CN109439760B - Arrdc2在评估口腔鳞癌发展进程中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了ARRDC2在评估口腔鳞癌发展进程中的应用，本发明通过高通量测序以及生物信息学分析，筛选到在肿瘤不同发展进程中表达显著变化的基因ARRDC2，提示可将ARRDC2作为分子标志物应用于口腔鳞癌发展进程的判断，精确、客观预测肿瘤预后、指导治疗方案的制定和疗效监测。

Description

ARRDC2在评估口腔鳞癌发展进程中的应用

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及ARRDC2在评估口腔鳞癌发展进程中的应用。

背景技术

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是口腔最常见的恶性肿瘤，每年全球有500000例新发病例出现，给整个社会的医疗保障***带来了巨大的挑战与负担。基因遗传背景的易感性与环境因素的共同作用导致了口腔鳞状细胞癌的发生、发展，由于频繁的远处转移、较差的预后以及高的复发率，口腔鳞状细胞癌患者的生存期较短。当前，大多数口腔鳞状细胞癌患者在诊断时即已处于疾病的晚期，因此一个合适的肿瘤相关标志物将有助于口腔鳞状细胞癌患者的早期诊断与预后判断。

在过去的几十年中，口腔癌机制研究和治疗方法等有了显著进步，但患者的5年生存率仍然停留在约50％，没有显著改变，因此加强恶性肿瘤的防治研究，准确、客观评价肿瘤生物学行为和预后、制定治疗方案显得更为迫切。肿瘤的分型(classification)、分级(grading)和分期(staging)是目前评价肿瘤生物学行为和诊断的最重要的三项指标，其中分级和分期主要用于恶性肿瘤生物学行为和预后的评估。近数十年来，随着生命科学和医学技术的突破性进展，肿瘤个体化治疗相关靶标的检测及包括靶向治疗在内的个体化治疗药物的临床应用，不仅在很大程度上提高了早期肿瘤的检出率，也明显改善了许多肿瘤的预后。传统肿瘤分型、分级和分期的临床价值和意义也随之产生不同程度的变化。为肿瘤的个体化治疗提供更为精确的分子生物学信息、指导个体化治疗方案的制定和疗效监测。

异型性(atypia)是恶性肿瘤的重要组织学特征，其实质是肿瘤分化程度的形态学表现，反映的是肿瘤组织在组织结构和细胞形态上与其来源的正常组织细胞间不同程度的形态差异。这种肿瘤组织异型性的大小可用肿瘤的分级(grading，G)来表示。目前肿瘤的分级常用简明三级方案：I级(G1)，即分化良好者(称为“高分化”)，肿瘤细胞接近相应的正常发源组织，恶性程度低；III级(G3)，分化较低的细胞(称为“低分化”)，肿瘤细胞与相应的正常发源组织区别大、分化差，为高度恶性；II级(G2)，组织异型性介于I级和III级之间者，恶性程度居中。

肿瘤的分级主要是根据显微镜下HE染色切片中肿瘤组织结构和细胞异型性的大小、核***像或增殖指数的多少、坏死范围、侵袭状况等参数确定的。然而，由于肿瘤组织结构的复杂性和异质性特征，不同类型肿瘤(例如腺癌、鳞癌、肾细胞癌、乳腺癌等等)均有其不同的结构特征和分级标准，且缺乏定量指标，此外，由于受取材充分程度和对诊断标准、异型性判读的主观性差异的影响，均不同程度地影响到肿瘤分级的客观性、精确性和可重复性。随着分子生物学的发展，人们开始关注基因与肿瘤的相关性，探讨基因与口腔鳞癌发展进程的相关性，积极开展以肿瘤特异性分子靶标的检测为核心的分子分型诊断是精确、客观预测肿瘤预后、指导治疗方案的制定和疗效监测的前提和基础，对于肿瘤个体化治疗的实施具有重要意义。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种与口腔鳞癌的发展进程相关的生物标志物，使用该标志物，可以评估口腔鳞癌患者的癌症分级，从而实现口腔鳞癌的精准治疗。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面提供了检测ARRDC2的试剂在制备评估口腔鳞癌发展进程的产品中的应用。

进一步，所述试剂包括通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测样本中ARRDC2表达水平的试剂。其中，用于检测ARRDC2的样本包括细胞、组织、脏器、体液(血液、淋巴液等)、消化液、咳痰、肺胞支气管清洗液、尿、粪便等。优选的，所述样本为组织、血液。在本发明的具体实施方式中，所述样本为组织。

进一步，所述试剂选自：

特异性识别ARRDC2的探针；或

特异性扩增ARRDC2的引物；或

特异性结合ARRDC2的抗体或配体。

进一步，特异性扩增ARRDC2的引物序列如SEQ ID NO.3～4所示。

进一步，ARRDC2在恶性程度高的口腔鳞癌患者中表达上调。

本发明的第二方面提供了一种评估口腔鳞癌发展进程的试剂盒，所述试剂盒包含进行DNA微阵列、寡核苷酸微阵列、蛋白阵列、RNA印迹法、RNase保护试验、蛋白质印迹法和反转录聚合酶链反应所必需的DNA芯片、寡核苷酸芯片、蛋白芯片、探针或引物，以检测ARRDC2的表达。

进一步，所述试剂盒通过DNA微阵列、反转录聚合酶链反应或者蛋白阵列的方法进行检测。

进一步，通过反转录聚合酶链反应进行检测的试剂包括特异性扩增ARRDC2的引物，优选的，所述引物的序列如SEQ ID NO.3～4所示。

进一步，ARRDC2在不同发展进程的口腔鳞癌中的表达水平不同，其中在分化程度高、恶性程度低的口腔鳞癌中表达水平相对较低，在分化程度低、恶性程度高的口腔鳞癌中表达水平相对较高。

本发明的第三方面提供了ARRDC2在构建评估口腔鳞癌发展进程的计算模型中的应用。

本发明所述的试剂盒可用于检测包括ARRDC2基因在内的多个基因(例如，与口腔鳞癌发展进程相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白芯片或蛋白免疫检测试剂盒可用于检测包括ARRDC2蛋白在内的多个蛋白质(例如与口腔鳞癌发展进程相关的多个蛋白质)的表达水平。将口腔鳞癌危险程度的多个标志物同时进行检测，可大大提高口腔鳞癌危险程度诊断的准确率。

本发明的优点和有益效果：

本发明选择ARRDC2作为分子标志物，可以判断口腔鳞癌的发展进程，从而指导医生对不同发展进程中的口腔鳞癌患者采取不同的治疗策略、手段及措施，进而可以避免过度治疗，也可以避免治疗强度不足，实现口腔鳞癌患者的个体化治疗。

附图说明

图1是利用QPCR检测ARRDC2在口腔鳞癌组织中的表达情况图。

具体的实施方式

本发明经过广泛而深入的研究，通过高通量测序以及生物信息学分析，筛选在从G1至中等分化OSCC(G2)、以及从G2至不良分化OSCC(G3)转变过程中其表达显著变化的基因。用所选的在每个转变阶段中其表达显著改变基因可以正确地预测肿瘤组织的分化等级。因此，这些基因可以用于诊断OSCC的分化等级。

在本发明中，本领域技术人员将认识到，本发明的实用性并不局限于对本发明的标志物基因的任何特定变体的基因表达进行定量。所述ARRDC2基因在目前国际公共核酸数据库GeneBank中的ID为27106。

作为非限制性的实例，一种代表性的人ARRDC2的编码序列或氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。ARRDC2包括包含SEQ ID NO.2的多肽和其它ARRDC2天然序列多肽，诸如天然存在变体和天然序列多肽，其由SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列编码。

本发明所述的分子标志物包括基因和蛋白。此类标志物包括含有编码分子标志物的核酸序列或此序列的互补序列的完整或部分序列的DNA。分子标志物核酸还包括含有所关注的任何核酸序列的完整或部分序列的RNA。分子标志物蛋白是由本发明的DNA分子标志物编码的或对应于本发明的DNA分子标志物的蛋白。分子标志物蛋白包含任何分子标志物蛋白或多肽的完整或部分氨基酸序列。分子标志物基因和蛋白的片段和变体也包括在本发明的范围内。

本发明可以利用本领域内已知的任何方法测定基因表达。本领域技术人员应当理解，测定基因表达的手段不是本发明的重要方面。可以在转录或翻译(即蛋白)水平上检测生物标志物的表达水平。这些技术包括但不限于：核酸测序、核酸杂交、核酸扩增技术、蛋白免疫技术。

在本发明中，试剂盒包括检测ARRDC2的试剂，以及选自下组的一种或多种物质：容器、使用说明书、阳性对照物、阴性对照物、缓冲剂、助剂或溶剂。

本发明的试剂盒中还可附有试剂盒的使用说明书，其中记载了如何采用试剂盒进行检测，和如何利用检测结果对肿瘤发展进行判断、对治疗方案进行选择。

试剂盒的组分可以以水介质的形式或以冻干的形式来包装。试剂盒中适当的容器通常至少包括一种小瓶、试管、长颈瓶、宝特瓶、针筒或其它容器，其中可放置一种组分，并且优选地，可进行适当地等分。在试剂盒中存在多于一种的组分时，试剂盒中通常也将包含第二、第三或其它附加的容器，其中分离地放置附加的组分。然而，不同组合的组分可被包含在一个小瓶中。本发明的试剂盒通常也将包括一种用于容纳反应物的容器，密封以用于商业销售。这种容器可包括注模或吹模的塑料容器，其中可保留所需的小瓶。

术语“探针”是指寡核苷酸及其类似物，并涉及通过与靶序列的核苷酸碱基的氢键相互作用而识别多核苷酸靶序列的一系列化学物质。意欲包括在促进杂交的条件下与核酸或其补体中的靶标序列特异性杂交，从而允许检测靶标序列或其扩增的核酸的核酸寡聚体或适体。检测可以是直接(即由直接与靶标或扩增的序列杂交的探针产生)或间接(即由与连接探针和靶标或扩增的序列的中间分子结构杂交的探针产生)的。探针的“靶标”通常指扩增的核酸序列中与至少部分探针序列通过标准氢键或“碱基配对”特异性杂交的序列。“充分地互补”的序列允许探针序列与靶标序列稳定杂交，即使该两个序列不完全互补。探针可被标记或不标记。探针可通过具体DNA序列的分子克隆生产，也可被合成。本发明所属领域的技术人员可容易地确定可在本发明的背景下设计和使用的多种引物和探针。

术语“引物”表示寡核苷酸，不管是在纯化的限制性消化物中天然存在还是合成产生，当置于诱导与核酸链互补的引物延伸产物合成的条件下，即在存在核苷酸和诱导剂如DNA聚合酶并在合适温度和pH下时它能作为合成起点。引物可以是单链或双链，并且必须足够长以在诱导剂存在下引发合成预期的延伸产物。引物的确切长度依赖于很多因素，其中包括温度、引物来源和使用方法。例如，对于诊断应用，依赖于靶序列的复杂性，寡核苷酸引物通常含有15-25个或更多核苷酸，尽管它可以含有更少核苷酸。参与确定引物适当长度的因素对于本领域技术人员容易知道。

术语“微阵列”是杂交阵列原件有序排列在基质上，所述杂交阵列原件诸如聚核苷酸探针(例如寡核苷酸)或结合剂(例如抗体)。所述基质可以是固体基质，例如，玻璃或二氧化硅玻片、珠、纤维光学粘结剂或半固态基质，例如硝酸纤维素膜。核苷酸序列可以是DNA、RNA或其中的任何排列。

本发明中使用的针对上述ARRDC2蛋白质的抗体以最广义使用，而且具体涵盖例如单克隆抗体、多克隆抗体、具有多表位特异性的抗体，多特异性抗体和抗体片段。此类抗体可以是嵌合的，人源化的，人的和合成的。

在本发明中，术语“包括”用于指短语“包括但不限于”，并与短语“包括但不限于”可以互换使用。

统计学方法

在本发明中，实验至少采用3次重复实验，结果数据都是以平均值±标准差的方式来表示，使用SPSS18.0统计软件来进行统计分析的，两者之间的差异采用t检验，认为当P<0.05时具有统计学意义。

下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的说明。以下实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1筛选与口腔鳞癌相关的基因标志物

1、样品收集

各收集68例口腔鳞癌组织和癌旁组织，其中包括经组织学分级为I级(G1)的患者20例，组织学分级为II级(G2)的患者30例，组织学分级为III级(G3/G4)的患者18例。患者术前未接受任何治疗。患者均知情同意，上述所有标本的取得均通过组织伦理委员会的同意每组各取4例标本进行基因表达谱的检测分析，进行差异表达基因的筛选，并在各组全部标本中进行验证实验。

2、RNA样品的制备(利用QIAGEN的组织RNA提取试剂盒进行操作)

取出冻存于液氮中的组织样本，把组织样本放入已预冷的研钵中进行研磨，按照试剂盒中的说明书提取分离RNA。具体如下：

1)加入Trizol，室温放置5min；

2)加入氯仿0.2ml，用力振荡离心管，充分混匀，室温下放置5-10min；

3)12000rpm离心15min，将上层水相移到另一新的离心管中(注意不要吸到两层水相之间的蛋白物质)，加入等体积的-20℃预冷的异丙醇，充分颠倒混匀，置于冰上10min；

4)12000rpm高速离15min后小心弃掉上清液，按1ml/ml Trizol的比例加入75％DEPC乙醇洗涤沉淀(4℃保存)，洗涤沉淀物，振荡混匀，4℃，12000rpm离心5min；

5)弃去乙醇液体，室温下放置5min，加入DEPC水溶解沉淀；

6)用Nanodrop2000紫外分光光度计测量RNA纯度及浓度，冻存于-70℃冰箱。

3、构建cDNA文库

使用Ribo-Zero试剂盒除去总RNA中的核糖体RNA，利用Illumina TruseqTM RNAsample Prep Kit进行cDNA文库的构建，具体操作按说明书进行。

4、上机测序

使用Illumina X-Ten测序平台对cDNA文库进行测序，具体操作按说明书进行。

5、高通量转录组测序数据分析

对测序结果进行生物信息学分析，使用工具为R-3.3.3进行linear by linearassociation test分析，根据每个基因的表达量的四分位数将每个样本划分到为4个表达量区间，然后检测表达量区间与tumor grade的相关性。当FDR值<0.05时，认为基因显著差异表达。

6、结果

ARRDC2基因在不同分化程度的口腔鳞癌组织中的表达量呈现显著性差异，与G1相比，G2和G3/G4中ARRDC2的表达显著上调，与G2相比，G3/G4中ARRDC2的表达显著上调，提示ARRDC2可作为可能的标志物为用于区分不同发展进程的口腔鳞癌。

实施例2 QPCR测序验证ARRDC2基因的差异表达

1、对ARRDC2基因差异表达进行大样本QPCR验证。

2、RNA提取步骤如实施例1所述。

3、逆转录：

采用FastQμant cDNA第一链合成试剂盒(货号：KR106)进行mRNA反转录，首先去除基因组DNA反应，在试管中加入5×gDNA Bμffer 2.0μl，总RNA 1μg，加Rnase Free ddH₂O使总体积至10μl，水浴锅中42℃加热3min，再将10×Fast RT Bμffer 2.0μl，RT Enzyme Mix1.0μl，FQ-RT Primer Mix 2.0μl，RNase Free ddH₂O5.0μl，混合后加入上述试管中一起混合共20μl，水浴锅中42℃加热15min，95℃加热3min。

4、QPCR扩增检测

根据ARRDC2和GAPDH的序列设计QPCR扩增引物，由博迈德生物公司合成。具体引物序列如下：

ARRDC2基因：

正向引物为5’-CCATGAGTTCCTGTTCAG-3’(SEQ ID NO.3)；

反向引物为5’-ATACAGTAGCGGACACTA-3’(SEQ ID NO.4)。

管家基因GAPDH的引物序列为：

正向引物：5’-CTCTGGTAAAGTGGATATTGT-3’(SEQ ID NO.5)

反向引物：5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’(SEQ ID NO.6)

用SuperReal PreMix Plus(SYBR Green)(货号：FP205)，进行扩增，实验操作按产品说明书进行。

采用20μl反应体系：2×SuperReal PreMix Plus 10μl，正反向引物(10μM)各0.6μl，5×ROX Reference Dye△2μl，DNA模板2μl，灭菌蒸馏水4.8μl。每个样本设置3个平行管，所有扩增反应均重复三次以上以保证结果的可靠性。

扩增程序为：95°15min，(95℃10s，55℃30s，72℃32s)×40个循环，95℃15s，60℃60s，95℃15s)。以SYBR Green作为荧光标记物，通过融解曲线分析和电泳确定目的条带，2^-ΔΔCT法进行相对定量。

6、结果

结果如图1所示，ARRDC2在不同发展进程的口腔鳞癌组织中呈现显著性差异，且分化程度越低，恶性程度越高，ARRDC2的表达水平越高，提示ARRDC2可作为分子标志物应用于口腔鳞癌分化等级的判断，精确、客观预测肿瘤预后、指导治疗方案的制定和疗效监测。

上述实施例的说明只是用于理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也将落入本发明权利要求的保护范围内。

序列表

<110> 湖南中南大学湘雅口腔医院

<120> ARRDC2在评估口腔鳞癌发展进程中的应用

<160> 6

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1209

<212> DNA

<213> Homo sapiens

<400> 1

atgcgctctg ggggcgtgcg cagcttcgcg ctggagctgg cgcggggccc gggcggcgcc 60

taccgcggcg gggagcggct gtgcggccgg gtgctgctgg aggcggcggc gccgctgcgg 120

gtgcgagcgc tcgaggtgaa ggcgcgcggc ggggcggcca cccactggtt ggagggtcgc 180

agcgtgggcg tcaacgccgt atccagcgac tacgcggccg cggagaccta cctgcggcgt 240

cggcagctgc tgctccgaga taccggggag accacgacgc tgcctcctgg gcgccatgag 300

ttcctgttca gcttccagct gcccccgacc ctggtgacat ccttcgaggg caaacacggt 360

agtgtccgct actgtatcaa ggccaccctg caccggccct gggtcccagc acgccgggca 420

aggaaggtgt tcactgtcat cgagcctgtg gacatcaaca cgccagccct gctggcacct 480

caagcggggg ctcgggaaaa ggttgcccga tcctggtact gtaaccgtgg cctagtctcc 540

ctttcggcca agatcgaccg caagggctac accccaggag aggtcatccc tgtctttgcc 600

gagatcgaca acggctccac acgtcctgtg ctgcctcggg cagccgtggt gcagacacag 660

acgttcatgg cccgaggcgc ccgaaagcag aaacgggcag tggtggccag cctcgcgggc 720

gagccggtgg gccccgggca gcgggcgctg tggcagggcc gggcactgcg gatcccccca 780

gtgggtcctt ccatcctgca ctgccgcgtt ctacacgtgg actacgcact caaggtctgt 840

gtggatatcc caggaacgtc caagctgctg ctggagctgc cactggtgat cggcaccatt 900

cccttgcacc cttttggcag ccgttcctcc agcgtgggca gccacgccag cttcctgctg 960

gactggaggc tgggggcctt gccggagcgg cctgaggctc ctcctgagta ctcggaggtg 1020

gtagccgaca ctgaggaggc agccttgggg cagagcccct tcccgcttcc gcaggacccc 1080

gacatgagcc ttgaaggccc gttcttcgcc tacatccaag agttccgcta ccgcccgcca 1140

cccctgtact ctgaggagga tccaaaccca ctcttggggg acatgaggcc gcgctgcatg 1200

acttgctga 1209

<210> 2

<211> 402

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 2

Met Arg Ser Gly Gly Val Arg Ser Phe Ala Leu Glu Leu Ala Arg Gly

1 5 10 15

Pro Gly Gly Ala Tyr Arg Gly Gly Glu Arg Leu Cys Gly Arg Val Leu

20 25 30

Leu Glu Ala Ala Ala Pro Leu Arg Val Arg Ala Leu Glu Val Lys Ala

35 40 45

Arg Gly Gly Ala Ala Thr His Trp Leu Glu Gly Arg Ser Val Gly Val

50 55 60

Asn Ala Val Ser Ser Asp Tyr Ala Ala Ala Glu Thr Tyr Leu Arg Arg

65 70 75 80

Arg Gln Leu Leu Leu Arg Asp Thr Gly Glu Thr Thr Thr Leu Pro Pro

85 90 95

Gly Arg His Glu Phe Leu Phe Ser Phe Gln Leu Pro Pro Thr Leu Val

100 105 110

Thr Ser Phe Glu Gly Lys His Gly Ser Val Arg Tyr Cys Ile Lys Ala

115 120 125

Thr Leu His Arg Pro Trp Val Pro Ala Arg Arg Ala Arg Lys Val Phe

130 135 140

Thr Val Ile Glu Pro Val Asp Ile Asn Thr Pro Ala Leu Leu Ala Pro

145 150 155 160

Gln Ala Gly Ala Arg Glu Lys Val Ala Arg Ser Trp Tyr Cys Asn Arg

165 170 175

Gly Leu Val Ser Leu Ser Ala Lys Ile Asp Arg Lys Gly Tyr Thr Pro

180 185 190

Gly Glu Val Ile Pro Val Phe Ala Glu Ile Asp Asn Gly Ser Thr Arg

195 200 205

Pro Val Leu Pro Arg Ala Ala Val Val Gln Thr Gln Thr Phe Met Ala

210 215 220

Arg Gly Ala Arg Lys Gln Lys Arg Ala Val Val Ala Ser Leu Ala Gly

225 230 235 240

Glu Pro Val Gly Pro Gly Gln Arg Ala Leu Trp Gln Gly Arg Ala Leu

245 250 255

Arg Ile Pro Pro Val Gly Pro Ser Ile Leu His Cys Arg Val Leu His

260 265 270

Val Asp Tyr Ala Leu Lys Val Cys Val Asp Ile Pro Gly Thr Ser Lys

275 280 285

Leu Leu Leu Glu Leu Pro Leu Val Ile Gly Thr Ile Pro Leu His Pro

290 295 300

Phe Gly Ser Arg Ser Ser Ser Val Gly Ser His Ala Ser Phe Leu Leu

305 310 315 320

Asp Trp Arg Leu Gly Ala Leu Pro Glu Arg Pro Glu Ala Pro Pro Glu

325 330 335

Tyr Ser Glu Val Val Ala Asp Thr Glu Glu Ala Ala Leu Gly Gln Ser

340 345 350

Pro Phe Pro Leu Pro Gln Asp Pro Asp Met Ser Leu Glu Gly Pro Phe

355 360 365

Phe Ala Tyr Ile Gln Glu Phe Arg Tyr Arg Pro Pro Pro Leu Tyr Ser

370 375 380

Glu Glu Asp Pro Asn Pro Leu Leu Gly Asp Met Arg Pro Arg Cys Met

385 390 395 400

Thr Cys

<210> 3

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

ccatgagttc ctgttcag 18

<210> 4

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

atacagtagc ggacacta 18

<210> 5

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

ctctggtaaa gtggatattg t 21

<210> 6

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

ggtggaatca tattggaaca 20

Claims (10)

1.检测ARRDC2的试剂在制备评估口腔鳞癌发展进程的产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂包括通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测样本中ARRDC2表达水平的试剂。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：

特异性识别ARRDC2的探针；或

特异性扩增ARRDC2的引物；或

特异性结合ARRDC2的抗体或配体。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，特异性扩增ARRDC2的引物序列如SEQ IDNO.3~4所示。

5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，ARRDC2在恶性程度高的口腔鳞癌患者中表达上调。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包含进行DNA微阵列、寡核苷酸微阵列、蛋白阵列、RNA印迹法、RNase保护试验、 蛋白质印迹法和反转录聚合酶链反应所必需的DNA芯片、寡核苷酸芯片、蛋白芯片、探针或引物，以检测ARRDC2的表达。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述产品通过DNA微阵列、反转录聚合酶链反应或者蛋白阵列的方法进行检测。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，通过反转录聚合酶链反应进行检测的试剂包括特异性扩增ARRDC2的引物。

9.根据权利要求6-8任一项所述的应用，其特征在于，ARRDC2在不同发展进程的口腔鳞癌中的表达水平不同。

10.ARRDC2在构建评估口腔鳞癌发展进程的计算模型中的应用。

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