 고정화된다. 바람직한 기질은 적합한 견고성 또는 반-견고성 지지체로서, 예컨대, 막, 필터, 칩, 슬라이드, 웨이퍼, 파이버, 자기성 비드 또는 비자기성 비드, 겔, 튜빙, 플레이트, 고분자, 미소입자 및 모세관을 포함할 수 있다. 상기 혼성화 어레이 요소는 상기 기질 상에 배열되고 고정화되며, 이와 같은 고정화는 화학적 결합 방법 또는 UV와 같은 공유 결합적 방법에 의해 수행될 수 있다. 예를 들어, 상기 혼성화 어레이 요소는 에폭시 화합물 또는 알데히드기를 포함하도록 변형된 글래스 표면에 결합될 수 있고, 또한 폴리라이신 코팅 표면에서 UV에 의해 결합될 수 있다. 또한, 상기 혼성화 어레이 요소는 링커(예: 에틸렌 글리콜 올리고머 및 디아민)를 통해 기질에 결합될 수 있다.

상기 "앱타머"는 ERRγ 단백질에 친화성을 갖는 핵산 올리고머를 의미한다. 상기 앱타머는 무작위적으로 합성된 약 60염기로 이루어지는 DNA 올리고머를 합성하고, 이들 중에서 ERRγ 단백질과 결합하는 DNA 올리고머를 친화성 컬럼으로 분리하고, 이를 증폭 및 상기 분리 과정을 반복하여 ERRγ에 친화성을 갖는 앱타머를 제조할 수 있다.

본 발명의 간암 진단용 키트는 ERRγ 유전자 검출용 또는 ERRγ 단백질 검출용일 수 있다.

본 발명의 간암 진단용 키트가 PCR 증폭 과정에 적용되는 유전자 증폭용인 경우, 본 발명의 키트는 선택적으로, PCR 증폭에 필요한 시약, 예컨대, 완충액, DNA 중합효소(예컨대, Thermus aquaticus(Taq), Thermus thermophilus(Tth), Thermus filiformis, Thermis flavus, Thermococcus literalis 또는 Pyrococcus furiosus(Pfu)로부터 수득한 열 안정성 DNA 중합효소), DNA 중합 효소 조인자 및 dNTPs를 포함할 수 있으며, 본 발명의 간암 진단용 키트가 면역 분석에 적용되는 ERRγ 단백질 검출용인 경우, 본 발명의 키트는 선택적으로, 이차항체 및 표지의 기질을 포함할 수 있다. 나아가, 본 발명에 따른 키트는 상기한 시약 성분을 포함하는 다수의 별도 패키징 또는 컴파트먼트로 제작될 수 있다.

상기 검출은 ERRγ 유전자 또는 단백질의 수준을 정량적으로 측정하며, 예를 들어, 하기 실시예에 나타난 바와 같은 신호 강도 수준(0. 1. 2 및 3) 등의 방법으로 측정될 수 있다.

본 발명에서 상기 "생물학적 시료"란 간암 발생 또는 진행 정도에 따른 상기 ERRγ 유전자의 발현 수준 또는 ERRγ 단백질의 발현 수준이 정상 대조군과는 다른, 생체로부터 채취된 시료를 말하며, 예를 들어 상기 생물학적 시료는 간 조직, 간 세포, 혈액, 혈청, 타액 또는 뇨를 들 수 있다.

상기 ERRγ 유전자의 발현 수준 측정은 바람직하게는 mRNA의 수준을 측정하는 것이며, 이 경우 상기 생물학적 시료로부터 RNA를 추출하는 과정을 수행하여야 한다. 추출된 RNA로부터 ERRγ mRNA의 수준을 측정하는 방법으로는 역전사 중합효소연쇄반응(RT-PCR), 실시간 역전사 중합효소연쇄반응(real-time RT-PCR), RNase 보호 분석법, 노던 블라팅(northern blotting) 또는 핵산 마이크로어레이(nucleotide microarray) 등이 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

상기 ERRγ 단백질 수준 측정은 항체를 이용할 수 있는데, 이러한 경우, 생물학적 시료 내의 ERRγ 마커 단백질과 이에 특이적인 항체는 결합물, 즉, 항원-항체 복합체를 형성하며, 항원-항체 복합체의 형성량은 검출 라벨(detection label)의 시그널의 크기를 통해서 정량적으로 측정할 수 있다. 이러한 검출 라벨은 효소, 형광물, 리간드, 발광물, 미소입자(microparticle), 레독스 분자 및 방사선 동위원소로 이루어진 그룹 중에서 선택할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 단백질 수준을 측정하기 위한 분석 방법으로는, 웨스턴 블라팅(western blotting), ELISA(enzyme linked immunosorbent assay), RIA(radioimmunoassay), 면역조직화학(immunohistochemistry) 또는 단백질 마이크로어레이(protein microarray) 또는 앱타머(aptamer) 등을 예로 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상술한 바와 같은 측정 방법에 따라 ERRγ 유전자 또는 단백질의 수준을 정량적으로 평가할 수 있으며, 그 발현 정도에 따라 간암의 발생 여부에 대한 임상적 판단을 위한 기초 정보를 제공할 수 있다.

이하에서는, 구체적인 실시예를 통하여 본 발명의 더욱 상세하게 설명한다.

[ 실시예 ]

1. 방 법

2001년부터 2011년까지 계명대학교 동산의료원에서 간암으로 수술한 190명의 환자를 대상으로 후향적으로 연구를 수행하였다. 예측하지 못한 교란 변수를 배제하기 위하여 간암화학색전술 혹은 고주파시술을 시행 받은 경우에는 등록에서 제외하였다.

성별, 연령, 간암의 원인, 간경변 동반 유무와 간의 기능성 상태, 절제 당시 종양의 크기를 분석하였으며, 미국암연합위원회가 2010년 제정한 TNM 병기와 Barcelona Clinic Liver Cancer(BCLC) 분류에 따라 간암의 진행 정도를 확인하였다.

수술한 간암 조직과 주변부의 정상조직을 포르말린 고정, 파라핀 조직 샘플로 조직 마이크로 어레이 블록을 만들었으며, ERRγ 항체를 이용하여 면역조직화학염색을 시행하였다. 염색된 정도는 암세포의 염색된 비율에 따라 분류하였다(0, no staining; 1, weak; 2, moderate; 3, strong). 임상적 자료를 바탕으로 18판 SPSS를 통해 통계적 유의성을 분석하였다.

2. 결 과

간암절제술을 시행 받은 190명의 환자 중 158명(83%)이 남자였으며, 전체 간암 환자 중 72%에 해당하는 137명은 HBV로 인한 간암이 발생한 경우였다. ERRγ 발현이 낮은 ERRγ low (ERRγ0-1) 그룹과 ERRγ 발현이 많은 ERRγ high (ERRγ 2-3) 그룹간에 성별, 연령, 간암의 발병 원인, 간경변의 동반여부에서는 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다(표 1).

[표 1] 190명의 간암 환자들의 ERR γ 발현과 임상적 특징 분석

그러나, ERRγ의 발현 정도에 따른 간암의 병기를 분석하였을 때 TNM 병기 분류법에 따른 I, II기에서는 ERRγ 발현이 낮은 그룹이 많았으며, 암이 진행된 III에서는 ERRγ 발현이 높은 그룹의 비율이 유의하게 높음을 알 수 있었다. BCLC 병기에 따라 분류하였을 때에도 비슷한 결과를 확인할 수 있었다(도 1).

마지막으로 간암 조직과 주변의 정상 간조직에서 ERRγ의 발현 정도를 분석하였다. 흥미롭게도 정상 간조직에서 96.3%가 ERRγ가 발현되지 않은 반면, 간암조직에서는 71%에서 ERRγ가 발현됨을 확인할 수 있었다. 정상조직과 간암조직에서 ERRγ 발현 차이를 종합하여 분석하였을 때, 간암에 대한 ERRγ 발현의 특이도는 97.9% (183/183+4), 민감도는 71% (135/135+55)로 높게 측정되었으며, 양성예측도와 음성 예측도 역시 97.1% (135/135+4), 76.8% (183/183+55)로 높은 진단율을 확인하였다(표 2).

[표 2] 정상 간조직과 간암조직에서 ERR γ의 발현 분석

<110> KYUNGPOOK NATIONAL UNIVERSITY HOSPITAL <120> ERR GAMMA AS THE BIOMAKER TO LIVER CANCER AND USE THEREOF <130> PP14-057 <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1308 <212> DNA <213> Homo sapiens ERR-gamma coding sequence <400> 1 atgtcaaaca aagatcgaca cattgattcc agctgttcgt ccttcatcaa gacggaacct 60 tccagcccag cctccctgac ggacagcgtc aaccaccaca gccctggtgg ctcttcagac 120 gccagtggga gctacagttc aaccatgaat ggccatcaga acggacttga ctcgccacct 180 ctctaccctt ctgctcctat cctgggaggt agtgggcctg tcaggaaact gtatgatgac 240 tgctccagca ccattgttga agatccccag accaagtgtg aatacatgct caactcgatg 300 cccaagagac tgtgtttagt gtgtggtgac atcgcttctg ggtaccacta tggggtagca 360 tcatgtgaag cctgcaaggc attcttcaag aggacaattc aaggcaatat agaatacagc 420 tgccctgcca cgaatgaatg tgaaatcaca aagcgcagac gtaaatcctg ccaggcttgc 480 cgcttcatga agtgtttaaa agtgggcatg ctgaaagaag gggtgcgtct tgacagagta 540 cgtggaggtc ggcagaagta caagcgcagg atagatgcgg agaacagccc atacctgaac 600 cctcagctgg ttcagccagc caaaaagcca tataacaaga ttgtctcaca tttgttggtg 660 gctgaaccgg agaagatcta tgccatgcct gaccctactg tccccgacag tgacatcaaa 720 gccctcacta cactgtgtga cttggccgac cgagagttgg tggttatcat tggatgggcg 780 aagcatattc caggcttctc cacgctgtcc ctggcggacc agatgagcct tctgcagagt 840 gcttggatgg aaattttgat ccttggtgtc gtataccggt ctctttcgtt tgaggatgaa 900 cttgtctatg cagacgatta tataatggac gaagaccagt ccaaattagc aggccttctt 960 gatctaaata atgctatcct gcagctggta aagaaataca agagcatgaa gctggaaaaa 1020 gaagaatttg tcaccctcaa agctatagct cttgctaatt cagactccat gcacatagaa 1080 gatgttgaag ccgttcagaa gcttcaggat gtcttacatg aagcgctgca ggattatgaa 1140 gctggccagc acatggaaga ccctcgtcga gctggcaaga tgctgatgac actgccactc 1200 ctgaggcaga cctctaccaa ggccgtgcag catttctaca acatcaaact agaaggcaaa 1260 gtcccaatgc acaaactttt tttggaaatg ttggaggcca aggtctga 1308 <210> 2 <211> 435 <212> PRT <213> Homo sapiens ERR-gamma amino acid sequence <400> 2 Met Ser Asn Lys Asp Arg His Ile Asp Ser Ser Cys Ser Ser Phe Ile 1 5 10 15 Lys Thr Glu Pro Ser Ser Pro Ala Ser Leu Thr Asp Ser Val Asn His 20 25 30 His Ser Pro Gly Gly Ser Ser Asp Ala Ser Gly Ser Tyr Ser Ser Thr 35 40 45 Met Asn Gly His Gln Asn Gly Leu Asp Ser Pro Pro Leu Tyr Pro Ser 50 55 60 Ala Pro Ile Leu Gly Gly Ser Gly Pro Val Arg Lys Leu Tyr Asp Asp 65 70 75 80 Cys Ser Ser Thr Ile Val Glu Asp Pro Gln Thr Lys Cys Glu Tyr Met 85 90 95 Leu Asn Ser Met Pro Lys Arg Leu Cys Leu Val Cys Gly Asp Ile Ala 100 105 110 Ser Gly Tyr His Tyr Gly Val Ala Ser Cys Glu Ala Cys Lys Ala Phe 115 120 125 Phe Lys Arg Thr Ile Gln Gly Asn Ile Glu Tyr Ser Cys Pro Ala Thr 130 135 140 Asn Glu Cys Glu Ile Thr Lys Arg Arg Arg Lys Ser Cys Gln Ala Cys 145 150 155 160 Arg Phe Met Lys Cys Leu Lys Val Gly Met Leu Lys Glu Gly Val Arg 165 170 175 Leu Asp Arg Val Arg Gly Gly Arg Gln Lys Tyr Lys Arg Arg Ile Asp 180 185 190 Ala Glu Asn Ser Pro Tyr Leu Asn Pro Gln Leu Val Gln Pro Ala Lys 195 200 205 Lys Pro Tyr Asn Lys Ile Val Ser His Leu Leu Val Ala Glu Pro Glu 210 215 220 Lys Ile Tyr Ala Met Pro Asp Pro Thr Val Pro Asp Ser Asp Ile Lys 225 230 235 240 Ala Leu Thr Thr Leu Cys Asp Leu Ala Asp Arg Glu Leu Val Val Ile 245 250 255 Ile Gly Trp Ala Lys His Ile Pro Gly Phe Ser Thr Leu Ser Leu Ala 260 265 270 Asp Gln Met Ser Leu Leu Gln Ser Ala Trp Met Glu Ile Leu Ile Leu 275 280 285 Gly Val Val Tyr Arg Ser Leu Ser Phe Glu Asp Glu Leu Val Tyr Ala 290 295 300 Asp Asp Tyr Ile Met Asp Glu Asp Gln Ser Lys Leu Ala Gly Leu Leu 305 310 315 320 Asp Leu Asn Asn Ala Ile Leu Gln Leu Val Lys Lys Tyr Lys Ser Met 325 330 335 Lys Leu Glu Lys Glu Glu Phe Val Thr Leu Lys Ala Ile Ala Leu Ala 340 345 350 Asn Ser Asp Ser Met His Ile Glu Asp Val Glu Ala Val Gln Lys Leu 355 360 365 Gln Asp Val Leu His Glu Ala Leu Gln Asp Tyr Glu Ala Gly Gln His 370 375 380 Met Glu Asp Pro Arg Arg Ala Gly Lys Met Leu Met Thr Leu Pro Leu 385 390 395 400 Leu Arg Gln Thr Ser Thr Lys Ala Val Gln His Phe Tyr Asn Ile Lys 405 410 415 Leu Glu Gly Lys Val Pro Met His Lys Leu Phe Leu Glu Met Leu Glu 420 425 430 Ala Lys Val 435

Claims

ERRγ(estrogen-related receptor gamma) 단백질을 포함하는 간암 진단용 바이오마커 조성물.
삭제
제 1항에 있어서, 상기 ERRγ 단백질은 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열을 갖는 단백질인 것을 특징으로 하는 간암 진단용 바이오마커 조성물.
ERRγ(estrogen-related receptor gamma) 단백질의 발현량을 측정할 수 있는 수단을 포함하는 간암 진단용 키트.
제 4항에 있어서, 상기 수단은 항체 또는 항체 단편인 것을 특징으로 하는 간암 진단용 키트.
생물학적 시료로부터 ERRγ(estrogen-related receptor gamma) 단백질의 발현 여부를 검출하는 것을 포함하는 간암 진단을 위한 정보 제공 방법.
제 6항에 있어서, 상기 생물학적 시료는 간 조직, 간 세포, 혈액, 혈청, 타액 및 뇨로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 간암 진단을 위한 정보 제공 방법.
삭제
삭제
삭제
제 6항에 있어서, 상기 단백질의 발현 여부를 검출하는 것은 항원-항체 반응에 의한 검출인 것을 특징으로 하는 간암 진단을 위한 정보 제공 방법.
제 11항에 있어서, 상기 항원-항체 반응에 의한 검출은 웨스턴 블라팅(western blotting), ELISA(enzyme linked immunosorbent assay), RIA(radioimmunoassay), 면역조직화학(immunohistochemistry) 또는 단백질 마이크로어레이(protein microarray)에 의한 검출인 것을 특징으로 하는 간암 진단을 위한 정보 제공 방법.