KR101620939B1 - 황칠나무와 배를 이용한 항비만 천연발효식초의 제조방법 - Google Patents

황칠나무와 배를 이용한 항비만 천연발효식초의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초의 제조방법에 관한 것으로, (a) 황칠나무 추출물, 배 및 설탕을 혼합하여 발효원료를 제조하는 단계; (b) 상기 발효원료에 효모를 접종하는 단계; 및 (c) 상기 효모가 접종된 발효원료를 발효시켜 발효액을 제조하는 단계를 포함한다. 본 발명의 제조방법으로 제조된 천연발효식초는 체중증가 억제 효과가 있을 뿐만 아니라 고밀도 지단백(HDL) 콜레스테롤 량은 증가시키면서 저밀도 지단백(LDL) 콜레스테롤 량, 유리지방산 량, 총지질 량은 감소시켜 건강증진에 도움을 준다.

Description

황칠나무와 배를 이용한 항비만 천연발효식초의 제조방법{Method for preparing antiobese natural fermented vinegar using dendropanax morbiferum leveille and pear}
본 발명은 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초의 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 황칠나무 추출액, 배 및 설탕을 발효시켜 항비만 효과가 탁월한 천연발효식초를 제조하는 방법에 관한 것이다.
식초는 여러 종류의 묽은 알코올성 액체를 발효시켜 만든 초산을 함유한 신맛이 나는 액체로, 곡류ㆍ알코올성음료ㆍ과실류 등을 원료로 한 양조초와 빙초산 또는 초산을 주원료로 한 합성초에 향신료를 첨가하여 만든 가공초 등이 있다.
식초는 체내의 잉여 영양소를 분해하며 담즙이나 부신피질호르몬의 생성을 돕고, 피로를 유발하는 물질인 젖산의 생성을 막을 뿐만 아니라 이미 생성된 젖산은 분해한다. 또한 식초는 간 기능 강화, 성장 촉진, 당 대사 촉진, 면역력 증강, 피로 회복 및 생활에 활력을 준다. 또한 식초는 지혈(止血), 익혈(益血) 작용을 하고 혈액 순환을 촉진하고 피를 맑게 하며 각종 출혈성 질환을 다스리고 혈액의 생성을 도우며 빈혈을 개선한다. 또한 식초는 산소와 헤모글로빈의 친화력을 높여 뇌에 충분한 산소를 공급하여 머리를 맑게 해주고 기억력을 증진시킨다. 특히 파로틴(일명 회춘 호르몬)의 분비를 촉진하여 세포의 노화를 막고 뼈를 강하게 하고, 체내의 칼슘 흡착력을 높여서 골의 질량을 늘린다. 아울러 타액과 위액의 분비를 촉진하여 식욕을 증진시키고 소화 흡수를 도우며 갈증을 없앤다.
이처럼 식초의 효용성이 부각됨으로써 다양한 천연발효식초에 대한 연구가 이루어지고 있는데, 특히 비만이 만병의 근원이 되는 바, 비만 예방에 촛점을 맞춘 연구가 진행되고 있다.
대한민국 등록특허 제1350046호에 항비만 효능을 갖는 복합 생약 발효 식초 조성물이 개시되어 있다. 상기 특허에서는 율무, 당귀, 강황, 결명자 및 감초를 이용하여 발효식초를 제조하고 있으나 체중증가 억제 및 지방축적 억제 효과에는 한계가 있었다.
황칠나무(Dendropanax morbifera Lev.)는 우리나라 남해안의 일부 도서지역에만 자생하는 두릅나무과에 속하는 상록교목으로, 수피에 상처를 내면 황색의 액이 나오는데 이것을 황칠(黃漆)이라 하며 오래전부터 가구등에 칠로서 사용되어왔다(이창복, 대한식물도감, 향문사, 1982).
최근 황칠나무와 관련된 연구결과에 따르면, 황칠이 항암, 항산화 효과, 간세포 재생, 경조직 세포 재생 등에 효과적인 것으로 밝혀졌다. 또한 황칠은 고혈압, 중풍, 치매 예방 등에 효과가 있는 것으로 보고되고 있으며, 이외에도 항균 효과, 소화기질환 치료, 강장 효과, 우울증 및 스트레스 해소 등에 효과적인 것으로 알려져 있다. 이에 약용식물로서 황칠나무에 대한 다각적 연구가 진행되고 있다.
본 발명의 발명자는 황칠나무와 배를 이용하여 제조되는 천연발효식초가 항비만 효과를 가질 뿐만 아니라 고밀도 지단백(HDL) 콜레스테롤 량은 증가시키면서 저밀도 지단백(LDL) 콜레스테롤 량, 트리글리세라이드(triglyceride) 량, 유리지방산(free fatty acid) 량, 총지질(total lipid) 량은 감소시키는 효과를 가짐을 확인하고 본 발명에 이르렀다.
본 발명의 목적은 항비만 효과가 있는 천연발효식초를 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 고밀도 지단백(HDL) 콜레스테롤 함량은 증가시키면서 저밀도 지단백(LDL) 콜레스테롤 량, 트리글리세라이드 량, 유리지방산 량, 총지질 량은 감소시키는 천연발효식초를 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은,
(a) 황칠나무 추출물, 배 및 설탕을 혼합하여 발효원료를 제조하는 단계;
(b) 상기 발효원료에 효모를 접종하는 단계; 및
(c) 상기 효모가 접종된 발효원료를 발효시켜 발효액을 제조하는 단계를 포함하는 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 (a) 단계에서 상기 황칠나무 추출물은 황칠나무의 잎, 줄기, 뿌리 또는 이들 중 2 종 이상의 혼합물을 20 내지 60℃에서 2 내지 5개월 동안 발효시킨 후 건조한 건조물을 열수 추출하여 제조될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 (a) 단계에서 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합비가 중량 기준으로 1 : 5 ~ 15일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 (a) 단계에서 상기 설탕이 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합물 100 중량부에 대하여 10 내지 40 중량부로 혼합될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 (c) 단계에서 상기 발효는 15 내지 28℃에서 60 내지 100일 동안 실시될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, (d) 상기 발효액을 살균시키는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 (d) 단계에서 상기 살균은 100 내지 200℃에서 20 내지 60분 동안 실시할 수 있다.
본 발명의 제조방법으로 황칠나무에 함유된 유효성분을 쉽게 추출해 낼 수 있으며 또한 간단한 방법으로 기능성 천연발효식초를 제조할 수 있다.
본 발명의 제조방법으로 제조된 천연발효식초는 체중증가 억제 효과가 있을 뿐만 아니라 고밀도 지단백(HDL) 콜레스테롤 량은 증가시키면서 저밀도 지단백(LDL) 콜레스테롤 량, 유리지방산 량, 총지질 량은 감소시켜 건강증진에 도움을 준다.
또한, 본 발명의 제조방법은 낙과 배 및/또는 흠집 배 등의 비상품성 배를 활용할 수 있어 배 수확 농가의 수익을 증진시킬 수 있다.
도 1은 본 발명의 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초 제조방법의 흐름도이다.
도 2는 본 발명의 일실시예 및 비교예에 따른 천연발효식초에 함유된 유기산 함량을 나타내는 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일실시예 및 비교예에 따른 천연발효식초에 함유된 유리당 함량을 나타내는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일실시예 및 비교예에 따른 천연발효식초에 함유된 에탄올 함량을 나타내는 그래프이다.
도 5는 식이에 따른 5개 시험군의 체중 변화를 나타내는 그래프이다(* p<0.05, vs. 정상군, # p<0.05, vs 대조군, @ p<0.05, vs. 실험군 A).
도 6은 식이에 따른 5개 시험군의 총콜레스테롤 량을 나타내는 그래프이다.
도 7은 식이에 따른 5개 시험군의 고밀도 지단백 콜레스테롤 량을 나타내는 그래프이다(* p<0.05, vs. 정상군).
도 8은 식이에 따른 5개 시험군의 저밀도 지단백 콜레스테롤 량을 나타내는 그래프이다.
도 9는 식이에 따른 5개 시험군의 트리글리세라이드 량을 나타내는 그래프이다(* p<0.05, vs. 정상군, # p<0.05, vs 대조군).
도 10은 식이에 따른 5개 시험군의 유리지방산 량을 나타내는 그래프이다.
도 11은 식이에 따른 5개 시험군의 총지질 량을 나타내는 그래프이다.
도 12는 식이에 따른 5개 시험군의 WBC 값을 나타내는 그래프이다.
도 13는 식이에 따른 5개 시험군의 RBC 값을 나타내는 그래프이다(* p<0.05, ** p<0.01, *** p<0.001, vs. 정상군).
도 14는 식이에 따른 5개 시험군의 Hb 값을 나타내는 그래프이다(* p<0.05, ** p<0.01, vs. 정상군).
도 15는 식이에 따른 5개 시험군의 PLT 값을 나타내는 그래프이다.
본 발명의 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초의 제조방법은,
(a) 황칠나무 추출물, 배 및 설탕을 혼합하여 발효원료를 제조하는 단계;
(b) 상기 발효원료에 효모를 접종하는 단계; 및
(c) 상기 효모가 접종된 발효원료를 발효시켜 발효액을 제조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
이하, 본 발명의 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초의 제조방법을 자세하게 설명한다. 도 1에 본 발명의 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초 제조방법의 흐름도가 도시되어 있다.
우선, 황칠나무 추출물, 배 및 설탕을 혼합하여 발효원료를 제조한다((a) 단계).
이때, 상기 황칠나무 추출물은 황칠나무의 잎, 줄기, 뿌리 또는 이들 중 2 종 이상의 혼합물을 20 내지 60℃에서 2 내지 5개월 동안 발효시킨 후 건조한 건조물을 열수 추출하여 제조되는 것이 바람직하다.
상기 황칠나무의 발효온도가 20℃ 미만이면 발효가 잘 되지 않는 문제점이 있으며, 60℃를 초과하면 악취가 날 우려가 있다. 보다 바람직한 온도는 25 내지 50℃이고 보다 더 바람직한 온도는 35 내지 40℃이다.
상기 발효 건조된 황칠나무는 80 내지 100℃에서 열수 추출하는 것이 바람직하다. 상기 열수 추출시 온도가 80℃ 미만이면 황칠나무에 함유된 유효성분의 추출 효율이 미비한 문제점이 있다. 또한 열수 추출 시간은 1 내지 5 시간이 바람직하다. 열수 추출 시간이 1 시간 미만이면 황칠나무에 함유된 유효성분의 추출 효율이 떨어지는 문제점이 있고, 5시간을 초과하면 추출 효율 증진없이 에너지가 낭비되는 문제점이 있다.
본 발명의 제조방법에 있어서, 배는 분쇄 또는 갈아서 사용되는 것이 바람직하고, 브로스(broth), 즙, 또는 슬러리 형태로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명에 있어서, 상기 배는 낙과 배 및/또는 흠집 배가 사용될 수 있다.
본 발명의 일 실시형태에서, 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합비는 중량 기준으로 1 : 5 ~ 15인 것이 바람직하다. 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합비가 1 : 5 미만이면 황칠나무의 향과 맛이 강하고 최종산물의 색상이 탁하여 식초로서의 상품성이 떨어지는 문제점이 있고, 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합비가 1 : 15를 초과하면 항비만 효과가 미비한 문제점이 있다. 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 보다 바람직한 혼합 비율은 1 : 8 ~ 12이다.
본 발명의 일 실시형태에서, 상기 설탕은 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합물 100 중량부에 대하여 10 내지 40 중량부로 혼합되는 것이 바람직하다. 상기 설탕이 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합물 100 중량부에 대하여 10 중량부 미만으로 혼합되면 발효가 잘 이루어지지 않아 식초로서의 효용성이 떨어지는 문제점이 있고, 40 중량부를 초과하면 단맛이 강하여 식초로서의 효용성이 떨어지는 문제점이 있다. 상기 황칠나무 추출물과 상기 배의 혼합물 100 중량부에 대하여 15 내지 25 중량부의 설탕이 혼합되는 것이 보다 바람직하다. 설탕이 혼합됨으로써 알코올 생성량이 많아지게 되고 또한 그 결과 초산의 생성량도 많아지게 된다.
이어, 상기 발효원료에 효모를 접종한다((b) 단계). 이때, 접종되는 효모의 양은 상기 발효원료(황칠나무 추출물, 배 및 설탕) 총량 100 중량부에 대하여 0.01 내지 0.5 중량부 혼합되는 것이 바람직하고 0.08 내지 0.2 중량부 혼합되는 것이 더 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 효모 접종시 초산균을 동시에 접종시킬 수도 있다. 이는 효모에 의해 생성된 알코올을 초산균이 소비함으로써 알코올 생성 속도를 촉진시키고 이에 따라 초산 발효 속도를 촉진하기 위함이다. 접종되는 초산균의 양은 상기 발효원료(황칠나무 추출물, 배 및 설탕) 총량 100 중량부에 대하여 0.01 내지 0.5 중량부 혼합되는 것이 바람직하고 0.08 내지 0.2 중량부 혼합되는 것이 더 바람직하다. 상기 초산균은 아세토박터 아세티(Acetobacter aceti)(KCTC No.1010)가 바람직하게 사용된다. 초산균은 다음과 같은 배지 조성에서 30℃에서 5일간 배양한 것이 사용될 수 있다: east extract 5.0g, peptone 3.0g, mannitol 25.0g, 증류수 1L.
이어, 상기 효모가 접종된 발효원료를 발효시켜 발효액을 제조한다((c) 단계). 이때, 상기 발효는 15 내지 28℃에서 60 내지 100일 동안 실시하는 것이 바람직하다. 상기 발효온도가 15℃ 미만이면 효모의 활동이 미비하여 발효가 잘 이루어지지 않는 문제점이 있고, 발효온도가 28℃를 초과하여도 발효가 잘 되지 않는 문제점이 있다. 상기 발효시간이 60일 미만이면 발효가 미비한 문제점이 있고, 발효시간이 100일을 초과하면 추가되는 잇점없이 비경제적인 문제점이 있다. 보다 바람직한 발효 조건은 20 내지 25℃에서 75 내지 90일이다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 발효원료에 위령선이 더 포함될 수 있다. 위령선은 쌍떡잎식물 미나리아재비목 미나리아재비과의 덩굴식물로, 혈압강하, 평활근 흥분, 이뇨작용, 혈당하강작용, 진통, 항균작용이 있는 것으로 알려져 있다. 상기 위령선의 양은 상기 발효원료(황칠나무 추출물, 배 및 설탕) 총량 100 중량부에 대하여 1 내지 20 중량부 혼합되는 것이 바람직하고 5 내지 10 중량부 혼합되는 것이 보다 바람직하다. 본 발명에서 상기 위령선은 위령선 추출물이 사용될 수 있다. 상기 위령선 추출물은 위령선을 물에 넣고 90~100℃에서 열수 추출한 후 감압농축하여 동결건조(-30~-20℃)시켜 제조되는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시형태에서, 상기 (c) 단계 이후 상기 발효액을 살균시키는 단계((d) 단계)를 더 포함할 수 있다. 이때, 상기 살균은 100 내지 200℃에서 20 내지 60분 동안 실시하는 것이 바람직하다. 상기 살균온도가 100℃ 미만이면 미생물 사멸 효과가 미비한 문제점이 있고, 200℃를 초과하며 추가되는 잇점없이 비경제적인 문제점이 있다. 상기 살균시간이 20분 미만이면 미생물 사멸 효과가 미비한 문제점이 있고, 60분을 초과하면 추가되는 잇점없이 비경제적인 문제점이 있다. 보다 바람직한 살균 조건은 110 내지 150℃에서 25 내지 35분이다. 이 과정을 통하여 발효액 속에 들어 있는 효모의 활성을 감소시켜 식초액의 변성을 효과적으로 방지할 수 있다.
본 발명의 천연발효식초 제조방법을 이용하면 pH 2.5~3.0, 당도 15~20 브릭스의 천연발효식초를 제조할 수 있다.
이하, 하기 실시예를 통하여 본 발명의 황칠나무와 배를 이용한 천연발효식초의 제조방법을 보다 자세하게 설명한다.
<실시예 1> 천연발효식초 제조
1-1 재료 준비 : 배(10kg)를 증류수로 깨끗하게 세척한 후 분쇄기를 이용, 분쇄하여 배 분쇄물(배즙)을 제조하였다. 황칠나무의 잎(500g)과 줄기(500g)를 혼합하고 이를 비닐로 덮은 상태에서 35~40℃에서 3개월 동안 발효시킨 후 3일 동안 건조시켰다. 상기 황칠나무 건조물을 분쇄하고 이 분쇄물을 95~100℃ 물 5ℓ에 넣고 3시간 동안 열수 추출하고 여과한 후 여과액이 1ℓ가 되도록 농축하여 황칠나무 추출물을 제조하였다.
1-2 효모 제조 : 한국생명공학연구원에서 분양받은 사카로미세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)(KCTC No. 7904)를 표 1과 같이 제조한 배지를 사용하여 30℃에서 5일간 배양하여 효모를 제조하였다.
Name YM broth
Composition yeast extract 3.0g
malt extract 3.0g
peptone 5.0g
dextrose 10.0g
distilled water 1L
1-3 천연발효식초(배즙 10, 황칠나무 추출물 1, 유기농설탕 20%) 제조 : 상기에서 제조된 배즙(1kg)과 황칠나무 추출물(100g)을 혼합하고 이 배즙과 황칠나무 추출물의 혼합물에 유기농설탕(220g)을 혼합하여 발효원료를 제조하였다. 상기 발효원료를 옹기로 된 회분식 100ℓ 발효기에 넣고 상기 발효원료에 상기 배양된 효모(13.2g)를 접종한 후 25~27℃에서 90일 동안 발효시켜 발효액을 제조하였다. 상기 발효액을 압착 탈수기를 이용하여 1차로 여과하고, 또한 여과포를 이용하여 2차로 여과하였다. 상기에서 얻어진 여과액을 스테인레스 스틸 가압반응기를 이용하여 120℃에서 30분간 살균하고 천연발효식초를 제조하였다.
제조된 천연발효식초의 pH는 2.8, 당도는 15 브릭스(brix)였고, 플라보노이드 농도는 0.018%, 포도당(glucose) 농도는 0.35%, 과당(fructose) 농도는 1.9%였다.
<비교예 1>
배즙 10, 황칠나무 추출물 1, 유기농설탕 20% 대신 배즙 10, 황칠나무 추출물 1을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 천연발효식초를 제조하였다.
<비교예 2>
배즙 10, 황칠나무 추출물 1, 유기농설탕 20% 대신 배즙 1, 황칠나무 추출물 1을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 천연발효식초를 제조하였다.
<비교예 3>
배즙 10, 황칠나무 추출물 1, 유기농설탕 20% 대신 배즙 7, 황칠나무 추출물 3을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 천연발효식초를 제조하였다.
<비교예 4>
배즙 10, 황칠나무 추출물 1, 유기농설탕 20% 대신 배즙 4, 황칠나무 추출물 1, 유기농설탕 50%를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 천연발효식초를 제조하였다.
<비교예 5>
효모를 넣지 않은 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 천연발효식초를 제조하였다.
<시험예 1> 천연발효식초의 성분 분석
실시예 1 및 비교예 1~3에서 제조된 천연발효식초의 성분 분석을 실시하였다.
1-1 유기산 분석
표 2의 HPLC 분석 조건 하에서 실시예 1 및 비교예 1~3에서 제조된 천연발효식초에 함유된 유기산 농도를 측정하고 그 결과를 도 2에 나타내었다.
Instrument LC-10 Avp(Shimadzu, Japan)
Column and oven temp. SUPELCOGELTM C-610H, 30℃
Fluid and velocity 0.1% H3PO4(w/v), 0.7㎖/min 유동
Detector SPD-10 Avp(Shimadzu, Japan)-210nm
도 2에 도시되어 있는 바와 같이, 실시예 1의 천연발효식초가 비교예 1~3의 천연발효식초에 비하여 유기산 농도가 44㎎/㎖로 가장 높았다. 따라서 실시예 1의 천연발효식초가 비교예 1~3의 천연발효식초에 비하여 식초로서의 효용성이 높음을 알 수 있었다.
1-2 유리당 분석
표 3의 HPLC 분석 조건 하에서 실시예 1 및 비교예 1~3에서 제조된 천연발효식초에 함유된 유리당 함량을 측정하고 그 결과를 도 3에 나타내었다.
Instrument LC-10 Avp(Shimadzu, Japan)
Column and oven temp. CAPCELL PAK NH2(4.6 X 250mm), 30℃
Fluid and velocity 75% acetonitrile, 1.0㎖/min
Detector RID-10 A(Shimadzu, Japan)
도 3에 도시되어 있는 바와 같이, 실시예 1의 천연발효식초가 비교예 1~3의 천연발효식초에 비하여 유리당 함량이 낮았다. 이는 당이 알코올로, 알코올이 유기산으로 변화되었음을 의미하는 것으로 실시예 1의 천연발효식초가 비교예 1~3의 천연발효식초보다 당 발효 효율이 우수함을 알 수 있었다.
1-3 에탄올 분석
실시예 1 및 비교예 1~3에서 제조된 천연발효식초에 함유된 에탄올 함량을 측정하고 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4에 도시되어 있는 바와 같이, 실시예 1의 천연발효식초가 비교예 1~3의 천연발효식초에 비하여 에탄올 함량이 낮았다. 이는 당이 알코올로, 알코올이 유기산으로 변화되었음을 의미하는 것으로 실시예 1의 천연발효식초가 비교예 1~3의 천연발효식초보다 유기산 변환 효율이 우수함을 알 수 있었다.
<시험예 2> 항비만 효과 검증
1. 동물 시험군 구성
동물 : 생후 7주령된 체중 200±20g의 Spraque-Dawley계 자성(雌性) 흰쥐
구입처 : 샘타코(주)
사육조건
ㆍ 일반사료의 등록성분 량 : 조단백질 22.1% 이상, 조지방 3.5% 이하, 조섬유 5.0% 이하, 조회분 8.0% 이하, 칼슘 0.6% 이상, 인 0.4% 이상, 항생제ㆍ삼양프리릭스-무첨가 1.3%
ㆍ 고지방식이 사료 : D12492(Reserch Diet사) 단백질 26.2gm%, 탄수화물 26.3gm%, 지방 34.9gm%
ㆍ 물(증류수) : 자유스럽게 공급
ㆍ 1주일 동안 실험실 환경에 적응
2. 방법
(1) 시험군 분류(각 군당 8마리)와 투여량
ㆍ 정상군(Normal) : 7주 동안 일반사료 섭취와 증류수 투여
ㆍ 대조군(Control) : 7주 동안 고지방 사료 섭취와 증류수 투여
ㆍ 실험군 A(Sample A) : 7주 동안 고지방 사료 섭취와 실시예 1에서 제조된 천연발효식초와 증류수를 1:1로 희석한 후 마리당 하루에 0.5㎖ 씩 투여
ㆍ 실험군 B(Sample B) : 7주 동안 고지방 사료 섭취와 실시예 1에서 제조된 천연발효식초와 증류수를 1:4로 희석한 후 마리당 하루에 0.5㎖ 씩 투여
ㆍ 실험군 C(Sample C) : 7주 동안 고지방 사료 섭취와 실시예 1에서 제조된 천연발효식초와 증류수를 1:8로 희석한 후 마리당 하루에 0.5㎖ 씩 투여
(2) 측정항목
체중 측정: 실험 개시일부터 일주일 간격으로 실험종료 시까지 각 군별로 흰쥐의 체중을 저울을 이용하여 측정하였다.
채혈 및 혈청분석: 실험종료 시 흰쥐를 우레탄으로 마취한 다음 심장천자를 실시하여 1회용 주사기로 혈액 5㎖를 취하였다. 원심분리기로 3,000 rpm 하에서 40분 동안 원심분리시킨 후 상층의 혈청을 혈청분리관(serum seperator)에 취하고 검사기관((재)씨젠의료재단)에 의뢰하여 총콜레스테롤 량(total colesterol), 저밀도 지단백(LDL) 콜레스테롤 량, 고밀도 지단백(HDL) 콜레스테롤 량, 트리글리세라이드 량, 유리지방산 량, 총지질 량을 측정하였다. 심장천자를 통해 채혈한 혈액을 EDTA bottle minicollect tube 0.5㎖ (greiner bio-one, Austria)에 넣은 후 전자동 혈구분석기 Hemavet 950 (Drew scientific Inc, U.S.A.)를 사용하여 WBC, RBC, Hb 및 PLT를 분석하였다.
(3) 유효성검증
수합된 데이터의 통계처리 방법으로는 SigmaPlot 11을 활용하여 ANOVA로 통계처리하였다. 유의한 경우 사후검정은 Tukey 방법을 시행하였고, p-value가 0.05 미만인 경우만 유의한 것으로 인정하였다.
3. 평가
(1) 체중의 변화
도 5에 식이에 따른 5개 시험군의 체중 변화를 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A 및 실험군 B의 체중이 대조군과 대비하여 전 실험기간 동안 감소하는 것으로 나타났다. 특히, 실험개시 2주째 실험군 A의 체중이 대조군의 체중보다 유의성 (p<0.05) 있게 감소하였다.
(2) 혈청학적 변화
도 6에 식이에 따른 5개 시험군의 총콜레스테롤 량을 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A, 실험군 B 및 실험군 C의 총콜레스테롤 량이 대조군과 대비하여 거의 유사한 것으로 나타났다.
도 7에 식이에 따른 5개 시험군의 HDL 콜레스테롤 량을 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A, 실험군 B 및 실험군 C의 HDL 콜레스테롤 량이 대조군과 대비하여 증가한 것으로 나타났다. 특히, 실험군 B의 HDL 콜레스테롤 량이 정상군보다 유의성 있게 증가한 결과를 나타내었다.
도 8에 식이에 따른 5개 시험군의 LDL 콜레스테롤 량을 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A, 실험군 B 및 실험군 C의 LDL 콜레스테롤 량이 대조군과 대비하여 감소한 것으로 나타났다.
도 9에 식이에 따른 5개 시험군의 트리글리세라이드 량을 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A, 실험군 B 및 실험군 C의 트리글리세라이드 량이 대조군과 대비하여 감소한 것으로 나타났다. 특히, 실험군 C의 트리글리세라이드 량이 정상군 및 대조군보다 유의성 있게 감소한 결과를 나타내었다.
도 10에 식이에 따른 5개 시험군의 유리지방산 량을 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A, 실험군 B 및 실험군 C의 유리지방산 량이 대조군과 대비하여 감소한 것으로 나타났다.
도 11에 식이에 따른 5개 시험군의 총지질 량을 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A, 실험군 B 및 실험군 C의 총지질 량이 대조군과 대비하여 감소한 것으로 나타났다.
(3) 혈액 검사(Complete Blood Cell Count, CBC) 결과
도 12에 식이에 따른 5개 시험군의 WBC 값을 나타내는 그래프가 도시되어 있고, 도 13에 식이에 따른 5개 시험군의 RBC 값을 나타내는 그래프가 도시되어 있으며, 도 14에 식이에 따른 5개 시험군의 Hb 값을 나타내는 그래프가 도시되어 있고, 도 15에 식이에 따른 5개 시험군의 PLT 값을 나타내는 그래프가 도시되어 있다. 실험군 A, 실험군 B 및 실험군 C의 WBC, RBC, Hb, PLT 모든 항목에서 대조군과 별다른 차이를 나타내지 않았다. 다만 실험군 A~C의 RBC 값 및 Hb 값이 정상군보다 약간 증가하였으나 임상상 큰 의미는 없는 것으로 판단된다.
따라서, 본 발명의 천연발효식초는 동물에 대한 투약 안전성을 확보한 것으로 판단되며 음용 가능함을 알 수 있다.
<시험예 3> 관능검사
여성(19~75세) 50명과 남성(19~75세) 50명, 총 100명을 대상으로 실시예 1 및 비교예 1~5의 천연발효식초를 시음하게 하고 향, 맛, 색상 및 탁도 평가를 실시하였다. 5점 척도법(1점: 매우 나쁨, 2점: 나쁨, 3점: 보통, 4점: 좋음, 5점: 매우 좋음)으로 점수를 매겨 그 결과를 표 5에 나타내었다.
구분 향 맛 색상 탁도
실시예 1 4.2 4.0 4.1 4.3
비교예 1 3.7 3.8 3.8 4.1
비교예 2 2.5 2.3 3.7 2.5
비교예 3 3.3 3.2 3.5 3.8
비교예 4 3.6 3.8 3.9 3.7
비교예 5 3.5 3.4 3.9 4.0
표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1의 천연발효식초가 비교예 1~5의 천연발효식초에 비하여 향, 맛, 색상, 탁도에서 평가자들에 의해 선호됨을 확인할 수 있었다.
이상에서 본 발명의 구체예가 제시되어 있지만 본 발명이 상기에 한정되는 것은 아니며 본 발명의 기술 사상 범위 내에서 다양하게 변형 가능하고 이러한 변형은 하기한 본 발명의 청구범위에 속한다 할 것이다.

Claims (7)

  1. (a) 황칠나무의 잎, 줄기, 뿌리 또는 이들 중 2 종 이상의 혼합물을 20 내지 60℃에서 2 내지 5개월 동안 발효시킨 후 건조한 건조물을 80 내지 100℃에서 열수 추출하여 제조되는 황칠나무 발효추출물, 배 및 설탕을 혼합하여 발효원료를 제조하되, 상기 황칠나무 발효추출물과 상기 배의 혼합비가 중량 기준으로 1 : 8 ~ 12이고, 상기 설탕이 상기 황칠나무 발효추출물과 상기 배의 혼합물 100 중량부에 대하여 15 내지 25 중량부로 혼합되는 단계;
    (b) 상기 발효원료 100 중량부에 0.08 내지 0.2 중량부의 효모를 접종하는 단계;
    (c) 상기 효모가 접종된 발효원료를 20 내지 25℃에서 75 내지 90일 동안 발효시켜 발효액을 제조하는 단계; 및
    (d) 상기 발효액을 110 내지 150℃에서 25 내지 35분 동안 살균시키는 단계를 포함하는 황칠나무와 배를 이용한 항비만 천연발효식초의 제조방법.
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