KR101566824B1 - External compositions for skin care containing extract of cyperus papyrus - Google Patents
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Abstract
본 발명은 파피루스 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 상기 파피루스 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 피부 자극이 없으면서 티로시나제 활성을 억제시키고, 멜라닌 생성을 저해하며, 보습 효과가 우수하고, 엘라스틴 및 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 있어, 피부 미백, 보습, 노화방지 및 탄력증진에 뛰어난 효과를 나타낸다. 따라서, 본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 미백용, 보습용, 노화방지용 및 탄력증진용으로서, 화장료 조성물 또는 약학 조성물로 사용할 수 있다. The present invention relates to an external preparation for skin containing a papyrus extract. The composition for external application for skin containing the papyrus extract of the present invention inhibits tyrosinase activity without skin irritation, inhibits melanin production, has excellent moisturizing effect, promotes elastin and collagen production, , Anti-aging and elasticity enhancement. Accordingly, the composition for external application for skin of the present invention can be used as a cosmetic composition or a pharmaceutical composition for skin whitening, moisturizing, anti-aging, and elasticity enhancement.
파피루스, 피부 자극, 티로시나제, 멜라닌, 엘라스틴, 콜라겐, 미백, 보습, 노화방지, 탄력증진, 화장료, 약학, 조성물 Papyrus, skin irritation, tyrosinase, melanin, elastin, collagen, whitening, moisturizing, anti-aging, elasticity enhancement, cosmetics, pharmacy, composition
Description
본 발명은 파피루스 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an external preparation for skin containing a papyrus extract.
피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 제기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주는 기능을 가지고 있다. 그러나, 나이가 들어감에 따라 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하며 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되고, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선에 자외선 함량이 증가하게 되고 환경오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 생기는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스 등은 피부의 정상기능을 저하시키고 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등이 생성되며, 피부의 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시키게 된다. Skin is the primary barrier of the human body and has functions to protect the internal organs of the body from changes in temperature and humidity, and from external stimuli such as ultraviolet rays and pollutants. However, as the age increases, the secretion of various hormones that regulate metabolism is reduced internally, the functions of the immune cells and the activity of the cells are degraded, and the ultraviolet ray content of the sunlight is increased due to the destruction of the ozone layer externally As the environmental pollution becomes more intense, excessive physical and chemical stimuli and stress caused by the increase of free radicals and active harmful oxygen degrade the normal function of the skin, resulting in stain and freckles due to melanin deposition, Thereby damaging the skin.
이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여, 종래 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하 여 사용함으로써 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부노화 및 멜라닌의 침착을 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔었다. In order to prevent such phenomenon and to maintain healthier and more beautiful skin, it has been conventionally used by adding physiologically active substances obtained from various animals, plants, microorganisms, etc. to cosmetics to maintain the inherent functions of the skin, ≪ / RTI > and melanin deposition.
한편, 자외선에의 노출이나 여타 스트레스에 의해서 젊은 여성의 경우 기미, 주근깨 등의 멜라닌 침착 현상이 발생하며, 많은 피부트러블의 하나가 되어 왔다. 이러한 작용을 억제하기 위하여 티로시나아제의 활성억제를 위한 약물들이 합성되거나, 천연물로부터 추출되어 왔다. On the other hand, due to exposure to ultraviolet rays and other stresses, melanin deposits such as spots and freckles occur in young women and have become one of many skin troubles. In order to inhibit such action, drugs for inhibiting the activity of tyrosinase have been synthesized or extracted from natural products.
그러나, 아직까지 안전하고 부작용이 없으면서 유효적인 효과를 나타내는 화장품 원료는 그리 많지 않은 실정이다.However, there are not so many raw materials for cosmetics that are effective yet effective without any safety and side effects.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 파피루스 추출물을 함유하여 우수한 피부 미백 효과, 보습 효과, 노화방지 효과 및 탄력증진 효과를 나타내는 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다. A problem to be solved by the present invention is to provide a composition for external application for skin which contains papyrus extract and exhibits excellent skin whitening effect, moisturizing effect, anti-aging effect and elasticity-enhancing effect.
또한, 상기 파피루스 추출물을 가능한 적은 처리과정을 거쳐 장기보존이 가능한 방법을 제공하고, 또한, 이를 사용한 화장료 조성물 또는 약학 조성물을 제공하는 것이다.It is another object of the present invention to provide a method capable of preserving the papyrus extract for a long time through as little treatment as possible, and to provide a cosmetic composition or a pharmaceutical composition using the same.
본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 파피루스 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.The composition for external application for skin according to the present invention is characterized by containing a papyrus extract.
본 발명에 의한 파피루스 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 티로시나제 활성 억제 효과, 멜라닌 생성 저해 효과, 보습 효과, 엘라스틴 생성 촉진 효과, 콜라겐 생성 촉진 효과가 있다. 또한, 파피루스 추출물의 저장기간을 향상시키는 효과가 있다. 따라서, 상기 파피루스 추출물을 피부 미백용, 보습용, 노화방지용 및 탄력증진용 피부 외용제 조성물로서 화장료 조성물 또는 약학 조성물로 사용할 수 있다.The composition for external application for skin containing papyrus extract according to the present invention has an effect of inhibiting tyrosinase activity, an effect of inhibiting melanin formation, a moisturizing effect, an effect of promoting the production of elastin, and an effect of promoting collagen production. In addition, there is an effect of improving the storage period of the papyrus extract. Therefore, the papyrus extract can be used as a cosmetic composition or a pharmaceutical composition as an external composition for skin whitening, moisturizing, anti-aging, and elasticity enhancement.
파피루스(cyperus papyrus)는 나일강 상류의 수중에서 자라는 다년생초(多年生草)로 길이는 6 ~ 7m 정도에 달하고, 뿌리는 아주 깊게 뻗어 있으며, 그 줄기는 삼각형이다. 줄기의 선단은 유연하고, 맨끝 봉오리에서는 꽃이 피며, 삼각형의 줄기에는 마디(節)가 없고, 밑둥지 부분에만 아주 짧은 잎이 있을 뿐이다. 상기 파피루스의 꽃은 장식용으로, 뿌리는 단단해서 각종 용구(用具)를 만들고 큰 줄거리는 범선을 만들거나 로프 (Rope), 짚신, 약용(藥用), 바구니, 연료로 사용할 수 있고, 밑둥지에 가까운 것은 종이를 만들거나 샐러드(Salad)등의 식용(食用)으로도 사용될 수 있다..Papyrus (cyperus papyrus ) is a perennial herb that grows in the upper reaches of the Nile River. Its length is about 6-7m, its roots are very deep, and its stem is triangular. The tip of the stem is supple, flowers bloom in the end bud, there are no nodes in the trunk of the triangle, and only a very short leaf exists in the bottom nest. The papyrus flowers are ornamental, the roots are hard to make various tools, the big plot can be used as sailboats, ropes, sandals, medicines, baskets, fuel, The nearest thing can be used for making paper or as a salad or other edible food.
또한, 상기 파피루스의 부위는 꽃, 잎, 씨앗, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상일 수 있다.The site of the papyrus may be at least one selected from the group consisting of flowers, leaves, seeds, roots and stems.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 파피루스 추출물을 조성물 총 중량에 대해 0.001~30.0중량%, 바람직하게는 0.01~10.0중량% 함유하는 것을 특징으로 한다. The composition for external application for skin of the present invention is characterized by containing 0.001-30.0% by weight, preferably 0.01-10.0% by weight of papyrus extract based on the total weight of the composition.
또한, 상기 파피루스 추출물은 파피루스로부터 추출물을 얻은 후 상기 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과한 후, 무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합함으로써 장기보존이 가능하도록 후처리된 추출물인 것을 특징한다.In addition, the papyrus extract is obtained by obtaining an extract from papyrus, filtering the extract using a filtration membrane having a pore size of 0.05 to 0.2 μm, adding anhydrous ethanol to at least 7% (w / w), so that the extract can be preserved for a long time.
본 발명의 상기 파피루스 추출물은 건조농축물 또는 건조된 추출물을 사용할 수 있다.The papyrus extract of the present invention may be dried concentrate or dried extract.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 미백용 조성물임을 특징으로 한다.The composition for external application for skin of the present invention is characterized by being a composition for skin whitening.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 보습용 조성물임을 특징으로 한다.The composition for external application for skin of the present invention is a composition for moisturizing the skin.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 노화방지용 조성물임을 특징으로 한다.The composition for external application for skin of the present invention is characterized by being a composition for preventing skin aging.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 탄력증진용 조성물임을 특징으로 한다.The composition for external application for skin of the present invention is a composition for promoting skin elasticity.
또한, 본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤과 같은 피부 점착타입의 화장료, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션과 같은 제형을 갖는 화장료, 샴푸, 린스, 바디크렌저, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징크림, 클렌징 워터, 비누와 같은 세정용 화장료 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있으며, 또한, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 분무제와 같은 경피투여형 제형을 갖는 약학 조성물일 수 있다. In addition, the composition for external application for skin of the present invention is not particularly limited in its formulation. For example, it may be formulated into skin-adhesive type cosmetics such as emulsion, lotion, cream, lotion, essence, pack, gel, powder, The composition may be a cosmetic composition having a form such as a cosmetic composition having a formulation such as a cosmetic base, a cup base or foundation, a shampoo, a rinse, a body cleanser, a serum, a cleansing foam, a cleansing cream, a cleansing water, a soap, The composition may be a pharmaceutical composition having a transdermal dosage form such as tablets, capsules, suspensions, emulsions, oral formulations such as syrups and aerosols, lotions, ointments, gels, creams, patches and sprays.
또한, 각 제형의 조성물에 있어서, 상기한 파피루스 추출물 이외에 다른 성분들은 기타 조성물의 제형 또는 사용목적 등에 따라 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.In addition, in the composition of each formulation, the components other than the above-described papyrus extract can be mixed and selected without difficulty depending on the formulation of the composition or the purpose of use.
본 발명에 따른 상기 파피루스 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물의 제조방법은, 파피루스로부터 추출물을 얻는 제 1 단계; 파피루스 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과하는 제 2단계; 무수에 탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합하는 후처리를 하는 제 3 단계; 및 상기 제 3 단계에서 후처리된 파피루스 추출물을 제형화하는 제 4 단계를 포함하여 구성되는 것을 특징으로 한다.A method for preparing a composition for external application for skin containing the papyrus extract according to the present invention comprises: a first step of obtaining an extract from papyrus; A second step of filtering the papyrus extract using a filtration membrane having a pore size of 0.05 to 0.2 μm; A third step of post-treatment in which anhydrous ethanol is mixed at a concentration of at least 7% (w / w) based on the entire composition 100; And a fourth step of formulating the papyrus extract post-treated in the third step.
상기 여과는 감압여과 방식 또는 가압여과 방식을 이용하는 것을 특징으로 한다.The filtration is characterized by using a reduced pressure filtration system or a pressure filtration system.
상기 감압여과는 진공펌프를 이용하고, 가압여과는 페리스테틱 펌프(peristaltic pump)를 이용하는 것을 특징으로 한다.The vacuum filtration uses a vacuum pump and the pressure filtration uses a peristaltic pump.
상기 제 1단계는 초임계 추출조를 사용하여 초임계 추출하는 것을 특징으로 한다.The first step is supercritical extraction using a supercritical water extracting tank.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
본 발명자들은 이러한 약리적 효능을 지닌 파피루스 추출물이 티로시나제 활성 억제능, 멜라닌 생성 저해능을 가짐과 동시에 수분의 흡습성을 증가시키며 엘라스틴 생성 및 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 있음을 발견하였으며, 이들 생약재 추출물은 식물체로부터 유효성분을 추출하기 위하여 통상적으로 사용되고 당업자에게 주지된 방법에 의해 제조된 것이다.The inventors of the present invention have found that papyrus extracts having such pharmacological effects have an effect of inhibiting tyrosinase activity and melanin production inhibition, increasing hygroscopicity of water, promoting elastin production and collagen production, and these herbal extracts are effective Which are conventionally used to extract the components and have been prepared by methods known to those skilled in the art.
또한, 파피루스 추출물은 기존에는 마땅한 변색, 변취 방지 방법이 없었으나, 본 발명에서 개발된 새로운 처리방법을 이용하여 채취직후 방부, 항산화 처리를 한다. In addition, the papyrus extract does not have a proper method for preventing discoloration and decoloration, but uses a new treatment method developed in the present invention to perform preservation and antioxidation treatment immediately after collection.
상기 파피루스 추출물을 수득하기 위하여, 예를 들면, 파피루스를 건조하여 분쇄한 다음, 파피루스 분쇄물에 물, 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르 또는 이들의 혼합물을 분쇄물 건조중량에 대하여 일정량을 가한 다음, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 50 내지 100 ℃ 온도로 5 내지 24시간동안 가열하여 추출하거나; 상기 파피루스 분쇄물에 물, 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르 또는 이들의 혼합물을 분쇄물 건조중량에 대하여 일정량을 가한 다음, 4 내지 25 ℃ 온도로 3 내지 20일간 침적시켜 파피루스 추출물을 수득하거나; 무수 또는 함수 에탄올, 또는 메탄올 추출물에 적당한 양의 물을 가한 뒤 생기는 침전물을 여과하여 제거하고, 여기에 에틸아세테이트, 부탄올 또는 디에틸에테르를 가하여 잘 섞은 다음 방치하여 층을 분리시킨 뒤 상층을 분리한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 파피루스 추출물을 수득할 수 있다. In order to obtain the papyrus extract, for example, papyrus is dried and pulverized, and water, an anhydrous or a lower alcohol having 1 to 3 carbon atoms, acetone, ethyl acetate or diethyl ether or a mixture thereof is added to the papyrus pulverized product Adding a predetermined amount to the dry weight of the pulverized product, and then extracting by heating at 50 to 100 DEG C for 5 to 24 hours in an extractor equipped with a cooling condenser; To the papyrus pulverized product is added a certain amount of water, an anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 3 carbon atoms, acetone, ethyl acetate or diethyl ether or a mixture thereof to the dry weight of the pulverized product, Immersing it for 20 days to obtain a papyrus extract; An appropriate amount of water was added to anhydrous or hydrolyzed methanol or methanol extract, and the resulting precipitate was removed by filtration. Ethyl acetate, butanol or diethyl ether was added thereto, followed by well mixing. Then, the layer was separated and the upper layer was separated Thereafter, the papyrus extract can be obtained from an extractor to which a cooling condenser is attached.
또한, 건조한 파피루스 일정량을 100~500 ml, 바람직하게는 100 ml의 초임계 추출조에 넣고 추출조를 밀봉한 다음, 추출조의 온도를 30~80 ℃, 바람직하게는 40 ℃까지 승온하고 고압 액체 펌프를 장착하여 용매로 물, 에틸알콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군중에서 선택된 어느 하나 이상, 바람직하게는 부틸렌글리콜을 일정량 투입하면서 동시에 이산화탄소를 고압용 기체 펌프를 이용하여 투입하여 압력을 200~400기압, 바람직하게는 300기압까지 올린 후, 추출조의 출구에 부착된 압력조절 밸브를 이용하여 추출물을 방출시키면서 압력과 온도를 약 300기압, 약 40℃로 일정하게 유지하고, 상기 용매를 20~50분, 바람직하게는 30분에 걸쳐 모두 투입하고 고압 액체 펌프의 가동을 중단하고 고압용 기체 펌프를 이용하여 이산화탄소로만 1~3시간, 바람직하게는 2시간 추출하여 추출조 내부에 남아있는 상기 용매를 모두 배출하여 추출을 종료하고, 상기에서 수득한 파피루스 추출액을 원심분리하고 여과하여, 본 발명의 파피루스추출물을 수득할 수 있다. In addition, a predetermined amount of dried papyrus is placed in a supercritical water extraction tank of 100 to 500 ml, preferably 100 ml, and the extraction tank is sealed. Then, the temperature of the extraction tank is raised to 30 to 80 캜, preferably 40 캜, And a solvent such as water, ethyl alcohol, propylene glycol, and butylene glycol, preferably butylene glycol, is added to the mixture while carbon dioxide is introduced into the mixture using a high-pressure gas pump, The pressure and temperature are kept constant at about 300 atm and about 40 ° C while releasing the extract using a pressure control valve attached to the outlet of the extraction tank, 50 minutes, preferably 30 minutes, the operation of the high-pressure liquid pump is stopped, and the high-pressure gas pump is used for only 1 to 3 hours with carbon dioxide, By the straight ends the extraction and extraction time extraction tank discharge all the solvent remaining therein, centrifuging the extract obtained in the above papyrus, filtered, it is possible to give the papyrus extract of the present invention.
본 발명에 따른 추출물은, 피부 외용제 조성물로써 추출물, 추출액, 농축물, 추출물의 건조분말, 추출액의 건조분말, 농축물의 건조분말 등을 그대로 도포하는 것이 적합하나, 통상의 외용의 제제, 화장료 제형 또는 약학 제형으로 제형화 할 수 있다. The extract according to the present invention is preferably applied as an external composition for skin to the skin as an extract, an extract, a concentrate, a dry powder of an extract, a dry powder of an extract, a dry powder of a concentrate, It can be formulated into pharmaceutical formulations.
본 발명에 따른 파피루스 추출물을 함유하는 화장료 제형을 갖는 화장료 조성물은, 상기한 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유하는 것도 무방하다. The cosmetic composition having a cosmetic preparation containing the papyrus extract according to the present invention may contain other ingredients that can give rise to a synergistic effect on the main effect, in addition to the above-mentioned extract, And the like.
또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.In addition, the cosmetic composition may take the form of a solution, an emulsion, a viscous mixture or the like.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤과 같은 피부 점착타입의 화장료, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션과 같은 제형을 갖는 화장료, 샴푸, 린스, 바디크렌저, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징크림, 클렌징 워터, 비누와 같은 세정 화장료의 제형을 가질 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention is not particularly limited in its formulation, but may be used in cosmetics such as emulsion, lotion, cream, lotion, essence, pack and gel, powder, lipstick, makeup base, Such as cosmetics, shampoos, rinses, body creams, essences, cleansing foams, cleansing creams, cleansing waters and soaps with the same formulation.
각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기의 추출물 이외에 다른 성분들은 기타 화장료의 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.In the cosmetic composition of each formulation, the ingredients other than the above-mentioned extracts can be mixed and selected without difficulty by the person skilled in the art depending on the formulations of the other cosmetic preparations or the purpose of use.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may further comprise a composition selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymeric polysaccharides, sphingolipids and seaweed extracts.
본 발명의 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.The cosmetic composition of the present invention may be blended with other necessary ingredients, if necessary, in addition to the essential ingredients.
이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.Examples of the compounding ingredients that may be added include organic solvents such as a preservative component, a moisturizer, an emollient, a surfactant, an organic and inorganic pigment, an organic powder, an ultraviolet absorbent, a preservative, a bactericide, an antioxidant, a plant extract, a pH adjuster, A blood circulation accelerator, a cold agent, an antiperspirant agent, and purified water.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.01～5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01～3 중량%로 배합된다.Any of the above components may be blended within the range not to impair the objects and effects of the present invention, but is preferably 0.01 to 5% by weight based on the total weight, More preferably 0.01 to 3% by weight.
본 발명의 파피루스 추출물을 함유하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition containing the papyrus extract of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents conventionally used in the production of pharmaceutical compositions.
본 발명의 추출물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. The pharmaceutical dosage forms of the extract of the present invention may be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, and may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds as well as in suitable aggregates.
본 발명에 따른 추출물을 포함하는 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 분무제와 같은 경피투여형 제형을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용될 수 있다. The pharmaceutical composition containing the extract according to the present invention can be administered orally or parenterally in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, oral preparations such as syrups and aerosols, lotions, ointments, And may be formulated in any form suitable for pharmaceutical preparations, including transdermal dosage forms such as powders, sprays and the like.
본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 대상자의 연령, 성별, 체중, 증상, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 약학 조성물을 1일 0.001~ 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 할 수도 있고, 수회 나누어 할 수도 있다. 또한, 그 투여량은 연령, 성별, 체중, 질병의 정도, 투여경로 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.The preferred dosage of the pharmaceutical composition of the present invention varies depending on the age, sex, weight, symptom, degree of disease, drug form, administration route and period of time of the subject, but can be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, it is preferable to administer the pharmaceutical composition of the present invention at 0.001 to 100 mg / kg per day. The administration can be done once a day, or divided into several times. In addition, the dose may be increased or decreased according to age, sex, weight, degree of disease, route of administration, and the like. Thus, the dosage amounts are not intended to limit the scope of the invention in any manner.
본 발명의 추출물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 비경구, 경구 등의 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. The extract of the present invention can be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, and the like by various routes such as parenteral, oral, and the like, and all manner of administration can be expected. For example, oral, rectal or intravenous , Muscle, subcutaneous, intrauterine or intracerebroventricular injection.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of Examples and Experimental Examples, but the present invention is not limited to these Examples.
실시예Example 1. 파피루스 추출물의 제조 1. Preparation of papyrus extract
파피루스를 채취하고 건조한 후 분쇄한 다음, 파피루스 건조분쇄물 1 g에 물 100 mℓ를 가한 다음, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 60℃ 온도로 8시간 동안 가열하여 파피루스 추출물을 수득하였다.The papyrus was collected, dried and then pulverized. 100 ml of water was added to 1 g of papyrus dried pulverized product, and then heated in an extractor equipped with a cooling condenser at a temperature of 60 ° C for 8 hours to obtain a papyrus extract.
실시예Example 2. 파피루스 추출물의 제조 2. Preparation of papyrus extract
건조한 파피루스 5 g을 100 ml의 초임계 추출조에 넣고 추출조를 밀봉한 다음, 추출조의 온도를 40 ℃까지 승온하고 고압 액체 펌프를 장착하여 부틸렌글리콜을 투입하면서 동시에 이산화탄소를 고압용 기체 펌프를 이용하여 투입하여 압력을 300 기압까지 올린 후, 추출조의 출구에 부착된 압력조절 밸브를 이용하여 추출물을 방출시키면서 압력과 온도를 300기압, 40 ℃로 일정하게 유지하면서, 부틸렌글리콜을 30분에 걸쳐 12.5 g을 모두 투입하고 고압 액체 펌프의 가동을 중단하고 고압용 기체 펌프를 이용하여 이산화탄소로만 2시간 추출하여 추출조 내부에 남아있는 부틸렌글리콜을 모두 배출하여 추출을 종료하고, 얻어진 추출액을 원심분리하고 여과하여 파피루스 추출물을 수득하였다. 5 g of dried papyrus is placed in a supercritical water extraction tank of 100 ml and the extraction tank is sealed. Then, the temperature of the extraction tank is raised to 40 ° C., and a high pressure liquid pump is installed to introduce butylene glycol and simultaneously use carbon dioxide And the pressure was raised to 300 atm. The extract was discharged using a pressure control valve attached to the outlet of the extraction tank, while the pressure and temperature were kept constant at 300 atm and 40 ° C., butylene glycol was distilled over 30 minutes And the operation of the high-pressure liquid pump was stopped. Extraction was completed by discharging only the butylene glycol remaining in the extraction tank for 2 hours with carbon dioxide using a high-pressure gas pump, and the obtained extract was centrifuged And filtered to obtain a papyrus extract.
제제예Formulation example
제제예 1. 유연화장수 Formulation Example 1. Flexible life
낫토검
셀룰로오스검
에탄올
폴리옥시에칠렌경화피마자유
초산토코페롤
방부제
색소
실시예 2의 파피루스 추출물
정제수Betaine
Natto sword
Cellulose sword
ethanol
Polyoxyethylene hardened castor oil
Tocopheryl acetate
antiseptic
Pigment
The papyrus extract of Example 2
Purified water
3.0
0.08
5.0
0.5
0.2
5.0
미량
적량
100 까지3.0
3.0
0.08
5.0
0.5
0.2
5.0
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 2. 영양화장수 Formulation Example 2. Nourishing lotion
세토스테아릴알콜
친유형모노스테아린산 스테아레이트
스쿠알란
폴리솔베이트 60
솔비탄세스퀴올리에이트
글리세린
트리에탄올아민
카르복시비닐폴리머
방부제
색소
향
실시예 2의 파피루스 추출물
정제수3-hexyl hexanoate
Cetostearyl alcohol
Chin type monostearate stearate
Squalane
Polysorbate 60
Sorbitan sesquioleate
glycerin
Triethanolamine
Carboxyvinyl polymer
antiseptic
Pigment
incense
The papyrus extract of Example 2
Purified water
1.0
0.8
2.0
1.5
0.5
8.0
0.2
0.2
미량
미량
미량
적량
100까지5.0
1.0
0.8
2.0
1.5
0.5
8.0
0.2
0.2
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 3. 영양크림Formulation Example 3. Nourishing cream
글리세릴스테아레이트
세토스테아레이트
폴리솔베이트 60
솔비탄세스퀴올리에이트
세칠에첼헥사노에이트
스쿠알란
유동파라핀
글리세린
프로필렌글리콜
식물 추출물
방부제
색소
향
실시예 2의 파피루스 추출물
정제수Wax
Glyceryl stearate
Cetostearate
Polysorbate 60
Sorbitan sesquioleate
Three-ethylhexanoate
Squalane
Liquid paraffin
glycerin
Propylene glycol
Plant extract
antiseptic
Pigment
incense
The papyrus extract of Example 2
Purified water
2.0
2.5
1.5
0.5
5.0
5.0
8.0
8.0
4.0
5.0
미량
미량
미량
적량
100까지1.0
2.0
2.5
1.5
0.5
5.0
5.0
8.0
8.0
4.0
5.0
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 4. 에센스Formulation Example 4. Essence
프로필렌글리콜
셀룰로오스검
낫토검
히아루론산추출물
아미노프로판술포닉액시드
카르복시비닐폴리머
에탄올
폴리옥시에칠렌경화피마자유
트리에탄올아민
방부제
향
색소
실시예 2의 파피루스 추출물
정제수glycerin
Propylene glycol
Cellulose sword
Natto sword
Hyaluronic acid extract
Aminopropanesulfonic acid liquid seed
Carboxyvinyl polymer
ethanol
Polyoxyethylene hardened castor oil
Triethanolamine
antiseptic
incense
Pigment
The papyrus extract of Example 2
Purified water
5.0
0.05
5.0
5.0
2.0
0.5
5.0
0.5
0.5
미량
미량
미량
적량
100까지15.0
5.0
0.05
5.0
5.0
2.0
0.5
5.0
0.5
0.5
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 5. 로션Formulation Example 5. Lotion
폴리솔베이트 60
솔비탄세스퀴올리에이트
세칠에칠헥사노에이트
스쿠알란
라놀린
글리세린
카르복시비닐폴리머
가수분해콜라겐
트리에탄올아민
방부제
향료
색소
실시예 2의 파피루스 추출물
정제수Glyceryl stearate
Polysorbate 60
Sorbitan sesquioleate
3-hexyl hexanoate
Squalane
lanolin
glycerin
Carboxyvinyl polymer
Hydrolyzed collagen
Triethanolamine
antiseptic
Spices
Pigment
The papyrus extract of Example 2
Purified water
1.5
0.5
3.0
3.0
2.0
8.0
0.5
1.0
0.5
미량
미량
미량
적량
100까지1.5
1.5
0.5
3.0
3.0
2.0
8.0
0.5
1.0
0.5
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
실험예 6. 연고Experimental Example 6 Ointment
액상 파라핀
솔비탄세스퀴올리에이트
옥틸도데세스-25
세칠에칠헥사노에이트
스쿠알란
살리실산
글리세린
솔비톨
실시예 2의 파피루스 추출물
정제수Caprine / caprylic triglyceride
Liquid paraffin
Sorbitan sesquioleate
Octyldodec-25
3-hexyl hexanoate
Squalane
Salicylic acid
glycerin
Sorbitol
The papyrus extract of Example 2
Purified water
10.0
6.0
9.0
10.0
1.0
1.0
15.0
10.0
적량
100까지10.0
10.0
6.0
9.0
10.0
1.0
1.0
15.0
10.0
Suitable amount
Up to 100
제제예 7. 분무제Formulation Example 7. Spray Agent
폴리비닐피롤리돈/비닐아세테이트
글리세린
폴리아크릴레이트
실시예 2의 파피루스 추출물
정제수Triethanolamine
Polyvinylpyrrolidone / vinyl acetate
glycerin
Polyacrylate
The papyrus extract of Example 2
Purified water
3.0
5.0
0.2
적량
100까지0.2
3.0
5.0
0.2
Suitable amount
Up to 100
상기 처방을 펌프용기에 담아 사용한다.Use the prescription in a pump container.
실험예Experimental Example 1. 파피루스 추출물의 피부자극도 실험 1. Skin irritation test of papyrus extract
피부 외용제 조성물로서 사용시 파피루스 추출물의 피부자극도를 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 행하였다.The following experiment was conducted to examine skin irritation of papyrus extract when used as a composition for external application for skin.
먼저, 건강한 남녀 실험자 20명의 팔 하박부에 상기 제제예 1 내지 5의 처방으로 제조된 시료를 폐쇄 첩포 시험 방법에 따라, 1일 1회씩 도포한 후 외부와의 차단을 위해 플라스틱 캡을 씌운 다음 1일 후, 3일 후, 7일 후하기 표 8의 판정 방법에 따라 자극 정도를 관찰하였고, 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다. 한편, 하기 표 9의 수치는 하기 표 8의 판정 방법에 의해 산출된 자극의 평균치이다.First, a sample prepared by the prescription of Formulation Examples 1 to 5 was applied to 20 subcutaneous tissues of healthy male and female subjects according to the closure patch test method once a day, and then a plastic cap was coated to cover the outside with a cap After 3 days, 7 days, the degree of stimulation was observed according to the determination method of Table 8, and the results are shown in Table 9 below. On the other hand, the numerical values in Table 9 are the average values of the stimuli calculated by the determination method in Table 8 below.
1
2
3
40
One
2
3
4
최소한의 자극
약간의 자극(홍반)
심한 자극(홍반, 부종)
극심한 자극(홍반, 부종)No stimulation
Minimal stimulus
Some irritation (erythema)
Severe irritation (erythema, edema)
Severe irritation (erythema, edema)
그 결과, 상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 상기 제제예 1 내지 5의 모든 시료에 있어 피부 자극이 없음을 알 수 있었다. As a result, as shown in Table 9, it was found that all the samples of Formulation Examples 1 to 5 had no skin irritation.
실험예Experimental Example 2. 2. 티로시나제Tyrosinase 활성억제 효과 실험 Experiment of inhibition of activity
파피루스 추출물의 티로시나제 활성억제 효과를 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다. 이 때, 상기 실시예 2의 파피루스 추출물은 그대로 사용할 수 있으나, 티로시나제의 활성억제 효과 실험을 위하여 파피루스 추출물 2 ℓ를 수득직후 여과하고, 바로 동결건조 처리하여 파피루스 추출물의 건조물 1.57 g을 얻었으며, 건조된 파피루스 추출물과 알부틴에 대해서 티로시나제 저해효과를 측정하였다. 티로시나제는 버섯류에서 추출한 시그마(Sigma)사의 것을 사용하였다. 이는 파피루스 추출물에는 티로시나제 활성억제성분이 매우 희박하게 희석되어 있으며, 파피루스 추출물을 그대로 사용함을 원 목적으로 시작하였으나, 티로시나제의 활성억제효과를 확인하기 위하여 농축, 건조한 시료를 준비하여 실험을 실시한 것이다. The following experiment was conducted to examine the inhibitory effect of papyrus extract on tyrosinase activity. At this time, the papyrus extract of Example 2 can be used as it is, but for the experiment to inhibit the activity of tyrosinase, 2 L of papyrus extract was immediately filtered and immediately lyophilized to obtain 1.57 g of dried papyrus extract, The tyrosinase inhibitory effect was measured against the papyrus extract and arbutin. Tyrosinase was obtained from Sigma, which was extracted from mushrooms. The papyrus extract was diluted very dilute with tyrosinase activity inhibitor and started to use papyrus extract as it was. However, in order to confirm the inhibitory effect of tyrosinase activity, concentrated and dried samples were prepared and tested.
먼저, 기질인 티로신을 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH 6.8)에 용해시켜 0.3 mg/㎖의 농도가 되게 하였으며, 이 용액 334 ㎕를 취하여 시험관에 넣고, 여기에 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH 6.8) 576 ㎕를 추가하였다. 상기 파피루스 추출물의 건조물을 메탄올에 용해시켜 10 mg/㎖가 되게 한 후, 메탄올을 사용하여 5, 1.5, 1 mg/㎖, 500, 150, 100 ug/㎖로 희석시켜 실험군으로 사용하였다. 이와 같이 희석된 파피루스 추출물의 건조물 시료들을 각각 70 ㎕씩 취하여 티로신이 든 시험관에 첨가하고, 37 ℃ 항온조에서 10분간 반응시키고, 대조군은 파피루스 추출물의 건조물 대신에 메탄올 70 ㎕를 첨가하였다. 실험군 및 대조군의 실험관 안에 1700 단위(unit)/㎖의 티로시나제 용액 20 ㎕씩 넣어주고 전체 부피가 1000 ㎕가 되도록 증류수를 넣고, 37 ℃ 항온조에서 30분간 반응시켰다. 30분 경과 후, 반응시킨 실험관을 얼음물에 넣어서 티로시나제의 활성을 중지시킨 후, 분광분석계를 사용하여 470 nm 단파장의 흡광도를 측정하였다.First, the substrate, tyrosine, was dissolved in a sodium phosphate buffer solution (0.1 M, pH 6.8) to give a concentration of 0.3 mg / ml. 334 μl of this solution was taken in a test tube. Sodium phosphate buffer solution (0.1 M, pH 6.8). The dried papyrus extract was dissolved in methanol to a concentration of 10 mg / ml and diluted to 5, 1.5, 1 mg / ml, 500, 150 or 100 ug / ml using methanol. 70 [mu] L of each of the diluted dried papyrus extract samples was added to a test tube containing tyrosine, and the mixture was reacted for 10 minutes in a 37 DEG C thermostatic chamber. As a control, 70 [mu] L of methanol was added instead of the dried papyrus extract. Twenty microliters of 1700 units / ml of tyrosinase solution was added to the test tubes of the experimental group and the control group, and distilled water was added thereto so that the total volume became 1000 占 퐇 and reacted at 37 占 폚 in a thermostatic chamber for 30 minutes. After 30 minutes, the reaction tube was placed in ice water to stop the activity of tyrosinase, and the absorbance of the 470 nm short wavelength was measured using a spectrophotometer.
또한, 알부틴에 의한 티로시나제의 활성억제효과를 확인하기 위하여 알부틴을 인산나트륨 완충용액에 용해시켜 농도 5, 1.5, 1 mg/㎖, 500, 150, 100 ug/㎖로 희석하여 실험군으로 사용하였으며, 알부틴의 대조군은 알부틴 용액 대신에 인산나트륨 완충용액을 넣은 것을 사용하였다.In order to confirm the effect of tyrosinase inhibition by arbutin, arbutin was dissolved in sodium phosphate buffer solution and diluted to a concentration of 5, 1.5, 1 mg / ml, 500, 150 or 100 ug / Were used in place of the arbutin solution in which sodium phosphate buffer solution was added.
그 결과를 하기 표 10 및 11에 나타내었다.The results are shown in Tables 10 and 11 below.
상기 표 10 및 11에 나타낸 바와 같이, 파피루스 추출물의 건조물은 알부틴보다 약 2 배정도의 티로시나제 활성억제 효과가 있음을 알 수 있으며, 이를 통하여 파피루스 추출물이 우수한 미백 효과를 나타냄을 알 수 있다. As shown in Tables 10 and 11, it can be seen that the dried product of papyrus extract has a tyrosinase activity inhibitory effect about twice as much as that of arbutin, and thus the papyrus extract shows excellent whitening effect.
실험예Experimental Example 3. 멜라닌 생성저해 효과실험 3. Melanin formation inhibition experiment
파피루스 추출물의 멜라닌 생성저해 효과를 알아보기 위하여, 상기 실시예 2의 파피루스 추출물을 상기 실험예 2에서 처리한 방법과 동일하게 파피루스 추출물의 건조물을 제조하였으며, 실험을 위하여 B-16세포(ATCC사, 미국)의 세포주를 사용하였다. 파피루스 추출물에는 멜라닌 생성저해성분이 매우 희박하게 희석되어 있으며, 파피루스 추출물을 그대로 사용함을 원 목적으로 시작하였으나, 멜라닌의 생성저해 효과를 확인하기 위하여, 본 실시 예에서도 농축, 건조한 시료를 준비하여 실험을 실시하였다.In order to examine the inhibitory effect of the papyrus extract on the melanin production, dried papyrus extracts were prepared in the same manner as in Example 2, except that B-16 cells (ATCC Co., USA) was used. In order to confirm the inhibitory effect of melanin on the production of melanin, the concentrated and dried samples were prepared and tested in order to confirm the inhibitory effect of melanin on the production of melanin, although the melanin inhibitory component of the papyrus extract was diluted very dilute. Respectively.
먼저, 흑색종 세포를 10 % 소의 태아혈청, 1 % 항생제, 10-7 M의 α-MSH(멜라닌세포 자극호르몬, 시그마사)이 들어 있는 RPM1(Gibco사)의 세포배양 배지에 공급하여 약 1/3정도의 집락(confluence)으로 성장시켰다. 파피루스 추출물의 건조물, 코지산, 알부틴 및 아스코르빈산 등 각각의 시료를 50 ug/㎖의 농도로 배양배지에 용해시키고, 시료가 들어있는 용액을 흑색종 세포에 지속적으로 가하면서 2일간 배양하였다. 대조군으로는 아무런 시료가 들어 있지 않은 배양배지를 사용하여 배양하였다. 배양 후 세포들을 트립신-EDTA(Gibco사)로 처리하여 시험관에 모은 후 세포들의 수를 세고, 4,000,000 세포당 1 ㎖의 1 N 수산화 용액을 첨가하여 멜라닌을 녹여낸 후 470 nm 단파장에서의 흡광도를 측정하였다.First, melanoma cells were fed to a cell culture medium of RPMI (Gibco) containing 10% fetal bovine serum, 1% antibiotic, 10-7 M of alpha-MSH (melanocyte stimulating hormone, Sigma) / 3 (confluence). Each sample, such as dried papyrus extract, kojic acid, arbutin and ascorbic acid, was dissolved in a culture medium at a concentration of 50 ug / ml, and the solution containing the sample was incubated for 2 days while continuously adding the solution to melanoma cells. As a control group, the cells were cultured using a culture medium containing no sample. After culturing, the cells were treated with trypsin-EDTA (Gibco), collected in a test tube, counted, and 1 ml of 1 N hydroxide solution was added per 4,000,000 cells to dissolve the melanin, and the absorbance at 470 nm was measured .
그 결과를 하기 표 12에 나타내었다.The results are shown in Table 12 below.
(㎍/㎖/4,000,000 세포)Amount of melanin
(占 퐂 / ml / 4,000,000 cells)
상기 표 12에 나타낸 바와 같이, 파피루스 추출물의 건조물은 대조군에 비해서 B-16 흑색종 세포의 멜라닌 양을 억제할 수 있으며, 같은 양의 알부틴이나 코지산을 사용하는 경우보다 생성된 멜라닌의 양이 적음을 확인하였다. 아스코르빈산은 대조군과 거의 유사한 값을 나타냈다. 이를 통하여 파피루스 추출물이 우수한 미백 효능을 나타냄을 알 수 있다.As shown in Table 12 above, the dried product of papyrus extract can inhibit the melanin amount of B-16 melanoma cells as compared with the control, and the amount of melanin produced is smaller than that of arbutin or kojic acid of the same amount Respectively. Ascorbic acid showed similar values to the control group. Thus, it can be seen that the papyrus extract has excellent whitening effect.
실험예Experimental Example 4. 수분 흡습성 실험 4. Water Hygroscopicity Experiment
파피루스 추출물의 수분 흡습성을 실험하기 위하여, 인간으로부터 직접 채취하거나 또는 상업적으로 구입한 사람의 건조 표피 세포에 상기 실시예 2의 파피루스 추출물과 증류수를 각각 포화 흡수시키고 흡수된 물의 양을 측정한 후, 48시간 건조후의 질량변화를 측정하였다. 각각의 측정된 질량의 변화로부터 피부세포 단위 질량 당 흡수된 물의 양을 비교하였다. 이러한 실험은 표피세포에 흡습되는 물의 양을 비교하기 위한 방법으로 실제 사람의 피부에 있어서도 그 보습효과를 예상할 수 있는 한가지 방법으로 사용되고 있다.In order to test the water hygroscopicity of the papyrus extract, the papyrus extract and distilled water of Example 2 were saturated and absorbed and the amount of the absorbed water was measured, The mass change after drying was measured. The amount of water absorbed per skin cell unit mass was compared from each measured mass change. This experiment is a method for comparing the amount of water absorbed to the epidermal cells, and is used as one method of predicting the moisturizing effect even in the human skin.
구체적으로, 사람의 표피세포를 건조시켜 단위질량 당 함유된 수분의 양을 일정하게 만든 후, 각각의 표피세포 시료의 무게와 함유된 물의 양을 카이저 방법(Kaiser method)을 사용하여 측정하였다. 물의 함량이 측정된 표피세포를 파피루스 추출물(A), 정제수(B)에 각각 24시간 담지하여 포화 흡수시켜준 뒤, 세포 내에 물이 포화흡수된 표피세포를 꺼내서 무게를 달고, 일부를 채취하여 카이저 수분측정기로 함유되어 있는 단위질량 당 수분의 양을 측정하였다. 이후 다시 48시간 감압건조시키고 무게를 달고난 후, 일부를 채취하여 카이저 방법에 의해 수분량을 측정하여 함유되어 있는 단위질량 당 수분의 양을 측정하였다.Specifically, human epidermal cells were dried to make the amount of water contained per unit mass constant, and then the weight of each epidermal cell sample and the amount of water contained were measured using the Kaiser method. The epidermal cells in which the water content was measured were carried on the papyrus extract (A) and the purified water (B) for 24 hours, respectively, and saturated and absorbed. Then, the epidermal cells in which the water was saturated and absorbed were taken out and weighted, The amount of water per unit mass contained in the moisture meter was measured. Then, after drying for 48 hours under reduced pressure, the weight was added, and a part of the weight was taken. The amount of water per unit mass was measured by measuring the water content by the Kaiser method.
그 결과를 하기 표 13에 나타내었다.The results are shown in Table 13 below.
상기 표 13에 나타낸 바와 같이, 파피루스 추출물로 포화 흡습시킨 표피세포가 정제수에 의하여 포화흡습된 표피세포의 재건조과정에 있어 정제수보다 훨씬 많은 물을 함유하고 있음을 확인할 수 있었으며, 이로부터 파피루스 추출물의 우수한 피부 흡습성을 확인할 수 있었다. 이를 통하여 파피루스 추출물이 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in Table 13, it was confirmed that the epidermal cells saturated with papyrus extract contained much more water than the purified water in the re-drying process of the epidermal cells that were saturated and desorbed by the purified water. From this, Excellent skin hygroscopicity was confirmed. This shows that the papyrus extract shows excellent moisturizing effect.
실험예Experimental Example 5. 파피루스 추출물의 엘라스틴 생성 촉진 효과 5. Effect of papyrus extract on elastin production
파피루스 추출물의 엘라스틴 생성 촉진 효과를 알아보기 위하여, 사람으로부터 직접 채취하거나 상업적으로 구입한 사람의 섬유 아세포에 상기 실시예 2의 파피루스 추출물을 처리하여 엘라스타제(elastase) 활성의 억제효과를 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to examine the effect of accelerating elastin production of papyrus extract, the effect of inhibiting elastase activity was examined by treating the fibroblasts collected directly from humans or a commercially purchased person with the papyrus extract of Example 2 Experiments were performed.
먼저, 사람의 섬유 아세포를 배양용 플라스크에 넣고 약 70～80 % 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이후 파피루스 추출물을 1일간 처리한 후 세포배양액을 채취하여 상업적으로 이용가능한 엘라스틴 측정기구를 이용하여 엘라스틴 생성정도를 측정하였다("The synthesis and analytical use of a highly sensitive and covenient substrate of elastase", Biochemical Medicine, 11, pp350-357, 1974 및 "Elastase and neutral cathepsin production by human fibroblasts effect of culture conditions on synthesis and secretion", J. Invest Dermatol., 86, pp63-68, 1986 참조). 즉, 엘라스타제의 기질인 Suc-(Ala) 3 NA를 이용하여, NA가 분해되면서 생기는 색의 변화를 흡광도를 이용하여, 엘라스타제의 활성도를 측정하였다. 이때 파피루스 추출물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.First, human fibroblasts were placed in a culture flask and cultured until they were about 70-80% grown. Since then the papyrus extract one days treatment with the collected cell culture using the elastin measuring apparatus commercially available to measure the degree of generation elastin ( "The synthesis and analytical use of a highly sensitive and covenient substrate of elastase", Biochemical Medicine, 11, pp350-357, 1974 and "Elastase and neutral cathepsin production by human fibroblasts effect of culture conditions on synthesis and secretion", J. Invest Dermatol ., 86 , pp63-68, 1986). That is, the activity of elastase was measured using the absorbance of the color change caused by decomposition of NA by using Suc- (Ala) 3 NA as a substrate of elastase. At this time, a group not treated with papyrus extract was used as a control group.
그 결과를 하기 표 14에 나타내었다.The results are shown in Table 14 below.
상기 표 14에 나타낸 바와 같이, 파피루스 추출물은 대조군에 비하여 엘라스타제의 활성을 뛰어나게 억제함을 알 수 있으며, 활성 억제율은 파피루스 추출물의 농도가 증가할수록 높아짐을 확인하였다. 이를 통하여 파피루스 추출물이 우수한 노화 방지 및 탄력 증진 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in Table 14, the papyrus extract significantly inhibited the activity of elastase as compared with the control group, and the activity inhibition rate was found to be higher as the concentration of papyrus extract increased. Thus, it can be seen that the papyrus extract exhibits excellent anti-aging and elasticity-enhancing effects.
실험예Experimental Example 6. 파피루스 추출물의 6. Papyrus extract 콜라젠Collagen 생성 촉진 효과 Promoting effect
파피루스 추출물의 콜라젠 생성 촉진 효과를 알아보기 위하여, 사람으로부터 직접 채취하거나 상업적으로 구입한 사람의 섬유아세포에 상기 실시예2의 파피루스 추출물을 처리하여 콜라게나제 활성 억제효과를 하기와 같은 방법으로 측정하였다.In order to examine the effect of promoting collagen production of papyrus extract, the effect of inhibiting collagenase activity was measured by the following method by treating the fibroblasts collected directly from humans or commercially purchased human papyrus extracts of Example 2 .
먼저, 사람의 섬유아세포를 배양용 플라스크에 넣고 약 70～80 % 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이후 파피루스 추출물을 1일간 처리한 후 세포배양액을 채취하여 상업적으로 이용 가능한 콜라게나제 활성측정기구를 이용하여 콜라젠 생성 정도를 측정하였다("An assay of collagenase activity using enzyme-linked immunosorbent assay for mammalian collagenase", Anal . Biochem ., 116(1), pp172-7, 1987 참조). 즉, 콜라게나제에 대한 항체를 이용하여, 사람(Human)에서 유래한 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)을 정량하였다. 이때, 파피루스 추출물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.First, human fibroblasts were placed in a culture flask and cultured until they were about 70-80% grown. After the papyrus extract was treated for 1 day, the cell culture medium was collected and the degree of collagen production was measured using a commercially available collagenase activity measuring apparatus ("An assay for collagenase activity using enzyme-linked immunosorbent assay for mammalian collagenase" , Anal . Biochem . , 116 (1) , pp 172-7, 1987). Namely, MMP-1 (Matrix Metalloproteinase-1) derived from human was quantified using an antibody against collagenase. At this time, a group not treated with papyrus extract was used as a control group.
그 결과를 하기 표 15에 나타내었다.The results are shown in Table 15 below.
상기 표 15에 나타낸 바와 같이, 파피루스 추출물은 대조군에 비하여 콜라게나제의 활성을 뛰어나게 억제함을 알 수 있으며, 활성 억제율은 파피루스 추출물의 농도가 증가할수록 높아짐을 확인하였다. 이를 통하여 파피루스 추출물이 우수한 탄력증진 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in Table 15, the papyrus extract significantly inhibited the activity of collagenase as compared with the control group, and the activity inhibition rate was found to be higher as the concentration of papyrus extract increased. It can be seen that the papyrus extract has excellent elasticity enhancement effect.
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