KR101346626B1 - 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법 - Google Patents

유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 유산균(lactic acid bacteria) 및 효소(enzyme)의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법에 관한 것으로서 보다 상세하게는 홍삼액에 1차 발효원을 접종하고 1차 발효시킨 후 1차 발효원을 불활성화시키는 단계; 상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원을 접종하고 2차 발효시킨 다음 여과하고 2차 발효원을 불활성화시키는 단계를 포함하는 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법 및 동 방법에 의해 제조한 홍삼액에 관한 것이다.

Description

유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법{Red ginseng liquid using two step fermentation of lactic acid bacteria and enzyme}
본 발명은 유산균(lactic acid bacteria) 및 효소(enzyme)의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법에 관한 것으로서 보다 상세하게는 홍삼액에 1차 발효원을 접종하고 1차 발효시킨 후 1차 발효원을 불활성화시키는 단계; 상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원을 접종하고 2차 발효시킨 다음 여과하고 2차 발효원을 불활성화시키는 단계를 포함하는 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법 및 동 방법에 의해 제조한 홍삼액에 관한 것이다.
인삼의 학명인 "Panax ginseng"에서 "Panax"는 그리스어로써 모든 것을 뜻하는 "Pan(all)"과 치료를 의미하는 "Axos(cure)"가 합쳐진 것으로 만병통치약을 지칭한다. 인삼의 종류는 세계적으로 6∼7종(種)이며, 약용으로 사용되는 것은 3종 정도이다.
우리나라와 극동아시아 지역의 고려인삼과 중국 남부의 전칠삼(Panax Notoginseng) 그리고 미국과 캐나다에서 생산되는 서양삼(Panax Quinquefolium) 등이 있다. 그러나 이중에서 고려인삼만이 사람을 닮았다 하여 사람"人"자를 사용하며 가장 우수한 품질로 인정받고 있다.
인삼과 홍삼의 효능은 약리성분인 사포닌(saponin)에 의해 나타나게 되는데 사포닌은 인삼에 함유된 배당체라 해서 달리 진세노사이드(ginsenoside)라고 불린다.
인삼의 약리성분은 사포닌 자체가 약효를 나타내는 것이 아니라, 사람의 장내(腸內)에 서식하고 있는 미생물에 의해 사포닌의 당(glucose)이 분해되어 사포닌 대사물로 전환되어야만 인체로 흡수되어 약효가 발현되는 것이다. 그러나 인체내에서 사포닌을 분해하여 흡수시키는 미생물은 개인마다 차이가 있어 인삼이나 홍삼을 동일한 조건으로 복용한다고 하더라도 개인에 따라 서로 다른 효과를 나타내거나 또는 효과가 없는 사례가 확인되었다.
2004년 한국식품영양학과학회에 보고된 "한국인의 장내 미생물에 의한 사포닌 분해 능력의 개인차"라는 논문에 따르면, 한국인 중 37.5％는 사포닌을 분해할 수 있는 효소가 아예 없거나 효소 성분 중 일부가 결여되어 있어 사포닌을 제대로 분해할 수 없는 상태인 것으로 나타났다. 그렇기 때문에 사포닌 분해효소가 아예 없거나 적은 사람은 아무리 인삼이나 홍삼을 많이 복용하여도 인체에서 활용이 되지 못하고 배설하게 되므로, 사포닌 분해효소가 아예 없거나 적은 사람은 장내 미생물에 의해 사전에 분해된 사포닌을 섭취하는 것이 좋다. 즉 발효홍삼을 섭취하는 것이 권장되는 것이다.
인체에 서식하는 미생물을 활용하여 홍삼을 발효시키면 사포닌에 붙어있던 여러개의 당이 미생물 대사에 의해 제거되고, 당이 1개인 저분자형의 "대사사포닌" 즉 "흡수형사포닌" 형태로 변환되어서 장관에서의 흡수가 용이하게 된다. 물론 발효기술의 차이에 따라서 당이 2,3개 이상 남을 수 있지만 당을 1개 가지는 단당 사포닌을 생산하는 기술이 가장 유용한 기술이다. 현재까지 연구된 바에 의하면 단당 사포닌이 인체내에서 가장 흡수율이 높고 효과도 좋으며 광범위한 효능을 발휘한다.
사포닌은 화학적으로 배당체(配當體, glycoside)라 부르는 화합물의 일종으로 사포닌 수용액은 흔들면 비누처럼 미세한 거품을 내는 성질을 가지고 있어 그리스어 'sapo'(비누)에서 유래된 말이다. 사포닌 성분은 주로 식물에 광범하게 분포되어 있고(약 7백50종), 해삼, 불가리스 등 일부 해양 동물에도 함유되어 있다. 사포닌을 함유한 동식물은 예부터 동양의학에서 세정, 거담, 진해를 목적으로 의약품에 응용되어 왔으며 현대에는 소염, 해열, 건위, 항종양, 이뇨, 강장 등의 약효가 확인 보고되고 있다.
사포닌의 화학구조는 당 부분 sugar(glycoside)과 비당부분 non-sugar(aglycoside)으로 구성되어있는 배당체이다. 비당부분을 사포게닌(sapogenin)이라 부른다. 사포닌은 비당부분의 골격 구조에 따라 크게 트리테르페노이드(triterpenoid)계 사포닌, 스테로이드(steroid)계 사포닌의 두 가지로 분류한다. 인삼 사포닌은 거의 트리테르페노이드계의 담마란(dammarane)계 사포닌으로서 인삼(panax)속 식물에만 존재하는 특유의 사포닌이다. 인삼이 다른 사포닌 함유 식물과 차별되는 약리 효능을 갖는 것은 이 때문이다.
지금까지 밝혀진 인삼 사포닌(ginsenoside)은 31종이다. 일반적으로 식물의 사포닌은 용혈작용(혈구를 녹이는 작용)을 나타내는 것이 보통이나 인삼사포닌은 약성이 매우 온화하고 과량 투여에 의한 독성이 없을 뿐만 아니라 용혈작용이 거의 없다는 것이 밝혀졌다. 인삼을 장기 복용해도 몸에 해롭지 않는다는 것은 옛날부터 전해져온 것이다.
본 발명은 홍삼액에 유산균 및 효소 중의 어느 하나를 1차 발효원으로 발효시킨 후 유산균 및 효소 중의 어느 하나를 2차 발효원으로 발효시키되, 이때 2차 발효원은 1차 발효원과 다른 성분으로 발효시켜서 혈소판 응집억제 작용, 항트롬빈, 선용활성화 작용, 기억감퇴 개선, 아세틸 알코올 유도, 카테콜아민 분비 억제 및 세포내 칼슘 유입 억제 작용, 암세포 전이억제 작용, 항암제의 내성 억제 작용이 우수한 것으로 알려진 진세노사이드 Rh1, 진세노사이드 F2, 진세노사이드 Rg2, 진세노사이드 Rg3의 함량을 증가시킨 홍삼액의 제조방법 및 동 방법에 의해 제조한 홍삼액을 제공하고자 한다.
본 발명의 목적은 진세노사이드 Rh1, 진세노사이드 F2, 진세노사이드 Rg2, 진세노사이드 Rg3의 함량이 높은 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법을 제공하고자 한다.
본 발명의 다른 목적은 상기에서 언급한 방법에 의해 제조한 진세노사이드 Rh1, 진세노사이드 F2, 진세노사이드 Rg2, 진세노사이드 Rg3의 함량이 높은 홍삼액을 제공하고자 한다.
본 발명은 홍삼액에 1차 발효원을 접종하고 1차 발효시킨 후 1차 발효원을 불활성화시키는 단계; 상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원을 접종하고 2차 발효시킨 다음 여과하고 2차 발효원을 불활성화시키는 단계를 포함하는 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법을 제공하고자 한다.
본 발명은 상기에서 언급한 홍삼액의 제조방법에 의해 제조한 홍삼액을 제공하고자 한다.
본 발명에 의해 제조한 홍삼액은 홍삼액을 유산균 및 효소의 2단계 발효에 의해 발효를 시킴으로써 보통의 홍삼액에 비해 혈소판 응집억제 작용, 항트롬빈, 선용활성화 작용, 기억감퇴 개선, 아세틸 알코올 유도, 카테콜아민 분비 억제 및 세포내 칼슘 유입 억제 작용, 암세포 전이억제 작용, 항암제의 내성 억제 작용이 우수한 것으로 알려진 진세노사이드 Rh1, 진세노사이드 F2, 진세노사이드 Rg2, 진세노사이드 Rg3의 함량이 높은 홍삼액을 제공할 수 있다.
도 1은 실시예 1에서 제조한 1차 발효원인 유산균 및 2차 발효원인 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조공정도이다.
도 2는 실시예 2에서 제조한 1차 발효원인 효소 및 2차 발효원인 유산균의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조공정도이다.
도 3a는 실시예 1에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이고, 도 3b는 실시예 2에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4a는 비교예 1에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이고, 도 4b는 비교예 2에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 제조예의 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 실시예 31에서 제조한 1차 발효원인 유산균 및 2차 발효원인 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액의 제조공정도이다.
도 7은 실시예 39에서 제조한 1차 발효원인 효소 및 2차 발효원인 유산균의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액의 제조공정도이다.
본 발명은 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법을 나타낸다.
본 발명은 홍삼액에 1차 발효원을 접종하고 1차 발효시킨 후 1차 발효원을 불활성화시키는 단계; 상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원을 접종하고 2차 발효시킨 다음 여과하고 2차 발효원을 불활성화시키는 단계를 포함하는 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법을 나타낸다.
상기에서 홍삼액은 홍삼을 착즙하여 얻은 홍삼착즙액을 농도가 10∼20brix가 되도록 조절한 홍삼액을 사용할 수 있다.
상기에서 홍삼액은 홍삼을 열수로 추출하여 얻은 홍삼추출액을 농도가 10∼20brix가 되도록 조절한 홍삼농축액을 사용할 수 있다.
상기의 홍삼농축액의 일예로서 홍삼을 홍삼 중량 대비 8∼20배량의 정제수에 첨가하고 90∼120℃에서 최초 정제수의 부피 대비 5∼50％가 되도록 추출한 후 여과수단에 의해 여과하여 얻은 홍삼추출액을 농도가 10∼20brix가 되도록 조절한 홍삼농축액을 사용할 수 있다.
상기의 홍삼농축액의 일예로서 홍삼을 홍삼 중량 대비 8∼20배량의 정제수에 첨가하고 90∼120℃에서 최초 정제수의 부피 대비 5∼40％가 되도록 추출한 후 여과수단에 의해 여과하여 얻은 홍삼추출액을 농도가 10∼20brix가 되도록 조절한 홍삼농축액을 사용할 수 있다.
상기의 홍삼농축액의 일예로서 홍삼을 홍삼 중량 대비 8∼20배량의 정제수에 첨가하고 90∼120℃에서 최초 정제수의 부피 대비 5∼30％가 되도록 추출한 후 여과수단에 의해 여과하여 얻은 홍삼추출액을 농도가 10∼20brix가 되도록 조절한 홍삼농축액을 사용할 수 있다.
상기의 홍삼농축액의 일예로서 홍삼을 홍삼 중량 대비 8∼20배량의 정제수에 첨가하고 90∼120℃에서 최초 정제수의 부피 대비 5∼20％가 되도록 추출한 후 여과수단에 의해 여과하여 얻은 홍삼추출액을 농도가 10∼20brix가 되도록 조절한 홍삼농축액을 사용할 수 있다.
상기의 홍삼액을 얻기 위한 재료인 홍삼은 시중에서 상품으로 판매되고 있는 것을 사용할 수 있다.
상기의 홍삼액을 얻기 위한 재료인 홍삼은 인삼을 80∼100℃의 수증기(steam)로 3∼6시간 동안 증숙하고 상온의 공기중에서 20∼25℃로 냉각하는 증숙 및 냉각공정을 1∼9회 실시하여 얻은 홍삼을 사용할 수 있다.
상기에서 1차 발효원은 유산균 및 효소 중에서 선택된 어느 하나를 사용할 수 있다.
상기에서 2차 발효원은 유산균 및 효소 중에서 선택된 어느 하나를 사용할 수 있으며, 이때 2차 발효원은 1차 발효원과 다른 성분을 사용한다. 즉, 1차 발효원으로 유산균을 사용하는 경우 2차 발효원은 효소를 사용하고, 1차 발효원으로 효소를 사용하는 경우 2차 발효원은 유산균을 사용하는 것이다.
상기에서 1차 발효원으로 유산균을 사용하고 2차 발효원으로 효소를 사용하는 경우 홍삼액에 1차 발효원인 유산균을 홍삼액 부피 대비 0.5∼5％(v/v)로 접종하고 25∼37℃에서 24∼48시간 동안 10∼50rpm으로 교반하며 발효시킨 후 80∼130℃에서 5∼30분하여 1차 발효원인 유산균을 불활성화시킨 다음 상기의 1차 발효원인 유산균의 불활성화 후 2차 발효원으로 효소를 홍삼액 부피 대비 0.5∼5％(v/v)로 접종하고 60∼70℃에서 2∼6시간 동안 10∼50rpm으로 교반하며 발효시킨 후 여과하고 80∼130℃에서 5∼30분 처리하여 2차 발효원인 효소를 불활성화시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 홍삼액을 제조할 수 있다.
상기에서 1차 발효원으로 유산균을 사용하고 2차 발효원으로 효소를 사용하는 경우 홍삼액에 1차 발효원인 유산균을 홍삼액 부피 대비 1.0％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 10∼50rpm으로 교반하며 발효시킨 후 121℃에서 15분 처리하여 1차 발효원인 유산균을 불활성화시킨 다음 상기의 1차 발효원인 유산균의 불활성화 후 2차 발효원으로 효소를 홍삼액 부피 대비 1.0％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 동안 30rpm으로 교반하며 발효시킨 후 여과하고 100℃에서 10분 처리하여 2차 발효원인 효소를 불활성화시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 홍삼액을 제조할 수 있다.
상기에서 1차 발효원으로 효소를 사용하고 2차 발효원으로 유산균을 사용하는 경우 홍삼액에 1차 발효원으로 효소를 홍삼액 부피 대비 0.5∼5％(v/v)로 접종하고 60∼70℃에서 2∼6시간 동안 10∼50rpm으로 교반하며 발효시킨 후 80∼130℃에서 5∼30분 처리하여 1차 발효원인 효소를 불활성화시킨 다음 2차 발효원인 유산균을 홍삼액 부피 대비 0.5∼5％(v/v)로 접종하고 25∼37℃에서 24∼48시간 동안 10∼50rpm으로 교반하며 발효시킨 후 여과하고 80∼130℃에서 5∼30분 처리하여 2차 발효원인 유산균을 불활성화시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 홍삼액을 제조할 수 있다.
상기에서 1차 발효원으로 효소를 사용하고 2차 발효원으로 유산균을 사용하는 경우 홍삼액에 1차 발효원으로 효소를 홍삼액 부피 대비 1.0％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4간 동안 130rpm으로 교반하며 발효시킨 후 100℃에서 10분 처리하여 1차 발효원인 효소를 불활성화시킨 다음 2차 발효원인 유산균을 홍삼액 부피 대비 1.0％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 30rpm으로 교반하며 발효시킨 후 여과하고 121℃에서 15분 처리하여 2차 발효원인 유산균을 불활성화시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 홍삼액을 제조할 수 있다.
상기에서 유산균은 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 알리멘타리우스(Lactobacillus alimentarius), 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 델브루엑키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 류코노스톡 멘센테로이드스(Leuconostoc mensenteroides), 엔테로코커스 파에시엄(Enterococcus faecium), 엔테로코커스 파에칼리스(Enterococcus faecalis), 비피도박테리엄 비피덤(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리엄 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도박테리엄 브라베(Bifidobacterium brave), 비피도박테리엄 롱검(Bifidobacterium longum), 스트렙토코커스 서모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 스트렙토코커스 락티스(Streptococcus lactis) 중에서 선택된 어느 하나의 유산균을 사용할 수 있다.
상기에서 유산균은 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 사용할 수 있다.
상기에서 효소는 베타-글루코시다아제(β-glucosidase), 알파-글루코시다아제(α-glucosidase), 알파-아밀라아제(α-amylase), 베타-아밀라아제(β-amylase), 글루코아밀라아제(glucoamylase), 이소아밀라아제(isoamylase), 폴리갈락투로나아제(polymethylgalactronase), 셀룰라아제(cellulase), 인버타아제(invertase) 중에서 선택된 어느 하나의 효소를 사용할 수 있다.
상기에서 효소는 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 사용할 수 있다.
상기에서 여과수단은 종래 용액을 여과할 수 있는 수단 일예로 여과지, 여과포, 여과막, 여과장치 중에서 선택된 어느 하나 이상의 여과수단을 이용할 수 있다. 이러한 여과수단은 당업자가 적의 선택하여 실시할 수 있으면 족하므로 이에 대한 자세한 내용은 생략하기로 한다.
상기에서 2차 발효원의 불활성화는 보통의 살균하는 온도에 준하는 고온에서 실시하므로 별도의 살균공정을 실시하지 않아도 좋다.
본 발명은 상기의 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 제조한 홍삼액에 농축공정을 추가로 더 포함하도록 하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하는 방법을 포함한다.
본 발명은 상기의 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 제조한 홍삼액을 40∼70brix로 농축시키는 농축공정을 추가로 더 포함하도록 하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하는 방법을 포함한다.
본 발명은 기능성이 향상된 홍삼액을 제조하기 위해 상기의 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법 중 2차 발효원에 의해 발효하고 여과 후 및 불활성화 처리 단계 전 홍삼액에 기능성성분 추출액을 여과한 홍삼액 중량 대비 0.5∼2％를 첨가하는 단계를 추가로 더 포함할 수 있다.
상기에서 기능성성분 추출액은 현초(玄草) 추출액을 사용할 수 있다.
상기에서 기능성성분 추출액은 장미과의 산사나무(Crataegus pinnatifida Bunge var. typica Schneider) 및 동속식물의 익은 열매인 산사 추출액을 사용할 수 있다.
상기에서 기능성성분 추출액은 연근(蓮根) 추출액을 사용할 수 있다.
상기에서 기능성성분 추출액은 노니(noni) 추출액을 사용할 수 있다.
상기에서 기능성성분 추출액은 현초(玄草) 추출액, 산사 추출액, 연근(蓮根) 추출액, 노니(noni) 추출액 중에서 선택된 2종 이상이 혼합된 혼합 추출액을 사용할 수 있다.
상기에서 기능성성분 추출액은 현초(玄草) 추출액, 산사 추출액, 연근(蓮根) 추출액, 노니(noni) 추출액 중에서 선택된 2종 이상이 동일한 중량비로 혼합된 혼합 추출액을 사용할 수 있다.
상기의 기능성성분 추출액은 각각의 기능성성분을 기능성성분 중량 대비 7∼20배량의 정제수에 첨가하고 90∼120℃에서 최초 정제수의 부피 대비 5∼50％, 바람직하게는 5∼25％가 되도록 추출한 후 여과수단에 의해 여과하여 얻은 기능성성분 추출액을 사용할 수 있다.
본 발명의 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법에 대해 다양한 조건으로 실시한바, 본 발명의 목적을 달성하기 위해서는 상기에서 언급한 조건에 의해 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법을 제공하는 것이 바람직하다.
본 발명은 상기에서 언급한 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법에 의해 제조한 홍삼액을 포함한다.
본 발명은 상기에서 언급한 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법에 의해 제조한 홍삼액을 농축시킨 홍삼농축액을 포함한다.
본 발명은 상기에서 언급한 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법에 의해 제조한 홍삼액을 40∼70brix로 농축시킨 홍삼농축액을 포함한다.
이하 본 발명의 내용을 제조예, 실시예, 비교예 및 시험예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
<제조예>
홍삼을 홍삼 중량 대비 10배량의 정제수에 첨가하고 100℃에서 최초 정제수의 부피 대비 30％가 되도록 추출한 후 여과지로 여과한 다음 농도가 10brix가 되도록 조절하고 121℃에서 15분간 멸균시켜 홍삼액을 얻었다.
상기의 홍삼액을 얻기 위한 재료인 홍삼은 인삼을 95℃의 수증기(steam)로 5시간 동안 증숙하고 상온의 공기중에서 25℃로 냉각하는 증숙 및 냉각공정을 3회 실시하여 얻은 홍삼을 사용하였다.
<실시예 1>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과하고 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다(도 1 참조).
<실시예 2>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과하고 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켜 효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다(도 2 참조).
<비교예 1>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 락토바실러스 플란타럼을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 여과지로 여과하고 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화시켜 홍삼액을 제조하였다.
<비교예 2>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 베타-글루코시다아제를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 여과지로 여과하고 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화시켜 홍삼액을 제조하였다.
<시험예 1> 홍삼액의 진세노사이드 분석
상기 제조예의 홍삼액, 실시예 1에서 제조한 홍삼액, 실시예 2에서 제조한 홍삼액, 비교예 1에서 제조한 홍삼액 및 비교예 2에서 제조한 홍삼액에 대하여 각각의 홍삼액에 대한 진세노사이드 분석을 실시하였다.
진세노사이드 분석은 제조예의 홍삼액, 실시예 1에서 제조한 홍삼액, 실시예 2에서 제조한 홍삼액, 비교예 1에서 제조한 홍삼액 및 비교예 2에서 제조한 홍삼액을 시료(sample)로 하여 각각의 시료 2㎖를 취한 후 2㎖의 부탄올을 넣고 추출하였다. 이후 원심분리(3,600rpm, 10분) 후 상층액(부탄올 층) 1㎖을 회수하고 감압 건조한 후 1㎖의 메탄올(methanol)에 녹인 후 10㎕로 HPLC(water 2695, Water Co., USA)로 분석하였다. 이때 HPLC 분석시 분석 컬럼(column)은 discovery C18(4.6×250mm, supelco Inc., USA)을 사용하였다. 이동상(Mobile phase)은 3차 증류수와 아세토니트릴(acetonitile)을 사용하였으며 초기 증류수와 acetonitile의 부피비를 80:20으로 시작하였으며, 110분에 부피비 10:90의 gradient system을 사용하였다. 유량(Flow rate)은 1.6㎕/min이었고, 디텍터(detector)는 UV detector(203nm)를 사용하였다.
제조예의 홍삼액, 실시예 1에서 제조한 홍삼액, 실시예 2에서 제조한 홍삼액, 비교예 1에서 제조한 홍삼액 및 비교예 2에서 제조한 홍삼액에 대하여 각각의 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 하기의 도 3a 내지 도 5에 나타내었다.
도 3a는 실시예 1에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이고, 도 3b는 실시예 2에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4a는 비교예 1에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이고, 도 4b는 비교예 2에서 제조한 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 제조예의 홍삼액에 대한 진세노사이드 함량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
하기의 도 3a 내지 도 5에서 나타낸 바와 같이 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 제조한 홍삼액(실시예 1, 실시예 2)(도 3a, 도 3b 참조)은 유산균 및/또는 효소로 처리하지 않은 제조예의 홍삼액(도 5), 유산균 단독으로 처리하여 제조한 홍삼액(비교예 1, 도 4a) 및 효소 단독으로 처리하여 제조한 홍삼액(비교예 2, 도 4b)에 비해 진세노사이드 Rh1, 진세노사이드 F2, 진세노사이드 Rg2, 진세노사이드 Rg3가 효율적으로 증가하였음을 보여준다.
<시험예 2> 관능검사
제조예의 홍삼액, 실시예 1에서 제조한 홍삼액, 실시예 2에서 제조한 홍삼액, 비교예 1에서 제조한 홍삼액 및 비교예 2에서 제조한 홍삼액에 대하여 각각의 홍삼액에 대한 향(flavor), 맛(taste), 전체적 기호도 등의 관능검사를 5점 척도법으로 측정하고 그 결과를 아래의 표 1에 나타내었다.
상기의 관능검사는 식품관련분야에서 3년 이상의 경력을 지닌 패널 20명(남여 각각 10명)을 대상으로 측정하였다.
하기 표 1에서와 같이 유산균 및 효소로 처리하지 않은 제조예의 홍삼액, 유산균 단독으로 처리하여 제조한 홍삼액(비교예 1) 및 효소 단독으로 처리하여 제조한 홍삼액(비교예 2)에 비해 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 제조한 홍삼액(실시예 1, 실시예 2)이 향, 맛, 전체적 기호도에서 모두 우수함을 알 수 있었다.
홍삼액의 관능검사
항목 홍삼액 비교예 1 비교예 2 실시예 1 실시예 2
향(Flavor) 2.2±0.2 1.8±0.2 3.8±0.3 4.5±0.2 4.3±0.1
맛(Taste) 1.8±0.8 1.2±0.1 3.2±0.2 4.2±0.5 4.1±0.3
전체적 기호도 2.2±0.2 1.8±0.2 3.8±0.3 4.6±0.1 4.2±0.2
<실시예 3 내지 실시예 10>
1차 발효원인 유산균으로써 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) 및 2차 발효원인 효소로써 베타-글루코시다아제(β-glucosidase) 대신에 하기의 표 2에 기재된 각각의 유산균 및 효소를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법을 사용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
1차 발효원인 유산균 및 2차 발효원인 효소의 사용에 따른 각각의 실시예
실시예 1차 발효원 2차 발효원
실시예 3 락토바실러스 알리멘타리우스 알파-글루코시다아제
실시예 4 락토바실러스 사케이 알파-아밀라아제
실시예 5 락토바실러스 아시도필러스 베타-아밀라아제
실시예 6 락토바실러스 카세이 글루코아밀라아제
실시예 7 락토바실러스 가세리 이소아밀라아제
실시예 8 락토바실러스 델브루엑키 폴리갈락투로나아제
실시예 9 락토바실러스 퍼멘텀 셀룰라아제
실시예 10 락토바실러스 불가리쿠스 인버타아제
<실시예 11 내지 실시예 20>
1차 발효원인 효소로써 베타-글루코시다아제(β-glucosidase) 및 2차 발효원인 유산균으로써 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) 대신에 하기의 표 3에 기재된 각각의 효소 및 유산균을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 동일한 방법을 사용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
1차 발효원인 효소 및 2차 발효원인 유산균의 사용에 따른 각각의 실시예
실시예 1차 발효원 2차 발효원
실시예 11 알파-글루코시다아제 락토바실러스 헬베티쿠스
실시예 12 알파-아밀라아제 류코노스톡 멘센테로이드스
실시예 13 베타-아밀라아제 엔테로코커스 파에시엄
실시예 14 글루코아밀라아제 엔테로코커스 파에칼리스
실시예 15 이소아밀라아제 비피도박테리엄 비피덤
실시예 16 폴리갈락투로나아제 비피도박테리엄 인판티스
실시예 17 셀룰라아제 비피도박테리엄 브라베
실시예 18 인버타아제 비피도박테리엄 롱검
실시예 19 알파-글루코시다아제 스트렙토코커스 서모필러스
실시예 20 알파-아밀라아제 스트렙토코커스 락티스
<실시예 21>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과한 다음 기능성성분으로 현초(玄草) 추출액을 홍삼액 중량 대비 1.5％ 첨가하고 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
상기의 현초(玄草) 추출액은 현초를 현초 중량 대비 10배량의 정제수에 첨가하고 100℃에서 최초 정제수의 부피 대비 25％가 되도록 추출한 후 여과지로 여과하여 얻은 추출액을 사용하였다.
<실시예 22>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 산사 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 21과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 23>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 연근(蓮根) 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 21과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 24>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 노니(noni) 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 21과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 25>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 연근(蓮根) 추출액 및 노니(noni) 추출액이 1:1의 중량비로 혼합된 혼합 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 21과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 26>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과한 다음 기능성성분으로 현초(玄草) 추출액을 홍삼액 중량 대비 1.5％ 첨가하고 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
상기의 현초(玄草) 추출액은 현초를 현초 중량 대비 10배량의 정제수에 첨가하고 100℃에서 최초 정제수의 부피 대비 25％가 되도록 추출한 후 여과지로 여과하여 얻은 추출액을 사용하였다.
<실시예 27>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 산사 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 26과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 28>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 연근(蓮根) 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 26과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 29>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 노니(noni) 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 26과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 30>
기능성 성분으로 현초(玄草) 추출액 대신 연근(蓮根) 추출액 및 노니(noni) 추출액이 1:1의 중량비로 혼합된 혼합 추출액을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 26과 동일한 방법으로 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 제조하였다.
<실시예 31>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과하고 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 얻었다.
상기의 홍삼액을 40브릭스(brix)로 농축시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다(도 6 참조).
<실시예 32>
유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 50브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 31과 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 33>
유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 60브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 31과 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 34>
유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 70브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 31과 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 35>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과한 다음 기능성성분으로 현초(玄草) 추출액을 홍삼액 중량 대비 1.5％ 첨가하고 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 얻었다.
상기의 홍삼액을 40브릭스(brix)로 농축시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
상기에서 현초(玄草) 추출액은 길이가 2±0.5cm으로 세절한 현초를 현초 중량 대비 10배량의 정제수에 첨가하고 100℃에서 최초 정제수의 부피 대비 25％가 되도록 추출한 후 여과지로 여과하여 얻은 추출액을 사용하였다.
<실시예 36>
유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 50브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 35와 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 37>
유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 60브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 35와 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 38>
유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 70브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 35와 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 39>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과하고 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켜 효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 얻었다.
상기의 홍삼액을 40브릭스(brix)로 농축시켜 효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다(도 7 참조).
<실시예 40>
효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 50브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 39와 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 41>
효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 60브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 39와 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 42>
효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 70브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 39와 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 43>
상기 제조예에서 얻은 홍삼액에 1차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 25℃에서 48시간 동안 30rpm으로 교반하면서 발효를 시킨 후 121℃에서 15분간 처리하여 락토바실러스 플란타럼을 불활성화 시켰다.
상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 홍삼액 부피 대비 1％(v/v)로 접종하고 65℃에서 4시간 30rpm으로 교반하면서 발효시킨 후 여과지로 여과한 다음 기능성성분으로 연근(蓮根) 추출액을 홍삼액 중량 대비 1.5％ 첨가하고 100℃에서 10분간 처리하여 베타-글루코시다아제를 불활성화 시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액을 얻었다.
상기의 홍삼액을 40브릭스(brix)로 농축시켜 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
상기에서 연근(蓮根) 추출액은 길이가 2±0.5cm으로 세절한 연근을 연근 중량 대비 10배량의 정제수에 첨가하고 100℃에서 최초 정제수의 부피 대비 25％가 되도록 추출한 후 여과지로 여과하여 얻은 추출액을 사용하였다.
<실시예 44>
효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 50브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 43과 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 45>
효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 60브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 43과 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
<실시예 46>
효소 및 유산균의 2단계 발효를 이용하여 얻은 홍삼액을 70브릭스(brix)로 농축시키는 것을 제외하고는 상기 실시예 43과 동일한 방법을 이용하여 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼농축액을 제조하였다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 제조예, 실시예, 비교예 및 시험예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
본 발명에 의해 제조한 홍삼액은 홍삼액을 유산균 및 효소의 2단계 발효에 의해 발효를 시킴으로써 보통의 홍삼액에 비해 혈소판 응집억제 작용, 항트롬빈, 선용활성화 작용, 기억감퇴 개선, 아세틸 알코올 유도, 카테콜아민 분비 억제 및 세포내 칼슘 유입 억제 작용, 암세포 전이억제 작용, 항암제의 내성 억제 작용이 우수한 것으로 알려진 진세노사이드 Rh1, 진세노사이드 F2, 진세노사이드 Rg2, 진세노사이드 Rg3의 함량이 높은 홍삼액을 소비자에게 제공할 수 있어 본 발명의 홍삼액을 섭취하는 소비자의 건강 향상과 홍삼 관련 업체 및 홍삼의 원료인 인삼 재배 농가, 인삼 재배 지역의 경제적 이익 향상에 기여할 수 있어 산업상 이용가능성이 있다.

Claims (5)

  1. 홍삼액에 1차 발효원으로 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 알리멘타리우스(Lactobacillus alimentarius), 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 델브루엑키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 류코노스톡 멘센테로이드스(Leuconostoc mensenteroides), 엔테로코커스 파에시엄(Enterococcus faecium), 엔테로코커스 파에칼리스(Enterococcus faecalis), 비피도박테리엄 비피덤(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리엄 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도박테리엄 브라베(Bifidobacterium brave), 비피도박테리엄 롱검(Bifidobacterium longum), 스트렙토코커스 서모필러스(Streptococcus thermophilus), 스트렙토코커스 락티스(Streptococcus lactis) 중에서 선택된 어느 하나의 유산균을 홍삼액 부피 대비 0.5∼5％(v/v)로 접종하고 25∼37℃에서 24∼48시간 동안 10∼50rpm으로 교반하며 발효시킨 후 80∼130℃에서 5∼30분 처리하여 1차 발효원인 유산균을 불활성화시키는 단계;
    상기의 1차 발효원의 불활성화 후 2차 발효원으로 베타-글루코시다아제(β-glucosidase), 알파-글루코시다아제(α-glucosidase), 알파-아밀라아제(α-amylase), 베타-아밀라아제(β-amylase), 글루코아밀라아제(glucoamylase), 이소아밀라아제(isoamylase), 폴리갈락투로나아제(polymethylgalactronase), 셀룰라아제(cellulase), 인버타아제(invertase) 중에서 선택된 어느 하나의 효소를 홍삼액 부피 대비 0.5∼5％(v/v)로 접종하고 60∼70℃에서 2∼6시간 동안 10∼50rpm으로 교반하며 발효시킨 다음, 여과한 여과액에 현초(玄草) 추출액 및 연근(蓮根) 추출액 중에서 선택된 어느 하나 이상의 추출액을 첨가한 후, 2차 발효원을 불활성화시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 유산균 및 효소의 2단계 발효를 이용한 홍삼액의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항의 방법에 의해 제조한 홍삼액.
  5. 제1항의 방법에 의해 제조한 홍삼액을 40∼70brix로 농축시킨 홍삼농축액.
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