KR101013527B1 - 오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물과 그로부터 추출된 오가피-버섯 균사체 발효추출물을 유효성분으로 하는 위염예방 및 치료용 약제 - Google Patents
오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물과 그로부터 추출된 오가피-버섯 균사체 발효추출물을 유효성분으로 하는 위염예방 및 치료용 약제 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 항암, 위궤양 등에 효능이 있으며, 위궤양치료효과 및 피로효과에 유용한 오가피를 이용하여 화학적 요인으로 손상된 위의 기능을 개선시키는 효능 및 화학적 요인으로 야기되는 위의 손상 예방에 유용한 오가피를 기질(천연배지)로 하는 오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물과 그로부터 추출된 오가피-버섯 균사체 발효추출물을 유효성분으로 하는 위염예방 및 치료용 약제에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 오가피[Acanthopanax senticosus(RUPR. et MAX.) HARMS(가시오갈피나무), Acanthopanax senticosus var. subinermis KITAGAWA(왕가시오갈피나무), Acanthopanax sessiliflorus (RUPR. et MAX.) SEEM.(오갈피나무), Acanthopanax chiisanense NAKAI(지리산오갈피나무), Acanthopanax koreanum NAKAI(섬오갈피나무), Acanthopanax rufinerve NAKAI(털오갈피나무), Acanthopanax seoulense NAKAI(서울오갈피나무), Acanthopanax sieboldianum MAKINO(오가나무)]를 천연배지로 하여 상기 천연배지에 버섯종균을 배양시켜 오가피-버섯 균사체 발효물을 획득하고, 상기 획득한 오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물과, 상기 오가피-버섯 균사체 발효물로부터 추출된 오가피-버섯 균사체 발효추출물을 유효성분으로 하는 위염예방 및 치료용 약제에 관한 것이다.
위염, 오가피, 버섯종균, 발효물, 추출물
Description
본 발명은 항암, 위궤양 등에 효능이 있으며, 위궤양치료효과 및 피로효과에 유용한 오가피를 이용하여 화학적 요인으로 손상된 위의 기능을 개선시키는 효능 및 화학적 요인으로 야기되는 위의 손상 예방에 유용한 오가피를 기질로 하는 오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물과 그로부터 추출된 오가피-버섯 균사체 발효추출물을 유효성분으로 하는 위염예방 및 치료용 약제에 관한 것이다.
대한민국의 경우 1999년의 소화기질환으로 인한 외래환자 수진율은 10만 명당 599명으로 1156명의 호흡기계 질환에 이어 가장 많은 수진율을 보이고 있으며 (보건복지부, 2001), 2001년 우리나라의 위 십이지장 궤양, 대장암 등 소화기계 질환의 인구 10만 명 당 사망률은 30.1명으로 높은 비율을 나타내고 있다(통계청, 2002).
소화기관의 질환은 세균질환에 의한 요인, 스트레스 등에 의한 요인, 에탄올 등 약물에 의한 요인, 식생활의 변화에 따른 요인, 노령화에 따른 요인 등 다양한 원인이 되어 소화기계 질환이 줄어들지 않고 있는 실정이다.
이러한 질병의 증가는 치료약 및 예방약 개발에 다양한 연구를 진행하였으며, 최근에 들어오면서 화학적 합성 약보다는 부작용 등이 적으면서 안정성이 확보된 천연물 의약에 대한 연구가 많이 이루어지고 있다.
우리나라에서도 종래에 여러 요인이 원인으로 인해 야기되어지는 위염이나 위궤양 등을 예방하거나 또는 위염 및 위궤양 질환을 치료 가능한 제제 개발에 노력하고 있다.
국내특허등록 제0414453호의 염증성 장질환 치료제용 쑥추출물에서는 약쑥(또는 쑥) 추출물을 이용한 위장질환 치료제가 제시되어 있으며,
국내공개특허공보 제10-2007-00656652호의 위염예방 및 치료에 유용한 목별자 추출물에서는, 목별자 추출물을 이용한 위염예방 및 치료에 유용한 약제에 대한 기술이 제시되어 있다.
이외에도 이러한 제제 탐색을 위한 후보군으로는 각종 한약재와 폭넓은 천연물질이 망라되어 있으며, 그 중에서도 버섯류가 많은 주목을 받고 있으며, 최근에는 천연물에 배양한 약용버섯류에 대한 다양한 생리활성 연구가 진행 중에 있다.
한편, 본 발명에서 발효물의 기질로 사용한 오가피 중, 가시오가피는 triterpenoid 계 chiisanoside (m.p.:208-209℃, C48H70O19)는 항히스타민, 항암, 위궤양 등에 효능이 있으며, Acantoside D(eleutherosideE)는 위궤양치료효과, 항암 및 항 지방간 작용이 있으며, lignan계 배당체 eleutheroside(A, B, C, D, E)는 외부의 스트레스에 대한 생체적응력 및 항 피로효과 있는 것으로 알려져 있으며,
이러한 오가피의 효능에 의하여 아래와 같이 오가피를 이용한 다양한 연구가 진행되고 있다.
국내특허등록 제241269호의 오가피 추출물을 포함한 C형 감영치료제에서는, 오갈피 속 나무의 뿌리, 줄기 및 가지 부분의 껍질을 증류수로 끓이거나 유기용매에 냉침시켜 추출물을 획득하는 기술이 제시되어 있으며,
국내특허등록 제380178호의 오가피 추출액 가공방법에서는, 일정량의 물에 오가피를 우려낸 후 소정의 시간동안 숙성한 후 우유 및 육류에 혼합하여 섭취할 수 있는 오가피 추출액 가공방법이 제시되어 있으며,
국내특허등록 제555904호의 큰느타리버섯과 오가피의 혼합 생약재 추출물 및 이를 유효성분으로 하는 골다공증 예방 및 치료용 조성물에서는, 큰느타리버섯과 오가피를 각각의 추출용기에 넣고 열을 가열하여 각각의 생약재 추출물을 획득하고, 각각의 생약재 추출물을 혼합하는 혼합 생약재 추출물의 제조에 대한 기술이 제시되어 있다.
영지버섯은 중국에서 발간된 중국 약용사균(1974)에서 영지추출물이 위궤양, 위염에 탁월한 효과를 언급하였고, 일본낑리끼대학 아리찌(有地) 교수는 설사, 변비, 위산과다, 궤양 등에 다양한 효과, 조선대학교 정명현 교수는 영지추출물이 소장 및 대장절편의 자동운동을 증대시키고, 흰쥐의 shay 궤양 및 아스피린위궤양에 대하여 유의할 만큼 억제효과를 가지고 있는 것으로 알려져 왔다.
또한, 노루궁뎅이버섯은 중국의 본초도감에서 오장을 이롭게 하고 소화를 도우며, 자양강장, 항암작용 및 위궤양. 십이지궤양, 신경쇠약 등에 효과가 있으며, 중국약용진균(1978)에서는 소화불량, 위궤양, 신경쇠약에 효과가 있는 약용버섯이라고 기록되어 있고, Yang(1989)와 Ahn(1992)은 노루궁뎅이버섯이 신체의 면역체계를 강화시켜주고, 위궤양, 십이지궤양, 위암 등에 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서는 위염 및 위궤양의 예방과 치료 가능한 제제를 개발하기 위한 것으로, 연구결과 오가피로 이루어진 천연배지에 버섯종균을 배양발효시켜 얻어진 발효물로부터 획득한 추출물이 위 점막 손상억제활성 및 치료활성에 대한 우수함을 확인하였다.
따라서, 본 발명은 오가피를 기질(천연배지)로 하는 오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물과, 그로부터 추출된 추출물을 유효성분으로 함유하는 위염예방 및 치료용 약제를 제공하는데 목적이 있다.
상기 목적을 달성하고자 발명된 본 발명은,
오가피를 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물을 획득하고, 상기 발효물로부터 추출된 추출물을 유효성분으로 함유하는 위염예방 및 치료용 약제를 제공한다.
오가피를 기질로 한 버섯 균사체 발효추출물은, 오가피의 수분함량을 50~65%로 조절하여, 멸균한 후 급랭하여 기질(천연배지)을 준비하고, 상기 준비된 오가피의 기질에 기 배양된 버섯종균을 8~11중량%를 접종하여 온도 23~32℃에서 15~60일간 발효시켜 획득한 오가피-버섯 균사체 발효물로부터 추출하는 것으로,
상기 오가피를 기질로 한 버섯 균사체 발효추출물은 오가피를 기질로 한 버섯 균사체 발효물을 물 또는 알코올수용액으로 추출한다.
오가피로 이루어지는 기질의 멸균은 수분함량을 50~65%로 조절된 오가피를 보통 온도 120~125℃에서 60~120분간 보관하여 멸균처리한다.
상기 버섯종균은 온도 23~32℃에서 3~7일간 배양한 노루궁뎅이버섯 또는 영지버섯 종균을 사용한다.
기질로 사용하는 오가피는 오가피 잎, 오가피 가지, 오가피 뿌리 등을 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있으며,
상기 오가피는 Acanthopanax senticosus(RUPR. et MAX.) HARMS(가시오가피나무), Acanthopanax senticosus var. subinermis KITAGAWA(왕가시오가피나무), Acanthopanax sessiliflorus (RUPR. et MAX.) SEEM.(오가피나무), Acanthopanax chiisanense NAKAI(지리산오가피나무), Acanthopanax koreanum NAKAI(섬오가피나무), Acanthopanax rufinerve NAKAI(털오가피나무), Acanthopanax seoulense NAKAI(서울오가피나무), Acanthopanax sieboldianum MAKINO(오가나무)로부터 1종을 선택하여 사용하거나, 또는 1종 이상을 선택하여 혼합하여 사용하는 것도 가능하다.
본 발명의 오가피를 기질로 한 버섯 균사체 발효추출물은 적절한 부형제를 사용하여 캡슐제, 정제, 액제, 산제, 현탁제 등의 제형으로 사용할 수 있는 것이다.
상기와 같이 오가피를 기질로 하여 버섯을 발효시킨 오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물과, 오가피-버섯 균사체 발효물로부터 추출된 오가피-버섯 균사체 발효추출물은 알코올로 유발되어지는 위 손상 억제활성이 우수하며, 또한 알코올로 손상되어진 위에 대한 치료활성이 우수하여 위염예방 및 치료에 매우 유용하다.
첨부된 도면을 참조로 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하도록 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서, 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형 예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
첨부된 도 1은 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 가시오가피를 기질로 하여 노루궁뎅이버섯 발효물(가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물)을 수득하는 방법을 도시한 블록도이고, 도 2는 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)로 야기되어지는 위 손상에 대한 예방효과(억제활성)를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 열수추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진이며, 도 3은 본 발명의 실 시예에 따른 화학적요인(알코올)로 야기되어지는 위 손상에 대한 예방효과(억제활성)를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 70%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진이고, 도 4는 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)로 야기되어지는 위 손상에 대한 예방효과(억제활성)를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 95%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진이며, 도 5는 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)으로 손상된 위의 기능 치료효과를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 열수추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진이고, 도 6은 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)으로 손상된 위의 기능 치료효과를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 70%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진이고, 도 7은 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)으로 손상된 위의 기능 치료효과를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 95%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진이다.
오가피를 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물의 제조는 도 1과 같이,
첫째, 오가피를 선별하여 수분의 함량을 50~65%로 조절한 다음 120~125℃에 서 60~150분간 멸균한 후 급랭하여 천연물기질을 준비하는 단계(P1)와;
둘째, 온도 23~32℃에서 3~7일간 배양하여 천연물기질에 접종할 버섯종균을 준비하는 단계(P2)와;
셋째, 준비된 천연물기질에 기 배양된 버섯종균을 6~11중량%로 접종하는 단계(P3)와;
넷째, 접종한 배양물을 23~32℃에서 15~60일간 발효시켜 발효물을 수득하는 단계(P4)로 이루어진다.
오가피를 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물로부터의 추출물의 추출은 발효물 중량에 3~5배(건조발효물인 경우 10배) 물 또는 알코올수용액으로 추출하는 것으로,
열수추출물 및 70%-알코올 수용액(EtOH) 추출물의 경우, 발효물 중량에 3~5배(건조발효물인 경우 10배)를 넣어 가열 추출 및 회수하는 작업을 2회 반복하여 농축 및 동결건조하는 단계를 거쳐 추출물을 획득하고,
95%-알코올 수용액(EtOH)의 경우 발효물 중량의 3~5배(건조발효물인 경우 10배)를 넣어 실온에서 36~48시간 동안 방치(6시간마다 shaking 작업을 반복실시) 하였다가 회수하는 작업을 2회 반복하여 농축 및 동결건조하는 단계를 거쳐 추출물을 획득한다.
기질로 사용되는 오가피는 오가피 잎, 오가피 가지, 오가피 뿌리 등을 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있으며,
상기 오가피는 Acanthopanax senticosus(RUPR. et MAX.) HARMS(가시오가피나무), Acanthopanax senticosus var. subinermis KITAGAWA(왕가시오가피나무), Acanthopanax sessiliflorus (RUPR. et MAX.) SEEM.(오가피나무), Acanthopanax chiisanense NAKAI(지리산오가피나무), Acanthopanax koreanum NAKAI(섬오가피나무), Acanthopanax rufinerve NAKAI(털오가피나무), Acanthopanax seoulense NAKAI(서울오가피나무), Acanthopanax sieboldianum MAKINO(오가나무)로부터 1종을 선택하여 사용하거나, 또는 1종 이상을 선택하여 혼합하여 사용한다.
보다 상세하게 설명하면,
오가피 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물 제조방법
1) 오가피 천연배지 준비단계(P1) :
① 수분조절 : 오가피에 물을 첨가하여 수분의 함량을 50~65%로 조절하고 입병을 한다.
(상기 오가피 잎을 천연배지로 이용할 경우에는 오가피 잎의 중량에 1.8~2.5배수의 물을 첨가하여 수분함량을 조절하고, 오가피 목질부(가지, 수피)와 뿌리를 이용하여 천연배지로 이용할 경우에는 각각의 중량의 1.5~2.2배의 물을 첨가하여 수분함량을 한다.)
② 멸균 : 오가피 잎을 기질로 입병한 배양병은 온도 120~125℃에서 60~120분간 멸균한 후 급랭하여 기질을 준비하고, 오가피 목질부 및 뿌리를 기질로 하여 준비한 배양병은 온도 120~125℃에서 120~150분간 멸균한 후 급랭하여 기질을 준비한다.
2) 접종할 종균준비 단계(P2) :
상기 단계(P1)에서 준비한 천연배지에 접종할 버섯종균을 준비하는 단계로, 온도 23~32℃에서 3~7일간 배양하여 버섯종균을 준비한다.
3) 천연물배지에 종균을 접종하는 단계(P3) :
상기 단계(P1)에서 준비한 오가피를 이용한 천연배지에 단계(P2)에서 준비된 버섯종균을 6~11 중량%로 접종한다.
4) 발효물 수득단계(P4) :
접종한 배양물을 최적조건인 온도 23~32℃, 습도 50~60%에서 발효시키되, 오가피 잎을 기질로 한 배양물의 경우 15~30일간 발효시켜 발효물을 획득하고, 목질부와 뿌리를 기질로 한 배양물은 40~60일간 발효시켜 발효물을 획득한다.
오가피 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물로부터 추출물 제조방법
1) 열수추출물 제조방법은,
① 오가피 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물 중량의 3~5배(발효물이 건조물일 경우, 10배수)의 물을 첨가하여 100℃에서 4시간 동안 1차 추출을 하고, 같은 방법으로 4시간 동안 2차 추출하고,
② 1차 및 2차 추출액을 합하여 농축기로 10 brix 정도로 농축하며,
③ 농축된 추출액을 진공냉동동결건조기를 이용하여 건조시킨다.
2) 70%-EtOH 추출물 제조방법은,
① 오가피 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물 중량의 3~5배(발효물이 건조물일 경우, 10배수) 70%-EtOH을 첨가하여 80℃에서 4시간 동안 1차로 추출하고, 같은 방법으로 4시간 동안 2차 추출하고,
② 1차 및 2차 추출액을 합하여 농축기로 10 brix 정도로 농축하며,
③ 농축된 추출액을 진공냉동동결건조기를 이용하여 건조시킨다.
3) 95% EtOH 추출물 제조방법
① 오가피 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물 중량의 3~5배(발효물이 건조물일 경우, 10배수) 95%-EtOH을 첨가하여 실온에서 48시간 동안 방치(6시간마다 shaking 작업을 반복실시)하여 추출한다. 같은 방법으로 2회 반복실시하여 추출액을 얻는다.
② 1차 및 2차 추출액을 합하여 농축기로 10 brix 정도로 농축한다.
③ 농축된 추출액을 진공냉동동결건조기를 이용하여 건조시킨다.
이하, 본 발명을 이용하여 제조된 추출물에 대한 효능을 알아보기 위하여 아래와 같이 다양한 실험을 하였다.
가시오가피를 기질로 하고, 상기 기질에 노루궁뎅이 버섯종균을 배양하여 발효물을 획득하였다.
즉, 가시오가피에 물을 첨가하여 수분의 함량을 60%로 조절하고 입병한 다음 121℃에서 120분간 멸균한 후 급랭한 후, 25℃에서 4일간 배양한 노루궁뎅이 버섯종균을 8 중량%로 접종하고, 온도 25℃, 습도 55%에서 30일간 발효시켜 발효물을 획득하였다.
상기 발효물을 이용하여 추출물 제조방법인 열수추출물, 70%-EtOH 추출물 및 95%-EtOH 추출물의 제조방법으로 각각 추출물을 획득하여 농축기로 10 brix 정도로 농축한 다음 진공냉동동결건조기를 이용하여 건조시켜 시료화 하였다.
실시예
1.
무수에탄올에 의해 유발된 위 손상 예방 효과
1) 실험방법
① 체중 180~200g의 수컷 흰쥐 4마리를 1군으로 대조군, 양성대조군(시메티딘; cimetidine), 실험군 (열수추출물, 70%-EtOH 추출물, 95%-EtOH 추출물)의 5군으로 실험하였다.
② 48시간 전, 24시간 전, 2시간 전에 열수추출물, 70%-EtOH 추출물, 95%-EtOH 추출물 및 시메티딘(cimetidine)을 150mg/kg 경구투여 한다.
③ 24시간 전부터 절식, 절수시킨다.
④ 무수에탄올 1ml/200g을 경구투여 한다.
⑤ 절식, 절수하여 2시간 방치 후 마취제(ether)로 치사시켜 위를 적출한다.
⑥ 적출한 위를 2%-formalin 용액에 1시간 담가 고정한다.
⑦ 위의 대만부를 절개하여 발생된 손상부위의 길이를 측정한다.
2) 실험결과
[표 1] 위 손상 예방 효과 측정에 따른 위 손상부위의 손상정도 및 손상율
시 료 명 | 손 상 정 도 | 손 상 율 |
NONE | 61.6 ± 23.0 | 100% |
시메티딘(cimetidine) | 49.4 ± 29.7 | 80.2% |
열수추출물 | 51.0 ± 27.8 | 82.8% |
70%-EtOH 추출물 | 52.7 ± 21.5 | 85.5% |
95%-EtOH 추출물 | 44.0 ± 10.6 | 71.4% |
발효물 추출물의 위 손상 예방효과를 양성대조군인 시메티딘(Cimetidine)정과 비교하여 실험을 실시하였다. 투여한 시료의 양은 150mg/kg이며, 실험동물은 SD Male Rat (180 ~ 200g)을 사용하여 위의 [표 1]과 같은 결과를 얻었다.
발효물 시료 3종 모두 양성대조군인 시메티딘(Cimetidine)과 비교하여 유의적인 예방효과를 갖는 결과를 얻었으며, 특히 발효물 95%-EtOH 추출물의 경우 손상율이 71.4%로 양성대조군인 시메티딘(Cimetidine)의 80.2% 보다 우수한 예방효과를 얻었다.
실시예
2.
무수에탄올에 의해 손상된 위의 치료 효과
1) 실험방법
① 체중 180~200g의 수컷 흰쥐 4마리를 1군으로 대조군, 양성대조군(cimetidine), 실험군 (열수추출물, 70%-EtOH 추출물, 95%-EtOH 추출물)의 5군으로 실험하였다.
② 24시간 전부터 절식, 절수시킨다.
③ 무수에탄올 1ml/200g을 경구 투여한다.
④ 절식, 절수하여 2시간 방치 후 열수추출물, 70%-EtOH 추출물, 95%-EtOH 추출물 및 시메티딘(cimetidine)을 24시간 간격으로 150mg/kg 경구 투여한다.
⑤ 24시간 후, 48시간 후 ether로 치사시켜 위를 적출한다.
⑥ 적출한 위를 2%-formalin 용액에 1시간 담가 고정한다.
⑦ 위의 대만부를 절개하여 발생된 손상부위의 길이를 측정한다.
2) 실험결과
[표 2] 위 손상 치료 효과 측정에 따른 위 손상부위의 손상정도
시 료 명 |
시료 섭취 후 시간(hr) | ||
0 | 24 | 48 | |
NONE | 56.7 ± 14.7 | 41.2 ± 14.8 | 29.4 ± 9.6 |
시메티딘(cimetidine) | 18.5 ± 0.7 | 8.0 ± 0.0 | |
열수추출물 | 20.3 ± 8.3 | 11.5 ± 4.9 | |
70%-EtOH 추출물 | 22.51 ± 4.4 | 10.7 ± 5.5 | |
95%-EtOH 추출물 | 16.8 ± 11.9 | 5.5 ± 3.3 |
[표 3] 위 손상 치료 효과 측정에 따른 위 손상부위의 손상율
시 료 명 |
시료 섭취 후 시간(hr) | ||
0 | 24 | 48 | |
NONE | 100.0% | 72.7% | 51.9% |
시메티딘(cimetidine) | 100.0% | 32.6% | 14.1% |
열수추출물 | 100.0% | 35.8% | 20.3% |
70%-EtOH 추출물 | 100.0% | 39.7% | 18.9% |
95%-EtOH 추출물 | 100.0% | 29.6% | 9.7% |
발효물 추출물의 위 손상 예방효과를 양성대조군인 Cimetidine 정과 비교하여 실험을 실시하였다. 투여한 시료의 양은 150mg/kg이며, 실험동물은 SD Male Rat (180 ~ 200g)을 사용하여 위의 [표 2]와 같은 손상정도와 [표 3]과 같은 손상율을 얻었다.
발효물 시료 3종 모두 양성대조군인 Cimetidine와 비교하여 유의적인 치료효과를 갖는 결과를 얻었으며, 특히 발효물 95%-EtOH 추출물의 경우 24시간과 48시간 후에 각각의 손상율이 29.6%, 9.7%로 양성대조군인 Cimetidine의 32.6%와 14.1% 보다 우수한 치료효과를 얻었다.
실시예3
오가피 기질로 한 오가피-버섯 균사체 발효물로부터 추출된 추출물의 독성시험
가시오가피 발효물의 열수추출물을 단회 또는 반복 투여했을 때 나타날 수 있는 독성을 식품의약품안전청의「의약품등의 독성시험기준」에 따라 평가하였다.
단회 투여 독성평가를 위해 가시오가피 발효물 열수추출물을 멸균정제수에 녹여 SD 랫드에 1,000, 2,000 또는 5,000 mg/kg의 용량으로 경구투여하고 14일간 임상증상과 체중을 기록한 후 15일째에 부검하여 병리검사와 더불어 주요 장기의 중량을 측정하였다.
시험결과 한계용량인 5,000 mg/kg까지 동물의 사망, 일반증상 및 부검시의 육안병변을 유발하지 않음은 물론 체중변화와 장기중량에도 영향을 미치지 않아 개략의 치사량 (10% 치사량)이 산출되지 않았다. 따라서 반복투여 독성평가를 위한 고용량을 한계용량인 2,000 mg/kg으로 하고 공비 0.5를 적용하여 중간용량을 1,000 mg/kg으로, 저용량을 500 mg/kg으로 설정하였다.
반복투여 독성평가를 위해 가시오가피 발효물 열수추출물을 28일간 경구투여하면서 일반증상과 체중 및 사료/음수 섭취량을 기록한 후 29일째에 부검하여 병리검사, 혈액학 및 혈액생화학 분석과 더불어 주요 장기의 중량을 측정하였다.
시험결과 한계용량인 2,000 mg/kg까지 동물의 사망, 일반증상, 체중변화, 사료 및 음수 섭취량, 부검소견, 혈액학적 지표, 혈액생화학적 지표 및 장기중량에 유의할만한 이상이나 변화를 초래하지 않아 경구투여 최소치사량은 2,000 mg/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.
도 1은 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 가시오가피를 기질로 하여 노루궁뎅이버섯 발효물(가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물)을 수득하는 방법을 도시한 블록도.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)로 야기되어지는 위 손상에 대한 예방효과(억제활성)를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 열수추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)로 야기되어지는 위 손상에 대한 예방효과(억제활성)를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯발효물의 70%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)로 야기되어지는 위 손상에 대한 예방효과(억제활성)를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 95%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)으로 손상된 위의 기능 치료효과를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 열수추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)으로 손상된 위의 기능 치료효과를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 70%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진.
도 7는 본 발명의 실시예에 따른 화학적요인(알코올)으로 손상된 위의 기능 치료효과를 in vivo 실험을 통하여 검토한 것으로, 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물의 95%-EtOH 추출물과 양성대조군인 cimetidine에 대한 실험결과로 위를 절제하여 손상정도를 측정한 사진.
Claims (7)
- 오가피의 수분함량을 50~65%로 조절한 후 가열하여 멸균한 오가피 천연배지에 온도 23~32℃에서 3~7일간 배양된 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum) 또는 영지버섯(Ganoderma lucidum) 종균을 8~11중량%를 접종하여 온도 23~32℃에서 오가피 잎을 기질로 하는 경우 15~30일간 발효시키고, 오가피 목질부와 뿌리를 기질로 하는 경우 40~60일간 발효시켜 획득한 오가피-버섯 균사체 발효물을 포함하는 위염예방 및 치료용 약학 조성물.
- 오가피의 수분함량을 50~65%로 조절한 후 가열하여 멸균한 오가피 천연배지에 온도 23~32℃에서 3~7일간 배양된 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum) 또는 영지버섯(Ganoderma lucidum) 종균을 8~11중량%를 접종하여 온도 23~32℃에서 오가피 잎을 기질로 하는 경우 15~30일간 발효시키고, 오가피 목질부와 뿌리를 기질로 하는 경우 40~60일간 발효시켜 획득한 오가피-버섯 균사체 발효물로부터 추출된 오가피-버섯 균사체 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 위염예방 및 치료용 약제.
- 제2항에 있어서,상기 오가피-버섯 균사체 발효추출물은 오가피-버섯 균사체 발효물을 물 또는 알코올수용액으로 추출한 것임으로 특징으로 하는 위염예방 및 치료용 약제.
- 제2항에 있어서,기질로 사용하는 오가피는 오가피 잎, 오가피 가지, 오가피 뿌리 등을 단독 또는 혼합하여 사용함을 특징으로 하는 위염예방 및 치료용 약제.
- 제2항에 있어서,상기 오가피는 Acanthopanax senticosus(RUPR. et MAX.) HARMS(가시오가피나무), Acanthopanax senticosus var. subinermis KITAGAWA(왕가시오가피나무), Acanthopanax sessiliflorus (RUPR. et MAX.) SEEM.(오가피나무), Acanthopanax chiisanense NAKAI(지리산오가피나무), Acanthopanax koreanum NAKAI(섬오가피나무), Acanthopanax rufinerve NAKAI(털오가피나무), Acanthopanax seoulense NAKAI(서울오가피나무), Acanthopanax sieboldianum MAKINO(오가나무)로부터 1종 또는 1종 이상을 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 위염예방 및 치료용 약제.
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