KR101508728B1 - 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 naas-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약 - Google Patents

신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 naas-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약 Download PDF

Info

Publication number
KR101508728B1
KR101508728B1 KR1020120130434A KR20120130434A KR101508728B1 KR 101508728 B1 KR101508728 B1 KR 101508728B1 KR 1020120130434 A KR1020120130434 A KR 1020120130434A KR 20120130434 A KR20120130434 A KR 20120130434A KR 101508728 B1 KR101508728 B1 KR 101508728B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
naas
weight
bacillus amyloliquefaciens
microorganism
kacc
Prior art date
Application number
KR1020120130434A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20140063268A (ko
Inventor
유재홍
박인철
김완규
Original Assignee
대한민국
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 대한민국 filed Critical 대한민국
Priority to KR1020120130434A priority Critical patent/KR101508728B1/ko
Publication of KR20140063268A publication Critical patent/KR20140063268A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101508728B1 publication Critical patent/KR101508728B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07—Bacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

본 발명은 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1와 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약에 관한 것이다.
본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P)균주는 서열번호 1로 표현되며, 배추 무름병 발생 병원균의 생육을 억제하는 것이 특징이다.
본 발명에 의해, 배추 무름병에 대하여 우수한 방제효과를 갖는 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1와, 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약이 제공됨으로써, 배추 무름병 발생을 억제함으로 인해 작물 생육이 가능하여 작물의 수량을 증대시킬 수 있게 된다.

Description

신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약{NEW MICROORGANISM BACILLUS AMYLOLIQUEFACIENS NAAS-1, AND MICROBIAL AGENT AND BIOPESTICIDE CONTAINING THE SAME}
본 발명은 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 배추 무름병 발생 병원균의 생육을 억제하여 작물 생육을 가능하게 하는 균주를 분리동정하고 이 균주를 유효성분으로 함유하는 미생물제제 및 미생물농약에 관한 것이다.
식물에서 발병되는 세균성 무름병(soft rot disease)은 채소재배에서 가장 문제가 되는 병으로서 신선한 저장기관을 형성하는 거의 모든 채소, 과채류, 감자, 구근 등 약 50종의 식물에서 발견되고 있으며, 재배기간 중에는 물론 수확물의 수송도중 또는 저장 중에도 큰 피해를 초래하는 병이다.
특히 배추에서는 잎, 줄기, 뿌리에 발생하는데 상처부위에서 처음 시작하여 좌우상하로 발전하며, 마지막에는 조직이 크림처럼 변하여 악취를 발산하고 배추의 일부 또는 전체가 시들어 죽게 한다.
배추 무름병은 우리나라 배추에서 매년 발생하여 큰 피해를 주고 있으며, 특히 여름철 배추 생산에 가장 큰 제한요인 중 하나이다.
현재 이 병의 방제를 위한 농약으로 스트렙토마이신(streptomycin: 농용신수화제)과 옥소리닉산(oxolinic acid: 일품)이 농약으로 등록되어 있으나, 여름철 배추 및 배추 포장에서 병원균의 밀도가 높아지게 되면 이들의 방제효과는 매우 낮은 실정이다.
또한 식물병 방제를 위해 사용하는 항생제 또는 화학물질은 농업생태계에서 항생제저항성의 유발 및 환경에 대한 오염 및 잔류독성의 문제 때문에 선진국을 중심으로 1980년대 이후 환경친화적인 생물농약의 개발에 몰두하게 되었다.
특히, 이러한 생물농약을 이용한 방제법은 환경에 대해 안전하고, 인축에 대한 독성이 거의 없으며, 일반적으로 이미 자연계에 널리 존재하는 미생물을 이용하기 때문에 농약사용에 대한 거부감 및 자연생태계의 변이 등을 최소화할 수 있는 장점이 있다.
관련 선행기술로는 대한민국공개특허 제10-2002-0064386호(공개일: 2002년 08월 09일, 명칭: 세균성 무름병 병원균에 대하여 항균활성을 갖는 신규한 바실러스 에스피균주 및 이를 이용한 세균성 무름병의 방제방법)과 대한민국등록특허 제10-0580336호(등록일: 2006년 05월 09일, 명칭: 배추 세균성 무름병 방제효과를 가지는 신규 바실러스 속 미생물)이 있다.
본 발명의 목적은 배추 무름병 발생 병원균에 대하여 항균활성을 나타내어 작물 생육을 가능하게 하는 신규의 균주인 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1을 분리 동정하고, 이 균주를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약을 제공하기 위한 것이다.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P)균주는 서열번호 1로 표현되며, 배추 무름병 발생 병원균의 생육을 억제하는 것이 특징이다.
상기 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P) 균주는 토양으로부터 분리되는 것으로서, 미생물 농약, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제 또는 관주살포제 중 어느 하나의 유효성분으로 이용되는 것이 특징이다.
상기 배추 무름병 발생 병원균은 팩토박테리움 카로토보륨(Pectobacterium carotovorum subsp . Carotovorum), 팩토박테리움 시프리페디(Pectobacterium cypripedii), 슈도모나스 비리디프라바(Pseudomonas viridiflava), 슈도모나스 마르기나리스(Pseudomonas marginalis pv . marginalis) 중 어느 하나 이상인 것이 특징이다.
또한, 본 발명의 미생물제제는 상기 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P) 균주의 균체 또는 그 배양액을 유효성분으로 함유하는 것이 특징이다.
상기 배양액에는 탄소원으로 가용성 전분, 질소원으로 효모추출분말, 무기염류로는 소금이 함유되며, 바람직하게는 상기 가용성 전분은 상기 배양액의 중량대비 0.5~3.5중량%, 상기 효모추출분말은 상기 배양액의 중량대비 2.5~7.5중량% 및 상기 소금은 상기 배양액의 중량대비 0.001~0.05중량%로 포함되며, 더욱 바람직하게는 상기 가용성 전분은 상기 배양액의 중량대비 2중량%, 상기 효모추출분말은 상기 배양액의 중량대비 5중량% 및 상기 소금은 상기 배양액의 중량대비 0.01중량%로 포함되는 것이 특징이다.
또한, 본 발명의 미생물농약은 상기 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P) 균주의 균체 또는 그 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로, 상기 미생물농약은 토양에 살포 또는 토양내에 관주하여 배추 무름병을 방제하는 것이 특징이다.
본 발명에 의해, 배추 무름병에 대하여 우수한 방제효과를 갖는 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1과, 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약이 제공됨으로써, 배추 무름병 발생을 억제하여 작물의 생육이 가능해져 작물의 수량을 증대시킬 수 있게 된다.
도 1은 본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1 균주의 동정을 나타낸 도면이다.
본 명세서에 기재된 용어, 기술 등은 특별한 한정이 없는 한, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 일반적으로 사용되는 의미로 사용된다.
본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 균주는 서열번호 1로 표현되며, 토양에서 분리한 것으로서 배추 무름병 발생 병원균에 대해 항균활성을 나타내는 사실을 하기 실시예를 통해 규명되었다.
이때, 상기 분리된 균주는 단간균이며 포자의 형태는 타원형이고 세포의 양끝에 위치하며 포자낭은 팽창되지 않는 상태이다. 또한, 영양 액체 배지에서 30℃에서 1-2일간 배양 생육이 좋고 펠리클을 형성하지 않으며 균체의 침전현상은 나타나지 않았으며, 생육 온도 범위는 20~50℃이고, 생육 pH 범위는 4~10이며, 염농도 8%까지 생육이 가능하다. 그리고 카탈라제 양성, 옥시다제 음성 및 프로피오네이트 이용성을 나타내며 전분을 가수분해하였으나 혈액 용혈 작용은 나타나지 않는다
본 발명의 상술한 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1 균주의 균체 또는 그 배양액을 함유하는 배추 무름병 발생억제용 미생물제제, 미생물농약을 제공하기도 한다.
특히, 상기 배양액에는 본 발명의 상술한 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1 균주의 균체가 잘 배양될 수 있도록 탄소원으로 가용성 전분, 질소원으로 효모추출분말, 무기염류로는 소금이 함유되는 것을 특징으로, 바람직하게는 상기 배양액의 중량대비 0.5~3.5중량%의 상기 가용성 전분, 2.5~7.5중량%의 상기 효모추출분말, 0.001~0.05중량%의 상기 소금을 포함하는 것이 상기 균주의 대량생산을 가능하게 하는 조건이며, 상기 균주 성장에 가장 적합한 최적조건은 상기 가용성 전분은 상기 배양액의 중량대비 2중량%, 상기 효모추출분말은 상기 배양액의 중량대비 5중량% 및 상기 소금은 상기 배양액의 중량대비 0.01중량%로 포함되는 것이다.
이때, 상기 가용성 전분은 0.5 중량% 미만으로 함유될 경우 에너지를 만들어주는 요소가 너무 적어 상기 균주의 증식속도를 더디게 하며, 3.5중량%초과로 함유될 경우 다른성분과의 적절한 혼합이 이루어지지 않아 오히려 상기 균주의 증식속도를 더디게 한다.
또한, 상기 효모추출분말은 2.5 중량% 미만으로 함유될 경우 균주의 생장과 생식을 더디게 하여 선택적으로 촉매하는 기질의 특이성이 떨어지게 되며, 7.5 중량%를 초과할 경우 과도한 촉매제가 첨가됨으로서 다른성분과의 적절한 혼합이 이루어지지 않음과 동시에 균주의 변형을 일으킬 우려가 있다.
또한, 상기 소금은 0.001 중량% 미만으로 함유될 경우 물질대사에서 중추적인 역할의 효력이 떨어지므로 상기 균주의 증식속도가 떨어지게 되며, 0.05 중량%초과로 함유될 경우에는 다른성분과의 적절한 혼합이 이루어지지 않아 오히려 상기 균주의 증식속도를 더디게 한다.
이와 같은 미생물제제와 미생물농약은 상기와 같은 균주들을 상기와 같은 배양조건에서 배양하여 제조된 배양액을 포함하는 것으로서 활성세균의 생존 유지기간, 생존발아율, 항균 활성유지, 항균물질 생성 능력이 우수하므로, 항균 미생물농약, 종자코팅제, 미생물영양제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제 또는 관주살포제 등에 이용될 수 있다.
하기 실시예 및 실험예에 의해서 보다 구체적으로 설명하지만 보호범위가 하기 실시예 및 실험예에 국한되는 것은 아니다.
<실시예 1> 본 발명의 신규 길항 미생물의 분리 및 동정
1) 토양 미생물의 분리
본 발명의 신규 미생물은 배추 재배지(강원도 화천 유기배추 재배농가) 토양으로부터 분리하여 도 1과 같이 동정되었다.
2) 본 발명의 미생물 균주의 선별
화천의 유기농배추재배지에서 채취한 토양을 증류수에 백금이로 현탁시킨 후 NB 평판배지 (육즙 0.3%, 펩톤 0.5%, 한천 1.2%)에 도말하고 30℃에서 1-2일 배양하여 균주를 분리하였다.
영양 액체 배지(NB배지) 10ml에 분리한 균주를 백금이로 1회 접종하여 30℃에서 76시간 동안 진탕배양하였다.
그 배양액을 원심력을 12,000×g(중력가속도)로 20분간 적용하여 원심분리하고 팩토박테리움 속(Pectobacterium carotovorum subs sp carotovorum KACC 10057)균을 피검균으로 사용하여 페이퍼 디스크(paper disc)법으로 배양 상등액의 항균활성을 측정하였다.
분리 균주들 중에서 항균 활성이 가장 좋은 균주를 선별하여 동정한 결과 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)의 특징과 유사 하였지만 성장 염농도 및 싸이트레이트 이용성에서 차이를 나타내었다.
하지만 16s rDNA 분석을 한 결과 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens)와 100%의 일치도를 나타내어 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1이라 명명하고, 이 균주를 2012년 11월 1일자로 한국농용미생물 센타(KACC)에 기탁하여 수탁번호 KACC 91751P를 부여받았다.
3) 본 발명의 바실러스속 균주의 동정
본 발명의 바실러스 NAAS-1 균주의 동정은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상적으로 행하는 동정법에 따라 수행하였으며, 그 결과는 다음의 표 1,2,3에 나타내었다.
1. 실험방법
16s rDNA PCR을 이용한 균주 동정을 위해 먼저 DNA 샘플을 조제하였다.
설명하면, 콜로니에서 DNA를 조제하기 위해, 멸균증류수 100㎕를 마이크로 튜뷰에 넣어 코로니에서 채취한 균체를 현탁하였다. 이 현탁액을 95℃에서 15분간 열처리 한다. 그 후 가볍게 원심분리하여 상등액을 샘플 DNA 용액으로 사용하였다.
이하 16s rDNA 영역 증폭 및 염기서열 정보분석은 일반적인 매뉴얼(TAKARA 회사 발행)에 의하여 시행하였다.
2. 실험결과
본 발명의 바실러스 속 NAAS-1 균주의 형태학적 특성
형태 단간균
세포크기 1.6×3.8㎛
운동성 +
그람염색 +
포자형성 타원형
포자위치 양끝
'+'는 양성을, '-' 는 음성을 나타낸다
상기 표 1에 기재되어 있듯이, 본 발명의 바실러스속 NAAS-1 균주는 단간균이며 포자의 형태는 타원형이고 세포의 양끝에 위치하며 포자낭은 팽창되지 않는 상태이었다.
본 발명의 바실러스 속 NASS-1 균주의 배양학적 특성
콜로니 형태 원형
콜로니 표면 매끄러움
콜로니 모서리 파상
콜로니 에리베이션 돌출
콜로니 흐림도 불투명면
콜로니 색깔 크림색
콜로니 광택성 빛나지 않음
상기 표 2에 나타나 있듯이, 영양액체 배지에서 30℃에서 1~2일간 배양 생육이 좋고 펠리클을 형성하지 않으며 균체의 침전현상은 나타나지 않았다.
본 발명의 바실러스 속 NAAS-1 균주의 생리학적 특성
성장온도 20~50℃
성장 pH 범위 4~10
성장 NaCl <8%
카탈라제 +
옥시다제 -
유레아제 +
리파제 _
β-갈락토시다제 +
알기닌 디하이드로라제 -
페닐알라닌 디아미나제 -
가수분해: 스타치
카제인
셀룰로오스
에스쿨린		 +
+
-
+
인돌형성 -
TSI 한천 배지에서의 H2S형성 -
슈크로오스로부터 레반형성 +
펩톤으로부터 NH3 형성 +
알기닌으로부터 NH3 형성 +
젤라틴 액화 +
사이트레이트 이용 -
프로피오네이트 이용 +
메틸레드 테스트 +
질소환원 +
탈질소 +
우유반응: 응고
펩토니제이션		 -
+
혈액 용혈 작용 -
O-F 테스트 발효
티로신 분해 -
'+'는 양성을, '-' 는 음성을 나타낸다
상기 표 3에 나타나 있듯이, 본 발명의 바실러스속 NAAS-1균주의 생육 온도 범위는 20~50℃이고, 생육 pH 범위는 4~10이며, 염농도 8중량%까지 생육이 가능하였다. 그리고 카탈라제 양성, 옥시다제 음성 및 프로피오네이트 이용성을 나타내며 전분을 가수분해하였으나 혈액 용혈 작용은 나타나지 않았다.
<실험예 1> 배추 무름균 항균활성 확인
1) 배추 무름병 유발규 분양
농업미생물 은행(KACC)로부터 하기 표 4에 나타나있듯이, 배추 무름병 유발균 4종을 분양받았다. 이들 균주는 생육 양호하며, 활성 검사 후 시험균으로 선발하여 사용하였다.
KACC No. 학명 배양온도 생육
10057 Pectobacterium carotovorum subs sp carotovorum 28℃ ++
10063 Pectobacterium cypripedii 28℃ ++
10387 Pseudomonas viridi flava 28℃ ++
10466 Pseudomonas marginalis pv . marginalis 28℃ ++
2) 항균활성 실험
배추 무름병을 유발하는 균에 대하여 본 발명의 신규미생물의 항균력을 확인하기 위해 상기와 실시에 1과 같이 분리 동정된 바실러스속 NAAS-1 균주를 100ml 삼각 플라스크에 20ml 분주한 영양 액체배지(Trytic soy broth)에 백금이로 1회 접종한 후 30℃에서 48시간 진탕배양하고, 정지기에 도달한 균주를 본 발명의 종균으로 사용하였다.
그 결과 하기 표 5와 같이 나타났다.
본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1 무름병균(KACC No.)
10057 10063 10387 10406
24hr - - - -
48hr + - - -
72hr ++ _ + +
96hr +++ + ++ +
120hr ++ + + +
- : 8 mm + ; 8~10mm ++ ; 15mm +++ : 18~20mm
mm : 항균력을 나타낸 영역정도(Inhibition zone size)
상기 표 5에 나타나 있듯이, 본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1 배양액의 활성을 측정한 결과, 배추 무름병 유발균 모두 항균활성을 나타냄을 확인하였으며, 특히 KACC No. 10057균주에 강한 활성을 나타내었음을 확인하였다. 상기 KACC 10057균주는 배추과 작물에 발생하는 대표적인 병원균이다.
<실험예 2> 배추 무름병균 저해 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1의 항균물질 최대생산조건 검토
본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1균주의 대량 배양조건을 검토한 바, 하기 표 6과 같이 조사되었다.
화학적 조건 탄소원: 가용성 전분 2.0 중량%
질소원: 효모추출분말 2.5 중량%
무기염류: 소금 0.01 중량%
물리적 조건 온도: 35℃
교반속도: 120rpm
통기량: 0.2L/min
pH(산도): 7.0
<실험예 3> 배지조성에 따른 무름병균에 대한 항균력 확인
배지조성을 달리하여 무름병균의 항균활성을 확인한 바, 하기 표 7과 같이 나타났다. 이때, 72시간 배양 후 항균력 측정하였다.
대조구
(세균용 일반 상업용배지: TSB배지)		 처리구
(시험결과 배지: ATBN-1 배지)
카제인 17 중량%
덱스트로즈 2.5 중량%
소금 5.0 중량%
다이포타슘 포스페이트 2.5 중량%		 탄소원: 가용성 전분 2.0 중량%
질소원: 효모추출분말 2.5 중량%
무기염류: 소금 0.01 중량%
14mm 24mm
억제영역 사이즈 표시 : mm (페이퍼 디스크 지름크기 8mm)
상기 표 7에 나타나 있듯이, 본 발명의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1는 탄소원으로 가용성 전분, 질소원으로 효모추출분말 및 무기염류로 소금이 함유된 ATBN-1배지에서 더 높은 항균력을 나타냄을 확인하였다.
이에, 배추 무름병에 대하여 우수한 방제효과를 갖는 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1과, 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약이 제공되며, 배추 무름병 발생을 억제하여 작물의 생육이 가능해져 작물의 수량을 증대시킬 수 있게 된다.
상기의 본 발명은 바람직한 실시예 및 시험예를 중심으로 살펴보았으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 본질적 기술 범위 내에서 상기 본 발명의 상세한 설명과 다른 형태의 실시예들을 구현할 수 있을 것이다. 여기서 본 발명의 본질적 기술범위는 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
국립농업과학원 농업유전자원센터 KACC91751P 20121101
<110> REPUBLIC OF KOREA(MANAGEMENT : RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> NEW MICROORGANISM BACILLUS AMYLOLIQUEFACIENS NAAS-1, AND MICROBIAL AGENT AND BIOPESTICIDE CONTAINING THE SAME <130> P2012-0168 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1438 <212> DNA <213> Bacillus amyloliquefaciens NAAS-1 <400> 1 gctcaggacg aacgctggcg gcgtgcctaa tacatgcaag tcgagcggac agatgggagc 60 ttgctccctg atgttagcgg cggacgggtg agtaacacgt gggtaacctg cctgtaagac 120 tgggataact ccgggaaacc ggggctaata ccggatggtt gtttgaaccg catggttcag 180 acataaaagg tggcttcggc taccacttac agatggaccc gcggcgcatt agctagttgg 240 tgaggtaacg gctcaccaag gcgacgatgc gtagccgacc tgagagggtg atcggccaca 300 ctgggactga gacacggccc agactcctac gggaggcagc agtagggaat cttccgcaat 360 ggacgaaagt ctgacggagc aacgccgcgt gagtgatgaa ggttttcgga tcgtaaagct 420 ctgttgttag ggaagaacaa gtgccgttca aatagggcgg caccttgacg gtacctaacc 480 agaaagccac ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt 540 ccggaattat tgggcgtaaa gggctcgcag gcggtttctt aagtctgatg tgaaagcccc 600 cggctcaacc ggggagggtc attggaaact ggggaacttg agtgcagaag aggagagtgg 660 aattccacgt gtagcggtga aatgcgtaga gatgtggagg aacaccagtg gcgaaggcga 720 ctctctggtc tgtaactgac gctgaggagc gaaagcgtgg ggagcgaaca ggattagata 780 ccctggtagt ccacgccgta aacgatgagt gctaagtgtt agggggtttc cgccccttag 840 tgctgcagct aacgcattaa gcactccgcc tggggagtac ggtcgcaaga ctgaaactca 900 aaggaattga cgggggcccg cacaagcggt ggagcatgtg gtttaattcg aagcaacgcg 960 aagaacctta ccaggtcttg acatcctctg acaatcctag agataggacg tccccttcgg 1020 gggcagagtg acaggtggtg catggttgtc gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa 1080 gtcccgcaac gagcgcaacc cttgatctta gttgccagca ttcagttggg cactctaagg 1140 tgactgccgg tgacaaaccg gaggaaggtg gggatgacgt caaatcatca tgccccttat 1200 gacctgggct acacacgtgc tacaatggac agaacaaagg gcagcgaaac cgcgaggtta 1260 agccaatccc acaaatctgt tctcagttcg gatcgcagtc tgcaactcga ctgcgtgaag 1320 ctggaatcgc tagtaatcgc ggatcagcat gccgcggtga atacgttccc gggccttgta 1380 cacaccgccc gtcacaccac gagagtttgt aacacccgaa gtcggtgagg taaccttt 1438

Claims (11)

  1. 서열번호 1로 표현되는 염기서열을 가지며, 배추재배지 토양으로부터 분리되되, 팩토박테리움 시프리페디(Pectobacterium cypripedii), 슈도모나스 비리디프라바(Pseudomonas viridiflava), 슈도모나스 마르기나리스(Pseudomonas marginalis pv. marginalis) 중 어느 하나 이상의 배추 무름병 발생 병원균의 생육을 억제하는,
    신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P)균주.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항에 있어서,
    상기 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 NAAS-1 균주는
    미생물 농약, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제 또는 관주살포제 중 어느 하나의 유효성분으로 이용되는,
    신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P)균주.
  6. 제1항 또는 제5항 중 어느 한항의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P)균주가 포함된 배양액을 유효성분으로 함유하되,
    상기 배양액에는 탄소원으로 배양액의 중량대비 0.5~3.5중량%의 가용성 전분, 질소원으로 배양액의 중량대비 2.5~7.5중량%의 효모추출분말, 무기염류로는 배양액의 중량대비 0.001~0.05중량%의 소금이 함유되는 것이 특징인,
    배추 무름병 발생억제용 미생물제제.
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 제6항에 있어서,
    상기 가용성 전분은 상기 배양액의 중량대비 2중량%, 상기 효모추출분말은 상기 배양액의 중량대비 5중량% 및 상기 소금은 상기 배양액의 중량대비 0.01중량%인,
    배추 무름병 발생억제용 미생물제제.
  10. 제1항 또는 제5항 중 어느 한항의 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P)균주의 균체가 포함된 배양액을 준비하는 단계;
    상기 배양액에 탄소원으로 상기 배양액의 중량대비 0.5~3.5중량%의 가용성 전분, 질소원으로 상기 배양액의 중량대비 2.5~7.5중량%의 효모추출분말, 무기염류로는 상기 배양액의 중량대비 0.001~0.05중량%의 소금을 넣고 혼합하여 대량생산용 배양액을 제조하는 단계;
    상기 대량생산용 배양액을 35℃의 온도, 120rpm의 교반속도, 0.2L/min의 통기량, 7.0의 pH의 조건하에 배양하여 상기 신규미생물을 대량생산하는 단계;를 포함하는
    신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) NAAS-1 (KACC 91751P)균주의 대량생산 방법.
  11. 삭제
KR1020120130434A 2012-11-16 2012-11-16 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 naas-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약 KR101508728B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120130434A KR101508728B1 (ko) 2012-11-16 2012-11-16 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 naas-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120130434A KR101508728B1 (ko) 2012-11-16 2012-11-16 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 naas-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140063268A KR20140063268A (ko) 2014-05-27
KR101508728B1 true KR101508728B1 (ko) 2015-04-07

Family

ID=50891316

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020120130434A KR101508728B1 (ko) 2012-11-16 2012-11-16 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 naas-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101508728B1 (ko)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108299122A (zh) * 2017-12-08 2018-07-20 江苏省农业科学院 一种用于修复酸化土壤的土壤调理剂
CN111567563A (zh) * 2020-06-22 2020-08-25 上海市农业科学院 一种玉米微生物种衣剂及其制备方法

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102124060B1 (ko) * 2018-12-07 2020-06-17 한경대학교 산학협력단 신규한 바실러스 벨레젠시스 mws28와 이를 포함하는 미생물 방제제 및 이를 생산하는 방법
CN111235064B (zh) * 2020-03-09 2021-11-02 闽江学院 一种农用复合微生物菌剂及其应用
CN112322521B (zh) * 2020-10-23 2022-05-03 贵州大学 解淀粉芽孢杆菌guor0918及其在防治猕猴桃软腐病中的应用
CN114891665B (zh) * 2022-04-14 2023-04-07 江南大学 一种海藻糖酶、重组菌及其在酵母制品水解中的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050059527A (ko) * 2003-12-15 2005-06-21 차재순 배추 세균성 무름병 방제효과를 가지는 신규 바실러스 속미생물
KR20080095962A (ko) * 2007-04-26 2008-10-30 유수진 왜율 방지 성능을 구비한 동 위상 저음 반전 방식의 출력구조를 갖는 전기음향변환 유닛

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050059527A (ko) * 2003-12-15 2005-06-21 차재순 배추 세균성 무름병 방제효과를 가지는 신규 바실러스 속미생물
KR20080095962A (ko) * 2007-04-26 2008-10-30 유수진 왜율 방지 성능을 구비한 동 위상 저음 반전 방식의 출력구조를 갖는 전기음향변환 유닛

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Afr. J. Microbiol. Res., Vol.5, pp.340-345(2011.02.18.) *
Afr. J. Microbiol. Res., Vol.5, pp.340-345(2011.02.18.)*
Genbank Accession No.JQ936683(2012.06.27.) *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108299122A (zh) * 2017-12-08 2018-07-20 江苏省农业科学院 一种用于修复酸化土壤的土壤调理剂
CN111567563A (zh) * 2020-06-22 2020-08-25 上海市农业科学院 一种玉米微生物种衣剂及其制备方法
CN111567563B (zh) * 2020-06-22 2021-11-02 上海市农业科学院 一种玉米微生物种衣剂及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
KR20140063268A (ko) 2014-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101508728B1 (ko) 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 naas-1과 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약
CN103215210B (zh) 一种西姆芽孢杆菌及其在制备微生物海藻肥料中的应用
CN104164394A (zh) 一株拮抗植物病原菌的菌株及其应用
CN102747013A (zh) 一种兼抗烟草黑胫病和青枯病的生防菌株Trb3
CN110295129B (zh) 一种用于防治黄瓜灰霉病和白粉病的生防菌及应用
CN111647518A (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌微生物菌剂及制备方法
CN109749953B (zh) 蜡样芽孢杆菌、菌剂及其制备方法和应用
CN107502565A (zh) 一株平贝母根际多粘类芽孢杆菌及其应用
CN108048360B (zh) 一种具有降解有机磷和防病双重作用的枯草芽孢杆菌
KR101535893B1 (ko) 신규미생물 바실러스 아밀로리퀴펜션스 cc110와 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약
KR20080045346A (ko) 신규한 바실러스 서브틸리스 엠27 균주 및 이를유효성분으로 한 식물 균핵병 방제 방법
CN102443559B (zh) 一株用于防治棉花黄萎病的芽孢杆菌及其应用
CN116676234A (zh) 耐盐芽孢杆菌jk-25、菌剂及其制备方法和应用
CN114058542B (zh) 一种多粘类芽孢杆菌菌剂及其对胡萝卜根腐病的防治作用
CN114085788B (zh) 一株雅马纳假单胞菌菌株及其应用
KR20110120748A (ko) 신규한 미생물 바실러스 아밀로리큐파션스 씨피 1 및 이를 이용한 딸기 탄저병균의 방제방법
KR101389975B1 (ko) 농작물 병해 방제 및 생장촉진을 위한 바실러스 서브틸러스 배양용 배지와 이를 이용한 미생물 제제의 제조방법
CN115851479A (zh) 一种对番茄灰霉病菌具有拮抗作用的细菌及其应用
CN111471627B (zh) 一株粘质沙雷氏菌bsz及应用
KR101510434B1 (ko) 신규미생물 파라코니오씨리움 미니탄스 s134와 이를 함유하는 미생물제제 및 미생물농약
CN113699075A (zh) 一种产蛋白酶、解钾的萎缩芽孢杆菌及其应用
CN113278541A (zh) 一株水稻内生贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN111088186A (zh) 一种芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用
CN117535178B (zh) 一种细菌性软腐病生防复合菌及应用
CN116218742B (zh) 一株拮抗掘氏疫霉菌的地衣芽孢杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right