KR101574536B1 - 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 쿠마린산(Coumaric acid)의 성장 촉진 효과에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 동물 사료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 조성물은 연골세포의 세포 증식과 성장호르몬 분비를 촉진시켜 결론적으로 성장을 촉진시키는 효과가 있어, 성장기의 유소아 및 청소년의 성장 및 골격을 형성하는데 효과적일뿐만 아니라 본 발명의 조성물 단독으로 또는 성장호르몬 치료와 병행요법을 통해 키 성장 치료에 효과적이다.

Description

쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 조성물{Composition for promoting growth comprising coumaric acid}

본 발명은 쿠마린산의 성장 촉진 효과에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 동물 사료용 조성물에 관한 것이다.

최근 들어 체형의 서구화 및 평균 신장의 상승으로 인하여 키 성장인자에 대한 관심이 높아지고 있다. 성장을 광의의 개념으로 정의하면 신장의 증가뿐 아니라 신체 각 기관의 크기와 기능의 증대를 포함하는 것이라 할 것이나, 이를 협의의 개념으로 정의하자면 신장의 증가를 의미하는 것으로 볼 수 있다. 이러한 신장의 증가는 영양과 성장 호르몬 등의 여러 요인에 의한 연골 조직의 합성, 골격 길이 성장 및 골격 조직의 광범위한 증식을 포함하는 골격대사를 통하여 이루어진다. 골(뼈) 조직은 특수하게 분화된 형태의 결합 조직으로, 간엽세포, 연골세포, 조골세포, 파골세포, 골수세포 등 여러 종류의 세포로 구성된 결합조직이다. 파골세포에 의한 골흡수 양과 조골세포에 의한 골형성 양 사이에는 균형이 유지되고 있는데, 성장기에는 조골세포에 의한 골 형성 능력이 최고치에 이르러 골형성 양이 골흡수 양을 훨씬 능가하게 되므로 뼈 성장이 이루어지게 된다.

지금까지 성장을 촉진시키기 위한 방법으로는 성장 호르몬 제제 투여법, 일리자노프 수술법 및 건강보조식품 복용법 등이 사용되어 왔다. 특히 과거 병적인 상태의 성장부진에 쓰이던 성장호르몬 요법이 근래에 키 성장에 대한 관심이 높아져감에 따라 정상 신장을 가지고 있는 성장기 어린이 및 청소년에게도 적용 되고 있다. 그러나 상기 성장 호르몬 제제 투여법은 성장 호르몬이 부족한 사람의 경우에는 뛰어난 효과를 보이지만, 호르몬 분비가 정상적인 대다수의 사람들에게는 말단 비대증, 성장 호르몬 항체 양성, 전신 알레르기 반응, 갑상선기능 저하증 등의 여러 가지 부작용을 야기할 수 있는 문제점이 있다. 뿐만 아니라 성장호르몬 요법의 기간과 비용이 과도하고, 암 발생 및 다른 성장인자들의 교란을 일으키는 등의 문제점이 발견되고 있다. 또한, 일리자노프 수술은 다리의 뼈를 절단한 후 늘리는 수술로서 환자의 고통 및 비용 측면에서 일반인에게 사용하기에는 많은 무리가 있으며, 성장 촉진용 건강보조식품은 과학적으로 검증되지 않은 경우가 대부분이다.

따라서, 성장 촉진에 있어서 그 효능이 과학적으로 검증되고, 안전한 식품소재의 개발이 필요한 실정이다.

이에 본 발명자들은 부작용 없이 성장을 효과적으로 촉진하는 활성을 가진 식품소재를 개발하고자 연구하던 중, 쿠마린산을 투여한 실험동물에서 경골 길이 증가 효과를 확인하고 본 발명을 완성하였다.

따라서 본 발명의 목적은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 동물 사료용 조성물을 제공하는 것이다.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 동물 사료용 조성물을 제공한다.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 조성물을 제공한다.

상기 쿠마린산은 o-쿠마린산, m-쿠마린산, p-쿠마린산으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 한다.

쿠마린산은 hydroxycinnamic acid라고도 하며 세가지의 기하학적 이성질체(o-coumaric acid, m-coumaric acid, p-coumaric acid)를 가진다. 쿠마린산의 이성질체이면 그 종류에 특별한 제한은 없다.

쿠마린산은 땅콩, 토마토, 당근, 마늘 등의 식물에 함유되어 있으며 와인과 식초 그리고 곡물에서도 찾아볼 수 있다.

쿠마린산은 땅콩, 토마토, 당근, 마늘 등의 식물 또는 제주도 조릿대 등에서 추출하여 얻을 수 있으며 Sigma-Aldrich사(St. Louis, MO, USA)에서 쿠마린산을 직접 구매할 수 있다.

쿠마린산은 항산화 특성이 있어 섭취시 위암의 위험을 줄여주는 효과가 있다고 보고되었다. 또한 다수의 연구에서 멜라닌 생산의 억제제로서 기재되어 있으며, 세균 증식의 억제효과가 있다고 보고되었다. 때문에 천연 미백 물질로 연구되고 있다. 그러나 쿠마린산의 성장 촉진의 효과에 대하여는 보고된 바 없다.

본 발명의 상기성장이란 신체 각 기관의 크기와 기능의 증대를 의미하며, 바람직하게는 증식골(뼈)의 조직의 크기, 굵기, 밀도, 길이, 기능 증대 및 성장호르몬 증가를 포함하며, 더욱 바람직하게는 골의 길이 성장을 의미한다.

본 발명의 조성물은 쿠마린산의 유효성분으로 포함하여 길이 성장에 효과적이다.

이는 본 발명의 명세서 실시예에 잘 나타나있다.

본 발명의 일실시예에서는 랫트(rat)에 10일간 쿠마린산을 투여한 후, 경골(tibia)의 길이 변화를 관찰하였다. 그 결과 성장호르몬 투여군과 비슷한 수준으로 경골의 길이가 길어진 것을 확인하였다(도 2).

본 발명의 또 다른 일실시예에서는 랫트(rat)에 10일간 쿠마린산을 투여한 후, 성장판의 증식부와 비대부의 길이를 측정하였다. 그 결과 성장호르몬 투여군과 비슷한 수준으로 성장판의 증식부와 비대부 길이가 증가함을 확인하였다(도 3).

본 발명의 또 다른 일실시예에서는 랫트(rat)에 쿠마린산을 투여하였을 때, 연골 세포의 증식이 대조군에 비해 증가한 것을 확인하였다(도 4).

본 발명의 또 다른 일실시예에서는 랫트(rat)에 쿠마린산을 투여하였을 때, 혈액내 성장호르몬이 증가됨을 확인하였으며(도 5), 성장호르몬의 분비를 자극하여 뼈의 성장을 촉진시키는 IGF-1 단백질의 양이 증가함을 확인하였다(도 6).

따라서, 본 발명은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 쿠마린산을 단독으로 함유하거나 또는 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 함유할 수 있다. 상기에서 "약학적으로 허용되는" 이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 활성성분의 작용을 저해하지 않으며 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 비독성의 조성물을 말한다.

약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다. 아울러, 펩티드 제제에 대한 경구투여용으로 사용되는 다양한 약물전달물질을 포함할 수 있다. 또한, 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코오스 및 글리콜 등을 포함할 수 있으며, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현택제 등을 추가로 포함할 수 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).

본 발명의 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있다. 예를 들면, 경구 또는 비경구적으로 투여할 수 있다. 비경구적인 투여방법으로는 이에 한정되지는 않으나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장내 투여일 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화 할 수 있다.

경구 투여용 제제의 경우에 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다. 예를 들어, 경구용 제제는 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 적합한 부형제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈,메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다. 나아가, 본 발명의 약학적 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

비경구 투여용 제제의 경우에는 주사제, 크림제, 로션제, 외용연고제, 오일제, 보습제, 겔제, 에어로졸 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법으로 제형화할 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA,1995)에 기재되어 있다.

본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 바람직하게 본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 전체 용량은 1일당 환자 체중 1 당 약 0.01 내지 10,000mg, 가장 바람직하게는 0.1 내지 1000mg일 수 있다. 그러나 상기 약학적 조성물의 용량은 제제화 방법, 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 본 발명의 조성물의 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.

본 발명은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.

예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 쿠마린산을 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화 하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 쿠마린산을 성장 촉진 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다. 예를 들어 본 발명의 식품 조성물은 쿠마린산 또는 쿠마린산 성분 이외에 미량의 미네랄, 비타민, 지질, 당류 및 공지의 성장촉진 활성을 가진 성분 등을 추가로 함유할 수 있다. 상기 미네랄로는 칼슘, 철 등 성장기에 필요한 영양성분이 함유될 수 있으며 비타민으로는 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6 등이 함유될 수 있다. 지질로는 알콕시글리세롤 또는 레시틴 등이 함유될 수 있으며 당류로는 프락토올리고당 등이 함유될 수 있다.

또한, 기능성 식품으로는 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 쿠마린산을 첨가하여 제조할 수 있다.

또한, 본 발명의 쿠마린산을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.

본 발명의 식품 조성물 중 쿠마린산의 바람직한 함량은 식품 조성물 총 중량에 대하여 식품의 전체 중량을 기준으로 0.0190%, 바람직하게는 0.150%의 비율로 함유될 수 있다.

본 발명은 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 동물 사료용 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 사료용 조성물은 발효사료, 배합 사료, 펠렛형태 및 사일레지(silage) 등의 형태로 제조될 수 있다. 상기 발효사료는 본 발명의 쿠마린산을 포함하고, 추가적으로 여러 가지 미생물 균 또는 효소들을 첨가함으로써 유기물을 발효시켜 제조될 수 있다. 상기 배합사료는 여러 종류의 일반 사료와 본 발명의 쿠마린산을 혼합하여 제조될 수 있다. 펠렛 형태의 사료는 상기 발효사료 또는 배합사료를 펠렛기로 제형화하여 제조될 수 있다. 사일레지는 청예사료와 본 발명의 쿠마린산을 혼합하여 유산균으로 발효시킴으로서 제조될 수 있다.

본 발명의 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 조성물은 연골세포의 세포 증식과 성장호르몬 분비를 촉진시켜 결론적으로 성장을 촉진시키는 효과가 있어, 성장기의 유소아 및 청소년의 성장 및 골격을 형성하는데 효과적일 뿐만 아니라 본 발명의 조성물 단독으로 또는 성장호르몬 치료와 병행요법을 통해 키 성장 치료에 효과적이다.

도 1은 투여 군별로 10일간 랫트(rat)의 몸무게 변화 추이를 나타낸 도식이다.
도 2는 경골 길이(total tibia length)를 그래프로 나타낸 것이다(Date represent mean (n=5), *p<0.05).
도 3A는 투여 군별로 랫트의 성장판 길이를 나타낸 그래프이며, 도 3B과 도 4C는 각각 증식부(proliferative zone)와 비대부(Hypertrophic zone)의 길이를 나타낸 그래프이다(A : 배율 X 20, *p<0.05 and ***p<0.001).
도 4A는 투여 군별로 랫트의 성장판 근위 경골부를 BrdU 염색한 사진이며, 도 5B는 투여 군별 랫트의 BrdU가 표지된 연골 세포의 비율을 나타낸 그래프이다(A : 배율 X 40, *p<0.05).
도 5는 투여 군별로 랫트의 혈액 내 성장호르몬 양을 나타낸 그래프이다(Date represent mean (n=5), *p<0.05).
도 6A는 투여 군별로 랫트의 성장판 근위 경골부를 BrdU 염색한 사진이며, 도 6B는 투여 군별 랫트의 혈액 내 IGF-1의 양을 나타낸 그래프이다(A : 배율 X 20, B : **p<0.01 and ***p<0.001).

이하 본 발명을 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

동물모델을 이용한 쿠마린산의 성장 촉진 효과 조사

<1-1> 쿠마린산의 투여

3주령의 Male Sprague-Dawley rat를 구입하여 사흘 동안 안정화시켰다. 사육 환경은 24, 명암주기는 12시간 간격을 유지하고 사료는 항생제가 첨가되지 않은 일반 고형사료를 사용하였다. Control 군에는 saline을 주입하며, 쿠마린산을 경구투여로써 일일 1회 경구 투여하였다. Positive 군에는 유트로핀주(LG생명과학)를 20μg/ kg의 용량으로써 일일 1회 피하 주사하였다. 본 발명의 쿠마린산을 투여 방법은, Rat에게 positive 군을 제외한 모든 군에서 oral cavity에 투여하며 모든 동물은 daily 1회 투여한다. 각 군의 구성은 아래와 같다.

- Control 투여군 : Normal saline 1ml

- Positive Control : growth hormone, 20μg/ kg

- 쿠마린산 : 100mg/ kg

10일간의 사료의 섭취와 쿠마린산의 투여가 끝난 후에 부검하여 아래 내용을 확인한다.

<1-2> 실험동물의 체중 변화

상기 실험예 <1-1>의 각 그룹의 식이 투여 전 체중과 10일간 식이 투여 후 체중을 측정하였다. 측정은 주 2회 실시되었다. 측정된 값은 통계처리하여 평균값과 표준편차를 계산하였다.

[도 1]에서 보는바와 같이, 10일간 관찰한 결과 Control군, 실험군, 성장호르몬 투여군 모두에서 몸무게의 차이가 거의 없는 것으로 나타났다. 이는 마우스의 몸무게가 쿠마린산 투약의 효과와 상관관계가 크게 없다는 것을 나타낸다.

<1-3> 실험동물의 경골(tibia) 길이 변화 측정

쿠마린산의 성장 촉진 효과를 확인하기 위하여 랫트의 경골 길이를 측정하였다. 상기 실험예 <1-1>에서 10일 간의 투여가 완료된 후, 본 발명에 따른 쿠마린산을 섭취시킨 실험군 및 대조군의 좌우 경골(정강이뼈)을 적출하여 뼈 조직에 부착되어 있는 근육, 지방, 인대 등을 전부 제거하고 70% 알코올에 보관하고 X-ray 촬영기기(OM-FORTE -10121, DK 메디칼시스템)를 이용하였다. X-ray source는 55kV, 320A로 하였다. 경골의 X-ray 촬영을 통해 경골 길이(tibia length)를 측정하였다.

[도 2]에서 보는 바와 같이, Control 군에 비해 성장호르몬을 투여한 군의 total tibia length가 증가하였으며, 쿠마린산을 투여한 군에서도 Control 군에 비하여 total tibia length가 증가하는 효과를 보였다.

<1-4> 실험동물의 성장판 분석

쿠마린산의 성장 효과를 확인하기 위하여 랫트의 성장판을 분석하였다. 상기 실험예 <1-1>에서 10일 간의 투여가 완료된 후, 본 발명에 따른 실험군 및 대조군의 좌우 경골(정강이뼈)를 적출하여 뼈 조직에 부착되어 있는 근육, 지방, 인대 등을 전부 제거하고, 탈회시킨 후 탈수시켰다. 그 후 xylene으로 씻어서 paraffin block에 넣었다. 이후 4μm 두께로 자른 뒤 BX50 microscope (Olympus)를 이용해 성장판 내의 증식부(proliferative zone)와 비대부(hypertrophic zone)의 길이를 측정하였다.

[도 3]에서 보는 바와 같이, Control 군의 증식부의 길이는 평균 0.77mm를 나타냈으며, 성장호르몬 투여군의 증식부의 길이는 1.13mm를 나타났다. 또한, 쿠마린산 투여군의 증식부 길이는 0.98mm로 측정되었다. 성장호르몬 투여군과 쿠마린산 투여군에서 모두 Control군보다 유의성 있는 증가를 보였으며, 특히 쿠마린산을 투여한 군의 증식부 길이 증가는 성장호르몬을 투여한 군에 준할 정도인 것으로 확인되었다. 비대부의 길이 또한 성장호르몬을 투여한 군에서 1.44mm, 쿠마린산 투여한 군에서 1.27mm로 control 군(1.10mm)에 비해 증가한 것을 확인하였다.

<1-5> 실험동물의 근위 경골부 연골세포 증식 관찰

쿠마린산의 골 성장 효과가 연골세포의 증식으로 인한 것인지 알아보기 위하여 연골세포를 관찰하였다. 상기 실험예 <1-1>에서 10일 간의 투여를 완료한 후, 실험 당일 본 발명의 실험군 및 대조군 랫트에 5-bromo-2'-deoxyuridine(BrdU)을 30mg/kg 단위로 흰쥐에게 복강 투여하였다. 2시간 뒤에 부검하여 다리를 적출하고 4% PFA에서 24시간 보관하였다. Embedding과 sectioning 작업을 거친 후 BrdU 염색 키트(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)를 이용하여 염색된 연골세포를 관찰하였다.

[도 4]에서 보는 바와 같이, 전체 세포에 대한 BrdU로 염색된 세포의 비율은 Control 군에서 0.13%, 성장호르몬 투여 군에서 0.18%, 쿠마린산 투여군에서 0.18%를 나타냈다. 다시 말해, 성장호르몬을 투여한 군과 쿠마린산을 투여한 군 모두 Control군에 비해 BrdU가 표지된 연골세포의 비율이 증가하였다.

<1-6> 실험동물의 혈액 내 성장호르몬 양 측정

쿠마린산이 성장호르몬의 분비량에 영향을 미치는지 확인하기 위하여 랫트의 혈액 내 성장호르몬 양을 측정하였다. 상기 실험예 <1-1>에서 10일 간의 투여를 완료한 후, 실험 당일 본 발명의 실험군 및 대조군 랫트의 하대정맥으로부터 혈액을 채취한 후 원심분리를 통해 혈청을 얻었다. 성장호르몬의 양을 측정하는데는 성장호르몬 랫트 ELISA Kit(Life Technologies, KRC5311)를 이용하였다.

[도 5]에서 보는 바와 같이, 혈액 내 성장호르몬은 Control에서 3.97 ng/ml, 성장호르몬을 투여한 군에서 11.89 ng/ml, 쿠마린산을 투여한 군에서 7.62 ng/ml로 성장호르몬 투여군과 쿠마린산 투여군에서 모두 Control 군에 비해 성장호르몬의 양이 유의성 있게 증가한 것으로 확인되었다.

<1-7> 실험동물의 혈액 내 IGF -1 단백질 양 측정

쿠마린산이 성장호르몬의 분비를 자극하는 단백질인 IGF-1의 분비량에 영향을 미치는지 알아보기 위하여 IGF-1 단백질의 양을 측정하였다. 상기 실험예 <1-1>에서 10일 간의 투여를 완료한 후, 실험 당일 본 발명의 실험군 및 대조군 랫트를 마취하고 주사기를 이용하여 혈액을 뽑은 뒤 원심분리를 하여 혈청을 얻었다. IGF-1의 측정은 IGF1 ELISA Kit(Abcam, ab100695)를 이용하였다.

[도 6]에서 보는 바와 같이, IGF-1 단백질의 양은 Control군에서 0.84 mg/kg, 성장호르몬 투여군에서 1.31 mg/kg, 쿠마린산 투여군에서 1.23 mg/kg으로 성장호르몬 투여 군과 쿠마린산 투여 군에서 모두 대조군에 비해 IGF-1 단백질의 양이 유의성 있게 증가한 것을 확인하였다.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 쿠마린산의 성장 촉진 효과에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장 촉진용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 동물 사료용 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 조성물은 연골세포의 세포 증식과 성장호르몬 분비를 촉진시켜 결론적으로 성장을 촉진시키는 효과가 있어, 성장기의 유소아 및 청소년의 성장 및 골격을 형성하는데 효과적일뿐만 아니라 본 발명의 조성물 단독으로 또는 성장호르몬 치료와 병행요법을 통해 키 성장 치료에 효과적이므로 산업상 이용가능성이 크다.

Claims (5)

1. 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장판 자극에 의한 골 길이 성장 촉진용 약학적 조성물.
   
2. 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장판 자극에 의한 골 길이 성장 촉진용 식품 조성물.
   
3. 쿠마린산을 유효성분으로 포함하는 성장판 자극에 의한 골 길이 성장 촉진용 동물 사료용 조성물.
   
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 쿠마린산은 o-쿠마린산, m-쿠마린산, p-쿠마린산으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 성장판 자극에 의한 골 길이 성장 촉진용 조성물.
5. 삭제

Images