KR101451810B1 - 감마-아미노부티르산 생산능이 우수한 신규한 락토바실러스 플랜타룸 ｋ255 균주 - Google Patents

감마-아미노부티르산 생산능이 우수한 신규한 락토바실러스 플랜타룸 ｋ255 균주 Download PDF

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Abstract

본 발명은 감마-아미노부티르산(gamma-ammino butyric acid, GABA)생산능이 뛰어난 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum)Ｋ255 균주에 관한 것이다. 본 발명의 균주는 생리활성물질인 GABA 생산량이 매우 높고, 식중독 유발균에 대해 생장억제 활성이 있으며, 담즙내성과 강한 내산성을 가진다. 또한, 탈지유 뿐만 아니라 두유에서 더 우수한 산 생성 발효특성을 나타내므로, 발효유제품 뿐만 아니라 발효두유 제조를 위한 발효스타터 균주로 사용할 수 있다.

Description

감마-아미노부티르산 생산능이 우수한 신규한 락토바실러스 플랜타룸 Ｋ255 균주{Novel Strains of Lactobacillus plantarum K255 with High Productivity of Gamma-Aminobutyric Acid}
본 발명은 신규한 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) K255 균주에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 발효 두유 제조에 적합한 감마-아미노뷰티르산(Gamma-Aminobutyric Acid; GABA) 생산능이 있는 신규한 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) K255에 관한 것이다.
젖산균(lactic acid bacteria: LAB)은 치즈, 발효유 및 젖산균음료 등의 발효 유제품을 비롯하여 각종 발효 식품의 제조에 전 세계적으로 광범위하게 응용되고 있는 산업적으로 중요한 미생물이다. 발효유 및 김치 등의 발효식품 통해 섭취된 젖산균은 장내 유용균의 증식을 촉진하는 반면, 유해균의 증식을 억제하여 유익균이 우위를 차지하도록 장내 균총의 균형을 개선하며, 그 결과 장관 감염과 식중독의 방지, 장내 부패억제, 장의 운동을 촉진하여 변비방지, 면역력 증가, 발암 억제 및 비타민 B군의 생산 등 여러 가지 생리적 기능을 가지는 것으로 밝혀지고 있다. 최근에는 이렇게 우유 및 치즈 등에서 분리된 젖산균과는 별도로 식물성 젖산균의 장점이 부각되고 있다. 식물성 젖산균은 POLAB(Plant Originated Lactic Acid Bacteria)으로 지칭되어 일반 젖산균과 차별적으로 취급되고 있으며 동양에서 예로부터 섭취하던 절임류, 김치 등의 식물 원료의 발효 식품에서 분리된 젖산균을 말한다. 식물성 젖산균은 일반 동물성 젖산균과 비교하여 그 종류가 10배 이상 많을 뿐 아니라, 외부 환경에 대한 적응력이 뛰어나다. 즉 절임류와 같이 염분 농도가 높고, pH가 낮은 환경 및 김치와 같이 마늘 등의 항균물질이 많은 환경에서도 생육이 가능한 균주이다. 즉 한국의 김치는 고염분, 낮은 pH 및 천연 항균물질의 함량이 높은 상태이기 때문에 김치에서 분리되는 각종 균은 대표적인 식물성 젖산균이며 따라서 잘 숙성된 김치는 식물성 젖산균(POLAB)의 대표적인 보고라 할 수 있다. 이러한 특징을 가진 식물성 젖산균을 섭취할 경우에는 동물성 젖산균과 달리 산에 대한 저항성이 강하여 위에서의 생존률이 높고, 장까지 생존상태로 도달하는 수가 많다. 또한, 척박한 환경에서 생육하기 때문에 각종 생리활성 물질의 생산력이 뛰어난 경우가 많다. 그 대표적인 물질로는 항균펩타이드, 면역증강물질 및 감마-아미노부티르산(gamma-ammino butyric acid, GABA) 등을 꼽을 수 있다.
GABA는 비단백질 구성 아미노산으로서 뇌에서 신경전달물질로서의 역할뿐 아니라 뇌기능 촉진, 정신안정작용, 혈압저하작용, 이뇨작용, 간 기능 개선 작용, 비만 방지 작용, 알코올대사 촉진작용 및 소취작용 등 매우 다양한 생리기능을 갖는다. 특히 의약품으로 등록되어 뇌졸중 또는 뇌동맥 후유증에 의한 두통, 이명 및 의욕저하 등의 치료에 사용되고 있다. GABA는 각종 야채, 과일, 쌀, 콩 등에 널리 분포되어 있는 것으로 알려져 있으나 그 함량이 낮아 생리작용을 나타내지 못한다. 그러나 최근 일본에서는 GABA 함량을 높인 녹차, 쌀배아, 발아현미 등이 판매되면서 식품업계와 소비자의 관심이 고조되고 있다. 최근의 연구에 의하면 차 잎을 N2 가스에 6-8시간 동안 혐기처리 하여 생산한, GABA가 다량 함유된 차를 고혈압 환자에게 음용시킨 임상실험 결과 혈압을 낮출 수 있을 뿐 아니라 체내에 축적되지 않고 분해되기 때문에 부작용이 전혀 없는 자연 건강음료로서 사용할 수 있다는 사실이 입증되었다. 또한, GABA함량을 높인 쌀 배아, 발아현미제품의 생리기능 및 응용실험 결과에 의하면 뇌혈류를 증가시켜 산소 공급량을 많게 하며 뇌세포 대사 기능을 활발하게 함으로써 자율신경 실조증, 중풍 및 치매를 예방하고, 기억력 증진 및 불면 등에 효과가 있으며, 혈압저하 작용이 있어 순환기 질환 개선효과가 우수하고 간 기능 활성 및 알코올 대사 촉진 기능이 있어 숙취제거 기능도 있는 것으로 밝혀졌다. 따라서 GABA는 최근에 생리활성기능이 매우 우수한 소재로서 각광을 받고 있으며 그 응용여부에 따라 무한한 시장성을 확보할 수 있는 기능성 소재이다.
GABA를 생산하는 젖산균에 관한 연구로는 문헌 "Nomura et al. International Journal of Systematic Bacteriology. 49, 163, 1999"에서 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)가 GABA를 생산하는 능력이 있음을 밝힌 바 있다. 한편, 한국특허출원 제10-2010-0068711호에는 GABA을 생산하는 능력을 갖는 락토바실러스 플란타룸이 기재되어 있고, 한국등록특허 제10-0549094호에는 감마-아미노부티르산(GABA)를 생산하는 락토바실러스속 균주로서 락토바실러스 사케이, 락토바실러스 브레비스 균주가 개시되어 있으며, 한국등록특허 제10-0631857호에는 감마아미노부티르산(GABA) 고생산성 균주인 락토바실러스 브레비스 오피케이-3가 개시되어 있고, 한국등록특허 제10-0755508호에는 GABA 생산 균주로서 신규한 락토바실러스 크리스파터스 균주가 개시되어 있다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
한국특허출원 제10-2010-0068711호 한국등록특허 제10-0549094호 한국등록특허 제10-0631857호 한국등록특허 제10-0755508호
Nomura et al. International Journal of Systematic Bacteriology. 49, 163, 1999
본 발명자들은 감마-아미노부티르산(gamma-ammino butyric acid, GABA) 생산능이 뛰어난 새로운 식물성 젖산균을 발굴하기 위해 연구하였다. 그 결과, 김치로부터 GABA 생성능이 매우 우수한 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) K255 균주를 분리 및 동정하는데 성공하였으며, 이 균주의 발효제품에 대한 응용가능성을 실험적으로 확인하여 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 감마-아미노부티르산 생산능이 우수한 신규 젖산균주를 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 균주를 포함하는 발효 출발 물질 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 발효 출발 물질 조성물을 발효시켜 제조한 발효물을 제공하는데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 발효물을 포함하는 식품 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 목적 및 장점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구의 범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 감마-아미노부티르산(gamma-aminobutyric acid) 생산능이 우수한 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)Ｋ255 (수탁번호: KACC91794P) 균주를 제공한다.
본 발명의 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) Ｋ255 균주는 식물성 젖산균으로서 김치에서 분리하였으며, 후술하는 실시예에 기재된 방법에 따라 스크리닝 및 동정하였다. 본 발명의 미생물의 동정은 미생물의 형태학적, 생리학적 및 생화학적 특성을 기초로 하여 이루어졌다.
미생물 분리 및 동정
본 발명자들은 각각 지역과 종류가 다른 김치를 수거하여 미생물 분리 원천으로 사용하였으며, 펩톤(peptone) 희석액으로 희석하여 NaN3를 첨가한 변형 MRS배지(하기 실시예 1의 표 1 참조)에 0.1 ㎖ 씩 평면도말법으로 접종한 후 37℃에서 48시간 배양하고 각 균락을 변형 MRS배지에서 순수 분리한 다음 노란색으로 변한 균락을 잠정적 젖산균으로 선발하였다. 선발된 균주는 전기 변형 MRS 배지에 도말한 후, 호기 배양하여 순수분리 하였다. 순수 분리된 균주를 동정한 결과, 균주는 그람양성의 간균이며, 산소유무와 상관없이 잘 생장하고 카탈라아제와 운동성에 대해서는 음성으로 확인되었다. 또한, 15℃와 45℃에서 생장하였으며, 글루코오스(glucose)로부터 가스와 알긴산으로부터 암모니아를 생성하지 않아 락토바실러스(Lactobacillus) 속(genus)에 속하는 것으로 확인하였다. 한편, 종명을 확인하기 위하여 49종의 당 발효 시험을 실시한 결과, 글루코스 등 21종의 당으로부터 산을 생성하였고(하기 실시예의 표 3 참조), ATB 동정시스템에 입력하여 조사한 결과와 16S rRNA 유전자 염기서열(Gene Sequence)을 이용하여 얻어진 결과가 일치되어 락토바실러스 플랜타룸((L. plantarum)인 것으로 최종 동정하였다. 본 발명의 김치에서 분리한 GABA 생성능력이 우수한 균주를 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) K255로 명명하고, 2013년 2월 28일 농업생명공학연구원 한국농업미생물자원센터(KACC)에 수탁번호 KACC91794P로 기탁하였다.
미생물의 생장
생균수와 pH를 측정하여 본 발명 젖산균의 생장을 시험한 결과, 생장최적온도는 37℃이었으며, 발효제품의 최적 pH 조건인 pH 4.3-4.4에 도달하는데 13시간 소요된다.
항생제 내성
항생제 내성시험을 위해 항생제 존재하에서 생장여부를 관찰하여 항생제의 최저억제농도(MIC, minimal inhibitory concentration) 값을 측정한 결과, 타 계열의 항생제에 비해 가나마이신과 반코마이신에 대해 내성이 있는 반면, 바시트라신에 감수성이 높았다(하기 실시예 표 4 참조).
효소 활성
분리한 본 발명 젖산균에 대한 효소활성시험을 수행한 결과, 류신 아릴아미다제, β-갈락토시다제, β-글루코시다제 및 N-아세칠-β-글루코스아민니다제에서 효소 활성이 높게 나타났다. 또한, 벤조피렌(Benzopyrene)을 발암성 물질로 전환시키는 발암효소인 β-글루쿠로니다제(β-glucuronidase)의 경우에는 효소활성이 없는 것으로 나타나 안전성을 확인할 수 있었다.
담즙내성 및 pH 내성
본 발명 젖산균을 MRS 배지에서의 성장을 시험하여 담즙에 대한 내성을 측정한 결과, 7 시간 배양 후 담즙을 첨가하지 않을 때와 첨가할 때와는 0.4 log의 차이로 약간 억제를 받기는 하나 담즙에 대한 충분한 내성을 보유하는 것으로 확인되었다. 또한, pH 내성을 시험한 결과, 대조구 pH인 6.4에 비해 강산인 pH 2에서 조차도 거의 생장에 영향을 받지 않음에 따라 강한 내산성을 가지고 있음을 확인하였다.
항균력
항균력 시험에서는 본 발명의 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255가 에스케리키아 콜리(Escherichia coli) 생장에 대해 31％의 억제력을 보였고, 살모넬라 타이피머리움(Salmonella typhimurium)생장에 대해서는 29.2％로서 비슷한 억제력을 나타내었다. 스테피로코커스 오레우스(Staphylococcus aureus)의 생장에 대해서 22.7％로서 다른 식중독균에 비해 약간 억제력이 낮았다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)Ｋ255 (수탁번호: KACC91794P) 균주가 접종된 발효기질을 포함하는 발효 출발 물질 조성물을 제공한다.
본 발명의 젖산균은 발효 출발 물질의 스타터(starter) 균주로서 사용가능하다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 발효 출발 물질 조성물에서 상기 발효기질은 두유이다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 발효 출발 물질 조성물을 발효시켜 제조한 발효물로서, 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)Ｋ255 (수탁번호: KACC91794P) 균주 및 감마-아미노부티르산이 포함된 발효물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)Ｋ255 (수탁번호: KACC 91794P) 균주 및 감마-아미노부티르산이 포함된 발효물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 감마-아미노부티르산(gamma-ammino butyric acid, GABA)생산능이 뛰어난 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum)Ｋ255 균주에 관한 것이다. 본 발명의 균주는 생리활성물질인 GABA 생산량이 매우 높고, 식중독 유발균에 대해 생장억제 활성이 있으며, 담즙내성과 강한 내산성을 가진다. 또한, 탈지유 뿐만 아니라 두유에서 더 우수한 산 생성 발효특성을 나타내므로, 발효유제품 뿐만 아니라 발효두유 제조를 위한 발효스타터 균주로 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 젖산균 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum)Ｋ255에 대해 MRS 액체 배지를 사용하여 34℃, 37℃ 및 40℃에서의 24시간 동안 생장률을 측정한 결과이다.
도 2는 본 발명의 젖산균 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum)Ｋ255에 대해 MRS 액체 배지를 사용하여 34℃, 37℃ 및 40℃에서의 24시간 동안 배지에서의 pH 변화를 측정한 결과이다.
도 3은 본 발명의 젖산균 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum)Ｋ255의 담즙내성을 측정한 결과이다.
도 4는 본 발명의 젖산균 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum)Ｋ255의 탈지유와 두유에서의 발효 특성을 측정한 결과이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예
실시예 1: 미생물의 분리
시료로 사용된 김치는 각각 지역과 종류가 다른 가정에서 수거하여 브롬크레졸 퍼플(Bromcresol purple)과 소듐아자이드(sodium azide)를 첨가한 변형 MRS 배지(표 1 참조)에 0.3 ㎖씩 평면도말법으로 접종한 후 37℃에서 48시간 배양하였다. 그런 다음, 각각의 균락을 상기한 변형 MRS 배지에서 순수분리하고, 노란색으로 변한 균락을 잠정적 젖산균으로 선발하였다. 선발된 균주는 상기 변형 MRS 배지에 3회 백금이로 도말한 후 호기배양 하여 순수분리 하였다. 하기 표 1은 미생물 분리에 사용된 변형 MRS 배지의 조성을 나타낸다.
성분 성분비(g/l)
프로테오스 펩톤 #3 10.0
쇠고기 추출물 10.0
효모 추출물 5.0
락토오스 20.0
트윈 80 1.0
암모늄 시트레이트 2.0
소디움 아세테이트 5.0
마그네슘 설페이트 0.1
망간 설페이트 0.05
디포타슘 포스페이트 2.0
소듐 아자이드 0.25
브롬크레졸 퍼플 0.04
실시예 2: GABA 생성 식물성 젖산균주 선발
GABA 함량이 500μg/㎖ 이상인 균주 75종을 3회 반복하여 정량하였고, 이중 900μg/㎖ 이상인 균주 7종에 대해 수준별로 MSG를 MRS배지에 첨가한 후 37℃에서 18시간 배양한 후 pH와 GABA 생성량을 측정하였다. 그 결과는 다음 표 2에 나타내었는 바, 표 2에는 MSG 첨가 수준별 pH 및 GABA 생산량을 측정한 결과가 정리되어 있다.
Figure 112013024013031-pat00001
상기 표 2에서 보는 바와 같이 분리된 젖산균 K255 균주는 GABA 생성량이 다른 균주에 비해 가장 안정적으로 MSG 첨가 수준별로 증가하는 경향을 보임에 따라 GABA 생산능력이 우수한 균주임을 확인하였고 이 균주를 선발하였다.
실시예 3: 미생물의 동정
미생물의 분류학적 동정은 Hammes 등[The prokaryotes, 1563-1578, 2nd Edition, Springer-Verlag Co.(1992)]의 방법에 따라 수행하였으며, 그 결과는 표 3에 나타내었다. 이들 균주는 모두 그람 양성, 간균이었으며, 산소유무와 상관없이 잘 생장하였고, 카탈라아제와 운동성은 음성이었다. 또한, 15℃와 45℃에서는 생장하였으며 포도당(glucose)으로부터 가스(gas)와, 아르기닌(arginine)으로부터 암모니아를 생성하지 않아 락토바실러스(Lactobacillus) 속(genus)에 속하는 균임을 확인하였다. 종(species)을 동정하기 위하여 API 50CHL kit(API bioMerieux, France)를 이용하여 49종의 당발효 시험을 실시하였을 때 글루코스 등 21종으로부터 산을 생성하였고, ATB 동정시스템에 입력하여 조사한 결과와 16S rRNA 유전자 염기서열을 이용하여 얻어진 결과가 일치되어 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)으로 판명되었다. 상기 과정을 통해 김치에서 분리한 GABA 생성능력이 우수한 균주를 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) K255로 명명하고, 2013년 2월 28일 농업생명공학연구원 한국농업미생물자원센터(KACC)에 수탁번호 KACC91794P로 기탁하였다.
아래 표 3은 본 발명 신규 젖산균 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255의 생리적 및 생화학적 특성을 정리하여 나타내었다.
Figure 112013024013031-pat00002
실시예 4: 미생물의 생장시험
젖산균의 생장은 생균수 및 pH를 측정하여 시험하였다. 생균수는 MRS 액체배지 150 ㎖에 젖산균을 1 ㎖용 피펫으로 1 방울 접종한 후 34℃, 37℃, 40℃에서 3시간 간격으로 24시간 까지 배양한 각 시료를 0.1％ 펩톤용액에 희석하여 BCP plate count agar 평판에서 부어 굳힌 후 35℃에서 48시간 배양하여 계수하였고, 온도 및 시간별로 pH 변화를 측정하였다. 측정 결과는 도 1 및 도 2에 나타내었다. 도 1과 도 2에서 볼 수 있는 바와 같이 젖산균 생장 최적온도는 37℃이었으며, 발효제품의 최적 pH 조건인 pH 4.3 - 4.4에 도달하는데 13 시간 소요되었다.
실시예 5: 항생제 내성시험
항생제 내성시험은 트립틱 소이 브로스(tryptic soy broth, Difco, USA)를 사용하여 2배 희석방법에 의해 생장여부를 관찰하여 최저억제농도(MIC) 값을 정하였으며, 측정한 결과는 표 4에 나타내었다. 아래 표 4에는 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255의 항생제 감수성을 측정한 결과가 나타나 있다.
Figure 112013024013031-pat00003
상기 표 4에서 볼 수 있는 바와 같이 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255는 타 계열의 항생제에 비해 가나마이신과 반코마이신에 대해 내성이 있는 반면 바시트라신에 감수성이 높았다.
실시예 6: 효소활성시험
효소활성시험은 MRS 액체배지에서 37℃, 18시간 동안 배양한 균주를 생리식염수로 희석하여 105 - 106 cfu/㎖ 수준의 시료를 조제한 후, API ZYM 키트(API bioMerieux, France)를 이용하여 37℃에서 5시간 동안 배양한 다음 효소반응을 시켰다. 효소활성은 표준색상표를 비교하여 0-5의 수치로 표시한 결과는 표 5에 나타내었다. 아래 표 5는 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255의 효소활성을 비교한 결과이다.
Figure 112013024013031-pat00004
*: 0에서 5까지 단계별로 표준색이 명시되어 있으며, 0은 음성이고 5는 최대의 강도를 나타낸다. 1은 5 나노몰(nanomoles), 2는 10 나노몰, 3은 20 나노몰, 4는 30 나노몰, 5는 40 나노몰 이상의 효소활성을 나타낸다.
상기 표 5에서 볼 수 있는 바와 같이, 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255는 류신아릴아미다제, β-갈락토시다제, β-글루코시다제 및 N-아세칠-β-글루코스아민니다제에서 효소 활성이 높게 나타났다. 벤조피렌(Benzopyrene)을 발암성 물질로 전환시키는 발암효소인 β-글루쿠로니다제(β-glucuronidase)의 경우에는 효소활성이 없는 것으로 나타나 안전성을 확인할 수 있었다.
실시예 7: 담즙내성시험
담즙내성시험은 길리랜드와 월커의 방법(Gilliland & Walker, J. Dairy Sci., 73, 905, 1990)에 따라 측정하였으며, 측정 결과는 도 3에 나타내었다. 도 3에서 볼 수 있는 바와 같이 7 시간 배양 후 담즙을 첨가하지 않을 때와 첨가할 때와는 0.4 log의 차이로 약간 억제를 받기는 하나 담즙에 대한 내성이 있는 것으로 나타났다.
실시예 8: pH 내성시험
pH 내성 시험은 클라크 등의 방법(Clark et al., Cultured Dairy Products J., 28(4), 11, 1993)에 따라 측정하였으며, 측정 결과는 표 6에 나타내었다. 아래 표 6에는 염산용액에서 3시간 후의 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255 내성을 비교한 결과를 나타내었다.
Figure 112013024013031-pat00005
상기 표 6에서 볼 수 있는 바와 같이 본 발명의 균주는 대조구 pH인 6.4에 비해 강산인 pH 2에서 조차도 생장에 거의 영향을 받지 않음에 따라 매우 강한 내산성을 가짐을 확인할 수 있었다.
실시예 9: 항균력 시험
항균력 시험은 길리랜드와 스펙(Gilliland & Speck, J. Food Prot., 40(12), 820, 1977)에 따라 측정하였으며, 측정 결과는 아래 표 7에 나타내었다. 아래 표 7은 MRS 배지에서 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255 식중독균 억제(*)활성을 측정한 결과이다.
Figure 112013024013031-pat00006
상기 표 7에서 볼 수 있는 바와 같이, 본 발명의 균주 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255가 에스케리키아 콜리(Escherichia coli)에 대해 31％의 억제력을 보였고, 살모넬라 타이피머리움(Salmonella typhimurium)에 대해서는 29.2％로서 비슷한 억제력을 나타내었다. 스테피로코커스 오레우스(Staphylococcus aureus)에 대해서는 22.7％로서 다른 식중독균에 비해 약간 억제력이 낮았다.
실시예 10: 락토바실러스 플랜타룸( L. plantarum ) K255 균주의 제품적용을 위한 pH 변화
본 발명의 균주가 GABA가 증진된 발효두유 스타터로서 적합한지 여부를 확인하기 위하여 락토바실러스 플랜타룸(L. plantarum) K255를 탈지유와 두유에 배양하면서 시험에 사용하였다. 탈지유와 두유에 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus
plantarum) K255를 각각 1.0％씩 접종하고 37℃에서 3시간 별로 24시간까지 배양한 후의 pH 변화를 측정하였으며, 측정결과는 도 4에 나타내었다. 도 4에서 볼 수 있는 바와 같이 탈지유와 두유 모두에서 발효가 이루어졌으며, 탈지유 보다 두유에서 산 생성능이 더 높게 나타냈다. 따라서, 본 발명의 젖산균은 발효유와 발효두유의 스타터 균주로 사용될 수 있으나, 발효유보다는 발효두유에 더 적합한 것으로 나타났다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
농업생명공학연구원 KACC91794P 20130228

Claims (5)

  1. 식중독균에 대한 항균활성, 내산성 및 내담즙성을 가지면서, 감마-아미노부티르산(gamma-aminobutyric acid) 생산능이 우수한 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)Ｋ255 (수탁번호: KACC91794P) 균주.
  2. 식중독균에 대한 항균활성, 내산성 및 내담즙성을 가지면서, 감마-아미노부티르산(gamma-aminobutyric acid) 생산능이 우수한 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)Ｋ255 (수탁번호: KACC91794P) 균주가 접종된 발효기질을 포함하는 발효 출발 물질 조성물로서, 상기 발효기질은 우유 또는 두유인 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 삭제
  4. 제 2 항의 발효 출발 물질 조성물을 발효시켜 제조한 발효물로서, 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)Ｋ255 (수탁번호: KACC91794P) 균주 및 감마-아미노부티르산이 포함된 발효물.
  5. 제 4 항의 발효물을 포함하는 식품 조성물.
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