KR101171447B1

KR101171447B1 - 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애의 예방 및 치료용 조성물

Info

Publication number: KR101171447B1
Application number: KR1020090129811A
Authority: KR
Inventors: 류종훈; 정재훈; 신찬영; 박세진
Original assignee: 동국제약 주식회사
Priority date: 2009-12-23
Filing date: 2009-12-23
Publication date: 2012-08-06
Also published as: EP2515924A4; WO2011078479A3; WO2011078479A2; EP2515924A2; US20120308673A1; KR20110072745A; JP2013515716A; CN102665744A

Abstract

본 발명은 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애(ADHD)의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 본 발명의 하고초 추출물은 ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)에 대하여 주의력결핍에 대하여 항 ADHD 효과를 확인한 바, 기존의 ADHD 치료제에 비하여 강력하게 ADHD을 억제시킴을 확인하였으므로, ADHD의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물 및 건강기능식품에 이용될 수 있다.

하고초, 주의력결핍과잉행동장애, ADHD,

Description

하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애의 예방 및 치료용 조성물 {Composition comprising the extract of Prunella vulgaris L for preventing and treating ADHD}

본 발명은 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 ADHD의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.

[문헌 1] Y. B. Lee, J. S. Shin, Korean journal of family social work, pp129-157, 2000, G. D. Kewley, British Medical Journal, 23, pp1594-1596. 1998, L. B. Silver, Attention-deficit hyperactivity disorder, Washington, DC.: American Psychiatry Press, Inc. 1992.

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[문헌 14] PsotovJ, KolM, Sousek J, Svagera Z, Vicar J, UlrichovJ. Biological activities of Prunella vulgaris extract. Phytother Res. 17 (2003) pp. 1082-7.

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주의력결핍과잉행동장애(Attention Deficit and Hyperactivity Disorder, 이하 ADHD)는 학령기 전후의 아동에게서 흔히 나타나는 정신과적 질환으로, 부주의(Inattention), 과잉행동 (Hyperactivity), 충동성(Impulsivity)이 주된 증상이다. 이와 같은 주의집중부족과 과잉활동은 아동의 학습장애를 비롯한 다양한 심리사회적 장애들을 동반하며, 청소년기의 비행이나 일탈행동, 성인기에는 약물 남용 및 범죄 등을 야기시키는 원인이 될 수 있다고 보고되었다 (Y. B. Lee, J. S. Shin, Korean journal of family social work, pp129-157, 2000, G. D. Kewley, British Medical Journal, 23, pp1594-1596. 1998, L. B. Silver, Attention-deficit hyperactivity disorder, Washington, DC.: American Psychiatry Press, Inc. 1992).

ADHD의 원인으로 유전적 요인 (R. A. Barkley. Attention deficit hyperactivity disorder: A handbook of diagnosis and treatment. New York: Guilford Press. 1990), 납 수치와 인스턴트식품의 식품첨가물에 대한 반작용으로 보는 생화학적 요인(G. David, J. Neal, Abnormal Psychology. John Wilry & Sons. 1976), 뇌에 전달하는 자극을 적절히 선택하는데 문제가 있다고 보는 견해 (이효신, 정서학습장애연구. 16), 환경적 요인 즉 부모와 자녀와의 관계나 부모의 사회적 지위, 임신 중 산모의 흡연과 알콜 남용 등을 언급하기도 하였으나 아직 원인에 대한 논의는 분분하다 (H. Mang, H. Chung, The Journal of Elementary Education. 18, pp243-277, 2005). 그러나 사회심리적인 요인보다 신경생물학적 요인이 중요하다고 여겨지고 있으며 이에 따라 이 질환의 약물치료와 생물학적 요인에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 특히 생물학적 요인으로 단일한 신경계의 발달이상 보다는 고위 인지기능을 담당하는 여러 뇌 영역의 상호연관성의 이상으로 초래되는 비 균일한 질환군일 가능성이 제시되고 있다 (Y. Frank, S. G. Pavlakis, Pediatric Neurology. 25, pp278-287, 2001, 김붕년, 이동수, 조수철. 신경정신의학. 39, pp412-423, 2000). 최근까지의 ADHD 환자를 대상으로 한 구조적, 기능적 뇌 영상연구를 보면, 대체로 ADHD의 병태생리가 전두-선조회로(fronto-striatal tract)의 기능장애와 연관되어 있으며 메틸페니데이트(Methylphenidate, 이하 MPH)에 의한 약물 효과는 이 영역에서의 도파민계의 기능변화와 연관되어 있다고 알려져 있다 (M. H. Teicher, C. M. Anderson et al., Nat. Med. 6, pp470-473, 2000, J. B. Schweitzer, D. O. Lee et al., Neuropsychopharmacology 28, pp967-973. 2003, E. Y. Oh, I. Hwang et al., J. Korean Soc. Biol. Ther. Psychiatri. 9, pp169-180, 2003). ADHD 증상은 도파민성 신경 외에도 전두엽의 신경회로를 조절하는 노르아드레날린성 신경의 조절과 연관이 있다. ADHD의 행동이 노르아드레날린성 신경과 도파민성 신경의 조절간에 불균형으로 초래된다는 연구도 보고된 바 있다. 포괄적으로는 Glutamatergic neurons와 GABA (g-aminobutyric acid)성 신경을 지배하는 카테콜라민류가 시냅스 후부에 미치는 영향력이 감소되는데 따른 것으로 이해된다 (T. Sagvolden, T. Xu. Behav. Brain Funct. 4, 2008, E. B. Johansen, P. R. Killeen et al., Behav. Brain Funct. 3, pp60. 2007).

ADHD의 치료제로 가장 흔히 쓰이는 약물은 중추신경 흥분제로서, 국내에서는 Methylphenidate를 성분으로 하는 리탈린(Ritalin), 메틸펜(Methylphen) 등이 사용되고 있다. 이러한 약물은 부주의, 과잉행동 및 충동성 완화에 단기적으로 가장 효과적인 치료방법이다. 그러나 장기적인 효과는 검증되지 못하였으며, 부모중심의 치료개입을 통해 효과를 극대화 하려는 노력들이 지속되고 있다 (S. Kim, D. Ahn, Y. Lee, J. Korean Neuropsychiatr. Assoc. 4, pp683-699, 1998).

한편, 하고초 (Prunella vulgaris L.)는 꿀풀과 (Labiatae)에 속하는 다년생 초본인 꿀풀(Prunella vulgaris var. lilacina) 및 하고초(P. vulgaris L.)의 화수이다. 이 약물은 예로부터 중국, 일본, 한국의 동양 의학권 및 유럽에서 민간약으로 널리 사용되었는데, 동양에서는 간경화 및 고혈압에 사용되었고, 유럽에서는 17세기부터 인후 염증 감소, 해열, 창상 치료 촉진 등에 이용되었다 (PsotovJ, KolM, Sousek J, Svagera Z, Vicar J, UlrichovJ. Biological activities of Prunella vulgaris extract. Phytother Res. 17 (2003) pp. 1082-7.). 최근 하고초의 생리활성 연구로는 항알러지, 항염증 (Ryu, S. Y., Oak, M. H., Yoon, S. K., Cho, D. I., Yoo, G. S., Kim, T. S., and Kim, K. M. Anti-allergic and anti-inflammatory triterpenes from the herb of Prunella vulgaris. PlantaMed. 66 (2000) 358-360.), 항산화, 항미생물, 항바이러스 (PsotovJ, KolM, Sousek J, Svagera Z, Vicar J, UlrichovJ. Biological activities of Prunella vulgaris extract. Phytother Res. 17 (2003) pp. 1082-7.) 등의 작용이 보고되어 있다. 하지만 아직까지 주의력 결핍 과잉 행동 장애 등의 치료 및 개선에 대해 효과가 있다 고 전혀 시사되어 있지 아니하다.

이에 본 발명자들은 동물을 이용한 생체 내 실험 (in vivo)을 통해, 하고초 추출물이 ADHD 동물 모델에서 주의력 증진, 과잉 행동 억제 효과 및 충동성 억제효과 등을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

그러나, 상기 문헌의 어디에도 하고초 추출물의 ADHD 치료제로서의 효능에 대하여 개시 또는 교시 된 바가 없다.

이에 본 발명자들은 천연물로부터 새로운 ADHD 치료제를 개발하기 위하여 수백 종의 천연물을 검색한 결과, 하고초 추출물이 생체 내 실험 (in vivo)을 통해, 하고초 추출물이 ADHD 동물 모델에서 주의력 증진, 과잉 행동 억제 효과 및 충동성 억제효과 등을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.

상기 목적을 수행하기 위하여, 본 발명은 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애(ADHD)의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애(ADHD)의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.

본원에서 정의되는 상기 하고초는 화수, 꽃, 뿌리 및 전초를 포함하나, 화수 부위를 사용함이 바람직하다.

본원에서 정의되는 상기 추출물은 정제수를 포함한 물, C₁ 내지 C₄의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매, 보다 바람직하게는 물 또는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 더 바람직하게는 물 또는 60 내지 95% 에탄올에 가용한 추출물을 포함한다.

이하, 본 발명의 추출물은 당업계에 통상적인 추출방법으로 수득가능한데, 이하에 상기 추출물을 수득하는 방법을 상세히 설명한다.

예를 들어, 건조한 하고초 시료 중량의 약 1 내지 100배(v/w), 바람직하게는 약 5 내지 20배(v/w)의 물, C₁ 내지 C₄의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매, 보다 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 더 바람직하게는 60 내지 95% 에탄올을 가하여 30 내지 110℃, 바람직하게는 50 내지 100℃에서 1시간 내지 5시간, 바람직하게는 1시간 내지 3시간동안 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각추출, 가열추출 등의 추출방법, 바람직하게는 초음파 추출법 또는 환류냉각추출법으로 추출한 후, 그 여과물을 여과하고 감압농축 및 건조하여 본 발명의 추출물을 수득할 수 있다.

따라서, 본 발명은 건조한 하고초 시료 중량의 약 1 내지 100배(v/w)의 물, C₁ 내지 C₄의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매를 가하여 30 내지 110℃에서 1시간 내지 5시간, 동안 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각추출, 또는 가열추출 법으로 추출하는 제 1단계; 그 여과물을 여과하고 감압농축 및 건조하는 제 2단계 공정을 포함하는 하고초 추출물을 제조하는 제조방법을 제공한다.

본 발명은 상기의 제조방법으로 얻어진 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애(ADHD)의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품을 제공한다.

본 발명의 하고초 추출물에 대하여 ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)에 대하여 주의력결핍에 대하여 항 ADHD 효과를 확인한 바, 기존의 ADHD 치료제에 비하여 강력하게 ADHD을 억제시킴을 확인하였으므로, ADHD의 예방 및 치료에 유용함을 확인하였다.

따라서, 본 발명의 추출물은 과잉행동과 충동성을 억제하면서 집중력을 향상시키므로 ADHD에 대한 대증요법으로 사용될 수 있다는 장점을 갖는다. 또한, 아동의 학습장애를 비롯한 심리사회적 장애들을 해결하며, 장기적으로 예상될 수 있는 청소년기의 비행이나 일탈행동, 성인기에는 약물 남용 및 범죄 등을 예방할 수 있다. 환자의 사회와 격리, 수치심, 대인관계의 어려움, 학교에서의 정상적인 생활의 어려움도 해결할 수 있다.

본 발명의 추출물을 함유하는 약학조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.1 내지 50 중량%로 포함한다.

그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.

본 발명의 추출물 자체는 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있는 약재이다.

본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔스,사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출물은 1일 0.5 g/kg 내지 5 g/kg으로, 바람직하게는 1 g/kg 내지 3 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.

따라서, 또한, 본 발명은 주의력결핍과잉행동장애의 예방 및 개선 효과를 갖 는 상기 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품 및 식품첨가제를 제공한다.

본 발명의 추출물을 포함하는 조성물은 ADHD의 예방 및 개선을 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.

본 발명의 추출물은 ADHD의 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물은 전체 식품 중량의 1 내지 5 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.

본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율 지본 발명의 조성물 100 mL당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명의 하고초 추출물은 ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)에 대하여 주의력결핍에 대하여 항 ADHD 효과를 확인한 바, 기존의 ADHD 치료제에 비하여 강력하게 ADHD을 억제시킴을 확인하였으므로, ADHD의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물 및 건강기능식품에 이용될 수 있다.

이하, 본 발명을 참고예, 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 참고예, 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 참고예, 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 하고초 추출물의 제조

1-1. 하고초 70% 에탄올 추출물의 제조

경동시장 (Seoul, Korea)에서 건조된 하고초를 구입하여 화수만을 분리한 뒤 가정용 분쇄기(mixer)를 이용하여 분말화 하였다. 상기 분말에 70% 에탄올을 10배량(v/v)을 가하여 60℃에서 초음파추출장치 (POWERSONIC 420, 화신테크) 로 2시간동안 2회 추출하였다. 추출액을 탈지면으로 여과 후, 감압농축기 (N-1000, EYELA) 로 감압 농축하여 동결건조기 (FDU-2000, EYELA) 로 동결건조한 후 분말을 얻었다. 동결 건조한 분말을 -70℃ 냉동고에 보관하고, 실험시 증류수에 녹여 사용하였다. (이하, “PV70E”라 함, 수득률: 70% 에탄올 - 16.85 %).

1-2. 하고초 물 추출물의 제조

경동시장 (Seoul, Korea) 에서 건조된 하고초를 구입하여 화수만을 분리한 뒤 적당한 크기로 잘랐다. 하고초에 증류수를 10배량을 가하여 가온기 (MS-E104, TOPS) 에서 약 100℃ 에서 2시간 환류 추출하였다. 상기에서 수득한 추출액을 감압농축기(N-1000, EYELA)로 감압여과 후, 동결건조기(FDU-2000, EYELA)로 동결 건조하여 분말을 얻었다. 동결 건조한 분말을 -70℃ 냉동고에 보관하고, 실험시 증류수에 녹여 사용하였다. (이하, “PVW”라 함, 수득률: 증류수 - 22.03 %).

참고예 1. 실험동물의 준비

5주령의 ICR 생쥐 (23 - 25 g)를 (주) 오리엔트 (Seoul, Korea)에서 공급받아 삼육대학교 의명신경과학연구소 동물실의 소독 케이지(clean cage)에 약 5일간 적응시켜 사용하였으며, 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였고, 온도 (23 ± 2 ℃), 습도 (55 ± 10 %) 및 명암주기 (12 시간)는 자동으로 조절되도록 하였다.

참고예 2. 통계처리

모든 실험 결과는 일원변량 분석을 이용하여 통계 처리하였고, 유의성이 인정될 경우 Student-Newman-Keuls Test 를 사용하여 p < 0.05 수준 이하에서 유의성 검정을 실시하였다.

실험예 1. 주의력결핍과잉행동장애(ADHD)활성 실험

상기 실시예에서 얻은 하고초 추출물의 과잉행동 억제효과, 집중력 개선 효과 및 충동행동 완화 효과 등의 주의력결핍과잉행동장애에 대한 활성을 측정하기 위하여, 하기와 같이 실험하였다

1-1. 일반 운동 활성에 대한 활성

문헌에 개시된 실험 방법을 응용하여 하기와 같은 방법으로 일반 운동 활성에 대한 효과를 확인하였다 (Kong, W.X., Chen, S.W., Li, Y.L., Zhang, Y.J., Wang, L., Min, L. and Mi, X (2006) Effects of taurine on rat behaviors in three anxiety models. Pharmacology, Biochem. Behavior 83: 271-276; Arulmozhi D.K., Veeranjaneyulu, A., Bodhankar, S.L., and Arora, S.K. (2005) Pharmacological studies of the aqueous extract of Sapindus trifoliatus on central nervous system: possible antimigraine mechanisms. J. Ethnopharmacol. 97: 491-496).

1주일간 동물을 안정화 시키고 실험 전날 위 장치에서 10분간 1회 이상 적응시키고, 시험 물질 투여 30분 후에 시험 박스 중앙에 흰쥐 또는 생쥐를 놓고 행동관찰 및 분석장치인 EthoVision system(Noldus IT b.v., Netherlands)을 활용하여 10분간 총 이동 거리 (Total movement distance)와 총 이동 시간 (Total movement duration)을 관찰분석하였다.

본 실험 결과, 도 1 및 2에 나타난 바와 같이, ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)의 과잉행동에 대한 하고초 추출물의 효과를 확인한 결과, ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)은 정상동물인 WKY 흰쥐에 비해 일반 운동 활성 (이동거리, 이동시간 및 rearing 횟수)이 유의성 있게 증가하였고 하고초 알콜추출물(PV70E) 및 물추출물(PVW)은 증가된 일반 운동 활성을 유의성 있게 감소시켰다. 정상동물인 WKY 흰쥐의 일반 운동 활성에는 유의성 있는 영향을 주지 않았다. 반면, 현재 ADHD 치료제로 사용되고 있는 양성대조약물 methylphenidate(환인제약-Johnson Mattey Public limited Co. 07-00568)을 3mg/kg 용량으로 복강 내 투여한 경우 ADHD 동물모델인 SHR의 일반 운동 활성에는 유의성 있는 영향을 주지 않았으나 정상동물인 WKY 흰쥐의 일반 운동 활성은 증가시켰다. 이는 methylphenidate가 ADHD 증상 중 과잉행동에는 영향을 주지 않거나 좋지 않은 영향을 미칠 수 있음을 의미한다.

ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)은 정상동물인 WKY 흰쥐에 비해 일반 운동 활성 (이동거리와 이동시간)이 유의성 (p<0.01) 있게 증가하였고 하고초 알콜추출물과 물추출물의 투여는 증가된 일반 운동 활성을 유의성 (p<0.01, 0.05) 있게 감소시켰다. 그 감소효과는 용량의존적인 경향을 나타내었다.

1-2. 변경 행동력에 대한 활성

문헌에 개시된 Y-maze 실험 방법을 응용하여 하기와 같은 방법으로 변경행동력에 대한 효과를 확인하였다 (Sarter, M., Bodewitz, G. and Stephens, D.N. (1988) Attenuation of scopolamine-induced impairment of spontaneous alteration behaviour by antagonist but not inverse agonist and agonist beta-carbolines. Psychopharmacology (Berl). 94: 491-5; Kim, D.H., Hung, T.M., Bae, K.H., Jung, J.W., Lee, S., Yoon, B.H., Cheong, J.H., Ko, K.H,, and Ryu, J.H. (2006) Gomisin A improves scopolamine-induced memory impairment in mice. Eur J Pharmacol. 542 : 129-35).

Y-maze test를 통해 실험동물의 집중력과 주의력을 평가할 수 있다. 집중력 평가를 위해 실험장치인 Y형 미로는 3개의 가지로 구성되어 있으며 각 가지(arm)의 길이는 42 cm, 넓이는 3 cm, 높이는 12 cm이고 세 팔이 접하는 각도는 120℃였다. 모든 실험 장치는 검정색의 polyvinyl plastic으로 구성되어 있다. 각 가지를 A, B, C로 정한 후 한쪽 가지에 mouse를 조심스럽게 놓고 8분 동안 자유롭게 움직이게 한 다음 실험동물이 들어간 가지를 기록한다. 이때, 들어간다 함은 꼬리까지 완전히 들어갔을 경우에 한하며, 갔던 가지에 다시 들어간 경우에도 기록하였다. 세 개의 다른 가지에 차례로 들어간 경우 1점 (실제 변경, actual alternation)씩 부여한 후, 변경 행동력 (alternation behavior)은 하기 수학식 1에 의해 계산된다. 상기의 방법대로 시험약물을 투여하고 30분 후에 한쪽 가지에 실험동물을 조심스럽게 놓고 8분 동안 자유롭게 움직이게 한 다음 실험동물이 들어간 가지를 기록하여 아래의 식에 따라 변경행동력을 계산하였다.

본 실험 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)의 변경행동력에 대한 하고초 추출물의 효과를 확인한 결과, ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)은 정상동물인 WKY 흰쥐에 비해 변경 행동력 (alternation behavior)이 유의성은 없지만 감소하였고 하고초 알콜추출물과 물추출물은 감소된 변경행동력을 유의성 (p<0.05) 있게 용량 의존적으로 증가시켰다. 정상동물인 WKY 흰쥐의 변경행동력은 유의성 있게 변하지 않았다. ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물에서 그 효과, 즉, 집중력은 현재 ADHD 치료제로 사용되고 있는 methylphenidate의 효과와 유사하였다.

1-3. 충동 행동력에 대한 활성

문헌에 개시된 실험 방법을 응용하여 하기와 같은 방법으로 충동행동력에 대한 효과를 확인하였다 (Bull, E., Reavill, C., Hagan, J.J., Overend, P., Declan, N. C. (2000) Evaluation of the spontaneously hypertensive rat as a model of attention deficit hyperactivity disorder: acquisition and performance of the DRL-60s test. Behavioural Brain Research, 109; 27-35; Marco, E.M., Adriani, W., Canese, R., Podo, F., Viveros, M.P. and Laviola, G. (2007) Enhancement of endocannabinoid signalling during adolescence: Modulation of impulsivity and long-term consequences on metabolic brain parameters in early maternally deprived rats. Pharmacology Biochemistry and Behavior, 86; Issue 2, 334-345).

관찰 상자를 3영역 즉, 안전영역, 전기가 흐르는 영역, 식수 공급영역으로 구분 된 관찰 상자와 이를 모니터하는 비디오 트랙킹 시스템장치를 활용하였다. 안전영역의 실험동물은 전기가 흐르는 영역을 지나야 물을 마실 수 있다. 충동성이 강할수록 전기가 흐르는 영역을 통과하는 횟수가 증가한다. 3일간 물을 마시기 위해선 전기충격을 감수해야 됨을 훈련시킨 후 1일간 식수 공급을 중단하였다. 시험 당일 NaCl 90 mg/kg을 경구 투여하여 갈증을 유발하고 1시간 후에 시험물질을 투여하였다. 시험물질 투여 30분 후에 실험동물을 안전영역에 두고, 30분간 물을 마시기 위해 전기가 흐르는 영역을 통과하는 횟수를 측정하였다.

본 실험 결과, 도 4에 나타난 바와 같이, ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)의 충동행동력에 대한 하고초 추출물의 효과를 확인한 결과, ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)은 정상동물인 WKY 흰쥐에 비해 충동 행동 활성 (전장을 통과하는 횟수)이 유의성 있게 증가하였고 하고초 알콜추출물과 물추출물은 증가된 충동행동 활성을 유의성 (p<0.01) 있게 용량 의존적으로 감소시켰다. 정상동물인 WKY 흰쥐의 충동 행동 활성은 유의성 있게 변하지 않았다. ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물에서 그 효과, 즉, 충동성완화효능 현재 ADHD 치료제로 사용되고 있는 methylphenidate의 효과와 유사하였다.

도 1 내지 도 4에 나타난 실험결과를 종합하면 methylphenidate는 ADHD 동물모델인 SHR에서 주의력 향상효과와 충동성 완화 효과를 나타내고 과잉행동에는 효과가 없는 반면에 하고초의 물추출물과 알콜추출물은 주의력 향상효과 및 충동성완화 효과와 함께 과잉행동 개선효과도 함께 나타내었다. 그러므로 ADHD 치료를 위해 하고초 추출물이 보다 더 유용할 수 있을 것으로 사료된다.

실험예 2. 급성독성시험

참고예 1의 생쥐를 사용하여 상기 실시예에서 수득한 하고초 추출물을 경구 투여하여 급성독성 시험을 실시하였다. 급성독성 시험 결과, 추출물의 경우는 그 투여 가능 용량인 2g/kg에서 사망예를 전혀 관찰할 수 없었으며, 체중 증가, 사료 섭취량 등에서 전혀 유의한 이상을 발견할 수 없었다. 따라서 추출물의 경우는 안전한 약물임을 알 수 있었다.

하기에 본 발명의 하고초 추출물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

제제예 1. 산제의 제조

PV70E 20 mg

유당 100 mg

탈크 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.

제제예 2. 정제의 제조

PV70E 10 mg

옥수수전분 100 mg

유당 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.

제제예 3. 캅셀제의 제조

PVW 10 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg

락토오스 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.

제제예 4. 주사제의 제조

PVW 10 mg

만니톨 180 mg

주사용 멸균 증류수 2974 mg

Na₂HPO₄,12H₂O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.

제제예 5. 액제의 제조

PVW 20 mg

이성화당 10 g

만니톨 5 g

정제수 적량

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.

제제예 6. 건강 식품의 제조

PV70E 1000 ㎎

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 B1 0.13 ㎎

비타민 B2 0.15 ㎎

비타민 B6 0.5 ㎎

비타민 B12 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

제제예 7. 건강 음료의 제조

PVW 1000 ㎎

구연산 1000 ㎎

올리고당 100 g

매실농축액 2 g

타우린 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

도 1은 ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)의 과잉행동에 대한 하고초 추출물의 효과를 나타낸 도이며;

도 2은 ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)의 과잉행동에 대한 하고초 추출물의 효과를 나타낸 도이며;

도 3는 ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)의 주의력결핍에 대한 하고초 추출물의 효과를 나타낸 도이며;

도 4는 ADHD 동물모델인 선천성고혈압동물 (SHR)의 충동행동활성에 대한 하고초 추출물의 효과를 나타낸 도이다.

Claims

하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애(ADHD)의 예방 및 치료용 약학조성물.
제 1항에 있어서, 상기 하고초는 화수, 꽃, 뿌리 및 전초를 포함하는 약학 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 추출물은 정제수를 포함한 물, C₁ 내지 C₄의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매인 약학조성물.
삭제
하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 주의력결핍과잉행동장애(ADHD)의 예방 및 개선용 건강기능식품.
주의력결핍과잉행동장애(ADHD)의 예방 및 개선 효과를 갖는 하고초 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품.
제 6항에 있어서, 캔디류의 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 또는 건강보조 식품류인 식품.