KR100486968B1 - 누에 수번데기 건조엑스를 함유한 건강보조식품 조성물 - Google Patents

누에 수번데기 건조엑스를 함유한 건강보조식품 조성물 Download PDF

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    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
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Abstract

본 발명은 누에 수번데기 건조엑스를 주성분으로 함유하는 생식계에 대한 활력증진용 건강보조식품 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 누에수번데기건조엑스 50∼250 mg, 가시오가피 건조엑스 10∼40 mg, 오미자건조엑스 1∼10 mg, 복분자건조엑스 1∼10 mg, 구기자건조엑스 0.5∼10 mg, 동결건조로얄젤리 50∼200 mg, L-글루타민 0.5∼5 mg 및 비타민E 1∼15 mg를 함유한 생식계에 대한 활력증진용 건강보조식품 조성물과 이를 함유한 연질캅셀을 제조하는 방법에 관한 것이다.

Description

누에 수번데기 건조엑스를 함유한 건강보조식품 조성물{COMPOSITION OF HEALTH CARE BEVERAGE CONTAINING SILKWORM EXTRACT}
본 발명은 누에 수번데기 건조엑스를 함유한 생식계에 대한 활력증진용 건강보조식품 조성물에 관한 것으로, 보다 상세히는 누에 수번데기 분말의 건조엑스를 주성분으로 하고, 가시오가피건조엑스, 오미자건조엑스, 복분자건조엑스, 구기자건조엑스, 동결건조로얄젤리, L-글루타민 및 비타민 E를 보조성분으로 함유한 생식계 활력증진효과를 갖는 건강보조식품의 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.
성생활에 대한 관심은 지속적으로 증가하지만 이와는 상대적으로 남성의 사회생활에 따른 스트레스, 환경호르몬의 증가 등에 따른 발기부전 및 생식계의 능력이 감소되고 있다. 또한 의학발달과 더불어 인간의 평균수명이 연장되어 성기능에 대한 증진이 더욱 요구되어지고 있다.
발기부전 및 조루에 대한 치료 약물로는 비아그라, 유프리마등이 알려져 있으나, 이들 약제는 고가의 약제로서 심장병, 고혈압 등 부작용이 많아, 심근경색이나 저산소증이 있는 환자나 노인등에게는 사용에 주의 및 금기가 필요하다.
따라서, 의약품 복용에 따른 심장병, 두통, 혈액순환 장애 등과 같은 부작용이 없는 천연생약제제를 주재료로한 생식계의 활력증진용 건강보조식품의 개발이 요구되고 있는 실정이다.
동물성생약과 식물성생약으로만 이루어진 생식계의 활력증진용 건강보조식품을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명은 누에 수번데기 건조엑스를 함유하는 생식계에 대한 활력증진용 건강보조식품 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세히는 누에 수번데기 건조엑스 50∼250 mg, 가시오가피 건조엑스 10∼40 mg, 오미자건조엑스 1∼10 mg, 복분자건조엑스 1∼10 mg, 구기자건조엑스 0.5∼10 mg, 동결건조로얄젤리 50∼200 mg, L-글루타민 0.5∼5 mg 및 비타민E 1∼15 mg을 함유한 생식계 활력증진용 건강보조식품 조성물과, 누에수번데기 건조엑스 50∼250 mg, 오미자건조엑스 1∼10 mg, 가시오가피건조엑스 10∼40 mg, 복분자건조엑스 1∼10 mg, 구기자건조엑스 0.5∼10 mg를 차례대로 혼합하여 균일하게 한다음, 이 혼합물을 동결건조로얄젤리 50∼200 mg에 가하면서 L-글루타민 0.5∼5 mg과 비타민E 1∼15 mg 을 가하며 혼합하고 팜유, 밀납, 레시틴, 콩기름을 가하고 전질이 균일하게 하여 현탁액을 제조한후, 젤라틴 연질캅셀에 충진하여 누에수번데기 건조엑스를 함유하는 생식계에 대한 활력증진용 건강보조식품 연질캅셀제를 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에서의 주성분인 누에 수번데기 건조엑스는 누에 수번데기를 분말화한 다음 60% 에탄올로 추출, 농축건조하여 얻어진 것으로 발기부전 및 남성력 증진 등의 효과가 있는 것으로 알려진 동물성생약으로,
원래 누에는 알에서 깨어나 4번의 허물벗기(탈피)를 거쳐 5령 누에가 되어 고치를 지으며, 누에번데기로 변태한후 나방이 되어 알을 낳고, 약 2주일후면 죽게되는 일생의 과정을 거친 완전변태(完全變態)곤충(昆蟲)이다. 본 발명에서는 수컷번데기(수번데기)만을 선별하여 동결건조시켜 주원료로 사용한다.
가시오가피건조엑스는 오갈피나무과(Aralicaceae)에 속하는 가시오갈피나무(Electrococcus senticosus Maxim)의 뿌리추출물의 건조엑스로, 주성분으로는 정유 성분인 4-메톡시살리실알데히드(4-methoxysalicylaldehyde)와 아칸토시드 A, B, C, D, 세사민, 사비닌, 이소푸락신 등 인삼배당체와 유사한 성분이 함유되어 자양강장제의 대표적 약물로 알려져 있다.
오미자건조엑스는 목란과(Magnoliaceae)에 속하는 오미자나무(Maximowiczia chinensis Ruprecht var. typica Nakai)의 익은 열매인 오미자(Maximowicziae Fructus)추출물의 건조엑스이며, 시잔드린(schizandrin)의 리그난(lignan)배당체를 주성분으로하여, 당 이화를 촉진시키며 중추신경계를 흥분시켜 노동효율을 향상시키고 강장작용이 뛰어난 것으로 알려져 있다.
복분자 건조엑스는 장미과(Rosaceae)에 속하는 복분자(Rubus coreanus)추출물의 건조엑스로 주 성분은 말산(malic acid)와 주석산(tartaric acid)등으로 알려져 있으며, 약효로서는 보간신, 소변줄임, 성기능 도움, 음위 등 충추 신경계를 흥분하는 대표적인 강장제 한방 원료로 널리 이용하고 있다.
구기자의 건조엑스는 가지과(Solanaceae)에 속하는 구기자나무(Lycium chinense Miller)의 뿌리껍질인 지골피(Lycii cortex Radicis)추출물의 건조엑스로, 주성분으로는 베타인(betaine), 제아산틴(Zeaxanthin), 피살리엔(Physalien), 헤테로사이드(Heteroside) 및 배당체인 루틴(rutin)을 함유하고 있으며, 항지방 간 작용하며, 약효는 자양강장 강정제, 당뇨병에 이용하고 있다.
동결건조로얄젤리는 양질의 단백질류와 자연탄수화물, 불포화지방산류를 함유하고 있어 신진대사를 촉진시키며 신속한 피로회복과 활력을 제공해준다.
L-글루타민과 비타민 E는 생체에서 보조 및 면역체게에 필요한 에너지를 제공함으로써 피로회복 및 신진대사능을 증진시킨다.
즉, 본 발명의 강장제 건강보조식품 조성물 주성분으로 2종의 동물성생약과 4 종의 식물성생약 및 필수 아미노산 1 종 비타민류 1 종으로 조성된 건강식품으로, 함유된 동식물생약의 여러 성분의 복합적인 작용에 기인하여 일반적인 강장작용은 물론 생식계의 활력증진효과, 특히 남성의 성기능 증진효과가 기대되는 기능성 건강보조식품이다.
본 발명에 있어서, 추가하여 가시오가피 생약대신 산수유건조엑스 1∼10 mg을 함유할 수 있다.
산수유 건조엑스는 층층나무과(Cornaceae)에 속하는 산수유나무(Cornus officialis Siebold et Zuccarini)의 익은열매인 산수유(Corni Fructus)를 따서 씨를 제거한 과실의 추출건조엑스로, 주성분으로는 능금산, 주석산, 몰식자산등 유기산과 배당체등이 들어있고, 한방에서는 자양,강장,수렴약으로 사용하고 있으며, 양기부족에도 사용하고 있는 생약이다.
상기 조성물은 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께 통상적인 정제, 경질캅셀 또는 연질캅셀로 제조할수 있으며, 성인기준 1 일 3 회, 1 회 2 연질 캅셀씩 복용하는 것이 바람직하다.
이하, 본 발명의 실시예, 제제예 및 실험예를 기재한다.
(실시예 1)
1) 누에수번데기 건조엑스의 제조방법
동결건조된 5 령의 누에수번데기를 분말화하여 얻은 누에분말 1 kg을 60% 에탄올 6 배량을 가하여 75∼85 ℃에서 2∼3 시간 추출, 여과하여 추출액을 얻고, 잔사에 다시 40% 에탄올 6 배량을 가하여 같은 방법으로 재추출한후 얻어진 추출액을 첫 번째 추출액과 혼합하여 60∼70 ℃에서 농축한 다음, 스프레이 드라이어(spray drier)로 건조시켜 누에수번데기 건조엑스 200 g을 얻었다.
2) 기타 가시오가피건조엑스, 오미자건조엑스, 복분자건조엑스, 구기자건조엑스는 통상 관용의 방법으로 가시오가피, 오미자, 복분자, 구기자 각각의 생약을 정제수로 80∼100 ℃ 에서 가열, 추출하고, 여과, 농축,건조시켜 얻으며, 기존 상품화된것을 사용할수도 있다. (구입처의 예 : 인천소재 경방신약(주)등)
(제제예 1)
1 연질캅셀중 처방(mg) :
누에수번데기건조엑스 100
가시오가피건조엑스 20
오미자건조엑스 5
복분자건조엑스 5
구기자건조엑스 1.5
동결건조로얄젤리 100
L-글루타민 1.5
비타민 E 6
팜유 30
밀납 10
레시틴 10
콩기름 211
총 500 mg
(연질캅셀의 제조):
상기 처방의 조성량을 갖고 누에 수번데기 건조엑스, 오미자건조엑스, 가시오가피건조엑스, 복분자건조엑스, 구기자건조엑스를 차례대로 혼합하여 균일하게 한 다음 이 혼합물을 동결건조 로얄젤리에 가하면서 L-글루타민과 비타민 E를 가하며 혼합하고 팜유,밀납,레시틴,콩기름을 가하고 전질이 균일하게 하여 현탁액을 제조한 후, 젤라틴 연질캅셀에 충진하여 연질캅셀제를 얻는다.
(제제예 2)
(처방) :
누에수번데기 건조엑스 157.6
오미자 건조엑스 5.3
복분자 건조엑스 5.3
구기자 건조엑스 3.0
동결건조로얄젤리 116
L-글루타민 2.0
비타민 E 7.0
팜유 30
밀납 2.9
콩기름 242.2
총 550 mg
(연질캅셀의 제조)
상기 처방의 조성을 갖고 식물성생약에 동물성생약을 가하고, 잔여 성분을 가하여 균질하게 한 다음 젤라틴 연질캅셀에 충진하여 얻는다.
(제제예 3)
(처방) :
누에수번데기 건조엑스 183.6
오미자 건조엑스 5.3
복분자 건조엑스 5.3
구기자 건조엑스 3.0
산수유건조엑스 5.8
동결건조로얄젤리 116
비타민 E 7.2
팜유 8.7
황납 2.9
콩기름 242
총량 580 mg
(연질캅셀의 제조)
상기 처방의 조성을 갖고 식물성생약에 동물성생약을 가하고, 잔여 성분을 가하여 균질하게 한다음 젤라틴 연질캅셀에 충진하여 얻는다.
(실험예 1) 랫드에 대한 성기능증진효과 실험.
1. 동물실험 및 사료 조성
(1) 실험동물 및 동물실험
① 랫트실험
대한바이오링크(대한실험동물센타)에서 구입한 SD(Sprague-Dawley)계 랫드 (수컷 6∼7 주령, 체중 155∼175 g)을 충북청주시소재 00 대학교 수의과대학 실험동물사육실에서 일주일 동안 적응시킨후 그 기간중 일반증상을 관찰하여 체중감소가 없는 건강 동물만을 골라 시험동물로 사용하였다. 투여개시시 주령 및 체중범위는 7∼8 주령으로 32 마리를 골라 투여 개시전에 랫드 240±10 g 범위의 동물만을 골라 평균체중 및 분산이 균질히 되도록 분배하였다. 온도는 23 ± 2 ℃, 상대습도는 50 ± 10 %이고, 환기 회수는 10 ∼ 12 회/hr, 명암싸이클(cycle)은 형광등 조명(07:00 점등 ∼ 19:00 소등)이었으며 조도는 150∼300 lux로 하였다.
시험군은 옥수수기름(corn oil)을 비클(vehicle)로 투여하는 대조군(10 ml/kg)과 누에수번데기 건조엑스(250 mg/kg, 실시예1)만을 투여하는 군, 및 본 발명에 따른 건강보조식품(500 mg/kg, 제제예 1)를 투여하는 3 개의 군으로 하여 8마리씩 구성하였으며, 투여경로는 인체 적용경로가 경구이므로 경구경로를 택하여 실시하였다. 투여회수 및 투여기간은 4 주간 매일 1 회씩 경구투여용 존대를 이용하여 투여하였다.
(2) 조제사료의 조성
삼양사료주식회사에서 구입한 마우스 및 랫트 사육용 배합사료를 사용하였으며, 사료성분에는 단백질 24 %, 지질 4.5 %, 섬유질 3.5 %, 수분 11.5 %, 소량의 비타민과 아미노산, 무기질 등이 함유되어 있다.
2. 실험방법
1) 랫드의 고환의 무게, 고환의 병리조직학적 검사 및 정자생성능(spermatogenesis)검사
먼저 수컷 랫드의 좌우 정소무게를 측정하여 정자생성능에 대한 간접지표를 얻은 다음, 좌측 고환을 부엥용액(Bouin's solution)으로 고정한 후 파라핀으로 2차 고정시킨후, 조직을 박절하여 에오진-헤마독실린(Eosin-Hematoxylin)염색을 실하였고, 고환의 병리조직학적 검사를 실시하였다. 그리고 우측의 정소를 12 ml의 증류수가 들어있는 용기에 넣은 후 울트라 투락스(Ultra-turrax)균질기(분당 8000 회전, 약 2분간)를 사용하여 균질화 한 뒤, 4∼7 ℃에서 3 분간 초음파기(Ultra-sonicator)를 이용 처리한 다음 적혈구 계산판을 이용하여 균질-저항성 정자머리(Homogenization-resistant sperm heads)의 수를 계산하였다. 그리고 정소 1 g 내의 정자 세포수를 6.1 일로 나눔으로써 1 g 정소당 1 일 정자생산율(daily sperm production; DSP)을 산출하였다.
2) 랫드의 정관내 정자의 형태학적 검사 및 운동성검사.
사료와 물을 충분히 공급하면서 7 일동안 적응시킨 체중이 230∼250 g이 되는 랫드를 8 마리씩 3 군으로 나누어 누에 수번데기 건조엑스(실시예1) 및 처방된 누에수번데기제제(제제예1)을 옥수수기름(corn oil)에 녹인 뒤 체중 kg당 10 ml으로 4 주동안 경구 투여한 뒤 좌측 정관을 절제한 후, 3 ml modified Tyrode's media가 들어있는 페트리디쉬(petri dish)에 조직을 넣은후 10 분간, 37 ℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 배양액중의 조직을 제거한 다음, 배양액 0.1 ml은 2% Eosin과 3% Citric acid 혼합액과 1:1로 혼합하여 도말 표본을 만들어 표본당 100 마리의 정자를 200 배 배율의 현미경하에서 관찰함으로써 형태학적 이상 유무를 검사하였다. 일부의 배양액은 정자분석기(SAIS, medical supply, Korea)를 이용하여 운동성(Motility)(%), 기능항진(Hyperactivity)(%), 곡선속도(Curvilinear velocity)(㎛/sec), 직선속도(Straight line velocity)(㎛/sec), 평균경로속도(Average path velocity)(㎛/sec),선형성(Linearity)(%), 직선성(Straightness), 비드교차주파수(Beat cross frequency)(Hz), 평균각변위약동(Mean angular displacement Dance), 약동평균치(Dance-mean), 측두변위(Lateral head displacement)(㎛)치를 분석하여 운동성 검사를 하였다.
3) 랫드의 고환에서의 PHGPx유전자 발현 분석
PHGPx유전자는 세레늄(Se)관련 항산화유전자로써 정자발생과정에서 강하게 발현되는 유전자로 정자발생과정에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 따라서 본 실험에서 랫드의 고환을 트리졸(TRIzol)을 이용하여 total RNA를 분리한후 분광광동측정법(spectrophotometry)으로 260 nm에서 RNA양을 측정하였다. total RNA 2 ㎍을 취하여 Superscript Preamplication System Synthesis(GibcoBRL)로 first-strand cDNA fragment는 thermal cycler (MJRes., USA)로 95 ℃에서 3 분간 그리고 나서 35 cycles 95 ℃에서 1 분간(denaturing), 55 ℃에서 1 분간(annealing), and 72 ℃에서 1.5 분간(extension); 그리고 추가 extension 72 ℃에서 5 분간으로 수행하였다. PCR 산물은 2% agarose gel에 로딩(Loading)하여 PHGPx유전자 발현확인 및 밀도를 분석하여 고환내 발현되는 PHGPx유전자 발현양을 관찰하였다.
3. 시험결과의 평가
(1) 동물실험의 결과
1) 랫드의 고환의 무게, 고환의 병리조직학적검사 및 정자생성능검사에 대한 결과
랫드생식기의 절대무게 및 상대무게는 모든 군간에 어떤 유의성 있는 변화는 없었으며 (표1참조), 고환의 병리조직학적 검사결과 고환내에서의 어떤 변화도 관찰되지 않았고,
정자 생성능검사결과는 표2에서 볼 수 있는 바와같이, 누에수번데기 건조엑스단일제 투여군(실시예1)과 본 발명에 따른 제제(제제예1)를 투여한 랫드의 정소에서 총정자수는 대조군에 비해 유의성있게 증가하였고, 특히 본 발명품 투여군의 랫드정소에서 가장 높은 정자생산량을 보였다(표 2참조).
표 1. 약물의 4 주간 경구투여시 랫드에서의 기관의 절대 및 상대무게의 비교
표 2. 약물의 4 주간 경구투여시 랫드에서의 정자수
·8회평균치
·대조군과의 유의성 : * p〈0.05
2)랫드의 정관내 정자의 형태학적 검사, 운동성검사.
랫드의 정자두부모양은 갈고리모양으로 모든 동물의 정자에서와 동일모양으로 기형이나 이상발생은 관찰되지 않았다.
정자운동성 분석에서는 표3 및 도1에서 볼수 있는 바와같이 본 발명품제제투여군이 대조군에 비해 유의성있게 높은 활성을 보였다.
표 3. 약물의 4 주간 경구투여시 랫드에서의 정자운동성 분석표
Result are mean ± S.D. (n=8)
Significant differences as aompared with control : * p<0.05
MOT; motility, WOB; wobble, HYP; hypermotility, VCL; curvilinear line velocity, DNM; dance mean, VSL; straight line velocity, ALH; lateral head displacement, VAP; average path velocity, LIN; linearity, STR; straightness, BCF; beatcellular frequence, MAD; mean angular displacement.
3) 고환조직내에서의 PHGPx유전자 발현양상
PHGPx 유전자발현 분석에 있어서 본 발명품 투여군의 고환에서 대조군에 비해 26.7%정도 높은 발현도를 보였다. (도 2참조)
4) 부검소견 및 병리조직학적검사
시험종료후 모든 시험동물에 대한 부검에서 시험물질에 투여에 의한 특가할만한 육안적 병변은 관찰되지 않았다.
각종 장기조직에 대해 병리조작학적 검체(슬라이드)를 제작하여 광학현미경으로 관찰한 결과 시험물질 투여에 의한 병변이나 표적장기는 인정되지 않았다. 그러나 고환 및 부고환에서 대조군 (도 3 및 도4) 및 누에건조엑스단일제(도 5 및 도6)에 비하여 본 발명품(도7 및 도8)은 정자수가 증가되는 경향을 나타내었다.
도 3은 대조군 투여시 고환의 광학현미경 사진(H&E ×100)으로, 정세관내 정조세포 및 정모세포의 별다른 이상이 관찰되지 않았으며 정자세포의 형태도 정상소견으로 관찰되었다.
도 4는 대조군 투여시 부고환의 광학현미경 사진(H&E ×100)으로, 내강내 성숙한 정자세포들이 정상적으로 관찰되었다.
도 5는 누에건조엑스 단일제 투여시 고환의 광학현미경사진(H&E ×100)으로 정세관내 정조세포 및 정모세포의 별다른 이상이 관찰되지 않았으며 정자세포의 형태도 정상소견으로 관찰되었다.
도 6은 누에건조엑스 단일제 투여시 부고환의 광학현미경사진(H&E ×100)으로 내강내 성숙한 정자세포들이 관찰되어 정상소견으로 관찰되었다.
도 7은 본 발명품 제제 투여시 고환의 광학현미경사진 (H&E ×100)으로, 정세관내 정조세포 및 정모세포의 별다른 이상 소견은 관찰되지 않았으나 내강내 정자세포의 수가 현격히 증가된 양상이 관찰되었다.
도 8은 본 발명품 제제 투여시 부고환의 광학현미경 사진 (H&E ×100)으로 내강내 성숙한 정자세포들이 농축되어 그 수가 증대된것이 관찰되었다.
[임상예]
본 발명품(제제예1)이 남성의 성기능 증진 및 전반적인 신체기능에 미치는 영향을 실험하였다.
1. 조사대상
본 조사는 서울 시내 및 근교에 소재한 12 개의 비뇨기과 및 내과 의원의 외래 환자 및 정상 성인 남자를 대상으로 본 조사의 목적을 설명하고, 이에 동의한 168 명을 연속 조사방식으로 등록시켜 조사를 진행하였으며, 이 중 투여전후로 testosterone과 FSH검사를 실시한 153 명에서 유효성 평가가 가능하였고, 한 번이라도 본 발명품을 복용한 168 명에서 안전성 평가가 가능하였다.
2. 복용 방법
조사 대상자들은 첫번째 방문 시 2 주일 분의 본 발명품 연질 캅셀(제제예 1)을 제공받아 1 일 3 회, 1 회 2 캅셀씩 식후 복용하도록 하였다.
4 주후 방문하였을 때 주관적인 증상의 호전이 없거나 미미한 경우에는 매회 1 캅셀씩을 증량하여 3 캅셀씩 2 주 동안 투여하도록 하였다.다른 합병증이 있거나 선행 증상이 있는 경우에는 적절한 투약을 지속하도록 하였으며, 특별한 식이요법이나 비타민 제제, 소화제 등의 투약은 제한하지 않았다
3. 혈액 채취
조사대상자들은 첫 번째 방문 및 방문 6주째에 테스토스테론(Testosterone) 및 FSH 수치를 측정하기 위해서 2 cc정도를 채혈을 하고 검사방법, 검사 수치의 표준화 및 정도 관리를 위하여 중앙검사소로 지정된 필 임상병리의원에서 검체를 수거하여 측정하도록 하였다.
4. 자료 관리 및 통계 분석
조사표에 기록된 모든 자료는 컴퓨터에 입력되어 이 임상증례조사의 데이터 베이스가 만들어졌다. 컴퓨터 입력을 위해 MS-ACCESS?를 사용하였고 데이터 분석을 위해는 MS-Excel?과 SAS를 사용하였다. 이 임상증례조사가 영구적인 데이터 베이스로 확정하기 전에 데이터베이스의 모든 정보를 3 번 대조 확인하여 입력시의 오차 및 조사표 상의 불완전한 점을 재차 확인, 보완시켰다. 확정된 데이터베이스는 각 항목별 기술적 분석(descriptive analysis)을 시행하였으며, 적절한 분할표(contingency table)를 작성하여 분석 결과를 제시하였다.
증례에 대한 통계학적인 분석은 각 요인별 이상반응 발현율과 유효성에 대하여 분석하였는데, 호르몬에 대한 본 발명품의 효과 분석은 반복 측정 자료 분석(repeated measures ANOVA test)로 유의성을 검정하였으며, 각 요인별 및 시간에 따른 효과의 발현은 Chi-square test 또는 Fishers exact test를 이용하여 구하였다.
5. 유효성 평가
1) 테스토스테론(Testosterone) 및 FSH의 변화
남성호르몬인 테스토스테론(Testosterone)수치는 본 발명품 투여전과 비교하여 Paired t-test로 전후차이를 검정하였을 때 평균 4.8 nmol/L에서 4.5 nmol/L로 0.3 nmol/L이 감소하였으나, 이는 투여 종료일과 검사일이 차이가 나는 증례가 많아 정확한 검사 결과를 나타내지 못하기 때문에 투여를 종료하는 당일 검사한 80 례의 증례에서 다시 Paired t-test로 전후차이를 검정하였다. 테스토스테론(Testosterone)은 평균 4.4 nmol/L에서 4.9 nmol/L로 증가하여 통계적으로 유의하다고 할 수도 있었으며(Marginally significant:P=0.06), 투여 종료 3 일 이내에 검사한 80 례의 증례에서는 평균 4.7에서 4.6 으로 감소하여 통계적으로 유의하지는 않았지만 반동현상이 나타나는 경향을 보였다.
한편, 정자의 기능을 증가시키는 FSH는 7.7 mIU/mL에서 8.0 mIU/mL으로 증가하였으나 통계적으로 유의하지는 않았다(P=0.16).
또한 투여 종료 당일에 검사한 80 례의 증례에서는 FSH가 평균 8.6 에서 9.6 으로 증가하였으나 통계적으로는 유의하지 않았으며(P=0.4), 투여 종료 3일 이내에 검사한 80 례의 증례에서는 평균 7.8 에서 8.2 로 0.3 이 증가하였으나 통계적으로 유의하지 않았다(P=0.3).
표 4, 5, 6에 자세한 내용을 기술하였다
표 4. 유효성 변수의 변화
표 5. 당일 검사한 Testosterone및 FSH의 변화
표 6. 투여 종료 3 일 이내에 검사한 Testosterone및 FSH의 변화
2) 주관적인 증상의 변화
본 발명을 사용하는 이유에 따른 유효성의 평가는 반복 측정한 ANOVA 를 이용하여 검정하였는데 피로, 발기부전, 정력감퇴, 소변줄기, 근위축, 수면장애 등 모든 증상에서 통계적으로 유의한 개선 효과를 보였다(표 7. 참조).
이 들 증상들은 투여 2주부터 유의한 개선이 나타났으며, 이에 대한 내용은 표 7 및 8 에 기술되어 있다.
표 7. 사용이유에 따른 유효성(VAS변화)
표 8. 사용이유에 따른 반응율(VAS scale % 변화)
사용이유에 따른 효과의 발현은 표9 에 나타나있는 바대로 특히 근위축과 수면장애가 투여 2 주부터 뚜렷한 개선을 보였고, 투여 4, 6 주에도 유효성이 지속되고 있다.
표 9. 사용이유에 따른 효과의 벌현시기와 유효성(VAS)
종합반응을 살펴보면 투여 2 주에 개선을 보였던 증례는 모두 159 명 중 1 명의 판정불능을 제외하고 99 명(62.6 %)이었는데, 4 주 후에는 136 명으로 증가하였고(86.1 %), 6 주후에는 154 명중 134 명으로 증가하였다(87.0 %).
종합반응의 투여 기간 별 개선도는 표 10과 표 11에 나타내었다
표 10. 투여 4 주후의 종합반응
표 11. 투여 6 주후의 종합반응
각각의 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도는 표12,13,14,15,16,17 및 18에 기술하였다.
표 12. 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도-피로
표 13. 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도-발기부전
표 14. 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도-정력감퇴.
표 15. 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도-소변줄기가 약함
표 16. 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도-근위축
표 17. 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도-수면장애
표 18. 주관적인 신체증상의 투여 기간별 개선도(종합)
종합적으로 주관적인 신체증상 각각에 대한 투여기간별 개선도를 살펴보면, 피로는투여 2 주에 39.6 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 65.4, 76.4 %의 개선율을 보였다(P<0.0001). 발기부전은 투여 2 주에 13.4 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 41.2, 72.7 %의 개선율을 보였다(P<0.0001). 정력감퇴는 투여 2 주에 13.6 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 51.6, 73.5 %의 개선율을 보였다(P<0.0001). 소변줄기가 약한 증상은 투여 2 주에 26.9 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 44.7, 66.8 %의 개선율을 보여(P<0.0001), 모두가 통계적으로 유의성을 보였다.
근위축 증상 및 수면 장애는 증례가 적어서 유의성은 없었으나, 투여 4 주에 60 %의 개선율을 보였고, 6 주에는 각각 80, 100 %의 개선율을 보였다(근위축:P=0.24, 수면장애:P=0.01).
특히, 발기부전을 호소하는 환자에 본 발명품을 투여하였을 때 VAS로 표시한 증상의 개선도는 총 대상 증례 63 명 중 투여 2 주 후 8 명(12.7 %)에서 개선을 나타냈으나, 4,6 주에는 각각 16 명(25.4 %), 45명(72.6 %)으로 증가를 보였다(표14,15 참조). 표 19과 종합반응의 개선도를 나타낸 표 20에서 투여 2주후와 비교해 4주후와 6주후의 개선도가 뚜렷이 증가하였음을 관찰할 수 있다
표 19. 발기부전 환자의 개선도(VAS Scale category)
표 20. 종합반응의 개선도(발기부전 환자)
증량한 6 례에서는 투여 2 주 및 4 주에는 종합반응이 3 명에서 개선이 나타났으나, 증량이 이루어진 후 6 주에서는 5 명에서 개선이 나타나 증량에 대한 효과의 증가가 뚜렸히 나타났으나 증례가 적어서 통계적인 유의성은 검증할 수 없었다.
6. 안전성 평가
이상반응은 소화장애, 가래, 일시적인 가슴 두근거림, 졸음, 대변횟수가 잦음등이 각 1 건씩 나타났으며, 모두 경증이었으며, 이중 본제(본 발명품, 제제예1)와 관련성이 있는 이상반응은 졸음 1 건만이 관련성이 적음으로 나타나고, 나머지는 판정이 불가능하여 비교적 이반응이 나타나지 않는 안전한 제제로 판단된다(표 21참조).
표 21. 이상반응과 환자인적사항
7. 임상결과요약
1) 남성력 지표 호르몬인 FSH 및 테스토스테론(Testosterone)에 대한 본 발명품의 영향을 투여 전, 후를 비교하였을 때, 통계적 또는 임상적으로 유의한 증가를 보였으며 투여 종료 후에는 리바운드(rebound)경향을 보였다.
2) 주관적인 신체 증상에 대한 본발명품의 영향은 투여 전과 투여 2, 4, 6 주를 비교하였을 때, 종합반응이 투여 2 주에 개선을 보였던 증례가 62.6 %이었는데, 4 주 및 6 주 후에는 각각 86.1 %, 87.0 %로 나타나 통계적으로 유의한 호전도를 보이고 있어 상당한 임상적인 의미가 있는 것을 알 수 있었다.
종합적으로 주관적인 신체증상 각각에 대한 투여기간별 개선도를 살펴보면, 피로는 투여 2 주에 39.6 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 65.4, 76.4 %의 개선율을 보였다. 발기부전은 투여 2 주에 13.4 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 41.2, 72.7 %의 개선율을 보였다. 정력감퇴는 투여 2 주에 13.6 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 51.6, 73.5 %의 개선율을 보였다. 소변줄기가 약한 증상은 투여 2 주에 26.9 %의 개선율을 보였고, 4,6 주에 각각 44.7, 66.8 %의 개선율을 보였다.
근위축 증상 및 수면 장애는 증례가 적어서 유의성은 없었으나, 투여 4 주에 60 %의 개선율을 보였고, 6 주에는 각각 80, 100 %의 개선율을 보였다
3) 증량한 증례에서 효과의 변화
비록 증량한 증례가 6 례로 적어서 유의성을 보일 수는 없었지만, 5 례에서 효과의 증가가 나타났다.
4) 효과 발현 시기에 대한 요약
본발명품을 투여한지 2 주만에 증상의 개선이 나타났지만, 이는 투여 4,6 주에 비교하면 개선도가 매우 낮아 본 발명품은 적어도 4 주 이상의 투여 기간이 권장된다.
5) 발기부전 환자에 대한 평가
특히 발기부전을 호소하는 환자에 본 발명품을 투여하였을 때 VAS로 표시한증상의 개선도는 총 대상 증례 63 명 중 투여 2 주 후 8 명(12.7 %)에서 개선을 나타냈으나, 4,6 주에는 각각 16 명(25.4 %), 45 명(72.6 %)으로 증가를 보여 발기부전 환자에게도 효과가 있는 것으로 나타났다
6) 안정성평가
소화장애등 이상반응이 나타나긴 하였으나 모두 경증으로 매우 안정한 제제로 판명되었다.
이에 본 발명품은 동물실험에서 정자활성과 정자수, 항상화 유전자의 발현을 증가시킨다는 사실이 확이되었고, 임상예에서도 남성력지표호르몬인 FSH 및 테스토스테론에 대한 투여전후임상적으로 유의성있는 증가를 볼수 있었고, 피로, 발기부전, 정력감퇴등에 개선율을 보였으며, 제제면에서 안정하고 안전한 성기능증진 및 신체기능활성화 적용을 갖는 기능성건강보조식품으로, 산업적으로 매우 유용한 발명임이 입증되었다.
도 1은 대조군, 누에건조엑스 단일제 및 본 발명품을 랫드에 4주간 투여후 정자운동성을 비교 분석한 그래프이고,
도 2는 대조군, 누에건조엑스 단일제 및 본 발명품을 랫드에 4주간 투여후 PHGPx 유전자 발현을 분석한 그래프이며,
도 3과 도4는 대조군을 투여후 고환 및 부고환에서의 조직을 광학현미경으로 관찰한 사진이고,
도 5와 도6은 누에건조엑스 단일제를 투여후 고환 및 부고환에서의 조직을 광학현미경으로 관찰한 사진이며,
도 7와 도8은 본 발명품을 투여후 고환 및 부고한에서의 조직을 광학현미경으로 관찰한 사진이다.

Claims (4)

  1. 누에 수번데기 건조엑스 50∼250 mg, 가시오가피 건조엑스 10∼40 mg, 오미자건조엑스 1∼10 mg, 복분자건조엑스 1∼10 mg, 구기자건조엑스 0.5∼10 mg, 동결건조로얄젤리 50∼200 mg, L-글루타민 0.5∼5 mg 및 비타민E 1∼15 mg 으로 이루어진 남성의 성기능증진 및 신체기능활성화작용을 갖는 기능성 건강보조식품.
  2. 삭제
  3. 청구항 1 에 있어서, 제형이 팜유, 밀납, 레시틴, 콩기름으로 구성된 담체로 이루어진 연질캅셀제인 기능성 건강보조식품.
  4. 누에수번데기 건조엑스 50∼250 mg, 오미자건조엑스 1∼10 mg, 가시오가피건조엑스 10∼40 mg, 복분자건조엑스 1∼10 mg, 구기자건조엑스 0.5∼10 mg를 차례대로 혼합하여 균일하게 한다음, 이 혼합물을 동결건조로얄젤리 50∼200 mg에 가하면서 L-글루타민 0.5∼5 mg과 비타민E 1∼15 mg 을 가하며 혼합하고 팜유, 밀납, 레시틴, 콩기름을 가하고 전질이 균일하게 하여 현탁액을 제조한후, 젤라틴 연질캅셀에 충진하는, 남성의 성기능증진 및 신체기능활성을 갖는 연질캅셀제형의 기능성 건강보조식품을 제조하는 방법.
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