KR0185440B1

KR0185440B1 - 신규의 테트라 펩티트 유도체

Info

Publication number: KR0185440B1
Application number: KR1019940700418A
Authority: KR
Inventors: 교이찌 사까끼바라; 마사아끼 곤도; 고이찌 미야자끼
Original assignee: 야마구찌 다까시; 데이꼬꾸조오끼세이야꾸 가부시끼가이샤
Priority date: 1991-08-09
Filing date: 1992-08-06
Publication date: 1999-04-01
Also published as: GR3033397T3; EP0598129A1; EP0598129A4; AU662551B2; CA2115355C; EP0934950B1; DE69230824T2; AU2001095A; US6004934A; DE69232552D1; AU2415292A; ATE215962T1; WO1993003054A1; DK0934950T3; DE69232552T2; ES2144421T3; ATE190983T1; ES2172069T3; US5654399A; JP2618597B2

Abstract

[화학식 1]

[상기 식에서, R₁, R₂, R₃및 R₄는 동일하거나 상이하며, 각각 수소원자, 저급 알킬기 또는 아르알킬기를 나타내고 ; Q는또는 -A₂-R₇의 기를 나타내고, 여기에서, A₁은 직접 결합 또는을 나타내고, Y는을 나타내고, R₅는 수소원자, 저급 알킬기 또는 아르알킬을 나타내고, R₆은 히드록시, 저급 알콕시기, 아르알킬옥시기 또는(여기서, R₈및 R₇는 동일하거나 상이하며, 각각 수소원자, 저급 알킬기, 페닐기 또는 S, O 및 N으로 부터 선택되는 1 또는 2개의 헤테로 원자를 함유하는 4 ∼ 7 원의 복소환식를 나타내거나, 또는 R₈과 R₉는 이들이 결합하는 질소원자와 함께 S, O 및 N으로 부터 선택되는 1개의 헤테로 원자를 함유하고 있는 4 ∼ 7 원의 복소환식 고리를 형성하고 있어도 좋다) 를 나타내고, A₂는 직접 결합 또는 저급 알킬렌기를 나타내고, R₇은 시클로알킬기, 아릴기 또는 인돌릴기를 나타내고, 단, R₁및 R₂가 이소프로필기를 나타내고, R₃이 sec - 부틸기를 나타내고, R₄가 메틸기를 나타내고, 그리고 Q 가 α - (2 - 티아졸릴) 페네틸기를 나타내는 경우를 제외한다]로 표시되는 테트라펩티드 유도체 또는 그의 염은 드라스타틴 10 보다도 높은 세포 증식 억제 작용을 갖고 있으며, 항종양제로서 유용하다.

Description

[신규의 테트라펩티드 유도체]

본 발명은 항 종양 작용을 갖는 신규의 테트라펩티드 유도체에 관한 것이며, 더욱 상세하게는 화학식 1

[상기식에서, R₁, R₂, R₃및 R₄는 동일 또는 상이하며, 각각 수소원자, 저급 알킬기 또는 아르알킬기를 나타내고;

Q는또는 -A₂-R₇의 기를 나타내고, 식중, A₁은 직접 결합 또는을 나타내고, Y는 수소원자 또는 -COR₆을 나타내고, R₅는 수소원자, 저급 알킬기 또는 아르알킬을 나타내고, R₆은 히드록시기, 저급 알콕시기, 아르알킬옥시기 또는(여기서, R₈및 R₉는 동일 또는 상이하며, 각각 수소원자, 저급 알킬기, 페닐기 또는 S. O 및 N으로 부터 선택되는 1 또는 2개의 헤테로 원자를 함유하는 4∼7 원의 복소환식 기를 나타내거나 또는 Rg과 Rp는 이들이 결합하는 질소원자와 함께 S. O 및 N으로부터 선택되는 1개의 헤테로 원자를 함유하고 있어서 고리를 형성하고 있어도 좋다)를 나타내고, A₂는 직접 결합 또는 저급 알킬렌기를 나타내고, R₇시클로알킬기, 아릴기 또는 인돌릴기를 나타내고, 단, R₁및 R₂가 이소프로필기를 나타내고, R₃가 sec- 부틸기를 나타내고, R₄가 메틸기를 나타내고, 그리고 Q 가 α-(2 - 티아졸릴) 페네틸기를 나타내는 경우를 제외한다.]로 표시되는 테트라펩티드 유도체 또는 그의 염에 관한 것이다.

바다의 연체동물인 피새눈의 해산복족류연의 다쓰나미조개 (Dolabella auricularia) 로 부터 세포 생장 억제 작용 및 / 또는 항신생물 작용을 갖는 펩티드의 단리는 지금까지 몇가지 행하여 졌고, 이들의 펩티드는 드라스타틴 1∼15 라고 호칭되고 있다. 이중, 드라스타틴 10은 1987년 페티쓰트 등에 의해 인도양 산인 다쓰나미 조개로 부터 추출된 하기 구조식을 갖는 화합물로서 알려져 있다(페티쓰트 동, J. Am. Chem. Soc., 109 권 6883 면 (1987 년) 및 일본국 특개평 2-167278 호 공보 참조).

[드라스타틴 10]

또 최근에 이르러, 드라스타틴 10 그 자체의 전 합성에 관해서는 발표가 되었으나(미국 특허 제 4978744 호 참조). 그의 유도체에 관해서는 현재까지 전혀 알려져 있지 않다.

본 발명자들은 드라스타틴 10의 유도체에 관해서 연구를 거듭한 결과, 상기 화학식 1로 표시되는 어느 종류의 드라스타틴 10 유사체가 드라스타틴 10 보다도 높은 세포 증식 제어 작용을 갖는다는 것을 발견하였다. 또 이들 화합물의 대부분은 드라스타틴 10 보다도 치료 비율 (최대 유효량 / 30% 연명률의 용량) 가 크고, 또한 독성도 낮으므로 항종양제로서 우수하다는 것을 발견하였다.

즉, 드라스타틴 10 의 아미노산 유사체가 오리지날의 드라스타틴 10 보다도 고활성을 나타낼 뿐만 아니라, 의외로 그의 티아졸 고리에 카르복실 유도체를 도입함으로써, 그의 작용이 더욱 증강되는 것을 알아내었다. 또한 참으로 놀랄만한 일은 티아졸 고리를 제거한 유도체가 드라스타틴 10 보다도 훨씬 고활성이라는 것을 발견하였다.

이러한 발견을 근거로 완성한 본 발명의 형태를 이하의 3가지의 카테고리로 분류할 수 있다.

(1) 드라스타틴 10 의 아미노산 치환체 및 이들의 합성.

(2) 티아졸 고리의 카르복실 유도체 및 이들의 합성.

(3) 티아졸 고리를 제거한 테트라 펩티드 유도체 및 이들의 합성.

카테고리 (1)에 속하는 화합물 군의 합성에 관해서는 하기의 흐름도 (flow sheet) 1, 2, 3에서 설명하고, 카테고리 (2)에 속하는 화합물의 합성에 관해서는 하기의 흐름도 4.5에서 설명한다. 또 카테고리 (3)에 속하는 화합물 군의 합성에 관해서는 하기 흐름도 6에서 설명한다.

본 명세서에서 저급이란 용어는 이 용어가 붙여진 기 또는 화합물의 탄소 원자수가 6개 이하, 바람직하기는 4개 이하인 것을 의미한다.

상기 화학식 1에 있어서, 저급 알킬기는 직쇄상 또는 측쇄상의 어느것이라도 좋고, 예를 들면 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 이소헥실기 등을 들 수 있고, 아르알킬기는 아릴-저급 알킬기의 의미이며, 예를 들면 벤질, 페네틸기 등을 들 수 있다. 또 저급 알콕시기는 저급 알킬 부분이 상기한 의미를 갖는 저급 알킬-0-기이며, 예를 들면 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, tert-부톡시기 등이 포함되고, 아르알킬옥시기는 아르알킬 부분이 상기한 의미를 갖는 아르알킬-0-기이며, 예를 들면 벤질옥시, 페네틸옥시기등이 포함된다. 또한, 저급 알킬렌기는 직쇄상 또는 측쇄상의 어느 것이어도 좋고, 예를 들면 메틸렌, 에틸렌, 트리메틸렌, 테트라메틸렌, 메틸메틸렌, 프로필렌, 에틸에틸렌, 1, 2-디메틸에틸렌기 등을 들 수 있고, 시클로알킬기 로서는 예를 들면 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸기 등의 탄소 원자수 3∼7 개를 갖는 시클로알킬기를 들 수 있고, 아릴기로서는 예컨대 페닐, 나프틸기 등을 들 수 있다.

R₈또는 R₉에 있어서 (S. O 및 N으로 부터 선택되는 1 또는 2개의 헤테로 원자를 함유하는 4 ∼ 7 원의 복소환식기)를 나타내는 경우의 이복소환식기의 예로서는, 아제티디닐, 푸릴, 티에닐, 피리딜, 피페리디닐, 아제비닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 피리미디닐, 피리다닐기 등을 들 수 있고, 한편, R₈과 R₉가 (이들이 결합하는 질소원자와 함께 S, O 및 N으로 부터 선택되는 1개의 헤테로 원자를 함유하고 있어도 좋은 4 ∼ 7 원의 복소환식 고리)를 나타내는 경우의 이 복소환식 고리의 예로서는 아제티디노, 피롤리디노, 피레리디노, 1-퍼히드로아제피닐, 피레라지노, 모르폴리노, 디오모르폴리노기 등을 들 수가 있다.

또한,의 기의 예로서는, 아미노, 메틸 아미노, 에틸 아미노, 이소프로필아미노, tert - 부틸아미노, 디메틸아미노, 디에틸아미노, 페닐아미노, N - 메틸 - N - 페닐아미노, 푸릴아미노, 피리딜아미노, 2 - 티아졸릴아미노, 이미다졸릴아미노, 피리미디닐아미노, 피롤리디노, 피레리디노, 모르폴리노기 등을 들 수가 있다.

상기 화학식 1의 화합물에 있어서, 바람직한 1 군의 화합물은 Q 가(여기서 R₅는 상기한 바와 같다)을 나타내는 경우의 화합물이며, 이중에서도 특히 R₁, R₂, R₃, R₄및 R₅중 4개의 기가 드라스타틴 10 (R₁및 R₂가 이소프로필기이며, R₃이 sec-부틸기이며, R₄가 메틸기이며, R₅가 벤질기인 화합물) 과 같은 기를 나타내고, 나머지의 하나의 기만이 드라스타틴 10과 다른 기를 나타내는 경우의 화합물이 특히 적당하다.

또한, 바람직한 다른 1군의 화합물은 R₁및 R₂가 이소프로필기를 나타내고, R₃가 sec-부틸기를 나타내고, R₄가 메틸기를 나타내고, 그리고 Q가(여기서, R₅는 벤질기를 나타내고, R₆는 상기한 바와 같다)를 나타내는 경우의 화합물이다.

또한, 바람직한 다른 1군의 화합물은 Q가 -A₂-R₇(여기서 A₂는 저급 알킬렌기를 나타내고, R₇은 상기한 바와 같다)를 나타내는 경우의 화합물이며, 이중에서도 특히 R₁및 R₂가 이소프로필기를 나타내고, R₃가 sec-부틸기를 나타내고, R₄가 메틸기를 나타내고, 그리고 R₇이 아릴기를 나타내는 화합물이 적당하다.

그리고, 본 발명의 상기 화학식 1 의 화합물에 있어서, 치환기 R₁, R₂, R₃, R₄및 R₅과 메톡시기가 결합되어 있는 탄소원자는 부정 탄소원자이므로, 이들은 임의의 R 또는 S 의 입체 배치를 가질 수가 있고, 이들은 모두 본 발명의 범위에 포함되나 약리활성의 면에서 보면 드라스타틴 10과 같은 입체 배치를 갖는 화합물이 바람직하다.

본 발명에 의해 제공되는 상기 나타낸 화학식 1의 화합물의 대표예로서는 하기 실시예에 열거하는 것 외에 다음의 것을 들 수가 있다.

[화학식1a]

[화학식1b]

[화학식1c]

상기 각 기에 있어서, Me는 메틸기, Et는에틸기, Pr는 프로필기, Bu는 부틸기, Pe는 펜틸기, Bzl은 벤질기, Np는 나프틸기를 의미한다.

상기 화학식 1의 테트라펩티드 유도체는 염으로서 존재할 수가 있고, 이와 같은 염의 예로서는 염산염, 브롬화수소산염, 트리플루오로아세트산염, p-톨루엔술폰산염, 아세트산염을 들 수가 있다.

본 발명에 의하면, 상기 화학식 1의 테트라펩티드 유도체는, 예를 들면 펩티드-화학의 분야에서 주지된 액상 합성법 (이.슈레이더 및 케이.류부케 저 The peptides 제 1 권, 76 136 면, 1965 년, Academic Press 발행 참조)에 따라서 각 아미노산 또는 펩티드 프래그멘트를 축합시킴으로써 제조할 수가 있으나, 특히 하기 화학식 2 의 트리펩티드 프래그 멘트와,

(식중, R₁, R₂및 R₃은 상기한 바와 같다)

하기 화학식 3

(식중, R₄는 상기한 의미를 가지며, Q는또는 -A₂-R₇의 기를 나타내고, 여기서 Y₁은 수소원자 또는 메톡시카르보닐기를 나타내고, A₁, A₂및 R₇은 상기한 바와 같다)의 프래그멘트를 축합시킴으로써 합성하는 것이 상기 화학식 2 및 3 의 각 프래그 멘트의 합성의 용이성, 이들의 축합시에 있어서 라세미화의 문제가 없다는 것 등 때문에 가장 적합하다. 기 Q에 있어서 티아졸 고리의 4-위치의 치환기 Y 가 메톡시카르보닐기 이외의 기을 나타내는 경우의 화합물을 얻기 위해서는, Y 가 메톡시카르보닐기를 나타내는 화학식 1의 화합물을 제조한 후, 그 메톡시카르보닐기를 원하는 기로 변환시키면 된다.

반응은 일반적으로 불활성 용매, 예를 들면 클로로포름, 아세트산에틸, 테트라히드로푸란 (THF), 디메틸포름아미드 (DMF), 아세트니트릴 등 중에서, 필요에 따라 유기 염기, 예를 들면 트리에틸아민, N-메틸모르폴린, 디이소프로필에틸아민 (DIEA) 등의 존재하에, 축합제, 예를 들면 디시클로헥실 카르보디이미드 (DCC), 디페닐포스포릴아지드 (DPPA), 시아노인산디에틸 (DEPC), 이른바 BOP 시약 등으로 처리함으로써 수행할 수가 있다.

반응 온도는 통상 -10℃ 내지 실온, 바람지하게는 0℃ 전후이며, 화학식 2 의 화합물에 대한 화학식 3 의 화합물, 유기 염기 및 축합제의 각각의 사용 비율은 화학식 2의 화합물 1 몰당 화학식 3 의 화합물을 적어도 1 몰, 바람직하게는 1.0 ∼ 1.1 몰 정도 사용하고, 유기 염기는 2 몰 정도, 축합제는 등몰정도 사용하는 것이 유리하다.

기 Q에 있어서, 티아졸 고리의 4-위치의 치환기 Y 가 메톡시카르보닐기를 나타내는 화합물로 부터 기을 나타내는 화합물로의 변환은, 예를 들면 R₆이 히드록시기를 나타내는 경우는 알칼리 가수분해 함으로써 수행할 수가 있고, 또, R₆이 다른 저급 알콕시기 또는 아르알킬옥시기를 나타내는 경우는, R₆이 히드록시기를 나타내는 경우의 화합물을 통상적인 방법에 따라, 에스테르화 함으로써 수행할 수가 있고, 한편 R₆이를 나타내는 경우에는 암모니아, 1 급 아민 또는 2 급 아민으로 처리함으로써 용이하게 수행할 수 있다.

이렇게 해서 목적으로 하는 화학식 1의 테트라 펩티드 유도체가 생성되고, 반응 혼합물로 부터의 단리, 정제는 재결정, 이온 교환 크로마토그래피, 겔 여과, 고속 액체 크로마토그래피 등에 의해 수행할 수가 있다.

그리고, 반응에 있어서 출발원료로서 사용되는 상기 화학식 2 및 상기 화학식 3의 화합물은 종래의 문헌에는 기재되지 않은 신규한 화합물이며, 그의 구성 성분인 각 아미노산을 액상 합성법으로 축합함으로써 용이하게 제조할 수가 있다.

본 발명의 화학식 1 의 테트라 펩티드 유도체는 드라스타틴 10 보다도 높은 세포 증식 억제 작용을 갖고 있으며, 급성 골수 백혈병, 급성 임파구 백혈병, 만성 흑색종, 폐의 선암, 신경 아종, 폐의 소세포암, 흉부암, 결장암, 난소암, 방광암 등의 치료에 유용하다.

세포 성장 억제 작용의 스크리닝은 임파구 백혈병 P388 세포를 사용하여 수행하였다. 이 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

본 발명에 관한 화합물은 약제로서 사용하는 경우, 그 용도에 따라, 고체 형태 (예를 들면 정제, 경캡슐제, 연캡슐제, 과립제, 산제, 세립제, 환제, 트로치정 등), 반고체 형태 (예를 들면 좌제, 연고 등) 또는 액체 형태 (주사제, 유제, 현탁액, 로숀, 스프레이 등) 의 어느 하나의 제제 형태로 조제하여 사용할 수가 있다. 그리하여, 상기 제제에 사용할 수 있는 무독성의 첨가물로서는 예를 들면 전분, 젤라틴, 포도당, 유당, 과당, 말토오스, 탄산 마그네슘, 활석, 스테아르산 마그네슘, 메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스 또는 그의 염, 아라비아 고무, 폴리에틸렌글리콜, p-히드록시벤조산알킬에스테르, 시럽, 에탄올, 프로필렌글리콜, 와셀린, 카복스, 글리세린, 염화 나트륨, 아황산 나트륨, 인산 나트륨, 시트르산 등을 들 수 있다.

이 약제중에 있어서의 본 발명의 화합물의 함유량은 그의 제형에 따라 상이하나, 일반적으로 고체 및 반고체 형태의 경우에는 0.1 ∼ 50 중량 %의 농도로, 그리고, 액체 형태의 경우에는 0.05 ∼ 10 중량 % 의 농도로 함유하고 있는 것이 바람직하다.

본 발명의 화합물의 투여량은, 대상으로 하는 인간을 비롯한 온혈 동물의 종류, 투여 경로, 증상의 경중, 의사의 진단 등에 의해 광범위하게 변할 수가 있으나, 일반적으로 1 일당 0.01 ∼ 50mg/kg 정도로 할 수기 있다. 그러나, 상기와 같이 환자의 증상의 경중, 의사의 진단에 따라 상기 범위의 하한 보다도 적은 양 또는 상한 보다도 많은 양을 투여 하는 것도 가능하다. 상기 투여량은 1 일 1 회 또는 수회로 나누어서 투여할 수가 있다.

이하, 참고예 및 실시예에 의해 본 발명을 더 설명하겠다.

그리고, 참고예 및 실시예에서 사용되는 화합물 번호에 대응하는 화합물의 구조에 관해서는 이하의 흐름도 1 ∼ 6을 참조하기 바람. 여기서 Z는 벤질옥시카르보닐기, Me은 메틸기, Bu는 tert - 부틸기, Boc는 tert - 부톡시카르보닐기, Bzl은 벤질기를 나타내고, R, R, R, R, R, R및 -A-R는 상기한 의미를 갖고 있다.

[흐름도 1]

[흐름도 1a]

[흐름도 2]

[흐름도 3]

[흐름도 4]

[흐름도 5]

[흐름도 6]

[참고예 1-A]

화합물 1-A (화합물 1에서, R₃= CH₃인 화합물) 의 제조

Z - 알라닌 11.15g(50 밀리몰)을 테트라히드로푸란 140 ml에 용해시키고, 여기에 카르보닐이미다졸 9.72 g(60 밀리몰)을 투입하여 실온에서 4 ∼ 5 시간 교반한다.

한편, 말론산 모노 메틸에스테르 칼륨염 17.16 g (110 밀리몰) 과 무수 염화 마그네슘 7.60 g (80 밀리몰)을 테트라히드로푸란 150 ml에 현탁시켜 55℃ 의 수욕상에서 가온하면서 6시간 교반한다. 이어서 이 반응액을 빙내하고, 여기에 상기한 반응액을 한 번에 주입하고 바로 냉각욕을 제거하고 실온에서 24 내지 48 시간 교반을 계속하였다.

반응액에 물 소량을 가하고, 석출된 왁스상 침전으로 부터 맑은 상청액을 경사 분리하고, 이것을 감압 농축하여 유상물을 얻었다. 상기 왁스상잔류물 및 이 유상물 각각에 아세트산에틸 및 빙냉한 4N 염산을 가하여 흔들어 섞어서 양쪽을 합친후 분액하고, 수층을 다시 아세트산에틸로 추출하였다. 아세트산에틸층을 빙냉 2N 염산 및 포화 중조수로 씻고, 건조시키고, 용매를 증류제거하여 담황색 유상물 13.50 g을 얻었다. 실리카겔의 칼럼 크로마토그래피(용출액 : 아세트산에틸 - n - 헥산 (1:1))로 정제하고, 무색 미황색의 유상물로서 목적하는 화합물 1-A 를 얻었다. 12.96 g(92.9 %).

참고예 1-a 와 완전히 동일하게 하여 참고예 1-B, 1-C, 1-D, 1-E 를 수행하고, 화합물 1-B, 1-C, 1-D, 1-E 를 각각 유상물로서 얻었다.

[참고예 2-A]

화합물 2-A(화합물 2에서, R₃=CH₃인 화합물) 의 제조

참고예 1-A에서 얻은 화합물 1-A 12.96 g (46.45 밀리몰)을 메탄올 380 ml에 용해시키고, -78℃에서 교반하면서 수소화 붕소 나트륨 3.56 g (93.67 밀리몰)을 한 번에 투입하였다. 냉각 교반을 6 시간 계속한 후, 빙냉한 1N 염산을 서서히 가하고, 산성으로 된 것이 확인되면 감압 농축하고, 석출된 유상물을 아세트산에틸로 추출한다. 아세트산에틸층을 포화 중조수로 씻은 후 건조시키고, 용매를 증류제거하여, 결정 12.93 g 이 얻어졌다.

이소프로필에테르로 부터 재결정하여 목적하는 화합물 2-A 가 융점 78℃ 의 무색 침상 결정으로서 얻어졌다. 11.09 g (85.0 %)

참고예 2-A 와 완전히 동일하게 하여 참고예 2-B, 2-C, 2-D, 2-E 를 실시하고, 화합물 2-B, 2-C, 2-E 를 얻었다.

[참고예 3-A]

[화합물 3-A (화합물 3에서, R=CH인 화합물) 의 제조.]

화합물 2-A에서 얻은 화합물 2-A 9.78 g (34.80 밀리몰)을 디메틸프아미드 100 ml에 용해시키고, 산화은 40.0 g (172.41 밀리몰) 과 요오드화 메틸 50 ml을 가하고, 35℃ 의 수욕중에서 5 시간 교반한다. 여과하여 산화은을 디메틸포름아미드로 씻고, 여세액을 합쳐서 50℃ 이하에서 감압농축한다. 잔류물을 아세트산에틸로 충분히 추출하고, 아세트산에틸층을 5 % 티오황산 나트륨, 이어서 포화 중조수로 씻고, 건조시켜, 용매를 증류제거하여 황색 유상물 10.43 g을 얻는다. 실리카겔의 칼럼 크로마토그래피(용출액 : 벤젠-아세트산에틸 (5:1)로 정제하여 목적하는 화합물 3-A 를 미황색 유상물로서 얻었다. 7.63 g (71.0%).

참고예 3-A 와 완전히 동일하게 하여 참고예 3-B, 3-C, 3-D, 3-E 를 실시하고, 화합물 3-B, 3-C, 3-D, 3-E 를 각각 유상물로서 얻었다.

[참고예 4-A]

[화합물 4-A (화합물 4에서, R=CH인 화합물) 의 제조.]

화합물 3-A에서 얻은 화합물 3-A 6.60 g (21.36 밀리몰)을 디옥산 100 ml에 용해시켜, 1N 수산화 나트륨 2.35㎖(23.5 밀리몰)을 가하여 실온에서 2 내지 3 시간 교반하였다. 반응액에 20 % 시트르산을 가하여 pH 4.0으로 한 후 감압농축시켜 석출된 유상물을 아세트산에틸로 추출하였다. 아세트산에틸층을 포화 식염수로 씻고, 건조시켜 용매를 증류제거하여 무색 미황색의 유상물이 남았다.

이것을 디클로로메탄 60ml에 용해시켜 진한 황산 0.8 ml을 가하고, 내압 병속에서 이소부텐 25 ml 와 실온에서 48 내지 96 시간 흔들어 섞었다. 반응액을 포화 중조수에 주입하고, 질소 가스를 불어 넣어 이소부텐과 대부분의 디클로로메탄을 제거한 후 석출한 유상물을 아세트산에틸로 추출하고, 아세트산 에틸층을 포화 중조 수로 세정하여 남은 황색 유상물 (7.32 g)을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(용출액 : 벤젠 - 건조시켰다. 용매를 종류 제거하는 화합물 4-A 6.31 g (84.1 %)을 무색 미황색의 유상물로서 얻었다.

참고예 4-A 와 완전히 동일하게 하여 참고예 4-B, 4-C, 4-D, 4-E 를 실시하고, 화합물 4-B, 4-C, 4-D, 4-E 를 각각 유상물로서 얻었다.

[참고예 5-A]

[화합물 5-A(화합물 5에서,인 화합물) 의 제조]

참고예 4-A에서 얻은 화합물 4-A 0.70 g (2.00 밀리몰)을 t-부탄올·물(9 : 1) 20 ml에 용해시켜 5% 팔라듐 탄소 0.1 g을 가하여 수소 기류하 2 시간 교반하였다. 반응후 촉매를 여과하여 분리하고, 세정하고, 여세액을 감압농축하였다. 남은 유상물을 벤젠 30 ml에 용해시키고, 재차 감압 농축하고, 다시 이 조작을 1회 더 반복하였다. 얻어진 유상물을 Z - 발린 0.56g(2.23 밀리몰)과 함께 아세토니트릴 10㎖에 용해시키고, 빙냉교 반하 DDC 0.43g (2.09 밀리몰)을 투입하였다. 곧 결정이 석출되었다. 적어도 3시간 0℃에서, 그후 얼음이 녹는대로 하룻밤 교반을 계속한 후 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 결정을 여과로 분리하여 아세트산에틸로 씻는다. 여세액을 감압농축시켜 시럽상 잔류물을 아세트산에틸에 용해시키고, 불용물이 있으면 여과 분리시킨 후, 아세트산에틸 용액을 빙냉 2 N 염산 및 포화 중조수로 씻고, 건조시키고, 용매를 증류제거하여 무색 유상물 1.01 g을 얻었다. 실리키겔 칼럼 크로마토그래피 (용출액 : 벤젠 - 아세트산에틸 (5 : 1))로 정제하여 목적하는 화합물 5-A 0.67 g(74.4 %)을 무색 유상물로서 얻었다.

참고예 5 - A 와 완전히 동일하게 하여 이하의 화합물을 얻었다.

[참고예 6-A]

[화합물 6-A(화합물 6에서, R=, R₂=, R₃= CH₃ ^-인 화합물) 의 제조]

참고예 5-A에서 얻은 화합물 5-A 0.65 g (1.44 밀리몰)을 t-부탄올·물(9 : 1) 15 ml에 용해시켜 5% 팔라듐 탄소 50 mg을 가하여 수소 기류하 2 시간 교반하였다. 반응후 촉매를 여과분리, 세정하고, 여세액을 감압농축시킨다. 유상 잔류물을 벤젠 30 ml에 용해시켜, 다시 감압 농축하고, 이 조작을 또다시 1회 반복하였다. 얻어진 유상물을 디메틸포름아미드 6 ml에 용해시키고, N, N - 디메틸발린 0.25 g (1.72 밀리몰) 과 DEPC 0.29 g (1.78 밀리몰)을 가하고, 균일한 용액으로 될 때까지 실온에서 교반한 후 빙냉하고, 트리에틸아민 0.17 g (1.68 밀리몰)을 디메틸포름아미드 1 ml에 용해시킨 액을 4분간 적가하였다. 그후 적어도 4시간 0 ℃에서 얼음이 녹는 대로 하룻밤 교반한 후 투명한 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 아세트산에틸용액을 포화 중조수로 충분히 씻은 후 건조시켰다. 용매를 증류제거하고 남은 담갈색 유상물 0.66 g을 실리카겔 크로마토그래피 (용출액 : 아세트산에틸·헥산 (1 : 1))으로 정제하여 목적하는 화합물 6-A 0.46 g (71.9 %)을 무색 유상물로서 얻었다.

[α]_D ²⁷-56.5° (c=1.00, MeOH)

¹H-NMR(CDC1₃, δ) 0.8∼1.1(12H, m), 1.15(3H, d, J=7.0 Hz), 1.45(9H, s), 2.27(6H, s), 3.05(3H, s), 3.38(3H, s), 3.55∼3.85(1H, m), 4.35∼4.65(1H, m), 4.65∼4.95(1H, m), 0.88(1H, br, d)

참고예 6 - A 와 완전히 동일하게 하여 이하의 화합물을 얻었다.

* c=1.00, MeOH

** CHC1(c=0.315)

[참고예 7-A]

[화합물 7-A(화합물 7에서, R=H 인 화합물) 의 제조]

무수 테트라히드로푸란 10 ml에 23.8 % LDA 테트라히드로푸란 : 헥산 (1 : 1) 용액 7 ml(15.5 밀리몰)을 -20℃에서 질소 분위기하, 교반하면서 적가한다. 이어서 드라이 아이스 - 아세톤 욕에서 -78 ℃ 로 냉각한다. 아세트산 벤질 2.3 g (15 밀리몰)을 30 분에 걸쳐서 적가하고, -78 ℃에서 5 분간 교반한 후, Boc - L - 프롤리날 2.0 g (10 밀리몰)을 테트라히드로푸란 10 ml에 용해시킨 용액을 1시간에 걸쳐서 적가하였다. -78 ℃에서 10분간 교반한 후, 빙냉한 1N 인산 30 ml을 가하고, 실온까지 온도를 상승시킨다. 아세트산에틸로 추출하고, 수세 건조후 용매를 감압에서 증류제거하고, 헥산 : 아세트산에틸 (5 : 1)을 용출액으로 하는 실리카겔 플래시 크로마토그래피로 정제하고, 목적하는 화합물 7-A 1.12 g (32.0 %)을 유상물로서 얻었다.

[참고예 8-A]

[화합물 8-A(화합물 8에서, R₄=H 인 화합물) 의 제조]

참고예 7에서 얻은 화합물 7-A 560 mg (1.6 밀리몰)을 디클로로메탄 27 ml에 용해시켜 얼음 - 식염으로 냉각하여 BF₃Et₂0 202 μ1 (1.6 밀리몰)을 가하고, 디아조메탄 (32 밀리몰)의에테르 용액을 30분간 적가하였다. 얼음 - 식염으로 냉각하여 다시 2시간 교반후 포화 중조수 2 ml을 가하였다. 불용물을 여과하여 제거한 후, 아세트산에틸로 추출하여 수세하고, 건조시킨다. 용매를 감압에서 증류제거하여 헥산 : 아세트산에틸 (5 : 1)을 용출액으로 하는 실리카겔 플래시 크로마토그래피로 정제하여 유상의 목적의 화합물 8-A 를 378 mg(65.0 %) 얻었다.

[참고예 9-A]

[화합물 9-A(화합물 9에서, R₅=CH₃인 화합물) 의 제조]

시스테아민 염산염 6.82 g (60 밀리몰)을 디메틸포름아미드 50 ml에 용해시키고, 트리에틸아민 8.4 ml으로 중화한 용액과, Boc - 알라니놀 8.75 g (50 밀리몰)을 산화시켜 얻은 조 Boc - 알라니날을 디메틸포름아미드 50 ml에 용해시킨 용액을 혼합하여, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매를 감압에서 증류제거하여 생성된 결정을 아세트산에틸로 용해시켜 10% 시트르산, 포화 중조수로 세척한 후 아세트산에틸층을 건조시켰다. 용매를 감압에서 증류제거하여 백색 결정의 목적하는 화합물 9-A 4.93 g (42.6 %)을 얻었다.

[참고예 10-A]

[화합물 10-A(화합물 10에서, R₅=CH₃인 화합물) 의 제조]

참고예 9에서 얻은 화합물 9-A 1.34 g(5.77 밀리몰) 과 이산화 망간 12.5 g을 벤젠 58 ml 중 55 ℃에서 1.5 시간 교반하였다. 현탁액을 여과하여 용매를 감압에서 증류제거하고, 헥산 : 아세트산에틸 (5 : 1)을 용출액으로 하는 실리카겔 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 화합물 10-A 를 유상물로서 118 mg (9.0 %)을 얻었다.

[참고예 11-A]

[화합물 11-A(화합물 11에서, R⁴=H, R₅=PhCH₂인 화합물) 의 제조]

참고예 8에서 얻은 화합물 8-A 220 mg (0.604 밀리몰)을 T - 부탄올 : 물 (9 : 1) 9 ml에 용해시켜 팔라듐 탄소를 50 mg 가하여 수소기류하에 교반하였다. 반응 종료후, 반응액을 여과하여 용매를 감압하 증류제거하여 고형물 165 mg (0.604 밀리몰)을 수득하였다. 이것을 아세토니트릴 3 ml에 용해시키고, BOP 시약 267 mg (0.604 밀리몰). 기지 화합물인 화합물 10-B (화합물 10에서 R₅= CH₂PH 인 화합물) 로 부터 수득된 트리플루오로아세트산염 192 mg (0.604 밀리몰)을 가하고, 빙냉하 디이소프로필에틸아민 195 mg (1.51 밀리몰)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 교반한 후, 용매를 감압하 증류제거하여 디클로로메탄에 용해시키고, 10% 시트르산, 포화 중조수, 포화 식염수로 씻고, 건조시켰다. 용매를 감압하에 증류제거하고 얻어진 조 생성물을 디클로로메탄 - 메탄올 (50 : 1)을 용출액으로 하는 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 화합물 11-A 를 무정형 분말로서 262 mg (94.4 %) 수득했다.

[참고예 11-B]

[화합물 11-B(화합물 11에서, R₄=CH₃, R₅=CH₃인 화합물)]

참고예 11-A 와 완전히 동일하게 하여 기지 화합물인 화합물 8 - B (화합물 8에서, R₄= CH₃인 화합물) 과 참고예 10에서 얻은 화합물 10-A 를 처리하여, 목적하는 화합물 11-B를 얻었다. 수율 62.0 %, 유상물.

[참고예 12-A]

[화합물 12-C(화합물 13에서, R₆=OCH₂Ph 인 화합물) 의 제조]

기지물인 화합물 13 - A ( 화합물 13에서, R = OCH₃인 화합물) 0.87 g (2.4 밀리몰)을에탄올 5 ml에 용해시켜 1 N 수산화 나트륨 3 ml을 가하였다. 실온에서 30 분간 교반 후 용매를 감압에서 증류제거하고 물을 가하여 시트르산으로 산성으로 한 후, 아세트산에틸로 추출하였다. 수세하여 무수황산 나트륨으로 건조시키고, 용매를 감압에서 증류제거하여 화합물 13 - B (화합물 13에서, R₆= OH 인 화합물)의 결정 0.68 g(83.3 %) 이 얻어졌다.

이 결정 70 mg (0.2 밀리몰)을 디클로로메탄 0.5 ml에 용해시키고, 4 - 디메틸아미노피리딘 2.4 mg (0.02 밀리몰), 벤질알콜 30 mg (2.4 밀리몰)을 가하고, 빙냉하 DCC 50 mg (2.4 밀리몰)을 가하였다. 빙냉하 1 시간 교반후 실온에서 하룻밤 교반하였다. 석출된 결정을 여별한 후, 여액을 아세트산에틸로 희석하고, 포화 중조수, 포화 식염수로 씻고, 건조시켰다. 용매를 감압에서 증류제거하여 얻어진 조 생성물을 TLC「전개 용매, 헥산 : 아세트산에틸 = 2 : 1」 로 정제하여 융점 111.5 113.4℃의 결정 (화합물 13 - C) 79.6 mg (91.0 %)을 얻었다.

[참고예 12-B]

[화합물 13-D(화합물 13에서, R₆=NHPh 인 화합물) 의 제조]

화합물 13 - B 28.2 mg (0.0809 밀리몰)을 디클로로메탄 0.5 ml에 용해시키고, BOP 시약 35.8 mg (1.0 당량) 및 아닐린 9mg (1.2 당량)을 가하고, 빙냉하 디이소프로필에틸아미 15.7 mg (1.5 당량)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 교반한 후 반응액을 감압농축하였다. 이것을 디클로로메탄에 용해시켜 10 % 시트르산수, 포화 중조수, 포화 식염수로 세척하여 건조시켰다. 조 조성물을 헥산 - 아세트산에틸 (2 : 1)을 전개용매로 하는 preparative TLC 로 정제하여 목적하는 화합물 13 - D 35 mg (100 %)을 결정으로서 얻었다.

동일하게 하여 참고예 12-C, 12-D 를 실시하고, 이하의 화합물을 얻었다.

[참고예 13-A]

[화합물 15-A(화합물 15에서, R=CH, R= OCH인 화합물) 의 제조]

기지물인 화합물 13-A 330 mg (0.91 밀리몰)을 디클로로메탄 1.4 ml에 용해시켜 빙냉하, 트리플루오로아세트산을 0.6 ml 가하여 실온에서 1.5 시간 교반하였다. 용매를 감압에서 증류제거하고에테르를 가하여 결정화 하였다. 이 백색 결정을 여취하여 건조시켰다. 수율 339 mg (98.9 %).

이 결정 314 mg (0.835 밀리몰)을 아세토니트릴 4.2 ml에 용해시켜 BOP 시약 369 mg (0.835 밀리몰 ) 및 기지물인 화합물 14 (R= CH) 240 mg (0.835 밀리몰)을 가하고, 빙냉하 디이소프로필에틸아민 270 mg (2.09 밀리몰)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 교반시킨후 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 10% 시트르산수, 포화 중조수, 포화 식염수로 세척하고 건조시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 - 메탄올 (50 : 1)을 용출액으로 하는 실리카겔의 칼럼 크로마토그래피로 정제하고, 목적하는 화합물 15 - A 431 mg (97.1 %)을 분말로서 얻었다.

참고예 13 - A 와 동일하게 하여 이하의 화합물을 얻었다.

[참고예 14-A]

[화합물 17-A (화합물 17에서, -A-R= CHCH-Ph 인 화합물) 의 제조]

기지 화합물 8-B (화합물 8에서, R= CH의 화합물) 로 부터 참고예 11에 따라서 얻어지는 카르복실산 30.5 mg (0.106 밀리몰)을 아세토니트릴 1 ml에 용해시키고, BOP 시약 51.6 mg (1.1 당량) 및 페네틸아민 14.1 mg(1.1 당량)을 가하고, 빙냉하 디이소프로필에틸아민 20.6 mg(1.5 당량)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 교반한 후 반응액을 감압농축시켰다. 이것을 디클로로메탄에 용해시켜 10 % 시트르산수, 포화 중조수, 포화 식염수로 씻어서 건조시켰다. 조 조성물을 디클로로메탄 - 메탄올 (10 : 1)을 전개 용매로 하는 preparative TLC 로 정제하고, 목적하는 화합물 17 - A 38.3 mg (92.5 %)을 분말로서 얻었다.

참고예 14 - A 와 완전히 동일하게 하여 이하의 화합물을 얻었다.

[참고예 15]

[화합물 18-A (-A-R=인 화합물) 의 제조]

화합물 8을 출발 원료로하고, 흐름도 6에 표시한 바와 같이 탈벤질화 (참고예 11 참조), 탈 BOC 화, Z 화의 각 공정을 경유하여 얻은 Z 화 카르복실산과 트립타민으로부터 참고예 14-A 와 동일하게 하여 화합물 18-A 를 얻었다.

[실시예 1]

[화합물 12-A (화합물 12에서, R₁, R₂=, R₄= CH₃, R₅= PhCH₂인 화합물) 의 제조]

참고예 6-G에서 얻은 화합물 6-g 108 mg (0.222 밀로몰)에 빙냉하 진한 염산 1 ml을 가하여 1시간 교반하였다. 감압 건고시킨후, 디메틸포름아미드 2 ml에 용해시켜 빙냉하면서 트리에틸아민 0.15 ml을 가하였다.

트리에틸아민 염산염이 석출되어 나오나, 그대로 건고하여 건조시켰다. 한편 기지 화합물인 화합물 11-C (화합물 11에서, R₄=CH₃, R₅=PhCH₂인 화합물 ) 105 mg (0.222 밀리몰)을 아세트산에틸 0.4 ml에 용해시켜 빙냉하 2N 염화수소/아세트산에틸을 3.3 ml 가하였다. 실온에서 1 시간 교반한 후 용매를 감압에서 증류제거하고 건조시켰다. 얻어진 흡습성 결정을 디메틸프름아미드 1.6 ml에 용해시켜 상기한 트리펩티드 카르복실산에 가하여 빙냉하 90% DEPC 40 mg (0.222 밀리몰)과 트리에틸아민 62 μ1 (0.444 밀리몰)을 가하였다. 빙냉하 1시간 교반후, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매를 감압에서 증류제거하여 디클로로메탄에 용해시켜 포화 중조수, 포화 식염수로 세척하여 건조시켰다. 용매를 증류제거한 후, 디클로로메탄 - 메탄올 (20 : 1)을 용출액으로 하는 실리카겔의 플래시 크로마토그래피로 정제하여 목적물을 함유하는 분획을, 또한 헥산 : 디클로로메탄 : 메탄올 (2 : 7.5 : 2.5)을 용출액으로 하는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 화합물 12-A를 무정형 분말로서 137 mg(78.4 %)을 얻었다.

[실시예 2∼14]

실시예 1 과 완전히 동일하게 실시예 2∼14 를 실시하고, 이하의 화합물을 얻었다.

[실시예 15]

[화합물 16-A(화합물 16에서, R=, R₂=, R₃=, R₄= CH₃, R₆= OCH₃인 화합물) 의 제조]

화합물 6-H 93 mg (0.192 밀리몰)에 빙냉하에 진한 염산 0.5 ml을 가하여 1시간 교반하였다. 감압 건고시킨 후, 디메틸포름아미드 2 ml에 용해시키고, 빙냉하면서 트리에틸아민 0.15 ml을 가하였다.

트리에틸아민 염산염이 석출되지만, 그대로 감압 건고시켜 건조시켰다.

한편, 참고예 13-A에서 얻은 화합물 15-A 102 mg (0.192 밀리몰)을 아세트산에틸 0.4 ml에 용해시켜 빙냉하 2N 염화수소/아세트산에틸을 3.3 ml 가하였다. 실온에서 1 시간 교반한 후 용매를 감압에서 증류제거하고 건조시켰다. 얻어진 흡습성 결정을 디메틸vh름아미드 0.8 ml에 용해시켜 상기한 트리펩티드 카르복실산에 가하여 빙냉하 90% DEPC 35 mg (0.192 밀리몰)과 트리에틸아민 54 μ1 (0.384 밀리몰)을 가하였다. 빙냉하 1시간 교반 후, 실온에서 하룻밤 교반하였다.

용매를 감압에서 증류제거하여 디클로로메탄에 용해시켜 포화 중조수, 포화 식염수로 세척하여 건조시켰다. 용매를 증류제거시킨 후, 디클로로메탄 : 메탄올 (30 : 1)을 용출액으로 하는 실리카겔의 플래시 크로마토그래피로 정제하여, 목적물 분획을 다시 헥산 : 디클로로메탄 : 메탄올 (2 : 7.5 : 2.5)을 용출액으로 하는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 화합물 16-A를 무정형 분말로서 100 mg(62.0 %)을 얻었다.

[실시예 16∼22]

실시예 15에 따라서 실시예 16∼22 를 실시하고, 이하의 화합물을 얻었다.

[실시예 23]

[화합물 16-I(화합물 16에서, R=, R₂=, R₃=, R₄= CH₃, R₆= OBu^t인 화합물) 의 제조]

1. 화합물 16-A 120 mg (0.142 밀리몰)을 디메틸포름아미드 5 ml에 용해시켜 빙냉하 1N 수산화 나트륨을 0.16 ml 가하였다. 빙냉하에서 30분간, 이어서 실온에서 90분간 교반하였다. 빙냉하에 1N 염산을 0.16 ml 가한 후, 용매를 감압에서 증류제거하여, 디클로로메탄에 용해시키고, 석출된 염화 나트륨을 여과제거 하였다. 여액을 헥산 : 디클로로메탄 : 메탄올 (2 : 7.5 : 2.5)을 용출액으로 하는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피로 정제하였다. 목적물을 재차 물에 용해시켜서 동결건조시키고, 화합물 16 카르복실산 (R₆=OH) 의 분말 114 mg (96.5 %)을 얻었다.

상기 카르복실산 30 mg (0.024 밀리몰)을 디클로로메탄 0.5 ml에 용해시키고, 드라이아이스 - 아세톤으로 냉각하 진한 황산 10 ㎖1와 이소부텐 1 ml을 가하여, 봉관중 2일간 교반하였다. 반응액에 포화 중조수 5 ml을 가하여 디클로로메탄으로 추출하고, 수세 후 건조시켰다. 용매를 감압에서 증류제거하여 헥산 : 디클로로메탄 : 메탄올 (2 : 7.5 : 2.5)을 용출액으로 하는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피로 정제하고, 목적물의 화합물 16-I을 무정형 분말로서 13 mg(62.5 %)을 얻었다.

[실시예 24]

[화합물 16-J(화합물 16에서, R₁=, R₂=, R₃=, R₄= CH₃, R₆=인 화합물) 의 제조]

화합물 16 카르복실산 (R₆= OH) 21.5 mg (0.026 밀리몰)을 아세토니트릴 0.5 ml에 용해시키고, BOP 시약 11.5 mg (1 당량) 및 2 - 아미노티아졸 2.6 mg (1당량)을 가하고, 빙냉하 디이소프로필에틸아민 5 mg (1.5 당량)을 적가 하였다. 실온에서 하룻밤 교반한 후 반응액을 감압농축시켰다. 이것을 디클로로메탄에 용해시켜 10 % 시트르산수, 포화 중조수, 포화 식염수로 세척하여 건조시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 - 메탄올 (10 : 1)을 전개 용매로 하는 preparative TLC 로 분취하여 목적물 분획을 다시 헥산 : 디클로로메탄 : 메탄올 (2 : 7.5 : 2.5)을 용출액으로 하는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피로 정제하고, 목적하는 화합물 16 - J 13.7 mg (57.7 %)을 무정형 분말로서 얻었다.

[실시예 25]

[화합물 16-K(화합물 16에서, R₁=, R₂=, R₃=, R₄= CH₃, R₆= NH₂인 화합물) 의 제조]

화합물 16-A 21 mg (0.025 밀리몰)을 암모니아 - 포화 메탄올 3 ml에 용해시켜 실온에서 1시간 방치하였다. 용매를 감압에서 증류제거하여 헥산 : 디클로로메탄 : 메탄올 (2 : 7.5 : 2.5)을 용출액으로 하는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피로 정제하여, 목적하는 화합물 16 - K 를 무정형 분말로서 20 mg (96.0 %) 얻었다.

[실시예 26∼27]

실시예 25 의 암모니아 포화 메탄올 대신에 70 %에틸아민 수용액 또는 5 % 디메틸아민 수용액을 사용하여 하기 표에 나타낸 화합물을 얻었다.

[실시예 28]

[화합물 19-A(화합물 19에서, R=, R₂=, R₃=, -A₂-R₇=CH₂CH₂Ph 인 화합물) 의 제조]

화합물 6-H 27.7 mg (0.057 밀리몰)을 디클로로메탄 0.3 ml에 용해시켜서, 빙냉하 트리플루오로아세트산을 0.3 ml 가하였다. 실온에서 1 시간 교반 후, 용매를 감압에서 증류제거한 후, 충분히 감압 건조시켰다. 한편, 화합물 7-A 22.3 mg (0.057 밀리몰)을 빙냉하 1N 염화 수소 / 아세트산에틸에 용해시켜 실온에서 1시간 교반하였다. 용매를 감압에서 증류제거하여 건조시키고, 디메틸프름아미드 0.5 ml에 용해시키고, 상기한 트리펩티드 카르복실산에 가하여, 빙냉하 95 % DEPC 9.8 mg (1.0 당량) 과 트리에틸아민 16 μ1 (2 당량)을 가하였다. 빙냉하 1시간 교반 후, 실온에서 하룻밤 교반하였다.

용매를 감압에서 증류제거하고 디클로로메탄에 용해시켜, 포화 중조수, 포화 식염수로 씻어 건조시켰다. 용매를 증류제거시킨 후 디클로로메탄 - 메탄올 (10 : 1)을 전개 용매로 하는 preparative TLC 로 분취하고, 목적물 분획을 다시 헥산 : CH₂C1₂: MeOH (2 : 7.5 : 2.5)을 용출액으로 하는 세파덱스 LH-20 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 화합물 19 - A를 35.8 mg (89.5 %)을 무정형 분말로서 얻었다.

실시예 28과 동일하게 하여 이하의 화합물을 얻었다.

[실시예 39]

[화합물 19-L(화합물 19에서, R=, R₂=, R₃=, -A₂-R₇=인 화합물) 의 제조]

화합물 18-A 를 참고예 5 - A에 따라 Z 를 제거한 생성물과, 화합물 6-H 를 실시예 28에 따라 반응시켜서 목적하는 화합물 19-L을 얻었다.

Claims

[화학식 1]

[상기 식에서, R₁, R₂, R₃및 R₄는 동일하거나 상이하며, 각각 수소원자, 저급 알킬기 또는 아르알킬기를 나타내고 ; Q는또는 -A₂-R₇의 기를 나타내고, 여기에서, A₁은 직접 결합 또는을 나타내고, Y는을 나타내고, R₅는 수소원자, 저급 알킬기 또는 아르알킬을 나타내고, R₆은 히드록시, 저급 알콕시기, 아르알킬옥시기 또는(여기서, R₈및 R₇는 동일하거나 상이하며, 각각 수소원자, 저급 알킬기, 페닐기 또는 S, O 및 N으로 부터 선택되는 1 또는 2개의 헤테로 원자를 함유하는 4 ∼ 7 원의 복소환식을 나타내거나, 또는 R₈과 R₉는 이들이 결합하는 질소원자와 함께 S, O 및 N으로 부터 선택되는 1개의 헤테로 원자를 함유하고 있는 4 ∼ 7 원의 복소환식 고리를 형성하고 있어도 좋다) 를 나타내고, A₂는 직접 결합 또는 저급 알킬렌기를 나타내고, R₇은 시클로알킬기, 아릴기 또는 인돌릴기를 나타낸다] 로 표시되는 테트라펩티드 유도체 또는 그의 염.
제1항에 있어서, Q 가(여기서, R₅및 Y는 제 1항에 정의한 바와 같다) 를 나타내는 테트라펩티드 유도체 또는 그의 염.
제2항에 있어서, R₁및 R₂가 이소프로필기를 나타내고 R₃이 sec - 부틸기를 나타내고, R₄가 메틸기를 나타내고, R₅가 벤질기를 나타내는 테트라 펩티트 유도체 또는 그의 염.
제1항에 있어서, Q 가 -A₂-R₇의 기를 나타내고, 여기서 A₂가 저급 알킬렌기를 나타내는 테트라펩티드 유도체 또는 그의 염.
제4항에 있어서, R₁및 R₂가 이소프로필기를 나타내고, R₃이 sec - 부틸기를 나타내고, R₄가 메틸기를 나타내고, 그리고 R₇이 아릴기를 나타내는 테트라펩티드 유도체 또는 그의 염.
제1항 기재의 테트라 펩티드 유도체 또는 그의 염을 유효 성분으로 하는 항종양제.