KR100570195B1 - 초임계 유체 추출법에 의한 대나무추출물과유산균발효액을 함유하는 나노리포좀 함유 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 초임계 유체 추출법에 의한 대나무 추출물 및 유산균 발효액을 함유하는 나노리포좀을 조성물 총중량에 대하여 0.5~30.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 하는, 초임계 대나무 추출물 및 유산균 발효액 함유 나노리포좀을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따르면, 피부내 침투가 매우 용이하고, 피부탄력 증진, 피부의 수분량 개선에 따른 노화 방지효과 및 여드름 개선 효과가 모두 뛰어나면서도 매우 안정하고 무독성인, 초임계 대나무 추출물 및 복합유산균 발효액을 포함하는 나노리포좀 함유 화장료 조성물을 얻을 수 있다.

Description

초임계 유체 추출법에 의한 대나무추출물과 유산균발효액을 함유하는 나노리포좀 함유 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION CONTAINING NANOLIPOSOME WITH BAMBOO SAP EXTRACT USING SUPERCRITICAL FLUID EXTRACTION AND LACTIC ACID BACTERIA FERMENTED SOLUTION}

본 발명은 대나무추출물과 유산균발효액을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 특히 나노리포좀으로 안정화된, 초임계 유체 추출법에 의한 대나무추출물과 유산균발효액을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

리포좀은 일반적으로 인지질로 만들어진다. 이러한 인지질은 소수성의 긴 탄화수소 사슬과 친수성의 극성기로 이루어져 있으며, 소수성의 긴 탄화수소는 스핑고신 유도체 또는 글리세롤 유도체로 되어 있다. 다른 한쪽은 콜린, 에탄올 아민, 세린, 이노시톨 또는 글리세롤과 에스테르 결합을 이루고 있다. 인지질은 이러한 분자구조에 의해 물 매체 속에서 규칙적으로 배치된 구조, 즉 미셀이나 라멜라 구조를 형성한다.

리포좀은 또한 생체막과 그 구조가 비슷하여 막 모델계 및 생리학적 물질의 전달 매개체 등으로써 많이 연구되고 있으며(R. Sundler. D. Papahadjpovlos, Biochim. Biophys. Acta, 648.743(1981)), 여러 가지 피부 유효 성분을 포집시킴으로써 피부에 전달을 용이하게 하여 이들 유효 성분의 효과를 더욱 증대시키고자 로션이나 크림 같은 유화계 제품(특허출원 제 92-2287호)에 주로 사용되고 있다.

한편, 대나무 추출물은, 피부상태를 개선하는 데 유용하며, 피부 보습력을 증진시켜 피부의 건조함과 거칠어짐을 개선시키고, 티로시나제의 저해효과와 멜라닌 색소의 생성을 억제하며, 아토피 증상을 치료하는데 효과적으로 사용될 수 있다는 것이 종래 기술로 알려져 있다. 예를 들면, 일본공개특허 평5-124930호에는 피부 보습력, 피부의 건조함과 갈라짐을 효과적으로 개선시키는 대나무 추출물 함유 화장료에 대해 개시되어 있으며, 일본공개특허 평11-199501호에는 피부의 보습력을 증진시켜 피부의 건조함과 거칠어짐을 개선시키는, 대나무 추출물, 우레아, 항염증조성물을 혼합한 피부 외용제가 개시되어 있다.

또한, 한국공개특허 2001-007943호에는 티로시나제 활성을 저해하고 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 죽내피 추출물 함유 화장료가 개시되어 있고, 일본공개특허 평11-080011호에는 대나무 증류액을 함유하여 아토피 증상을 치료할 수 있는 욕용제가 개시되어 있다.

유산균 발효액은, 유효성분으로서 히아루론산과 젖산을 포함한 40여종의 효소 단백질, 지질, 유해균 사멸 기능 물질, 비타민 A, B1, B2, B6, B12, E, 아스코빈산, 무기질 등의 물질을 포함하는 것으로 분석되었다. 유산균 발효액을 화장료에 적용하는 경우, 고보습, 미백, 주름 억제 또는 완화, 여드름 개선 효과를 갖는 것으로 개시되어 있다(한국 특허 공고 제 10-2001-0302504호).

초임계 유체 추출 기술은, 특정 물질이 일정한 고압 및 고온(임계점)을 넘어서면 유체 상태가 되는데, 이 상태의 특정 물질을 용매로 사용하여 독성이나 잔류 물질 없이 인간에게 이로운 유효 성분만을 고순도로 분리, 정제해 내는 기술이다. 이러한 용매로서의 초임계 유체는, 임계온도(critical temperature, Tc)와 임계압력(critical pressure, Pc) 부근 또는 그 이상의 상태로 사용되며, 일반적으로 사용되는 초임계 유체로는 임계온도가 낮아 열에 불안정한 물질의 분리 정제에 용이한 이산화탄소를 들 수 있다. 이와 같은 초임계 유체 용매인 이산화탄소를 사용하면, 일반적인 용매 대신 인체에 무해한 이산화탄소를 이용하므로 피부에 무독성이고, 제품으로부터 쉽게 제거가능하므로 유기용매 추출시에 문제가 되는 환경오염을 방지할 수 있으며, 가격이 저렴하고, 추출과정을 최대한 단순화함으로써 산소차단, 미생물 오염방지 등의 생화학적 안정성을 얻을 수 있다.

본 발명은, 노화방지 및 여드름 개선 효과가 매우 탁월하면서도 피부내 침투가 용이한 나노리포좀으로 안정화된, 초임계 추출법에 의한 대나무 추출물과 유산균 발효액을 함유하는 화장료를 얻는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따르면, 초임계 유체 추출법에 의한 대나무 추출물 및 유산균 발효액을 함유하는 나노리포좀을 조성물 총중량에 대하여 0.5~30.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 하는, 초임계 대나무 추출물 및 유산균 발효액 함유 나노리포좀을 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.

본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명에 따른 대나무의 사용가능한 부위는 대나무 대의 내피 및 외피이다.

대나무 추출물을 제조하기 위해서는, 먼저 대나무를 건조시킨 후 분쇄하여 대나무 분말을 제조한다.

추출 용매로는, 다가알콜과 에탄올을 같은 질량비로 혼합한 후 교반하여 단일상이 되도록 하고, 이를 공용매로 사용한다. 다가알콜로는 1,3-부틸렌 글리콜을 사용하는 것이 피부 안정성 면에서 가장 바람직하다.

본 발명에 사용되는 초임계 유체 추출은 이산화탄소를 이용한 통상적인 방법으로 실시할 수 있으며, 구체적으로 다음과 같이 실시하는 것이 바람직하다.

분쇄된 대나무와 공용매를 혼합하여 교반한다. 혼합 비율은 대나무와 공용매를 1:1 ~ 1:3의 질량비로 혼합하는 것이 바람직하며, 1:2의 질량비로 혼합하는 것이 수율 면에서 가장 우수하다. 이어서, 이 혼합물을 초임계 추출조에 투입하고, 고압용 기체펌프를 이용하여 추출조에 이산화탄소를 공급한 후 압력을 높인다. 이어서, 추출조 내부의 온도를 40℃ 까지 승온시키고 이를 유지시킨다. 그리고나서, 이산화탄소를 추출조에 연속적으로 공급하면서, 출구 쪽에 부착된 압력조절기를 이용하여 추출물을 방출시킨다. 압력조절기의 온도를 조절하여, 방출물의 압력 및 온도강하로 인해 이산화탄소가 고체 드라이아이스로 전이되어 최종 출구쪽의 튜브가 막히는 현상을 방지한다. 방출된 추출물은 상압으로 감압되어 이산화탄소와 대나무 추출물이 분리되며, 이산화탄소는 대기로 방출되고 대나무 추출물은 회수된다.

본 발명에 따라 사용가능한 유산균은, 한국형 유산균 비피도 박테리아론검, 락토바실러스 카제이, 락토바실러스 애시고필러스 및 스트렙터커스 써모필러스로 이루어진 군에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 복합 유산균이다.

이러한 유산균 또는 복합유산균을 배양 배지에 접종하여 유산균 발효액을 얻는다. 배지로는 유산균 발효에 통상적으로 사용되는 배지를 사용할 수 있으며, 유장 함유 배지를 사용하는 것이 가장 바람직하다. 배양 조건은, pH 7.0~7.4, 배양 온도 36~37℃ 및 통기량 1VM의 조건을 유지하는 것이 바람직하다.

상기 배양으로 얻어진 발효액은 통상적인 방법으로 원심분리하여 고분자 침전물과 균체를 제거한 후 사용한다.

이어서, 상기 얻어진 초임계 대나무 추출물과 유산균 발효액을 크기가 20~80nm인 나노리포좀 내에 함유시켜, 상기 활성성분을 보호 및 안정화시키고 피부내 침투가 용이하도록 한다.

상기 나노리포좀 안에 대나무 추출물과 유산균 발효액을 내포시키기 위해서는, 레시틴, 알콜 및 항산화제로 구성되는 베시클에, 초임계 대나무 추출물과 유산균 발효액을 첨가하여 균질화시키고, 물을 첨가하여 균질화시킨 후, 이 혼합물을 고압유화장치에 통과시킨다.

상기 베시클은, 레시틴, 알콜 및 항산화제를 2~4:10~20:0.06~0.12의 중량비로 계량하여 혼합하고, 이를 80~85℃까지 가열하여 완전히 혼합함으로써 제조한다. 이 때, 레시틴은 나노리포좀의 총중량에 대하여 12~24 중량%, 바람직하게는 15~21 중량%가 되도록 한다. 이러한 비율로 혼합 및 첨가함으로써, 적절한 비용으로 안 정한 안정도를 갖는 베시클을 얻을 수 있다. 상기 항산화제로는 소듐 아스코빌 포스페이트, 부틸레이티드 하이드록시 톨루엔 등을 사용할 수 있다.

상기 초임계 대나무 추출물과 유산균 발효액의 혼합비는 1:0.17~5.7 인 것이 바람직하며, 1:0.67의 혼합비로 사용하는 것이 특히 바람직하다. 상기 비율을 벗어나는 경우에는 노화방지 효과 및 여드름 개선 효과가 미미하므로 1:0.17~5.7로 하는 것이 바람직하다. 이 때, 초임계 대나무 추출물과 유산균 발효액을 상기 비율로 미리 혼합한 후 이 혼합물을 베시클에 첨가하거나, 초임계 대나무 추출물과 유산균 발효액을 개별적으로 베시클에 첨가하되, 나노리포좀 내 혼합비율이 상기와 같이 되도록 첨가할 수 있다.

또한, 상기 초임계 대나무 추출물 및 유산균 발효액은, 이를 함유하는 나노리포좀의 총중량에 대하여 4~20 중량%의 양으로 포함되는 것이 바람직하고, 4~13 중량% 포함되는 것이 가장 바람직하다. 상기 함량이 4 중량% 미만인 경우에는 효과가 거의 없으며, 20 중량% 초과 시에는 안정도가 감소하므로 4~20 중량%가 바람직하다.

상기 공정을 통해, 나노리포좀의 폐쇄된 다층 구조 안에 유효성분인 초임계 대나무 추출물 및 유산균 발효액이 들어가 효과적으로 안정화됨으로써, 초임계 대나무 추출물 및 유산균 발효액의 효과가 극대화될 수 있다.

상기와 같이 제조된, 본 발명에 따른 초임계 대나무 추출물 및 유산균 발효액 함유 나노리포좀은, 에센스, 영양크림 등의 노화 방지와 관련된 모든 화장료에 첨가할 수 있으며, 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.5~30 중량%로 첨가하는 것이 바람직하다. 0.5 중량% 미만이면 뚜렷한 노화방지 효과를 기대할 수 없으며, 30 중량%를 초과하면 안정도에 문제가 생기고, 비용이 많이 들어 바람직하지 못하다.

이하 실시예 및 비교예, 제조예, 시험예는 본 발명을 더욱 상세하게 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 권리 범위가 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.

(실시예)

(초임계 대나무 추출물의 제조)

대나무의 내피 및 외피를 분쇄기로 직경 0.3cm 이하의 크기로 분쇄하였다. 또한, 동일한 질량의 1,3-부틸렌글리콜과 에탄올을 혼합한 후 교반시켜 단일상의 공용매를 제조하였다.

분쇄된 대나무와 공용매를 1:2의 질량비로 혼합하여 30분간 교반시킨 후, 대나무와 공용매 혼합물을 내부 용적 1.5ℓ의 초임계 추출조에 투입하고 추출조를 밀봉하였다. 고압용 기체펌프를 이용하여 추출조에 이산화탄소를 공급하고 압력을 높인 뒤, 추출조의 압력이 320기압에 달하면 이산화탄소의 공급을 중단하였다.

PID 온도제어기를 이용하여 추출조 외부를 감싸고 있는 열선을 이용하여 추출조 내부의 온도를 0.5℃/min 속도로 40℃ 까지 승온시켰다. 승온으로 인해 상승된 추출조의 압력은 추출조의 출구에 부착된 압력조절기를 이용하여 이산화탄소를 일부 배출하며 압력을 320기압으로 유지시켰다. 또한, 추출조의 온도와 압력을 40℃, 320기압으로 50분간 유지시켰다.

고압용 기체 펌프를 재가동하여 20ℓ/min의 유량으로 이산화탄소를 추출조에 연속적으로 공급하였다. 동시에 출구쪽에 부착된 압력조절기를 이용하여 추출물 을 방출시키되, 추출조의 압력을 320기압, 온도를 40℃로 유지시켰다. 방출된 추출물은 상압으로 감압되어 이산화탄소와 대나무 추출물이 분리되었고 이산화탄소는 대기로 방출되었다. 분리된 대나무 추출물을 유리 포집기를 이용하여 회수하였다. 상기 공정 중, 추출조 내부의 온도를 0.5 ℃/min 속도로 40℃ 까지 승온시키는 공정으로부터 분리된 대나무 추출물을 회수하는 공정까지를 수회 반복하여 12시간 동안 수행 후, 추출을 종료하여 추출물을 얻었다(이후 S1이라 함).

(복합 유산균 발효액의 제조)

한국형 유산균 비피도 박테리아론검(Bifidobacteria longum : KFCC 10870)과 락토바실러스 애시고필러스(Lactobacillus acidophilus : KCTC 3170)로 이루어진 복합 균주를, 유장 10%, 글루코스 1%, 효모 추출물 0.5%, 물 88.5%를 함유하는 유장(Whey) 함유 배지에 접종하였다. 배지의 pH는 7.2로 유지하고, 배양시 온도는 36℃, 통기량은 1VM로 유지하면서 12시간동안 배양하였다. 이어서, 얻어진 발효액을 6,000rpm으로 10분간 원심분리하여 고분자 침전물과 균체를 제거함으로써 유산균 발효액을 얻었다(이후, S2라 함).

(제조예 1)

초임계 대나무 추출물 및 복합 유산균 추출물 함유 화장료의 제조

하기 표 1의 조성을 사용하여 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 크림을 제조하였다.

성분	함량(중량%)	함량(중량%)
A	초임계대나무추출물(S1)	6
	복합유산균발효액(S2)	4
	정제수	잔량
	1.3 부틸렌글라이콜	10
	산탄검	0.15
B	방부제	적량
	세틸옥타노에이트	7
	폴리글리세릴-3 메칠글루코사이드	3
	디메치콘	3
	향	적량
합계		100

(비교제조예 1)

초임계 대나무 추출물 함유 화장료의 제조

초임계 대나무 추출물 및 복합 유산균 발효액을 함께 사용하는 대신 초임계대나무추출물(S1)만을 사용하는 것을 제외하고는 제조예 1과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(비교제조예 2)

복합 유산균 발효액 함유 화장료의 제조

초임계 대나무 추출물 및 복합 유산균 발효액을 함께 사용하는 대신 복합 유산균 발효액(S2)만을 사용하는 것을 제외하고는 제조예 1과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(시험예 1)

피부탄력 증진효과

온도 22-24℃, 상대습도 55% 조건에서 20세 이상의 건강한 여성 30명(평균연령 28.5세)을 각각 10명씩 3그룹으로 나누고, 제조예 1 및 비교제조예 1, 2의 화장료 조성물을 눈가를 중심으로 12주간 도포(2회/일)한 후, 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다.

시험 결과는 하기 표 1에 SEM 575의 각 시험 그룹별 평균값인 △R5값[R5(12주)-R5(0주)] 값으로 기재하였는데, R5 값은 실탄성 계수를 나타내는 값으로 1에 가까워지면 보다 탄력도가 우수함을 나타낸다.

또한 개선도는 하기 식에 따라 계산하였다.

개선도(%) = ( △R5 / 도포전 ) X 100

(시험예 2)

피부 수분량 개선 효과

온도 22-24℃, 상대습도 55%의 공기의 흐름이 없는 실내에서 건강한 여성 30명(평균연령 28.5세)을 각각 10명씩 3그룹으로 나누고, 제조예 1 및 비교제조예 1, 2의 화장료 조성물을 눈가를 중심으로 얼굴 전체에 6주간 도포(2회/일)하게 하였다. Skicon-200(IBS Co., Japan)을 이용하여, 도포 전, 후에 볼 부위의 수분량을 측정하여 보습효과의 지속성을 측정하였다. 그 결과를 하기 표 2에 각 시험그룹별 평균값으로 나타내었다.

개선도는 하기 식에 따라 계산하였다.

(시험예 3)

여드름 개선 효과

고체평판배지에 여드름균(Streptomyces bikiniensis)을 도말하였다. 이어서, 제조예 1 및 비교제조예 1, 2의 화장료 조성물을 정중앙에 20㎕씩 떨어뜨려 자연건조시켰다. 이를 37℃에서 24시간 배양하여, 생성된 억제환의 크기를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

	피부탄력 증진효과 (개선도%)	피부수분량 (개선도%)	여드름개선효과 억제 환 지름 (mm)
제조예 1	8.0	12.0	3.5
비교제조예 1	3.2	6.0	0.5
비교제조예 2	2.5	3.5	1.5

상기 표 2에 따르면, 초임계 대나무 추출물과 복합 유산균 추출물을 혼합하여 사용할 경우, 단독 사용하는 경우에 비해 피부탄력 증진, 피부수분량 개선, 여드름 개선 효과가 탁월함을 알 수 있다.

(제조예 2)

하기 표 3의 조성을 사용하여 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 크림을 제조하였다.

성분		함량(중량%)
A	초임계대나무추출물(S1)	17
	복합유산균발효액(S2)	3
	정제수	잔량
	글리세린	10
	프로필렌글리콜	5
	카보머	0.15
B	방부제	적량
	세틸옥타노에이트	7
	폴리글리세릴-3 메칠글루코사이드	3
	디메치콘	3
	마카다미아넛오일	2
	향	적량
	합계	100

(제조예 3)

초임계 대나무 추출물(S1)을 15 중량%, 복합 유산균 발효액(S2)을 5 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 2과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(제조예 4)

초임계 대나무 추출물(S1)을 12 중량%, 복합 유산균 발효액(S2)을 8 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 2과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(제조예 5)

초임계 대나무 추출물(S1)을 10 중량%, 복합 유산균 발효액(S2)을 10 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 2과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(제조예 6)

초임계 대나무 추출물(S1)을 5 중량%, 복합 유산균 발효액(S2)을 15 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 2과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(제조예 7)

초임계 대나무 추출물(S1)을 3 중량%, 복합 유산균 발효액(S2)을 17 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 2과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(비교제조예 3)

초임계 대나무 추출물(S1)을 18 중량%, 복합 유산균 발효액(S2)을 2 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 2과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(비교제조예 4)

초임계 대나무 추출물(S1)을 2 중량%, 복합 유산균 발효액(S2)을 18 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 2과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

(시험예 4)

피부탄력 증진효과

제조예 2 내지 7 및 비교제조예 3, 4의 화장료 조성물에 대하여 여성 40명(평균연령 28.0세)(5명씩 8그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 1과 동일한 방법으로 피부탄력을 측정 및 평가하였다. 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.

	도포전	도포후	피부탄력 증강 효과(△R5)	개선도(%)
비교제조예 3	0.73	0.74	0.01	1.4
제조예 2	0.74	0.79	0.05	6.8
제조예 3	0.74	0.86	0.09	16.2
제조예 4	0.72	0.87	0.15	20.8
제조예 5	0.71	0.85	0.14	19.7
제조예 6	0.74	0.85	0.09	14.9
제조예 7	0.72	0.76	0.04	5.6
비교제조예 4	0.74	0.75	0.01	1.3

(시험예 5)

각질층의 수분 손실량 측정

22~24℃, 상대습도 55%, 공기의 흐름이 없는 실내에서 건강한 여성 40명(평균연령 28.0세)을 대상으로 5명씩 8그룹으로 나누어, 제조예 2 내지 7 및 비교제조예 3, 4를 눈가를 중심으로 얼굴 전체에 도포하게 하였다. 도포 1시간, 2시간, 4시간 및 6시간 후 TEWAMETER TM 210(C+K electronic GmbH. Germany)을 이용하여 경표피 수분 손실량(TEWL, Transepidermal Water Loss)을 볼 부위에서 측정하였다.

실험 결과는 하기 표 5에 나타내었다.

	1시간 경과 후	2시간 경과 후	4시간 경과 후	6시간 경과 후
비교제조예 3	37 ±1.0	33 ±1.0	27 ±1.0	23 ±1.0
제조예 2	35 ±1.0	30 ±1.0	22 ±1.0	17 ±1.0
제조예 3	38 ±1.0	24 ±1.0	16 ±1.0	11 ±1.0
제조예 4	36 ±1.0	20 ±1.0	13 ±1.0	9 ±1.0
제조예 5	36 ±1.0	21 ±1.0	15 ±1.0	11 ±1.0
제조예 6	35 ±1.0	26 ±1.0	18 ±1.0	12 ±1.0
제조예 7	37 ±1.0	29 ±1.0	24 ±1.0	17 ±1.0
비교제조예 4	37 ±1.0	32 ±1.0	30 ±1.0	25 ±1.0

(시험예 6)

피부 수분량 측정

제조예 2 내지 7 및 비교제조예 3, 4의 화장료 조성물에 대하여 여성 40명(평균연령 28.0세)(5명씩 8그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 2와 동일한 방법으로 피부수분량을 측정 및 평가하였다. 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.

	시험전	도포 6주후	개선도(%)
비교제조예 3	625±10	670±10	7.2
제조예 2	630±10	715±10	13.4
제조예 3	635±10	785±10	23.6
제조예 4	640±10	832±10	30.0
제조예 5	635±10	820±10	29.1
제조예 6	640±10	790±10	23.4
제조예 7	620±10	700±10	12.9
비교제조예 4	630±10	630±10	6.3

(시험예 7)

여드름 개선 효과

제조예 2 내지 7 및 비교제조예 3, 4의 화장료 조성물에 대하여 시험예 3과 동일한 방법으로 시험 및 평가하였다. 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.

	억제 환 지름 (mm)
비교제조예 3	2
제조예 2	10
제조예 3	18
제조예 4	20
제조예 5	17
제조예 6	15.5
제조예 7	9
비교제조예 4	1

상기 표 4 내지 7에 따르면, 상기 초임계 대나무 추출물과 유산균 발효액은 1:0.17~5.7의 혼합비로 사용할 경우에 피부탄력 효과, 보습효과, 여드름균에 대한 생장저지 효과가 뚜렷하고, 경표피 수분 손실량도 적어 바람직하다는 것을 알 수 있다.

(베시클의 제조)

레시틴, 알콜 및 항산화제를 하기 표 1의 비율로 계량하여 80~85℃까지 가열하면서 완전히 용해, 혼합시켜 베시클을 제조하였다(이후, S3이라 함).

(초임계대나무추출물 및 복합유산균발효액을 안정화시킨 나노리포좀의 제조)

상기에서 얻어진 베시클(A)에 초임계대나무추출물(B)와 복합유산균발효액(C)을 하기 표 8과 같은 비율로 서서히 첨가하면서 균질화시켰다. 이어서, 정제수(D)를 하기 표 8의 비율로 혼합시키면서 균질화시켰다. 이를 고압균질화기 (Microfluidic Corp제, Microfludizer 110T 90014)를 사용하여 1,000bar의 압력으로 15ℓ/시간의 속도로 2회 처리하여 균질화시킨 후, 서서히 냉각시켜 나노리포좀을 얻었다(이후, S4라 함).

	성 분	중량%
A	레시틴 알코올 소듐 아스코빌 포스페이트 부틸레이티드 하이드록시 톨루엔	3.0 15.0 0.05 0.04
B	초임계대나무추출물(S1)	6
C	복합유산균발효액(S2)	4
D	정제수	잔량
	합계	100

(제조예 8)

초임계대나무추출물 및 복합유산균발효액을 안정화시킨 나노리포좀 함유 화장료의 제조

하기 표 9의 조성을 사용하여 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 크림을 제조하였다.

(비교제조예 5)

초임계대나무추출물 및 복합유산균발효액 함유 화장료의 제조

제조예 8의 화장료 조성물과 동량의 초임계대나무추출물 및 복합유산균발효 액이 함유되도록, 하기 표 9의 조성을 사용하여 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 크림을 제조하였다.

(비교제조예 6)

베시클 함유 화장료의 제조

제조예 8의 화장료 조성물과 동량의 베시클이 함유되도록, 하기 표 9의 조성을 사용하여 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 크림을 제조하였다.

(비교제조예 7)

베시클 및 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액 함유 화장료의 제조

제조예 8의 화장료 조성물과 동량의 초임계대나무추출물, 복합유산균발효액 및 베시클이 함유되도록, 하기 표 9의 조성을 사용하여 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 크림을 제조하였다.

(비교제조예 8)

무함유 화장료의 제조

초임계대나무추출물, 복합유산균발효액 및 베시클이 함유되지 않도록, 하기 표 9의 조성을 사용하여 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 크림을 제조하였다.

성 분	제조예 8	비교제조예 5	비교제조예 6	비교제조예 7	비교제조예 8
S1 및 S2 (S1:S2=1:0.67)	-	3.0	-	3.0	-
S3	-	-	5.43	5.43	-
S4	30.0	-	-	-	-
히아루론산	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
글리세린	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
세틸옥타노에이트	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
글리세릴 스테아레이트	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
폴리글리세릴-3 메칠 글루코스 디스테아레이트	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5
사이클로메치콘	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
산탄검	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
방부제	적량	적량	적량	적량	적량
향	적량	적량	적량	적량	적량
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
계	100.0	100.0	100.0	100.0	100.0

(시험예 8)

피부탄력 증진 효과

제조예 8 및 비교제조예 5 내지 8의 화장료 조성물에 대하여 여성 30명(6명씩 5그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 1과 동일한 방법으로 피부탄력을 측정 및 평가하였다. 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다.

	도포전	도포후	피부탄력 증강효과(△R5)	개선도(%)
제조예 8	0.72	0.93	0.21	29.2
비교제조예 5	0.74	0.77	0.03	4.1
비교제조예 6	0.73	0.79	0.06	8.2
비교제조예 7	0.73	0.84	0.11	15.1
비교제조예 8	0.74	0.75	0.01	1.4

상기 표 10에 따르면, 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액을 포함하는 나노리포좀 함유 화장료(제조예 8)를 사용한 경우의 피부탄력은, 비교제조예 8에 비해 27.8%, 비교제조예 7에 비해 14.1%, 비교제조예 6에 비해 21.0%, 비교제조예 5에 비해 25.1% 증가했다. 따라서, 본 발명에 따른 초임계 대나무 추출물과 복합 유산균 발효액을 안정화시킨 나노리포좀은, 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액, 베시클을 그대로 사용한 것보다 피부탄력을 효과적으로 증진시키는 것을 알 수 있다.

(시험예 9)

각질층의 수분 손실량 측정

제조예 8 및 비교제조예 5 내지 8의 화장료 조성물에 대하여 여성 30명(평균연령 28.5세)(6명씩 5그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 2와 동일한 방법으로 수분 손실량을 측정 및 평가하였다. 그 결과를 하기 표 11에 나타내었다.

	1시간 경과	2시간 경과	4시간 경과	6시간 경과
제조예 8	37 ±1.0	18 ±1.0	14 ±1.0	8 ±1.0
비교제조예 5	36 ±1.0	30 ±1.0	23 ±1.0	22 ±1.0
비교제조예 6	36 ±1.0	29 ±1.0	20 ±1.0	16 ±1.0
비교제조예 7	36 ±1.0	22 ±1.0	17 ±1.0	13 ±1.0
비교제조예 8	38 ±1.0	33 ±1.0	26 ±1.0	24 ±1.0

상기 표 11에서, 본 발명에 따른 초임계대나무추출물 및 복합유산균 발효액을 포함하는 나노리포좀 함유 화장료(제조예 8)는, 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액, 베시클을 그대로 사용한 것보다, 각질층의 수분유지력의 지표인 경표피 수분 손실량이 6시간 경과 후 현저히 개선됨을 알 수 있었다.

(시험예 10)

피부 수분량 개선 효과

제조예 8 및 비교제조예 5 내지 8의 화장료 조성물에 대하여 여성 30명(6명씩 5그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 2와 동일한 방법으로 피부 수 분량 개선 효과를 측정 및 평가하였다.

그 결과를 하기 표 12에 나타내었다

	시험전	도포 6주후	개선도(%)
제조예 8	630 ±10	910±10	44.4
비교제조예 5	625±10	665±10	6.4
비교제조예 6	630±10	705±10	11.9
비교제조예 7	625±10	755±10	20.8
비교제조예 8	630±10	645±10	2.4

상기 표 12에 따르면, 본 발명에 따른 초임계대나무추출물 및 복합유산균 발효액을 포함하는 나노리포좀 함유 화장료(제조예 8)는 피부 수분 함유량이 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액, 베시클을 그대로 사용한 것보다 입자 크기가 작아 피부 침투가 용이하며, 피부보습 효과의 지속성을 증대시킨다는 것을 알 수 있었다.

(시험예 11)

여드름 개선 효과

제조예 8 및 비교제조예 5 내지 8의 화장료 조성물을 사용한 것을 제외하고는 시험예 3과 동일한 방법으로 여드름균의 억제효과를 실험하였다.

시험 결과를 하기 표 13에 나타내었다.

	억제 환 지름 (mm)
제조예 8	29.5
비교제조예 5	5.0
비교제조예 6	4.5
비교제조예 7	11.0
비교제조예 8	1.0

상기 표 13에 따르면, 본 발명에 따른 초임계대나무추출물과 복합유산균 발 효액을 포함하는 나노리포좀 함유 화장료(제조예 8)는 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액, 베시클을 그대로 사용한 것보다 여드름균 억제효과가 뛰어남을 알 수 있었다.

(시험예 12)

제형의 안정성 시험

제조예 8 및 비교제조예 5 내지 8을 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 담아 12주동안 보관한 시료, 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관한 시료, -10℃에서 50℃를 순환하는 순환 챔버에 2주동안 보관한 시료에 대하여 분리 정도 및 변색 정도를 비교 측정하였다. 제품 분리 및 변색 정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가한 결과를 하기 표 14에 나타내었다.

제품 변색 평가 기준

0: 변화 없음 1: 극히 조금 분리(변색)

2: 조금 분리(변색) 3: 조금 심하게 분리(변색)

4: 심하게 분리(변색) 5: 극히 심하게 분리(변색)

	제조예 8	비교제조예 5	비교제조예 6	비교제조예 7	비교제조예 8
45℃	0	1	1	1	0
4℃	0	0	0	0	0
순환	0	1	0	1	0

상기 표 14에 따르면, 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액, 베시클을 그대로 사용한 화장료는 45℃, 순환 시험에서 변색이나 분리 증상이 나타나지만, 본 발명에 따른 초임계대나무추출물과 복합유산균 발효액을 포함하는 나노리포좀 함유 화장료(제조예 8)는 변색이나 분리 증상이 나타나지 않아 안정함을 알 수 있었다.

(제조예 9)

S4를 0.5 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 8과 동일한 방법으로 화장료 조성물을 제조하였다.

(비교제조예 9)

S4를 0.3 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 8과 동일한 방법으로 화장료 조성물을 제조하였다.

(비교제조예 10)

S4를 35 중량% 사용하는 것을 제외하고는 제조예 8과 동일한 방법으로 화장료 조성물을 제조하였다.

(시험예 13)

피부탄력 증진 효과

제조예 8, 9 및 비교제조예 9, 10의 화장료 조성물에 대하여 여성 20명(5명씩 4그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 1과 동일한 방법으로 피부 탄력을 측정 및 평가하였다.

그 결과를 하기 표 15에 나타내었다.

	S4 함량(%)	도포전	도포후	피부탄력 (△R5)	개선도(%)
비교제조예 9	0.3	0.73	0.76	0.03	4.1
제조예 9	0.5	0.74	0.82	0.08	10.8
제조예 8	30	0.72	0.93	0.21	29.2
비교제조예 10	35	0.71	0.92	0.21	29.6

(시험예 14)

각질층의 수분 손실량 측정

제조예 8, 9 및 비교제조예 9, 10의 화장료 조성물에 대하여 여성 20명(5명씩 4그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 5와 동일한 방법으로 각질층의 수분 손실량을 측정 및 평가하였다.

실험 결과를 하기 표 16에 나타내었다.

	S4함량(%)	1시간 경과	2시간 경과	4시간 경과	6시간 경과
비교제조예 9	0.3	37 ±1.0	28 ±1.0	20 ±1.0	18 ±1.0
제조예 9	0.5	36 ±1.0	26 ±1.0	19 ±1.0	12 ±1.0
제조예 8	30	37 ±1.0	18 ±1.0	14 ±1.0	8 ±1.0
비교제조예10	35	36 ±1.0	17 ±1.0	10 ±1.0	7 ±1.0

(시험예 15)

피부 수분량 개선 효과

제조예 8, 9 및 비교제조예 9, 10의 화장료 조성물에 대하여 여성 20명(5명씩 4그룹)을 대상으로 하는 것을 제외하고는 시험예 2과 동일한 방법으로 피부 수분량 개선 효과를 측정하였다.

그 결과를 하기 표 17에 나타내었다.

	시험전	도포 6주후	개선도(%)
비교제조예 9	640±10	665±10	4.03
제조예 9	620±10	685±10	10.5
제조예 8	630±10	910±10	44.4
비교제조예 10	635±10	925±10	45.7

(시험예 16)

여드름 개선 효과

제조예 8, 9 및 비교제조예 9, 10의 화장료 조성물을 사용한 것을 제외하고는 시험예 3과 동일한 방법으로 여드름균의 억제효과를 시험 및 평가하였다.

시험 결과를 하기 표 18에 나타내었다.

	억제 환 지름 (mm)
비교제조예 9	2.5
제조예 9	7.0
제조예 8	29.5
비교제조예 10	32.0

(시험예 17)

제형의 안정성 시험

제조예 8, 9 및 비교제조예 9, 10의 화장료 조성물을 사용한 것을 제외하고는 시험예 12와 동일한 방법으로 제형의 안정성을 시험 및 평가하였다.

시험 결과를 하기 표 19에 나타내었다.

	비교제조예 9	제조예 8	제조예 9	비교제조예 10
45℃	0	0	0	2
4℃	0	0	0	1
순환	0	0	0	3

상기 표 15 내지 19에 따르면, 초임계대나무추출물 및 복합유산균 발효액을 포함하는 나노리포좀을 화장료 총 중량에 대하여 0.5 중량% 미만으로 함유하는 경 우에는 노화방지 및 여드름 개선 효과가 너무 미미하고, 30.0 중량%를 초과하여 함유하는 경우에는 제형이 불안정하여 분리 및 변색이 일어나므로, 0.5 ~ 30.0 중량% 가 바람직하다는 것을 알 수 있었다.

(제조예 10)

하기 표의 조성으로 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 에센스를 제조하였다.

배합성분	중량%
나노리포좀	10.0
1.3-부틸렌글리콜	3.0
글리세린	1.0
폴리아크릴아미드	1.0
토코페릴아세테이트	2.0
싸이클로메치콘	1.0
쉐어버터	1.0
산탄검	0.1
하이드로제네이티드	0.1
트리(카프릴.카프린산)글리세린	1.0
스쿠알란	1.0
세테아릴알코올	1.0
아라키딜알코올/베헤닐알코올/아라-키딜글루코사이드	2.0
글리세릴스테아레이트 피이지-100 스테아레이트	1.0
글리세릴스테아레이트	1.0
EDTA-2NA	0.02
방부제	적량
향	적량
정제수	잔량
합계	100

(제조예 11)

하기 표의 조성으로 통상적인 화장료의 제조 방법에 따라 영양크림을 제조하였다.

배합성분	중량부
나노리포좀	10.0
세테아릴알콜	1.5
글리세릴스테아레이트	1.0
글리세릴스테아레이트 피이지-100 스테아레이트	1.0
폴리글리세릴-3 메칠글루코스 디스테아레이트	1.5
트리(카프릴.카프린산)글리세린	4.0
세틸옥타노에이트	3.0
하이드로제네이티드폴리데센	2.0
디메치콘	0.5
싸이클로메치콘	3.0
토코페롤아세테이트	1.0
글리세린	5.0
1,3-부틸렌글리콜	5.0
폴리아크릴아미드	1.0
히아루론산복합추출물	1.0
EDTA-2NA	0.02
방부제	적량
향	적량
정제수	잔량
합계	100

본 발명에 따르면, 피부내 침투가 매우 용이하고, 피부탄력 증진, 피부의 수분량 개선에 따른 노화 방지효과 및 여드름 개선 효과가 모두 뛰어나면서도 매우 안정하고 무독성인, 초임계 대나무 추출물 및 복합유산균 발효액을 포함하는 나노리포좀 함유 화장료 조성물을 얻을 수 있다.

Claims (2)

1. 초임계 유체 추출법에 의한 대나무 추출물 및 유산균 발효액을 함유하는 나노리포좀을 조성물 총중량에 대하여 0.5~30.0 중량% 함유하고, 상기 유산균은, 한국형 유산균 비피도 박테리아론검, 락토바실러스 카제이, 락토바실러스 애시고필러스 및 스트렙터커스 써모필러스로 하는, 초임계 대나무 추출물 및 유산균 발효액 함유 나노리포좀을 함유하는 화장료 조성물.
2. 삭제