KR0137206B1 - 분무용 겔 기제와 이것을 사용한 분무용 겔제 - Google Patents

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Description

분무용 겔 기제와 이것을 사용한 분무용 겔제

본 발명은 분무에 적합한 겔(Gel) 기제(基劑) (이하 분무용 겔 기재 라 함) 및 상기한 분무용 겔 기제를 활성 약물과 균일하게 혼합하여 제조된 분무에 적합한 겔제(gel preparation) (이하 분무용 겔제라 함)에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 카르복시비닐 폴리머(carboxyvinyl polymer)(이하 CVP라 함) 수용액을 수용성 염기성 물질로 점성을 증대시켜 제조된 전착성(展着性)이 우수한 분무용 겔 기제 및 이 기제에 활성 약물을 균일하게 혼합하여 된 분무용 겔제에 관한 것이다.

분사제로서 플루오르화 탄화수소 (hydrocarbon fluoride) [즉, 프레온 (Freon), 듀폰사의 상품명]를 이용한 에어로졸 (aerosol) 등의 분무제 및 수동 가압에 의한 활성 약물 수용액의 분무제 등이 현재 공지되어 있다. 이들 중에서 분사제로서 플루오르화 탄화수소 (프레온)를 사용하는 에어로졸은; (1) 분무된 활성 약물 또는 활성 약물을 함유하는 분말은 분무 부위에서 용해되어 약리 작용을 발휘하여야 하나 잘 용해되지 않으므로 에어로졸은 약리 작용을 최대한으로 발휘하는데 있어서 활성 약물 수용액으로 된 분무제 보다 뒤떨어지고. (2) 더욱이 플루오르화 탄화수소 자체와 가스 분무압 때문에 분무 부위에 대하여 물리적 자극이 있으며, (3) 그리고 플루오르화 탄화수소가 성층권 내에서의 오존(ozone) 함유량에 심각한 영향을 주므로, 사용 규제의 대상이 되고 있기 때문에 바람직하지 못하다.

한편, 활성 약물의 수용액을 수동 가압으로 분무하는 분무제가 에어로졸에서의 상기한 결점을 가지고 있지 않더라도 다른 여러 가지 결점들이 있다. 즉, 활성약물 수용액의 분무가 전착성이 불량하므로 분무 부위에서부터 활성 약물 수용액이 흘러떨어지기 때문에 사용할 때에 불안감이 있게 되며, 고정된 부위에 활성 약물의 소요량을 투여할 수가 없고, 활성 약물이 물에 용해하지 않을 경우에는 활성 약물을 함유하는 제제를 균일하게 제조할 수가 없다

상기한 상황하에서 예컨대, 분무기의 분무 노즐의 크기를 최소화하여 분무시 입자크기를 훨씬 작게 하는 등의 몇가지 수단에 의해 액체 방울이 떨어지지 않도록 시도하고 있다. 그러나, 이러한 수단에 의해서도 액체 방울이 흘러떨어지는 문제는 아직도 해결되지 않고 있으므로 액체 방울이 흘러떨어지는 일이 없이 분무 부위에서 적절하게 소요량의 활성 약물을 유지할 수 있는 수단을 개발하고자 하는 연구가 수행되어 왔다.

분무시에 활성 약물 수용액으로 된 분무제의 전착성을 개선하기 위해서는 일반적으로 증점제 (增粘濟)로서 널리 사용되고 있는 수용성 고분자 화합물, 예를 들어, 히드록시프로필 셀룰로오스, 히드록시프로필 메틸셀룰로오스, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 피롤리돈, 젤라틴, 알긴산 나트륨 등을 사용하면 상기한 활성 약물 수용액의 점도를 높이는데 효과적이다. 그러나, 본 발명자들의 연구에 따르면 이들 종래의 증점제들을 사용할 때는 활성 약물의 수용액은 분무기로부터 분사될 수 없거나, 그것이 분사될 수 있다 하더라도 그 분사액은 안개 같은 형태가 되지 않고 물기둥 같이 되므로 상기한 문제점은 이러한 수단으로서는 미해결인 채로 되어 있다.

분무용 제제에 대한 철저한 연구에서 본 발명자들은 수용성의 염기성 물질로 CVP 수용액의 점도를 증가시켜 제조된 겔 기제가 분무기에서의 분무성이 양호한 반면, 이렇게하여 제조된 겔 기제는 상기한 종래의 증점제를 사용하여 제조된 용액과 비교하여 높은 점도를 가지며, 또한 액의 흘러떨어짐도 생체에 적용하는 경우를 제외하고 상기한 겔 기제를 사용함으로써 방지할 수 있다는 것을 발견하였다. 그러나, 본 발명자들은 CVP로부터 만든 상기한 겔 기제에서 다음과 같은 결점을 발견하였다. 즉, 분무 전에 높은 CVP 용액의 점도는 분무를 함으로써 어느 정도 저하하게 되고, 점막이나 피부와 같은 생체에 적용하면 용액의 점도는 분무 부위에서 급격히 감소하여 액의 흘러떨어짐이나 함유된 소요량의 활성 약물을 적절하게 유지할 수 있다. 이상에서 말한 결점을 해결하기 위하여 본 발명자들은 CVP를 높은 비율로 사용함으로써 활성 약물 용액의 점도를 증가시키고자 시도하였으나 이 경우에 있어서 그것을 분무하는 데는 높은 분무압이 필요하였고, 적용 부위에서 높은 분무암으로 인해 자극이 있었다.

더욱이, 이러한 높은 점도를 가진 용액을 강제로 분무하면 용액의 입자 크기는 대단히 크게 되며,

용액의 점도가 더욱 높아지면 분무할 수 없게 된다.

상기한 사정하에서 본 발명자들은 더욱 더 강도 높은 연구를 거듭한 결과, 비교적 높은 농도의 CVP를 함유하는 수용액을 수용성 염기물질로 점도를 증대시켜 비교적 높은 점도의 겔 (gel)을 얻은 다음 그 점도를 점도 조정제로 500-5,000 센티포이즈 (cp) (centipoise) 범위로 조정하면, 우수한 성질을 가진 소용의 분무용 겔 기제를 얻을 수 있다는 것을 뜻밖에 발견하였다. 즉, 상기한 방법으로 제조한 분무용 겔 기제는 분무 전후 사이에 점도변화가 작고 우수한 성질을 가진 소요의 분무용 겔 기제를 얻을 수 있다는 것을 뜻밖에 발견하였다. 즉, 상기한 방법으로 제조한 분무용 겔 기제는 분무 전후 사이에 점도변화가 작고 우수한 전착성을 나타내므로 그것을 점막이나 피부 같은 생체에 적용할 경우 적용 부위로부터 흘러떨어지는 일이 없다. 더욱이, 본 발명자들은 활성 약물과 상기한 겔 기제를 혼합하여 제조한 분무용 겔제는 또한 대단히 우수한 특성을 가지고 있어 점막이나, 피부 같은 생체에 대하여 계속해서 활성 약물을 방출할 수 있다는 것을 발견하였다.

본 발명의 목적은 수용성의 염기성 물질로 비교적 고농도의 CVP함유 수용액의 점도를 증대시킨 다음 증점된 용액의 점도를 점도 조정제로써 일정한 범위로 조정하여 제조되는 우수한 전착성과 생체 적용시 흘러내림이 없는 분무용 겔 기제를 제공함이 있다. 본 발명의 기타 목적은 생체에 적용했을 때 활성 약물의 우수한 흡수력을 가진 활성 약물과 상기한 겔 기제를 균일하게 혼합하여 제조한 분무용 겔제를 제공함에 있다. 본 발명의 여러 가지 목적과 장점들은 다음 설명에서부터 명백해질 것이다.

본 발명은 CVP를 0.2-1.5 wt. % 함유하는 수용액을 수용성 염기물질로써 점도를 증대시키고, 그 점도를 점도 조정제로써 500-5,000 cp 범위내로 조정하여 분무 후의 분무 입도(粒度) 분포가 20-100 ㎕ 의 범위에서 80% 이상이 되게 한 활성 약물과 분무용 겔 기제 함유의 우수한 전착성을 가진 분무용 겔 기제를 제공한다.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.

본 발명의 분무용 겔 기제에서 사용된 CVP 는 아크릴산을 주(主)단량체 성분으로 하여 종합하여 제조되는 친수성 폴리머이고, 종래의 카아보폴(Carbopol) 934,934P, 940 및 941 [미합중국의 (Goorich사에서 시판)] 등을 포함한다. 본 발명에서 사용된 CVP 수용액의 농도는 일반적으로 0.2-1.5 wt. % 범위내에 있다.

본 발명에서 사용된 수용성 염기물질은 CVP수용액을 증점(增粘)시켜 그의 점도를 증대시킬 목적으로 사용된다. 본 발명의 수용성 염기물질의 적절한 예로서는 무기 기제 (예 : 수산화 나트륨, 수산화 칼륨, 암모니아 등)와 유기 기제 [예 : 알칼아민 (예 : 메틸아민, 에틸아민, 프로필아민 등), 디알킬아민 (예 : 디메틸아민, 디에틸아민, 디프로필아민 등), 트리알킬아민 (예 : 트리메틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민 등), 알칸올아민 (예 : 메탄올아민, 에탄올아민, 프로판올아민 등), 디알칸올아민 (예 : 디메탄올아민, 디에탄올아민, 디프로판올아민 등), 트리알칸올아민 (예: 트리메탄올아민, 트리에탄올아민, 트리프로판올아민 등), 아미노산 (예 아르기닌, 리신, 오르니틴 등)등]를 포함한다. 이들 수용성 염기들은 CVP수용액의 pH 값을 소망하는 pH 값으로 조정하기 위한 중성화에 필요한 양으로 사용된다.

본 발명의 점도 조정제는 CVP를 0.2-1.5 wt. % 함유하는 수용액을 수용성 염기물질로 증점시켜 제조된 비교적 고점성의 겔의 점도를 조정하여 분무 후의 분무 입도 분포가 20∼100㎛의 범위에서 80% 이상이 되도록 할 목적으로 사용된다. 본 발명의 적절한 점도 조정제는 예를 들어 염화 나트륨, 염화 칼륨, 염화 칼슘 같은 것들을 포함한다. 본 발명의 점도 조정제는 모든 성분의 총량에 대하여 0.01-10.2wt. % 의 비율로 사용되는 것이 바람직하다. 한편, 점막에 적용될 경우 점도 조정제의 양은 점도 조정제로 인한 삼투압의 변화를 고려하여 결정하여야 한다.

본 발명의 분무용 겔 기제의 점도를 조정함에 있어서 분무 후의 분무 입도 분포가 20-100㎛의 범위 안에서 80% 이상이 되도록 하는 것이 바람직하다. 분무 후의 분무 입도 분포가 상기한 범위내에 있는 경우에서만 본 발명의 분무용 겔 기제는 우수한 전착성을 가지며, 그 점도는 분무 전후에서 변하지 않는다.

본 발명의 분무용 겔 기제는 교반하에 CVP를 0.2-1.5wt. % 함유하는 수용액에 수용성 염기물질을 첨가하고, 이 혼합물을 균일하게 혼합하여 점성겔을 제조한 다음 교반하에 점도 조정제를 첨가하여 소요의 점도를 얻음으로써 제조할 수 있다. 점도 조정제가 결정형태인 때에는 그대로 첨가할 수도 있으나, 수용액의 형태로 첨가되는 것이 더욱 바람직하다. 왜냐하면 수용액 형태로 첨가되면 점도의 급격한 변화가 없고 점도가 균일하게 변화하기 때문이다.

본 발명의 분무용 겔 기제의 pH 값은 활성 약물의 안정성 또는 흡수성을 고려하여 수용성 염기물질 또는 기타 pH 조정제로 조정한다.

본 발명의 분무용 겔제는 CVP를 0.2-1.5 wt.% 함유하는 수용액을 수용성 염기물질로 증점시킨 다음, 활성 약물과 균일하게 혼합한 후 상기한 분무용 겔 기제와 같은 방법으로 혼합물의 점도를 조정하여 제조한다. 더욱이 활성 약물의 종류에 따라 본 발명의 분무용 겔제는 CVP를 0.2-1.5 wt.% 함유하는 수용액 중에 활성 약물을 먼저 용해 또는 분산시킨 다음 교반하에 수용성 염기물질을 첨가하여 균일하게 혼합한 후 상기와 같은 방법으로 혼합물의 점도를 조정하여 제조한다.

수용성 및 수불용성의 약물 두가지를 본 발명의 활성 약물로서 사용할 수 있으나, 제제중에서, 즉 수용액 중에서 안정한 약물을 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 본 발명의 적절한 활성 약물의 예로서는 최면제와 진정제 (예 : 그루테티미드, 클로랄 수화물, 니트라제팜, 아모바르비탈, 페노바르비탈 등), 해열, 진통 및 소염제 (예 : 아스피린, 아세트아미노펜, 이부프로펜, 플루르비프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 티클로페낙 나트륨, 염산 티알아미드, 피록시캉, 플루페남산, 메페남산, 펜타조신 등), 국소 마취제 (예 : 메틸 아미노벤조에이트, 리도카인 등), 국소 혈관수축제 (예: 질산 나파졸린, 질산 테트라졸린, 염산 옥시메타존, 염산 트라미졸린 등), 항알레르기제 (예 : 크로모글리크산이나트륨, 옥사토미드, 염산 아젤라스틴, 프마르산 케토티펜, 트락사녹스 나트륨, 암렉사녹스 등), 강심제 (예 : 염산 도파민, 유비데카레논 등), 항부정맥제 (예 :염산 프로프라놀롤, 핀드롤, 페니토인, 디소피라미드 등), 관상혈관 확장제 (예 : 질산 이소소르비드, 니페디핀, 염산 딜티아젬, 디피리다몰 등), 소화기관의 약 (예 : 돔페리돈 등), 부신피질 홀몬제 (예 : 트리암시놀론 아세토니드, 덱사메타존, 베타메타존소듐 포스페이트, 아세트산 프레도니솔론, 플루오시노니드, 프로피온산베클로메타존, 플루니솔리드 등), 항프라스민제 (예 : 트라넥삼산등), 항진균제 (예 : 클로트리마졸, 질산 미코나졸, 케토코나졸 등), 항악성종양제 (예 : 테가푸르, 플루오로우라실, 메르캅토푸린 등), 항생물질 (에 : 아목시실린, 암피실린, 세팔렉신, 세팔로틴 나트륨, 세프티족심 나트륨, 에리트로마이신, 염산 옥시테트라사이클린 등), 생리활성 펩티드 (예 : 인슐린, 연어 칼시토닌 등의 칼시토닌류, 병아리 칼시토닌 및 엘카토닌, 우로키나제, TRA, 인테페론 등), 왁진류 (예: 인플루엔자 왁진, 돼지 보르데텔라 감염증 예방 확진, B형 감염 왁진 등) 같은 것들을 포함한다. 본 발명의 분무용 겔제에서 사용된 활성 약물의 양은 약물의 종류에 따라 달라지나 활성 약물을 소용의 약리학적 활성을 발휘하는데 충분한 양으로 사용한다.

본 발명에서 수불용성 약물을 사용하면 분무용 겔제는 백색으로 탁해지게 되나 활성 약물은 침강하지는 않고, 일상적인 투약에는 지장이 없다. 그러나 본 발명의 분무용 겔제를 피부 같은 것에 적용하여 생체에의 흡수가 고형보다 용액형에서 더 잘 될 경우에 있어서는 수용성 유기용매내에 미리 수불용성 약물을 용해하거나 용해제를 사용하여 분무용 겔제를 제조하는 것이 바람직하다. 적절한 수용성 유기용매로는 예를 들어 저급 알코올 (예: 에탄올, 이소프로판올 등), 글리콜류 (예:프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 분자량 300-500의 폴리에틸렌글리콜 등) 같은 것을 포함한다. 적절한 용해제는 활성 약물의 용해도에 따라 여러 가지 계면활성제, 크로타미톤, 살리실화 글리콜 에스테르, 살리실산 메틸, 박하유, 벤질 알코올 등으로 구성된 군으로부터 선택된다.

한편, 본 발명에서 사용된 활성 약물은 적당한 현탁화제를 사용함으로써 현탁시킬 수가 있다. 적절한 현탁화제는 여러 가지 계면활성제가 포함되는데, 예컨대 수크로오스 지방산 에스테르, 폴리옥실 스테아레이트 40, 폴리옥시에틸렌 수소첨가 피마자유 60, 폴리소르베이트 80, 글리세린 모노스테아레이트, 소리비탄 모노스테아레이트, 소르비탄모노스테아레이트, 소르비탄 모노팔미테이트 같은 것들을 포함한다.

본 발명의 분무용 겔 기제와 분무용 겔제의 점도를 염화 나트륨, 염화 칼륨, 염화 칼슘 등의 점도 조정제로 500-5,000cp의 범위내로 조정하는 것이 바람직하다. 본 발명의 분무용 겔 기제 또는 분무용 겔제의 점도가 500cp 이하이면 유동성이 너무 높기 때문에 점막이나 피부에 적용될 경우 액이 흘러떨어지게 된다. 한편, 본 발명의 분무용 기제 또는 분무용 겔제의 점도가 5,000cp 이상이면 분무 후의 입자 크기가 불규칙하고 크기 때문에 활성 약물의 소망한 효력을 잘 나타내기에는 부적합하다. 본 발명의 분무용 기제 또는 분무용 겔제의 점도는 800-3,000cp 범위 이내인 것이 더욱 바람직하다.

본 발명의 분무용 겔제는 종래의 방법에 따라 비강점막, 구강점막, 질점막 및 피부에 적용될 수 있다. 점도 조정제를 쓰지 않고 제조된 겔제 또는 CVP 겔 기제 혹은 종래의 수용성 고분자 화합물을 사용하여 제조된 제제와 비교하면 본 발명의 분무용 겔 기제와 분무용 겔제는 입자크기가 훨씬 균일하고 분무 전후 사이의 점도의 변화가 적기 때문에 전착성이 우수하고 분무후 액이 흘러떨어지는 일이 없다.

더욱이, 본 발명의 분무용 겔제는 의료용에도 유용하다. 예를 들어서, 본 발명에 따라 제조된 인플루엔저 왁진의 분무용 겔저를 비강 점막에 적용할 수가 있으며 종래의 인플루엔자 왁진의 투약 형태보다 더욱 바람직하다.

이제까지 인플루엔저 왁진은 피하주사로 투여되어 왔는데, 그 이유는 인플루엔자 왁진은 고분자량의 폴리펩티드이어서 막투과성이 불량하고, 소화관내에서 분해되는 경향이 있으며, 생체에 흡수되기 어렵고, 더욱이 경구 투여시 인플루엔저 왁진의 접종은 혈액내의 항균 항체의 생성 (체액 면역)에 목적을 두고 있기 때문이다.

근본적으로 인플루엔저균은 호흡관의 점막에서만 감염 (국소 감염)을 하므로 혈액내에서 항체를 생성하는 것보다 호흡관의 점막에 항체 (I gA 항체)를 생성하는 것이 더욱 효과적이다. 그러나, 종래의 피하접종에서는 호흡관의 점막은 자극되지 않으므로 분비 I gA를 얻어질 수 있다. 또한, 피하접종은 그 부작용으로 인해 사용이 제한되어 있으며, 감염예방에 충분항 양의 인플루엔저 왁진을 접종할 수 없기 때문에 항체반응 레벨은 적절하지 않고 그 지속시간도 짧다.

더욱이 인플루엔저균은 향원변위를 일으키면서 유행하기 때문에 왁진 중의 항원종류가 유행하는 균의 항원 종류와 상이하면 왁진의 예방 효과는 감소된다.

종래의 인플루엔저 왁진의 투여제형의 상기한 결점을 개량하기 위하여 그의 새로운 유형의 왁진 또는 그 투여제형을 개발하려고 노력하여 왔다. 비강(코구멍)으로의 투여는 하나의 감염 루우트인 호흡관에서 분비 I gA항체를 유도 하는 것이 될 수 있으며 감염저지에 유효하다.

그러나 인플루엔저 왁진을 단독으로 또는 인플루엔저 왁진 수용액을 분무하여 호흡관에서 높은 레벨의 분비 I gA를 얻는다는 것은 어렵다. 그 이유는 인플루엔저 왁진은 고분자량의 폴리펩티드이기 때문에 호흡관 점막에서의 침투성이 낮고, 그리고 점액분비, 상피마모, 융모(villus)운동 등의 호흡관 점막의 정화 메카니즘에 의한 호흡관 점막에서의 인플루엔저 왁진의 흡수가 곤란하기 때문이다.

본 발명의 인플루엔저 왁진의 비강 분무용 겔제는 위에서 설명한 분무용 겔 기제와 인플루엔저 왁진을 혼합하여 제조할 수 있다. 본 발명에서 사용된 인플루엔저 왁진은 독성 약화된 왁진 또는 그의 비활성 왁진 중의 어느 것이라도 좋다.

독성 약화된 왁진을 사용할 때는 에테르 처리에 의하여 지방질 성분을 제거하여 만든 H_A왁진이거나, 에테르 처리하지 않은 바이러스 입자 왁진이어도 좋다.

더욱이, 본 발명에서 사용한 인플루엔저 왁진은 신형인 한랭적응 생왁진, 인공막왁진, 유전자 조작 왁진, 펩티드 왁진 같은 것들을 포함한다.

본 발명에 따라 제조된 인플루엔저 왁진의 비강 분무용 겔제는 인플루엔저 왁진과 함께 사용될 수 있는 적당한 활성 약물, 살균제, 방부제, 계면 활성제, 안정제 등을 함유할 수 있다.

본 발명을 다음의 실시예에, 참고예 및 실험예에 따라 더욱 상세하게 설명하게 될 것이나, 거기에 한정되는 것으로 생각해서는 안 된다. 다음의 실험예나 참고예와 실시예에서는 점도는 20℃에서 C형 점도계 [일본국의 Tokyo Keiki(주)제]로 측정하였다.

실험예

다음의 여러 가지 증점제와 정제수를 사용하여 제조한 여러 가지 기제에서 분무 시험을 하였고, 기제의 특성은 분무상태, 점도 유지율, 전착성, 피부 전착성으로 측정하였다. 그 결과는 제 1표에 나와 있다.

[표 1]

HPMC : 히드록시프로필 메틸셀룰로오스

HPC : 히드록시프로필 셀룰로오스

PVA : 폴리비닐 알코올

PVP : 폴리비닐 피롤리돈

*) 분무상태는 다음 기준에 따라 평가하였음.

불량 1: 분무기에서 분출 않음

불량 2: 분무기에서 분출한 용액상태는 입자가 아니고 물기둥 이었음.

불량 3: 분무기에서 분출하였으나, 입자가 너무 큼.

양호 : 분무기에서 균일하게 분출하였고, 입자가 작음.

**) 점도 유지율은 다음 식에 따라 구하였음.

***) 전착성 시험은 다음 방법으로 하였다.

생리식염수 (1.5g)를 침투시킨 여과지 6호 (직경 : 110 ㎜)를 각도 40도의 경사판에 붙인 다음 30㎜ 떨어진 거리에서 분무기의 내용물 (600 ㎎)을 여과지의 중심을 향하여 분무한 후, 액이 흘러떨어지기 시작할 때까지의 시간 (초)을 측정하였다. 액의 흘러떨어지지 않았을 때는 무변화로 평가하였다.

****)피부 전착성은 다음 방법으로 평가하였다.

분무기의 내용물 (180㎎)을 사람의 상부 팔뚝 안쪽에다 30㎜ 거리에서 분무한 후 10초 내에 액이 흘러떨어졌을 경우에는 흘러떨어짐 이라고 평가하였고, 분무후 10초 동안 액이 흘러떨어지지 않았을 경우에는 점착 (粘着)함으로 평가하였다.

제 1표에서 명백한 바와 같이, 본 발명 (CVP 0.4 % ＋ NaCl 0.27% 및 CVP 0.6 ＋ NaCl 0.45%)에 따라 제조된 겔 기제만이 분무상태, 점도 유지율, 판과 인간피부에 대한 전착성이 모두 양호하였다.

실시예 1

케토프로펜 (Ketoprophen)의 분무용 겔제 :

케토프로펜의 분무용 겔제는 다음과 같은 양의 성분을 사용하여 제조하였다.

CVP 4%수용액에 교반하면서 수산화 나트륨 2% 수용액을 서서히 첨가하고 겔이 될 때까지 혼합물을 교반하였다. 혼합물에 디소디움 에데테이트 (disodiumedetate) 1%수용액을 첨가한 다음, 케토프로펜을 폴리소트베이트 80과 정제수에 현탁시킨 현탁액을 서서히 첨가하여 균일하게 교반하였다. 이 혼합물의 점도를 염화 나트륨 10% 수용액으로 조정한 다음 이 혼합물을 균일히 교반하고 잘 혼합함으로써 케토프로펜의 분무용 겔제 (3%, pH : 6.8, 점도 : 3,800 cp)를 제조하였다.

실시예 2

질산 테트라졸린 분무용 겔제 :

질산 테트라졸린 분무용 겔제는 다음과 같은 양의 성분을 사용하여 제조하였다.

CVP 4% 수용액에 교반하면서 L-아르기닌 2% 수용액을 서서히 첨가하고, 이 혼합물을 겔이 되기까지 교반하였다. 정제수에 용해된 질산 테트라졸린을 서서히 첨가하고 이 혼합물을 균일히 교반한 후, 이 혼합물의 점도를 염화 나트륨 10% 수용액으로 조정하고, 이 혼합물을 균일하게 교반 혼합하여 질산 테트라졸린의 분무용 겔제 (0.1 %, pH : 5.8, 점도 : 4,500 cp)를 제조하였다.

실시예 3

크로모글리크산 이나트륨의 분무용 겔제 :

크로모글리크산 이나트륨의 분무용 겔제를 다음과 같은 양의 성분을 사용하여서 제조하였다.

CVP 4% 수용액에 교반하면서 2% 수산화 나트륨 2% 수용액을 서서히 첨가하고, 이 혼합물을 겔이 될 때까지 교반하였다. 혼합물에 디소디움 에데테이트 1% 수용액을 첨가하고, 글리세린과 정제수에 크로모글리크산 이나트륨을 첨가하여서 된 용액을 가하여 균일하게 교반하였다. 이 혼합물의 점도를 10% 염화 나트륨, 10% 수용액으로 조정하고 균일하게 교반 혼합하여 크로모글리크산 이나트륨의 분무용 겔제 (2%, pH : 6.0, 점도 : 1,500cp)를 제조하였다.

실시예 4

옥사토미드이 분무용 겔제 :

옥사토미드의 분무용 겔제를 다음과 같은 양의 성분을 사용하여 제조하였다.

CVP 4%수용액에 교반하면서 L-아르기닌 2% 수용액을 서서히 첨가하고, 이 혼합물이 겔이 될 때까지 교반하였다. 이 혼합물이 폴리소르베이트 80과 정제수에 옥사토미드를 가해서 된 현탁액을 서서히 첨가하여 균일하게 교반하였다. 혼합물의 점도를 염화 나트륨 10% 수용액으로 조정하고 균일하게 교반 혼합하여 옥사토미드의 분무용 겔제 (0.01%, pH : 5.1, 점도 : 1,500 cp )를 제조하였다.

실시예 5

프로피온산 베클로메타존 분무용 겔제 :

프로피온산 베클로메타존의 분무용 겔제를 다음과 같은 양의 성분을 사용하여서 제조하였다.

CVP 4% 수용액에 교반하면서 수산화 나트륨 2% 수용액을 서서히 첨가하고, 이 혼합물을 겔이 될 때까지

교반하였다. 혼합물에 서서히 폴리소르베이트 80, 진한 글리세린 및 정제수에 프로피온산 베클로메타존을 가해

서 된 현탁액을 서서히 첨가하여 균일하게 교반하였다.

이 혼합물의 점도를 염화 나트륨 10% 수용액으로 조정하고, 균일하게 교반 혼합하여 프로피온산 베클로메타

존의 분무용 겔제 (0.1%, pH : 6.0, 점도 : 2,500 cp )를 제조하였다.

실시예 6

폴니솔리드의 분무용 겔제 :

폴니솔리드의 분무용 겔제를 다음과 같은 양의 성분을 사용하여 제조하였다.

CVP 4% 수용액에 교반하면서, 수산화 나트륨 2% 수용액을 서서히 첨가하고 이 혼합물이 겔이 되기까지 교반하였다. 혼합물에 디소디움 에데테이트 1% 수용액과 염화 벨즈알코늄 0.1%수용액을 첨가한 다음 폴리소르베이트 80, 폴리에틸렌 글리콜 및 정제수에 폴니솔리드를 가해서된 용액을 서서히 첨가하고 균일하게 교반하였다.

혼합물의 점도를 염화 나트륨의 10%수용액으로 조정하고 이 혼합물을 균일하게 교반 혼합하여, 폴니솔리드의 분무용 겔제 (0.0255 %, pH : 5.1, 점도 : 2,200 cp )를 제조하였다.

실시예 7

인슐린의 분무용 겔제 :

인슐린의 분무용 겔제를 다음과 같은 양의 성분을 사용하여 제조하였다.

CVP 4% 수용액에 교반하면서 L-아르기닌 4% 수용액을 서서히 첨가하고, 이 혼합물을 겔이 될 때까지 교반하였다. 이 혼합물에 정제수에 인슐린을 가해서 된 용액을 서서히 첨가하여 균일하게 교반하였다. 이 혼합물의 점도를 염화나트륨 10% 수용액으로 조정하고, 균일하게 교반 혼합하여 인슐린의 분무용 겔제 (50 U/g pH: 7.3, 점도 : 550 cp)를 제조하였다.

실시예 8

인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 겔제 :

인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 겔제를 다음과 같은 양의 성분을 사용하여 제조하였다.

CVP 4% 수용액에 교반하면서 L-아르긴 4% 수용액을 서서히 첨가하고, 이 혼합물이 겔이 될 때까지 교반하였다. 이 혼합물에 인산 완충액에 인플루엔저 H_A왁진을 가해서 된 용액을 서서히 첨가하여 균일하게 교반하였다.

이 혼합물의 점도를 정제수에 염화 나트륨을 가해서 된 용액으로 조정하고 이 혼합물을 균일하게 교반 혼합하여 인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 겔제 (249 ㎍ 단백질/ml , pH : 7.2, 점도 : 2,900cp)를 제조하였다.

실시예 9-11

인플루엔저 H_A왁진 (A/야마가타/120/86)비강 분무용 겔제를 다음 제 2표에서의 성분량을 사용하여 제조하였다.

[표 2]

*) A/야마가타/120/86, 500㎍ 단백질 /ml

CVP 4% 수용액에 교반하면서 L-아르기닌 8% 수용액을 서서히 첨가하고, 이 혼합물이 겔이 될 때까지 교반하였다. 이 혼합물에 정제수에 염화 나트륨을 가해서 된 용액을 서서히 첨가하고, 균일하게 교반 혼합하여 분무용 기제를 제조하였다. 이렇게 제조된 분무용 겔 기제를 고압 증기 멸균처리 (121℃,20분 )한 다음 인플루엔저 H_A왁진용액 (500㎍ 단백질/ ml)관 균일하게 혼합한 후 무균 조건하에서 농축하여 인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 겔제를 제조하였다.

참고예 1

인플루엔저 H_A왁진 (A/야마가타/120/86)을 인산 완충액 (pH : 7.4)에 용해하여 인플루엔저 H_A왁진의 비강

분무용 제제 (24㎍ 단백질/㎖)를 제조하였다.

참고예 2

인플루엔저 H_A왁진 (A/야마가타/120/86)은 인산 완충액 (pH : 7.3)에 용해하여, 인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 제제 (250㎍ 단백질/ ㎖)를 제조 하였다.

약리학적 시험

실시예 (8∼11)에서 제조된 인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 겔제와 참고예 1과 2에서 제조된 인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 제제를 사용하여 다음의 약리학적 시험을 하였다.

(방 법)

(1) 면역법 :

BALB/C마우스에 넴부탈 (Nembutal) 주사액 (소디움 페토바르비튜레이트, 15배희석액)을 복강내에 주사

(0.2-0.3㎖/마리)하여 마취시켰다.

마취된 BALB/C 마우스의 비강을 위쪽으로 돌려 비강의 하나에 제젤 투여 (20 ㎍마리)하였다.

(2) 샘플링법 :

면역후 3주째에 마우스로부터 혈구응집 반응 억제 항체값 (간단히 HI 항체값 이라 함)측정용 혈청을 채취 (전혈 채취)하고, 흉부를 절개하여 기관 (氣管)을 노출시켰다. 턱 아래의 기관의 정상부로부터 폐쪽을 향하여 항 IgA 항체의 희석액 (1 ㎖ )을 기관속으로 주입하여 서서히 흡안케하였다. 이러한 흡인과 주입을 반복하여 샘플들을 채취하였다.

(3) HI 항체값 측정법 :

혈청시료 (0.1 ㎖)를 수용체 파괴 효소 (RED) (뉴우라미니다아제, 0.3 ㎖)로 처리하여, 37℃에서 하룻밤 유지한 다음, 56℃에서 1시간 부동화 처리를 하였다. 여기에 닭의 적혈구를 한 방울 첨가하고, 이 혼합물을 진탕하여 실온에서 1시간 방치한 후, 원심 분리기 (2,000 rpm, 10분간)에서 상청액을 회수 하였다. 측정에 사용된 균주의 항원량을 16 H_A로 조정하였다. 마이크로 플레이트 (microplate) 의 96웰 (well)위 첫 번째 웰을 제외하고, 전부에 인산 완충액 (0.025 ㎖)을 각각 주입하였다. 첫 번째 웰에는 시료 (0.05 ㎖)를 넣었다. 모든 웰 속의 샘플들을 자동 희석기로 희석하였다. 16 H_A로 조종된 량의 항원액 (0.025 ㎖)을 마이크로플레이트의 모든 웰에 주입하고, 플레이트 믹서로 플레이트를 충분히 진탕한 후 1시간 방치하였다. 0.5%의 혈구 (0.05㎖)를 모든 웰에 첨가한 후, 다시 플레이트를 진탕한 후, 1시간 방치한 다음 각 웰 바닥의 형상을 관찰하였다.

(4) IgA 시험법 :

다이나텍 임뮬론 II플랫바텀 플레이트 (Dynatech Immulon II Flatbottom Plates)를 사용하여 0.05M 탄산 수소염 완충액 (pH : 9.5 )으로 희석하여 , 최적농도 (약 1-10㎍/㎖)로 한 HANA항원을 100㎕의 량으로 상기한 플레이트의 각 웰에 주입한 다음 4℃에서 하룻밤 (약 18시간)방치하였다. 그 다음날, 플레이트를 0.05% Tween 20을 함유하는 0.01M 인산 완충액 (pH : 7.2)으로 3회 세척한 다음, 0.1% BSA (소혈청 알부민)을 함유하는 인산 완충액을 써서 37℃에서 1시간 처리함으로써 블로킹하여 항원 고형상을 만들었다. HANA 항원 대신에 혈청노액을 사용한 것을 제외하고 상기와 같은 방법으로 대조용 플레이트를 제조하였다.

샘플 (0.5% BSA와 0.05% Tween 20을 함유하는 0.01M 인산 완충액)에 대한 희석액 100㎕를 첨가하였다.

이 플레이트를 사란 랩 (Saran Wrap) (염화 폴리비닐리덴 필름)으로 싼 다음, 4℃에서 하룻밤 방치하였다. 그 다음날, 각 웰 속의 반응 혼합물을 제거하고, 각 웰을 세정액 (0.05% Tween 20을 함유하는 0.01M 인산 완충액)으로 3회 세정하였다.

표지된 항체 (labelled antibody) (퍼옥시다아제로 표지된 항 마우스 IgA 항체)를 상기와 같은 샘플에 대한 동일한 희석액으로 최적농도로 희석하여, 100㎕를 플레이트의 웰 속에 주입하였다.

플레이트를 실온에서 2시간 반응시킨 다음, 상기한 세정액으로 3회 세정하였다.

기질 용액 (0.1M 시트르산 완충액, pH : 4.9, 3.3㎎/㎖ 0-페닐렌디아민 함유, 0.02% H202) 100㎕씩을 각 웰에 주입하고 차광된 조건하에 실내온도에서 0.5-1.0시간 반응시킨 다음 1.5N 황산(100㎕)을 첨가하여 반응을 정지 시켰다. 흡광도 (492nm)를 마이크로플레이트에 대해 오토리이더(autoreader) 측정하였다.

(5) 결과 :

그 결과는 다음 제 3 표에 나와 있다.

[표 3]

상기한 결과로부터 명백한 바와 같이, 본 발명에 따라 제조된 인플루엔저 H_A왁진의 비강 분무용 겔제가 투여된 마우스에 있어서, 투약된지 3주 후에 비강 세정액에서 항바이러스 IgA항체가 검출되었고, 또한 HI 항체가 혈증 농도가 높은 레벨로 검출되었다. 이에 반해서, 인산 완충액에 인플루엔저 H_A왁진이 첨가된 용액 (참고예 1 및 2도 )이 투여된 마우스에 있어서 IgA항체는 미량 검출되었고 혈중 HI 항체는 같은 조건에서 저레벨로만 검출되었다.

Claims (12)

1. 수용성 염기물질로 카르복시비닐 폴리머 수용액 0.2-1.5wt. %을 중점시킨 후 그 점도를 점도조정제로 500-5,000 센티포이즈 범위내로 조정하여 제조되는 점도 500-5,000 센티포이즈의 카르복시비닐 폴리머 수용액 함유 분무용 겔 기제.
2. 청구항 1에 있어서, 점도 조정제가 염화 나트륨, 염화 칼륨 및 염화 칼슘로 된 군으로부터 선택된 것인 분무용 겔 기제.
3. 청구항 1에 있어서, pH값이 4-9 범위내인 분무용 겔 기제.
4. 청구항 2에 있어서, pH값이 4-9 범위내인 분무용 겔 기제.
5. 청구항 1, 2, 3또는 4에 있어서, 수용성 염기물질이 수용성 무기염기 또는 수용성 유기염기인 분무용 겔 기제.
6. 청구항 1에 의한 분무용 겔 기제와 유효량의 활성 약물의 균일 혼합물을 함유하는 분무용 겔제.
7. 청구항 6에 있어서 pH값이 4-9 범위내인 분무용 겔제.
8. 청구항 6 또는 7에 있어서, 점막 또는 피부에 적용하기 위한 것인 분무용 겔제.
9. 청구항 6 또는 7에 있어서, 용해제 또는 용매를 첨가함으로써 활성 약물을 현탁시켜서 되는 분무용 겔제.
10. 청구항 6 또는 7에 있어서, 활성 약제에 현탁화제를 첨가하여 활성 약물을 현탁시켜서 되는 분무용 겔제.
11. 청구항 1에 의한 겔 기제와, 바이러스 입자 왁진, H_A왁진, 생바이러스 왁진, 인공 막 왁진, 유전자 조작 왁진, 펩티드 왁진으로 된 군으로부터 선택된 인플루엔저 유효량을 비강 분무용 겔제.
12. 청구항 11에 있어서, pH범위가 6.0-8.0 범위내인 비강 분무용 겔제.