KR100466862B1 - Composition for External Skin Application containing Hedyotis Diffusa Willd Extract - Google Patents
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Abstract
본 발명은 백화사설초 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 더 구체적으로 백화사설초 추출물을 함유하여, 항염증효과, 항바이러스, 항박테리아, 및 항진균효과가 우수하며, 콜라겐 생합성 촉진효과 또한 우수한 피부 노화방지용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an external composition for skin containing Pleurotus eryngii extract, more specifically, Pleurotus eryngii extract, which has excellent anti-inflammatory effect, antiviral, antibacterial, and antifungal effect, and also has excellent collagen biosynthesis promoting effect. It relates to an anti-aging skin external composition.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 백화사설초 추출물은 백화사설초를 분쇄하는 단계(a); 상기 단계(a)의 분쇄물을 탄소수 1~4개의 무수, 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올), 아세톤, 에칠아세테이트, 디에칠에테르, 벤젠, 클로로포름, 또는 헥산으로 구성되는 추출용매 가운데 1종 이상 선택하여 냉침 또는 온침하여 추출하는 단계(b); 및 상기 단계(b)의 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 적정온도로 감압 농축하는 단계(c)에 의하여 얻어진다.In the composition for external application for skin according to the present invention, the baekhwasachocho extract is pulverized baekhwasachocho (a); The pulverized product of step (a) is one or more of an anhydrous, 1 or 4, extraction solvent consisting of hydrous lower alcohols (methanol, ethanol), acetone, ethyl acetate, dieth ether, benzene, chloroform, or hexane. Selecting (b) extracting by cooling or warming; And concentrating the extract of step (b) under reduced pressure to an appropriate temperature in a distillation apparatus equipped with a cooling condenser.
Description
본 발명은 백화사설초 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 백화사설초 추출물을 함유하여, 항염증효과, 항바이러스, 항박테리아, 및 항진균효과가 우수하며, 콜라겐 생합성 촉진효과 또한 우수한 피부 노화방지용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an external composition for skin containing baekhwangsachocho extract, specifically, baekhwangchocho, containing anti-inflammatory effect, antiviral, antibacterial, and antifungal effect, collagen biosynthesis promoting effect also excellent skin aging It relates to a topical skin composition for prevention.
피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 제기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에도 중요한 역할을 하고 있다. 그러나, 외부로부터 받는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스, 영양결핍 등은 피부의 정상기능을 저하시키고, 탄력손실, 각질화, 주름생성 등의 피부 노화현상을 촉진시키게 되는데, 이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 탄력 있는 피부를 유지하기 위하여 종래 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리활성물질들이 강화된 화장품을 사용함으로써 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부노화를 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔다.Skin is the body's primary protective film that protects the organs of the body from temperature and humidity changes and the stimulation of the external environment such as ultraviolet rays and pollutants, and plays an important role in maintaining homeostasis such as body temperature control. However, excessive physical and chemical stimuli, stress, and malnutrition from the outside can reduce the normal function of the skin and promote skin aging such as loss of elasticity, keratinization, and wrinkle formation. In order to maintain elastic skin, efforts have been made to effectively suppress skin aging by maintaining skin's intrinsic function and activating skin cells by using cosmetics that have been strengthened with bioactive substances obtained from various animals, plants, and microorganisms. .
그러나, 기존의 화장품 원료들은 대부분 효능이 미진하거나 피부 부작용을 유발하는 등 여러 가지 문제점을 가지고 있다.However, conventional cosmetic raw materials have many problems, such as most of them are ineffective or cause skin side effects.
따라서, 피부 부작용을 유발하지 않으면서 피부 노화방지효과를 갖는 원료에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 본 발명은 이러한 연구의 결과로서, 천연원료인 백화사설초 추출물을 화장료 조성물 등의 피부 외용제 조성물에 적용하여 우수한 피부 노화방지효과를 발견하였다.Therefore, studies on raw materials having an anti-aging effect without causing skin side effects have been actively conducted. As a result of this study, the present invention was found to have excellent skin anti-aging effect by applying the natural extracts of baekhwasachocho extract to external skin composition such as cosmetic composition.
백화사설초는 한의학뿐만 아니라, 민간요법으로도 널리 알려지고 사용되어온 한방약제의 하나이다. 백화사설초는 중국의 남부, 동남아시아, 제주도의 울창하고 그늘진 숲속에서 자생하는 꼭두서니과(Rubiaceae) 식물로 중국 전통의학에서 간암, 폐암, 직장암의 치료, 해열, 해독에 사용되어 왔다.Baekhwasaengcho is one of the herbal medicines that have been widely known and used not only in oriental medicine but also in folk medicine. White flowers are a plant of the Rubiaceae family that grows in the lush and shady forests of southern China, Southeast Asia and Jeju Island, and has been used in traditional Chinese medicine to treat liver cancer, lung cancer, rectal cancer, fever and detoxification.
백화사설초에 함유된 성분으로는 베툴린(Betulin), 베툴릭산(Betulinic acid), 우루솔릭산(Ursolic acid), 올레아놀릭산(Oleanolic acid), 스티그마스테롤(Stigmasterol), 베타-시토스테롤(β-Sitosterol), 베타-글리시레티닉산(β-Glycyrretinic acid), 펜타-쿠마릭산(ρ-Coumaric acid), 글루코사이드(Glucoside), 헨트리아콘테인(Hentriacontane) 등이 있으며 항암활성, 항염증효과 및 항바이러스효과를 나타낸다고 알려져 있다.Ingredients included in Bacteria (Betulin), Betulinic acid, Ursolic acid, Oleanolic acid, Stigmasterol, Beta-Sitosterol , Β-Glycyrretinic acid, β-Gumalic acid (ρ-Coumaric acid), Glucoside (Glucoside), Hentriacontane, etc., anti-cancer, anti-inflammatory and antiviral effect It is known to represent.
즉, 우루솔릭산과 올레아놀릭산은 티피에이(TPA : tetradecanoyl phobol acetate)처리에 의한 유두종(papillomas)의 생성을 억제하며, 미리 생성된 유두종의 크기를 감소시킨다.In other words, urolelic acid and oleanolic acid inhibit the generation of papillomas by tetradecanoyl phobol acetate (TPA) and reduce the size of the previously generated papilloma.
일반적으로 우루솔릭산과 올레아놀릭산은 종양 성장 초기의 세포 변화를 억제하는 효과가 있다. 예컨대, 우루솔릭산과 올레아놀릭산이 혼합된 연고는 디엠비에이(DMBA : 7,12-dimethylbenz[a]anthracene)에 의해 유도된 피부암을 억제하는 것으로 보고되었다.In general, urolelic acid and oleanolic acid have the effect of inhibiting cellular changes early in tumor growth. For example, ointments mixed with uroleic acid and oleanolic acid have been reported to inhibit skin cancer induced by DMBA: 7,12-dimethylbenz [a] anthracene.
베툴린과 베툴릭산도 역시 매우 강력한 항암제로서 미국에서 텍솔(Taxol)에 이어 신약 적용이 거론되고 있으며, 피부암 예방 및 치료효과도 매우 탁월하다. 베툴린과 베툴릭산은 또한 강력한 항염증 활성을 나타낸다. 베툴린과 베툴릭산은 루코트리엔(Leucotriene) 생합성에 있어 효소를 저해하며, 우루솔릭산과 올레아놀릭산은 인간 백혈구 엘라스타제를 저해한다.Betulin and betulic acid are also very powerful anticancer drugs, and in the United States, new drugs are being applied following Taxol, and skin cancer prevention and treatment are also excellent. Betulin and betulic acid also show potent anti-inflammatory activity. Betulin and betulic acid inhibit enzymes in leucotriene biosynthesis, while urolelic acid and oleanolic acid inhibit human leukocyte elastase.
베툴린과 베툴릭산은 강력한 항바이러스효과로 헤르페스, 인류 면역 결핍 바이러스(HIV)의 치료에 이용되며, 우루솔릭산은 수종의 포도상구균(staphylococci) 균주를 저해하며, 항박테리아 및 항진균효과를 나타낸다. 또한, 올레아놀릭산은 티프스균, 파라티프스균, 녹농균, 폐염쌍구균에 대한 저해 활성 능력을 갖는다.Betulin and betulic acid are used for the treatment of herpes and human immunodeficiency virus (HIV) with potent antiviral effects. Ursolic acid inhibits several staphylococci strains and has antibacterial and antifungal effects. In addition, oleanolic acid has an inhibitory activity ability against Typhoid bacteria, Paratyphoid bacteria, Pseudomonas aeruginosa and Pneumococcal pneumoniae.
최근 연구된 바에 따르면, 백화사설초 추출물이 발암물질에 의한 DNA 변화를 억제하고 면역 글로블린 생성 촉진에 의해 면역력을 조절하며 다양한 종류의 염증을 치료하며 혈행을 촉진한다는 사실이 밝혀졌다. 특히 백화사설초에서 추출한 물질의 돌연변이 방지효과는 추출성분에 의한 글루타티온과 황산염의 증가와 시토크롬 피-450(cytochrome P-450)과 관련이 있음이 밝혀졌다.Recently, it has been found that P. aeruginosa extract inhibits DNA changes caused by carcinogens, regulates immunity by promoting immunoglobulin production, treats various types of inflammation, and promotes blood circulation. In particular, it was found that the antimutagenic effects of the extracts from P. chinensis were associated with the increase of glutathione and sulfate by the extract components and cytochrome P-450.
백화사설초의 종래의 연구들은 간질환 예방 및 치료용 생약조성물(대한민국 특허 출원번호 1999010284, 1997058134, 1997058131) 또는 간암 치료용 생약제(대한민국 특허 출원번호 1997058133)에 관한 내용으로 본 발명의 주름개선효과, 콜라겐 생합성 촉진, 및 항염증효과가 있는 피부 외용제 조성물과는 전혀 다른 것이다.Conventional studies of Pear vulgaris are related to the herbal composition for preventing and treating liver disease (Korean Patent Application No. 1999010284, 1997058134, 1997058131) or herbal medicine for treating liver cancer (Korean Patent Application No. 1997058133). It is completely different from the topical skin composition which has biosynthesis promoting and anti-inflammatory effects.
특히 백화사설초가 함유하고 있는 다양한 활성성분에 의한 효능, 즉 경구투여 또는 국부 처치시의 다양한 염증, 알러지, 피부암, 발진, 여드름, 부종, 소양증, 가려움증 등의 억제효과 및 항균효과는 백화사설초가 화장품등 피부 외용제의 신소재로서 활용될 수 있음을 시사한다.In particular, the effects of various active ingredients contained in Pear vulgaris, that is, the inhibitory and antibacterial effects of various inflammations, allergies, skin cancers, rashes, acne, edema, pruritus and itching during oral administration or topical treatment, It suggests that it can be used as a new material for external skin preparations.
본 발명은 상기한 바와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 본 발명의 목적은, 항노화효과가 우수한 백화사설초를 극성변화에 의해 순차적으로 추출한 것을 유효성분으로 함유함으로써 피부 개선 및/또는 활성화효과, 주름개선효과, 콜라겐 생합성 촉진효과, 및 항염증효과가 우수한 피부 노화방지용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.The present invention is to solve the problems of the prior art as described above, the object of the present invention is to improve and / or activate the skin by containing as an active ingredient extracted sequentially white baekryechosa with excellent anti-aging effect by polarity change It is to provide a skin external composition for preventing skin aging which is excellent in effects, wrinkle improvement effect, collagen biosynthesis promoting effect, and anti-inflammatory effect.
상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, 백화사설초 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.In order to achieve the object as described above, the external preparation composition for skin according to the present invention is characterized in that it contains an extract of baekryeoksa.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 백화사설초 추출물은 전체 조성물의 총중량을 기준으로 0.0001중량% 내지는 10중량%로 함유되는 것을 특징으로 한다.In the composition for external application for skin according to the present invention, the baekhwasachocho extract is characterized in that it is contained in 0.0001% by weight to 10% by weight based on the total weight of the total composition.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 백화사설초 추출물은 백화사설초를 분쇄하는 단계(a); 상기 단계(a)의 분쇄물을 탄소수 1~4개의 무수, 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올), 아세톤, 에칠아세테이트, 디에칠에테르, 벤젠, 클로로포름, 또는 헥산으로 구성되는 추출용매 가운데 1종 이상 선택하여 냉침 또는 온침하여 추출하는 단계(b); 및 상기 단계(b)의 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 적정온도로 감압 농축하는 단계(c)에 의하여 얻어지는 것을 특징으로 한다.In the composition for external application for skin according to the present invention, the baekhwasachocho extract is pulverized baekhwasachocho (a); The pulverized product of step (a) is one or more of an anhydrous, 1 or 4, extraction solvent consisting of hydrous lower alcohols (methanol, ethanol), acetone, ethyl acetate, dieth ether, benzene, chloroform, or hexane. Selecting (b) extracting by cooling or warming; And concentrating the extract of step (b) under reduced pressure to an appropriate temperature in a distillation apparatus equipped with a cooling condenser.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 피부 외용제 조성물은 화장용 세정제 이외의 피부에 적용되는 모든 화장료 조성물 또는 약학 조성물인 것을 특징으로 한다.In the external preparation composition for skin according to the present invention, the external preparation composition for skin is characterized in that all cosmetic compositions or pharmaceutical compositions applied to the skin other than the cosmetic detergent.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, 백화사설초 추출물을 함유하고 주름 개선 기능을 가지는 것을 특징으로 한다.본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, 백화사설초 추출물을 함유하고 콜라겐 생합성 촉진 기능을 가지는 것을 특징으로 한다.본 발명에 의한 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 피부 외용제 조성물은 항염증 기능을 나타내어 피부활력을 증가시키는 것을 특징으로 한다.The external preparation composition for skin according to the present invention is characterized in that it contains an extract of chlorosis and has an anti-wrinkle function. The external composition for cosmetics according to the present invention contains an extract of chlorosis and has a function of promoting collagen biosynthesis. In the external preparation composition for skin according to the present invention, the external preparation composition for skin is characterized in that it exhibits anti-inflammatory function to increase skin vitality.
이하, 본 발명의 구성에 대하여 보다 상세하게 설명한다.EMBODIMENT OF THE INVENTION Hereinafter, the structure of this invention is demonstrated in detail.
본 발명은 야생 또는 재배된 백화사설초를 무수 또는 함수의 저급 알코올, 아세톤에서 1차 추출한 후 에칠아세테이트, 디에칠에테르, 벤젠, 클로로포름, 헥산 등의 저극성 용매로 재추출하여 활성성분의 함량을 증대시키고 불순물을 제거하여 안정도가 향상됨과 동시에 효능이 극대화된 추출물을 피부 외용제, 예컨대 가용화기술을 이용한 유연화장수에서부터 유화기술을 응용한 영양화장수, 크림, 에센스 등에 첨가하는 것이다.The present invention firstly extracted wild or cultivated baekhwasaengchool anhydrous or hydrated lower alcohol, acetone, and then reextracted with ethyl acetate, diethyl ether, benzene, chloroform, hexane, etc. to increase the content of the active ingredient. To remove the impurities and improve stability and at the same time maximize the efficacy of the extract is added to the skin external preparations, such as softening longevity using solubilization technology to nutrient cosmetics, cream, essence applied to the emulsification technology.
본 발명을 좀더 상세히 설명하면 다음과 같다. 백화사설초를 자연건조 또는 어떠한 방법으로든 잘게 분쇄하고 분쇄물 건조중량에 대해 추출 용매로서 물, 저급 알코올(메탄올, 에탄올), 물과 저급 알코올의 혼합물, 아세톤, 1,3-부틸렌 글리콜,노말 프로판올, 이소 프로판올, 노말 부탄올 등의 극성용매와 이것들의 혼합용매를 5~20배 부피량을 가하여 침적 추출하여 여과한 후 여액을 감압농축한다. 농축액에 물을 가하여 분산시킨 후 분산액에 동량의 에칠아세테이트, 클로로포름, 디에칠에테르 등의 저극성 유기용매를 가하고 진탕한다. 유기층을 분리한 후 감압농축하여 활성이 우수한 추출물을 얻는다. 추출방법으로는 냉침과 페르콜레이션의 경우는 12~96 시간 정도, 또는 탄소수 1~4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 에칠아세테이트 또는 디에칠에테르를 용매로 하여 4~25℃ 상온에서 3~20일 방치 숙성시켜서 유효성분을 추출할 수도 있다. 온침의 경우는 사용하는 용매 등의 종류와 온도에 따라서 상이하나 적당한 것은 용매의 환류 온도에 가까운 온도로 5~24시간 정도를 행하는 것이 좋다.The present invention will be described in more detail as follows. Pear crushed by natural drying or by any method, and water, lower alcohol (methanol, ethanol), mixture of water and lower alcohol, acetone, 1,3-butylene glycol, normal propanol , 5-20 times the volume of polar solvents such as isopropanol and normal butanol and mixed solvents thereof were added by immersion extraction, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. Water is added to the concentrated solution to disperse the same, and the same amount of low polar organic solvents such as ethyl acetate, chloroform, and die ether are added to the dispersion and shaken. The organic layer is separated and concentrated under reduced pressure to obtain an excellent extract. Extraction method is about 12 to 96 hours for cold acupuncture and percolation, or 3 to 20 days at room temperature of 4 to 25 ° C using anhydrous or hydrous lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, ethyl acetate or dietyl ether as solvents. It is also possible to extract the active ingredient by leaving it to mature. In the case of warm needle, it is different depending on the kind and temperature of the solvent etc. to be used, but it is preferable to perform about 5 to 24 hours at a temperature close to the reflux temperature of the solvent.
상기와 같이 얻어진 백화사설초 추출물은 일반적으로 극성용매로 1차 추출한 것에 비해 매우 강력한 항노화를 나타내며 피부 외용 연고나 로션 등의 피부 외용제로 제조되어 사람의 피부에 도포되었을 때 피부 항산화효과가 매우 우수하다. 또한 어떠한 부작용도 유발하지 않아서 백화사설초 추출물이 안전하고 효과가 뛰어난 피부 항노화 억제제임을 알 수 있다.White birch vinegar extract obtained as described above has a very strong anti-aging effect compared to the first extraction with a polar solvent, and is made of an external skin ointment or a lotion such as a lotion, and has an excellent skin antioxidant effect when applied to human skin. . In addition, it does not cause any side effects, it can be seen that the extract of P. vulgaris is a safe and effective skin anti-aging inhibitor.
상기와 같이 제조된 백화사설초 추출물은 조성물의 총중량을 기준으로 0.0001~10중량%, 바람직하게는 0.0005~5.0중량%가 적당하다. 0.0001중량% 이하의 농도에서는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없었고, 10.0중량% 농도 이상에서는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않았다.Baeksasasulchocho extract prepared as described above is 0.0001 to 10% by weight, preferably 0.0005 to 5.0% by weight based on the total weight of the composition. A clear effect could not be expected at concentrations below 0.0001% by weight, and no increase in effect was observed with an increase in content above 10.0% by weight.
본 발명에 따른 조성물은 화장품학 및 피부과학적으로 허용가능한 매질 및/또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및/또는 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적 방법에 따라 제조될 수 있다. 또한 본 발명에 따른 조성물은 폼의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.The composition according to the invention contains cosmetically and dermatologically acceptable media and / or bases. These are all formulations suitable for topical application, for example emulsions, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) obtained by dispersing an oil phase in a solution, gel, solid or pasty anhydrous product, aqueous phase, and / or It may be provided in the form of a nonionic vesicle dispersant or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or cone stick. These compositions can be prepared according to conventional methods in the art. The composition according to the invention can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.
본 발명의 조성물은 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제, 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 이들 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.Compositions of the present invention include fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening and gelling agents, emollients, antioxidants, suspending agents, stabilizers, blowing agents, fragrances, surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, metals In the field of cosmetics or dermatology, such as ion blockers and chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics It may contain a commonly used adjuvant. These adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetic or dermatological field.
하기에서 실시예, 실험예 및 제조예를 통하여 본 발명을 더 구체적으로 설명한다. 그러나 아래의 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 여기에 한정되지 않음을 밝혀둔다.In the following Examples, Experimental Examples and Preparation Examples the present invention will be described in more detail. However, the following Examples, Experimental Examples and Preparation Examples are provided only for the purpose of illustration in order to help the understanding of the present invention is not limited to the scope and scope of the present invention.
또한 하기의 실시예를 통하여 본 발명의 조성물의 제조방법을 더욱 상세히 설명하도록 한다.In addition to the following examples to explain in more detail the preparation method of the composition of the present invention.
<실시예 1><Example 1>
백화사설초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 세말화한 백화사설초 가루 100g을 50% 에탄올 수용액 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고, 상기 여과액을 4~15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과한다. 상기 추출물을 3리터들이 분액 깔대기에 넣고 여기에 에칠아세테이트 1리터를 가한 뒤 흔들어서 잘 섞어준 다음 두층으로 완전히 분리된 후 상층(에칠아세테이트층)을 취한다. 하층(물층)을 다시 분액 깔대기에 넣고 에칠아세테이트로 두 번 더 추출한다. 분리된 상층을 모두 합한 뒤 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 50℃로 감압 농축하고 건조하여 건조중량 18.2g을 얻었다.Wash white chlorosis with purified water and dry it. Then, put 100 g of white crushed white sulcus powder into 1 liter of 50% ethanol aqueous solution, boil it for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, filter it with 300 mesh filter cloth, and filter the filtrate with 4 ~. After aging at 15 ° C. for 7 days, it is filtered with Whatman No. 2 filter paper. 3 liters of the extract was added to the separatory funnel, and 1 liter of ethyl acetate was added thereto, shaken well, mixed well, and then completely separated into two layers, and the upper layer (ethyl acetate layer) was taken. Put the lower layer (water layer) back into the separating funnel and extract twice with ethyl acetate. The combined upper layers were combined, concentrated under reduced pressure at 50 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser, and dried to obtain a dry weight of 18.2 g.
<실시예 2><Example 2>
백화사설초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분쇄한 백화사설초 가루 100g을 에탄올 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고, 상기 여과액을 4~15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거한다. 상기 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 60℃로 감압 농축한다. 이를 물 50㎖에 분산한 후 에틸 아세테이트 300㎖로 다시 추출한 후 유기층을 농축하고 동결 건조하여 건조중량 19.4g을 얻었다.Wash the white chlorosis with purified water and dry it, and then put 100 g of crushed white chlorosis powder into 1 liter of ethanol and boil it for 12 hours in an extractor with a cooling condenser and filter it with 300 mesh filter cloth, and filter the filtrate at 4 ~ 15 ℃ 7 After aging for one day, it is filtered through Whatman No. 2 filter paper to remove insoluble matters. The extract is concentrated under reduced pressure at 60 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser. The mixture was dispersed in 50 ml of water, extracted again with 300 ml of ethyl acetate, and the organic layer was concentrated and freeze-dried to obtain a dry weight of 19.4 g.
<실시예 3><Example 3>
백화사설초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 세말화한 백화사설초 가루100g을 노말 부탄올 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고, 상기 여과액을 4~15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거한다. 상기 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 80℃로 감압 농축한다. 이를 물 50㎖에 분산한 후 에틸 디클로로 메탄 300㎖로 다시 추출한 후 유기층을 농축하고 동결 건조하여 건조중량 16.8g을 얻었다.Wash the white chlorosis with purified water and dry it, and then put 100 g of crushed white chlorosis powder into 1 liter of normal butanol, boil it for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, filter it with 300 mesh filter cloth, and filter the filtrate with 4-15 ° C. After aging for 7 days, the filter is filtered through Whatman No. 2 filter paper to remove insoluble matters. The extract is concentrated under reduced pressure at 80 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser. The mixture was dispersed in 50 ml of water and extracted again with 300 ml of ethyl dichloromethane. The organic layer was concentrated and freeze-dried to obtain a dry weight of 16.8 g.
<실시예 4><Example 4>
백화사설초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 세말화한 백화사설초 가루 100g을 에탄올 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고, 상기 여과액을 4~15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과한다. 상기 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 50℃로 감압 농축하고 건조하여 건조중량 20.9g을 얻었다.Wash the white chlorosis with purified water and dry it, and then put 100 g of crushed white chlorosis powder into 1 liter of ethanol and boil it for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, filter it with 300 mesh filter cloth, and filter the filtrate at 4 to 15 ° C. After aging for 7 days, it is filtered with Whatman No. 2 filter paper. The extract was concentrated under reduced pressure at 50 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser and dried to obtain a dry weight of 20.9 g.
<실시예 5>Example 5
백화사설초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 세말화한 백화사설초 가루 100g을 디에칠에테르 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고, 상기 여과액을 4~15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과한다. 상기 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 50℃로 감압 농축하고 건조하여 건조중량 21.2g을 얻었다.Wash the white chlorosis with purified water and dry it, and then put 100 g of crushed white chlorosis powder into 1 liter of ethyl ether, boil it for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, filter it with 300 mesh filter cloth, and filter the filtrate with 4-15. After aging for 7 days at ℃, it is filtered with Whatman No. 2 filter paper. The extract was concentrated under reduced pressure at 50 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser and dried to obtain a dry weight of 21.2 g.
백화사설초 추출물에 대하여 피부 개선 및/또는 활성화효과를 확인하기 위한 실험을 수행하였다. 백화사설초 추출물이 주름개선효과, 콜라겐 생합성 촉진효과, 항염증효과를 갖는다는 것은 하기 실험에 의하여 나타내었다.Experiments were performed to confirm the skin improvement and / or activation effect on the baekhwasachocho extract. It was shown by the following experiment that the baekhwasachocho extract has anti-wrinkle effect, collagen biosynthesis promoting effect, and anti-inflammatory effect.
<실험예 1: 주름개선효과>Experimental Example 1: Wrinkle Improvement Effect
백화사설초 추출물의 주름개선효과로서는 피부 세포(skin cell) 증식효과를 보기위해 인체 정상 섬유아세포(Fibroblast)를 96-웰 마이크로 플레이트(96-well microplate)의 각 웰(Well)에 1x104세포가 되도록 접종하여 디엠이엠(DMEM : Dulbecco's Modified Eagle's Medium)배지에서 24시간 배양한다. 배양후 상기에서 제조한 실시예 1 내지 5 의 백화사설초 추출물을 최종 농도 500㎍/㎖ 되도록 조정한 혈청이 없는 디엠이엠 배지로 교체한 후 24시간 더 배양한다. 3-(4,5-디메틸씨아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸리움(MTT : (3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)2,5-diphenyl tetrazolium : 5㎎/㎖) 10㎕씩 첨가하고 4시간 방치 후, 배지 부분을 버린다. 각 웰당 100㎕의 디메틸 설폭사이드용액을 가하여 마이크로 플레이트 리더로 570㎚ 에서의 흡광도를 측정하였다.Wrinkle improvement effect of P. vulgaris extract extracts 1 × 10 4 cells in each well of a 96-well microplate in order to see the skin cell proliferation effect. Inoculate and incubate for 24 hours in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) medium. After incubation, the baekhwangsasulcho extract of Examples 1 to 5 prepared above was replaced with DM medium without serum adjusted to a final concentration of 500 μg / ml, followed by further incubation for 24 hours. 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium (MTT: (3- (4,5-dimethyl-thiazol-2-yl) 2,5-diphenyl tetrazolium: 5 mg / ml) was added, and left for 4 hours, and then the medium portion was discarded, and 100 µl of dimethyl sulfoxide solution was added to each well, and the absorbance at 570 nm was measured with a microplate reader.
상기 과정을 실시하여 하기 수학식 1로부터 세포증식효과를 구해 그 결과를 표 1 에 나타내었다.
상기 표 1에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따라 백화사설초 추출물이 첨가된 인체 정상 섬유아세포에서 세포증식효과가 우수함을 알 수 있다.As shown in Table 1, it can be seen that the cell proliferation effect is excellent in normal human fibroblasts to which baekrye-sachochocho extract is added according to the present invention.
<실험예 2: 콜라겐 생합성 촉진효과>Experimental Example 2: Collagen Biosynthesis Promoting Effect
백화사설초 추출물의 콜라겐 생합성 촉진효과를 알아보기 위해, 인체 정상 섬유아세포를 96-웰 마이크로 플레이트에 접종시키고(2x10 세포/웰) 디엠이엠 배지에서 24시간 배양한다. 배양 후 상기에서 제조한 실시예 1 내지 5 의 백화사설초 추출물을 500㎍/㎖의 농도로 준비하여 혈청이 함유되지 않은 디엠이엠 배지와 함께 넣고 48시간 배양한다. 배양 마지막 24시간전에 아스코르빅산 50㎍/㎖을 첨가하여 콜라겐 합성을 촉진시킨다. 배양 후 각 웰을 세척하고 혈청이 함유되지 않은 디엠이엠 배지로 교체한 후 24시간 더 배양한다. 배양 후 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐 타입 아이 씨-펩타이드(PICP, Type I C-Peptide)양을 키트(Kit, Takara, Kyoto, Japan)를 이용하여 새로 합성된 콜라겐 양을 PICP 양으로 측정하였으며 PICP 양은 ng/2x104세포로 환산하여 콜라겐의 합성 효과를 하기 표 2 에 나타내었다.In order to investigate the collagen biosynthesis promoting effect of P. aerugosa extract, human normal fibroblasts are seeded in 96-well microplates (2x10 cells / well) and incubated in DM medium for 24 hours. After the cultivation, the extracts of Baeksasaengcho extract of Examples 1 to 5 prepared above were prepared at a concentration of 500 µg / ml, incubated with DM medium containing no serum, and cultured for 48 hours. Ascorbic acid 50 μg / ml was added 24 hours before the last culture to promote collagen synthesis. After incubation, each well is washed, replaced with DM medium without serum, and incubated for another 24 hours. After incubation, the supernatant of each well was collected, and the amount of newly synthesized collagen was measured by the amount of PICP using a kit (Kit, Takara, Kyoto, Japan) using procollagen type I-peptide (PICP). PICP amount is shown in Table 2 below to synthesize the collagen in terms of ng / 2x10 4 cells.
콜라겐은 피부의 결합조직의 대부분을 차지하는 생체물질로서 피부의 탄력과 관계가 있으며 노화와 더불어 그 양이 감소한다. 따라서 콜라겐의 생합성 양을 증가시키면 피부의 탄력성을 증가시킬 수 있다.Collagen is a biomaterial that accounts for most of the skin's connective tissue. It is related to skin elasticity and decreases with age. Therefore, increasing the amount of collagen biosynthesis can increase the elasticity of the skin.
<실험예 3: 항염증효과>Experimental Example 3: Anti-inflammatory Effect
백화사설초 추출물의 항염증효과를 알아보기 위하여 쥐 20마리를 각 5마리씩 상기에서 제조한 실시예 1 내지 5 의 백화사설초 추출물 1.0중량%를 처리하는 시료군과 인도메타신(Indomethacin) 1.0중량%를 처리하는 비교군, 그리고 아라키돈산만을 처리하는 대조군으로 나누어 실험을 실시하여 쥐 귀두께의 평균치를 측정하였다. 먼저 백화사설초 추출물을 처리하는 시료군과 인도메타신을 처리하는 비교군은 시료를 20㎕/ear로 1일 1회 4일간 지속적으로 도포하였으며, 아라키돈산만을 처리하는 대조군은 1일 1회 4일간 용매인 동량의 에탄올만 도포하였다. 마지막 도포 1시간 후 모든 군에 아라키돈산을 2㎎/ear로 도포하여 인위적으로 쥐 귀에 부종을 유도하고, 1시간 후 귀의 부종 정도를 마이크로미터를 사용하여 시료군과 비교군, 그리고 대조군의 쥐 귀를 3회씩 반복하여 측정하여 귀두께의 변화를 기록하였다. 항염증효과는 아라키돈산만을 처리한 대조군을 기준으로 부종억제정도로 판정하였다(수학식 2 참조).In order to examine the anti-inflammatory effect of P. vulgaris extract, 20 rats each of 5 rats were treated with 1.0% by weight of P. vulgaris extract of Examples 1 to 5 and 1.0% by weight of indomethacin (Indomethacin). The experimental group was divided into a comparison group to be treated and a control group to treat only arachidonic acid, and the average value of the ear thickness of the rat was measured. First, the sample group treated with Pear vulgaris extract and the control group treated with indomethacin were continuously applied with the sample 20 μl / ear once a day for 4 days, and the control group treated with only arachidonic acid was solvent once a day for 4 days. Only phosphorus ethanol was applied. One hour after the last application, arachidonic acid was applied to all groups at 2 mg / ear to artificially induce edema in the rat's ear. After 1 hour, the degree of edema in the ear was measured using a micrometer. Was repeated three times to record the change in ear thickness. Anti-inflammatory effect was determined as the degree of edema inhibition based on the control group treated with arachidonic acid only (see Equation 2).
A : 대조군 쥐 귀의 두께변화A: thickness change of control rat ear
(아라키돈산 처리 후 귀의 두께 - 아라키돈산 처리 전 귀의 두께)(Thickness of ears after arachidonic acid treatment-thickness of ears before arachidonic acid treatment)
B : 시료군 또는 비교군 쥐 귀의 두께변화B: thickness change of sample or control rat ears
(아라키돈산 처리 후 귀의 두께 - 아라키돈산 처리 전 귀의 두께)(Thickness of ears after arachidonic acid treatment-thickness of ears before arachidonic acid treatment)
상기 측정 결과는 하기 표 3 에 나타내었다.The measurement results are shown in Table 3 below.
상기 표 3 에서 보는 바와 같이, 본 발명에 의한 백화사설초 추출물은 염증억제효과를 보였다.As shown in Table 3, the baekhwasasacho extract according to the present invention showed an inhibitory effect.
상기와 같은 화장품적 효능이 있는 백화사설초 추출물을 가용화제형과 유화제형에 각각 도입하여 아래와 같은 제형을 만드는 것을 예시함으로써 본 발명을 보다 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 제조예에만 한정되는 것은 아니다.The present invention will be described in more detail by illustrating the preparation of the following formulations by introducing each of the extracts of whitening saponcho extract having the above cosmetic effect into a solubilizing agent type and an emulsifying agent type, but the present invention is not limited to these preparation examples.
<제조예 1-3: 유화 제형>Preparation Example 1-3: Emulsion Formulation
유화제형의 제조방법은 다음과 같다.The manufacturing method of an emulsifier type is as follows.
1) 1 내지 9 의 원료의 혼합물을 65~70℃로 가열하였다.1) The mixture of the raw materials of 1-9 was heated at 65-70 degreeC.
2) 10 의 원료를 상기 1) 의 혼합물에 투입하였다.2) 10 raw materials were added to the mixture of 1) above.
3) 11 내지 13 의 원료의 혼합물을 65~70℃로 가열하여 완전히 용해시켰다.3) The mixture of 11-13 raw materials was heated at 65-70 degreeC, and was completely dissolved.
4) 65~70℃로 가열하면서 상기 2) 의 혼합물을 상기 3) 의 혼합물에 서서히 첨가하면서 rpm 8,000에서 2~3분간 유화시켰다.4) The mixture of 2) was emulsified for 2 to 3 minutes at rpm 8,000 while being slowly added to the mixture of 3) while heating to 65 to 70 ° C.
5) 14 의 원료를 소량의 물에 용해시킨 후 상기 4) 의 혼합물에 첨가하고 2분간 더 유화시켰다.5) The raw material of 14 was dissolved in a small amount of water, and then added to the mixture of 4) and emulsified for 2 minutes.
6) 15 내지 17 의 원료를 각각 평량한 후 상기 5) 의 혼합물에 넣고 30초간 더 유화시켰다.6) The raw materials of 15 to 17 were weighed, and then put into the mixture of 5) and emulsified for 30 seconds.
7) 상기 6) 의 혼합물을 유화 후 탈기과정을 거쳐 25~35℃로 냉각시켜, 유화제형을 제조하였다.7) The mixture of 6) was emulsified and then cooled to 25 ~ 35 ℃ through a degassing process, to prepare an emulsifier type.
<제조예 4-6: 가용화 제형>Preparation Example 4-6 Solubilized Formulation
가용화 제형의 제조방법은 다음과 같다.The preparation of the solubilized formulation is as follows.
1) 2 내지 6의 원료를 상기 1의 정제수에 넣고 아직믹서를 이용하여 용해시켰다.1) The raw materials of 2 to 6 were put into purified water of 1 above and dissolved using a still mixer.
2) 8 내지 11의 원료를 상기 7의 알코올에 넣고 완전용해시켰다.2) The raw materials of 8 to 11 were put in the alcohol of 7 and completely dissolved.
3) 상기 2)의 혼합물을 상기 1)의 혼합물에 서서히 첨가하면서 가용화시켰다.3) The mixture of 2) was solubilized with slow addition to the mixture of 1).
<실험예 4: 보존 안정성>Experimental Example 4: Storage Stability
상기에서 제조한 제조예 1 내지 6 의 제형에 대하여 화장품으로서 보존 안정성을 평가하였다. 보존 안정성을 확인하기 위하여 온도별 변화에 따른 안정성을 조사하고, 그 결과를 하기 표 6 에 나타내었다.The storage stability as a cosmetic was evaluated for the formulations of Preparation Examples 1 to 6 prepared above. In order to confirm the storage stability, the stability of the temperature-dependent change was investigated, and the results are shown in Table 6 below.
상기 표 6의 결과로부터, 본 발명에 따른 제형은 보존 안정성이 우수함을 알 수 있었다.From the results of Table 6, it can be seen that the formulation according to the present invention is excellent in storage stability.
상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 백화사설초 추출물을 함유한 피부 외용제 조성물은 주름개선효과, 콜라겐 생합성 촉진효과, 항염증효과가 우수하다.As described above, the external composition for skin containing the baekhwangsachocho extract of the present invention is excellent in wrinkle improvement effect, collagen biosynthesis promoting effect, anti-inflammatory effect.
특히, 본 발명의 백화사설초 추출물을 함유한 피부 외용제 조성물은 가용화 기술을 이용한 유연화장수 등 수용성 화장품 제형에서부터 유화기술을 응용한 영양화장수, 크림, 에센스 등 유화 화장품 제형으로 제공될 수 있고, 제형화된 경우에 보존 안정성도 우수하였다.In particular, the composition for external application for skin containing baekryeoksaengcho extract of the present invention can be provided as an emulsified cosmetic formulation, such as nutrient cosmetics, creams, essences, etc., applied to the emulsification technology from water-soluble cosmetic formulations, such as supple cosmetics using solubilization technology In this case, the storage stability was also excellent.
비록 상기에서 본 발명은 기재된 구체예를 중심으로 상세히 설명되었지만, 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 본 발명자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.Although the invention has been described in detail above with reference to the described embodiments, it will be apparent to those skilled in the art that various modifications and variations are possible within the scope and spirit of the invention, and the claims appended hereto. It is natural to belong to.
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