KR100867370B1 - 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논ｂ를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 또는 비만의예방 및 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논ｂ를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 또는 비만의예방 및 치료용 약학적 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 또는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 특히 고삼 추출물로부터 분리한 단일화합물인 5-메틸소포라플라바논 B는 당뇨 합병증을 유발하는 알도스 환원효소의 활성 억제효과를 나타내고, 또한 지방세포 분화과정을 저해하여 비만을 예방하므로 본 발명에 따른 조성물은 당뇨병 합병증 또는 비만을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다.
고삼, 메틸소포라플라바논 B, 당뇨병 합병증, 비만, 예방 및 치료

Description

고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 Ｂ를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 또는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물{Pharmaceutical compositions for the prevention and treatment of diabetic complications or obesity containing Sophora flavascens extracts or the isolated 5-methylsophoraflavanone B therefrom as an active ingredient}
도 1은 정상적으로 분화된 지방세포(a) 및 5-메틸소포라플라바논 B로 처리된 지방세포(b)의 염색된 세포주 외관사진을 나타내고,
도 2는 본 발명의 5-메틸소포라플라바논 B에 의한 지방세포 분화 억제 효과를 나타내고,
도 3은 정상적으로 분화된 지방세포(a) 및 5-메틸소포라플라바논 B로 처리된 지방세포(b)의 현미경 관찰 결과를 나타낸다.
본 발명은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유 효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 또는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
당뇨병은 인슐린의 부족으로 혈액 중의 포도당(혈당) 농도가 정상인 수준보다 높아져 포도당이 소변으로 배출되는 만성질환이다. 당뇨병에 병발하는 질환에는 당뇨병 이외의 거의 모든 질환이 있다고 해도 좋을 정도로 많다. 그러나 합병 빈도도 높고 중요한 증세로는 망막병증(retinopathy), 신경병증(neuropathy) 및 신장병증(nephropathy)이 있다.
당뇨병에 의해 체내 혈당량이 높아진 상태가 장기간 계속됨으로써 당화산물이 신장, 신경, 망막과 전신의 크고 작은 혈관들을 침범하면서 만성 합병증이 발병하는데, 당뇨 합병증의 약 반수 이상이 당뇨병성 망막병증이며 성인 실명의 가장 큰 발병 원인이다. 증세로는 시력장애, 녹내장, 시력상실 등이 있다.
또한, 당뇨병성 신경병증으로 탄수화물 및 지질 중간대사의 이상으로 인해 말초신경장애가 생긴다. 건반사(腱反射)의 저하, 소실, 지각장애, 사지동통 등의 증세가 나타난다. 특히 하지에 야간의 근육통과 같은 증세를 호소하는 일이 있고 발바닥의 작열감(灼熱感), 통각과민 및 촉각둔마 등을 호소하기도 한다. 보통은 좌우대칭성이며 운동장애는 드물다. 그 밖에 자율신경장애로서 동공의 좌우부동, 발한 이상, 음위(陰蔿), 잔뇨감, 배뇨지연, 요폐(尿閉), 변비 및 설사 등을 볼 수 있다.
신장병증 역시 매우 흔하여 당뇨병 합병증의 가장 중요한 사망 원인으로 꼽 히고 있다. 당뇨병 환자는 정상인에 비해 신부전증의 위험이 약 20 배 높은 것으로 확인되고 있다. 증세로는 사구체 경화증, 단백뇨, 신부전 등이 있다. 신장합 병증은 과다한 알도스 환원효소 또는 산화적 스트레스에 의해 유발되는 것으로 보고되고 있다.
이러한 당뇨합병증을 유발하는 기전으로는 크게 단백질의 비효소적 당화반응(non-enzymatic glycation of protein)과 폴리올 경로(polyol pathway)의 기작 변화에 의한 삼투압 스트레스 및 자유 라디칼에 의한 산화적 스트레스(oxidative stress) 등으로 설명되고 있다.
단백질의 비효소적 당화반응에서는 단백질의 리신 잔기 등의 아미노산 그룹이 환원당과 효소 작용 없이 축합 및 교차반응하여 최종당화산물(advanced glycation endproducts, AGEs)을 생성한다. 최종당화산물은 비가역적인 반응 산물이므로, 일단 생성되면 혈당이 정상으로 회복되어도 분해되지 않고 단백질 생존기간 동안 조직에 축적되어 조직의 구조와 기능을 비정상적으로 변화시킨다(Vinson, J.A. et al., J. Nutritinal Biochemistry, 7, 559-663, 1996; Smith, P.R. et al., Eur. J Biochem., 210, 729-739, 1992). 비효소적 단백질 당화반응에 의하여 기저막, 혈장 알부민, 수정체 단백질, 피브린, 콜라겐 등의 단백질에서 당화가 일어나며, 생성된 최종당화산물이 조직의 구조와 기능을 비정상적으로 변화시켜 당뇨병 망막병증(retinopathy), 당뇨병 백내장(cataract), 당뇨병 신증(nephropathy), 당뇨병 신경병증(neuropathy) 등의 만성 당뇨합병증을 유발시킨 다.
또한 고혈당 상태에서 최종당화산물이 생성되는 과정에서 지질대사에 이상이 일어나고 동시에 생성되는 유해한 산소 자유 라디칼에 대한 방어시스템 기능이 저하되어 산화적 스트레스가 유발된다고 보고된 바 있다(Yokozawa, T. et al., J of Trad. Med., 18, 107-112, 2001). 이처럼 비효소적 당화반응과 산화적 스트레스(oxidative stress) 작용 기전이 서로 연관되어 있다.
폴리올은 알도스(aldose)나 케토스(ketose)로부터 알도스 환원효소(aldose reductase; AR)에 의해 환원된 알코올을 의미한다. 일반적으로 포도당이 세포 내로 들어오게 되면 헥소키나제에 의하여 6-인산포도당으로 전환된 다음 해당경로를 거쳐 분해된다. 그러나 포도당의 농도가 증가하는 경우 이에 결합하는 헥소키나제가 포화되어 여분의 포도당은 헥소키나제에 비하여 친화성이 낮은 알도스 환원효소에 결합하여 솔비톨로 대사됨으로써 세포 내에는 솔비톨이 축적된다. 알도스 환원효소는 망막, 공막, 렌즈, 신장, 적혈구, 뇌, 근육, 간 및 말초신경 등에 존재하는데, 특히 말초신경에서는 포도당 투과가 인슐린에 의하여 영향을 받지 않기 때문에 문제가 될 수 있다. 즉, 고혈당 시 슈만 세포에 솔비톨이 과다 축적되면 이로 인하여 삼투압이 증가하여 수초(myelin sheath)의 부종, 괴사 및 붕괴가 발생할 수 있고, 지속적으로 증가한 삼투압으로 인하여 수분이 인입되어 당뇨병 합병증으로 진행된다(당뇨병학, 김응진 외, 대한 당뇨병학회, 고려의학, 483 쪽; Soulis-Liparota, T. et al., Diabetologia, 38, 357-394, 1995).
최종당화산물이 사람의 미세혈관 내피세포에서 폴리올 경로의 주효소인 알도스 환원효소(AR)를 활성화하는 것이 보고된 바 있다(Nakamura, N. et al., Free Radic Biol. Med., 29, 17-25, 2000). 정상상태에서는 알도스 환원효소가 포도당에 대하여 친화력이 매우 낮지만, 고농도의 포도당에서는 알도스 환원효소가 활성화되어 과도하게 포도당을 솔비톨로 환원시키고, 이 솔비톨이 솔비톨 탈수소효소에 의해 과당으로 전환된다. 이 과당은 포도당에 비하여 단백질의 비효소적 당화반응의 속도가 약 10 배 정도 빠르다. 따라서 고농도의 과당이 단백질과 결합하여 결국은 최종당화산물의 형성을 가속화시킨다.
이중, 신장 합병증은 매우 흔하여 당뇨병 합병증의 가장 중요한 사망 원인으로 꼽히고 있다. 또한 당뇨병 환자는 정상인에 비해 신부전증의 위험이 약 20 배 높은 것으로 확인되고 있다. 신장 합병증 치료제로 알도스 환원효소 억제제인 AS-3201((R)-2-(4-브로모-2-플루오로벤질)-1,2,3,4-테트라히드로피롤로[1,2-a]피라진-4-스피로-3'-피롤리딘-1,2',3,5'-테트론), 톨레스타트(tolrestat), 포날레스타트(ponalrestat) 및 에팔레스타트(epalrestat)가 개발되어 있으나, 이들의 치료효과에 대한 연구는 여전히 진행 중에 있다. 이 밖에도, 당뇨병 합병증 치료제를 개발하기 위한 일환으로 알도스 환원효소 억제활성을 보이면서 동시에 항당뇨, 항산화성 및 혈당강하 효능을 가진 천연물질에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다.
일단 당뇨병이 발생하여 혈당이 금방 떨어지지 않으면 당뇨합병증 예방제를 복용하여 당뇨합병증을 예방하여야 한다. 현재, 단백질 당화 억제제로 유일한 합성제제인 아미노구아니딘 HCl(aminoguanidine HCl)은 친핵성 히드라진(hydrazine) 으로 축합반응의 산물과 결합하여 단백질과의 교차결합을 방지함으로써 최종당화산물의 생성을 억제하여 합병증으로 진전되는 것을 지연 또는 방지한다(Brownlee, M. et al., Sciences, 232, 1629-1632, 1986; Edelstein, D. et al., Diabetes, 41, 26-29, 1992). 아미노구아니딘 HCl은 당뇨합병증의 예방 및 치료에 가장 유망한 합성 의약품으로 제 3상 임상실험까지 진행되었으나, 장기간 투여 시 독성이 유발되는 문제점이 있어보다 안전한 약제의 개발이 요망되고 있다.
영국의 당뇨병 조절 및 합병증 치료 연구그룹(Diabetes Control and Complication Trial Research Group)의 연구 결과에 의하면 강력한 인슐린 요법에 의해 혈당이 조절되면 당뇨병의 대다수를 차지하는 제 2형 (인슐린 비의존성)당뇨병 환자의 만성합병증 발병률 및 발병 소요기간을 늦추어 준다는 임상연구 보고가 있으나 5~10년이 지나면 대부분의 당뇨환자들에게서 합병증이 발병하게 된다.
당뇨합병증을 억제하는 기전으로는 폴리올 경로(Polyol pathway), 최종당화산물 경로(advanced glycation end-products(AGEs) pathway), 헥소사민 경로(Hexosamine pathway), 단백질 키나아제 C 경로(Protein kinase C pathway)를 억제하는데에 초점을 맞추고 있으며(Nature, 414, p813, 2001) 해당되는 기전을 차단하는 것은 당뇨병의 치료 약물을 개발하는 기전과는 전혀 별개이다.
즉, 당뇨병 치료제를 개발하는 기전을 통해서 개발한 약물은 당뇨합병증에 대해 효과를 나타낸다고 볼 수 없으며, 당뇨합병증에 효과적인 약물은 혈당이나 인슐린 내성 등에 전혀 효과적이지 않다. 예를 들어 일본에서 시판되어 판매가 된 당뇨합병증 저해제인 에팔레스타트(epalrestat, ONO-2235, 알도스 환원효소 저해제)는 실험동물 및 임상에서 혈당을 강하하는 효과나 인슐린 내성과는 관계가 없으며, 알도스 환원효소 및 최종당화산물을 저해함으로써 당뇨합병증을 치료하는 약물로 알려져 있다. 따라서, 당뇨에 대한 효과와 당뇨합병증에 대한 효과는 별개의 문제라 할 수 있다.
또한, 당뇨병과 직간접적으로 연관되어있으며 현대인의 만성질환 중의 하나인 비만은 산업화와 소득 수준 향상에 따른 식습관 및 생활습관 변화로 전세계적으로 가장 심각한 건강 문제의 하나로 대두되고 있으며, 1996년에는 세계보건기구(WHO)에 의하여 질병으로 규정되었다. 뿐만 아니라 비만은 당뇨, 고혈압, 고지혈증, 심장병 등의 성인병과 각종 암 유발에 직간접적으로 연관되어 있는 것으로 알려지고 있다. 현재까지 알려진 비만 치료제의 작용기전으로는 식욕억제, 열대사촉진, 소화억제, 호르몬 조절 등이 있다. 이와는 구별되게 전구지방세포가 지방세포로 분화되는 과정을 저해하면, 체내의 지방세포수를 조절할 수 있으며, 따라서 이러한 작용기전을 바탕으로 비만 치료에 이용할 수 있다. 지방세포로의 분화과정은 Pref-1, Foxo1, Foxa2, SMAD-3, Wnt-10b, GATA-2, GATA-3, PPAR 등의 세포 내 조절인자 상호간의 신호전달 과정에 의하여 조절된다. 그러므로, 이러한 세포 내 신호전달물질에 영향을 줄 수 있는 약물을 스크리닝함으로써, 비만 치료물질을 찾아낼 수 있다(Harp., Curr. Opin. Lipidol., 15, 303-307, 2003; Tong, et al., Science, 290).
한편, 고삼(Sophora flavescens)으로부터 분리한 화합물이 알파글루코시다아제(α-glucosidase)와 베타아밀라아제(β-amylase) 저해함으로써 항당뇨 효과가 있음이 보고된 바 있다(Jin Hyo Kim et al., Biol. Pharm. Bull., 29(2), 302-305, 2006). 상기 문헌의 고삼 유래 플라보노이드에는 쿠쉐놀 A(kushenol A), 쿠라리논(kurarinone), 소포라플라바논 G(sophoraflavanone G), 2'-메톡시쿠라리논(2'-methoxykurarinone), 쿠라리놀(kurarinol), 8-프레닐캠프페롤(8-prenylkaempferol), 이소잔토휴몰(isoxanthohumol), 쿠라리딘(kuraridin), 맥키안(maackian) 등이 알려져 있다. 그러나 이들 플라보노이드의 당뇨병 합병증 치료 및 예방 효과에 대해서는 밝혀진 바 없다.
이에, 본 발명자들은 고삼으로부터 분리한 단일 화합물인 5-메틸소포라플라바논 B가 알도스 환원효소의 활성을 억제할 뿐만 아니라, 지방세포 분화과정을 저해함을 세계 최초로 발견하고, 이를 당뇨병 합병증, 비만 또는 비만과 직·간접적으로 관련되는 질병을 예방 및 치료할 수 있음을 알아내고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 예방 및 개선용 건강식품을 제공하는 데 있다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 또는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 예방 및 개선용 건강식품을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 고삼 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 고삼 추출물은 고삼 뿌리로부터 추출하여 얻은 것이 바람직한데, 상기 고삼은 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다. 상기 고삼 추출물을 제조하는 방법은 당업계의 통상적인 추출방법을 사용할 수 있다. 고삼 건 조물을 에탄올로 추출하여 추출액을 얻은 다음, 추출액을 여과하고, 감압 농축하여 고삼의 에탄올 추출물을 얻을 수 있다.
또한, 본 발명은 고삼 추출물로부터 분리한 하기 화학식 1로 표시되는 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 화합물 5-메틸소포라플라바논 B는 고삼으로부터 추출·분리된 것이다.
Figure 112007026471630-pat00001
본 발명에 따른 상기 화합물은 고삼에 존재하는 대표적인 활성성분으로, 상기 화합물을 분리하기 위한 방법은 하기와 같이 수행될 수 있다.
본 발명은 고삼 뿌리 건조물을 C1~C4의 알코올로 추출하여 고삼 추출물을 얻는 단계(단계 1); 및 상기 단계 1에서 얻은 추출물을 고속액체 크로마토그래피를 수행하여 화합물을 분리하고 정제하는 단계(단계 2)를 포함하여 이루어지는 상기 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B의 제조방법을 제공한 다.
본 발명에 따른 단계 1은 고삼 뿌리 건조물을 C1~C4의 알코올로 추출하여 고삼 추출물을 얻는 단계이다. 상기 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등의 저급 알코올을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 에탄올이다.
본 발명에 따른 단계 1에 있어서, 상기 알코올 추출물을 얻는 방법은 건조된 고산 뿌리를 적당한 크기로 분쇄하여 추출용기에 넣고 적당한 양의 에탄올을 첨가하여 상온에서 추출하여 추출액을 얻는다. 고삼의 추출 효율을 높이기 위하여 상기 과정을 수회 이상 반복 수행할 수 있다. 상기 추출액을 여과하고, 감압 농축하여 고삼의 에탄올 추출물을 제조할 수 있다.
본 발명에 따른 단계 2는 상기 단계 1에서 얻은 추출물을 고속액체 크로마토그래피를 수행하여 5-메틸소포라플라바논 B를 분리하고 정제하는 단계이다.
상기 에탄올 추출물은 고속액체 크로마토그래피를 수행하여 5-메틸소포라플라본 B로 분리될 수 있으며, 이때 3,7,4'-트리히드록시-5-메톡시-8-프레닐플라바논, 쿠세놀 N, 쿠라리논, 2'-메톡시쿠라리논, 소포라플라바논 G, 리치아논 A 및 쿠라리딘도 분리될 수 있다. 상기 크로마토그래피는 35 부피% 아세토니트릴에서 70 부피% 아세토니트릴로 농도 구배된 물과 아세토니트릴 혼합용매를 전개용매로 사용하여 수행될 수 있으며, 이때 용출속도는 분당 5~15 ㎖의 속도, 수행 시간은 0.5 내지 2시간 동안이 바람직하다.
나아가, 본 발명은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 알도스 환원효소의 활성 저해제를 제공한다.
본 발명에 따른 고삼 추출물의 알도스 환원효소 억제 활성을 확인하기 위하여 흰쥐의 수정체의 효소 침전물을 대상으로 수행한 실험을 통하여, 본 발명의 고삼 추출물은 알도스 환원효소의 활성을 63% 저해함을 알 수 있었다. 또한, 본 발명에 따른 고삼의 에탄올 추출물에서 분리된 5-메틸소포라플라바논 B뿐만 아니라, 함께 분리된 3,7,4'-트리히드록시-5-메톡시-8-프레닐플라바논, 쿠세놀 N, 쿠라리논, 2'-메톡시쿠라리논, 소포라플라바논 G, 리치아논 A 및 쿠라리딘의 알도스 환원효소 억제 활성 확인을 위해 수행한 실험에서, 모든 화합물이 알도스 환원효소에 억제 활성이 있음을 알 수 있었으며, 특히 본 발명의 5-메틸소포라플라본 B는 가장 높은 억제 활성을 나타내었다(표 2 참조).
당뇨합병증을 유발하는 기전으로는 크게 단백질의 비효소적 당화반응과 폴리올 경로의 기작 변화에 의한 삼투압 스트레스 및 자유 라디칼에 의한 산화적 스트레스 등으로 설명되고 있는데, 이때 폴리올은 알도스나 케토스로부터 알도스 환원효소에 의해 환원된 알코올을 의미한다. 일반적으로 포도당이 세포 내로 들어오게 되면 헥소키나제에 의하여 6-인산포도당으로 전환된 다음 해당경로를 거쳐 분해된다. 그러나 포도당의 농도가 증가하는 경우 이에 결합하는 헥소키나제가 포화되어 여분의 포도당은 헥소키나제에 비하여 친화성이 낮은 알도스 환원효소에 결합하여 솔비톨로 대사됨으로써 세포 내에는 솔비톨이 축적된다. 알도스 환원효소는 망막, 공막, 렌즈, 신장, 적혈구, 뇌, 근육, 간 및 말초신경 등에 존재하는데, 특히 말초신경에서는 포도당 투과가 인슐린에 의하여 영향을 받지 않기 때문에 문제가 될 수 있다. 즉, 고혈당 시 슈만 세포에 솔비톨이 과다 축적되면 이로 인하여 삼투압이 증가하여 수초의 부종, 괴사 및 붕괴가 발생할 수 있고, 지속적으로 증가한 삼투압으로 인하여 수분이 인입되어 당뇨병 합병증으로 진행된다(당뇨병학, 김응진 외, 대한 당뇨병학회, 고려의학, p483; Soulis-Liparota, T. et al., Diabetologia, 38, 357-394, 1995).
최종당화산물이 사람의 미세혈관 내피세포에서 폴리올 경로의 주효소인 알도스 환원효소를 활성화하는 것이 보고된 바 있다(Nakamura, N. et al., Free Radic Biol. Med., 29, 17-25, 2000). 정상상태에서는 알도스 환원효소가 포도당에 대하여 친화력이 매우 낮지만, 고농도의 포도당에서는 알도스 환원효소가 활성화되어 과도하게 포도당을 솔비톨로 환원시키고, 이 솔비톨이 솔비톨 탈수소효소에 의해 과당으로 전환된다. 이 과당은 포도당에 비하여 단백질의 비효소적 당화반응의 속도가 약 10 배 정도 빠르다. 고농도의 과당이 단백질과 결합하여 결국은 최종당화산물의 형성을 가속화시킨다. 당뇨병에 의해 체내 혈당량이 높아진 상태가 장기간 계속됨으로써 당화산물이 신장, 신경, 망막과 전신의 크고 작은 혈관들을 침범하면서 만성 합병증이 발병하게 된다.
따라서, 본 발명의 고삼으로부터 알코올로 추출한 추출물 또는 이로부터 분 리한 5-메틸소포라플라바논 B는 알도스 환원효소의 억제 활성을 나타내므로, 알도스 환원효소의 활성 저해제로 이용될 수 있고, 또한 당뇨병 합병증의 예방 및 치료제로도 사용할 수 있다.
상기 당뇨병 합병증은 당뇨병 망막병증, 당뇨병 백내장, 당뇨병 신장병증, 당뇨병 신경병증 등이다.
또한, 본 발명은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 고삼의 에탄올 추출물에서 분리한 5-메틸소포라플라본 B의 비만 억제 효과를 검증하기 위해 수행한 실험에서, 미분화 3T3-L1 세포주를 지방세포로 분화유도하는 과정에서 5-메틸소포라플라바논 B를 처리함으로써, 지방세포 분화 저해 효과가 있음을 확인하였다(도 1, 2 및 3 참조).
따라서, 본 발명에 따른 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B는 비만의 예방 및 치료제로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 5-메틸소포라플라바논 B는 고삼으로부터 추출하거나, 또는 유기화학적 합성법으로 합성하여 사용할 수 있다.
상기 조성물은 약학적 조성물로 사용할 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 목적하는 바에 따라 비경구 투여하거나 경구 투여할 수 있으며, 하루에 체중 1 ㎏당 0.1~500 ㎎, 바람직하게는 1~100 ㎎의 양으로 투여되도록 1 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다. 특정 환자에 대한 투여용량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강 상태, 식이, 투여 시간, 투여 방법, 배설률, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.
아울러, 본 발명은 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 합병증 예방 및 개선용 건강식품을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물은 당뇨병 합병증의 예방 및 개선을 목적으로 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 식품, 음료 등의 건강보조 식품에 첨가할 수 있다. 이 경우, 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 식품 첨가물로 사용시에 원료에 대하여 0.01~20 중량%, 바람직하게는 0.1~5 중량%의 양으로 첨가될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안정성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다. 상기 추출물 또는 이로부터 분리한 화합물을 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한이 없다. 상기 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸컬릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함하는 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 식품 보조 첨가제는 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스, 수크로오스 등과 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 시클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 솔비톨, 에르트리톨 등의 당알코올이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명에 따른 조성물 100 중량부당 일반적으로 약 0.01~0.04 중량부, 바람직하게는 0.02~0.03 중량부이다.
상기 외에 본 발명에 따른 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명에 따른 조성물은 천연 과일쥬스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명에 따른 조성물 100 중량부당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 상세히 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 고삼 추출물의 제조
고삼뿌리(20 g)에 100 ㎖의 에탄올을 가하고 1시간 동안 70~80 ℃의 온도에서 가온 추출한 후, 거름종이를 사용하여 에탄올 가용부만을 회수하였다. 이를 3 회 반복 실시한 후 에탄올 가용부를 감압농축하여 고삼의 에탄올 추출물(2 g)을 얻었다.
< 실시예 2> 고삼 추출물로부터 5- 메틸소포라플라바논 B의 분리
상기 실시예 1에서 얻은 에탄올 추출물(2 g)을 메탄올에 녹인 후, 고속액체 크로마토그래피를 수행하여 5-메틸소포라플라바논 B뿐만 아니라, 3,7,4'-트리히드록시-5-메톡시-8-프레닐플라바논, 쿠세놀 N, 쿠라리논, 2'-메톡시쿠라리논, 소포라플라바논 G, 리치아논 A 및 쿠라리딘을 분리하였다. 이때 고속액체 크로마토그래피 조건은 다음과 같다. 이동상으로는 물과 아세토니트릴의 혼합용매를 사용하였으며, 조건은 60분 동안 35 부피% ~ 70 부피% 아세토니트릴로 농도구배하여 사용하였다. 유속은 분당 10 ㎖이었으며, 컬럼은 HiQ sil C18(φ 21.2 × 250 mm, 10 ㎛)을 사용하였다. 분리된 화합물은 분광학적 방법(1H-NMR 분광법(Varian unity Inova with cryoprobe, Varian, USA))으로 구조를 동정하였다. 그 분석 결과를 표 1에 나타내었다.
화합물 화합물명 1H-NMR(DMSO-d6)
1 5-메틸소포라플라바논 B 7.28 (2H, d, J=7.4 Hz, H-2',6'), 6.77 (2H, d, J=7.4 Hz, H-3',5'), 6.14 (1H, s, H-6), 5.32 (1H, dd, J=12.5, 3.0 Hz, H-2), 5.09 (1H, tt, J=1.3, 7.0 Hz, H-2"), 3.69 (3H, s, 5-OCH3), 3.11 (2H, d, J=7.0 Hz, H-1"), 2.92 (1H, dd, J=16.4, 12.5 Hz, J=3), 2.56 (1H, dd, J=16.4, 3.0 Hz, H-3), 1.58 (3H, s, H-5"), 1.54 (3H, s, H-4")
2 3,7,4'-트리히드록시-5-메톡시-8-프레닐플라바논 7.27 (2H, d, J=8.3 Hz, H-2',6'), 6.76 (2H, d, J=8.3 Hz, H-3',5'), 6.15 (1H, s, H-6), 5.15 (1H, d, J=4.3 Hz, 3-OH), 5.06 (1H, brt, J=7.2 Hz, H-2"), 4.89 (1H, d, J=11.3 Hz, H-2), 4.24 (1H, dd, J=11.3, 4.3 Hz, H-3), 3.71 (3H, s, 5-OCH3), 3.04 (2H, m, H-1"), 1.55 (3H, s, H-4"), 1.46 (3H, s, H-5")
3 쿠세놀 N 7.12 (1H, d, J=8.4 Hz, H-6'), 6.31 (1H, d, J=1.9 Hz), 6.22 (1H, dd, J=8.4, 1.9 Hz, H-5'), 6.11 (1H, s, H-6), 5.21 (1H, d, J=11.1 Hz, 3-OH), 5.04 (1H, d, J=3.3 Hz, H-2), 4.86 (1H, brt, J=6.5 Hz, H-4"), 4.50 (1H, s, H-9"a), 4.43 (1H, s, H-9"b), 4.36 (1H, dd, J=11.1, 3.3 Hz, H-3), 3.71 (3H, s, 5-OCH3), 2.42-2.37 (3H, m, H-1",2"), 1.90 (2H, m, H-3"), 1.51 (6H, s, H-7",10"), 1.44 (3H, s, H-6")
4 쿠라리논 7.22 (1H, d, J=8.4 Hz, H-6'), 6.34 (1H, d, J=1.7 Hz, H-3'), 6.26 (1H, dd, J=8.4, 1.7 Hz, H-5'), 6.12 (1H, s, H-6), 5.43 (1H, dd, J=13.0, 2.1 Hz, H-2), 4.90 (1H, brt, J=5.8 Hz, H-4"), 4.56 (1H, brs, H-9"a), 4.49 (1H, brs, H-9"b), 3.71 (3H, s, 5-OCH3), 2.82 (1H, dd, J=16.2, 13.0 Hz, H-3a), 2.51 (1H, dd, J=13.0, 2.1 Hz, H-3b), 2.51-2.42 (3H, m, H-1",2"), 1.93 (2H, m, H-3"), 1.58 (3H, s, H-10"), 1.54 (3H, s, H-7"), 1.46 (3H, s, H-6")
5 2'-메톡시쿠라리논 7.29 (1H, d, J=8.2 Hz, H-6'), 6.43 (1H, d, J=1.2 Hz, H-3'), 6.11 (1H, s, H-6), 5.42 (1H, dd, J=13.6, 1.8 Hz, H-2), 4.86 (1H, brt, J=5.4 Hz, H-4"), 4.54 (1H, brs, H-9"a), 4.46 (1H, brs, H-9"b), 3.71 (3H, s, 2'-OCH3), 3.69 (3H, s, 5-OCH3), 2.84 (1H, dd, J=16.1, 13.6 Hz, H-3a), 2.45-2.39 (4H, m, H-3b,1",2"), 1.91 (2H, m, H-3"), 1.56 (3H, s, H-10"), 1.51 (3H, s, H-7"), 1.41 (3H, s, H-6")
6 소포라플라바논 G 7.27 (1H, d, J=8.3 Hz, H-6'), 6.39 (1H, d, J=2.0 Hz, H-3'), 6.31 (1H, dd, J=8.3, 2.0 Hz, H-5'), 5.99 (1H, s, H-8), 5.55 (1H, dd, J=13.1, 2.3 Hz, H-2), 4.95 (1H, brt, J=6.0 Hz, H-4"), 4.61 (1H, s, H-9"a), 4.54 (1H, s, H-9"b), 3.16 (1H, dd, J=17.2, 13.1 Hz, H-3a), 2.66 (1H, dd, J=17.2, 2.3 Hz, H-3b), 2.54-2.44 (3H, m, H-1",2"), 1.99 (2H, m, H-3"), 1.62 (3H, s, H-10"), 1.58 (3H, s, H-7"), 1.49 (3H, s, H-6")
7 리치아논 A 7.31 (1H, dd, J=8.4, 1.9 Hz, H-6'), 6.48 (1H, d, J=1.9 Hz, H-3'), 6.41 (1H, dd, J=8.4, 1.9 Hz, H-5'), 5.93 (1H, s, H-6), 5.54 (1H, dd, J=13.3, 3.0 Hz, H-2), 4.88 (1H, brt, J=6.7 Hz, H-4"), 4.56 (1H, s, H-9"a), 4.47 (1H, s, H-9"b), 3.74 (3H, s, 2'-OCH3), 3.18 (1H, dd, J=17.1, 13.3 Hz, H-3a), 2.61 (1H, dd, J=17.1, 3.0 Hz, H-3b), 2.47-2.32 (3H, m, H-1",2"), 1.97 (2H, m, H-3"), 1.55 (3H, s, H-10"), 1.52 (3H, s, H-7"), 1.43 (3H, s, H-6")
8 쿠라리딘 14.92 (1H, s, 9-OH), 7.97 (1H, d, J=15.5 Hz, H-2), 7.88 (1H, d, J=15.5 Hz, H-3), 7.46 (1H, d, J=8.5 Hz, H-6'), 6.40 (1H, d, J=2.1 Hz, H-3'), 6.34 (1H, dd, J=8.5, 2.1 Hz, H-5'), 6.07 (1H, s, H-6), 5.00 (1H, brt, J=5.5 Hz, H-4"), 4.60 (1H, brs, H-9"a), 4.53 (1H, brs, H-9"b), 3.86 (3H, s, 5-OCH3), 2.57-2.44 (3H, m, H-1",2"), 2.03 (2H, m, H-3"), 1.68 (3H, s, H-10"), 1.62 (3H, s, H-7"), 1.53 (3H, s, H-6")
< 실험예 1> 고삼 추출물의 알도스 환원효소의 활성 억제효과
본 발명에 따른 조성물의 알도스 환원효소의 활성 억제효과를 측정하기 위하여 흰쥐의 수정체의 효소 침전물을 대상으로 하는 실험을 수행하였다. 먼저, 알도스 환원효소원을 수득하기 위하여 흰쥐의 수정체를 적출하여 그 습증량에 따라 일정량의 인산완충액을 가한 후, 수정체를 균질화하였다. 4 ℃에서 균질액을 원심분리하여 상등액을 수득하고, 상등액에 암모늄설페이트(ammonium sulphate)를 가하여 최종 농도가 40%가 되도록 하였다. 그 후, 다시 원심분리하여 상등액을 수거한 다음 여기에 암모늄 설페이트를 최종 농도 70%로 가한 후, 한 시간 정도 혼합하였다. 이를 원심분리하여 수득한 침전물을 PBS 완충액에 현탁하여 1일간 투석하여 알도스 환원효소원을 수득하였다. 이후 준비한 알도스 환원효소원에 10 ㎍/㎖ 농도의 고삼추출물을 가하고, DL-글리세르알데히드를 기질로 반응시켜 340 nm에서의 NADPH 흡광도 감소율을 측정하였다. 대조군은 테트라메틸렌 글루타르산을 이용하였다.
측정 결과, 고삼 추출물 10 ㎍/㎖ 처리 시, 무처리 대조군에 비하여 알도스 환원효소의 활성이 63% 저해되는 것으로 나타나, 고삼 추출물이 알도스 환원효소의 활성을 억제하는 약리 활성이 있음을 확인하였다.
< 실험예 2> 고삼 추출물로부터 분리한 화합물의 알도스 환원효소의 활성 억제효과
먼저, 실험 1에서와 동일한 방법으로 알도스 환원효소원을 수득하였다. 이후 준비한 알도스 환원효소원에 실시예 2에서 얻은 5-메틸소포라플라바논 B(화합물 1), 3,7,4'-트리히드록시-5-메톡시-8-프레닐플라바논(화합물 2), 쿠세놀 N(화합물 3), 쿠라리논(화합물 4), 2'-메톡시쿠라리논(화합물 5), 소포라플라바논 G(화합물 6), 리치아논 A(화합물 7) 및 쿠라리딘(화합물 8)을 각각 가하고, DL-글리세르알데히드를 기질로 반응시켜 340 nm에서의 NADPH 흡광도 감소율을 측정하였다. 역시 대조군은 테트라메틸렌 글루타르산을 이용하였다. 상기 측정결과를 하기 표 2에 나타내었다.
화합물 농도(M) 저해율(%) IC50(M)
1 100 94.90 0.29
10 80.98
1 75.92
0.1 30.36
2 100 93.63 0.54
10 73.39
1 50.61
0.1 39.22
3 100 79.71 1.55
10 62.12
1 55.68
0.1 24.04
4 100 96.16 1.61
10 64.53
1 35.43
0.1 30.36
5 100 87.31 1.48
10 60.74
1 43.02
0.1 32.90
6 100 100.0 0.56
10 89.83
1 51.88
0.1 31.63
7 100 79.72 3.79
10 60.74
1 31.36
0.1 21.51
8 100 99.96 0.99
10 75.92
1 45.82
0.1 27.84
대조군 100 91.10 2.45
10 72.12
1 36.69
표 2에 나타난 바와 같이, 고삼 추출물로부터 분리한 화합물들은 모두 대조군으로 사용한 테트라메틸렌 글루타르산보다 우수한, 또는 대등한 저해활성을 나타내었다. 특히, 본 발명의 화학식 1의 5-메틸소포라플라바논 B는 알도스 환원효소에 대한 가장 우수한 저해활성을 나타내었는데, 그 IC50 값은 0.29이었다.
< 실험예 3> 고삼 추출물로부터 분리한 5- 메틸소포라플라바논 B의 비만 억제
고삼 추출물로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 이용하여, 미분화 상태의 3T3-L1 세포주(American type of cell culture, ATCC)가 지방세포(adipose cell)로의 분화 저해 효과를 검증하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
미분화된 3T3-L1 세포주는 10% 우아혈청(bovine calf serum)이 포함된 DMEM 배지에서 유지하였다. 미분화 3T3-L1 세포주를 밀도가 90% 정도될 때까지 배양한 다음, 분화를 유도하기 위해 10% 우태혈청(fetal bovine serum)과 덱사메타손, IBMAX, 인슐린이 포함된 DMEM 배지를 교체해주었는데, 이때부터 실험군의 경우 배지를 교체할 때마다 디메틸설폭사이드(DMSO)에 녹인 100 μM의 5-메틸소포라플라바논 B를 지속적으로 처리해 주었다. 이틀간 배양한 다음, 10% 우태혈청, 인슐린이 포함된 DMEM 배지로 교체해주었다. 이어서 이틀 간격으로 10% 우태혈청 만이 포함된 DMEM 배지로 교체해 주었다. 재분화를 유도한 시점부터 8일 후에 지방세포로의 재분화는 완결되었다. 이때 대조군은 실험군과 완전히 동일한 간격으로 배지를 교체하되, 동일한 농도의 DMSO만을 처리하였다. 재분화가 완결된 다음, 지질 성분만을 선택적으로 빨간색으로 염색시키는 오일레드오로 염색하여 외관 사진 촬영, 현미경 사진 촬영하였다. 동시에 오일레드오 염색약을 세포로부터 추출한 다음, 이 용액의 흡광도 (520 nm)를 분광광도계로 측정하여 지방세포로의 분화 정도를 비교하였다. 그 실험결과는 도 1, 2 및 3 에 나타내었다.
도 1에 나타난 바와 같이, 대조군(a)은 오일레드오로 염색된 지방세포가 많은 수로 확인되는 반면, 3T3-L1 세포주가 지방세포로의 분화 과정에서 5-메틸소포라플라바논 B 처리한 경우(b), 분화된 지방 세포주가 거의 없음을 알 수 있다. 도 2에서 나타난 바와 같이 3T3-L1 세포주가 지방세포로의 분화 과정에서 5-메틸소포라플라바논 B 처리시, 대조군과 비교하여 지방 세포 형성이 50% 정도 현저히 저해됨을 확인할 수 있었다. 또한, 도 3에 나타난 바와 같이, 현미경 관찰 결과에서도 대조군(a)과 비교하여 5-메틸소포라플라바논 B 처리한 경우(b) 지방세포 분화가 크게 억제됨을 알 수 있었다.
< 제제예 1> 약학적 제제의 제조
1-1. 산제의 제조
고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
1-2. 정제의 제조
고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B 100 ㎎
옥수수 전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
1-3. 캡슐제의 제조
고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B 100 ㎎
옥수수 전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
1-4. 주사액제의 제조
고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B 10 ㎍/㎖
묽은 염산 BP pH 3.5로 될 때까지
주사용 염화나트륨 BP 최대 1 ㎖
적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B를 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.
< 제조예 2> 건강식품의 제조
2-1. 음료의 제조
꿀 522 ㎎
치옥토산아미드 5 ㎎
니코틴산아미드 10 ㎎
염산리보플라빈나트륨 3 ㎎
염산피리독신 2 ㎎
이노시톨 30 ㎎
오르트산 50 ㎎
고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B 0.48~1.28 ㎎
물 200 ㎖
상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.
2-2. 츄잉껌의 제조
껌베이스 20 %
설탕 76.36~76.76 %
고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B 0.24~0.64 %
후르츠향 1 %
물 2 %
상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉껌을 제조하였다.
2-3. 캔디의 제조
설탕 50~60 %
물엿 39.26~49.66 %
고삼 추출물 또는 이로부터 분리한 5-메틸소포라플라바논 B 0.24~0.64 %
오렌지향 0.1 %
상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 캔디를 제조하였다.
이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 의하면 고삼 추출물로부터 분리한 단일화합물인 5-메틸소포라플라바논 B는 당뇨 합병증을 유발하는 알도스 환원효소의 활성 억제효과를 나타내고, 또한 지방세포 분화과정을 저해하여 비만을 예방하므로 본 발명에 따른 조성물은 당뇨병 합병증 또는 비만을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다.

Claims (10)

  1. 3,7,4′-트리히드록시-5-메톡시-8-프레닐플라바논, 쿠세놀 N, 쿠라리논, 2′-메톡시쿠라리논, 소포라플라바논 G 및 쿠라리딘으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 화합물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 망막병증, 당뇨병 백내장, 당뇨병 신장병증 또는 당뇨병 신경병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  2. 제1항 기재의 화합물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 망막병증, 당뇨병 백내장, 당뇨병 신장병증 또는 당뇨병 신경병증 예방 및 개선용 건강식품.
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