상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에서는,
장생도라지 추출물을 포함하는 간보호 활성 및 인지기능 개선활성을 가지는 기능성 주류를 제공한다.
본 발명의 기능성 주류는 보조생약 추출물을 더 포함하는 것이 바람직하며,상기 보조 생약추출물은 저령, 은행잎, 당귀, 산약, 천마, 천궁, 원지, 백작약, 백봉령, 백출, 계피 및 치자의 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추출물인 것이 바람직하다.
본 발명의 기능성 주류는 (a) 장생도라지 추출물 30∼40 중량부; 및 (b) 상기 장생도라지 추출물 30∼40 중량부에 대하여 저령 추출물 9∼11 중량부; 은행잎 추출물 9∼11 중량부; 당귀 추출물 5∼7 중량부; 산약 추출물 4∼6 중량부; 천마 추출물 3∼5 중량부; 천궁 추출물 5∼7 중량부; 원지 추출물 5∼7 중량부; 백작약 추출물 4∼6 중량부; 백봉령 추출물 2∼4 중량부; 백출 추출물 2∼4 중량부; 계피 추출물 2∼4 중량부; 및 치자 추출물 3∼5 중량부; 를 포함하는 보조생약 추출물 60 내지 70 중량부; 를 포함하는 것이 적합하다.
본 발명의 기능성 주류는 (a) 장생도라지 추출물 35 중량부; 및 (b) 상기 장생도라지 추출물 35 중량부에 대하여 저령 추출물 10 중량부; 은행잎 추출물 10 중량부; 당귀 추출물 6 중량부; 산약 추출물 5 중량부; 천마 추출물 4 중량부; 천궁 추출물 6 중량부; 원지 추출물 6 중량부; 백작약 추출물 5 중량부; 백봉령 추출물 3 중량부; 백출 추출물 3 중량부; 계피 추출물 3 중량부; 및 치자 추출물 4 중량부; 를 포함하는 보조생약 추출물 65 중량부; 를 포함하는 것이 가장 적합하다.
위와 같은 장생도라지 추출물 및 보조생약 추출물의 조성비율은 많은 실험결과를 토대로 얻어진 것이며, 그 하한치 비율보다 낮은 경우에는 기능성 주류의 생리활성이 급속히 감소하였으며 그 상한치보다 높은 경우에는 다른 성분의 약효가 감소되는 이유로 상승작용 및 생약조성물의 협동작용이 현저하게 떨어지는 문제점을 야기했다.
본 발명의 기능성 주류는 소주, 맥주, 위스키, 리큐르주, 진, 보드카 등의 알콜성 음료를 말하는 것이나, 리큐르주인 것이 바람직하다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명한다.
본 발명의 기능성 주류에 포함되는 조성물의 각 구성성분은 하기와 같다.
도라지는(길경 Platycodon grandiflorum A. DC)는 도라지과(Campanulaceae) 의 식물로 주근이 10 ∼ 15cm 내외이고 지름은 1 ∼ 3cm 이며 윗부분에는 불규칙한 줄기 자리가 있고 회갈∼유백색이며 세로 주름이 깊고, 가로로는 파목(皮目)과 주름이 있다. 질은 단단하나 비섬유성이어서 파절이 쉽고 약간의 냄새가 나며 맛은 아리다.(육창수 등, 현대 생약학, 서울, 학창사, 460-461, 1993) 이러한 도라지의 주요 약리성분은 트리테르펜계 사포닌(platycodin A, C, D, D2, D3)으로서 뿌리의 약 2%를 차지하며, 이 약리성분은 동물실험을 통하여 진해, 거담작용, 중추신경억제작용(진정, 진통, 해열효과), 급·만성 염증에 대한 함염증작용, 항궤양 및 위액분비억제작용, 혈관을 확장하여 혈압을 낮추는 항콜린작용, 혈당강하작용, 콜레스테롤 대사 개선작용 등이 있는 것으로 밝혀져 있다. 장생도라지는 20년근 이상의 도라지를 말하는 것으로, 그동안 도라지의 다양한 약리작용에도 불구하고, 장기간 재배가 어려웠으나, 최근 20년 이상의 도라지인 장생도라지를 재배할 수 있는 기술이 개발되어(이성호, "다년생 도라지재배법" 대한민국 특허 제045731호) 다량생산이 가능해졌다. 이러한 장생도라지는 2∼4년근의 일반도라지에 비해 약리작용과 생리활성효능이 우수하다.
저령(polyporus)은 잔나비걸상과(polyporaceae)의 균핵이 Alnus spp., Quercus spp., 등의 살아 있는 나무의 뿌리에 기생하여 자란 것으로 고르지 못한 덩어리 모양의 균핵이다. ergosterol 등의 sterol 성분을 함유하고 있으며, 이뇨, 소염작용이 있는 것으로 알려져 있다.
은행나무(Ginkgo biloba)는 낙엽 교목으로 지구상에서 존재하는 나무 중에서 가장 오래된 것으로 알려져 있으며 높이 60cm까지 자라며, 잎은 부채 모양으로 맥이진 모양으로 갈라진다. 은행잎에는 perpene lactone류의 징코라이드(ginkgolide) A, B, C, M, 빌로발라이드(bilobalide)와 플라본 글라이코사이드(flavone glycoside)류의 캠프페롤(kaempferol) 등의 성분이 함유된 것으로 알려져 있다.
당귀(當歸, Angelica gigiantis radix)는 미나리과(Umbelliferae)의 참당귀의 꽃피기전의 뿌리를 건조한 것이다. 굵고 짧은 주군에서 갈라저 난 여러개의 가지뿌리로 되어 있으며 주근의 윗쪽에는 줄기 및 잎의 잔기가 남아 있다. 성분은 purancoumarin계의 decursin을 주로 함유하고 있으며 빈혈, 활혈효과 있어 혈행장애에 의한 부인과 제질환에 쓰인다.
산약(山葯, Discoreae Rhizoma)은 마과(Dioscoreaceae)의 참마(Dioscorea japonica) 또는 마(Dioscorea batatas)의 뿌리줄기의 주피를 제거하고 그대로 또는 쪄서 말린 것이다. 원주형의 딱딱한 뿌리줄기로서 대부분 유백색-대황백색이고 주피가 버껴지지 않은 부분은 갈색이다. dioscin이라는 steroid saponin을 함유하고 있다.
천마(天麻, Gastrodiae Rhizoma)는 천마(Gastrodia elata, 난초과(Orchidaceae))의 덩이줄기이다. 바깥면은 엷은 황백색-황갈색이고 불규칙한 세로 주름과 돌림마디가 있다. 페놀 유도체인 gastrodin, vanillyl alcohol을 주성분으로 함유하고 있다.
천궁(川芎, Cnidii Rhizoma)는 미나리과(Umbelliferae)의 천궁(Cnidium officinale) 뿌리줄기를 그대로 또는 열탕에 데친것을 말한다. 불규칙한 덩어리를 이루고 때때로 세로로 잘라져 있으며 종단면의 가장자리는 고리지 않게 갈라지고 안쪽면은 회갈색-회백색으로 반투명이며 때로는 비어 있기도 하다. phthalides가 성분의 주축을 이루며 한방에서 진정, 진경 빈혈, 부인과 질환에 쓰인다.
원지(Polygalae Radix)는 원지과(Polygalaceae)의 원지(Polygala tenuifolia)의 뿌리로 가늘고 길며 구부러진 원주형의 성상을 갖고 있다. onjisaponin A-G 등의 triterpenoidal saponin을 주성분으로 함유하고 있다.
백복령(白茯笭, Hoellen)은 잔나비걸상과(Polyporaceae)의 복령군의 바깥층을 거의 제거한 균핵을 지칭한다. 한국, 중국, 일본 등지에서 소나무 등을 벌채 후 수 년후에 벌채한 줄기주변의 지하에 있는 뿌리에 부착, 형성된 균핵이다. 포도당 다당체인 pachymic acid 등을 함유하고 있다.
백출(白朮, Atractylodis Rhizoma alba)는 국화과(Compositae) 의 삽주(Atractylodes japonica)의 주피를 제거한 뿌리줄기이다. 고르지 않은 덩어리 또는 일정하지 않게 구부러진 원부형으로, 항염작용을 가지는 atractylenolide 등을 주성분으로 함유하고 있다.
계피(桂皮, Cinnamomi Cortex)는 녹나무과(Lauraceae)의 계피나무(cinnamomum cassia) 또는 그밖의 동속 근연 식물의 수피를 그대로 또는 주피를 다소 제거한 것으로, cinnamic aldehyde라는 정류를 주성분으로 함유하고 있다. 하열작용, 중추억제 작용, 건위(健胃) 작용을 갖는 것으로 알려져 있다.
치자(梔子, Gardeniae Fructus)는 꼭두서니과(Rubiaceae)의 치자나무(Gardenia jasminoides) 또는 그 밖의 동속식물의 열매로 난형으로 흔히 6개 내외의 뚜렷한 능선이 새로로 뻗는다. crocin 이라는 색소와 geniposide, gardenoside 등의 iridoid glycoside를 주성분으로 함유하고 있다. 치자는 담즙분비 촉진, 혈중 bilirubin 상승을 억제, 혈압강하 작용이 있음이 보고되어 있다.
이하 실시예 및 실험예로서 본 발명을 상세히 설명한다.
그러나 하기한 실시예는 본 발명의 바람직한 일 실시예일 뿐 본 발명이 하기한 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[제조예]
[생약 추출물의 제조]
장생도라지, 저령, 은행잎, 당귀, 산약, 천마, 천궁, 원지, 백작약, 백봉령, 백출, 계피 및 치자 각각 1kg을 증류수 4ℓ에 넣고, 환류냉각기가 부착된 resin cattle에서 4시간 동안 95℃로 추출한 후 냉각시킨 다음 여과하여 여액이 1ℓ가 될 때까지 감압농축한 후 각각을 동결건조시켜 추출물을 얻었다.
[기능성 주류의 제조]
상기에서 얻은 생약 추출물을 가지고, 하기와 같은 조성으로 리큐르주를 제조하였다.
|
실시예1 |
실시예2 |
실시예3 |
실시예4 |
장생도라지 추출물 |
100g |
35g |
40g |
30g |
저령 추출물 |
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10g |
11g |
9g |
은행잎 추출물 |
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10g |
11g |
9g |
당귀 추출물 |
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6g |
5g |
5g |
산약 추출물 |
|
5g |
6g |
5g |
천마 추출물 |
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4g |
4g |
5g |
천궁 추출물 |
|
6g |
5g |
7g |
원지 추출물 |
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6g |
5g |
7g |
백작약 추출물 |
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5g |
4g |
6g |
백봉령 추출물 |
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3g |
2g |
4g |
백출 추출물 |
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3g |
2g |
4g |
계피 추출물 |
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3g |
2g |
4g |
치자 추출물 |
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4g |
3g |
5g |
총 |
100g |
100g |
100g |
100g |
상기 생약 추출물 100g을 여과하여, 그 여액에 주정과 정제수를 첨가하고, 감미료로 올리고당 100g을 첨가하여 알콜 37%, 100㎖가 되게 희석하여 리큐르주를 제조하였다.
생약 추출물은 여과효율 및 잡미의 제거정도가 우수한 입상형태의 활성탄을 사용하여 여과하였다. 여과필터는 PAD 여과지의 경우 시간이 많이 걸리는 단점이 있고, 일반필터는 반복사용시 청징도가 떨어지는 단점이 있으므로, 여과효율면에서 적합한 크린필터를 사용하였다. 생약 추출물을 첨가한 알콜 37%, 100㎖ 리큐르주는 통상의 제조방법을 따르며, 구체적으로 설명하면 다음과 같다.(1) 95% 주정과 정제수로 활성탄 처리수를 10:9의 용량비로 혼합하여 50%농도의 정제주정 1ℓ를 제조하고 이를 입자와 밀도를 달리한 활성탄 칼럼에 통과시켜 탈취한다.(2) 50% 정제주정에 생약 추출물 100g를 첨가하여 침출한다. 침출은 진탕조건에서 30일동안 하였다.(3) 침출액에서 원액을 분리하고 이어 원액을 여과한다. 여과는 마이크로필터를 사용하였다.(4) 여과된 원액에 첨가물로 올리고당(비중:1.25, 순도:이소말토올리고당 51%) 100g를 첨가하여 블랜딩한다.(5) 활성탄 처리수를 첨가하여 알콜농도 37%가 되게 희석한다.(6) 저온(4℃) 조건하에서 30일동안 숙성용기를 사용하여 숙성시킨다.(7) 숙성하여 완성된 리큐르주 100㎖를 확보한다.
본 발명의 기능성 주류는 장생도라지 추출물 또는 이와 함께 보조생약 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다. 장생도라지 추출물과 보조생약 추출물 이외의 감미료나 산미료 및 이들의 첨가량은 특별히 한정되지 않으며 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
이하, 본 발명의 기능성 주류의 간보호활성 및 인지기능 개선활성을 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
[실험예 1]
[간 보호활성 실험]
1. 실험방법
사염화탄소(CCl4) 및 아세트아미노펜(acetaminophen, APAP)으로 인위적인 간손상을 유발 시키고, 간 손상시 간 세포에서 혈액내 serum으로 유리된 ALT(alanine aminotransferase, 알라닌 아미노트랜스퍼라제)의 양을 측정함으로 라이트만 프랭켈(Reitman-Frankel) 방법에 준하여 측정하였다. 실험동물(ICR mouce)을 각각 10마리씩 군을 구성하여, 대조군은 생리식염수만 경구 투여하였다. 실험군은 상기 실시예 1, 2, 3, 4에서 얻은 기능성 주류를 100mg/kg씩 전처리한 후 아세트아미노펜(APAP, 400mg/kg)과 사염화탐소를(CCl4, 18mg/kg)를 복강 투여하여 인위적인 간 손상을 유발시킨 다음, 18시간 지난 후에 생쥐를 에탄올로 마취 후 심장으로 부터 혈액을 채취하였다. 채취한 혈액의 serum을 ALT의 기질액과 37℃에서 30분 동안 반응시켜 pyruvate를 생성시킨 후, 발색액을 넣고 20분 후 0.4N-NaOH를 섞어서 동정색의 발색이 되면 505nm에서 흡광도를 측정하였다.
2. 실험결과
실험결과를 하기 표 2에 나타내었다.
구 분 |
대조군 |
아세트아미노펜(APAP) |
사염화탄소(CCl4) |
성 분 |
0 |
실시예1 |
실시예2 |
실시예3 |
실시예4 |
0 |
실시예1 |
실시예2 |
실시예3 |
실시예4 |
혈청 ALT(U/liter) |
30±3 |
2278±251 |
1697±142 |
1629±126 |
1675±158 |
1654±154 |
3986±723 |
3187±135 |
3112±123 |
3153±187 |
3147±142 |
상기 표 2에서 알 수 있듯이, 아세트아미노펜과 사염화탄소에 의한 간 손상으로 간 세포에서 혈청으로 유리된 알라민 아미노트랜스퍼라제의 활성도를 측정한 결과 본 발명의 기능성 주류를 처리한 군들은 아세트아미노펜과 사염화탄소만을 처리한 군에 비해 아미노트랜스퍼라제의 활성이 감소하였다.
[실험예 2]
[인지기능 개선활성 효과 실험: 수동회피실험(passive avoidance conditioned response)]
1. 실험방법
실험동물은 ICR mice(18∼20g)를 사용하였으며, 사육실은 22±1℃로 유지시키며 12시간을 주기로 명암을 조절하였다. 사육시 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였고 3일 이상 순화시킨 후 실험에 사용하였다. 상기 실시예 1,2,3,4에서 얻은 기능성 주류를 전처리하여 5% Tween 용액(Tween 80(polyoxyethylenesorbitan monooleate):시그마)에 녹인 후 500㎎/㎏ 의 용량으로 매일 1회씩 일주일 동안 경구 투여하였으며 양성 대조군(positive control)으로서 타크린(tacrine(9-amino-1,2,3,4,-tetrahydroacridine):시그마) 2.5 ㎎/㎏과 5㎎/㎏을 이용하였고, 대조군은 5% Tween 용액을 투여하였다.
수동회피실험은 콜롬부스 인스트루먼트사의 PACS-30 셔틀 박스 시스템을 사용하였으며 박스의 크기는 48cm×23cm×27cm이다. 수동회피실험은 학습(learning trial)과 실험(testing trial)로 나우어 2일 연속(간격:24시간)으로 동일시간에 행하였다.
2. 수동회피실험(passive avoidance conditioned response)
(1) 학습시험(Learning trial)
마지막 약물 투여 30분 후에 에탄올(50 % w/v) 을 3 g/㎏의 용량으로 경구 투여하고, 에탄올 투여 1시간 후 실험동물을 조명을 비춘 밝은 쪽 구획에 놓고, 30초의 탐색시간 후 길로틴 문(guillotine door)이 열리고 어두운 구획으로 들어갈 수 있게 하였다. 이때 door가 열린 후 120초 이내에 어두운 쪽으로 들어가지 않는 쥐는 실험에서 제외시켰다. 길로틴 문(guillotine door)이 열린 후 쥐가 어두운 쪽으로 들어갈 때까지의 시간을 자동측정하였다. 일단 쥐가 어두운 쪽으로 들어가면 door가 닫히고 0.4㎃ 의 스크램블된 충격(scrambled shock)이 5초 동안 그리드 바닥(grid floor)을 통해 흐르게 되고 쥐는 이것을 기억하게 된다.
(2) 실험(Testing trial)
학습 시험(Learning trial)이 끝난지 24시간 후에 시행하였다. 쥐가 30초의 탐색시간 후 길로틴 문(guillotine door)이 열리고 어두운 쪽으로 들어 갈 때까지의 도달시간(latency time)dmf 300초까지 측정하였으며 도달시간(latency time)이 길수록 수동 회피의 학습과 기억이 좋음을 나타내는 것으로 판단하였다. 다음 표 3은 실험 조건을 나타낸다.
항 목 |
조 건 |
탐구시간(exploration duration) |
30 초 |
최대 시험 시간(Max. Trial duration) |
학습시험(learning) 120초 실험(testing) 300초 |
CS(conditioned stimuli) light intensity |
10 |
UCS(unconditioned stimuli) Grid intensity |
0.4mA |
UCS Grid duration |
5 초 |
실험물질 |
도달시간(초) |
대조군 |
20 |
타크린 투여군(Tac 1) |
31 |
타크린 투여군(Tac 2) |
330 |
실시예 1 |
229 |
실시예 2 |
257 |
실시예 3 |
238 |
실시예 4 |
245 |
3. 실험결과
상기 표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 상기 실시예 1, 2, 3, 4의 기능성 주류를 투여한 실험군은 대조군이나 타크린 투여군(Tac 1)에 비해 도달시간이 현저히 길게 나타났다. 따라서 본 발명의 기능성 주류는 기억력 증강 효과가 뚜렷함을 확인할 수 있었다.