KR100854567B1 - Composition comprising an extract of prunus fructus, schizandrae fructus, coptidis rhizoma showing antibacterial activity - Google Patents

Composition comprising an extract of prunus fructus, schizandrae fructus, coptidis rhizoma showing antibacterial activity Download PDF

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Abstract

An animal feed supplement composition and antibacterial agent having antibacterial activity containing Prunus fruit, Coptis root and Schizandra fruit are provided to reduce toxicity and resistance and to ensure antibacterial effect and immunity boosting effect. An animal feed supplement composition and antibacterial agent contain a mixed extract of Prunus fruit, Coptis root and Schizandra fruit and one or more antioxidants selected from the group consisting of citric acid, fumaric acid, adipic acid, lactic acid, malic acid, sodium phosphate, potassium phosphate, acid pyrophosphate, polyphosphate, polyphenol, catechin, alpha-tocopherol, rosemary extract, vitamin C, green tea extract, licorice root extract, chitosan and phytic acid. The animal feed supplement composition is fed in an amount of 0.01 to 2 parts by weight, based on 100 parts by weight of feed. The mixed extract of Prunus fruit, Coptis root and Schizandra fruit is obtained by mixing Prunus fruit, Coptis root and Schizandra fruit in a weight ratio of 2 to 5:1 to 3:1 to 2 and extracting in a C1-5 lower alcohol solvent.

Description

오매, 황련 및 오미자를 포함하는 항균 활성이 있는 동물 사료용첨가제조성물 및 항균제{COMPOSITION COMPRISING AN EXTRACT OF PRUNUS FRUCTUS, SCHIZANDRAE FRUCTUS, COPTIDIS RHIZOMA SHOWING ANTIBACTERIAL ACTIVITY}COMPOSITION COMPRISING AN EXTRACT OF PRUNUS FRUCTUS, SCHIZANDRAE FRUCTUS, COPTIDIS RHIZOMA SHOWING ANTIBACTERIAL ACTIVITY}

도 1a는 오매, 황련 및 오미자 투여군의 간으로 정상적인 central vein과 그 주변의 sinoside가 관찰되는 도(간, 오매·황련·오미자 투여군, ×100).Fig. 1A is a diagram in which normal central vein and its surrounding sinosides are observed in the liver of the mae, nasturtium, and Schizandra administration groups (liver, mae, sulfur, Schizandra administration group, × 100).

도 1b는 대조군의 간으로 동모양혈관에서 울혈이 관찰되며, 혈관 주변이 괴사를 나타내는 도(간, 대조군, ×100).Figure 1b is a congestion observed in the same blood vessels as the liver of the control, the diagram showing the necrosis around the blood vessels (liver, control, × 100).

도 2a는 오매, 황련 및 오미자 투여군의 신장으로 정상적인 intralobulr vein과 renal corpuscle, convoluted tuble 등이 보이는 도(신장, 오매·황련·오미자 투여군, ×100).Fig. 2a is a diagram showing normal intralobulr vein, renal corpuscle, convoluted tuble, and the like of the kidneys of the mae, nasturtium, and Schizandra administration groups (height, the falcon, barberry, Schizandra administration group, × 100).

도 2b는 대조군의 신장으로 울혈과 괴사가 심하고 vein주변의 proximal convoluted tuble의 괴사가 심하게 관찰되는 도(신장, 대조군, ×100).Figure 2b is a severe congestion and necrosis in the kidneys of the control group and the necrosis of the proximal convoluted tuble around the vein is severely observed (height, control, × 100).

도 3a는 오매, 황련 및 오미자 투여군의 비장으로 정상적인 적색수질과 백색수질, 림프절 등이 관찰되는 도(비장, 오매·황련·오미자 투여군, ×100).Fig. 3a is a diagram showing normal red medulla and white medulla, lymph nodes, and the like as the spleen of the maeru, nasturtium and Schisandra chinensis groups (spleen, hyacinth, biureum, Schisandra chinensis, × 100).

도 3b는 대조군의 비장으로 적색수질이 더 많이 관찰되어 적색수질의 울혈이 인정되고 적혈구가 더 많이 관찰되며 백색수질과 림프절도 더 뚜렷하게 보이는 것 으로 보아 균 접종에 따른 염증반응이 강하게 이루어진 것을 나타내는 도(비장, 대조군, ×100).FIG. 3b shows that more red medulla is observed as the spleen of the control group, congestion of the red medulla is observed, more red blood cells are observed, and white medulla and lymph nodes are more clearly seen. (Spleen, control, x100).

도 4a는 약재 비투여군의 간으로 모두 이상조직소견이 발견되지 않고 간의 central vein, portal vein 주변으로 괴사 소견 및 울혈 소견이 관찰되지 않는 도(control 간, ×100).FIG. 4A is a diagram showing that no abnormal tissue findings were found in the livers of the non-medicinal herbs, and necrosis findings and congestion findings were not observed around the central vein and portal vein of the liver (control liver, × 100).

도 4b는 약재 비투여군의 신장으로 vein주변의 근위곡세뇨관과 원위곡세뇨관이 정상적으로 관찰되는 도(control 신장, 대조군, ×100).Figure 4b is a diagram in which the proximal and tubular distal tubules around vein are normally observed in the kidney of the nonadministrative group of herbs (control kidney, control, × 100).

도 5a는 오매, 황련 및 오미자 투여군의 간으로 모두 이상조직소견이 발견되지 않고 간의 central vein, portal vein 주변으로 괴사 소견 및 울혈 소견이 관찰되지 않는 도(간장, 오매·황련·오미자 투여군, ×100).5A is a diagram in which no abnormal tissue findings were found in the liver of the mae, nasturtium and schizandra administration groups, and necrosis findings and congestion findings were not observed around the central vein and portal vein of the liver (soy, yam, barberry, Schizandra administration group, × 100). ).

도 5b는 오매, 황련 및 오미자 투여군의 신장으로 오른편으로 보이는 부분은 medullary cone로써 정상소견을 보이며 중간 중간에 진하게 보이는 부분은 renal corpuscle로 이 또한 정상적으로 관찰되는 도(신장, 오매·황련·오미자 투여군, ×100).5b shows the right side of the kidney, medullary, and Schisandra chinensis treated group as the medullary cone, and the darker portion in the middle is the renal corpuscle. × 100).

본 발명은 항균 활성이 있는 동물 사료용첨가제조성물 및 항균제에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 생체에 독성 및 내성이 적고 항균 활성이 있는 오매, 황 련 및 오미자를 포함하는 동물 사료용첨가제조성물 및 항균제에 관한 것이다.The present invention relates to an animal feed additive composition and an antimicrobial agent having an antimicrobial activity, and more particularly, to an animal feed additive composition and an antimicrobial agent containing buckwheat, rhubarb and schisandra chinensis with low toxicity and resistance to living organisms. .

최근 한국에서도 경제적, 문화적으로 국제교류가 활발해짐에 따라 외국의 병원성 세균들의 유입 가능성이 더욱 많아지고 있으며, 축산물 수입이 증가됨에 따라 이를 통한 신종세균의 국내 확산이 가속화될 전망이다. 현재 우리나라 축산에 상재하는 세균들은 대부분 기존 항생제에 내성을 나타내고 있어 그 치료가 점차 어려워지고 있는 실정이며, 이들 치료 문제점은 이들 세균에 감염된 축산물을 통한 인체에 전파가 심각할 것이다. 최근 보고에 의하면 인체의 전염성 질병 중 50% 이상이 인수공통전염병으로 나타나고 있어 안전한 축산물 공급은 공중보건상 가장 신중하게 해결해야 될 선결 문제이다. 세균들의 항생제 내성 발현은 일부 국한된 항생제에 나타나지 않고 현재 사용되고 있는 거의 모든 약제에 발현되고 있어, 세균의 생리적 그리고 유전학적 성상 분석 결과 어떤 약제도 저항할 수 있는 능력을 가질 것으로 예상되고 있다. 항생제 내성을 가지는 여러 가지 세균들 중 대표적으로 메티실린-저항 S.아우레우스(methicillin-resistant S. aureus ; MRSA), 반코마이신-저항 엔테로코시( vancomycin-resistant enterococci; VRE), 반코마이신-매개 S. 아우레우스( vancomycin intermediate S. aureus ; VISA), 그리고 최소 6종 이상의 항생제 내성을 가진 대장균(E. coli) O157:H7 등이다. 우리나라에서만도 MRSA는 병원의 감염 병원체(nosocomial infection agent)로 대형 종합병원에서 80%가까이 상재하고 있다. VRE와 VISA의 경우도 1990년대부터 만연하기 시작하여 전국적으로 확산하여 있는 상태이다. 대장균 O157:H7 경우에도 다수의 병원체 저항(multiple agent resistant)으로 이미 여러 종류의 항생제에 내성을 가지며 아직까지 완벽한 치료항생제가 없는 상태이다. 이 대장균의 경우 이미 미국, 유럽 그리고 가까운 일본에서 빈번히 발생하여 사회적 문제가 되어 있고, 우리나라에서 산발적으로 사람과 가축에서 발생하였다. 그리고 2001년부터 소의 수입이 자유화되면서 이 대장균 상제지역으로부터 축산물이나 생우 수입 시 우리나라에 이 대장균의 만연이 확실하다. 이들 내성균들은 우리나라의 경우 특별한 항생제 선택체계가 없고, 급격한 내성증가 요인은 다른 나라보다 훨씬 크다. 항생제 내성증가는 새로운 고가 항생제 사용증가, 치료기간 증가, 사망률 등을 증가시켜, 결국 경제적 그리고 사회적 문제를 증가시키는 악순환이 되고 있다. 따라서 이러한 문제를 해결하기 위해서는 현재 발생되고 있는 내성기전을 이해하고 내성을 일으키지 않는 구조의 신종항생제의 개발이 절실히 요구되고 있다.In recent years, as international economic and cultural exchanges have become more active in Korea, the influx of foreign pathogenic bacteria is increasing, and domestic livestock production is expected to accelerate as the import of livestock products increases. Currently, most of the bacteria present in domestic livestock are resistant to existing antibiotics, and the treatment is becoming increasingly difficult. These treatment problems will be seriously transmitted to the human body through livestock products infected with these bacteria. According to recent reports, more than 50% of human infectious diseases appear to be common infectious diseases, so safe livestock supply is a prerequisite for public health. Antibiotic resistance of bacteria is expressed in almost all drugs currently in use, rather than in some localized antibiotics, and bacterial physiological and genetic characterization is expected to have the ability to resist any drug. Among the various bacteria resistant to antibiotics, methicillin-resistant S. aureus ( MRSA), vancomycin-resistant enterococci (VRE), vancomycin-mediated S. aureus . Aureus (vancomycin intermediate S. aureus ( VISA)) and E. coli O157: H7 with at least six antibiotic resistance. In Korea alone, MRSA is a nosocomial infection agent in hospitals, and it is almost 80% in large general hospitals. VRE and VISA have also been rampant since the 1990s and have spread throughout the country. Escherichia coli O157: H7 is also resistant to multiple antibiotics due to multiple agent resistance and there is no complete therapeutic antibiotic yet. E. coli has already been a frequent social problem in the United States, Europe, and nearby Japan, and has occurred sporadically in humans and livestock in Korea. Since the import of cattle has been liberalized since 2001, it is clear that E. coli is widespread in Korea when livestock products or live cattle are imported from the E. coli Sangje region. These resistant bacteria do not have special antibiotic selection system in Korea, and the factor of rapid increase in resistance is much larger than in other countries. Increasing antibiotic resistance is a vicious cycle of increasing use of new expensive antibiotics, increasing treatment duration, and mortality, which in turn increases economic and social problems. Therefore, in order to solve this problem, it is urgently needed to understand the mechanism of resistance that is occurring and to develop a new antibiotic having a structure that does not cause resistance.

현재 급격히 증가하는 세균의 약제 내성에 대처하고 다양한 세균을 효과적으로 치료하기 위해서는 기존의 항생제와는 다른(분자구조, 약제의 효능 등) 신약 개발이 절실히 요구되고 있다. 특히 최근에는 항생제에 대해 내성을 갖는 슈퍼 박테리아들의 출현으로 인하여 새로운 항생제의 개발이 시급히 요청되고 있는 실정이다. 또한 이러한 신약의 구비해야할 조건은 살균의 효과뿐만 아니라 사람과 동물의 세포에 부작용이 없는 안전한 약물이어야 한다. 항생제는 아무리 효능이 우수하다하더라도 시간이 지나면 내성이 생기는데, 천연약물을 이용한다면 충분히 이런 문제를 해결할 수 있을 것이다. 그 이유는 천연물은 현재까지 알려지지 않은 새로운 성분이며, 개개의 작용이 다양한 단일성분의 혼합물이므로, 복합물상호간의 약리 작용으로 내성 등의 부작용을 감소할 수 있을 것이다.In order to cope with the rapidly increasing bacterial drug resistance and to effectively treat various bacteria, development of new drugs different from conventional antibiotics (molecular structure, efficacy of drugs, etc.) is urgently required. In particular, due to the emergence of super bacteria that are resistant to antibiotics, the development of new antibiotics is urgently required. In addition, the conditions to be equipped with such a new drug should be a safe drug having no side effects on human and animal cells as well as bactericidal effect. No matter how good the antibiotic is, resistance develops over time, and natural medicines will solve this problem. The reason is that the natural product is a new component that is unknown until now, and since each action is a mixture of various single components, the pharmacological action between the complexes may reduce side effects such as resistance.

현재 축산에 사용되는 많은 항생제의 경우 내성률 심각한 수준에 있으며 일부의 항생제의 경우 100% 근접해 있다. 현재 축산에서 항생제는 주로 사료 첨가제로 또는 육계의 경우 7일에서 10일 사이에 정기적으로 클리닝(Cleaning) 목적으로 사용된다. 보고에 의하면 전국 도축장에 온 소?돼지?닭에서 분리한 살모넬라, 장내구균 따위의 식중독 균의 항생제 내성률을 조사한 결과 닭 분변에서 나온 대장균은 퀴놀론계 항생제에 57%를 웃도는 내성률을 보였다. 이와 같이 현재 축산에 사용되고 항생제는 대부분 세균들이 내성을 지니고 있어 축산에 효과적으로 사용할 수 있는 새로운 항생제 개발이 시급하다.Many antibiotics currently used for livestock are at severe levels of resistance and some are close to 100%. In livestock, antibiotics are mainly used as feed additives or for cleaning purposes regularly between 7 and 10 days for broilers. According to the report, the antibiotic resistance rates of Salmonella and enterococci such as Salmonella and enterococci isolated from cows, pigs and chickens from all over the country showed that the resistance of E. coli from chicken feces was more than 57% to quinolone antibiotics. As such, currently used for livestock raising, most antibiotics are resistant to bacteria, so it is urgent to develop new antibiotics that can be effectively used for livestock raising.

최근 의약품의 연구동향은 여러 가지 부작용이나 독성 및 내성 등이 심각해지고 있으므로 세계적으로 천연물로부터의 의약품 개발에 관한 연구가 활발히 추진되고 있다. 한편, 우리나라를 위시한 동양에서는 장구한 시일을 통하여 천연약물의 하나인 전통약물의 꾸준한 발전을 도모해 온 배경을 갖고 있다. 항생물질은 1941년 페리실린이 임상적으로 사용된 후 현재까지 5500여종이 발견되었고, 이중 100여종만이 발효 생산되고 있으며, 대부분은 화학적으로 합성된다. 이것들이 질병치료에 효과적으로 이용되기 위해서는 치료용량이 숙주에 대해서는 독성을 주지 않고 감염원에 대해서는 항균효과가 매우 커야 하나 독작용이나 특이한 부작용을 가지고 있으며, 임상적으로 사용된 후 오래지 않아 내성균주가 증가하는 현상이다. 따라서 독성이 적으며 내성균에 유효한 새로운 항생물질을 연구개발하고, 병용투여와 같은 방법으로 내성균의 출현 및 독성을 감소시키기 위한 연구가 요구된다. 천연약품자 원으로부터 항균력이 우수하고 독성이 적은 새로운 항생물질 및 내성균에 유효한 새로운 항생물질을 검색하여 신약개발을 할 수 있다.Recently, the research trend of medicines are getting serious side effects, toxicity and resistance, so the research on the development of medicines from natural products is actively being carried out worldwide. On the other hand, in the East, including Korea, it has a background that has promoted the steady development of traditional medicine, which is one of natural medicines, through long periods of time. Since the use of ferricillin in clinical trials in 1941, about 5,500 species have been discovered to date, of which only 100 are fermented and mostly chemically synthesized. In order to be effectively used for the treatment of diseases, the therapeutic dose should not be toxic to the host and the antibacterial effect to the infectious agent should be very large, but it has poisoning or unusual side effects. to be. Therefore, research and development of new antibiotics that are less toxic and effective against resistant bacteria are needed, and studies to reduce the appearance and toxicity of resistant bacteria by methods such as co-administration are required. It is possible to develop new drugs by searching for new antibiotics with excellent antibacterial and low toxicity from natural drug sources and new antibiotics that are effective against resistant bacteria.

우리나라의 세균성 질병 중 가장 많은 발병률을 보이는 것으로 특히 사람에게는 식품에 매개가 많은 것이 살모넬라증이다. 2,300여종이 넘는 혈청형이 보고되어 있으며 이들의 증상 또한 거의 비슷하다. 살모넬라(Salmonella)는 균체내 독소, 세포 독소, 장 독소 등 다양한 독소가 존재하고 있어 여러 가지의 임상 증상을 유발할 수 있다. 특히 이 병원균은 장내 상피세포를 투과하여 숙주세포에 침입할 수 있으며 거의 모든 포유동물에 감염되고 사람의 식중독을 일으키는 병원균 중 가장 흔한 균으로 인수공통전염병을 일으키는 대표적인 균은 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium) 이다. 주로 오염된 식육을 통해 사람에 전파되고 대개 급성장염, 고열, 패혈증 등으로 증상이 나타난다.The most common incidence of bacterial diseases in Korea is Salmonellosis, which is especially mediated in food for humans. More than 2,300 serotypes have been reported, and their symptoms are similar. Salmonella (Salmonella) can cause a variety of clinical symptoms and there is a variety of toxins such as endotoxins, cell toxin, enterotoxin cells exist. In particular, the pathogen can be transmitted through the intestinal epithelium and invade host cells and infect almost all mammals, the most common strains of pathogenic bacteria leading cause of food poisoning in people causing zoonotic epidemic Salmonella typhimurium (Salmonella typhimurium ). It is spread to humans mainly through contaminated meat and usually causes symptoms such as acute enteritis, high fever and sepsis.

균의 조절을 위해 항생제가 도처에 지속적으로 사용되어 왔으며, 이러한 항생제나 항균 물질 등의 오용, 남용으로 인해 최근 항생제 내성균들이 등장하여 사회적으로 큰 문제가 되고 있다. 이러한 문제 인식이 확산됨에 따라 항생제나 항균 물질의 사용을 자제하는 사회적 분위기가 조성되고 있으며, 이와 더불어 항생제를 대체할 수 있는 물질에 대한 연구 또한 활발하여 오래전부터 민간요법으로 사용되어 오던 식물이나 생균제(probiotics) 등을 이용하여 항균 효과나 면역 증진 효과 등을 얻고자 하는 연구가 활발히 진행되고 있다.Antibiotics have been continuously used everywhere for the control of bacteria, and antibiotic-resistant bacteria have recently emerged due to misuse and abuse of such antibiotics and antimicrobial substances, which has become a big problem in society. As awareness of these problems spreads, societal atmospheres that prevent the use of antibiotics or antimicrobial agents are being created. In addition, research on substances that can replace antibiotics has been actively conducted, and plants and probiotics (which have been used as folk remedies for a long time) ( Probiotics have been actively used to obtain antimicrobial and immune enhancing effects.

따라서, 본 발명의 목적은 생체에 독성 및 내성이 적고 항균 활성이 있는 오매, 황련 및 오미자를 포함하는 동물 사료용첨가제조성물 및 항균제를 제공함에 있다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide an animal feed additive composition and an antimicrobial agent, including ume, rhubarb and schisandra chinensis, which are less toxic and resistant to living organisms and have antimicrobial activity.

전술한 본 발명의 목적은, The above object of the present invention,

오매, 황련 및 오미자의 혼합분말 또는 상기 오매, 황련 및 오미자의 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 항균 활성이 있는 동물 사료용첨가제조성물을 제공함에 의해 달성된다.It is achieved by providing an additive composition for animal feed having an antimicrobial activity, characterized in that it comprises a mixed powder of ume, rhubarb and schizandra or extracts of the maeru, rhubarb and schizandra.

본 발명의 바람직한 특징에 의하면, 상기 오매, 황련 및 오미자는 중량비가 2∼5 : 1∼3 : 1∼2 이다.According to a preferred feature of the present invention, the mae, sulfur, and schizandra have a weight ratio of 2 to 5: 1 to 3: 1 to 2.

본 발명의 더욱 바람직한 특징에 의하면, 상기 추출물은 C₁내지 C₄의 저급 알콜에 가용된다.According to a further preferred feature of the invention, the extract is soluble in lower alcohols of C₁ to C₄.

본 발명의 더욱 더 바람직한 특징에 의하면, 상기 추출물은 구연산, 후말산, 아디핀산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나 폴리페놀, 카테친(catechin), 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물(rosemary extract), 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 피틴산으로 구성되는 그룹에서 선택되는 1종 이상의 천연 항산화제를 더 포함한다.According to an even more preferable feature of the present invention, the extract is an organic acid such as citric acid, fumaric acid, adipic acid, lactic acid, malic acid, phosphate or polyphenol such as sodium phosphate, potassium phosphate, acid pyrophosphate, polyphosphate (polymeric phosphate), etc. It further comprises at least one natural antioxidant selected from the group consisting of catechin (catechin), alpha-tocopherol, rosemary extract, vitamin C, green tea extract, licorice extract, chitosan, phytic acid.

본 발명의 더욱 더 바람직한 특징에 의하면, 전체 사료 100중량부에 대하여 0.01∼2중량부 첨가된다.According to an even more preferable feature of the present invention, 0.01 to 2 parts by weight is added to 100 parts by weight of the whole feed.

본 발명의 더욱 더 바람직한 특징에 의하면, β-글루칸(β-glucan), 비타민 E, 효모 배양물(yeast culture) 및 L-카르니틴(L-carnitin) 중 어느 하나 이상을 더 포함한다.According to a still more preferred feature of the present invention, it further comprises any one or more of β-glucan (β-glucan), vitamin E, yeast culture (Yeast culture) and L-carnitin (L-carnitin).

또한, 전술한 본 발명의 목적은,In addition, the above object of the present invention,

오매 20∼50중량부, 황련 10∼30중량부 및 오미자 10∼20중량부를 혼합하여 물 또는 메탄올로 가용한 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 항균제를 제공함에 의해서도 달성된다.It is also achieved by providing an antimicrobial agent comprising 20 to 50 parts by weight of ergots, 10 to 30 parts by weight of rhubarb and 10 to 20 parts by weight of Schizandra chinensis, comprising extracts soluble in water or methanol.

이하, 본 발명에 따른 항균 활성이 있는 동물 사료용첨가제조성물 및 항균제에 관하여 상세히 설명한다.Hereinafter, an additive composition and an antimicrobial agent for animal feed having an antimicrobial activity according to the present invention will be described in detail.

본 발명에 따른 항균 활성이 있는 동물 사료용첨가제조성물은 오매, 황련 및 오미자를 포함하며, 상기 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 분말이 혼합되어 이루어질 수 있으며, 상기 오매, 황련 및 오미자의 추출물로 이루어질 수 있다. 여기서, 상기 오매, 황련 및 오미자는 중량비가 2∼5 : 1∼3 : 1∼2 인 것이 바람직하며, 5 : 3 : 2 의 중량비를 갖는 것이 더욱 바람직하다.Animal feed additive composition having an antimicrobial activity according to the present invention comprises a mae, rhubarb and Schizandra, may be made by mixing the powder by cutting the mae, rhubarb and Schizandra, may be made of the extract of the have. Here, it is preferable that the said ume, rhubarb, and schizandra have a weight ratio of 2-5: 1-1-3, and it is more preferable to have a weight ratio of 5: 3: 2.

상기 추출물은 건조된 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 무게(㎏)의 약 1배 내지 20배, 바람직하게는 약 3배 내지 10배의 물, C₁내지 C₄의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물 또는 메탄올로, 20℃ 내지 100℃, 바람직하게는 50℃ 내지 100℃ 추출온도에서 약 1시간 내지 10일, 바람직하게는 약 2시간 내지 5시간동안 냉침, 열수추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출방법을 이용하여 수득한 추출액을 여과, 감압농축 또는 건조하여 수득할 수 있다.The extract is chopped dried ume, rhubarb and schisandra chinensis to about 1 to 20 times, preferably about 3 to 10 times water, C₁ to C₄ lower alcohol or a mixed solvent thereof, preferably by weight (kg) Preferably, water or methanol, cold, hot water extraction, ultrasonic extraction, refluxing at 20 ° C. to 100 ° C., preferably 50 ° C. to 100 ° C. for about 1 hour to 10 days, preferably about 2 hours to 5 hours. The extract obtained by using a cold extraction method can be obtained by filtration, concentration under reduced pressure or drying.

상기 추출물은, 상술한 바와 같이, 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 오매, 황련 및 오미자를 5:3:2의 중량비로 혼합된 것을 추출하여 얻을 수 있으며, 이러한 추출물은 본 발명에 따른 동물 사료용첨가제조성물에 0.01∼99.9% 함유하는 것이 바람직하고, 0.1∼90% 함유하는 것이 더욱 바람직하다. 그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 오매, 황련 및 오미자의 추출물은 20 내지 90% 고농축액, 분말 또는 과립 형태일 수 있다. The extract, as described above, can be obtained by extracting the mixed ume, rhubarb and schizandra in a weight ratio of 5: 3: 2 by chopping the plum, rhubarb and schizandra, and the extract is an additive for animal feed according to the present invention. It is preferable to contain 0.01 to 99.9% in a composition, and it is more preferable to contain 0.1 to 90%. However, the composition as described above is not necessarily limited thereto. The extracts of the maeol, rhubarb and schizandra may be in the form of 20 to 90% high concentrate, powder or granules.

또한, 상기 추출물은 구연산, 후말산, 아디핀산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나 폴리페놀, 카테친(catechin), 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물(rosemary extract), 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 피틴산 등으로 구성되는 그룹에서 선택되는 1종 이상의 천연 항산화제를 더 포함하는 것이 바람직하다.In addition, the extract may be organic acids such as citric acid, fumaric acid, adipic acid, lactic acid, malic acid, phosphates such as sodium phosphate, potassium phosphate, acid pyrophosphate, polyphosphate (polyphosphate), polyphenols, catechin, alpha- It is preferable to further include at least one natural antioxidant selected from the group consisting of tocopherol, rosemary extract, vitamin C, green tea extract, licorice extract, chitosan, phytic acid and the like.

본 발명에 따른 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 얻은 추출물을 함유하는 동물 사료용첨가제조성물은 보조성분으로 아미노산, 무기염류, 비타민, 항생물질, 항균물질, 항산화, 항곰팡이, 효소, 살아있는 미생물 제제 등과 같은 각종 보조제를 첨가할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 얻은 추출물을 함유하는 동물 사료용첨가제조성물은 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩 및 해바라기를 주성분으로 하는 것; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조 성분, 건조 첨가제를 모두 혼합한 후, 액체 성분과, 가열 후에 액체가 되는 성분, 즉, 지질, 예를 들면 가열에 의해 임의로 액화시킨 동물성 지방 및 식물성 지방 등과 같은 주성분 이외에 영양 보충제, 소화 및 흡수 향상제, 성장 촉진제, 질병 예방제 등과 같은 물질과 함께 사용될 수 있다.Animal feed additive composition containing the extract obtained by slicing omega, rhubarb and Schizandra chinensis according to the present invention is an auxiliary ingredient such as amino acids, inorganic salts, vitamins, antibiotics, antibacterial substances, antioxidants, antifungal, enzymes, living microbial preparations, etc. Various adjuvants may be added. In addition, the animal feed additive composition containing the extract obtained by slicing the ume, rhubarb and schisandra chinensis according to the present invention is a grain, for example, crushed or crushed wheat, oats, barley, corn and rice; Vegetable protein feed, such as rape, soybeans and sunflower; Animal protein feeds such as blood meal, meat meal, bone meal and fish meal; Sugars and dairy products, for example, a dry ingredient consisting of various powdered milk and whey powder, and a drying additive, all mixed together with a liquid component, and a component which becomes a liquid after heating, that is, a lipid, for example, an animal liquefied by heating. In addition to the main components such as fats and vegetable fats and the like can be used with substances such as nutritional supplements, digestion and absorption enhancers, growth promoters, disease prevention agents and the like.

본 발명은 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물 식이에 적용할 수 있으며, 식이는 상업상 중요한 포유류, 예를 들어 돼지, 소, 양, 염소, 실험용 설치 동물(예: 랫트, 마우스, 햄스터 및 게르빌루스쥐 등), 모피 소유 동물(예: 밍크 및 여우 등), 및 동물원 동물(예: 원숭이 및 꼬리 없는 원숭이 등), 뿐만 아니라 가축(예: 고양이 및 개 등)에게 사용할 수 있다.The invention is applicable to a large number of animal diets, including mammals, poultry and fish, the diet being of commercially important mammals such as pigs, cattle, sheep, goats, experimental rodents (eg rats, mice, hamsters) And gerbilus rats, etc.), fur-bearing animals (such as minks and foxes), and zoo animals (such as monkeys and tailless monkeys), as well as livestock (such as cats and dogs).

본 발명에 따른 동물 사료용첨가제조성물을 포함한 동물사료 조성물의 배합 방법은, 상기 동물 사료용첨가제조성물을 동물 사료에 건조 중량 기준으로 사료 1 ㎏당 약 0.1g 내지 100 g의 양으로 혼입한다. 또한, 사료 혼합물은 완전히 혼합한 후, 성분들의 분쇄 정도에 따라 경점성의 조립 또는 과립 물질이 얻어진다. 이것을 메시로서 공급하거나, 또는 추가 가공 및 포장을 위해 원하는 분리된 형상으로 형성시킬 수 있으며, 이 경우에 저장 중의 분리를 방지하기 위해, 동물 사료에 물을 첨가하고, 이어서 통상의 펠릿화, 팽창화, 또는 압출 공정을 거치는 것이 바람직하며 과잉의 물은 건조 제거될 수 있다.In the blending method of the animal feed composition comprising the animal feed additive composition according to the present invention, the animal feed additive composition is incorporated into the animal feed in an amount of about 0.1 g to 100 g per kg of feed on a dry weight basis. In addition, the feed mixture is thoroughly mixed and then a viscous granulated or granular material is obtained depending on the degree of grinding of the components. It may be fed as a mesh or formed into a desired discrete shape for further processing and packaging, in which case water is added to the animal feed to prevent separation during storage, followed by conventional pelletization, expansion, Alternatively, it is preferable to go through an extrusion process and excess water may be dried out.

본 발명은 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 추출물을 유효성분으로 하는 독성 및 내성이 적은 항균활성이 있는 항균제를 제공한다.The present invention provides an antimicrobial agent having low toxicity and resistance to antimicrobial activity by cutting the ume, rhubarb and Schizandra chinensis as an active ingredient.

본 발명의 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 얻은 추출물을 포함하는 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 상기의 추출물을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.The composition comprising the extract obtained by slicing the ume, rhubarb and schisandra chinensis of the present invention may further include appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions. The composition comprising the extract is formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories, and sterile injectable solutions, respectively, according to conventional methods. Carriers, excipients and diluents which may be used and may be included in the composition comprising the extract include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium Phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations may include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose in the extract. ) Or lactose, gelatin and the like are mixed. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium styrate talc are also used. Oral liquid preparations include suspending agents, liquid solutions, emulsions, and syrups, and may include various excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin. . Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.

본 발명에 따른 추출물 또는 분획물의 바람직한 투여량은 동물의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출물은 1일 0.01 mg/kg 내지 10 g/kg으로, 바람직하게는 1 mg/kg 내지 1 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명에 따른 동물 사료용첨가제조성물은 쥐, 생쥐, 가축 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다. The preferred dosage of the extract or fraction according to the invention depends on the condition and body weight of the animal, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration, but may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the extract of the present invention is preferably administered at 0.01 mg / kg to 10 g / kg, preferably 1 mg / kg to 1 g / kg per day. Administration may be administered once a day or may be divided several times. Therefore, the above dosage does not limit the scope of the present invention in any aspect. Animal feed additive composition according to the present invention can be administered to various mammals such as rats, mice, livestock. All modes of administration can be expected, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or cerebrovascular injections.

이상, 본 발명에 따른 오매, 황련 및 오미자를 세절하여 얻은 추출물을 함유하는 동물 사료용첨가제조성물 또는 항균제에 대하여 설명하였으며, 이하 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.In the above, the additive composition for the animal feed or the antimicrobial agent containing the extract obtained by slicing the ume, rhubarb and schisandra chinensis according to the present invention has been described. Hereinafter, the present invention will be described in detail by Examples and Experimental Examples. However, the following Examples and Experimental Examples are only illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following Examples and Examples.

실시예Example 1. 오매(50%),  1.false (50%), 황련goldthread (30%) 및 오미자(20%) 추출물의 제조방법(30%) and the preparation method of Schizandra chinensis (20%)

1-1. 오매, 황련 및 오미자 분말의 제조1-1. Preparation of Plum, Rhubarb and Schizandra Powder

경동시장에서 구입한 오매, 황련 및 오미자를 서늘한 곳에서 1주일 가량 실온에서 건조시킨 후, 건조된 오매, 황련 및 오미자를 분쇄기를 이용하여 입자의 크기가 30메시(mesh) 이하가 되도록 분쇄하여 오매, 황련 및 오미자를 5:3:2의 비율로 분말을 제조하였다. 상기의 방법으로 수득된 오매, 황련 및 오미자를 분말은 본 발명의 주 원료로 사용하였다.The dried plums, rhubarb and schisandra chinensis purchased at Kyungdong market are dried at room temperature for about 1 week at a cool place, and then the dried sorghum, rhubarb and schisandra chinensis are ground to a particle size of 30 mesh or less using a mill. Powder was prepared in a ratio of 5: 3: 2. The ume, rhubarb and schizandra powder obtained by the above method were used as the main raw material of the present invention.

1-2. 오매, 황련 및 오미자 1-2. Plums, Rhubarb and Schizandra 조추출물의Crude extract 제조 Produce

상기 실시예 1-1로부터 얻은 건조된 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)의 혼합분말(300g) 질량의 3배에 해당하는 100% 메탄올 용액을 가하여 100℃에서 24시간동안 환류 냉각 추출하고 여과 및 동결건조한 과정을 통해 3.2g의 오매, 황련 및 오미자의 혼합 조추출물을 수득하였다.100% methanol solution corresponding to three times the mass of the mixed powder (300 g) of the dried ume (50%), rhubarb (30%) and schizandra (20%) obtained in Example 1-1 was added thereto at Cooling extraction under reflux for time, filtration and lyophilization yielded 3.2 g of mixed crude extracts of omega, rhubarb and Schizandra chinensis.

1-3. β-1-3. β- 글루칸Glucan (β-(β- glucanglucan ) 함유 추출물의 제조) Preparation of extract containing

상황버섯을 채취하여 물로 깨끗이 수세한 다음, 분쇄기를 이용하여 입자의 크기가 30메시가 되도록 분말화 하였다. 건조된 상황버섯 분말(300g) 질량의 3배에 해당하는 70% 메탄올 용액을 -20℃에서 가하여 20분간 혼합 한 후, 여과하였다. 상기의 과정을 3회 반복 수행하여 추출한 다음, 추출된 여액을 모두 합하여 2M K2HPO4 용액을 소량 가하여 3000rpm에서 20분간 원심분리하였다. 원심분리 후 남아있는 부분은 메탄올로 세척하고 1.2N 염산 용액 1ℓ에 용해시킨 후, 탄산나트륨 포화용액 1ℓ를 가하여 pH를 4.0으로 중화시킨 다음, 36시간 동안 투석액에서 투석시 켰다. 투석액에 동일한 양의 카페인(caffeine) 포화 용액을 첨가하여 3000rpm에서 다시 20분간 원심분리하였다. 분리되어 남아있는 부분은 1% 염산-디메틸포름아미드(HCL-dimethylformamide) 용액에 용해시킨 후, 세파덱스 LH-20 컬럼(Sephadex LH-20 column)에 주입하여 70% DMFA 용액을 전개용매로 하여 전개시킨 다음 동결 건조하여, β-글루칸 함유 추출물 30g을 수득하였다.Sichuan mushrooms were collected and washed with water, and then powdered to a size of 30 mesh using a grinder. 70% methanol solution corresponding to three times the mass of dried dried mushroom powder (300 g) was added at -20 ° C, mixed for 20 minutes, and filtered. The procedure was repeated three times, followed by extracting, adding all the extracted filtrates and adding a small amount of 2M K2HPO4 solution, followed by centrifugation at 3000 rpm for 20 minutes. The remaining part after centrifugation was washed with methanol, dissolved in 1 L of 1.2N hydrochloric acid solution, neutralized the pH to 4.0 by adding 1 L of saturated sodium carbonate solution, and dialyzed in dialysis solution for 36 hours. The same amount of saturated solution of caffeine was added to the dialysate and centrifuged again at 3000 rpm for 20 minutes. The remaining portion was dissolved in 1% hydrochloric acid-dimethylformamide solution, injected into Sephadex LH-20 column, and developed with 70% DMFA solution as a developing solvent. After lyophilization, 30 g of β-glucan-containing extract was obtained.

1-4. 효모 배양물(1-4. Yeast culture ( yeastyeast cultureculture )의 제조Manufacturing

박토이스트(BactoYeast) 추출물 10g을 1000㎖의 증류수에 녹인 다음, 오토클레이브(autoclave)하였다. 오토클레이브된 추출물에 한천(Agar) 20g을 첨가하여 녹인 다음, 37℃에서 YPD 배양기에 넣어 배양하였다. 배양이 끝난 후 수분이 10% 이하가 되도록 1주일간 서늘한 곳에서 건조시킨 후, 다시 40℃ 이하의 낮은 온도에서 온풍 건조시켰다. 건조된 효모는 1㎏당 함량이 17%이상이 되도록 하여 동물 사료용첨가제조성물을 제조하는데 사용하였다.10 g of BactoYeast extract was dissolved in 1000 ml of distilled water, followed by autoclave. 20 g of agar (Agar) was added to the autoclaved extract to dissolve, and then cultured in a YPD incubator at 37 ° C. After incubation, the resultant was dried in a cool place for one week so that the moisture was 10% or less, and then warm-dried at a low temperature of 40 ° C or lower. The dried yeast was used to prepare an additive composition for animal feed so that the content per kg was 17% or more.

실시예Example 2. 동물용 사료 조성물의 제조 2. Preparation of Animal Feed Composition

상기 실시예 1로부터 얻은 오매, 황련 및 오미자 분말, 오매의 조추출물에 β-글루칸 함유 추출물 및 효모 이외에 비타민 E 및 L-카르니틴(L-carnitin)을 첨가하여 동물 사료용첨가제조성물을 제조하였다. 상기 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)의 혼합분말은 0.1내지 50%, 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)의 메탄올 가용추출물은 0.1내지 50%, 효모는 1㎏ 당 10 내지 20% 함유되도록 하였다. L-카르니틴, β-글루칸 및 비타민 E는 소량 첨가하여 본 발명의 동물용 사료 조성물을 제조하였다. 본 발명의 동물 사료용첨가제조성물의 비율을 표 1에 예시하였다.In addition to β-glucan-containing extracts and yeasts, the additives for animal feed were prepared by adding E, L-carnitine powder, and oak powder obtained from Example 1 above. The mixed powder of the maeja (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%) is 0.1 to 50%, methanol soluble extract of umeru (50%), rhubarb (30%) and schizandra (20%) is 0.1 To 50%, yeast was to be contained 10 to 20% per kg. Small amounts of L-carnitine, β-glucan and vitamin E were added to prepare the animal feed composition of the present invention. The ratio of the animal feed additive composition of the present invention is illustrated in Table 1.

[표 1]TABLE 1

조성물 예Composition example W%W% 조성물 예 Composition example W%W% 오매(50%), 황련(30%), 오미자(20%) 분말Ome (50%), Rhubarb (30%), Schisandra chinensis (20%) Powder 4545 오매(50%), 황련(30%), 오미자(20%) 메탄올 가용추출물Soybean extract (50%), rhubarb (30%), Schisandra chinensis (20%) methanol soluble extract 4545 β-글루칸β-glucan 0.50.5 L-카르니틴L-carnitine 0.50.5 비타민 EVitamin E 0.50.5 효모 배양물Yeast culture 8.58.5

1-1. 1-1. 공시균주Disclosure strain 및 배지와 균주배양 And culture with culture medium

항균력 측정에 사용된 균주는 인체나 동물에서 분리 야외균주와 ATCC 표준균주이다(표 2 참조). 균주들은 Tryptic Soy brothⓡ (TSB; Difco, USA)에 접종되어 37℃ 항온기에서 24시간동안 배양하여 실험에 사용하였으며 육안의 관찰을 위해서는 뮬러-힌톤 (Muller-Hinton; Difco, USA) 한천 배지를 사용하였다. Strains used to measure antimicrobial activity are isolated outdoor strains from humans or animals and ATCC standard strains (see Table 2). Strains were inoculated with Tryptic Soy broth® (TSB; Difco, USA) and incubated for 24 hours in a 37 ° C thermostat. It was.

[표 2] 박테리아 균주의 목록Table 2 List of Bacterial Strains

Table 1. List of the bacterial strains used in this study Table 1. List of the bacterial strains used in this study

균주Strain 묘사 describe 유래 origin JOL375JOL375 비브리오 콜레라 01(V. Cholerae)Vibrio Cholera 01 (V. Cholerae) 사람Person JOL376JOL376 비브리오 콜레라 139(V. Cholerae)Vibrio Cholera 139 (V. Cholerae) JOL377JOL377 시겔라 디센테리아(Shigella dysenteriae)Shigella dysenteriae 사람Person JOL378JOL378 시겔라 플렉세네리(Shigella flexeneri)Shigella flexeneri 사람Person JOL379JOL379 이콜라이 O157(E.Coli O157) ATCC 43890E.Coli O157 ATCC 43890 MRSA104MRSA104 엠알에스에이(MRSA) 104MRSA 104 사람Person JOL284JOL284 이콜라이 O157(E.Coli O157) E. Coli O157 동물 animal

항균력 측정에 사용된 살모넬라(Salmonella)균은 인체나 동물에서 분리된 자연 균주와 ATCC 균주이다(표 3참조). 균주들은 Tryptic Soy brothⓡ (TSB; Difco, USA)에 접종되어 37℃ 항온기에서 24시간동안 배양하여 실험에 사용하였으며 육안의 관찰을 위해서는 뮬러-힌톤 한천배지를 사용하였다. Salmonella bacteria used to measure the antimicrobial activity are natural strains and ATCC strains isolated from humans or animals (see Table 3). Strains were inoculated in Tryptic Soy broth® (TSB; Difco, USA) and incubated for 24 hours in a 37 ° C thermostat and used for experiments. Muller-Hinton agar medium was used for visual observation.

[표 3] 살모넬라 목록[Table 3] Salmonella List

균주Strain 묘사 describe 유래 origin JOL380JOL380 살모넬라 티피 (Salmonella typhi)S.TyphiSalmonella typhi S. Typhi 사람Person JOL381JOL381 살모넬라 파라티피 (Salmonella paratyphi) Salmonella paratyphi 사람Person JOL386JOL386 살모넬라 엔테리티디스(S.Enteritidis)Salmonella Enteritidis 돼지 pig JOL387JOL387 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium 돼지pig JOL388JOL388 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium 돼지pig JOL389JOL389 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium 돼지 pig JOL394JOL394 살모넬라 칼리나리움 (Salmonella gallinarium)Salmonella gallinarium 닭(비장) Chicken (splenic) JOL395JOL395 살모넬라 칼리나리움 (Salmonella gallinarium)Salmonella gallinarium 닭(간) Chicken liver JOL398JOL398 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium 돼지 pig JOL399JOL399 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium 돼지 pig JOL400JOL400 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium 돼지 pig JOL401JOL401 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium chicken JOL402JOL402 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium chicken JOL403JOL403 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium chicken JOL404JOL404 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium chicken JOL405JOL405 살모넬라 엔테리티디스(S.Enteritidis)Salmonella Enteritidis chicken JOL407JOL407 살모넬라 엔테리티디스(S.Enteritidis)Salmonella Enteritidis small JOL408JOL408 살모넬라 티피뮤리움(S.Typhimurium)Salmonella typhimurium small JOL409JOL409 살모넬라 듀블린(S.Dublin)Salmonella Dublin small JOL410JOL410 살모넬라 더비S.Derby)Salmonella Derby small JOL411JOL411 살모넬라 콜레라시우스(S.Cholerasuis) ATCC 7001Salmonella Cholerasis ATCC 7001 돼지pig JOL419JOL419 살모넬라 칼리나리움 (Salmonella gallinarium) Salmonella gallinarium chicken JOL420JOL420 살모넬라 칼리나리움 (Salmonella gallinarium)Salmonella gallinarium chicken JOL421JOL421 살모넬라 칼리나리움 (Salmonella gallinarium)Salmonella gallinarium chicken JOL422JOL422 살모넬라 칼리나리움 (Salmonella gallinarium)Salmonella gallinarium chicken JOL423JOL423 살모넬라 칼리나리움 (Salmonella gallinarium) ATCC 9184Salmonella gallinarium ATCC 9184 chicken

1-2. 디스크검사법(1-2. Scanning disk method ( BauerBauer -- kirbykirby testtest ))

세균 배양액을 뮬러-힌톤 한천 배지 위에 접종하고 이 위에 천연물질에서 추출한 약제를 디스크에 주입하면 배지에 항생제 농도구배가 생긴다. 이때 디스크 주위로 생기는 억제환이 항균력을 나타낸다. 억제환은 항생제의 용해도와 세균의 민 감성정도에 따라 크기가 나타나며 각 항생제에 대한 민감성은 항생제마다 일정한 억제환의 크기에 따라 감수성(sensitive, S), 중간내성(intermeditely sensitive, I), 내성(resistant, R)으로 나눈다. Inoculating bacterial culture on Muller-Hinton agar medium and injecting a drug extracted from natural substances onto the disc creates an antibiotic gradient in the medium. At this time, the inhibitory ring around the disc shows antibacterial activity. The inhibitory ring is sized according to the solubility of antibiotics and the sensitivity of bacteria, and the sensitivity to each antibiotic is sensitive (S), intermeditely sensitive (I), and resistant (resistant, Divide by R)

1-2-1. 오매(50%), 1-2-1. Hawk (50%), 황련goldthread (30%) 및 오미자(20%) 추출물의 항균력(30%) and Schisandra chinensis (20%) Extracts

오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)의 0.5mg/ml농도로 처리한 후, 디스크 확산법으로 항균성을 조사한 결과 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)에서 아래의 모든 세균에 감수성을 보였다(표 4참조).After treatment with 0.5 mg / ml concentrations of ume (50%), rhubarb (30%) and schizandra (20%), the antimicrobial activity was investigated by disk diffusion method. %) Showed susceptibility to all of the following bacteria (see Table 4).

[표 4] 오매(50%),황련(30%),오미자(20%) 추출물의 박테리아 성장 억제 활성TABLE 4 Bacterial Growth Inhibitory Activities of Extracts of Ome (50%), Sulfur (30%), and Schisandra chinensis (20%)

식물학적 명칭  Botanical designation 깨끗한 부분의 지름(mm)Diameter of clean area (mm) JOL 375JOL 375 JOL 376JOL 376 JOL 377JOL 377 JOL 378JOL 378 JOL 379JOL 379 MRSA 104MRSA 104 JOL 284JOL 284 오매,황련,오미자 추출물Omae, Rhubarb, Schizandra Extract 2727 2525 1515 1717 2020 1212 1010

1-2-2. 살모넬라에 대한 오매(50%),1-2-2. Hawk on salmonella (50%), 황련goldthread (30%),오미자(20%)추출물의 항균력 시험(30%), Antibacterial activity test of Schisandra chinensis (20%) extract

살모넬라에 대한 한약재추출물의 0.5mg/ml농도로 처리한 후의 항균성을 조사한 결과 오매에서 높은 항균성을 보였다 (표 5참조). Antimicrobial Activity of Salmonella Extracts Treated with 0.5mg / ml Concentrations of Herb Extracts It showed high antimicrobial activity in omega (see Table 5).

[표 5] 약용식물 추출물의 살모넬라 성장 억제 활성[Table 5] Salmonella growth inhibitory activity of medicinal plant extracts

샘플Sample 깨끗한 부분의 지름 (mm)Diameter of clean area (mm) 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)Ome (50%), Rhubarb (30%) and Schisandra (20%) JOL380JOL380 1313 JOL381JOL381 1313 JOL386JOL386 1111 JOL387JOL387 1212 JOL388JOL388 1212 JOL389JOL389 1010 JOL407JOL407 88 JOL408JOL408 1111 JOL409JOL409 77 JOL410JOL410 1010 JOL411JOL411 1212 JOL419JOL419 99 JOL420JOL420 1010 JOL421JOL421 1212 JOL422JOL422 1010

1-3. 최소 억제 농도(1-3. Minimum inhibitory concentration ( MICMIC ))

1-3-1. 실험과정1-3-1. Experiment process

항균력이 나타난 한약재의 최소 억제 농도 측정도 뮬러-힌톤 한천 배지를 이용하였다. TSB에 증균된 균을 같은 배지를 이용하여 재증균 후 590nm에서 흡광도를 측정하여 CFU (개/㎖)를 계산 후, 0.85% 생리식염수를 이용하여 1X 105개/㎖로 희석한다.Muller-Hinton agar medium was also used to measure the minimum inhibitory concentration of the herbal medicine showed antibacterial activity. The bacteria enriched in TSB were re-sterilized using the same medium, and the absorbance at 590 nm was measured to calculate CFU (dog / ml), and then diluted to 1 × 105 / ml using 0.85% physiological saline.

측정 농축물은 55~60℃의 뮬러-힌톤 브로스(broth)로 녹이고 희석된 균과 동량으로 넣어 37℃ 항온기에서 24시간 배양한다. 배양된 균을 멸균된 증류수를 이용하여 100배 희석한다. 뮬러-힌톤 한천 배지에 100㎕ 희석액을 도말하여 37℃ 항온기에서 18시간 배양한 후, 육안으로 관찰하여 군집 수가 100개 미만인 농도를 최소 억제 농도로 결정하였다.The measured concentrate is dissolved in Muller-Hinton broth at 55-60 ° C, in the same amount as the diluted bacteria and incubated in a 37 ° C thermostat for 24 hours. The cultured bacteria are diluted 100-fold using sterile distilled water. 100 μl dilutions were spread on Muller-Hinton agar medium and incubated for 18 hours at 37 ° C. incubator, followed by visual observation to determine the concentration at which the population was less than 100 as the minimum inhibitory concentration.

1-3-2. 실험결과1-3-2. Experiment result

항균력이 확인된 3종의 한약재, 즉 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)의 100% 메탄올 추출물을 대상으로 살모넬라 균주에 대한 최소억제농도(MIC)를 검사한 결과, 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 처리군에서 대체적으로 최저 0.49mg/ml에서 최고 7.8mg/ml의 범위에서 항균성을 나타나는 것을 보여주고 있다. (표 6참조).The minimum inhibitory concentration (MIC) of Salmonella strains was tested against 100% methanol extracts of three Chinese herbs, antibacterial (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%). It was shown that antimicrobial activity ranged from 0.49 mg / ml up to 7.8 mg / ml in the OH (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%) groups. (See Table 6).

[표 6] 오매(50%), 황련(30%), 오미자(20%)의 살모넬라 균주에 대한 최소억제농도Table 6 Minimum Inhibitory Concentrations of Salmonella Strains of Ome (50%), Huang Yan (30%), and Schisandra chinensis (20%)

Jol NO.Jol NO. speciesspecies (mg/ml) (mg / ml) Jol NO.Jol NO. speciesspecies (mg/ml) (mg / ml) 표준균주Standard strain Salmonella.sppSalmonella.spp 3.93.9 403403 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 380380 S.TyphiS.Typhi 1.91.9 404404 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 381381 S.ParatyphiS.Paratyphi 0.490.49 405405 S.EnteritidisS.Enteritidis 1.91.9 386386 S.EnteritidisS.Enteritidis 3.93.9 407407 S.EnteritidisS.Enteritidis 1.91.9 387387 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 408408 S.TyphimuriumS.Typhimurium 3.93.9 388388 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 409409 S.DublinS.Dublin 1.91.9 389389 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 410410 S.DerbyS.Derby 0.490.49 394394 S.GallinarumS.Gallinarum 1.91.9 411411 S.CholerasuisS.Cholerasuis 7.87.8 395395 S.GallinarumS.Gallinarum 3.93.9 419419 S.GallinarumS.Gallinarum 1.91.9 398398 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 420420 S.GallinarumS.Gallinarum 7.87.8 399399 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 421421 S.GallinarumS.Gallinarum 1.91.9 400400 S.TyphimuriumS.Typhimurium 7.87.8 422422 S.GallinarumS.Gallinarum 1.91.9 401401 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9 423423 S.GallinarumS.Gallinarum 1.91.9 402402 S.TyphimuriumS.Typhimurium 1.91.9

1-4. 닭 접종실험1-4. Chicken Inoculation Experiment

1-4-1. 실험동물1-4-1. Laboratory animals

본 실험에는 7~10일령의 삼계용 닭을 사용하였다. 실험에 사용하기 전 3일간의 적응기간을 두었다. 실험동물은 각 군당 30마리씩 총 3군으로 나누어 분리사육 하였다.In this experiment, chickens for three chickens of 7-10 days of age were used. There was a three-day adaptation period prior to use in the experiment. Experimental animals were divided into three groups of 30 animals in each group.

1군(test group) - 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)를 2%씩 사료에 첨가해 제공Test group-Provided with 2% of omega (50%), rhubarb (30%) and omija (20%) to feed

2군(positive control) - tetracycline을 권장량인 0.05%씩 사료로 첨가해 제공Group 2 (positive control)-Provide tetracycline as feed in 0.05% recommended amount

3군(negative control) - 사료만 제공Negative control-feed only

실험 전에 미생물학적 검사를 실시하여 Salmonella spp.에 감염되어 있지 않음을 확인하였다. 실험을 수행하는 기간 내내 충분한 양의 사료와 음수를 공급하였다. 또한 사육장내에서의 재감염을 줄이기 위해 매일 사료통과 물통 및 바닥 등을 갈아주었다. Salmonella was tested before microbiological testing It was confirmed that it is not infected with spp . Sufficient amount of feed and drinking water were supplied throughout the duration of the experiment. Also, to reduce re-infection in the kennel, the daily feed bucket, bucket and bottom were changed.

1-4-2. 닭 접종실험 방법1-4-2. Chicken inoculation experiment method

마우스 접종실험에는 tetracycline susceptible strain인 S. Gallinarum (JOL 420)을 Tryptic Soy broth (TSB; Difco, USA)에 접종하여 37℃ shaking incubator에서 20시간 배양 후 2,500rpm에서 30분간 원심분리하여 균체를 회수하였다. 균체를 1X phosphate buffered saline(PBS)으로 1회 세척 후, 20% sucrose in 1X PBS에 재부유시켜 1x106cfu/2ml씩 zondae를 이용하여 경구 접종하였다. Mouse inoculation experiments included tetracycline susceptible strain S. Gallinarum (JOL 420) was inoculated in Tryptic Soy broth (TSB; Difco, USA) and cultured for 20 hours at 37 ℃ shaking incubator and centrifuged at 2,500rpm for 30 minutes to recover the cells. The cells were washed once with 1X phosphate buffered saline (PBS), resuspended in 20% sucrose in 1X PBS and inoculated orally using zondae at 1x106cfu / 2ml.

1-4-3. 닭의 1-4-3. Chicken 생존여부와Survival and 분변에서In feces 살모넬라의 검출에 의한 효과측정 Effect measurement by detection of Salmonella

닭에 S. Gallinarum을 투여한 후, 닭의 생존여부와 분변으로 배출되는 Salmonella spp .의 수를 조사하였다. 생존여부는 약재 투여 후 5일 동안 매일 조사하였고, 분변으로 배출되는 균수는 균 접종직전의 변을 통해 Salmonella spp .에 감염되어 있는지를 조사한 다음, 균 접종 후 1일, 3일, 5일째의 분변을 받아 1X PBS를 이용해 1x10-3, 1x10-5 으로 계대 희석하였다. 그리고 희석된 시료를 100㎕씩 Salmonella & Shigella (Difco, Sparks, USA) agar에 접종하고 37°C incubator에서 18~20시간 배양한 후 균락 수를 조사하였다. S to chicken. After administering Gallinarum, Salmonella spp . The number of was investigated. Survival was a daily survey for 5 days after the administration of medicines, the bacteria are excreted in feces spp Salmonella bacteria through the changes of the previous vaccination. 1, 3, and 5 days after the inoculation of the bacterium, it was subdivided into 1x10-3 and 1x10-5 using 1X PBS. The diluted samples were inoculated into Salmonella & Shigella (Difco, Sparks, USA) agar at 100 μl and incubated in 37 ° C incubator for 18-20 hours.

균 투여 후, 분변에서 검출된 Salmonella spp.의 집락 수와 닭의 생존률을 조사하였다. Table 3은 닭의 생존률을 조사한 결과이다. 분변을 통한 균락 수에서는 각 군에서 유의하게 차이를 보이지 않았다. 하지만 생존률에서는 균 투여 후 5일째 까지 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 공급군에서 30마리 중 63% (19마리)가 살아남은 반면, tetracycline 투여군에서는 43% (13마리)가 살아남았고 대조군에서는 20% (6마리)만이 살아남았다. 또한 실험이 끝날 때까지 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 공급군 병아리들의 활동성은 매우 활발하고 건강해 보인반면, 2군과 특히 3군은 매우 침울하며 기모역립등의 증상이 있었다. 따라서 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)는 병아리의 생존률을 높이는데 탁월한 효과가 있는 것으로 보인다. Salmonella detected in feces after fungal administration The number of colonies and the survival rate of chickens were investigated. Table 3 shows the survival rate of the chickens. There were no significant differences in the number of fecal collapses in each group. However, in survival, 63% (19) out of 30 survived in the mae (50%), rye (30%) and schizandra (20%) feeding groups until the 5th day after the fungal administration, while 43% (13) in the tetracycline group. ) Survived and only 20% (6) survived in the control group. Also, until the end of the experiment, the chicks (50%), rhubarb (30%), and Schisandra chinensis (20%) feeding chicks were very active and healthy, while group 2 and especially group 3 were very depressed. Had symptoms. Thus, ume (50%), rhubarb (30%) and schisandra (20%) seem to have an excellent effect on improving the survival of chicks.

[표 7] Survival rate of chicken after infection of S. Gallinarum Table 7 Survival rate of chicken after infection of S. Gallinarum

GroupGroup Number of dead chicken after S. Gallinarum infectionNumber of dead chicken after S. Gallinarum infection 0day0day 1day1day 2day2day 3day3day 4day4day 5day5day Total deathTotal death 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%)Ome (50%), Rhubarb (30%) and Schisandra (20%) 33 55 33 1111 TetracyclineTetracycline 44 66 77 1717 ControlControl 33 55 88 88 2424

1-4-4. 병리학적 조사 1-4-4. Pathological investigation

사망한 닭의 간, 비장, 소장, 신장 등의 조직을 닭이 죽은 뒤 잘라내고 10% NBF에 넣어 4℃에서 하루 동안 둔다. H&E 염색 후 병리학적인 변화를 관찰한다.The liver, spleen, small intestine, and kidney tissue of the dead chicken is cut off after the chicken dies and placed in 10% NBF for 4 days at 4 ° C. Observe pathological changes after H & E staining.

1-4-5. 병리학적 조사 결과 1-4-5. Pathological findings

1) 간장1) soy sauce

오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 투여군의 간은 정상소견을 보이고 있다. 정상적인 central vein과 그 주변의 sinoside가 관찰된다(1a). 대조군의 간은 동모양혈관에서 울혈이 관찰되며, 혈관 주변이 괴사(1b)되어 있다.Liver of normal group (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%) was normal. Normal central vein and its surrounding sinosides are observed (1a). In the liver of the control group, congestion is observed in the same blood vessel, and necrosis (1b) is around the blood vessel.

2) 신장2) height

오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 투여군의 신장은 정상소견(2a)을 보이고 있으며 정상적인 intralobulr vein과 renal corpuscle, convoluted tuble 등이 보이고 있다. 하지만 대조군의 신장은 울혈과 괴사가 심하여 renal corpuscle과 convoluted tuble의 관찰이 용이하지 않다. 특히 vein주변의 proximal convoluted tuble의 괴사가 심하게 관찰된다(2b).Kidney (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%) showed normal height (2a) and normal intralobulr vein, renal corpuscle, and convoluted tuble. However, the renal corpuscle and convoluted tuble were not easily observed because the kidneys of the control group had congestion and necrosis. In particular, necrosis of proximal convoluted tubles around vein was severely observed (2b).

3) 비장3) spleen

오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 투여군은 정상소견을 보이고 있으며 정상적인 적색수질과 백색수질, 림프절 등이 관찰된다(3a). 대조군에서는 적색수질이 더 많이 관찰되어 적색수질의 울혈이 인정된다.(3b). 또한 대조군에서는 적혈구가 더 많이 관찰되며 백색수질과 림프절도 더 뚜렷하게 보이는 것으로 보아 균 접종에 따른 염증반응이 강하게 이루어 진 것 같다.The group treated with ume (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%) showed normal findings, and normal red and white medulla and lymph nodes were observed (3a). In the control group, more red medulla was observed, indicating congestion of red medulla (3b). In addition, more erythrocytes were observed in the control group, and white medulla and lymph nodes were more clearly seen, indicating that the inflammatory response due to inoculation was strong.

1-5. 닭 사양실험1-5. Chicken Specification

1-5-1. 실험동물1-5-1. Laboratory animals

(1) 육계 사양시험 (1) Broiler Specification Test

시험 1은 육계 1일령 코브 수컷(평균 44g)을 이용하여 5주간 사양시험을 진행하였다. 육계 사료에 오매, 황련 및 오미자를 0, 0.25, 0.5, 1, 2% 수준으로 첨가하였고, 처리구당 4반복, 반복당 16수씩 총 320수를 공시하였다. 사료내 영양소 함량은 사육전기 2주와 후기 3주로 구분하여 각각 CP 22, 20%와 ME는 3,100kcal/kg 수준으로 하였고, 기타 영양소 함량은 NRC 사양표준(1994)에 의거하였다.Test 1 was carried out for 5 weeks using a broiler 1-day-old Cove male (average 44g). Oysters, rhubarb and schisandra chinensis were added to broiler feed at levels of 0, 0.25, 0.5, 1, 2%, and a total of 320 waters, 4 repetitions per treatment and 16 per repetition, were disclosed. The nutrient content in the feed was divided into 2 weeks before and 3 weeks after breeding, and CP 22, 20% and ME were 3,100 kcal / kg, respectively. Other nutrient contents were based on NRC specification standard (1994).

(2) 산란계 사양시험(2) Spectrometer Specification Test

시험 2에서는 강제환우 시킨 산란계 하이라인 갈색계(86주령)를 이용하여 4 주간 사양실험을 시행하였다. 산란계 사료에 오매, 황련 및 오미자를 0, 0.05, 0.1, 0.2% 수준으로 첨가하여 4개 처리구를 두었고, 처리구당 4반복, 반복당 18수씩, 총 288수를 공시하였다.In Test 2, a four-week feeding test was conducted using a laying hen highline brown system (86 weeks old). Four treatments were added to the laying hens at levels of 0, 0.05, 0.1 and 0.2%, and 4 repetitions per treatment and 18 per repetition were published.

1-5-2 조사항목 1-5-2 Survey Items

1) 육계와 산란계의 생산성1) Productivity of broilers and laying hens

육계의 체중, 사료섭취량, 사료요구율은 전기와 후기로 구분하여 측정하였으며, 사료요구율은 사료섭취량을 증체량으로 나누어 계산하였다. 산란계의 산란수와 난중은 매일 조사하였고, 사료섭취량은 시험 종료시 조사하였다. 산란율은 산란수와 사육수수로 나눈 값(헨데이 산란율)로 표시하였고, 평균 난중은 연란과 기형란을 제외하고 계산하였다. 1일 산란량은 1일 평균 산란율과 평균 난중을 곱하여 계산하였고, 사료요구율은 1일 평균 사료섭취량을 1일 산란량으로 나누어 계산하였다.The body weight, feed intake and feed demand of broilers were measured by the first and last stages. Feed demand was calculated by dividing feed intake by weight gain. Laying eggs and egg weight of the laying hens were examined daily, and feed intake was examined at the end of the test. The spawning rate was expressed as the number of eggs divided by the number of spawning and breeding (Henday's spawning rate), and the average egg weight was calculated excluding eggs and malformed eggs. The daily egg production was calculated by multiplying the average egg yield and the average egg weight per day, and the feed requirement was calculated by dividing the average feed intake by the daily egg production.

2) 혈액의 성상2) the appearance of blood

혈청 중 총 단백질, 알부민, 총콜레스테롤, 중성지방, HDL-cholesterol 등의 함량은 ADVIA 1650(JEOL, JAPAN)으로 측정하였다.Serum total protein, albumin, total cholesterol, triglyceride, HDL-cholesterol and the like were measured by ADVIA 1650 (JEOL, JAPAN).

3) 난각강도, 난각두께, 호유닛(Haugh unit), 난황색도3) Eggshell Strength, Eggshell Thickness, Haugh Unit, Egg Yellow Color

난각강도, 난각두께, 호유닛, 난황색도는 8주 간격으로 조사하였으며, 처리구당 30 반복으로 측정하였다. 난각강도는 난각강도계(FHK, Japan)를 이용하였고, 난각두께는 내부 난각막을 제거한 후 micrometer(FHK, Japan)로 측정하였다. 호유닛과 난황색도는 계란 품질측정기(QCM+, TSS, England)를 이용하여 측정하였다. Eggshell strength, eggshell thickness, arc unit, and egg yolk were examined at 8-week intervals and measured at 30 replicates per treatment. The eggshell strength was measured using an eggshell strength meter (FHK, Japan), and the eggshell thickness was measured using a micrometer (FHK, Japan) after removing the inner eggshell membrane. Hounit and egg yellow were measured using an egg quality tester (QCM +, TSS, England).

1-5-3 사양실험결과1-5-3 Specification Experiment Result

가. 육계에서 오매, 황련 및 오미자 추출물을 수준별로 급여하였을 때, 증체량은 1-2, 3-5, 1-5주 기간별로 유의한 차이는 발견할 수 없었으나 오매, 황련 및 오미자 추출물 0.25% 첨가구가 대조구에 비하여 증가하는 경향을 보였다. 사료섭취량의 경우, 오매, 황련 및 오미자 추출물 2% 첨가구는 1-2주와 3-5주 기간 동안에서 차이가 없었으나 시험 전체기간(1-5주)으로 계산하였을 때에는 대조구와 비교하여 유의하게 감소하였다. 사료요구율에 있어서는 오매, 황련 및 오미자 첨가구 전체에서 3-5주와 시험 전체기간(1-5주)에서 대조구보다 유의하게 개선되었다. end. When broiler broilers were fed omega, rhubarb, and schizandrae extracts by level, there was no significant difference in weight gain between 1-2, 3-5, and 1-5 weeks. Increased more than the control. In the case of feed intake, there was no difference in 2, 5 and 5 weeks of omega, rhubarb, and Schisandra chinensis extracts. Decreased. Feed demand rate was significantly improved in the whole group of o medium, yellow lotus and Schisandra chinensis supplemented group compared to the control group at 3-5 weeks and whole test period (1-5 weeks).

나. 육계에서 오매, 황련 및 오미자 추출물을 수준별로 급여하여 혈액의 성상을 조사한 결과, 혈중 총단백질, 알부민, 글루코스 농도에서는 대조구와 차이가 없었다. 그러나 콜레스테롤과 중성지방 농도는 오매, 황련 및 오미자 추출물 1%와 2% 첨가구가 대조구에 비하여 유의하게 감소하였다.I. The broiler broiler fed mae, rhubarb and schisandra chinensis extracts according to their levels, and the results showed that the total protein, albumin and glucose levels in blood were not different from those of the control. However, cholesterol and triglyceride concentrations were significantly decreased in the 1% and 2% diets of Omae, Rhubarb and Schisandra chinensis extracts compared to the control.

다. 산란계에서 오매, 황련 및 오미자 추출물을 수준별로 급여하여 생산성과 난품질을 비교한 결과, 일반적으로 오매, 황련 및 오미자 추출물 첨가구가 대조구에 비하여 개선되는 경향을 보였으나 유의적인 수준은 아니었다.All. As a result of comparing the productivity and egg quality by feeding the ume, rhubarb and Schisandra chinensis extracts in the laying hens, the addition of the buckwheat, rhododendron and Schisandra chinensis extract tended to improve compared to the control, but it was not significant.

표 1. 한약재의 급여가 육계의 생산성에 미치는 영향 (시험 1)Table 1. Effect of Herbal Supplementation on Broiler Productivity (Test 1)

처리구 (%)Treatment Zone (%) 증체량(g)Weight gain (g) 사료섭취량(g)Feed Intake (g) 사료요구율Feed rate 1-2주1-2 weeks 3-5주3-5 weeks 전체all 1-2주1-2 weeks 3-5주3-5 weeks 1-5주1-5 weeks 1-2주1-2 weeks 3-5주3-5 weeks 1-5주1-5 weeks 00 384384 1,2941,294 1,6791,679 495495 2,3622,362 2,857a2,857a 1.2871.287 1.826a1.826a 1.702a1.702a 0.250.25 390390 1,3531,353 1,7431,743 500500 2,3752,375 2,874a2,874a 1.2851.285 1.755b1.755b 1.649b1.649b 0.500.50 391391 1,2911,291 1,6821,682 494494 2,2832,283 2,777ab2,777ab 1.2661.266 1.767b1.767b 1.651b1.651b 1.001.00 382382 1,2771,277 1,6591,659 501501 2,2292,229 2,731ab2,731ab 1.3151.315 1.747b1.747b 1.647b1.647b 2.002.00 376376 1,2441,244 1,6191,619 492492 2,1712,171 2,663b2,663b 1.3101.310 1.746b1.746b 1.645b1.645b SEMSEM 3.473.47 13.5613.56 14.6214.62 4.024.02 25.9125.91 25.5225.52 0.010.01 0.010.01 0.010.01

표 2 한약재의 급여가 육계의 혈액 성상에 미치는 영향 (시험 1)Table 2 Effect of Herbal Supplementation on Blood Characteristics of Broilers (Test 1)

처리구(%)Treatment Zone (%) 알부민albumin 단백질protein 글루코스Glucose 콜레스테롤cholesterol 중성지방Triglyceride 00 1.111.11 2.772.77 200.1200.1 171.3ab171.3ab 20.3a20.3a 0.250.25 1.181.18 2.902.90 217.9217.9 182.0a182.0a 20.3a20.3a 0.500.50 1.181.18 2.842.84 219.7219.7 182.9a182.9a 20.9a20.9a 1.001.00 1.131.13 2.812.81 211.9211.9 153.3c153.3c 15.3b15.3b 2.002.00 1.101.10 2.652.65 212.3212.3 159.6bc159.6bc 15.5b15.5b SEMSEM 0.010.01 0.030.03 3.333.33 2.672.67 0.730.73

표 3 한약재의 급여가 산란계의 생산성에 미치는 영향 (시험 2)Table 3 Effects of Herbal Medicines on Productivity of Laying Hens (Test 2)

처리구(%) Treatment Zone (%) 산란율Spawn rate 난중Lanzhou 산란량Scattering 사료섭취량Feed intake 사료요구율 (feed/egg)Feed rate (feed / egg) (%, 헨데이)(%, Henday) (g)(g) (g/수/1일)(g / Wed / 1 day) (g/1일)(g / 1 day) 00 82.8582.85 68.668.6 56.856.8 124.0124.0 2.1812.181 0.050.05 83.4383.43 69.169.1 57.657.6 123.4123.4 2.1422.142 0.100.10 83.5883.58 69.469.4 58.058.0 125.0125.0 2.1562.156 0.200.20 84.8584.85 68.868.8 58.458.4 128.5128.5 2.2032.203 SEMSEM 0.400.40 0.290.29 0.390.39 0.810.81 0.020.02

표 4 한약재의 급여가 산란계의 계란품질에 미치는 영향 (시험 2)Table 4 Effect of Herbal Supplementation on Egg Quality of Laying Hens (Test 2)

처리구(%) Treatment Zone (%) 난각강도Eggshell strength 난각두께Eggshell thickness 난백고Egg white 호유닛 Ho Unit 난황색도 Egg yolk (kg/cm2)(kg / cm2) (㎛)(Μm) (mm)(mm) 00 4.894.89 332332 7.157.15 81.481.4 7.47.4 0.050.05 5.095.09 349349 7.197.19 81.481.4 7.57.5 0.100.10 4.994.99 335335 7.157.15 81.581.5 7.97.9 0.200.20 4.754.75 343343 7.187.18 81.281.2 7.67.6 SEMSEM 0.100.10 2.852.85 0.120.12 0.780.78 0.070.07

1-5-4. 병리학적 조사1-5-4. Pathological investigation

사망한 닭의 간장과 신장의 조직을 닭이 죽은 뒤 잘라내고 10% NBF에 넣어 4℃에서 하루 동안 둔다. H&E 염색 후 병리학적인 변화를 관찰한다.The liver and kidney tissue of the dead chicken is cut off after the chicken dies and placed in 10% NBF for 1 day at 4 ° C. Observe pathological changes after H & E staining.

1-5-5. 병리학적 조사 결과 1-5-5. Pathological findings

1) 간장1) soy sauce

오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 투여군과 비투여군의 간은 모두 정상소견을 보이고 있다. 정상적인 central vein과 portal vein 주변으로 괴사 소견 및 울혈 소견이 관찰되지 않는다(4ab).The livers of the o medium (50%), rhubarb (30%), and Omija (20%) and non-administered groups were all normal. Necrosis and congestion were not observed around normal central vein and portal vein (4ab).

2) 신장2) height

오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 투여군과 비투여군의 간은 모두 정상소견을 보이고 있다. 신장의 vein주변의 근위곡세뇨관과 원위곡세뇨관이 정상적으로 관찰된다(5ab). 5b의 오른편으로 보이는 부분은 medullary cone로써 정상소견임. 중간 중간에 진하게 보이는 부분은 renal corpuscle로 이 또한 정상 소견임. 따라서 약제는 신체 장기에서 독성을 보이지 않는 안전한 조성인 것으로 보임. 약재 투여군과 비투여군에서 모두 이상조직소견이 발견되지 않음. The livers of the o medium (50%), rhubarb (30%), and Omija (20%) and non-administered groups were all normal. Proximal and distal tubules around the vein of the kidney were normally observed (5ab). The right side of 5b is normal as a medullary cone. The darker part in the middle is the renal corpuscle, which is also normal. Therefore, the drug appears to be a safe composition that does not show toxicity in body organs. No abnormal tissue findings were found in both the drug and non-administrative groups.

사료조성물 예 1. (표 1 참조)Feed composition example 1. (See Table 1)

실시예 1-2의 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 조추출물..100 mgCrude (50%), rye (30%) and Schisandra chinensis (20%) crude extracts of Example 1-2. 100 mg

실시예 1-1의 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 분말......100 mgOmega (50%), rhubarb (30%) and Omija (20%) powders of Example 1-1 ... 100 mg

실시예 1-3의 β-글루칸(β-glucan) 함유 추출물.........0.7 mgΒ-glucan-containing extract of Examples 1-3 ... 0.7 mg

실시예 1-4의 효모 배양물(yeast culture)................24 mgYeast culture of Examples 1-4 ... 24 mg

비타민 E..............................................0.7 mgVitamin E ........................................ 0.7 mg

L-카르니틴............................................0.7 mgL-Carnitine ......................................... 0.7 mg

제제예Formulation example 1. 주사제제의 제조 1. Preparation of Injection

실시예 1-2의 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 조추출물..100 ㎎Crude extract of Example 1-2 (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%). 100 mg

소디움 메타비설파이트................................3.0 ㎎Sodium metabisulfite .................. 3.0 mg

메틸파라벤...........................................0.8 ㎎Methylparaben ...................................... 0.8 mg

프로필파라벤.........................................0.1 ㎎Propylparaben ......................................... 0.1 mg

주사용 멸균증류수...................................적량Sterile Distilled Water for Injection ...

상기의 성분을 혼합하고 통상의 방법으로 최종 부피가 2㎖이 되도록 제조한 후, 2㎖용량의 앰플에 충전하고 멸균하여 주사제를 제조한다.The above ingredients are mixed and prepared in a conventional manner to have a final volume of 2 ml, and then filled into 2 ml ampoules and sterilized to prepare an injection.

제제예Formulation example 2.  2. 환제의Pilled 제조 Produce

실시예 1-2의 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 분말..120㎎Omega (50%), rhubarb (30%) and Omija (20%) powders of Example 1-2.

옥수수 전분..........................................100㎎Corn starch ... 100 mg

멸균증류수...........................................적량Sterilized Distilled Water ...............

상기의 성분을 혼합하고, 통상의 환제 제조방법으로 0.3cm 지름으로 제환하여 환제를 제조한다.The above components are mixed and refilled in a 0.3 cm diameter by a conventional pill manufacturing method to prepare pills.

제제예Formulation example 3. 정제의 제조 3. Preparation of Tablets

실시예 1-2의 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 분말..120㎎Omega (50%), rhubarb (30%) and Omija (20%) powders of Example 1-2.

유당.................................................100 ㎎Lactose ... 100 mg

전분.................................................100 ㎎Starch ..................... 100 mg

스테아린산 마그네슘....................................적량Magnesium Stearate ...............

통상의 정제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 타정하여 정제를 제조한다.A tablet is prepared by mixing and tableting the above components according to a conventional tablet manufacturing method.

제제예Formulation example 4. 캡슐제의 제조 4. Preparation of Capsules

실시예 1-2의 오매(50%), 황련(30%) 및 오미자(20%) 조추출물..100 ㎎Crude extract of Example 1-2 (50%), rhubarb (30%) and Schisandra chinensis (20%). 100 mg

유당..................................................50 ㎎Lactose ... .50 mg

전분..................................................50 ㎎Starch ..................... .50 mg

탈크...................................................2 ㎎Talc .................. ..2 mg

스테아린산마그네슘.....................................적량Magnesium stearate .....................................

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.According to a conventional capsule preparation method, the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.

이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 따른 오매, 황련 및 오미자 분말 또는 추출물을 포함하는 동물 사료용첨가제조성물은 독성 및 내성이 적고 항균 활성을 갖고 있어, 항균효과 또는 면역 증진 효과로 인한 농가 소득 증대에 기여할 수 있다.As described above, the animal feed additive composition comprising the ume, rhubarb and schisandra chinensis powder or extract according to the present invention is less toxic and resistant and has antimicrobial activity, thus contributing to the increase of farm income due to the antimicrobial or immune enhancing effect. Can be.

Claims (7)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 오매, 황련 및 오미자의 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 것을 특징으로 하는 항균 활성이 있는 동물 사료첨가용조성물에 있어서,In the animal feed composition having an antimicrobial activity, characterized in that the mixed extract of maeja, rhubarb and Schisandra chinensis as an active ingredient, 상기 오매, 황련 및 오미자는 중량비가 2~5 : 1~3 : 1~2 이고,The mae, halyeon and Schisandra chinensis has a weight ratio of 2 to 5: 1 to 3: 1, 2, 상기 추출물은 C₁내지 C₄의 저급 알콜을 용매로 하되,The extract is a solvent of a lower alcohol of C₁ to C₄, 구연산, 후말산, 아디핀산, 젖산, 사과산, 인산나트륨, 인산칼륨, 산성피로인산염, 폴리인산염, 폴리페놀, 카테친(catechin), 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물(rosemary extract), 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 피틴산으로 구성되는 그룹에서 선택되는 1종 이상의 천연 항산화제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 항균 활성이 있는 동물 사료첨가용조성물.Citric acid, fumaric acid, adipic acid, lactic acid, malic acid, sodium phosphate, potassium phosphate, acid pyrophosphate, polyphosphate, polyphenols, catechin, alpha-tocopherol, rosemary extract, vitamin C, green tea extract, Licorice extract, chitosan, phytic acid has an antimicrobial activity animal feed additive composition further comprises one or more natural antioxidants selected from the group consisting of. 전체 사료 100중량부에 대하여 0.01∼2중량부 첨가되는 것을 특징으로 하는 항균 활성이 있는 제4항 기재의 동물 사료첨가용조성물의 사용방법.A method of using the animal feed additive composition according to claim 4, wherein the composition is added in an amount of 0.01 to 2 parts by weight based on 100 parts by weight of the whole feed. 제4항에 있어서,The method of claim 4, wherein β-글루칸(β-glucan), 비타민 E, 효모 배양물(yeast culture) 및 L-카르니틴(L-carnitin) 중 어느 하나 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 항균 활성이 있는 동물 사료첨가용조성물.Animal feed additive composition having an antimicrobial activity, characterized in that it further comprises any one or more of β-glucan (β-glucan), vitamin E, yeast culture (yeast culture) and L-carnitin (L-carnitin). 삭제delete
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