KR101103958B1 - External compositions for skin care containing extract of Scirpi Rhizoma - Google Patents
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Abstract
본 발명은 삼릉 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 상기 삼릉 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 피부 자극이 없으면서 티로시나제 활성을 억제시키고, 멜라닌 생성을 저해하며, 보습 효과가 우수하고, 엘라스틴 및 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 있어, 피부 미백, 보습, 노화방지 및 탄력증진에 뛰어난 효과를 나타낸다. 따라서, 본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 미백용, 보습용, 노화방지용 및 탄력증진용으로서, 화장료 조성물 또는 약학 조성물로 사용할 수 있다.
The present invention relates to an external composition for skin containing Samreung extract. The external composition for skin containing the Samreung extract of the present invention has no skin irritation, inhibits tyrosinase activity, inhibits melanin production, has an excellent moisturizing effect, promotes elastin and collagen production, skin whitening, and moisturizing. Excellent effect on anti-aging and elasticity. Therefore, the external composition for skin of the present invention can be used as a cosmetic composition or a pharmaceutical composition for skin whitening, moisturizing, anti-aging and elasticity.
삼릉, 피부 자극, 티로시나제, 멜라닌, 엘라스틴, 콜라겐, 미백, 보습, 노화방지, 탄력증진, 화장료, 약학, 조성물 Samneung, Skin irritation, Tyrosinase, Melanin, Elastin, Collagen, Whitening, Moisturizing, Anti-aging, Elasticity, Cosmetics, Pharmaceuticals, Composition
Description
본 발명은 삼릉 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an external composition for skin containing Samreung extract.
피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 제기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주는 기능을 가지고 있다. 그러나, 나이가 들어감에 따라 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하며 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되고, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선에 자외선 함량이 증가하게 되고 환경오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 생기는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스 등은 피부의 정상기능을 저하시키고 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등이 생성되며, 피부의 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시키게 된다. Skin is the body's primary protective film that protects internal organs from changes in temperature and humidity, and from stimuli from the external environment such as ultraviolet rays and pollutants. However, with age, the secretion of various hormones that regulate metabolism decreases internally, the function of immune cells and the activity of cells decreases, and the ultraviolet content of the sun increases due to the destruction of the ozone layer. As environmental pollution becomes more severe, excessive physical and chemical irritation and stress caused by the increase of free radicals and active harmful oxygen decrease the normal function of the skin, produce melanin, blemishes, freckles, etc. Promotes damage to the skin.
이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여, 종래 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부노화 및 멜라닌의 침착을 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔었다. In order to prevent such a phenomenon and maintain a healthier and more beautiful skin, by using physiologically active substances obtained from various animals, plants, microorganisms, etc. in the past, it is possible to maintain the inherent function of the skin and to activate skin cells by activating skin cells. Efforts have been made to effectively inhibit the deposition of melanin.
한편, 자외선에의 노출이나 여타 스트레스에 의해서 젊은 여성의 경우 기미, 주근깨 등의 멜라닌 침착 현상이 발생하며, 많은 피부트러블의 하나가 되어 왔다. 이러한 작용을 억제하기 위하여 티로시나아제의 활성억제를 위한 약물들이 합성되거나, 천연물로부터 추출되어 왔다. Meanwhile, melanin deposition such as blemishes and freckles occurs in young women due to exposure to ultraviolet rays and other stresses, and has been one of many skin problems. In order to inhibit this action, drugs for inhibiting tyrosinase activity have been synthesized or extracted from natural products.
그러나, 아직까지 안전하고 부작용이 없으면서 유효적인 효과를 나타내는 화장품 원료는 그리 많지 않은 실정이다.However, there are not many cosmetic raw materials that have a safe and effective side effect and yet have no effective effects.
삼릉(Scirpi Rhizoma)은 혈액순환에 도움을 주고 피부에 생기를 부여하여 각종 염증을 삭히고 예방해주고, 노인성질환과 부인과 질병에 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 이러한 내용이 일본과 중국 등에서도 구전되어오고 있다. 그러나, 삼릉 추출물은 장기보존이 어려워 피부 외용제 조성물로서 화장료 조성물이나 약학 조성물에 사용이 불가능한 단점이 있다.
Samreung ( Scirpi Rhizoma ) is known to be effective in circulating and preventing various inflammations by helping blood circulation and vitalizing the skin, and is effective in senile diseases and gynecological diseases. . However, Samreung extract is difficult to long-term preservation has a disadvantage that it can not be used in cosmetic compositions or pharmaceutical compositions as an external composition for skin.
이에, 본 발명자들은 피부 탄력 효능을 향상시키면서도 피부에 안전하고 미백 효능을 갖는 새로운 물질을 제공하고자 검색한 결과, 이미 안전성이 간접적으로 입증되어있다 할 수 있는 한약의 재료가 되는 생약재 중 삼릉 추출물이 피부 자극이 없으며, 매우 우수한 티로시나제 활성 억제 및 멜라닌 생성 저해 효과, 뛰어난 보습 효과를 나타냄과 함께 엘라스틴 및 콜라겐 생성을 억제시킴을 발견하고, 삼릉 추출물의 장기 보존 방법을 연구한 결과, 본 발명을 완성하게 되었다. Therefore, the present inventors have searched to provide a new substance having a safe and whitening effect on the skin while improving the skin elasticity efficacy, and found that Samreung extract among the herbal medicines, which is a material of herbal medicine, has already been proved to be indirectly safe. It was found that it has no irritation, shows very good tyrosinase activity inhibition, melanin production inhibitory effect, excellent moisturizing effect, inhibits elastin and collagen production, and studies the long-term preservation method of Samreung extract. .
따라서, 본 발명의 목적은 상기와 같은 효과를 갖는 삼릉 추출물을 함유하여 우수한 피부 미백 효과, 보습 효과, 노화방지 효과 및 탄력증진 효과를 나타내는 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다. Therefore, it is an object of the present invention to provide a skin external preparation composition containing the Samreung extract having the above-described effect, showing an excellent skin whitening effect, moisturizing effect, anti-aging effect and elasticity enhancing effect.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 삼릉 추출물을 가능한 적은 처리과정을 거쳐 장기보존이 가능한 방법을 제공하고, 또한, 이를 사용한 화장료 조성물 또는 약학 조성물을 제공하는 것이다.
Still another object of the present invention is to provide a method capable of long-term storage of the Samreung extract through as few treatments as possible, and to provide a cosmetic composition or a pharmaceutical composition using the same.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 삼릉 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.In order to achieve the above object, the external preparation composition for skin according to the present invention is characterized in that it contains Samreung extract.
상기 삼릉은 경삼릉(京三稜), 형삼릉(荊三稜), 석삼릉(石三稜), 흑삼릉(黑三稜), 홍포근(紅蒲根), 광삼릉(光三稜) 및 매자기(荊三稜)로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상, 바람직하게는 매자기임을 특징으로 한다.The three tombs are Gyeongsamreung (京 三稜), Hyeongsamreung (荊 三稜), Seoksamreung (石 三稜), Heuksamneung (黑 三稜), Hongpo-gun (紅 蒲 根), Gwangsamneung (光 三稜) and At least one selected from the group consisting of barberry, it is characterized in that the barberry.
또한, 상기 삼릉의 부위는 잎, 씨앗, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상일 수 있다.In addition, the portion of the Samreung may be one or more selected from the group consisting of leaves, seeds, roots and stems.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 삼릉 추출물을 조성물 총 중량에 대해 0.01~99.5중량%, 바람직하게는 0.01~60.0중량%, 더욱 바람직하게는 1.0~50.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 한다. 이는 상기 추출물의 양이 99.5중량% 초과일 경우, 제형 안정성에 문제가 발생할 수 있고, 0.01 미만일 경우 그 효과가 미미하기 때문이다. 상기 관점에서 볼 때 0.01~60.0중량% 함유하는 것이 바람직하며, 1.0~50.0 중량% 함유하는 것이 더욱 바람직하다.The external preparation composition for skin of the present invention is characterized by containing the Samreung extract 0.01 to 99.5% by weight, preferably 0.01 to 60.0% by weight, more preferably 1.0 to 50.0% by weight relative to the total weight of the composition. This is because when the amount of the extract is more than 99.5% by weight, problems in formulation stability may occur, and when the amount is less than 0.01, the effect is insignificant. It is preferable to contain 0.01-60.0 weight% from the said viewpoint, and it is more preferable to contain 1.0-50.0 weight%.
또한, 상기 삼릉 추출물은 삼릉으로부터 추출물을 얻은 후 상기 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과한 후, 무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합함으로써 장기보존이 가능하도록 후처리된 추출물인 것을 특징한다.In addition, the Samreung extract is obtained by extracting from the Samreung and then the extract is filtered using a filter membrane having a pore size (pore size) of 0.05 ~ 0.2 μm, anhydrous ethanol at least 7% (w) based on the total composition 100 / w) is characterized in that the extract is post-treated to enable long-term preservation by mixing to be.
본 발명의 상기 삼릉 추출물은 건조농축물 또는 건조된 추출물을 사용할 수 있다.The Samreung extract of the present invention may use a dry concentrate or dried extract.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 미백용 조성물임을 특징으로 한다.The external preparation composition for skin of the present invention is characterized in that the composition for skin whitening.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 보습용 조성물임을 특징으로 한다.The external preparation composition for skin of the present invention is characterized in that the composition for moisturizing the skin.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 노화방지용 조성물임을 특징으로 한다.The external preparation composition for skin of the present invention is characterized in that the composition for preventing skin aging.
본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 탄력증진용 조성물임을 특징으로 한다.The external preparation composition for skin of the present invention is characterized in that the composition for promoting skin elasticity.
또한, 본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤과 같은 피부 점착타입의 화장료, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션과 같은 제형을 갖는 화장료, 샴푸, 린스, 바디크렌저, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징크림, 클렌징 워터, 비누와 같은 세정용 화장료 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있으며, 또한, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 분무제와 같은 경피투여형 제형을 갖는 약학 조성물일 수 있다. In addition, the topical skin composition of the present invention is not particularly limited in the formulation, for example, cosmetics of the skin adhesive type such as emulsion, lotion, cream, lotion, essence, pack, gel, powder, lipstick, makeup Cosmetic compositions having formulations such as cup bases, foundations, shampoos, rinses, body cleansers, essences, cleansing foams, cleansing creams, cleansing water, soaps, and cosmetic compositions with cleansing cosmetic formulations, such as powders, granules, Oral dosage forms such as tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, and the like, and transdermal dosage forms such as lotions, ointments, gels, creams, patches, and sprays.
또한, 각 제형의 조성물에 있어서, 상기한 삼릉 추출물 이외에 다른 성분들은 기타 조성물의 제형 또는 사용목적 등에 따라 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.In addition, in the composition of each formulation, other components in addition to the above Samreung extract can be selected and blended without difficulty according to the formulation or purpose of use of the other composition.
본 발명에 따른 상기 삼릉 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물의 제조방법은, 삼릉으로부터 추출물을 얻는 제 1 단계; 삼릉 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과하는 제 2단계; 무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합하는 후처리를 하는 제 3 단계; 및 상기 제 3 단계에서 후처리된 삼릉 추출물을 제형화하는 제 4 단계를 포함하여 구성되는 것을 특징으로 한다.Method for producing a skin external preparation composition containing the Samreung extract according to the present invention, the first step of obtaining an extract from Samreung; A second step of filtering the Samreung extract using a filtration membrane having a pore size of 0.05-0.2 μm; A third step of post-treatment of mixing anhydrous ethanol to at least 7% (w / w) based on the total composition 100; And a fourth step of formulating the post-treatment Samreung extract in the third step.
상기 여과는 감압여과 방식 또는 가압여과 방식을 이용하는 것을 특징으로 한다.The filtration is characterized in that using a reduced pressure filtration or pressure filtration.
상기 감압여과는 진공펌프를 이용하고, 가압여과는 페리스테틱 펌프(peristaltic pump)를 이용하는 것을 특징으로 한다.The reduced pressure filtration uses a vacuum pump, and the pressure filtration uses a peristaltic pump.
상기 제 1 단계는 초임계추출조를 사용하여 초임계 추출하는 것을 특징으로 한다. The first step is characterized in that the supercritical extraction using a supercritical extraction tank.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
삼릉(Scirpi Rhizoma)은 삼릉과에 속한 다년생 초본인 흑삼릉과 사초과에 속 한 다년생 초본인 매자기의 건조한 괴경으로 형태는 원추형으로 약간 납작하고 길이 2-6 ㎝, 지름 2-4 ㎝이다. 표면은 황백색 또는 회황색으로 칼로 깎은 자국이 있으며 체는 무겁고 질은 견고하고 단단하다. 상기 생약은 한방에서는 오랫동안 항암, 항염, 소화불량을 해소하기 위해 처방해왔다.Samrung (Scirpi Rhizoma) is a perennial herbaceous perennial herbaceous and perennial herbaceous perennial herbaceous tuber, conical, slightly flat, 2-6 ㎝ long, 2-4 ㎝ in diameter. The surface is yellowish white or grayish yellow with knife cuts, the sieve is heavy and the quality is solid and hard. The herbal medicine has long been prescribed in herbal medicine to relieve anti-cancer, anti-inflammatory, indigestion.
본 발명자들은 이러한 약리적 효능을 지닌 삼릉 추출물이 티로시나제 활성 억제능, 멜라닌 생성 저해능을 가짐과 동시에 수분의 흡습성을 증가시키며 엘라스틴 생성 및 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 있음을 발견하였으며, 이들 생약재 추출물은 식물체로부터 유효성분을 추출하기 위하여 통상적으로 사용되고 당업자에게 주지된 방법에 의해 제조된 것이다.The present inventors have found that Samreung extract having such pharmacological effects has an effect of inhibiting tyrosinase activity and inhibiting melanin production, increasing moisture hygroscopicity and promoting elastin production and collagen production, and these herbal extracts are effective from plants. It is conventionally used to extract the ingredients and prepared by methods well known to those skilled in the art.
또한, 삼릉 추출물은 기존에는 마땅한 변색, 변취 방지 방법이 없었으나, 본 발명에서 개발된 새로운 처리방법을 이용하여 채취직후 방부, 항산화 처리를 한다. In addition, the Samreung extract was previously not a proper method of preventing discoloration and odor, but by using a new treatment method developed in the present invention, antiseptic, anti-oxidation treatment immediately after collection.
삼릉은 국내외에서 2년 이상 성장한 삼릉의 잎, 씨앗, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 부위를 채취하여 얻을 수 있다. Samreung can be obtained by harvesting at least one selected from the group consisting of leaves, seeds, roots and stems of Samreung, which has grown more than two years at home and abroad.
상기 삼릉 추출물을 수득하기 위하여, 예를 들면, 삼릉을 건조하여 분쇄한 다음, 삼릉 분쇄물에 물, 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르 또는 이들의 혼합물을 분쇄물 건조중량에 대하여 일정량을 가한 다음, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 50 내지 100 ℃ 온도로 5 내지 24시간동안 가열하여 추출하거나; 상기 삼릉 분쇄물에 물, 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르 또는 이들의 혼합물을 분쇄물 건조중량에 대하여 일정량을 가한 다음, 4 내지 25 ℃ 온도로 3 내지 20일간 침적시켜 삼릉 추출물을 수득하거나; 무수 또는 함수 에탄올, 또는 메탄올 추출물에 적당한 양의 물을 가한 뒤 생기는 침전물을 여과하여 제거하고, 여기에 에틸아세테이트, 부탄올 또는 디에틸에테르를 가하여 잘 섞은 다음 방치하여 층을 분리시킨 뒤 상층을 분리한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 삼릉 추출물을 수득할 수 있다. To obtain the Samreung extract, for example, Samneung is dried and pulverized, and then water, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 3 carbon atoms, acetone, ethyl acetate or diethyl ether or a mixture thereof is added to the Samreung pulverized product. Adding a predetermined amount to the dry weight of the pulverized product, and then extracting by heating at an extractor with a cooling capacitor at a temperature of 50 to 100 ° C. for 5 to 24 hours; Water, anhydrous or hydrous lower alcohol, acetone, ethyl acetate or diethyl ether or mixtures thereof are added to the Samreung pulverized product with respect to the dry weight of the pulverized product, and then 3 to 3 ° C. at a temperature of 4 to 25 ° C. Immersion for 20 days to obtain Samreung extract; After adding an appropriate amount of water to anhydrous or hydrous ethanol or methanol extract, the resulting precipitate is filtered off, and then added with ethyl acetate, butanol or diethyl ether, mixed well and left to separate the layers, and the upper layer is separated. After that, the Samreung extract can be obtained in the extractor to which the cooling capacitor is attached.
또한, 건조한 삼릉 일정량을 100~500 ml, 바람직하게는 100 ml의 초임계 추출조에 넣고 추출조를 밀봉한 다음, 추출조의 온도를 30~80 ℃, 바람직하게는 40 ℃까지 승온하고 고압 액체 펌프를 장착하여 용매로 물, 에틸알콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군중에서 선택된 어느 하나 이상, 바람직하게는 부틸렌글리콜을 일정량 투입하면서 동시에 이산화탄소를 고압용 기체 펌프를 이용하여 투입하여 압력을 200~400기압, 바람직하게는 300기압까지 올린 후, 추출조의 출구에 부착된 압력조절 밸브를 이용하여 추출물을 방출시키면서 압력과 온도를 약 300기압, 약 40℃로 일정하게 유지하고, 상기 용매를 20~50분, 바람직하게는 30분에 걸쳐 모두 투입하고 고압 액체 펌프의 가동을 중단하고 고압용 기체 펌프를 이용하여 이산화탄소로만 1~3시간, 바람직하게는 2시간 추출하여 추출조 내부에 남아있는 상기 용매를 모두 배출하여 추출을 종료하고, 상기에서 수득한 삼릉 추출액을 원심분리하고 여과하여, 본 발명의 삼릉추출물을 수득할 수 있다. In addition, a certain amount of dry Samreung is placed in a supercritical extraction tank of 100 to 500 ml, preferably 100 ml, and the extraction tank is sealed. Then, the temperature of the extraction tank is raised to 30 to 80 ° C, preferably 40 ° C, and the high pressure liquid pump is At least one selected from the group consisting of water, ethyl alcohol, propylene glycol and butylene glycol as a solvent, preferably butylene glycol in a predetermined amount and at the same time the carbon dioxide is added by using a high pressure gas pump to pressure 200 ~ After raising the pressure to 400 atm, preferably 300 atm, the pressure and the temperature are kept constant at about 300 atm and about 40 ° C. while releasing the extract using a pressure regulating valve attached to the outlet of the extraction tank. 50 minutes, preferably 30 minutes, all of the high-pressure liquid pump is shut down, using a high-pressure gas pump for 1 to 3 hours, preferably It may be extracted for 2 hours to end the extraction extraction tank discharge all the solvent remain inside and centrifuged a samreung extract obtained in the above and filtered to give, to give the samreung extract of the present invention.
상기의 방법으로 수득된 삼릉 추출물을 저장용기에 보관한다. 이때, 저장된 삼릉 추출물의 방부, 항산화를 위한 처리방법은 수득직후의 삼릉 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여, 진공펌프를 이 용한 감압여과 방식 또는 페리스테틱 펌프(peristaltic pump)를 이용한 가압여과 방식으로 여과시켜 삼릉 추출물에 존재하여 장래 균, 미생물 및 미생물의 영양분으로 이용되거나, 장기 보존시 침전, 변성의 가능성이 있는 분자량이 큰 단백질 등을 제거한 후, 무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합하여 효소의 활성을 억제하며, 처리 직후 바로 질소 분위기 하에서 밀봉보관하여 외부와 차단시켜 외부의 균이나 미생물의 침입을 방지하도록 처리한 후 실험에 사용한다. Samreung extract obtained by the above method is stored in a storage container. At this time, the treatment method for antiseptic and antioxidant of the stored Samreung extract is a reduced pressure filtration method or a peristetic method using a vacuum pump using a filter membrane having a pore size of 0.05 to 0.2 μm. Filtered by pressure filtration using a peristaltic pump, which is present in Samreung extracts to be used as nutrients for future bacteria, microorganisms and microorganisms, or to remove proteins with high molecular weight that may be precipitated or denatured during long-term storage. To suppress the activity of the enzyme by mixing ethanol to at least 7% (w / w) based on the total composition 100, and sealed immediately in a nitrogen atmosphere to block the outside to prevent the invasion of external bacteria or microorganisms. After treatment, it is used for the experiment.
본 발명에 따른 추출물은, 피부 외용제 조성물로써 추출물, 추출액, 농축물, 추출물의 건조분말, 추출액의 건조분말, 농축물의 건조분말 등을 그대로 도포하는 것이 적합하나, 통상의 외용의 제제, 화장료 제형 또는 약학 제형으로 제형화 할 수 있다. The extract according to the present invention is suitable for applying the extract, extract, concentrate, dry powder of the extract, dry powder of the extract, dry powder of the concentrate, etc. as the external composition for the skin, but for general external preparations, cosmetic formulations or It may be formulated into a pharmaceutical formulation.
본 발명에 따른 삼릉 추출물을 함유하는 화장료 제형을 갖는 화장료 조성물은, 상기한 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유하는 것도 무방하다. Cosmetic composition having a cosmetic formulation containing the Samreung extract according to the present invention, in addition to the above-described extract, other components that can give a synergistic effect to the main effect, preferably within the range that does not impair the main effect of the present invention. It may also contain such.
또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.In addition, the cosmetic composition may take the form of a solution, an emulsion, a viscous mixture, and the like.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤과 같은 피부 점착타입의 화장료, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션과 같은 제형을 갖는 화장료, 샴 푸, 린스, 바디크렌저, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징크림, 클렌징 워터, 비누와 같은 세정 화장료의 제형을 가질 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention is not particularly limited in the formulation, but for example, skin adhesive type cosmetics such as latex, lotion, cream, lotion, essence, pack, gel, powder, lipstick, makeup base, foundation and It may have a formulation of a cleaning cosmetic such as a cosmetic, shampoo, rinse, body cleanser, essence, cleansing foam, cleansing cream, cleansing water, soap having the same formulation.
각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기의 추출물 이외에 다른 성분들은 기타 화장료의 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의선정하여 배합할 수 있다.In the cosmetic composition of each formulation, other components in addition to the above extract may be appropriately selected by those skilled in the art without difficulty depending on the formulation or purpose of use of other cosmetics.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함할 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention may include a composition selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, sphingolipids and seaweed extract.
본 발명의 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.In addition to the said essential component, you may mix | blend with the cosmetic composition of this invention the other component normally mix | blended with cosmetics as needed.
이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.Other components that may be added include fats and oils, moisturizers, emollients, surfactants, organic and inorganic pigments, organic powders, ultraviolet absorbers, preservatives, fungicides, antioxidants, plant extracts, pH adjusters, alcohols, pigments, flavorings, Blood circulation accelerators, cooling agents, restriction agents, purified water and the like.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.01∼5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01∼3 중량%로 배합된다.Moreover, the compounding component which may be added other than this is not limited to this, Moreover, Although all said components can be mix | blended within the range which does not impair the objective and effect of this invention, Preferably it is 0.01-5 weight% with respect to a total weight, More preferably, it is mix | blended in 0.01 to 3 weight%.
본 발명의 삼릉 추출물을 함유하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. Pharmaceutical compositions containing Samreung extract of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.
본 발명의 추출물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. Pharmaceutical dosage forms of the extracts of the present invention may be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, or may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds, as well as in any suitable collection.
본 발명에 따른 추출물을 포함하는 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 분무제와 같은 경피투여형 제형을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용될 수 있다. Pharmaceutical compositions comprising extracts according to the present invention may be prepared in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, lotions, ointments, gels, creams, patches, It can be used in any form suitable for pharmaceutical formulations, including transdermal formulations such as nebulizers.
본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 대상자의 연령, 성별, 체중, 증상, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 약학 조성물을 1일 0.001~ 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 할 수도 있고, 수회 나누어 할 수도 있다. 또한, 그 투여량은 연령, 성별, 체중, 질병의 정도, 투여경로 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Preferred dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention vary depending on the subject's age, sex, weight, symptoms, extent of disease, drug form, route of administration and duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, it is preferable to administer the pharmaceutical composition of the present invention at 0.001 to 100 mg / kg per day. Administration may be once a day or may be divided several times. In addition, the dosage may be increased or decreased depending on age, sex, weight, degree of disease, route of administration, and the like. Thus, the dosage amounts are not intended to limit the scope of the invention in any manner.
본 발명의 추출물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 비경구, 경구 등의 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. The extract of the present invention can be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, etc. by various routes, such as parenteral, oral, and all modes of administration can be expected, for example, oral, rectal or intravenous. , Intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Experimental Examples, but the present invention is not limited only to these examples.
실시예 1. 삼릉 추출물의 제조Example 1. Preparation of Samreung Extract
삼릉을 채취하고 건조한 후 분쇄한 다음, 삼릉 건조분쇄물 1 g에 물 100 ㎖를 가한 다음, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 60℃ 온도로 8시간동안 가열하여 삼릉 추출물을 수득하였다.
Samreung was collected, dried and pulverized. Then, 100 ml of water was added to 1 g of the Samreung dry pulverized product, which was then heated at 60 ° C. for 8 hours in an extractor with a cooling capacitor to obtain the Samreung extract.
실시예 2. 삼릉 추출물의 제조Example 2. Preparation of Samreung Extract
건조한 삼릉 5 g을 100 ㎖의 초임계 추출조에 넣고 추출조를 밀봉한 다음, 추출조의 온도를 40 ℃까지 승온하고 고압 액체 펌프를 장착하여 부틸렌글리콜을 투입하면서 동시에 이산화탄소를 고압용 기체 펌프를 이용하여 투입하여 압력을 300 기압까지 올린 후, 추출조의 출구에 부착된 압력조절 밸브를 이용하여 추출물을 방출시키면서 압력과 온도를 300기압, 40 ℃로 일정하게 유지하면서, 부틸렌글리콜을 30분에 걸쳐 12.5 g을 모두 투입하고 고압 액체 펌프의 가동을 중단하고 고압용 기체 펌프를 이용하여 이산화탄소로만 2시간 추출하여 추출조 내부에 남아있는 부틸렌글리콜을 모두 배출하여 추출을 종료하고, 얻어진 추출액을 원심분리하고 여과하여 삼릉 추출물을 수득하였다.
5 g of dry Samreung was placed in a 100 ml supercritical extraction tank, and the extraction tank was sealed. Then, the temperature of the extraction tank was raised to 40 ° C., and a high pressure liquid pump was installed to inject butylene glycol. The pressure was raised to 300 atm, and the butylene glycol was maintained for 30 minutes while maintaining the pressure and temperature at 300 at 40 ° C. while releasing the extract using a pressure control valve attached to the outlet of the extraction tank. 12.5 g of the mixture was put in, and the high pressure liquid pump was stopped and extracted with carbon dioxide for 2 hours using a high pressure gas pump to discharge all butylene glycol remaining in the extraction tank to terminate the extraction, and the obtained extract was centrifuged. And filtered to obtain the Samreung extract.
제제예Formulation example
제제예 1. 유연화장수 Formulation Example 1 Softener
낫토검
셀룰로오스검
에탄올
폴리옥시에칠렌경화피마자유
초산토코페롤
방부제
색소
실시예 2의 삼릉 추출물
정제수Betaine
Natto gum
Cellulose gum
ethanol
Polyoxyethylene Cured Castor Oil
Tocopherol Acetate
antiseptic
Pigment
Samreung Extract of Example 2
Purified water
3.0
0.08
5.0
0.5
0.2
5.0
미량
적량
100 까지3.0
3.0
0.08
5.0
0.5
0.2
5.0
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 2. 영양화장수 Formulation Example 2 Nutrients
세토스테아릴알콜
친유형모노스테아린산 스테아레이트
스쿠알란
폴리솔베이트 60
솔비탄세스퀴올리에이트
글리세린
트리에탄올아민
카르복시비닐폴리머
방부제
색소
향
실시예 2의 삼릉 추출물
정제수3,7 hexanoate
Cetostearyl alcohol
Lipophilic Monostearic Acid Stearate
Squalane
Polysorbate 60
Solbitan Sesquioleate
glycerin
Triethanolamine
Carboxy Vinyl Polymer
antiseptic
Pigment
incense
Samreung Extract of Example 2
Purified water
1.0
0.8
2.0
1.5
0.5
8.0
0.2
0.2
미량
미량
미량
적량
100까지5.0
1.0
0.8
2.0
1.5
0.5
8.0
0.2
0.2
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 3. 영양크림Formulation Example 3 Nutrition Cream
글리세릴스테아레이트
세토스테아레이트
폴리솔베이트 60
솔비탄세스퀴올리에이트
세칠에첼헥사노에이트
스쿠알란
유동파라핀
글리세린
프로필렌글리콜
식물 추출물
방부제
색소
향
실시예 2의 삼릉 추출물
정제수Beeswax
Glyceryl Stearate
Cetostearate
Polysorbate 60
Solbitan Sesquioleate
Secchicelhexanoate
Squalane
Liquid paraffin
glycerin
Propylene glycol
Plant extracts
antiseptic
Pigment
incense
Samreung Extract of Example 2
Purified water
2.0
2.5
1.5
0.5
5.0
5.0
8.0
8.0
4.0
5.0
미량
미량
미량
적량
100까지1.0
2.0
2.5
1.5
0.5
5.0
5.0
8.0
8.0
4.0
5.0
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 4. 에센스Formulation Example 4 Essence
프로필렌글리콜
셀룰로오스검
낫토검
히아루론산추출물
아미노프로판술포닉액시드
카르복시비닐폴리머
에탄올
폴리옥시에칠렌경화피마자유
트리에탄올아민
방부제
향
색소
실시예 2의 삼릉 추출물
정제수glycerin
Propylene glycol
Cellulose gum
Natto gum
Hyaluronic Acid Extract
Aminopropanesulphonic acid
Carboxy Vinyl Polymer
ethanol
Polyoxyethylene Cured Castor Oil
Triethanolamine
antiseptic
incense
Pigment
Samreung Extract of Example 2
Purified water
5.0
0.05
5.0
5.0
2.0
0.5
5.0
0.5
0.5
미량
미량
미량
적량
100까지15.0
5.0
0.05
5.0
5.0
2.0
0.5
5.0
0.5
0.5
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
제제예 5. 로션 Formulation Example 5 Lotion
폴리솔베이트 60
솔비탄세스퀴올리에이트
세칠에칠헥사노에이트
스쿠알란
라놀린
글리세린
카르복시비닐폴리머
가수분해콜라겐
트리에탄올아민
방부제
향료
색소
실시예 2의 삼릉 추출물
정제수Glyceryl Stearate
Polysorbate 60
Solbitan Sesquioleate
3,7 hexanoate
Squalane
lanolin
glycerin
Carboxy Vinyl Polymer
Hydrolyzed Collagen
Triethanolamine
antiseptic
Spices
Pigment
Samreung Extract of Example 2
Purified water
1.5
0.5
3.0
3.0
2.0
8.0
0.5
1.0
0.5
미량
미량
미량
적량
100까지1.5
1.5
0.5
3.0
3.0
2.0
8.0
0.5
1.0
0.5
a very small amount
a very small amount
a very small amount
Suitable amount
Up to 100
실험예 6. 연고Experimental Example 6. Ointment
액상 파라핀
솔비탄세스퀴올리에이트
옥틸도데세스-25
세칠에칠헥사노에이트
스쿠알란
살리실산
글리세린
솔비톨
실시예 2의 삼릉 추출물
정제수Caprine / Capryl Triglycerides
Liquid paraffin
Solbitan Sesquioleate
Octyldodeceth-25
3,7 hexanoate
Squalane
Salicylic acid
glycerin
Sorbitol
Samreung Extract of Example 2
Purified water
10.0
6.0
9.0
10.0
1.0
1.0
15.0
10.0
적량
100까지10.0
10.0
6.0
9.0
10.0
1.0
1.0
15.0
10.0
Suitable amount
Up to 100
제제예 7. 분무제Formulation Example 7 Spray
폴리비닐피롤리돈/비닐아세테이트
글리세린
폴리아크릴레이트
실시예 2의 삼릉 추출물
정제수Triethanolamine
Polyvinylpyrrolidone / Vinyl Acetate
glycerin
Polyacrylate
Samreung Extract of Example 2
Purified water
3.0
5.0
0.2
적량
100까지0.2
3.0
5.0
0.2
Suitable amount
Up to 100
상기 처방을 펌프용기에 담아 사용한다.
The prescription is used in a pump container.
실험예 1. 방부처리 실험Experimental Example 1. Antiseptic Treatment Experiment
삼릉 추출물의 가장 효과적인 방부처리 방법을 알아보기 위하여, 상기 실시예 2에서 수득한 삼릉 추출물을 0.2 미크론(micron) 기공 크기를 가지는 여과막을 통과시킨 후, 이미다졸리디닐 유레아 0.3 %, 메틸파라벤(10 % 에탄올 용액 내) 0.3 %, 프로필파라벤(10 % 에탄올 용액 내) 0.3 %, 메틸파라벤/프로필파라벤(10 % 에탄올 용액 내) 0.2/0.1 %, 무수 에탄올 2.0 %, 5.0 %, 7.0 %, 10.0 %, 25.0 %를 각각처리하고, 각각, 실온, 45 ℃에서 보관하고, 1일, 7일, 30일의 시간경과에 따른 방부 효과를 확인하였고, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.
In order to find out the most effective antiseptic treatment method of the Samreung extract, the Samreung extract obtained in Example 2 was passed through a filter membrane having a pore size of 0.2 micron, and then imidazolidinyl urea 0.3%, methylparaben (10 % In ethanol solution) 0.3%, propylparaben (in 10% ethanol solution) 0.3%, methylparaben / propylparaben (in 10% ethanol solution) 0.2 / 0.1%, anhydrous ethanol 2.0%, 5.0%, 7.0%, 10.0% , 25.0% were treated, respectively, and stored at room temperature, 45 ℃, respectively, and confirmed the preservative effect over time of 1 day, 7 days, 30 days, the results are shown in Table 8 below.
Preservative Treatment
(% w/w)content
(% w / w)
유레아Imidazolidinyl
Urea
Ｏ: 방부 유지, ×: 방부 효과가 없어서 균류 증식
O: antiseptic oil, x: proliferation of fungus due to no antiseptic effect
그 결과, 상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 무수 에탄올을 7 %(w/w) 함유한 경우 30 일까지 방부 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다.
As a result, as shown in Table 8, it was confirmed that when containing anhydrous ethanol 7% (w / w) can exhibit an antiseptic effect up to 30 days.
실험예 2. 삼릉 추출물의 피부자극도 실험Experimental Example 2. Skin irritation test of Samreung extract
피부 외용제 조성물로서 사용시 삼릉 추출물의 피부자극도를 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to determine the skin irritation degree of Samreung extract when used as an external composition for skin, the following experiment was performed.
먼저, 건강한 남녀 실험자 20명의 팔 하박부에 상기 제제예 1 내지 5의 처방으로 제조된 시료를 폐쇄 첩포 시험 방법에 따라, 1일 1회씩 도포한 후 외부와의 차단을 위해 플라스틱 캡을 씌운 다음 1일 후, 3일 후, 7일 후하기 표 9의 판정 방법에 따라 자극 정도를 관찰하였고, 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다. 한편, 하기 표 10의 수치는 하기 표 9의 판정 방법에 의해 산출된 자극의 평균치이다.
First, a sample prepared by the formulation of Formulations 1 to 5 in the lower arm of 20 healthy male and female experimenters was applied once a day according to the closed patch test method, and then covered with a plastic cap for blocking from the outside 1 After one day, after three days, seven days later, the degree of stimulation was observed according to the determination method of Table 9 below, and the results are shown in Table 10 below. In addition, the numerical value of following Table 10 is an average value of the stimulus computed by the determination method of following Table 9.
1
2
3
40
One
2
3
4
최소한의 자극
약간의 자극(홍반)
심한 자극(홍반, 부종)
극심한 자극(홍반, 부종)No irritation
Minimal irritation
Slight irritation (erythema)
Severe irritation (erythema, edema)
Severe irritation (erythema, edema)
그 결과, 상기 표 10에 나타낸 바와 같이, 상기 제제예 1 내지 5의 모든 시료에 있어 피부 자극이 없음을 알 수 있었다.
As a result, as shown in Table 10, it was found that all the samples of Formulation Examples 1 to 5 had no skin irritation.
실험예 3. 티로시나제 활성억제 효과 실험Experimental Example 3. Tyrosinase activity inhibitory effect experiment
삼릉 추출물의 티로시나제 활성억제 효과를 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다. 이 때, 상기 실시예 2의 삼릉 추출물은 그대로 사용할 수 있으나, 티로시나제의 활성억제 효과 실험을 위하여 삼릉 추출물 2 ℓ를 수득직후 여과하고, 바로 동결건조 처리하여 삼릉 추출물의 건조물 1.57 g을 얻었으며, 건조된 삼릉 추출물과 알부틴에 대해서 티로시나제 저해효과를 측정하였다. 티로시나제는 버섯류에서 추출한 시그마(Sigma)사의 것을 사용하였다. 이는 삼릉 추출물에는 티로시나제 활성억제성분이 매우 희박하게 희석되어 있으며, 삼릉 추출물을 그대로 사용함을 원 목적으로 시작하였으나, 티로시나제의 활성억제효과를 확인하기 위하여 농축, 건조한 시료를 준비하여 실험을 실시한 것이다. In order to determine the tyrosinase activity inhibitory effect of Samreung extract was performed as follows. At this time, the Samreung extract of Example 2 can be used as it is, for the experiment of the inhibitory effect of tyrosinase, after filtering 2 ℓ of Samreung extract immediately filtered, immediately lyophilized to obtain 1.57 g of the dried product of the Samreung extract, dried The tyrosinase inhibitory effect was measured on the extracted Samreung extract and arbutin. Tyrosinase was used as the Sigma (Sigma) company extracted from the mushrooms. This is very thin dilution of tyrosinase activity inhibitory ingredients in Samreung extract, but began with the purpose of using the Samreung extract as it was, but experiments were prepared by preparing a concentrated, dry sample to confirm the activity inhibitory effect of tyrosinase.
먼저, 기질인 티로신을 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH 6.8)에 용해시켜 0.3 mg/㎖의 농도가 되게 하였으며, 이 용액 334 ㎕를 취하여 시험관에 넣고, 여기에 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH 6.8) 576 ㎕를 추가하였다. 상기 삼릉 추출물의 건조물을 메탄올에 용해시켜 10 mg/㎖가 되게 한 후, 메탄올을 사용하여 5, 1.5, 1 mg/㎖, 500, 150, 100 ug/㎖로 희석시켜 실험군으로 사용하였다. 이와 같이 희석된 삼릉 추출물의 건조물 시료들을 각각 70 ㎕씩 취하여 티로신이 든 시험관에 첨가하고, 37 ℃ 항온조에서 10분간 반응시키고, 대조군은 삼릉 추출물의 건조물 대신에 메탄올 70 ㎕를 첨가하였다. 실험군 및 대조군의 실험관 안에 1700 단위(unit)/㎖의 티로시나제 용액 20 ㎕씩 넣어주고 전체 부피가 1000 ㎕가 되도록 증류수를 넣고, 37 ℃ 항온조에서 30분간 반응시켰다. 30분 경과 후, 반응시킨 실험관을 얼음물에 넣어서 티로시나제의 활성을 중지시킨 후, 분광분석계를 사용하여 470 nm 단파장의 흡광도를 측정하였다.First, tyrosine, a substrate, was dissolved in sodium phosphate buffer (0.1M, pH 6.8) to a concentration of 0.3 mg / ml. Take 334 μl of this solution into a test tube, and add sodium phosphate buffer (0.1M, pH 6.8) 576 μl were added. The dried product of the Samreung extract was dissolved in methanol to 10 mg / ml, and then diluted with 5, 1.5, 1 mg / ml, 500, 150, 100 ug / ml using methanol, and used as an experimental group. 70 μl of each of the dried samples of Samreung extract diluted in this way was added to a test tube containing tyrosine, reacted for 10 minutes in a 37 ° C. thermostat, and 70 μl of methanol was added instead of the dried product of the Samreung extract. 20 μl of 1700 unit / ml tyrosinase solution was added to the test tube of the experimental group and the control group, distilled water was added so that the total volume was 1000 μl, and the reaction was carried out for 30 minutes in a 37 ° C. thermostat. After 30 minutes, the reaction tube was placed in iced water to stop tyrosinase activity, and the absorbance at 470 nm was measured using a spectrometer.
또한, 알부틴에 의한 티로시나제의 활성억제효과를 확인하기 위하여 알부틴을 인산나트륨 완충용액에 용해시켜 농도 5, 1.5, 1 mg/㎖, 500, 150, 100 ug/㎖로 희석하여 실험군으로 사용하였으며, 알부틴의 대조군은 알부틴 용액 대신에 인산나트륨 완충용액을 넣은 것을 사용하였다.In addition, in order to confirm the inhibitory effect of tyrosinase activity by arbutin, arbutin was dissolved in sodium phosphate buffer and diluted to a concentration of 5, 1.5, 1 mg / ml, 500, 150, 100 ug / ml and used as an experimental group. The control group was used to put sodium phosphate buffer instead of arbutin solution.
그 결과를 하기 표 11 및 12에 나타내었다.
The results are shown in Tables 11 and 12 below.
상기 표 11 및 12에 나타낸 바와 같이, 삼릉 추출물의 건조물은 알부틴보다 약 2 배정도의 티로시나제 활성억제 효과가 있음을 알 수 있으며, 이를 통하여 삼릉 추출물이 우수한 미백 효과를 나타냄을 알 수 있다.
As shown in Tables 11 and 12, it can be seen that the dried product of the Samreung extract has about 2 times the tyrosinase activity inhibitory effect than Arbutin, and through this, the Samreung extract shows an excellent whitening effect.
실험예 4. 멜라닌 생성저해 효과실험Experimental Example 4. Melanin production inhibitory effect
삼릉 추출물의 멜라닌 생성저해 효과를 알아보기 위하여, 상기 실시예 2의 삼릉 추출물을 상기 실험예 3에서 처리한 방법과 동일하게 삼릉 추출물의 건조물을 제조하였으며, 실험을 위하여 B-16세포(ATCC사, 미국)의 세포주를 사용하였다. 삼릉 추출물에는 멜라닌 생성저해성분이 매우 희박하게 희석되어 있으며, 삼릉 추출물을 그대로 사용함을 원 목적으로 시작하였으나, 멜라닌의 생성저해 효과를 확인하기 위하여, 본 실시예에서도 농축, 건조한 시료를 준비하여 실험을 실시하였다. In order to examine the melanin production inhibitory effect of the Samreung extract, the dried product of the Samreung extract was prepared in the same manner as the method of treating the Samreung extract of Example 2 in the Experimental Example 3, B-16 cells (ATCC, US cell lines were used. Samneung extract is very thinly diluted melanin production inhibitors, starting with the purpose of using the Samreung extract as it is, but in order to confirm the inhibitory effect of melanin production, in this embodiment also prepared a concentrated and dry sample experiment Was carried out.
먼저, 흑색종 세포를 10 % 소의 태아혈청, 1 % 항생제, 10-7 M의 α-MSH(멜라닌세포 자극호르몬, 시그마사)이 들어 있는 RPM1(Gibco사)의 세포배양 배지에 공급하여 약 1/3정도의 집락(confluence)으로 성장시켰다. 삼릉 추출물의 건조물, 코지산, 알부틴 및 아스코르빈산 등 각각의 시료를 50 ug/㎖의 농도로 배양배지에 용해시키고, 시료가 들어있는 용액을 흑색종 세포에 지속적으로 가하면서 2일간 배양하였다. 대조군으로는 아무런 시료가 들어 있지 않은 배양배지를 사용하여 배양하였다. 배양 후 세포들을 트립신-EDTA(Gibco사)로 처리하여 시험관에 모은 후 세포들의 수를 세고, 4,000,000 세포당 1 ㎖의 1 N 수산화 용액을 첨가하여 멜라닌을 녹여낸 후 470 nm 단파장에서의 흡광도를 측정하였다.First, melanoma cells were supplied to a cell culture medium of RPM1 (Gibco) containing 10% fetal bovine serum, 1% antibiotic, and 10-7 M α-MSH (melanin cell stimulating hormone, Sigma). It grew to about 3 colonies. Each sample such as dried, kojic acid, arbutin and ascorbic acid of Samreung extract was dissolved in culture medium at a concentration of 50 ug / ml, and the solution containing the sample was incubated for 2 days while continuously adding to the melanoma cells. The control was incubated using a culture medium containing no sample. After incubation, the cells were treated with trypsin-EDTA (Gibco Co., Ltd.), collected in a test tube, the cells were counted, and 1 ml of 1 N hydroxide solution was added per 4,000,000 cells to dissolve melanin and the absorbance at 470 nm was measured. .
그 결과를 하기 표 13에 나타내었다.
The results are shown in Table 13 below.
(㎍/㎖/4,000,000 세포)Melanin
(Μg / ml / 4,000,000 cells)
상기 표 13에 나타낸 바와 같이, 삼릉 추출물의 건조물은 대조군에 비해서 B-16 흑색종 세포의 멜라닌 양을 억제할 수 있으며, 같은 양의 알부틴이나 코지산을 사용하는 경우보다 생성된 멜라닌의 양이 적음을 확인하였다. 아스코르빈산은 대조군과 거의 유사한 값을 나타냈다. 이를 통하여 삼릉 추출물이 우수한 미백 효 능을 나타냄을 알 수 있다.
As shown in Table 13, the dry matter of Samreung extract can inhibit the amount of melanin of B-16 melanoma cells compared to the control group, and the amount of melanin produced is lower than that of the same amount of arbutin or kojic acid. It was confirmed. Ascorbic acid showed almost the same value as the control. It can be seen that Samreung extract shows excellent whitening effect.
실험예 5. 수분 흡습성 실험Experimental Example 5. Water Hygroscopicity Experiment
삼릉 추출물의 수분 흡습성을 실험하기 위하여, 인간으로부터 직접 채취하거나 또는 상업적으로 구입한 사람의 건조 표피 세포에 상기 실시예 2의 삼릉 추출물과 증류수를 각각 포화 흡수시키고 흡수된 물의 양을 측정한 후, 48시간 건조후의 질량변화를 측정하였다. 각각의 측정된 질량의 변화로부터 피부세포 단위 질량 당 흡수된 물의 양을 비교하였다. 이러한 실험은 표피세포에 흡습되는 물의 양을 비교하기 위한 방법으로 실제 사람의 피부에 있어서도 그 보습효과를 예상할 수 있는 한가지 방법으로 사용되고 있다.In order to test the moisture hygroscopicity of the Samreung extract, the samples were obtained by saturating and absorbing the Samreung extract of Example 2 and distilled water, respectively, directly from humans or commercially purchased human epidermal cells. The mass change after time drying was measured. The amount of water absorbed per unit of skin cell mass was compared from each measured change in mass. This experiment is used to compare the amount of water absorbed by epidermal cells and is used as a way to anticipate the moisturizing effect even on real human skin.
구체적으로, 사람의 표피세포를 건조시켜 단위질량 당 함유된 수분의 양을 일정하게 만든 후, 각각의 표피세포 시료의 무게와 함유된 물의 양을 카이저 방법(Kaiser method)을 사용하여 측정하였다. 물의 함량이 측정된 표피세포를 삼릉 추출물(A), 정제수(B)에 각각 24시간 담지하여 포화 흡수시켜준 뒤, 세포 내에 물이 포화흡수된 표피세포를 꺼내서 무게를 달고, 일부를 채취하여 카이저 수분측정기로 함유되어 있는 단위질량 당 수분의 양을 측정하였다. 이후 다시 48시간 감압건조시키고 무게를 달고난 후, 일부를 채취하여 카이저 방법에 의해 수분량을 측정하여 함유되어 있는 단위질량 당 수분의 양을 측정하였다.Specifically, after the human epidermal cells were dried to make the amount of water contained per unit mass constant, the weight of each epidermal cell sample and the amount of water contained therein were measured using the Kaiser method. The epidermal cells of which the water content was measured were saturated and absorbed in Samreung extract (A) and purified water (B) for 24 hours, and then the epidermal cells with saturated water absorbed in the cells were taken out and weighed. The amount of water per unit mass contained in the moisture meter was measured. Thereafter, the resultant was dried under reduced pressure for 48 hours and weighed, and then a portion of the sample was collected and water content was measured by Kaiser method to determine the amount of water per unit mass contained therein.
그 결과를 하기 표 14에 나타내었다.
The results are shown in Table 14 below.
상기 표 14에 나타낸 바와 같이, 삼릉 추출물로 포화 흡습시킨 표피세포가 정제수에 의하여 포화흡습된 표피세포의 재건조과정에 있어 정제수보다 훨씬 많은 물을 함유하고 있음을 확인할 수 있었으며, 이로부터 삼릉 추출물의 우수한 피부 흡습성을 확인할 수 있었다. 이를 통하여 삼릉 추출물이 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.
As shown in Table 14, it was confirmed that the epidermal cells saturated with the Samreung extract contained much more water than the purified water in the process of redrying the epidermal cells saturated with the purified water. Excellent skin hygroscopicity could be confirmed. Through this, it can be seen that Samreung extract shows excellent moisturizing effect.
실험예 6. 삼릉 추출물의 엘라스틴 생성 촉진 효과Experimental Example 6. Elastin production promoting effect of Samreung extract
삼릉 추출물의 엘라스틴 생성 촉진 효과를 알아보기 위하여, 사람으로부터 직접 채취하거나 상업적으로 구입한 사람의 섬유 아세포에 상기 실시예 2의 삼릉 추출물을 처리하여 엘라스타제(elastase) 활성의 억제효과를 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to investigate the elastin production promoting effect of Samreung extract, the treatment of Samreung extract of Example 2 to the fibroblasts obtained directly from human or commercially purchased human to inhibit the elastase (elastase) activity such as The experiment was performed.
먼저, 사람의 섬유 아세포를 배양용 플라스크에 넣고 약 70∼80 % 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이후 삼릉 추출물을 1일간 처리한 후 세포배양액을 채취하여 상업적으로 이용가능한 엘라스틴 측정기구를 이용하여 엘라스틴 생성정도를 측정하였다("The synthesis and analytical use of a highly sensitive and covenient substrate of elastase", Biochemical Medicine, 11, pp350-357, 1974 및 "Elastase and neutral cathepsin production by human fibroblasts effect of culture conditions on synthesis and secretion", J.Invest Dermatol., 86, pp63-68, 1986 참조). 즉, 엘라스타제의 기질인 Suc-(Ala) 3 NA를 이용하여, NA가 분해되면서 생기는 색의 변화를 흡광도를 이용하여, 엘라스타제의 활성도를 측정하였다. 이때 삼릉 추출물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.First, human fibroblasts were placed in a culture flask and cultured until about 70-80% growth. After treatment for 1 day after the Samreung extract was extracted cell culture medium and the elastin production was measured using a commercially available elastin measuring instrument ("The synthesis and analytical use of a highly sensitive and covenient substrate of elastase", Biochemical Medicine , 11 , pp350-357, 1974 and "Elastase and neutral cathepsin production by human fibroblasts effect of culture conditions on synthesis and secretion", J. Invest Dermatol ., 86 , pp63-68, 1986). That is, the activity of elastase was measured using the absorbance, using the absorbance using the Suc- (Ala) 3 NA which is a substrate of elastase. At this time, the group not treated with Samreung extract was used as a control.
그 결과를 하기 표 15에 나타내었다.
The results are shown in Table 15 below.
상기 표 15에 나타낸 바와 같이, 삼릉 추출물은 대조군에 비하여 엘라스타제의 활성을 뛰어나게 억제함을 알 수 있으며, 활성 억제율은 삼릉 추출물의 농도가 증가할수록 높아짐을 확인하였다. 이를 통하여 삼릉 추출물이 우수한 노화 방지 및 탄력 증진 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in Table 15, the Samreung extract was found to inhibit the activity of elastase excellently compared to the control, it was confirmed that the activity inhibition rate increases as the concentration of the Samreung extract increases. Through this, it can be seen that Samreung extract exhibits excellent anti-aging and elasticity enhancing effects.
실험예 7. 삼릉 추출물의 콜라젠 생성 촉진 효과Experimental Example 7. Collagen production promoting effect of Samreung extract
삼릉 추출물의 콜라젠 생성 촉진 효과를 알아보기 위하여, 사람으로부터 직접 채취하거나 상업적으로 구입한 사람의 섬유아세포에 상기 실시예 2의 삼릉 추출물을 처리하여 콜라게나제 활성 억제효과를 하기와 같은 방법으로 측정하였다. In order to investigate the collagen production promoting effect of Samreung extract, the treatment of the Samreung extract of Example 2 to the fibroblasts obtained directly from human or purchased commercially was measured by the following method to inhibit the collagenase activity .
먼저, 사람의 섬유아세포를 배양용 플라스크에 넣고 약 70∼80 % 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이후 삼릉 추출물을 1일간 처리한 후 세포배양액을 채취하여 상업적으로 이용 가능한 콜라게나제 활성측정기구를 이용하여 콜라젠 생성 정도를 측정하였다("An assay of collagenase activity using enzyme-linked immunosorbent assay for mammalian collagenase", Anal. Biochem., 116(1), pp172-7, 1987 참조). 즉, 콜라게나제에 대한 항체를 이용하여, 사람(Human)에서 유래한 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)을 정량하였다. 이때, 삼릉 추출물를 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.First, human fibroblasts were placed in a culture flask and cultured until about 70-80% growth. After treatment for 1 day after the Samreung extract, cell culture was collected and the degree of collagen production was measured using a commercially available collagenase activity measuring instrument ("An assay of collagenase activity using enzyme-linked immunosorbent assay for mammalian collagenase"). , Anal.Biochem . , 116 (1) , pp 172-7, 1987). In other words, using an antibody against collagenase, MMP-1 (Matrix Metalloproteinase-1) derived from Human was quantified. At this time, the group not treated with Samreung extract was used as a control.
그 결과를 하기 표 16에 나타내었다.
The results are shown in Table 16 below.
상기 표 16에 나타낸 바와 같이, 삼릉 추출물은 대조군에 비하여 콜라게나제의 활성을 뛰어나게 억제함을 알 수 있으며, 활성 억제율은 삼릉 추출물의 농도가 증가할수록 높아짐을 확인하였다. 이를 통하여 삼릉 추출물이 우수한 탄력증진 효과를 나타냄을 알 수 있다.
As shown in Table 16, the Samreung extract was found to inhibit the activity of collagenase excellently compared to the control, the activity inhibition rate was confirmed to increase as the concentration of the Samreung extract increases. It can be seen that the Samreung extract shows an excellent elasticity promoting effect.
이상에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 의한 삼릉 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 티로시나제 활성 억제 효과, 멜라닌 생성 저해 효과, 보습 효과, 엘라스틴 생성 촉진 효과, 콜라겐 생성 촉진 효과가 있다. 또한, 삼릉 추출물의 저장기간을 향상시키는 효과가 있다. 따라서, 상기 삼릉 추출물을 피부 미백용, 보습용, 노화방지용 및 탄력증진용 피부 외용제 조성물로서 화장료 조성물 또는 약학 조성물로 사용할 수 있다.
As can be seen from the above, the external composition for skin containing Samreung extract according to the present invention has a tyrosinase activity inhibitory effect, melanin production inhibitory effect, moisturizing effect, elastin production promoting effect, collagen production promoting effect. In addition, there is an effect to improve the storage period of Samreung extract. Therefore, the Samreung extract may be used as a cosmetic composition or a pharmaceutical composition as a skin external preparation composition for skin whitening, moisturizing, anti-aging and elasticity promotion.
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