KR101192117B1 - 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법에 관한 것으로서, 특히 인삼 또는 홍삼을 분쇄하여 인삼분말 또는 홍삼분말을 제조하는 제1단계와; 상기 제1단계에서 제조된 인삼분말 또는 홍삼분말에 증류수를 첨가하여 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액을 만든 후 멸균하는 제2단계와; 풀버섯 균사체를 30~35℃의 온도와 100~400rpm을 유지하는 GY(Glucose-Yeast)배지에서 2~5일간 진탕배양하면서 2~10vvm의 공기를 불어넣어 1~10mm의 펠릿균사체로 제조하는 제3단계와; 상기 제2단계에서 멸균되어 생성된 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액에 상기 제3단계에서 제조된 펠릿균사체를 접종하고, 30~35℃의 온도에서 pH 4.5~6.5를 유지하면서 2~7일동안 2~10vvm의 공기를 불어넣어 배양하여 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 제조하는 제4단계와; 상기 제4단계에서 제조된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 95℃에서 30~60분간 가열하여 살균하는 제5단계와; 상기 제5단계에서 살균된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 농축하는 제6단계;로 구성되어, 단기간 내에 다양한 생리활성을 가진 Rh1, Rh 2, Rg3, Compound K 등의 진세노사이드 대사체를 다량 함유하는 발효인삼 또는 발효홍삼을 제조할 수 있는 효과가 있다.
Description
본 발명은 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법에 관한 것으로서, 특히 단기간 내에 면역력 증강 및 생리활성을 갖는 진세노사이드 대사체를 다량 함유하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법에 관한 것이다.
인삼은 섭취시 비극성이 높은 알카로이드 등은 위에서 흡수되나, 대부분의 다당체, 사포닌 등은 흡수되지 않는다. 이들은 장내에 서식하는 균주들과 접하게 되고, 이 균주들은 쉽게 이용가능한 당 부분을 분해하여 체내로 흡수하게 된다. 당이 분해되어 흡수되기 쉬운 형태인 진세노사이드 대사체는 이후 혈액 내로 흡수되어 인체에 약효를 발휘하게 된다. 이런 장내세균 전환체 또는 대사체들은 경구투여 되기 전의 사포닌들과 비교해서 대부분이 약효가 상당히 증가된다.
인삼의 주성분은 사포닌인 '진세노사이드(ginsenoside)'이며, 프로토페낙사디올(protopanaxadiol)계인 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc 등과 프로토페낙사트리올(protopanaxatriol)계인 진세노사이드 Re, Rg1, Rf 등이 알려져 있는데, 이 성분들의 약리작용으로는 항암활성, 항염증, 항당뇨작용 등이 알려져 있다.
따라서, 상기와 같은 다양한 생리활성을 갖는 진세노사이드 대사체를 다량 함유되도록 하기 위해서 종래에 인삼을 배양하는 여러 가지 방법들이 제안되었으나, 종래의 방법들은 그 배양기간이 오래 걸려서 산업화하기에 부적절하거나 진세노사이드가 기대했던 것보다 적은 양이 함유되는 문제점을 갖고 있다.
본 발명은 상기한 종래기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 단기간 내에 면역력 증강, 항종양, 항암효과 등과 같은 다양한 생리활성을 갖는 진세노사이드 대사체를 다량 함유할 수 있는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.
상기한 과제를 해결하기 위한 본 발명에 의한 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법은 인삼 또는 홍삼을 분쇄하여 인삼분말 또는 홍삼분말을 제조하는 제1단계와; 상기 제1단계에서 제조된 인삼분말 또는 홍삼분말에 증류수를 첨가하여 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액을 만든 후 멸균하는 제2단계와; 풀버섯 균사체를 30~35℃의 온도와 100~400rpm을 유지하는 GY(Glucose-Yeast)배지에서 2~5일간 진탕배양하면서 2~10vvm의 공기를 불어넣어 1~10mm의 펠릿균사체로 제조하는 제3단계와; 상기 제2단계에서 멸균되어 생성된 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액에 상기 제3단계에서 제조된 펠릿균사체를 접종하고, 30~35℃의 온도에서 pH 4.5~6.5를 유지하면서 2~7일동안 2~10vvm의 공기를 불어넣어 배양하여 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 제조하는 제4단계와; 상기 제4단계에서 제조된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 95℃에서 30~60분간 가열하여 살균하는 제5단계와; 상기 제5단계에서 살균된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 농축하는 제6단계;로 구성된다.
한편, 상기 제3단계에서 진탕배양할 때 풀버섯 균사체와 함께 담자균류를 추가하여 진탕배양하는데, 상기 담자균류는 구름버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯, 표고버섯, 흰들버섯, 동충하초, 그물버섯, 양송이버섯, 차가버섯, 목이버섯, 버들송이, 만가닥버섯, 느타리버섯 중에서 하나 이상 선택된 것이다.
그리고, 상기 제4단계에서는 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 하측까지 삽입된 공기주입관을 통하여 공기가 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 하측으로부터 상측을 향하여 주입된다.
상기와 같이 구성되는 본 발명의 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법은 면역력 증강, 항종양, 항암효과 등과 같은 다양한 생리활성을 가진 Rh1, Rh 2, Rg3, Compound K 등의 진세노사이드 대사체를 다량 함유하며, 진세노사이드의 체내 섭취율을 현저히 향상시킬 수 있는 이점이 있다.
또한, 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 하측으로부터 이루어지는 통기를 통하여 배양일수가 단축되는 이점이 있다.
도 1은 본 발명에 의한 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법을 보인 순서도.
도 2a는 표 2에 기재된 비교예의 진세노사이드 분석 프로파일이고, 도 2b는 표 2에 기재된 실시예의 진세노사이드 분석 프로파일.
도 3의 A는 표 3에 기재된 대조군의 고형암 크기를 보인 도이고, B는 표 3에 기재된 시료투여군의 고형암 크기를 보인 도.
도 2a는 표 2에 기재된 비교예의 진세노사이드 분석 프로파일이고, 도 2b는 표 2에 기재된 실시예의 진세노사이드 분석 프로파일.
도 3의 A는 표 3에 기재된 대조군의 고형암 크기를 보인 도이고, B는 표 3에 기재된 시료투여군의 고형암 크기를 보인 도.
이하, 본 발명에 의한 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법의 실시 예를 첨부된 도면을 참조하여 상세히 설명한다.
도 1은 본 발명에 의한 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법을 보인 순서도이다.
그리고, 도 2a는 표 2에 기재된 비교예의 진세노사이드 분석 프로파일이고, 도 2b는 표 2에 기재된 실시예의 진세노사이드 분석 프로파일이다.
또한, 도 3의 A는 표 3에 기재된 대조군의 고형암 크기를 보인 도이고, B는 표 3에 기재된 시료투여군의 고형암 크기를 보인 도이다.
본 발명에 의한 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법은 몇 단계의 과정을 거쳐 완성된다.
먼저, 제1단계(S10)는 인삼 또는 홍삼을 분쇄하여 인삼분말 또는 홍삼분말을 제조하는 분말화과정이다. 홍삼분말을 예로 들어 좀 더 부연하면, 수삼을 세척하여 찌고 건조하기를 반복하여 수분이 15% 이하로 함유된 홍삼을 준비한 후 홍삼을 분쇄기에 넣고 분말화하는 과정이 제1단계(S10)이다.
제2단계(S20)는 상기 제1단계(S10)에서 제조된 인삼분말 또는 홍삼분말에 증류수를 첨가하여 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액을 만든 후 이것을 멸균하는 과정이다. 이때, 첨가되는 증류수는 상기 인삼분말 또는 홍삼분말 중량의 2~10배(바람직하게는 4~6배)에 해당되는 양이다. 그리고, 120~125℃를 유지하는 멸균기 안에 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액을 15~60분 정도 넣어 놓음으로써 멸균작업을 수행한다.
제3단계(S30)는 풀버섯 균사체를 30~35℃의 온도와 100~400rpm의 회전속도를 유지하는 GY(Glucose-Yeast)배지에서 2~5일간 진탕배양하면서 2~10vvm(바람직하게는 3~5vvm)의 공기를 불어넣어 1~10mm의 펠릿균사체로 제조하는 과정이다. 이때, GY(Glucose-Yeast)배지에는 풀버섯 균사체만을 접종하여 통기를 하면서 진탕배양함으로써 펠릿균사체를 제조할 수도 있으나, 풀버섯 균사체와 함게 담자균류를 GY(Glucose-Yeast)배지에 접종하여 진탕배양함으로써 펠릿균사체를 제조할 수도 있다. 여기에서 말하는 담자균류는 구름버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯, 표고버섯, 흰들버섯, 동충하초, 그물버섯, 양송이버섯, 차가버섯, 목이버섯, 버들송이, 만가닥버섯, 느타리버섯 중에서 하나 이상 선택된 버섯균사체를 말하는 것이다.
좀 더 부연하면, 상기 제3단계(S30)는 풀버섯 균사체(또는 담자균류와 함께)를 접종한 GY(Glucose-Yeast)배지를 삼각플라스크에 넣고, 이 삼각플라스크를 30~35℃ 유지하면서 100~400rpm으로 회전시킴과 아울러 2~10vvm의 통기를 함으로써 수행되는데, 이때, 통기는 상기 삼각플라스크의 하측에서 상측으로 향하도록 한다. 즉, 삼각플라스크의 하측까지 삽입 연장된 공기주입관에 의하여 외부의 공기가 삼각플라스크의 가장 하측으로 먼저 공급되고, 공급된 공기는 삼각플라스크의 내부 하측에서 상측을 향하여 유동하도록 하는 것이다. 본 명세서에서는 이것을 '통기심부배양'이라 명명하도록 한다.
제4단계(S40)는 상기 제2단계(S20)에서 멸균되어 생성된 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액에 상기 제3단계(S30)에서 제조된 펠릿균사체를 접종하고, 30~35℃의 온도에서 pH 4.5~6.5를 유지하면서 2~7일동안 2~10vvm(바람직하게는 3~5vvm)의 공기를 불어넣어 배양하여 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 제조하는 과정이다.
이때, 상기 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액에 접종되는 펠릿균사체는 그 중량이 상기 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액 중량의 5~20%이다.
그리고, 상기 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액에 공기를 주입, 즉 통기를 할 때는 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 하측까지 삽입된 공기주입관을 통하여 공기가 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 하측으로부터 상측을 향하여 주입된다. 위에서 언급한 것과 같은 '통기심부배양'을 하는 것이다. 이러한 통기심부배양을 위해서 버블배양기 또는 에어리프트 배양기와 같은 통기심부발효가 가능한 배양기를 사용한다. 이렇게 통기심부배양을 하는 이유는 통기심부배양을 하게 되면 그 배양속도가 종래의 다른 어떠한 방법보다도 빨라지기 때문이다.
제5단계(S50)는 상기 제4단계(S40)에서 제조된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 95℃에서 30~60분간 가열하여 살균하는 과정이다.
제6단계(S60)는 상기 제5단계(S50)에서 살균된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 필터링하고 농축기를 사용하여 농축하는 과정이다.
지금부터는 상기와 같은 본 발명에 의한 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법의 실시예를 더욱 구체적으로 제시함과 아울러 본 발명 실시예의 특성을 보다 용이하게 파악할 수 있도록 본 발명의 실시예와 비교할 수 있는 비교예를 제시한다.
<실시예>
수삼을 세척하여 찌고 건조하고를 반복하여 수분함량이 15% 이하로 제조된 홍삼을 준비한다.
그 다음 증포된 홍삼을 분쇄기를 통해 분쇄하여 분말화한다. 분말화된 홍삼 분말 100g에 증류수를 400g 첨가하여 홍삼현탁액을 만들고 pH 6.2으로 조정하여 121도, 15분간 가압 멸균한다.
풀 버섯 균사체를 통기심부배양장치가 되어 있는 500mL삼각플라스크를 이용하여 GY(glucose-yeast)배지에서 33도, 300rpm에서 3일간 진탕 배양하면서 3vvm의 통기를 불어주면서 5mm의 펠릿균사를 제조한다.
가압 멸균한 홍삼현탁액에 5mm 펠릿형태로 전배양한 풀 버섯 균사체를 총 무게 함량의 10%수준으로 접종한 다음, 33도에서 통기수준 3vvm, 초기 pH 6.2 조건으로 통기심부배양을 7일간 실시하였다.
상기 과정으로 제조한 발효홍삼 배양액을 95도에서 30분간 가열살균한 뒤에 발효홍삼 배양액에 80% 에탄올 500mL을 가하여 3시간 동안 환류하여 진세노사이드를 추출하였으며 이 환류액을 50mL까지 농축하였다.
<비교예>
상기 <실시예>에서 홍삼 현탁액에 풀버섯 균사체를 처리하지 않은 것을 제외하고는 상기 <실시예>와 동일한 방법으로 실시하였다.
<시험예 1> 홍삼분말을 이용한 발효홍삼 배양액의 pH, 총당함량, 산성당(우론산) 함량 측정
상기 실시예의 발효홍삼 배양액 및 비교예의 홍삼현탁액의 pH, 총당 및 산성당 함량을 다음과 같은 방법으로 측정하고, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 먼저, pH는 pH자동측정기를 통해 측정하였고, 총당은 phenolsulfuric acid법으로 측정하였으며, 산성당(우론산)의 함량은 Blumenkrantz과 AsboeHansen법(Blumenkrantz, N.and AsoeHansen, G. (1973) Anal. Biochem., 54, 484)에 의해 측정하였다.
| DAY | 실시예 | 비교예 | ||||
| pH | 총당함량 (mg/mL) |
우론산 (ug/mL) |
pH | 총당함량 (mg/mL) |
우론산 (ug/mL) |
|
| 0 | 6.2 | 453 | 225 | 6.2 | 453 | 225 |
| 1 | 6.2 | 431 | 223 | 6.2 | 453 | 225 |
| 3 | 5.4 | 367 | 240 | 6.2 | 453 | 225 |
| 5 | 5.1 | 219 | 276 | 6.2 | 453 | 225 |
| 7 | 5.1 | 135 | 322 | 6.2 | 453 | 225 |
상기 표1에 나타낸 바와 같이 풀버섯 균사체를 이용하여 7일간 발효/배양을 한 <실시예>의 경우에 pH는 6.2에서 5.1로 감소하였고, 총당함량은 453mg/mL에서 135mg/mL로 감소하였으며, 우론산은 225ug/mL에서 322ug/mL로 증가하였다. 여기서, 발효가 진행되면서 총당함량이 감소한 것은 발효에 관여하는 버섯균사체 생육에 필요한 탄소원으로 홍삼현탁액의 당이 이용되었음을 보여주는 결과이다. 그리고, 홍삼에 함유된 산성당은 항암 등 면역활성물질로 알려져 있으므로, 발효가 진행되면서 산성당 결합물인 우론산이 증가하는 것은 바람직한 현상이다.
이에 반해, <비교예>는 풀버섯 균사체를 처리하지 않았으므로 발효/배양이 전혀 진행되지 않아서 일주일이 지난 후에도 pH, 총당함량 및 우론산의 함량에 변화가 없다.
<시험예 2> 홍삼분말을 이용한 발효홍삼 배양액의 총 진세노사이드 함량 및 대사체 함량 측정
홍삼분말을 이용하여 상기 실시예 및 비교예의 발효홍삼 배양액의 총 진세노사이드 함량 및 대사체 함량을 측정하였다. 상시 실시예 및 비교예의 발효홍삼 배양액의 진세노사이드 분석을 위하여 HPLC를 사용하여 다음과 같은 방법에 의해 분석하고, 그 결과를 표 2에 나타내었다.
분석방법을 좀 더 자세히 설명하면, 상기 실시예의 발효홍삼 배양액 및 비교예의 홍삼현탁액 10g을 각각 평량한 후 80% 에탄올 50mL를 가하여 80℃의 진탕 배양기에서 2회 추출하고, Whatman #1 paper를 이용하여 여과하였다. 이 여과액을 진공농축기를 이용하여 감압 건조하고 50㎖의 증류수를 가하여 용해하였다.
그런 다음 증류수가 가해진 여과액 1㎖에 디에틸에테르 2㎖을 가하여 혼합한 후, 1500rpm에서 10분간 원심분리하여 디에틸에테르를 제거하고, 여기에 다시 불포화 부탄올을 1.5㎖를 가하여 혼합한 다음 부탄올층을 회수하였다. 3회 재 반복하여 회수한 부탄올층에 증류수 1.5㎖을 가하여 혼합하고 원심분리하여 물층을 제거하였으며, 이같은 조작을 2회 재반복하여 수용성 불순물을 세척하였다.
이렇게 얻어진 부탄올층을 40℃에서 건조하였으며, 여기에 메탄올 0.5㎖을 가한 후, 0.45㎛ 멤브레인 필터로 여과하여 HPLC 분석용 시료로 사용하였다.
HPLC 분석을 함에 있어서, 컬럼(column)은 C18(250 X 4.6mm)이 장착된 Waters Breeze system HPLC를 사용하였고 이동상은 아세토니트릴(Sol. A, HPLC급, Sigma사)과 증류수(Sol. B, HPLC급)를 사용하였으며 검출기는 ELSD detector를 사용하였다. 컬럼 온도는 상온에서 유속은 분당 1.0mL, UV 파장은 203nm로 설정하여 측정하였다.
| 진세노사이드 | 비교예(mg/g) | 실시예(mg/g) |
| Rb1 | 4.52 | 2.08 |
| Rb2 | 2.32 | 1.63 |
| Rc | 2.52 | 1.71 |
| Rk | 0.35 | 3.78 |
| Rh2 | 0.26 | 0.35 |
| Rg1 | 3.53 | 0.12 |
| (S)Rg3 | 1.52 | 3.53 |
| (R)Rg3 | 1.13 | 2.71 |
| Rg5 | 0.73 | 5.26 |
| Compound K | 0 | 1.09 |
<시험예 3> 홍삼분말을 이용한 발효홍삼 배양액의 면역효과
홍삼분말을 이용한 발효홍삼 배양액의 진세노사이드 대사체인 Compound K, Rg3, Rh1, Rh2는 암예방 및 암세포 성장 억제작용을 하는 것으로 알려져 있는데 풀버섯 균주로 발효한 홍삼현탁액의 면역효과를 알아보고자 실험하였다.
실험동물은 ICR계 마우스를 바이오링크로부터 분양받아 사료와 물을 자유롭게 공급하면서 동물실험실에서 적응 시킨 후, 건강상태가 양호한 마우스를 사용하였다. 실험동물의 온도는 23ㅁ1℃, 습도는 55ㅁ5%였으며 사료는 펠렛형 실험동물 사료로 하였다. 암세포주는 Sarcoma-180세포를 8-12주령된 ICR마우스의 복강에서 계대 배양한 복강액을 1ml 주사기로 찔러 노란색의 복수액 1ml를 채취한 후, 그 원액을 0.1ml씩 정상 ICR마우스의 복강속에 접종하고 28일간 사육하였다. 시료 투여는 대조군과 시료 투여군으로 나누어 진행하였다. 대조군은 증류수 일정량을 2주 동안 매일 경구 투여하였으며, 시료 투여군은 풀버섯 균사체에 의해 발효 전환된 발효홍삼 배양액을 200mg/kg/day의 농도로 증류수에 완전히 용해시켜 매일 동일량의 농도로 경구투여 하였다. Sarcoma-180 고형암에 대한 항암효과 측정은 28일 후 마우스의 고형암을 적출하고 무게를 microbalance로 측정하였다. 고형암 증식에 대한 저해율은 다음과 같이 계산하고, 그 결과를 표 3에 기재하였다.
저해율(%) = (1- 시료투여군의 암세포 무게/대조군의 암세포 무게) X 100
| Sample | Dose(mg/kg) | Turmor weight | Inhibition rate(%) |
| 대조군 | - | 11.3ㅁ0.8 | 0 |
| 시료투여군 | 200 | 3.4ㅁ1.3 | 70 |
S10: 제1단계 S20: 제2단계
S30: 제3단계 S40: 제4단계
S50: 제5단계 S60: 제6단계
S30: 제3단계 S40: 제4단계
S50: 제5단계 S60: 제6단계
Claims (7)
- 인삼 또는 홍삼을 분쇄하여 인삼분말 또는 홍삼분말을 제조하는 제1단계(S10)와;
상기 제1단계(S10)에서 제조된 인삼분말 또는 홍삼분말에 증류수를 첨가하여 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액을 만든 후 멸균하는 제2단계(S20)와;
풀버섯 균사체를 30~35℃의 온도와 100~400rpm을 유지하는 GY(Glucose-Yeast)배지에서 2~5일간 진탕배양하면서 2~10vvm의 공기를 불어넣어 1~10mm의 펠릿균사체로 제조하는 제3단계(S30)와;
상기 제2단계(S20)에서 멸균되어 생성된 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액에 상기 제3단계(S30)에서 제조된 펠릿균사체를 접종하고, 30~35℃의 온도에서 pH 4.5~6.5를 유지하면서 2~7일동안 2~10vvm의 공기를 불어넣어 배양하여 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 제조하는 제4단계(S40)와;
상기 제4단계(S40)에서 제조된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 95℃에서 30~60분간 가열하여 살균하는 제5단계(S50)와;
상기 제5단계(S50)에서 살균된 발효인삼 배양액 또는 발효홍삼 배양액을 농축하는 제6단계(S60);로 구성된 것을 특징으로 하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법.
- 청구항 1에 있어서,
상기 제3단계(S30)에서 진탕배양할 때 풀버섯 균사체와 함께 담자균류를 추가하여 진탕배양하는 것을 특징으로 하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법.
- 청구항 2에 있어서,
상기 담자균류는 구름버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯, 표고버섯, 흰들버섯, 동충하초, 그물버섯, 양송이버섯, 차가버섯, 목이버섯, 버들송이, 만가닥버섯, 느타리버섯 중에서 선택된 하나 이상의 버섯균사체인 것을 특징으로 하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법.
- 청구항 1에 있어서,
상기 제2단계(S20)에서 첨가되는 증류수는 그 중량이 상기 인삼분말 또는 홍삼분말의 중량에 대하여 2~10배인 것을 특징으로 하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법.
- 청구항 1에 있어서,
상기 제4단계(S40)에서 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액에 접종되는 펠릿균사체는 그 중량이 상기 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 중량에 대하여 5~20%인 것을 특징으로 하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법.
- 청구항 1에 있어서,
상기 제3단계(S30)에서는 GY(Glucose-Yeast)배지를 삼각플라스크에 넣어 진탕배양을 하면서 외부의 공기를 불어 넣되,
외부의 공기는 삼각플라스크의 하측까지 삽입 연장된 공기주입관에 의하여 삼각플라스크의 하측으로부터 상측으로 유동되는 것을 특징으로 하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법.
- 청구항 1에 있어서,
상기 제4단계(S40)에서는 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 하측까지 삽입된 공기주입관을 통하여 공기가 인삼현탁액 또는 홍삼현탁액의 하측으로부터 상측을 향하여 주입되는 것을 특징으로 하는 통기펠렛배양법을 이용한 발효인삼 또는 발효홍삼 제조방법.
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