JPWO2019157533A5

JPWO2019157533A5 -

Info

Publication number: JPWO2019157533A5
Application number: JP2020542979A
Authority: JP
Publication date: 2022-02-22

Claims

（ａ）第一抗原に結合する第一抗原結合ドメインと第二抗原に結合する第二抗原結合ドメインを含む細胞外ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）ポリペプチドと；
（ｂ）二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）であって、標的抗原とＴ細胞抗原に結合するＢｉＴＥと
を発現するように操作された免疫細胞。
ＣＡＲポリペプチドが、
（ｉ）膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメイン、又は、
（ｉｉ）一又は複数の共刺激ドメイン
を含み、
第一及び第二抗原が、好ましくは、神経膠芽腫抗原であり、さらに、第一及び第二抗原が、好ましくは、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮増殖因子受容体変異体ＩＩＩ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、ＣＤ１９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ３７、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、インターロイキン１３受容体アルファ２（ＩＬ－１３Ｒα２）、エフリンＡ型受容体１（ＥｐｈＡ１）、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２）、メソテリン、ムチン１，細胞表面関連（ＭＵＣ１）、又はムチン１６，細胞表面関連（ＭＵＣ１６）から独立して選択され、
第一抗原結合ドメイン及び／又は第二抗原結合ドメインは、好ましくは、抗体の抗原結合断片、又は第一及び／又は第二抗原のリガンドを含み、及び／又は、
抗体の抗原結合断片が、好ましくは、単一ドメイン抗体又は単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む、
請求項１に記載の免疫細胞。
第一抗原結合ドメインがＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインを含み、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインは、好ましくは、抗ＩＬ－１３Ｒα２ｓｃＦｖ又はＩＬ－１３Ｒα２のリガンドを含み、さらに、ＩＬ－１３Ｒα２のリガンドは、好ましくは、ＩＬ－１３又はＩＬ－１３ゼータカイン、又はそれらの抗原結合断片を含む；又は、
ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインは、好ましくは、配列番号：１０１のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインは、好ましくは、配列番号：１０１のアミノ酸配列を含む、
請求項１に記載の免疫細胞。
第二抗原結合ドメインがＥＧＦＲｖＩＩＩ結合ドメインを含み、ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合ドメインは、好ましくは、抗体の抗原結合断片、又は抗ＥＧＦＲｖＩＩＩｓｃＦｖを含み、抗ＥＧＦＲｖＩＩＩｓｃＦｖは、好ましくは、配列番号：１１１又は１１３のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、及び／又は配列番号：１１２又は１１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、ＶＨは、好ましくは、配列番号：１１１又は１１３のアミノ酸配列を含み、かつ／又はＶＬは、配列番号：１１２又は１１４のアミノ酸配列を含む；又は、
ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合ドメインは、好ましくは、配列番号：１０３のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、
ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合ドメインは、好ましくは、配列番号：１０３のアミノ酸配列を含む、
請求項１に記載の免疫細胞。
（ｉ）配列番号：１００のアミノ酸配列、又は配列番号：１００のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＡＲポリペプチドと；
（ｉｉ）標的抗原とＴ細胞抗原に結合するＢｉＴＥと
を発現するように操作された免疫細胞。
（ａ）標的抗原は、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ３７、ＰＳＭＡ、ＰＳＣＡ、ＩＬ－１３Ｒα２、ＥｐｈＡ１、ＨＥＲ２、メソテリン、ＭＵＣ１、又はＭＵＣ１６の一つから選択される神経膠芽腫関連抗原である；
（ｂ）Ｔ細胞抗原はＣＤ３である；
（ｃ）標的抗原はＥＧＦＲであり、且つＴ細胞抗原はＣＤ３である；
（ｄ）ＢｉＴＥは、配列番号：９８又は９９のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ＢｉＴＥは、好ましくは、配列番号：９８又は９９のアミノ酸配列を含む；
（ｅ）免疫細胞がＴ又はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である；又は、
（ｆ）免疫細胞がヒト細胞である、
請求項１又は５に記載の免疫細胞。
請求項１又は５に記載の、ＣＡＲポリペプチドとＢｉＴＥをコードするポリヌクレオチド。
治療を必要とする対象のがんを治療する方法における使用のための、請求項１又は５に記載の免疫細胞であって、前記方法は、請求項１又は５に記載の免疫細胞、又はその薬学的組成物を対象に投与することを含み、がんは、好ましくは、神経膠芽腫、肺がん、膵臓がん、リンパ腫、又は骨髄腫であり、がんは、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ３７、ＰＳＭＡ、ＰＳＣＡ、ＩＬ－１３Ｒα２、ＥｐｈＡ１、ＨＥＲ２、メソテリン、ＭＵＣ１、及びＭＵＣ１６からなる群の一又は複数を発現することを含んでもよく、神経膠芽腫は、好ましくは、ＩＬ－１３Ｒα２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、メソテリン、及びＥｐｈＡ１からなる群の一又は複数を発現する細胞を含み、又は、神経膠芽腫は、好ましくは、ＥＧＦＲｖＩＩＩ発現が低下した細胞を含む、使用のための免疫細胞。
免疫細胞を対象に投与することを含む、対象のＥＧＦＲｖＩＩＩ発現が低下した神経膠芽腫を治療する方法における使用のための免疫細胞であって、免疫細胞は、（ｉ）細胞外ＥＧＦＲｖＩＩＩ結合ドメインを含むＣＡＲポリペプチドと；（ｉｉ）ＢｉＴＥとを発現するように操作されており、免疫細胞は、請求項１又は５に記載の免疫細胞から選択されてもよい、使用のための免疫細胞。
（ｉ）細胞外標的結合ドメインを含むＣＡＲと；（ｉｉ）ＢｉＴＥとを含む免疫細胞を対象に投与することを含む、対象の腫瘍微小環境における、免疫抑制又はＴ細胞消耗を防止又は低減する方法における使用のための免疫細胞であって、免疫細胞は、請求項１又は５に記載の免疫細胞から選択されてもよい、使用のための免疫細胞。
対象において異種抗原発現を有するがんを治療する方法における使用のための免疫細胞であって、
方法は、（ｉ）細胞外標的結合ドメインを含むＣＡＲと；（ｉｉ）ＢｉＴＥとを含む免疫細胞を対象に投与することを含み、免疫細胞は、請求項１又は５に記載の免疫細胞から選択されてもよく、
がんは、好ましくは、神経膠芽腫、前立腺がん、肺がん、膵臓がん、リンパ腫又は骨髄腫である、又は、がんは、好ましくは、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１９、ＰＳＭＡ、ＰＳＣＡ、ＩＬ－１３Ｒα２、ＥｐｈＡ１、Ｈｅｒ２、メソテリン、ＭＵＣ１、及びＭＵＣ１６からなる群の一又は複数を発現する細胞を含む、
使用のための免疫細胞。
異種核酸分子を含むＣＡＲＴ細胞であって、異種核酸分子が、
（ｉ）細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲをコードする第一ポリヌクレオチドと；
（ｉｉ）治療剤をコードする第二ポリヌクレオチドと
を含み、
（ａ）治療剤は、好ましくは、抗体試薬を含み、抗体試薬は、好ましくは、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、又は、二重特異性抗体試薬を含み、二重特異性抗体試薬は、好ましくは、ＢｉＴＥを含み、ＢｉＴＥは、（ｉ）腫瘍関連抗原又はＴｒｅｇ関連抗原と、（ｉｉ）Ｔ細胞抗原とに結合してもよく、且つ、単一ドメイン抗体は、好ましくは、カメリド抗体を含み、カメリド抗体は、腫瘍関連抗原又はＴｒｅｇ関連抗原に結合してもよい；
（ｂ）治療剤は、好ましくは、サイトカインを含む；
（ｃ）ＣＡＲ及び治療剤は、好ましくは、別個のＣＡＲ分子及び治療剤分子として生成され、ＣＡＲＴ細胞は、好ましくは、ＣＡＲをコードする第一ポリヌクレオチドと治療剤をコードする第二ポリヌクレオチドとの間にリボソームスキッピング部分を含み、より好ましくは、リボソームスキッピング部分は、２Ａペプチドを含み、２Ａペプチドは、好ましくは、Ｐ２Ａ又はＴ２Ａを含む；
（ｄ）ＣＡＲ及び治療剤は、好ましくは、それぞれ構成的に発現される；
（ｅ）ＣＡＲ及び治療剤の発現は、好ましくは、ＥＦ１αプロモーターによって駆動される；
（ｆ）治療剤は、好ましくは、Ｔ細胞受容体又はＣＡＲシグナル伝達により誘導可能であってもよい誘導性プロモーターの制御下で発現され、誘導性プロモーターは、好ましくは、ＮＦＡＴプロモーターを含む；
（ｇ）ＣＡＲは、好ましくは、構成的プロモーターの制御下で発現され、治療剤は、Ｔ細胞受容体又はＣＡＲシグナル伝達により誘導可能であってもよい誘導性プロモーターの制御下で発現される；
（ｈ）ＣＡＲは、好ましくは、一又は複数の共刺激ドメインを更に含み、共刺激ドメインは、４－１ＢＢ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、又はＯＸ－４０の共刺激ドメインを含んでもよく、４－１ＢＢ共刺激ドメインは、配列番号：５、１１、１７、２３、２９、３８、４７、５９、６７、７３、７９、及び１０５、又はそれらのバリアントの何れか一の配列を含んでいてもよい；
（ｉ）ＣＡＲの抗原結合ドメインは、好ましくは、抗体、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、又はリガンドを含む；
（ｊ）膜貫通ドメインは、好ましくは、ヒンジ／膜貫通ドメインを含み、ヒンジ／膜貫通ドメインは、好ましくは、免疫グロブリン様タンパク質、ＣＤ２８、ＣＤ８、又は４－１ＢＢのヒンジ／膜貫通ドメインを含む；
（ｋ）ＣＡＲの膜貫通ドメインは、好ましくは、配列番号：４、１０、１６、２２、２８、３７、４６、５８、６６、７２、７８、及び１０４、又はそれらのバリアントの何れか一の配列を含んでいてもよい、ＣＤ８ヒンジ／膜貫通ドメインを含む；
（ｌ）細胞内シグナル伝達ドメインは、好ましくは、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３θ、ＣＤ３ε、ＣＤ３η、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、又はＣＤ６６ｄの細胞内シグナル伝達ドメインを含む；
（ｍ）細胞内シグナル伝達ドメインは、好ましくは、配列番号：６、１２、１８、２４、３０、３９、４８、６０、６８、７４、８０、及び１０６、又はそれらのバリアントの何れか一の配列を含んでいてもよい、ＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達ドメインを含む；又は、
（ｎ）ＣＡＲ抗原結合ドメインは、好ましくは、腫瘍関連抗原又はＴｒｅｇ関連抗原に結合する、
ＣＡＲＴ細胞。
細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲポリペプチドであって；抗原結合ドメインがＴｒｅｇ関連抗原に結合し、
（ａ）Ｔｒｅｇ関連抗原は、好ましくは、ＧＡＲＰ、ＬＡＰ、ＣＤ２５、及びＣＴＬＡ－４からなる群から選択され、ＣＡＲは、一又は複数の共刺激ドメインを更に含んでもよく、共刺激ドメインは、４－１ＢＢ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、又はＯＸ－４０の共刺激ドメインを含んでもよく、４－１ＢＢ共刺激ドメインは、配列番号：５、１１、１７、２３、２９、３８、４７、５９、６７、７３、７９、及び１０５、又はそれらのバリアントの何れか一の配列を含んでいてもよい；
（ｂ）Ｔｒｅｇ関連抗原は、好ましくは、ＧＡＲＰ又はＬＡＰである；
（ｃ）ＣＡＲの抗原結合ドメインは、配列番号：３、９、１５、２５、７１、７７、及びそれらのバリアントからなる群から選択される配列を含んでいてもよいｓｃＦｖ又は単一ドメイン抗体を含む；
（ｄ）膜貫通ドメインは、ヒンジ／膜貫通ドメインを含み、ヒンジ／膜貫通ドメインは、免疫グロブリン様タンパク質、ＣＤ２８、ＣＤ８、又は４－１ＢＢのヒンジ／膜貫通ドメインを含んでいてもよい；
（ｅ）ＣＡＲの膜貫通ドメインは、配列番号：４、１０、１６、２２、２８、３７、４６、５８、６６、７２、７８、及び１０４、又はそれらのバリアントの何れか一の配列を含んでいてもよいＣＤ８ヒンジ／膜貫通ドメインを含む、；
（ｆ）細胞内シグナル伝達ドメインは、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３θ、ＣＤ３ε、ＣＤ３η、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、又はＣＤ６６ｄの細胞内シグナル伝達ドメインを含む；又は、
（ｇ）細胞内シグナル伝達ドメインが、配列番号：６、１２、１８、２４、３０、３９、４８、６０、６８、７４、８０、及び１０６、又はそれらのバリアントの何れか一の配列を含んでいてもよいＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達ドメインを含む、
ＣＡＲポリペプチド。
配列番号：２６、配列番号：３５、配列番号：４４、配列番号：５３、配列番号：６１、配列番号：１９、配列番号：１、配列番号：７、配列番号：１３、配列番号：６９、配列番号：７５、及び配列番号：１００の何れか一のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＡＲポリペプチドであって、
さらに、配列番号：２６、配列番号：３５、配列番号：４４、配列番号：５３、配列番号：６１、配列番号：１９、配列番号：１、配列番号：７、配列番号：１３、配列番号：６９、配列番号：７５、及び配列番号：１００の何れか一のアミノ酸配列を含んでもよい、
ＣＡＲポリペプチド。
請求項１２又は１３に記載の、（ｉ）ＣＡＲポリペプチド、又は（ｉｉ）ＣＡＲポリペプチドと治療剤を含むポリタンパク質をコードする核酸分子であって、
さらに、自殺遺伝子又はシグナル配列をコードする配列を更に含む、核酸分子。
請求項１３に記載のＣＡＲポリペプチドを含む免疫細胞であって、免疫細胞は、好ましくは、Ｔ若しくはＮＫ細胞又はヒト細胞である、免疫細胞。
がんを有する患者を治療する方法における使用のためのＣＡＲＴ細胞産物であって、
方法は、腫瘍毒性抗体又はサイトカインを分泌するように遺伝子改変されたＣＡＲＴ細胞産物を患者に投与することを含み、がん毒性を腫瘍微小環境に局所的に向けることにより全身毒性が低減され、ＣＡＲＴ細胞は、遺伝子改変されて、ＣＴＬＡ４、ＣＤ２５、ＧＡＲＰ、ＬＡＰ、ＩＬ－１５、ＣＳＦ１Ｒ、又はＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１９、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ３７、ＰＳＭＡ、ＰＳＣＡ、ＩＬ－１３Ｒα２、ＥｐｈＡ１、Ｈｅｒ２、メソテリン、ＭＵＣ１、又はＭＵＣ１６に対する抗体、あるいは二重特異性抗体が腫瘍微小環境に送達されてもよく、さらに、二重特異性抗体は、好ましくは、ＥＧＦＲ及びＣＤ３に対するＢｉＴＥである、
使用のためのＣＡＲＴ細胞産物。
（ｉ）細胞外標的結合ドメインを含むＣＡＲポリペプチドと；（ｉｉ）ＢｉＴＥを発現するように操作されたＣＡＲＴ細胞を対象に投与することを含む、対象の腫瘍微小環境における、免疫抑制又はＴ細胞消耗を防止又は低減する方法における使用のためのＣＡＲＴ細胞産物であって、ＣＡＲＴ細胞が、請求項１２に記載のＣＡＲＴ細胞であってもよい、使用のためのＣＡＲＴ細胞産物。
対象の異種抗原発現を有するがんを治療する方法における使用のためのＣＡＲＴ細胞産物であって、
方法は、（ｉ）細胞外標的結合ドメインを含むＣＡＲポリペプチドと；（ｉｉ）ＢｉＴＥとを発現するように操作されたＣＡＲＴ細胞を対象に投与することを含み、ＣＡＲＴ細胞は、請求項１２に記載のＣＡＲＴ細胞であってもよく、がんは、好ましくは、神経膠芽腫、前立腺がん、肺がん、膵臓がん、リンパ腫、又は骨髄腫であり、さらに、がんは、好ましくは、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１９、ＰＳＭＡ、ＰＳＣＡ、ＩＬ－１３Ｒα２、ＥｐｈＡ１、Ｈｅｒ２、メソテリン、ＭＵＣ１、及びＭＵＣ１６の一又は複数を発現する細胞を含む、
使用のためのＣＡＲＴ細胞産物。