KR101500551B1 - Cosmetic composition with hydroxycitric acid for skin whitening - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 하이드록시시트릭산(hydroxycitric acid)을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening, and more particularly to a cosmetic composition for skin whitening containing hydroxycitric acid as an active ingredient.
피부는 외부 환경과 직접 접하면서 인체를 보호하며 생화학적 및 물리적인 기능을 가지고 있는 아주 중요한 조직이다. 이 조직은 크게 3가지 즉, 표피, 진피 및 피하조직으로 나누어진다. 사람의 피부색은 주로 피부 세포 속에 들어있는 멜라닌을 함유하는 멜라노좀(melanosome)의 숫자, 크기, 종류 및 분포도에 따라 다르게 나타난다. Skin is a very important tissue that has the biochemical and physical functions to protect the human body in direct contact with the external environment. This tissue is roughly divided into three parts: epidermis, dermis and subcutaneous tissue. The skin color of a person varies depending on the number, size, type and distribution of the melanosome containing melanin mainly contained in the skin cells.
멜라닌은 햇빛 중 자외선의 빛에너지를 흡수하여 더 깊숙이 있는 세포들이 자외선에 의해 손상되는 것을 막아주는 역할을 한다. 이러한 멜라닌이 비정상적으로 적게 생산되면 백반증과 같은 피부병변이 유발되고, 반대로 자외선 등에 의해 멜라닌이 과도하게 합성되면 피부에 손상을 줄 뿐만 아니라 기미, 주근깨를 형성하고, 더 나아가 피부암의 원인이 되기도 한다. Melanin absorbs ultraviolet light energy in the sunlight, preventing deeper cells from being damaged by ultraviolet light. Such abnormal production of melanin causes skin lesions such as vitiligo. On the other hand, when melanin is excessively synthesized by ultraviolet rays or the like, it not only damages the skin but also forms spots and freckles and further causes skin cancer.
멜라닌 형성과정에서 가장 중요한 역할을 하는 것은 티로시나제(tyrosinase) 효소로 알려져 있으며, 이 효소는 조직 중에 존재하는 티로신(tyrosine)에 작용하여 도파(dopa)를 생성시키고, 다시 도파퀴논(dopaquinone)을 생성시키며, 이 도파퀴논으로부터 여러 단계의 자동 산화과정을 거쳐 흑색 색소인 멜라닌이 생성된다. The most important role in melanin formation is known as the tyrosinase enzyme, which acts on tyrosine present in the tissue to generate dopa and then to generate dopaquinone , And melanin, which is a black pigment, is produced from this dopaquinone through various auto oxidation processes.
피부 흑화의 원인과 기작이 밝혀지면서, 피부 흑화 과정에 관여하는 티로시나제(tyrosinase) 활성 저해효과를 갖는 물질들을 화장료에 배합하거나, 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시키는 방법이 피부 흑화를 방지하기 위해 일반적으로 사용되고 있다. 이러한 목적으로 사용되고 있는 대표적인 물질로는 알부틴, 아스코르빈산, 히드로퀴논, 상백피추출물 및 감초추출물 등의 식물 추출물이 있다. As the causes and mechanisms of skin blackening are revealed, a method of reducing the production of melanin by mixing substances having inhibitory effect on tyrosinase activity involved in skin blackening process in cosmetics or inhibiting some reactions during melanin production is a method It is generally used to prevent blackening. Representative materials that have been used for this purpose include plant extracts such as arbutin, ascorbic acid, hydroquinone, bark extract, and licorice extract.
알부틴의 경우, 우수한 티로시나제 활성 저해작용을 갖는 반면, 화장품에 배합시 변색 및 경시변화에 따른 역가 저하 등 안정성에 문제점이 있으며, 피부자극이 커 사용상 한계가 있다. 아스코르빈산은 티로시나제 활성 저해효과가 낮고, 분자 자체의 안정성이 낮아 멜라닌 생성 억제제로 적합하지 않은 문제가 있다. 히드로퀴논은 피부에 대한 자극이 높아 안전성 문제로 현재 화장품 배합시에 그 사용성이 제한되는 문제가 있다. 또한, 대부분의 식물 추출물들은 고농도에서만 비교적 높은 티로시나제 활성 저해 효과를 나타내며, 저농도에서는 저해 효과가 거의 나타나지 않는 등의 문제점을 갖고 있다. 특히, 기존 멜라닌 생성 억제제들은, 실제 사람 피부에 대한 임상적인 실험시 미백효과가 미약하다는 가장 큰 문제점이 있다. Arbutin has excellent tyrosinase activity inhibiting action, but has problems in stability such as discoloration and decrease in potency due to aging change when it is added to cosmetics, and there is a limit in use due to skin irritation. Ascorbic acid has a problem that the effect of inhibiting the activity of tyrosinase is low and the stability of the molecule itself is low, which is not suitable as an inhibitor of melanogenesis. Hydroquinone has a problem that its usability is limited when it is mixed with cosmetics at present because of high safety of skin irritation. In addition, most plant extracts exhibit relatively high inhibitory effect on tyrosinase activity only at a high concentration, and the inhibitory effect is hardly exhibited at a low concentration. In particular, the existing melanin production inhibitors have the biggest problem that the whitening effect is weak in a clinical experiment on actual human skin.
한편, 하이드록시시트릭산은 구연산에서 파생된 것으로 가르시니아캄보지아 또는 히비스커스와 같은 다양한 열대 식물의 성분 중 하나로 알려져 있으며, 체지방 감소 또는 비만개선에 효과가 있는 것으로 나타나 꾸준히 연구되어 오고 있다. 그러나, 하이드록시시트릭산의 색소침착 제거 또는 피부미백에 대한 연구는 미미하다.
On the other hand, hydroxycitric acid, derived from citric acid, is known as one of various tropical plant components such as Garcinia cambogia or hibiscus and has been shown to be effective in reducing body fat or improving obesity and has been studied steadily. However, studies on the removal of pigmentation of hydroxycitric acid or skin whitening are insignificant.
본 발명은 미백 효능이 우수하며, 피부자극이 없는 유효성분을 함유하는 피부미백용 화장료 조성물을 개발하여 제공하는 것을 목적으로 한다.
It is an object of the present invention to develop and provide a skin whitening cosmetic composition containing an effective ingredient having excellent whitening efficacy and having no skin irritation.
본 발명은 하이드록시시트릭산(Hydroxycitric acid)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a cosmetic composition for skin whitening characterized by containing hydroxycitric acid as an active ingredient.
한편, 상기 하이드록시시트릭산은 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~30.0 중량% 함유되는 것이 좋다. 더욱 바람직하게는 하이드록시시트릭산이 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.01~10 중량% 함유되는 것이 좋다. 상기 추출물의 함량이 0.00001 중량% 미만인 경우에는 피부 개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 개선 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있고, 비경제적이다. On the other hand, the hydroxycitric acid is preferably contained in an amount of 0.001 to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. More preferably, the hydroxystic acid is contained in an amount of 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. When the content of the extract is less than 0.00001% by weight, the effect of improving the skin is not exhibited. When the content of the extract is more than 30.0% by weight, the degree of increase of the skin improving effect with respect to the content of the extract is insignificant, It is uneconomical.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 하이드록시시트릭산은 일 예로, 가르시니아캄보지아(Garcina cambogia)의 잎, 뿌리, 줄기, 가지, 껍질, 열매, 열매의 껍질 및 종자 등으로부터 추출하여 얻거나, 화합물 형태로 구입하여 사용할 수 있다. On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, the hydroxycitric acid is obtained by extracting from leaves, roots, stems, branches, bark, fruits, fruit husks and seeds of Garcina cambogia , It can be purchased and used in the form of a compound.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 하이드록시시트릭산은 추출시, 농축과 증발과정에서 락톤 형태 (lactone form)로 고리화가 쉽게 일어나기 ?문에, 칼륨, 칼슘, 나트륨의 염을 단독 또는 복합으로 결합시켜 안정화시키는 것이 좋다. On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, the hydroxystic acid easily cyclizes to a lactone form during concentration and evaporation during extraction, so that salts of potassium, calcium and sodium can be used singly or in combination To stabilize it.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 일 예로 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.On the other hand, the cosmetic composition of the present invention may contain components conventionally used in cosmetic compositions, and examples thereof may include conventional additives such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and fragrances, and carriers have.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 일 예로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있다. 다만, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다. 더욱 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.Meanwhile, the cosmetic composition of the present invention can be prepared in any formulations conventionally manufactured in the art, and examples thereof include solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant- , Oil, powdered foundation, emulsion foundation, wax foundation, pack, massage cream and spray. However, the present invention is not limited thereto. More specifically, it can be manufactured in the form of a soft lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray or a powder.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우, 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation is a paste, a cream or a gel in the cosmetic composition of the present invention, the carrier component may be an animal oil, a vegetable oil, a wax, a paraffin, a starch, a tragacanth, a cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, Talc or zinc oxide may be used.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 용액 또는 유탁액인 경우, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 일 예로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다. On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is a solution or an emulsion, a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethylcarbonate, ethyl acetate, Benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3-butylene glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan can be used.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 현탁액인 경우, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 등이 이용될 수 있다.On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is in the form of a suspension, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester , Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tragacanth, and the like may be used.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as the carrier component when the formulation is a powder or a spray, Propellants such as chlorofluorohydrocarbons, propane / butane or dimethyl ether.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우, 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is a surfactant-containing cleansing agent, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, sarcosinate, Fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, aliphatic alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative, or ethoxylated glycerol fatty acid ester.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형 또는 비누일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나, 떼어내거나, 물로 씻어낼 수도 있다. 일 예로, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누일 수 있고, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩일 수 있으며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔일 수 있다. 다만, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, when it is a cleansing formulation containing a surfactant or a cleansing formulation without a surfactant or a soap, it may be applied to the skin and then wiped off, peeled off, or rinsed with water. For example, the soap may be liquid soap, powdered soap, solid soap, and oil soap, and the surfactant-containing cleansing formulation may be a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing towel and a cleansing pack, A cleansing cream, a cleansing lotion, a cleansing water and a cleansing gel. However, the present invention is not limited thereto.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수도 있다.
On the other hand, the cosmetic composition of the present invention may be used singly or in combination, or may be used in combination with other cosmetic compositions other than the present invention. In addition, the cosmetic composition according to the present invention can be used according to a conventional method of use, and may be used in a different number of times depending on the skin condition or taste of the user.
본 발명의 하이드록시시트릭산(hydroxycitric acid)을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물은 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌 생성을 억제하여 피부 미백에 효과를 발휘한다.
The skin whitening cosmetic composition containing the hydroxycitric acid of the present invention as an active ingredient inhibits some reactions during the melanin production process, thereby inhibiting melanin production and exerting an effect on skin whitening.
이하, 본 발명의 내용에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
Hereinafter, the contents of the present invention will be described in more detail in the following examples, but the scope of the present invention is not limited to the following examples, but includes modifications of equivalent technical ideas.
[실시예 1: 하이드록시시트릭산의 제조][Example 1: preparation of hydroxycitric acid]
세절하여 음건한 가르시니아캄보지아(Garcinia cambogia) 열매와 껍질 100 g을 분쇄하여 이 분쇄물에 70% 에탄올 5 L를 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 300메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한번 여과하였다. 그 후, 칼슘을 넣고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 60℃ 온도에서 감압 농축하여, 13 g의 추출물을 수득하였다. 수득한 추출물을 클로로포름과 메탄올용액을 용매로 하여 세파덱스 LH-20 컬럼에 흘려주어 하이드록시시트릭산 분획을 받은 후, 감압농축기를 이용하여 농축하였다. 그 후, 에틸아세테이트 메탄올 조건에서 재결정하여 약 1.52 g의 하이드록시시트릭산을 최종 수득하였다.
Garcinia cambogia (100 g) and crushed garcinia cambogia (100 g) were pulverized, and 5 L of 70% ethanol was added to the pulverized product. The mixture was heated in an extractor equipped with a cooling condenser for 3 hours Respectively. The extract was filtered through a 300-mesh filter cloth, and then filtered once again with Watson-2 filter paper. Thereafter, calcium was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure at a temperature of 60 DEG C by a distillation apparatus equipped with a cooling condenser to obtain 13 g of an extract. The obtained extract was passed through a Sephadex LH-20 column using chloroform and a methanol solution as a solvent to obtain a hydroxycitric acid fraction, which was then concentrated using a vacuum concentrator. Thereafter, recrystallization under ethyl acetate-methanol gave about 1.52 g of hydroxystric acid.
[실험예 1: 티로시나제 활성 저해효과 비교][Experimental Example 1: Comparison of inhibitory effect of tyrosinase activity]
본 실험예에서는 상기 실시예 1의 하이드록시시트릭산의 티로시나제 활성 저해효과를 확인하고자 하였다. 이때, 미백제로 잘 알려진 상지추출물과 알부틴을 비교 샘플로 사용하였다. In this Experimental Example, the effect of inhibiting the tyrosinase activity of the hydroxystric acid of Example 1 was examined. At this time, upper limb extract and arbutin, well known as whitening agents, were used as comparative samples.
티로시나제는 생체 내에서 티로신(tyrosine)이라는 물질의 산화과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되도록 하는 효소이다. 티로시나제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 Sigma 사에서 구입하여 사용하였다. 기질인 L-티로신은 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 용해하여 0.1 ㎎/㎖ 용액으로 만들고, 하이드록시시트릭산은 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 적당한 농도로 조절하여 용해한 후 사용하였다. L-티로신 용액 0.5 ㎖를 시험관에 넣고 여기에 하이드록시시트릭산 0.5 ㎖를 가하고 37℃ 항온기에서 10분간 방치하였다. 그 후, 200 unit/㎖ 티로시나제 0.5 ㎖를 첨가하고 37℃에서 10분간 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음 위에 놓아 급냉시켜 반응을 중지시킨 후, 분광광도계를 파장 475 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 하이드록시시트릭산 대신 완충용액 0.5 ㎖를 넣은 것을 사용하였다. 이때, 티로시나제에 대한 활성 저해율(%)은 하기 수학식 1에 의하여 계산하였으며, 티로시나제 활성이 50% 저해될 때의 IC50의 값을 각 미백물질에 대해 측정하였다. 그 결과를 하기의 표 1에 나타내었다.
Tyrosinase is an enzyme that stimulates the oxidation of tyrosine in vivo to produce melanin. Tyrosinase was isolated and purified from mushrooms and purchased from Sigma. The substrate, L-tyrosine, was dissolved in 0.05 M sodium phosphate buffer solution (pH 6.8) to prepare a 0.1 mg / ml solution. Hydroxyacetic acid was dissolved in 0.05 M sodium phosphate buffer solution (pH 6.8) Respectively. 0.5 ml of L-tyrosine solution was put into a test tube, 0.5 ml of hydroxy-citric acid was added thereto, and the mixture was allowed to stand at 37 DEG C for 10 minutes. Thereafter, 0.5 ml of 200 units / ml tyrosinase was added, and the mixture was reacted at 37 占 폚 for 10 minutes. The reaction tube was placed on ice to quench the reaction, and the absorbance at 475 nm was measured by a spectrophotometer. As a control, 0.5 ml of buffer solution was used instead of hydroxystric acid. At this time, the inhibitory activity (%) against tyrosinase was calculated by the following equation (1), and the IC 50 value when the tyrosinase activity was inhibited by 50% was measured for each whitening substance. The results are shown in Table 1 below.
(하이드록시시트릭산)Example 1
(Hydroxycitric acid)
실험결과, 티로시나제 활성율 50%를 저해하는 하이드록시시트릭산의 농도는 18.4 ug/ml로, 상지추출물이 240.7 ug/ml, 알부틴이 200.5 ug/ml인 것을 고려할 때, 하이드록시시트릭산의 티로시나제 활성 억제효과가 월등이 우수한 것을 확인할 수 있었다.
As a result of the experiment, considering that the concentration of hydroxystic acid which inhibits 50% of tyrosinase activity is 18.4 ug / ml, that of upper limb extract is 240.7 ug / ml and that of arbutin is 200.5 ug / ml, It was confirmed that the tyrosinase activity inhibitory effect was superior.
[실험예 2: B16F1 멜라닌 형성 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 분석][Experimental Example 2: Analysis of inhibitory effect on melanin production using B16F1 melanin-forming cells]
본 실험예는 하이드록시시트릭산의 미백효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라닌 형성 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 보고 미백 효과를 평가하고자 하였다. 이때, 미백제로 잘 알려진 알부틴을 비교샘플로 사용하였다. In order to examine the whitening effect of hydroxysuccinic acid, the present experimental example was conducted to evaluate the inhibitory effect of melanin formation on B16F1 melanin-forming cells to evaluate the whitening effect. At this time, arbutin, well known as a whitening agent, was used as a comparative sample.
본 실험예에서 사용한 B16F1 멜라닌 형성 세포는 마우스에서 유래한 세포로, ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양받아 사용하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2×105 농도로 분주하고, 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 실시예 1의 하이드록시시트릭산을 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후, 세포를 트립신-EDTA로 떼어내고, 세포 수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 변형하여 실시하였다. 세포 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1 ml를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후, 마이크로 플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기 수학식 2에 의하여 계산하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.
The B16F1 melanin-forming cells used in this experiment were mouse-derived cells, and were used from ATCC (American Type Culture Collection). B16F1 melanocyte-forming cells were divided into 6-well plates at a concentration of 2 x 10 5 cells per well and treated with the hydroxystric acid of Example 1 at a concentration that did not cause toxicity after cells were attached and cultured for 72 hours. After 72 hours of culture, the cells were detached with trypsin-EDTA, the number of cells was measured, and the cells were recovered by centrifugation. Quantification of intracellular melanin was carried out by modification of the method of Lotan (Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980). The cell pellet was washed once with PBS, and 1 ml of a homogenization buffer solution (50 mM sodium phosphate, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) was added and vortexed for 5 minutes to disrupt the cells. After centrifugation (3,000 rpm, 10 min), 1N NaOH (10% DMSO) was added to the cell filtrate to dissolve the extracted melanin, and the absorbance of melanin was measured at 405 nm with a microplate reader. (%) Of melanin production was measured. Melanin formation inhibition rate (%) of B16F1 melanin-forming cells was calculated by the following equation (2), and the results are shown in Table 2 below.
A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양A: Amount of melanin in wells to which no sample was added
B: 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양
B: Amount of melanin in the well to which the sample was added
실험결과, 하이드록시시트릭산의 멜라닌 생성 억제능이 알부틴보다 우수하게 나타나는 것을 확인할 수 있었다(표 2).
As a result, it was confirmed that the ability of hydroxycitric acid to inhibit melanin production was superior to arbutin (Table 2).
[제조예 1: 하이드록시시트릭산을 함유하는 미백 화장료 조성물 제조] [Preparation Example 1: Preparation of whitening cosmetic composition containing hydroxystric acid]
본 제조예에서는 하이드록시시트릭산을 함유하는 미백 화장료 조성물을 제조하고자 하였다.In this Example, a whitening cosmetic composition containing hydroxycitric acid was prepared.
하기 표 3과 같이 조성하여 미백 화장료 조성물을 제조하였다.
The composition was prepared as shown in Table 3 below to prepare a whitening cosmetic composition.
[비교예 1: 알부틴을 함유하는 미백 화장료 조성물 제조][Comparative Example 1: Preparation of whitening cosmetic composition containing arbutin]
본 제조예에서는 알부틴을 함유하는 미백 화장료 조성물을 제조하고자 하였다.In this Production Example, a whitening cosmetic composition containing arbutin was prepared.
하기 표 4와 같이 조성하여 에센스 제형의 미백 화장료 조성물을 제조하였다.
The composition was prepared as shown in Table 4 below to prepare an essence-type whitening cosmetic composition.
[실험예 3: 피부미백 화장료 조성물의 미백 효능 분석][Experimental Example 3: Analysis of whitening effect of skin whitening cosmetic composition]
본 실험예에서는 상기 제조예 1의 하이드록시시트릭산을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과, 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물의 미백 효능을 알아보고자 하였다.In this Experimental Example, the whitening effect of the skin whitening cosmetic composition containing the hydroxyacetic acid of Production Example 1 as an active ingredient and the skin whitening cosmetic composition containing arbutin as an active ingredient of Comparative Example 1 was examined .
본 발명의 미백화장료 조성물의 임상 미백효능을 실험하기 위하여, 색소침착증을 가지고 있는 건강한 성인 여성 40명을 무작위로 20명씩 2개 그룹(A 및 B)으로 나눈 후, A 그룹을 대상으로는 제조예 1의 화장료 조성물을, B 그룹을 대상으로는 비교예 1의 미백화장료 조성물을 각각 1일 2회씩 8주간 도포하였다. 이후, 피부색의 변화를 스펙트로포토미터(Minolta CM600-d)를 이용하여 색의 밝기 변화(ΔL)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 미백효과를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 5에 타나내었다. 이때, 미백효능 정도를 다음의 7등급으로 평가하였다. In order to test the clinical whitening effect of the whitening cosmetic composition of the present invention, 40 healthy adult women with pheochromocytosis were randomly divided into two groups (A and B) by 20 persons, 1, and the whitening cosmetic composition of Comparative Example 1 was applied to the B group for 2 weeks, twice a day for 8 weeks. Subsequently, the change in skin color was measured by using a spectrophotometer (Minolta CM600-d) to measure a change in brightness (DELTA L) of the color, and objective visual observation with a plurality of experts and subjective visual observation with the subject were performed to obtain a whitening effect Respectively. The results are shown in Table 5 below. At this time, the degree of whitening efficacy was evaluated by the following seven grades.
<미백효능 평가 기준><Whitening efficacy evaluation standard>
-3: 매우악화 -2: 악화 -1: 약간 악화 0: 변화 없음-3: very bad -2: worse -1: slightly worse 0: no change
1: 약간 개선 2: 개선 3: 매우 개선 1: Slight improvement 2: Slight improvement 3: Slight improvement
실험결과, 본 발명의 하이드록시시트릭산을 함유하는 미백화장료 조성물을 도포한 A그룹의 평균 L값은 3.30(p<0.01)이며, 알부틴을 함유한 미백화장료 조성물을 도포한 B그룹의 평균 L값은 2.03(p<0.05)이었고, 숙련자에 의한 미백 평가에서 A그룹은 1.4, B그룹은 0.60이었으며, 피검자에 의한 미백 평가에서는 A그룹은 1.1, B그룹은 0.6으로 나타났다. As a result of the experiment, the average L value of the group A coated with the hydroxyacetic acid-containing whitening cosmetic composition of the present invention was 3.30 (p < 0.01), and the average L value of the group B coated with the whitening cosmetic composition containing arbutin The whitening value of the A group was 1.1 and the B group was 0.6 in the whitening test by the subject. The value of the whitening test was 2.03 (p <0.05).
이상의 결과를 통해, 본 발명의 하이드록시시트릭산을 함유하는 미백화장료 조성물이 기존의 알부틴을 함유하는 미백화장료 조성물보다 피부 미백 효능이 더 우수한 것으로 확인할 수 있었다.
From the above results, it was confirmed that the whitening cosmetic composition containing the hydroxystic acid of the present invention is superior in skin whitening efficacy to the existing whitening cosmetic composition containing arbutin.
[실험예 4: 제형의 안정성 실험][Experimental Example 4: Stability Test of Formulation]
본 실험예는 상기 제조예 1의 하이드록시시트릭산을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 및 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물의 제형 안정성을 알아보고자 하였다.This Experimental Example was conducted to examine the formulation stability of the skin whitening cosmetic composition containing the hydroxyacetic acid of Production Example 1 as an active ingredient and the skin whitening cosmetic composition containing arbutin as an active ingredient of Comparative Example 1.
상기 제조예 1의 하이드록시시트릭산을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과, 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물을, 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 각각 담아 2주 동안 보관하고, 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자용기에 담아 2주 동안 보관한 후, 변색 정도를 비교측정하였다.The skin whitening cosmetic composition containing the hydroxyacetic acid of Production Example 1 as an active ingredient and the skin whitening cosmetic composition containing arbutin as an active ingredient of Comparative Example 1 were placed in a thermostat kept constant at 45 캜 And stored in an opaque glass container for 2 weeks and kept in a completely shaded refrigerator maintained at 4 ° C in an opaque glass container for 2 weeks and then measured for discoloration.
실험 결과를 하기 표 6에 나타내었다. 이때, 제품 변색 정도는 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다. The experimental results are shown in Table 6 below. At this time, the degree of discoloration of the product was classified into the following six grades and evaluated.
<제품 변색 평가 기준>≪ Evaluation criteria of product discoloration >
0: 변화없음 1: 극히 조금 변함 2: 조금 변함 3: 조금 심하게 변함 0: No change 1: Extremely slightly changed 2: Slightly changed 3: Slightly changed
4: 심하게 변함 5: 극히 심하게 변함
4: Severely changed 5: Extremely severe
실험 결과, 본 발명의 하이드록시시트릭산을 함유하는 미백화장료는 변색이 거의 되지 않아, 제형으로서의 안정성이 훨씬 우수함을 알 수 있었다.
As a result of the experiment, it was found that the whitening cosmetic composition containing the hydroxycitric acid of the present invention hardly discolored and thus had a much better stability as a formulation.
[실험예 5: 피부 자극 실험][Experimental Example 5: Skin irritation test]
본 실험예는 상기 제조예 1의 하이드록시시트릭산을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물과, 비교예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물의 피부자극 정도를 알아보고자 성인 남, 여 20명을 대상으로 등부위에 5×20 cm 크기로 각 시료의 일정량(20 ㎕)을 각각 24시간 동안 첩포한 후, 제거하고, 1시간, 24시간 경과 후, 육안으로 피부상태 변화를 판독하였다. 실험 결과를 표 7에 나타내었다. 이때, 피부상태의 변화 정도는 다음의 피부상태 평가 기준에 따라 분류하여 평가하였다. This Experimental Example was conducted to examine the skin irritation degree of the skin whitening cosmetic composition containing the hydroxyacetic acid of Production Example 1 as an active ingredient and the skin whitening cosmetic composition containing arbutin as an active ingredient of Comparative Example 1 (20 ㎕) of each sample was applied for 24 hours on the back of the adult male and female in a size of 5 × 20 cm, and then removed. After 1 hour and 24 hours, the skin condition change . The experimental results are shown in Table 7. At this time, the degree of change of the skin condition was classified and evaluated according to the following skin condition evaluation standard.
<피부 상태 평가 기준><Criteria for skin condition>
0: 변화없음 1: 극히 조금 변함 2: 조금 변함 3: 조금 심하게 변함 0: No change 1: Extremely slightly changed 2: Slightly changed 3: Slightly changed
4: 심하게 변함 5: 극히 심하게 변함
4: Severely changed 5: Extremely severe
실험 결과, 본 발명의 하이드록시시트릭산을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물은 비교예 1의 조성물에 비해 피부 자극이 적은 것으로 나타났다.
As a result of the test, the skin whitening cosmetic composition containing the hydroxyacetic acid of the present invention as an active ingredient showed less skin irritation than the composition of Comparative Example 1. [
Claims (2)
상기 하이드록시시트릭산은 가르시니아캄보지아의 열매 및 껍질의 추출물로서 칼륨, 칼슘 또는 나트륨의 염의 형태인 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
It contains hydroxycitric acid as an active ingredient,
Wherein the hydroxycitric acid is an extract of fruit and skin of Garcinia cambogia and is in the form of a salt of potassium, calcium or sodium.
상기 하이드록시시트릭산은,
화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~30.0 중량% 함유되는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
The hydroxycitric acid may be,
Is contained in an amount of 0.001 to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
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|---|---|---|---|---|
| KR101712643B1 (en) | 2016-08-17 | 2017-03-06 | 여명바이오켐 주식회사 | Cosmetic composition for skin whitening with taxifolin or its derivative |
| KR20230078889A (en) | 2021-11-26 | 2023-06-05 | 주식회사 청안오가닉스 | Extraction method of hydroxycitric acid from Garcinia cambogia green tea catechins using supercritical fluid |
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2014
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